天狼星红染色液(试剂盒)操作步骤及注意事项
天狼猩红染色实验报告
天狼猩红染色实验报告
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称厂家型号
脱水机武汉俊杰电子有限公司JJ-12J
包埋机武汉俊杰电子有限公司JB-P5
病理切片机上海徕卡仪器有限公司RM2016
冻台武汉俊杰电子有限公司JB-L5
组织摊片机浙江省金华市科迪仪器设备有限公司KD-P
烤箱天津市莱玻瑞仪器设备有限公司GFL-230
载玻片及盖玻片江苏世泰实验器材有限公司10127105P-G
正置光学显微镜日本尼康NIKON ECLIPSE E100成像系统日本尼康NIKON DS-U3
2、主要实验试剂
试剂名称厂家货号
无水乙醇国药集团化学试剂有限公司100092683
二甲苯国药集团化学试剂有限公司10023418
天狼猩红染液四川赛因斯特生物科技有限公司
中性树胶国药集团化学试剂有限公司10004160
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无
水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗。
2、天狼猩红染色：切片入天狼猩红染液中染色8-10min，两缸或三缸无水乙醇脱水；
3、脱水封片：切片放入再放入干净的二甲苯透明5min，中性树胶封片。
4、显微镜镜检，图像采集分析。
三、结果判读：
光学显微镜下胶原纤维红色，背景黄色；偏振光下，Ⅰ型胶原呈橘黄色或亮红色的粗纤维，Ⅲ型胶原呈绿色的细纤维。
四、注意事项：
1、无水乙醇脱水时应控制程度，片子不能残留多余的染液，也不能影响黄色的背景。
眼科天狼星仪检查操作规程
眼科天狼星仪检查操作规程
《眼科天狼星仪检查操作规程》
一、前言
眼科天狼星仪是一种能够快速、准确检测眼部疾病的先进设备，广泛应用于眼科临床诊断。
为了确保天狼星仪的正常使用并提供准确的检查结果，我们制定了相应的操作规程。
二、检查前准备
1. 检查前需进行设备预热，按照设备说明书进行操作。
2. 准备好相应的人员和材料，包括医生、护士以及消毒液等。
3. 对患者进行简要询问，了解其眼部状况，排除有可能影响检查结果的因素。
三、检查过程
1. 让患者取下眼镜、隐形眼镜等眼镜，取下隐形眼镜的病人，建议不要戴隐形眼镜再检查。
2. 要求患者坐在检查椅上，并保持眼睛自然的状态。
3. 用消毒液对天狼星仪的接触部分进行消毒处理，保证设备的卫生。
4. 由医生和护士共同协作，对患者进行眼睛检查。
医生操作设备，护士负责辅助并观察患者的反应。
5. 在确保患者眼部处于稳定状态后，进行扫描、拍照等操作，确保操作规范、技术准确。
四、检查后处理
1. 对检查过程中产生的数据进行整理和存储。
2. 告知患者检查结果，并给予适当的治疗建议。
3. 对设备进行消毒清洁，保证下一次使用的卫生安全。
以上就是眼科天狼星仪检查操作规程，希望能够帮助大家更好地使用天狼星仪，提高眼科临床工作的准确度和效率。
HE染色方法与步骤吐血整理
HE染色试剂配置A：0.5~1%的伊红酒精溶液：称取伊红Y0.5~1g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。
以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精（即工业酒精，如果不怕浪费，用无水乙醇配制也可）100毫升溶解。
B：苏木素染液配方：(配制3000ml，可按比列减少)苏木精6g无水乙醇100ml硫酸铝钾150g蒸馏水2000ml碘酸钠1.2g冰醋酸120ml甘油900ml配制方法：将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，最后加入冰醋酸和碘酸钠。
C：1%盐酸酒精分化液：将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。
