EB病毒检测技术进展及临床应用
EB病毒实验室检测技术研究进展
Ｅ Ｖ 培 养 是 将 标 本 直 接 接 种 人 新 鲜 的 脐 带 血 淋 巴 细 胞 或 Ｂ Ｂ细 胞 ， 养 ４周 ， 果 出现 大 量 的转 化 淋 巴 细 胞 ， 提 示 病 毒 培 如 则 培养阳性 ， 通过免疫荧光技术或其他检测手段检测转化淋 巴 可
１ 培 养 法
白成 为可 能 ， 种 Ｅ Ｖ 抗 原 已 被 表 达 纯 化 ， Ｅ ＩＡ 法 诊 断 多 Ｂ 使 ＬＳ 相 关 疾 病 的 价 值 大 大 提 高 。通 过 Ｅ ＩＡ 法 检 测 诊 断 Ｎ Ｃ 获 ＬＳ Ｐ 得 较 好 结 果 的 抗 原 有 ｇ １５ Ｅ Ｚ Ｂ Ａ、 Ｂ ｐ２ 、 Ａ、 Ｅ Ｒ Ｅ ＮＡ１ ＴＫ 激 酶 、 、 Ｄ ＮＡ 聚 合 酶 、 糖 核 酸 还 原 酶 等 ， 中 ＶＣ ｐ２ 核 其 Ａ ｇ １５编 码 是 敏 感 性 最 高 的基 因 片 段 ， 具 有 极 强 的 免 疫 原 性 。 盛 平 等 ｌ 并 ＿ １ 选
２Ｉ 免疫 荧 光法 （ ． ｉ ｍｍｕ ｏ ｕ ｒｓ ｅ ｃ ｓａ ，Ｆ Ｉ Ａ 以 ｎ ｆ ｏ ｅ ｃｎ ｅａ ｓ ｙ Ｉ Ａ） Ｆ ｌ Ｅ Ｖ 激 活 的 Ｂ ５ ８细 胞 或 Ｒ ｊ 细 胞 涂 片 ， 显 色 剂 显 色 后 用 Ｂ ９— ａｉ 经
关 键 词 ： 疹 病 毒 ４型 ， ； 病 毒 培 养 ； 免 疫 学技 术 ； 聚 合 酶 链 反 应 疱 人 Ｄ Ｉ１ ． ９ ９ｊｉｓ． ６ ３４ ３ ． ０ ２ ０ ． ２ Ｏ ：０ ３ ６ ／．ｓｎ １７ —１０ ２１ ． ９ ０ ９ 文 献标 识 码 ： Ａ
Ｅ 病 毒 （ｐｔｉ－ａｒｖ ｕ ， Ｂ 又 称 人 类 疱 疹 病 毒 ４ Ｂ ｅ ｓ ｎｂ ｒ ｉ ｓ Ｅ Ｖ） ｅ ｒ 型 ， 引 起 传 染 性 单 核 细 胞 增 多 症 ， 与 鼻 咽癌 （ Ｃ 、 基 特 可 并 ＮＰ ） 伯 （ ｕｋｔ 淋 巴瘤 、 奇 金 淋 巴 瘤 及 多 发 性 硬 化 症 的 发 生 关 系 密 Ｂ ｒ ｉ） ｔ 霍
EB病毒感染实验室检测方法
EB病毒感染实验室检测方法摘要本文档详细描述了EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）感染的实验室检测方法，包括病毒培养、血清学检测、核酸扩增和病毒载量测定等。
这些检测方法在临床诊断、流行病学研究以及疫苗研发等领域具有重要意义。
1. 病毒培养1.1 原理EBV属于疱疹病毒科，是一种专性细胞内寄生的DNA病毒。
病毒培养可以充分展示病毒的感染性、复制能力和生物学特性。
1.2 方法1. 选择合适的细胞系，如B95-8或Daudi细胞。
2. 将临床样本（如唾液、血液等）接种至细胞系。
3. 在适宜的条件下（如37°C、5% CO2）培养细胞，观察病毒复制和感染现象。
4. 定期观察细胞病变，如细胞增大、核固缩等。
5. 采用免疫荧光染色、电子显微镜等方法检测病毒颗粒。
2. 血清学检测2.1 原理血清学检测基于病毒感染后诱导的免疫反应，通过检测特异性抗体来诊断EBV感染。
2.2 方法1. 收集患者血清样本。
2. 使用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测EBV特异性抗体，如VCA-IgM、VCA-IgG、EA-IgG等。
3. 采用免疫荧光染色、免疫组化等方法进行抗体检测。
4. 根据抗体类型和滴度判断感染状态，如急性感染、慢性感染或回忆性感染。
3. 核酸扩增3.1 原理核酸扩增技术通过特异性引物和DNA聚合酶酶链反应（PCR）来检测EBV的DNA序列。
3.2 方法1. 提取临床样本的DNA。
2. 设计针对EBV DNA的特异性引物，进行巢式PCR或实时定量PCR（qPCR）。
