核糖核酸酶抑制剂使用说明
RNA提取注意事项
RNA提取注意事项一些RNA提取方法，在进行具体实验时，应根据研究对象的性质，提取核酸的用途而对上述方法在操作步骤和试剂使用量上作一定的修改。
1、在核酸提取时，为了增加细胞的裂解度，增加核蛋白复合体破碎度，以释放更多的游离核酸，在操作中常要用到溶菌酶和蛋白酶K，在确保没有核酸水解酶存在的前提下，酶反应时间越长越好。
2、有时在使用蛋白酶时，为了抑制核酸水解酶的降解作用，可在蛋白酶缓冲液中用终浓度5mM的EDTA代替NaC L，并且可将反应温度提高到50－60℃，并将反应时间缩短到15－25min，但酶用量必须提高10－20倍。
溶菌酶使用时缓冲液中需加EDTA，因游离金属离子对酶有抑制。
3、许多植物材料中富含酚，在细胞破碎时，在多酚氧化酶作用下，被氧化成有色的锟类物资，影响核酸的提取及降低提取质量，在提取液中加入PVP和巯基乙醇对降低酚类的干挠可能有所帮助。
PVP将与酚形成复杂的聚合体，在提取时将酚从核酸成分中游离。
且PVP与巯基乙醇作为强还原剂可防止多酚的褐变。
另外作为还原剂的这些成分在一定程度上可抑制核酸水解酶的作用。
4、许多生物材料在提取核酸时，都会遇到多糖的污染问题，具体表现为有机溶剂沉淀时，沉淀很多，但复溶时，大量沉淀不溶，电泳观察时核酸含量很低。
克服多糖污染可采用以下一些办法1) CTAB多次抽提。
2) 在有机溶剂沉淀时先稀释样品浓度（可到10倍左右），对低浓度样品再进行沉淀。
3)在有机溶剂沉淀时选用异丙醇和5M NaCL作为沉淀溶剂，此时氯化钠的用量可用到1/5-1/2的体积，异丙醇可用到0.6-1的体积。
异丙醇沉淀核酸时，高浓度盐存在将使大量多糖存在在溶液中，从而可达到去多糖的作用。
RNA酶抑制剂
1.产品描述RNA酶抑制剂具有广谱的RNA酶抑制作用，包括中性的真核生物的RNA的抑制作用。
分子量是50kDa的蛋白质通过非共价键与RNA酶以1：1的比例结合发挥它的抑制作用。
RNA酶抑制剂与RNA酶结合的有效浓度时10-14M。
相比之下，抗体的结合浓度是10-6-10-8M。
而且，RNA酶抑制剂的动力学结合是非常迅速的，确保与RNA酶的迅速络合，并对其产生迅速的抑制作用。
Promega提供两种不同的实验方案：天然的RNA酶抑制剂和重组的RNA 酶抑制剂。
这些产品都是应用离子交换和亲和色谱法结合得到，所以都是纯净的。
她们都不含有DNA外切酶、核酸外切酶活性和RNA酶活性。
RNA酶抑制剂除了具有对RNA酶活性抑制作用的能力外，已经被证实，在血管生成素的诱导下可以抑制血管的生成。
重组RNA酶抑制剂：为实验人员提供一个额外的水平，保证试剂的纯度和连续性。
从重组大肠杆菌中提取，氨基端是一个已经解锁的丝氨酸残基。
一般考虑：分子和核糖核酸酶结合，因为核酸酶在变性的情况下保持活性，所以必须注意避免RNA酶抑制剂变性。
如果被稀释或储存一段时间，为了防止活跃核酸酶的释放，应该避免温度高于50℃，以及尿素或者其他变性剂的浓度过高。
RNA酶抑制剂在一定pH变化范围内是非常活跃的。
2.标准使用程序重组和天然RNA酶抑制剂在体外转录和翻译时可以互换，具体介绍如下。
想要得到更多关于体外转录系统的信息，请咨询核糖核酸探针体外转录系统手册。
A.体外转录（未标记RNA）下面的体外转录系统分析使用最终浓度在1u/ul的RNA酶抑制剂。
经过合适的修改，这个反应可以用于各种实验的体外转录分析。
B.体外转录（32P标记RNA探针）C.体外翻译包括RNA抑制酶和体外翻译，确保RNA酶作用物的完整性。
（1）兔网织红细胞溶解产物参与的简单体外翻译反应：（2）三硝基甲苯网织红细胞溶解产物或者小麦胚芽提取物系统参与的简单体外翻译3．缓冲液和溶液的成分4.参考文献。
dsrna纯化方法
dsrna纯化方法dsRNA是一种双链RNA（double-stranded RNA）分子，其在生物学研究和应用中具有重要的作用。
纯化dsRNA是获得高纯度dsRNA样品的关键步骤，本文将介绍几种常用的dsRNA纯化方法。