染色流程(1)二甲苯（Ⅰ）15min(2)二甲苯（Ⅱ）15min（3）二甲苯：无水乙醇=1:12min(4)100%乙醇（Ⅰ）5min(5)100%乙醇（Ⅱ）5min(6)80%乙醇5min(7)蒸馏水5min(8)苏木精液染色5min(9)流水稍洗去苏木精液1-3s(10)1%盐酸乙醇1-3s(11)稍水洗10-30s(12)蒸馏水过洗1-2s(13)0.5%伊红液染色1-3min(14)蒸馏水稍洗1-2s(15)80%乙醇稍洗1-2s(16)95%乙醇（Ⅰ）2-3s(17)95%乙醇（Ⅱ）3-5s(18)无水乙醇5-10min(19)石炭酸二甲苯5-10min(20)二甲苯（Ⅰ）2min(21)二甲苯（Ⅱ）2min(22)二甲苯（Ⅲ）2min(23)中性树胶封固注：①第（11）、（12）步可省去，（13）步冲水时间需延长至20-30min。
②第（21）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。
*冷冻切片HE染色步骤：（1）冰冻切片固定10～30s（2）稍水洗1～2s（3）苏木精液染色（60℃）30～60s（4）流水洗去苏木精液5～10s（5）1%盐酸乙醇1～3s（6）稍水洗1～2s（7）促蓝液返蓝5～10s（8）流水冲洗15～30s（9）0.5%曙红液染色30～60s（10）蒸馏水稍洗1～2s（11）80%乙醇1～2s（12）95%乙醇1～2s（13）无水乙醇1～2s（14）石炭酸二甲苯2～3s（15）二甲苯（Ⅰ）2～3s（16）二甲苯（Ⅱ）2～3s（17）中性树胶封固。
天狼星红染色
染色结果： 普通光学显微镜
胶原纤维 细胞核
红色 蓝色
偏振光显微镜 Ⅰ型胶原纤维 Ⅲ型胶原纤维
强橙黄色或亮红色 绿色
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-3-
天狼星红染色试剂盒
货号：BB-44333
试剂盒储存条件：
2-8℃密封避光保存。
开盖后组份按要求条件保存。
试剂盒组成：
产品组成 规格
组份 A：天狼星红染色液 组份 B：Mayer 苏木素染色液
使用说明书
V1.7.X
BB-4101-1 100 ml 50 ml 50 ml 1
组份编号
4重要事项 ※ ※ ※
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制： 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：
贝博 TM 会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行 相应的版本更新。使用产品时，请参照试剂盒中随产品附带的印刷版说明书， 不能参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时 可以在收到产品后发邮件索取。
胶原纤维（Collagen Fiber）是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维，广泛分布于各 种脏器，其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱纤维；Ⅱ型胶 原纤维主要是软骨胶原；Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道；Ⅳ型胶原纤维 主要在基膜中。天狼星红与其衬染液都是强酸性染料，易与胶原分子中的碱性基团结合，吸 附牢固。偏振光镜检查，胶原纤维有正的单轴双折射光的属性，与天狼星红复合染色液结合 后，可增强双折射，提高分辨率，从而区分两型胶原纤维。
天狼星红染色原理
天狼星红染色原理天狼星红是一种常用的组织染色剂，它在生物学和医学领域有着广泛的应用。
天狼星红染色原理是指天狼星红在染色过程中的作用机制和原理。
下面我们将详细介绍天狼星红染色原理的相关知识。
首先，天狼星红是一种亲水性染料，它能够与细胞内的蛋白质结合形成稳定的复合物。
在染色过程中，天狼星红以阳离子形式存在，它能够与细胞内的阴离子基团结合，从而在细胞内形成可见的染色效果。
这种染色效果能够帮助科研人员观察细胞的形态、结构和功能，为细胞学和组织学研究提供了重要的技术手段。
其次，天狼星红染色原理还涉及到染色剂与细胞结构的亲和性。
天狼星红能够与细胞内的特定结构发生亲和作用，如细胞核、细胞质、细胞器等，从而在染色过程中呈现出不同的染色效果。
这种亲和作用是天狼星红染色原理的重要组成部分，也是其在细胞学和组织学研究中得以广泛应用的重要原因之一。