3. 扩增EBV特异性基因，如EBNA1、EBNA2、LMP1等。
4. 分析扩增产物，判断病毒感染情况。
4. 病毒载量测定4.1 原理病毒载量测定通过检测病毒颗粒的数量来评估病毒感染的程度。
4.2 方法1. 提取临床样本的病毒颗粒。
2. 采用实时定量PCR、定量荧光显微镜等方法测定病毒载量。
3. 根据病毒载量判断感染程度，为临床治疗提供依据。
EB病毒抗体联合检测的临床应用价值分析
EB病毒抗体联合检测的临床应用价值分析【摘要】EB病毒抗体联合检测在临床诊断中具有重要的应用价值，能够帮助医生快速准确地诊断EB病毒感染，指导治疗方案的制定。
本文从EB 病毒抗体联合检测的原理与方法、在疾病诊断中的应用、临床价值以及未来发展方向等方面进行了详细分析和探讨。
通过本文的研究可以更好地了解EB病毒抗体联合检测在临床实践中的意义和作用，为医疗工作者提供参考和指导。
展望未来，随着检测技术的不断创新和完善，EB病毒抗体联合检测在临床应用中的重要性将会进一步得到提升，为疾病的早期筛查和诊断提供更加可靠的支持。
【关键词】EB病毒、抗体联合检测、临床应用、价值分析、研究背景、研究目的、原理与方法、疾病诊断、临床价值、未来发展方向、结论总结、展望未来1. 引言1.1 研究背景EB病毒，即Epstein-Barr病毒，是一种广泛分布于全球人群中的常见病毒，与多种疾病的发生密切相关。
EB病毒抗体检测是通过检测人体对EB病毒的免疫应答，判断个体是否感染EB病毒的一种常用方法。
传统的EB病毒抗体检测通常只检测一种或几种抗体，但由于感染EB病毒的个体免疫应答复杂，仅检测部分抗体可能导致漏诊或误诊的情况。
联合检测多种EB病毒抗体成为了当前临床诊断中的重要手段。
随着医学技术的不断进步和人们对健康的重视，越来越多的研究开始关注EB病毒抗体联合检测在临床应用中的价值。
通过综合分析不同种类的EB病毒抗体，可以更全面地了解个体对EB病毒的感染情况，为疾病的诊断和治疗提供更准确的依据。
本研究旨在探讨EB病毒抗体联合检测在临床应用中的重要性，以期为临床医生提供更科学、有效的诊断和治疗方案。
1.2 研究目的研究目的：本文旨在探讨EB病毒抗体联合检测在临床应用中的价值，并分析其在疾病诊断中的重要作用。
通过对相关文献及实验数据的综合分析，了解EB病毒抗体联合检测的原理与方法，以及其在各种疾病中的应用情况。
探讨EB病毒抗体联合检测在临床诊断中的临床价值，为临床医生提供更准确、及时的诊断依据，有助于提高患者的治疗效果和生存质量。
EB病毒感染临床应用研究进展
自然 杀 伤 细 胞 等 ， 发 相 关 的疾 病 。 引 ］ ２ Ｅ Ｂ病 毒 感 染 相 关 疾 病
２ １ 肿 瘤 性 疾 病 Ｅ ． Ｂ病 毒 感 染 与 某 些 肿 瘤 的发 生 和 发 展 密 切 相 关 ， Ｂ ｒ ｉ 淋 巴瘤 、 咽 癌 、 杰 金 病 和 成 人 Ｔ 细 胞 如 ｕｋｔ Ｓ ｔ 鼻 何
感 染 的 Ｂ淋 巴 细 胞 可 表 达 一 系列 Ｅ Ｂ病 毒 特 异 性 抗 原 分 子 ， 诱
２３ 其他相关疾病 ．
大 量 研 究 提 示 ， Ｂ病 毒 病 毒 感 染 与 类 风 Ｅ
湿关节炎之间存在 诸多联 系＿ ｌ Ｅ 病 毒 蛋 白和 类 风 湿 关 节 。 Ｂ 炎 特 异性 蛋 白 间存 在 一 些 抗 原 序 列 相 似 性 。 有 报 道 滑 膜 中存 在 Ｅ ＶＤ Ｂ ＮＡ 的个 体 中 患类 风 湿 关 节 炎 的风 险增 加 ＿ ｌ 近 年 。 来 ， Ｂ病 毒感 染 与 妊 娠 相 关 的 报 道 也 越 来 越 多 ， 妇 感 染 Ｅ Ｅ 孕 Ｂ 病毒后也会发生流产、 产 、 早 胎死 宫 内 、 儿 畸 形 及 新 生 儿 感 染 胎 等 情 况 。Ｅ Ｂ病 毒 妊 娠 期 再 次 激 活 可 导 致 孕 期 缩 短 ， 现 出 生 出 儿 体 质 量 降 低 、 长 缩 短 和头 颈 周 径 缩 短现 象 口。 身 。