一、聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化法聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化法是一种常用的dsRNA纯化方法。
首先，将含有dsRNA的样品与脱氧核糖核酸酶（RNase）抑制剂混合，以防止dsRNA在纯化过程中被RNase降解。
然后，将样品加载到聚丙烯酰胺凝胶电泳槽中，通过电泳分离dsRNA和其他核酸分子。
最后，使用透明质酸钠（sodium dodecyl sulfate，SDS）和乙酸银染色法对dsRNA进行染色，以便可视化。
二、硅胶柱层析法硅胶柱层析法是另一种常用的dsRNA纯化方法。
首先，将含有dsRNA的样品与硅胶混合，通过离心将混合物分离为上清液和沉淀。
上清液中含有dsRNA，而沉淀中则含有其他杂质。
然后，将上清液加载到硅胶柱中，通过洗涤和洗脱步骤，分离纯净的dsRNA。
三、钠酒石酸盐沉淀法钠酒石酸盐沉淀法是一种简单且有效的dsRNA纯化方法。
首先，将含有dsRNA的样品与醋酸钠和酒石酸钠混合，形成沉淀。
然后，通过离心将沉淀收集，将其溶解在缓冲液中，并进行适当的处理以去除其他核酸和蛋白质。
最后，通过超速离心或凝胶过滤等方法去除残留的杂质，得到纯净的dsRNA。
四、凝胶过滤法凝胶过滤法是一种常用的dsRNA纯化方法，适用于小分子量的dsRNA。
首先，将含有dsRNA的样品加载到凝胶柱中，通过缓冲液的滤过，将dsRNA从其他杂质中分离出来。
然后，使用含有RNase抑制剂的缓冲液洗涤凝胶柱，以去除剩余的杂质。
最后，通过洗脱步骤将纯净的dsRNA从凝胶柱中收集。
以上介绍了几种常用的dsRNA纯化方法，包括聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化法、硅胶柱层析法、钠酒石酸盐沉淀法和凝胶过滤法。
在进行dsRNA纯化时，需要注意使用RNase抑制剂来保护dsRNA不被RNase 降解。
核苷类逆转录酶抑制剂
核苷类逆转录酶抑制剂是最先问世、开发品种较多的一类药物，临床证实对HIV复制具有很强的抑制作用，核苷类逆转录酶抑制剂（NRTIs），是合成HIV的DNA逆转录酶底物脱氧核苷酸的类似物，在体内转化成活性的三磷酸核苷衍生物，与天然的三磷酸脱氧核苷竞争性与HIV 逆转录酶（RT）结合，抑制RT的作用，阻碍前病毒的合成。
[主要品种] 本类药物主要有拉米夫定、司他夫定、地丹诺辛（DDI）和扎西他宾（DDC）。
[基本结构] 核苷类逆转录酶抑制剂（NRTIs）的结构与核苷类似，为双脱氧核苷衍生物，可与细胞内核苷竞争性地结合逆转录酶，从而终止逆转录反应。
[作用机制] 通过阻断病毒RNA基因的逆转录，即阻断病毒的双股DNA的形成，使病毒失去复制的模板。
此类药物首先进入被感染的细胞，然后磷酸化形成具有活性的双脱氧核苷三磷酸化合物，竞争性抑制艾滋病病毒逆转录酶，可导致未成熟的DNA链合成终结，从而病毒复制受到抑制。
[临床应用] 早期用于治疗AIDS及其相关综合征，对治疗HIV阳性/AIDS有一定的效果，可降低死亡率及机会性感染率，但都不能治愈AIDS。
[耐药性] 核苷类逆转录酶抑制剂联用，副作用大，易出现交叉耐药。
[药物相互作用] 核苷类逆转录酶抑制剂和蛋白酶抑制剂联用：由于蛋白酶抑制剂作用于蛋白酶，使前病毒不能正常装配。
为此这两类药物联用，大大降低了病毒在体内复制水平。
DNase I 脱氧核糖核酸酶
ü 必须在加热之前加入终止溶液（20 mM EGTA）以防止金属（Mg/Ca）离子催化水解 RNA。在 70°C 加热 10 分钟使 DNA 酶 I 和 RNA 变性。
DNase 活性。
质检结果： 泳道 1：Marker 泳道 2：阴性对照（无 DNase I） 泳道 3：DNA + 1 单位 DNA 酶 I. 泳道 4：DNA + 2 单位 DNA 酶 I. 泳道 5：DNA + 3 单位 DNA 酶 I.
Sangon 泳道1 泳道 2 泳道 3 泳道 4 泳道 5
DNase I 脱氧核糖核酸酶
产品编号 : A610099 包装规格：250 MG / 1 G / 5 G
