培养基母液的配置

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培养基母液与培养基的配置

摘要:配制培养基时,为了使用方便和用量准确,通常采用母液法进行配制,即将所选培养基配方中各试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量,分别先配制成一系列的母液保存,使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。

关键词:培养基母液常用培养基植物激素

1.常用培养基种类,培养基母液的各种成分的量以及配置过程

1.1常用培养基:

MS培养基

MS培养基是目前使用最普遍的培养基。其具有较高的无机盐浓度,能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高,在配制、贮存和消毒等过程中,即使有些成分略有出入,也不会影响离子间的平衡。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织,也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养,其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适,足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此,一般情况下,不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比,MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高,这是它的显著特点。

B5培养基

与其他培养基相比,它的主要特点是含有较低的铵,而铵这一营养成分可能对有些培养基有抑制生长的作用。当愈伤组织和悬浮培养中对B5培养基与MS培养基进行对比培养试验时,发现有些植物的愈伤组织和细胞培养物在MS培养基上

平内的脏物清理干净。

3.3在配制铁盐时,如果加热搅拌时间过短,会造成FeS04和Na2-EDTA鳌合不彻底,此时若将其冷藏,FeSO4会结晶析出。为避免此现象发生,配制铁盐母液时,FeSO4和Na2-EDTA应分别加热溶解后混合,并置于加热搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20 - 30 min),调pH值至5 .5,室温放置冷却后,再冷藏。

3.4由于维生素母液营养丰富,因此贮藏时极易染菌。被菌类污染的维生素母液,有效浓度降低,并且易给后期培养造成伤害,不宜再用。避免此现象发生的方法是:配制母液时用无菌重蒸馏水溶解维生素,并贮存在棕色无菌瓶中,或缩短贮藏时间。

3.5所有的母液都应保存好,若母液出现沉淀或霉团则不能继续使用。

3.6计算时,要考虑周全,无论是配置母液时的计算还是配置培养基时吸取量的计算,都要考虑周全,尤其是母液配置时的计算,因为贯穿以后的实验,必须准确制备。

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