淋 巴瘤 等 。近 年 来 ， 来 越 多 的学 者 把 研 究 重 点 转 移 到 Ｅ 越 Ｂ病
Ｅ Ｂ病 毒 实 验 室 检 测 的方 法 主要 有 ： 异 性 凝 集 试 验 、 毒 嗜 病 培 养 分 离 法 、 合 酶 链 反 应 、 毒 荧 光 检 测 、 清 学 抗 体 检 测 聚 病 血
肺结核病患者EB病毒的检测及临床意义
ＪＪｎｎ ｅ ｉ ， ｇ ｓ Ｏ ｌ Ｖｏ． ４ Ｎｏ ４ ｉｉｇＭ ｄＵｎｖ Ａｕ ｕ检测及 临床 意义
张 东顺 赵 月 霞 侯 春 生 。 石 俊 仕
（ 州 市大 安 中心 ｌ ｛ ， 兖 ！ － 山东 兖 州 ２ ２ ０ ； 济 宁 医学 院附 属 第 一 人 民医 院 ， Ｉ 济 宁 ２ ２ １ Ｚ院 ７ １ ０ １东 １ ７０１ 济 宁市 传 染 病 院 ， 山东 济 宁 ２ ２ ０ ； 宁 市结 核 病 防 治 所 ，Ｉ 济 宁 ２ ２ ０ ） ７ ０ ０ 济 １东 Ｉ ７ ０ ０
下 ：） １ 测血 清样 本和试 剂 盒 （ 别是 试剂 盒 中 的 Ａ、 特
Ｂ） 复 室温 （ ５ ７Ｃ） ２ 取 出反 应板 ， 恢 ２ ～３ ； ） 于反 应板 孔 中滴 人试 剂 Ａ ２滴 ， 置 ， 静 待试 剂 Ａ 完 全 吸入 ； ３ 用 加液器 吸 取 待 测 血 清 样 本 １ ０ ｌ 反 应 板孑 ） ０／ 于 ｘ Ｌ
２ ２ 肺 结 核 患 者 痰 检 阳 性 与 阴性 组 抗 Ｅ Ｖ 抗 体 ． Ｂ
阳 性 率 的 比较
见 表 ２ 。
济 宁 医学 院学 报 ２ １ 年 ８月第 ３ ０１ ４卷 第 ４期
表 ２ 肺 结 核 患 者 痰 检 阳 性 组 与 阴性 组 抗 Ｅ Ｖ 抗 体 Ｂ 阳性 率 的 比较
摘 要 Ｈ的 了解 肺 结 核 患 者 Ｅ Ｂ病 毒 感 染 及 Ｅ 病 毒感 染 对 结 核 病 病 情 和 病 程 的 可 能 影 响 。 Ｂ
法 采
用 金 标 免 疫 斑 点渗 滤 法 分 别 检 测 ５ 倒 肺 结 核 患 者和 ３ １ ０例 正 常健 康 人 血 浆 Ｅ Ｂ病 毒 感 染 的 ＩＭ 和 ＩＧ。结 果 ｇ ｇ 肺 结 核 患 者 Ｅ Ｖ ＩＭ 抗 体 阳性 率 ６ ． ％， Ｂ —ｇ Ｏ８ 与对 照组 （０ ０ ） 比 ， 异 有 统 计 学 意 义 （ ３ ． 相 差 Ｐ＜ ０ ０ ） Ｅ Ｖ— Ｇ 阳 ．５ ；Ｂ Ｉ ｇ 性 率 ４ ． ， １２ 与对 照 组 （６ ７ ） ２ ． 比较 无 统 计 学 意义 （ ００ ） 经 统 计 学 处 理 ， Ｂ 的 活 动 性感 染 － 结 核 的 病 Ｐ＞ ． ５ ； ＥＶ ９肺
EB病毒抗体诊断方法研究进展
【 Ｋｅ ｙ ｗ ｏ ｒ ｄ ｓ 】 Ｅ Ｂ ｖ ｉ ｕｓ ｒ ； Ｎ ａ ｓ ｏ ｐ ｈ ａ ｒ ｙ ｎ ｇ ｅ ａ ｌ ｃ ａ ｒ ｃ ｉ ｎ ｏ ｍａ ； Ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｔ ｏ ｄ ｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｅ ； Ｐ ｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ
病 毒 和 鼻 咽 癌 的血 清 学 有 关 以来 ， 后 来 诸 多 研 究 均 发 现
抗 Ｅ Ｂ病 毒 壳 抗原 的免 疫 球蛋 白对 鼻 咽 癌诊 断 有 特 异 性 。 近 年 来 ，随 着 检 验技 术 的发 展 和 在 临 床上 的大 量应 用 ， 国