产品说明: 脱氧核糖核酸酶 I（A610099）是来源于牛胰腺的核酸内切酶，在二价阳离子存在的情况下会降解双链 DNA，生成 3'-OH
寡核苷酸。Mg2+存在条件下，DNase I 可以剪切双链 DNA 位点形成切口，而在 Mn2+存在条件下，DNase I 可以剪切 DNA 的 双链。
抑制剂：EGTA；EDTA；盐浓度> 100 mM 会降低 DNase 活性。
io 分子量：31,000 道尔顿。 B 必备：Ca2+和 Mg2+或 Mn2+
来源：牛胰腺。
n 储存温度：-20°C 储存。避免频繁的温度变化。请参阅产品信息标签上的有效期。 o 终止溶液：20 mM EGTA（pH 8.0）。
PH0624 RNase A(核糖核酸酶A)使用手册
PH0624|RNase A（核糖核酸酶A）
Catalog No：PH0624Size：☐25mg Storage：Store@-20℃
◆简介
核糖核酸酶A是内切核糖核酸酶，可特异地攻击RNA上嘧啶残基的3'端，切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键。
反应终产物是嘧啶3'磷酸及末端带嘧啶3'磷酸的寡核苷酸。
无辅因子及二价阳离子存在时，核糖核酸酶A的作用可被胎盘RNA酶抑制剂(B1ackburn et al．1977)或氧钒—核糖核苷复合物(Puskas et al．1982)所抑制。
制备不含DNase的RNase：将RNase A溶解在0.01M的醋酸钠(pH5.2)中，使终浓度为10mg/ml，加热到100℃，15min，在室温下缓慢冷却。
用0.1体积的1M的Tris-HCl调整pH至7.4后，分装小管保存在-20℃备用，当浓缩的溶液在中性pH 条件下加热到100℃时，核糖核酸酶产生沉淀。
◆特性
>>别名：Pancreatic Ribonuclease；Ribonuclease I；Ribonucleate-3’-pyrimidinooligonucleotidohydrolase
>>英文名称：RNase A,bovine pancreas
>>CAS：9001-99-4
>>储存条件：-20℃
>>外观（性状）：类白色结晶或冻干粉
>>为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明
蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明一、蛋白酶抑制剂PMSF：特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。
溶解性：溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。
在水溶液中不稳定。
在100%异丙醇，25℃时稳定至少9个月。
分子量：174.2使用：贮存浓度200mM，工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。
溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。
4℃一周稳定，分成小份，冷冻在-20℃至少6个月。
分子量：C20H38N6O4 ×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 × H2O:493.6使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。
Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。
不抑制凝血酶或因子X。
溶解性：易溶于水（10mg/ml）或缓冲液（例如0.1M tris，pH8.0）。
pH约7~8的溶液在4℃可保存1周，分装保存在-20℃可至少保存6个月。
避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。
