培养基母液的配制

培养基母液的配制

植物在自然状态下生长时，具有完整的营养体，是属于自养型的，很多营养物质可以自制，对外界营养条件的要求比较简单,而在离体条件下生长的植物器官、组织和整体植物不同，属于异养型,要求的营养条件十分复杂,因此在人工合成养基的组成和制备上必须全面考虑，满足供应。

一、实验目的

配制培养基母液是植物组织培养的基本技术。当需要连续和大量配制培养基时,如果每次都称量药品、溶解并定容，工作将十分繁琐，因此需要将大量元素、微量元素、铁盐、有机物质、激素类分别配制成适当的浓缩液。要求拿握植物组织培养培养基母液的配制方法。

二、实验材料仪器

冰箱、电子天平(0.0001g)

容量瓶: 1000 ml, 500ml、250 ml、100 ml、25 ml

广口储液瓶: 500 ml、250ml、50 ml、25 ml

烧杯: 1000ml、500ml 、250m、100ml 、50 ml

.数十根玻璃搅棒、大药勺、小药勺、标签纸、胶水、记号笔药品

50%酒精、95%酒精、1N盐酸(1N盐酸(HC1)的配制:取浓盐酸825ml,加入蒸馏水1000ml,即为IN的HCI)、1 N Na0H(1N氢氧化钠(或氢氧化钾)的配制:称40 gNa0H (或氢氧化钾57.1g)加入蒸馏水100ml ,即为1N的Na0H( IN的K0H)

几种常用的培养基所需的大量元素、微量元素、有机物、激素、铁盐等药品、蒸馏水

三、实验步骤

按照培养基配方，把大量元素、微量元素、铁盐、有机物、植物激素分类，每一类中各种药品分别称量。如Ms培养基各种母液的配制步骤如下:1、大量元素母液:

包括用量较大的几种化合物，按表中排列顺序，将每种药品的用量扩大10倍，分别称取，分别溶解,然后按照顺序混合在一-起。如钙盐等易发生沉淀的药品不能混合，应单位定容。最后加上蒸馏水，定容至1升或500毫升。在定容时注意用蒸馏水洗净烧杯和玻璃棒以减少误差。定容后的溶液为大量元素母液，配制培养基时，每配1 L培养基需吸取该母液100 m或50

2、微量元素母液:

因用量少,为了称量精确和方便,常配成100倍或100倍的母液,即每种药品扩大100倍或者1000倍。逐个溶解，混合在一起成为微量元素母液，每配1 L N培养基需吸取该母液10

m1或者1 ml。

U 14:05:19

3、铁盐:

在培养基配制中需要单独配制,它是由硫酸亚铁(FeSO:7H20) 5.57 g和乙二氨四乙酸二钠(Na)EDTA) 7.45g;分别溶解，混合后，用酒精灯加热半小时以上，冷却后定容至1L。冰箱过夜贮藏无结晶析出，否则重新配制。每配1升培养基需加该铁盐母液5 ml。4、有机物质:

主要指氨基酸，维生素类物质。它们大都是扩大1000倍,分别称量,分别定容和储存，配制培养基时按需要的量加入。

5、植物激素:

常用的有生长素类如: 2,4-D、萘乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA) ;细胞分裂素类:激动素(KT)、6苄基氨基嘌呤(6-BA) 、玉米素(ZT)。配制时需要单

个称量,根据需要可分别用酸、碱或酒精等不同的溶剂溶解后,再用蒸馏水配制成所需的浓度，- -般为每毫升含0.1-2 mg/ml,配制培养基时按所需要的量分别加入，如2,4-D和6-BA常配成1 m/mI的母液。

在配制2,4D、萘乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA) 母液时，先用几滴95%酒精溶解完全后，加蒸馏水定容，否则会发生沉淀。而激动素(KT) 、6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 、玉米素(ZT)母液时，要用少量的 1 molL HCI或Na0H 溶解，最后加水定容。

配好的母液要标记好配制的日期以及药物的浓度。