内外 学者 对 鼻 咽癌 患 者血 清 Ｅ Ｂ病 毒抗 体 诊断 方 法作 了大
ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｃ ａ ｎ ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｄ ｅ ａ ｓ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｔ ｉ ｎ ｄ ｅ ｘ ｆ ｏ ｒ ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ ｅ ａ ｒ ｌ ｙ ｄ ｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｎ ａ ｓ ｏ ｐ ｈ ａ ｒ ｙ ｎ ｇ ｅ ａ ｌ ｃ ａ ｒ ｃ ｉ ｎ ｏ ｍａ ．Ｉ ｎ ｒ ｅ ｃ ｅ ｎ ｔ ｙ ｅ ａ ｒ ｓ ，
ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｏｒ ｆ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｓ ｅ ｕ ｍ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｔ ｏ ＥＢ ｖ ｉ ｕｓ ｒ ｈ ａ ｖ ｅ ｂ ｅ ｅ ｎ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ，ｔ ｈ ｅ ＥＢ ｖ ｉ ｕｓ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ ｄ ｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｔ ｉ ｃ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ
Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ｐｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ ＥＢ ｖ ｉ ｒ ｕｓ ａ ｎｔ ｉ ｂ ｏ ｄｙ ｉ ｎ ｔ ｈｅ ｄ ｉ ａ ｇ ｎｏ ｓ ｉ ｓ
EB病毒抗体谱检测的临床意义
EB病毒检测的临床意义
EB病毒（EBV）是传染性单核细胞增多症的病原体，与鼻咽癌有关。
由于该病毒普遍存在，其几乎感染全世界95%的成年人。
EBV传染的主要途径是口腔接触，它在咽的上皮细胞中复制，从被感染的B淋巴细胞中释放出来，随之流入唾液中。
临床意义：
EB 病毒属于人疱疹病毒，EB病毒初次感染年龄在发展中国家以2～6岁以下低年龄段为主，发达国家感染年龄延迟，以青少年时期为主｡EB病毒感染可导致免疫功能紊乱，发生与免疫系统功能紊乱相关的多种疾病如传染性单核细胞增多症､淋巴瘤､鼻咽癌及类风湿关节炎等｡EB 病毒是传染性单核细胞增多症的病原体，传染性单核细胞增多症是与咽炎和淋巴结病有关的发热性疾病，并且还经常伴有肝脾肿大，但很少有出疹｡
EB病毒共有6种抗原成分：壳抗原EBV－CA、早期抗原EBV－EA、核抗原EBV-NA、膜抗原EBV－MA、补体结合抗原(即可溶性抗原S)、淋巴细胞检查的膜抗原LYDMA,前五种均有相应抗体，LYDMA尚未检测到相应抗体｡
“EB病毒抗体四项”定性检测人血清中抗 EBV－CA (IgG ＋ IgM)、EBV－EA 和EBV-NA抗体，其主要临床意义见附表。
EB病毒相关疾病抗体谱
EB病毒相关疾病抗体谱
注：鼻咽癌的病因学检测应同时进行EBV－VCAIgA、EBV－EAIgA的检测。
EB病毒感染及特异性抗体检测的临床意义