分子量：6,512使用：贮存浓度1mg/ml，工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。
Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇约1mg/ml；可溶于乙醇，过夜溶解可达到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。
4℃稳定一周，分装储存于-20℃时可保存1个月。
分子量：685.9使用：贮存浓度1mg/ml，使用浓度0.7 μg/ml(1 μM)。
EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制剂溶解性：溶于水至0.5M，在pH8-9的条件下，4℃稳定至少6个月分子量：372.24使用：工作浓度0.2~0.5 mg/ml(0.5~1.3 mM)，不需现用现配，在溶液pH值调至8~9时再加入。
RibonucleaseInhibitor重组核糖核酸酶抑制剂-ThermoFisher
Ribonuclease Inhibitor重组核糖核酸酶抑制剂货号：c10777000浓度：40 U/µl (参见下面的储存注意事项)规格：5,000 Units 储存于 -20℃产品描述该重组核糖核酸酶 (RNase) 抑制剂是胰型核糖核酸酶 (如 RN ase A) 的强效非竞争性抑制剂，该产品为猪肝脏核糖核酸酶抑制剂基因在重组大肠杆菌中的表达产物，经亲和层析纯化后得到。
与其他胰型核糖核酸酶抑制剂类似，该产品为酸性蛋白质，分子量约为 52 kDa ，与 RNase A 等胰型核糖核酸酶具有极高的亲和结合力。
该产品是胰型核糖核酸的非竞争性抑制剂，通过与牛胰腺 RNase A 形成 1:1 的复合物来实现其抑制作用。
该产品能够抑制 RNase A 、RNase B 和 RNase C 的活性，但对 RNase 1、RNase T1、RNase T2、S1 核酸酶和 RNase H 的活性没有抑制作用。
储存缓冲液20 mM Tris-HCl (pH 8.0)、50 mM KCl 、0.5 mM EDTA 、8 mM DTT 及 50% (v/v) 甘油。
储存注意事项避免将产品放置于温度剧烈变化的环境中，使用时建议将该产品放置于冰盒内或冰浴上，使用完毕后应立即放置于 -20℃ 冰箱内保存。
此核糖核酸酶抑制剂需要 1 mM DTT ，以维持活性。
该产品仅适用于实验室研究使用。
注意：不适用于诊断用途。
该产品在诊断或者其他临床应用上的安全性和有效性方面尚未经过验证。
质量控制单位定义：一个活性单位为抑制5 ng RNase A 50%活性所需的核糖核酸酶抑制剂的量。
此活性是通过检测该产品抑制RNase A 水解胞嘧啶 2’, 3’-环单磷酸的效率来测定的 (1)。
纯度：经12.5%SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，该核糖核酸酶抑制剂的纯度高于90%。
比活性 80,000 units/mg 。
核酸内切酶 (切口) 分析：分别将50、100 和200 单位的该核糖核酸酶抑制剂与1 µg φX174 RF DNA 混合，37℃ 孵育60 分钟，与对照组 (未加入任何核糖核酸酶抑制剂) 相比，未观察到 DNA 被切为开放环状 (II 型) 或线性 (III 型)。
齐多拉米双夫定片说明书
For the use of a Registered Medical Practitioner or a Hospital or a Laboratory only仅供注册医生、医院、实验室使用Lamivudine, Zidovudine and Nevirapine Tablets IP拉米夫定，齐多夫定和奈韦拉平片（印度药典级）Duovir-N（商品名）Warning警告Duovir-N is not intended for use in patients who are just initiating therapy with