另外，天狼星红染色原理还与染色剂的渗透性和选择性有关。
天狼星红能够通过细胞膜进入细胞内部，与细胞内的特定结构结合并发生染色反应。
这种渗透性和选择性使得天狼星红在染色过程中能够准确地染色目标结构，为科研人员提供了清晰的观察和分析样本的机会。
总的来说，天狼星红染色原理是一个复杂而又精密的过程，它涉及到染色剂的化学特性、细胞结构的生物学特性以及染色过程的物理化学变化等多个方面的知识。
了解天狼星红染色原理不仅有助于科研人员正确地选择和运用染色剂，还能够帮助他们更好地理解细胞和组织的结构与功能，为生物学和医学研究提供更加准确和可靠的数据支持。
总之，天狼星红染色原理是细胞学和组织学研究中的重要内容，它的深入理解和准确把握对于科研工作具有重要的意义。
希望通过本文的介绍，能够使读者对天狼星红染色原理有一个更加清晰和全面的认识，为相关研究工作提供一定的帮助和指导。
天狼猩红染色
已知胶原有四型（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）区分并定量这四种胶原纤维，对于研究病变的发生机理和演变过程有一定的意义。
利用胶原蛋白聚合及其缠绕螺旋排列不同的特点，使用天狼星红苦味酸染色法，在偏振光显微镜下，可以根据双折光性和着色的不同，分别显示出四型胶原纤维。
[组织固定与切片]
4%甲醛液固定组织，石蜡切片。
[试剂配制]
（1）天狼星红-饱和苦味酸液：%天狼星红10ml，苦味酸饱和水溶液90ml。
（2）天青石蓝液：天青石蓝，铁明矾，蒸馏水250ml。
溶解煮沸，冷却后过滤，加入甘油30ml，然后再加入浓硫酸（注意硫酸一定要后加入）。
[操作步骤]
（1）石蜡切片厚4~6μm，脱蜡至水。
（2）入天青石蓝液5~10min。
（3）蒸馏水冲洗3次。
（4）天狼星红饱和苦味酸液15~30min；（可用Harris苏木素液淡染细胞核）。
（5）直接用无水乙醇分化与脱水。
（6）二甲苯透明、光学树胶封固。
[染色结果]
普通光镜观察：胶原纤维呈红色，细胞核呈绿色，其他成分呈黄色。
偏振光显微镜下观察：
Ⅰ型胶原纤维：红色或黄色，排列紧密，具强双折光性。
Ⅱ型胶原纤维：多种色彩，疏松网状、弱双折光性。
Ⅲ型胶原纤维：绿色、细纤维、弱双折光性。
Ⅳ型胶原纤维：淡黄色、弱双折光性（基膜成分）。
[注意事项]
为保持色彩鲜艳，应在染色后及时观察并照相。
核固红染色液配制及使用方法
北京华越洋生物提供QQ:1733351176
核固红染色液(0.1%)
核固红染色液是组织切片染色中常用的复染液，染色后细胞核呈红色。
本产品为工作液，可直接使用。
染色液可重复使用多次，但染色效果会逐渐降低。
使用方法：
1、切片脱蜡至水，可进行其他染色，染色后蒸馏水洗2-5min。
2、将组织切片浸入核固红染色液，也可以直接滴加到样本上染色5-10分钟(浅染细胞核)，染色时间可根据染色深度做相应调整。
3、自来水中冲洗去除多余的染色液。
4、常规脱水透明，中性树胶封固。
注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
3、染色过程推荐浅染，通常能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞颜色。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地：国产
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
保存：室温避光保存，有效期至少一年。
关键词：核固红染色液(0.1%)
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Masson三色染色液染色步骤及注意事项
Masson三色染色液染色步骤及注意事项步骤一：预处理1. 切片：将需要染色的组织标本切成厚度约为5um的切片，将切片均匀地放置在已经预先烘干和标记好的玻片上。
2.固定：用10%中性缓冲福尔马林固定切片，固定时间约为24小时。
步骤二：染色1. 染色剂的准备：将Masson三色染色液购买回来后，根据品牌推荐比例稀释至适当浓度。
不同品牌染色液稀释比例可能有所不同，因此以具体品牌的说明为准。
2.染色操作：(1)将切片放入染色盒中，并将染色盒放入水浴中加热，温度为60-70摄氏度，时间为20-30分钟。