EB病毒(EBV)感染及特异性抗体检测的临床意义EB病毒（EBV）于1964年由英国病毒学家Epstein和Barr首次从Burkitt淋巴瘤患者病理活检片中分离出来[1]。
感染EBV细胞体外培养实验证明该病毒具有显著的细胞转化能力[2，3]。
目前已有的研究表明EBV感染与多种肿瘤疾病的发生和发展具有密切相关性。
（见表1）表1：EB病毒感染与肿瘤疾病的相关性相关疾病高危人群与EBV感染相关性传染性单个核细胞增多症年轻人多数伴X染色体淋巴组织增生症（XLP）XLP基因突变的男性多数B淋巴组织增生症（BLPD）LP移植后<90%HIV感染患者原发性中枢神经系统淋巴瘤100外周淋巴瘤<80%Burkitt淋巴瘤（BL）非洲儿童（疫区）97%-100%HIV感染患者<25%Hodgkin病（HD）发展中国家的儿童40%-80%具有传单病史的年轻人40%-80%鼻咽癌亚洲人群100%NK淋巴瘤EBV慢性感染患者10%-100%HIV感染患者10%-100%一、EB病毒生物学特性1）结构和形态EB病毒是DNA病毒，属疱疹科病毒，人类是其唯一天然宿主。
电镜下呈球形，直径约200-300nm。
最外层的外膜为典型的类脂双层膜，上面有短的突起。
外膜下为内直径100-110nm的衣壳。
在衣壳和外膜之间常有一层称之为壳皮的无定型球状物质。
最内侧的核心为缠绕有DNA的核心蛋白。
EB病毒长期潜伏在淋巴细胞内，以环状DNA形式游离在胞浆中，并整合到染色体内。
2）EBV感染流行病学EB病毒在全球范围人群中广泛感染，主要传播途径包括唾液、喷嚏、咳嗽、共用餐具和输血等。
根据血清学调查，我国3~5岁儿童EB病毒VCA-IgG抗体阳性率达90%以上。
与所有的疱疹病毒相同，EBV感染后病毒可在宿主体内持续存在，但多数无明显症状，或引起轻症咽炎和上呼吸道感染[4]。
青年期发生原发性感染，约50%出现传染性单核细胞增多症[5]。
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EBV实验室检测方法
嗜异凝集抗体试验：也称“Monospot”试验。在EBV还未 确定为IM的病因之前，1932年引入临床实践诊断IM。 当时发现IM患者的血清或血浆可以凝集马或绵羊的红细胞。 该抗体在病程第1～2周出现，持续约6个月。 在青少年原发性EBV感染中其阳性率可达80％-90％，约10％ 的青少年缺乏对嗜异性抗体的阳性反应。
1975年Horwitz首次描述一些持续性IM患者血清存在高滴 度的抗EBV-VCA和EA抗体
1982年Tobi进一步描述并证实该病 1984年被称为慢性单核细胞增多样综合征 1986年被定义为慢性症状性EBV感染 1991年被称为慢性活动性EBV感染
CAEBV
发生于儿童或年轻成年人 该病表现为慢性或反复的单核细胞增多样症：发热、肝脾
概述
➢ 传播途径：EBV感染主要通过唾液接触传播，也可通过 血液传播；
➢ 人感染EBV后建立终身潜伏感染，人群感染率超过90%。 ➢ 1-6岁儿童、14-20岁青少年及年轻成年人高度易感，发
展中国家EBV感染多发生在儿童早期。
病原学
疱疹病毒科，γ疱疹病毒亚科，淋 巴隐病毒属，人疱疹病毒4型
球形双链DNA病毒，基因组平均 大小约为172 kb
EBV病毒核酸检测
➢ 实时荧光定量PCR是目前最主要的监测EBV载 量的方法
➢ 鉴别EBV健康携带者的低水平复制与EBV相关 疾病患者高水平活动性感染。
EBV病毒核酸检测
EBV载量检测有多种方法，Real-time PCR是 目前最主要的监测EBV载量的方法，有较强的敏 感性和特异性。不同的EBV疾病进行Real-time PCR检测时，需要的标本不同。
EB病毒检测技术及临床应用
概述
Epstein-Barr病毒（EBV）
➢ 疱疹病毒科，γ亚科，嗜淋巴细胞病毒属， ➢ 1964年由Epstein、Barr等人首次在非洲儿童的恶性淋巴瘤组织
培养中发现。 ➢ EBV是是传染性单核细胞增多症的病原体，也是一种重要的肿瘤
相关病毒，与鼻咽癌、淋巴瘤、胃癌、移植后淋巴增殖症等多种 肿瘤的发生密切相关，被列为致癌性病毒之一。
EBV潜伏感染的细胞含有大量的EBERl／EBER2 （EBERS）转录子，其主要功能是抑制干扰素介导的抗病 毒效应和凋亡。该转录子不翻译成蛋白质，每个EBV潜伏 感染的细胞含有大约106拷贝EBERS，被认为EBV潜伏感染 的最好标志物，因此原位杂交检测肿瘤细胞中EBERS是诊 断肿瘤是否EBV相关的金标准
－ ＋ ＋/－ 低＋/－ 高＋
－ － ＋/－ ＋ ＋/－
临床需要回答的问题
➢ 是否感染EBV? ➢ EBV感染的时相？ ➢ 是否EBV活动性感染？ ➢ 疾病是否与EBV感染相关？
EBV实验室检测方法
➢ 病毒培养 ➢ 免疫学技术（免疫荧光法，免疫组化技术） ➢ 血清学方法（ELISA法，化学发光法） ➢ 基因诊断技术
潜伏膜蛋白（LMP-1,-2A,-2B）：
• 在感染B细胞表面，与细胞恶化有关，
未翻译的转录物BARF0和EBER EBNA-3、EBNA-2、LMP-1是EBV-CTL CD8+的主要目标
原发性EBV感染过程中首先产生针对 衣壳抗原（capsid antigen, VCA） IgG和IgM，在急性感染的晚期，抗 早期抗原（early antigen, EA）抗体 出现在恢复期晚期，抗核抗原 （nuclear antigen, NA）抗体产生， 抗VCA-IgG和抗NA-IgG可持续终身
原位杂交：检测出EBER-1阳性细胞 Southern杂交：受累组织或外周血中检测出
EBV DNA 免疫荧光：检测到抗原（EBNA、LMP） 感染的B、T、NK细胞、单核/巨噬/组织细胞
检测到EBNA、EBER、EBV-DNA
EBV相关的噬血细胞性淋巴组织细胞增生症 EBV-associated hemophagocytic lymphohistocytosis EBV-HLH
➢ 特指由EBV感染引起的发热、咽炎和淋巴结肿大的综合征 ➢ 1889年被首次描述为“glandular fever” ➢ 1920年正式定义为IM ➢ 1932年发现嗜异性凝集实验 ➢ 1968年实验室工作人员感染EBV，出现IM临床症状和嗜
异性凝集抗体，明确EBV是IM的病原
IM临床表现
25-30%的青少年和<30岁的成年人原发感染EBV后表现IM 儿童时期EBV感染多为亚临床型或不典型症状 临床症状：发热、淋巴结肿大、扁桃体炎（灰白色渗出）、咽炎、肝
抗EA-IgG在发病后3-4周后升高， 3~4月后检测不到
抗EBNA-1-IgG在发病后3~4周被检 测到，持续终身，部分慢性EBV感 染者检测不到
抗VCA-IgG和抗EBNA-1-IgG终生持 续阳性
EBV常见相关疾病
传染性单核细胞增多症(IM) infectious mononucleosis
膜抗原（MA）： • 细胞表面包膜糖蛋白（MA gp350/220,gp85)，是EBV的中和性 抗原 • 抗MA-IgM可用于早期诊断
EBV感染的抗原表达
EBV潜伏感染期，选择性表达早期抗原以及：
核抗原（EBNA-1,-2,-LP,-3A,-3B,-3C）：
• 为DNA结合蛋白，在感染的B细胞核内； • EBNA-1与感染有关，EBNA-2与细胞转化和永生化有关； • EBNA抗体出现在感染晚期。
EBV致病机制
➢ EBV在人体B细胞建立潜伏感染，EBV只表达潜伏抗原 （包括EBNA-1、EBNA-2、EBNA-3A、EBNA-3B、 EBNA-3C、EBNA-LP、LMP-1、LMP-2及EBER），受 感染者将成为终身带毒者。