(2)将加热后的染色盒取出，用水冲洗2-3分钟，直至明显的污染物被冲走。
(3)将切片置于70%酒精中，时间为5分钟。
(4)在20%盐酸酒精中浸泡1-2秒钟，然后立即将切片漂洗至酸性的第一盐酸酒精。
(5)在酸性的第一盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟，然后漂洗至酸性的第二盐酸酒精中。
(6)在酸性的第二盐酸酒精中浸泡30秒至1分钟，然后漂洗至蒸馏水中。
(7)转移到可溶性亮蓝GR中染色5分钟。
(8)快速漂洗后，放入蒸馏水中清洗1-2分钟。
(9)再次转移到1%醋酸中染色1分钟。
(10)最后，在6%石蜡溶液中浸泡5-10分钟。
步骤三：封片1.脱水：将切片放入95%乙醇中，时间为1-2分钟，然后放入绝对乙醇脱水2-3分钟。
2.渗透：将切片放入二氯甲烷中，时间为5分钟，再在房温下放置3-5分钟以充分渗透。
3. 封片：将切片放入500-1000ml锡兰红封片剂中，时间为1-2分钟，然后将切片转到盖玻片上，将封片剂挤满，盖上玻片，压平后放在60摄氏度的烘箱中加热2-3小时。
注意事项：1.操作中应注意个人防护，佩戴手套和口罩，避免接触有害物质。
2.染色过程中要严格控制温度和时间，避免染色过程中出现偏差。
3.在脱水和封片过程中要注意将切片完全浸透，防止切片变形或脱落。
4.染色溶液和液体处理过程中，应注意防止溅溢和污染，保持操作环境清洁。
天狼星红染色液操作说明及注意事项
天狼星红染色液操作说明及注意事项
货号：G1471
规格：50ml/100ml
保存：4℃，避光，12个月
产品说明：
胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维，广泛分布于各种脏器，其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。
天狼星红染色液的溶剂为衬染PA饱和溶液，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，管等组织的胶原纤维被染成红色，的帮助作用。
操作说明：（仅供参考）
1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。
2、切片厚6μm，常规脱蜡至水。
3、天狼星红染色液滴染。
4、流水稍微冲洗，去除切片表面染液。
5、Mayer苏木素染色液染细胞核。
6、流水冲洗10min。
7、常规脱水透明，中性树胶封固。
注意事项：
1、为使在偏振光镜下显示清晰，本法的切片厚度以6～7μm为宜。
2、本法染色稳定，不易褪色。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
HE染色方法与步骤吐血整理
HE染色试剂配置A：0.5~1%的伊红酒精溶液：称取伊红Y0.5~1g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。
以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精（即工业酒精，如果不怕浪费，用无水乙醇配制也可）100毫升溶解。
B：苏木素染液配方：(配制3000ml，可按比列减少)苏木精6g无水乙醇100ml硫酸铝钾150g蒸馏水2000ml碘酸钠1.2g冰醋酸120ml甘油900ml配制方法：将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，最后加入冰醋酸和碘酸钠。
C：1%盐酸酒精分化液：将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。
染色流程(1)二甲苯（Ⅰ）15min(2)二甲苯（Ⅱ）15min（3）二甲苯：无水乙醇=1:12min(4)100%乙醇（Ⅰ）5min(5)100%乙醇（Ⅱ）5min(6)80%乙醇5min(7)蒸馏水5min(8)苏木精液染色5min(9)流水稍洗去苏木精液1-3s(10)1%盐酸乙醇1-3s(11)稍水洗10-30s(12)蒸馏水过洗1-2s(13)0.5%伊红液染色1-3min(14)蒸馏水稍洗1-2s(15)80%乙醇稍洗1-2s(16)95%乙醇（Ⅰ）2-3s(17)95%乙醇（Ⅱ）3-5s(18)无水乙醇5-10min(19)石炭酸二甲苯5-10min(20)二甲苯（Ⅰ）2min(21)二甲苯（Ⅱ）2min(22)二甲苯（Ⅲ）2min(23)中性树胶封固注：①第（11）、（12）步可省去，（13）步冲水时间需延长至20-30min。