➢ 在机体免疫功能下降和某些因素触发下，潜伏的EBV可以 被再激活，引起病毒复制及临床疾病。
➢ Burkitts淋巴瘤 何奇金淋巴瘤
EBV感染的抗原表达
EBV溶解性感染期，可表达：
早期抗原（EA）： • EA/R和EA/D（具DNA多聚酶活性）； • EA出现表明EBV活跃增殖，EA抗体出现在感染早期；
衣壳蛋白（VCA） • 晚期表达的结构蛋白 • VCA-IgM出现在急性感染早期，VCA-IgG出现在急性感染期并 持续存在
肿大、持续性肝炎、广泛性淋巴结肿大 EBV感染的NK和T细胞克隆扩增在CAEBV具有重要意义 通常是一种肿瘤前状态或者与严重免疫缺陷有关，可进一
步引起EBV相关的T/NK细胞增殖性疾病 预后差，病死率高
CAEBV的诊断标准
1）持续性或反复发作的IM样症状 2）异常升高的抗VCA-IgG和EA-IgG
EBV常见相关疾病
➢ 传染性单核细胞增多症 （Infectious mononucleosis,IM)
➢ 慢性活动性EB病毒感染 （Chronic active EBVinfection，CAEBV）
➢ EB病毒相关性嗜血细胞综合征 （EBV-associated hemophagocytic syndrome, EBVAHS)
作用机制
作用病毒DNA多聚酶，抑制病毒复制
EBV感染的实验室诊断
外周血分类
淋巴细胞≥50% WBC 不典型淋巴细胞≥10% WBC（系激活的CD8+ CTL）
血清学检查
嗜异性凝集实验（heterophile test/spot test） VCA-IgM、IgG，EA-IgG，EBNA-IgG
EBV致病机制
➢ 原发EBV感染时，EBV先是在口咽部上皮细胞内增殖， 然后感染附近的B淋巴细胞，受到感染的B淋巴细胞进 入血液循环可以造成全身性感染。
➢ EBV原发感染后，大多数无临床症状，尤其是6岁以 下幼儿大多表现为隐性或轻型发病，但在儿童期、青 春期和青年期 ，约50%的原发性感染均表现为IM。
EBV感染的血清学诊断评价
嗜异性抗体（heterophile antibody，HA）凝集实验 （“spot” test）
嗜异性抗体（IgM）在发病后7天内出现，2-5周达高峰，可以持 续6-12个月，偶有12个月后以低水平存在
HA阳性提示原发急性感染，EBV再激活感染几乎阴性 阳性率：青少年和成年人71%-90%， 2-5岁儿童50% 假阴性：发病第1周内假阴性率25%，10%成人始终阴性 假阳性：2-3%自身免疫性疾病、HIV感染、心内膜炎、HAV肝
Hydroavacciniforme 牛痘样水疱
hypersensitivity to mosquito bites
CAEBV的诊断标准(1)
临床症状
持续性或反复发作的IM样症状
• 发热、淋巴结肿大、肝脾肿大
并发症：
• 血液系统（EBV-HLH、淋巴瘤、白血病、DIC、血小板减少、贫血） • 消化系统（肝功能衰竭、消化道溃疡） • 中枢神经系统 • 间质性肺炎 • 心血管（冠状动脉瘤、心肌炎、心瓣膜病） • 皮肤（蚊虫叮咬过敏、皮肤牛痘样水疱 ）
抗EBV病毒药物
无环核苷拟似剂 acyclovir（阿昔洛韦），ED50 0.3µΜ ganciclovir（更昔洛韦）， ED50 0.05µΜ
valaciclovir（缬昔洛韦 ）
无环核苷酸
cidofovir，adefovir
焦磷酸盐 拟似剂
foscarnet（磷甲酸钠）
和/或受累组织包括外周血检测到EBV基因组 3）慢性疾病不能以其他已知的疾病解释
Okana M, et al. Proposed guidelines for diagnosing chronic active Epstein-Barr virus infection. America J Hematol.2005,80:64-69