②第（21）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。
*冷冻切片HE染色步骤：（1）冰冻切片固定10～30s（2）稍水洗1～2s（3）苏木精液染色（60℃）30～60s（4）流水洗去苏木精液5～10s（5）1%盐酸乙醇1～3s（6）稍水洗1～2s（7）促蓝液返蓝5～10s（8）流水冲洗15～30s（9）0.5%曙红液染色30～60s（10）蒸馏水稍洗1～2s（11）80%乙醇1～2s（12）95%乙醇1～2s（13）无水乙醇1～2s（14）石炭酸二甲苯2～3s（15）二甲苯（Ⅰ）2～3s（16）二甲苯（Ⅱ）2～3s（17）中性树胶封固。
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天狼星红染色液(试剂盒)操作步骤及注意事项
货号：G1470
规格：2×50ml/2×100ml
有效期：12个月
产品内容：
2×50ml2×100ml Storage
规格
名称
试剂(A):weigert铁苏木素溶液A1:Weigert染液A25ml50ml4℃避光
A2：Weigert染液B25ml50ml4℃避光临用时，取A1、A2按1:1等量混合均匀后使用，现配现用。
试剂(B):天狼星红染色液50ml100ml4℃避光产品简介：
胶原纤维（Collagen Fiber）是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维，广泛分布于各种脏器，其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。
Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱纤维；Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原；Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道；Ⅳ胶原纤维主要在基膜中。
天狼星红与其衬染液都是强酸性染料，易与胶原分子中的碱性基团结合，吸附牢固。
偏振光镜检测，胶原纤维有正的单轴双折光性的属性，与天狼星红复合染色液结合后，可增强双折射，提高分辨率，从而区分两型胶原纤维。
天狼星红染色液主要由weigert铁苏木素染色液、天狼星红染色液组成，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，肌纤维被染成黄色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。
采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，但所用抗体昂贵，操作费
时，而采用天狼星红染色试剂便宜，操作简单。
自备材料：
1.10%的福尔马林固定液
2.普通光学显微镜或偏振光显微镜
操作步骤（仅供参考）：
1.组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。
2.切片厚度6µm，常规脱蜡至水。
3.weigert铁苏木素染色液染色10-20min。
4.酸性分化液分化数秒（可省略）。
5.自来水洗5-10min，蒸馏水洗一次。
6.天狼星红染色液滴染1h。
7.流水稍微冲洗，去除切片表面染液。
8.常规脱水透明，中性树胶封固。
染色结果：
普通光学显微镜：
胶原纤维红色
细胞核蓝色
肌纤维黄色
偏振光显微镜：
Ⅰ型胶原纤维强橙黄色或亮红色
Ⅲ型胶原纤维绿色
注意事项：
1.为使在偏振光镜下显示清晰，本法的切片厚度以6～7µm为宜。
2.用weigert铁苏木素染液染细胞核，可不受天狼星红染液的影响。
3.本法染色稳定，不易褪色。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。