nevirapine. Duovir-N should be administered only to patients who have received Zidovudine + Lamivudine (standard doses) + Nevirapine (200 mg OD) for 2 weeks and have demonstrated adequate tolerability to Nevirapine (see Indications, Dosage and Administration).Duovir- N不适合那些刚开始使用奈韦拉平治疗的患者，Duovir- N只应施用于那些已经接受齐多夫定+ 拉米夫定（标准剂量）+ 奈韦拉平（200毫克，每天一次）达2周，并证明对奈韦拉平具有足够耐受性的患者（见适应症、剂量和服用）。
Zidovudine has been associated with haematologic toxicity including Neutropenia and severe anaemia. Particularly in patients with advanced disease (see Warnings and Precautions) .Prolonged use of Zidovudine has been associated with symptomatic myopathy.齐多夫定与血液学毒性相关，包括中性粒细胞减少和严重贫血，特别是长期使用齐多夫定，一直伴随症状肌病的晚期患者（见警告和注意事项）。
关于核糖核酸酶A
核糖核酸酶A（RNase A）来源：牛胰腺，采用最先进的层析纯化方法，冻干工艺精制而成，活性高，纯度大。
相对分子质量：13700 性状：白色类白色冻干粉，易溶于水，pI9.45，最适pH7.0～7.5。
稳定性：在冷冻干燥和存储过程中易产生凝集现象，应与-20℃保存在磷酸盐缓存液中。
抑制剂有脱氧核糖核酸（DNA）、重金属离子、肝素、尿苷钒酸盐。
1%水溶液在280nm处的吸光系数为7.3。
用途：核糖核酸酶A为内切核酸酶，它能催化核糖核酸降解，能改变宿主细胞新陈代谢。
抑制病毒合成。
规格：>80u/mg 包装：1g/5g 保存：-20℃密封干燥避光RNase，即RNA（水解酶），RNase A是一种被详细研究和具有广泛应用的核酸内切酶.RNase A 对RNA有水解作用，但对DNA则不起作用。
RNase A在C端和U端残基处专一地催化RNA的核糖部分3'-与5' -磷酸二酯键的裂开，形成具有2',3'-环磷酸衍生物寡聚核苷酸。
如pG-pG-pC-pA-pG 被切割产生pG-pG-pCp 和A-pG。
可以用来去除DNA制品中的污染RNA。
RNase I是RNase A的另一种叫法"核糖核酸酶(牛胰)/RNA酶/核糖核酸酶A(牛胰)/核糖核酸酶I /RNASE A/ RNase I/RNASE都是一种东西RNase H 概述：核糖核酸酶H (RNase H)是一种核糖核酸内切酶，它能够特异性地水解杂交到DNA链上的RNA磷酸二酯键，故能分解RNA/DNA杂交体系中的RNA链。
该酶不能消化单链或双链DNA。
核糖核酸酶A (RNase A)概述：RNase A是一种被详细研究和具有广泛应用的核酸内切酶.RNase A 对核糖核酸有水解作用，但对脱氧核糖核酸则不起作用。
核糖核酸酶A 在C端和U端残基处专一地催化RNA的核糖部分3'-与5' -磷酸二酯键的裂开，形成具有2',3'-环磷酸衍生物寡聚核苷酸。
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核糖核酸酶抑制剂使用说明
RNasin Ribonuclease Inhibitor
货号：R8060
规格：1000U/2000U/10000U
保存：-20ºC保存，避免反复冻融。
产品简介：
RNasin是从人胎盘中提取的一种广谱的核糖核酸酶抑制剂，分子量约50KDa。
它在分子生物学的实验中有着十分广泛的应用。
例如：RT-PCR，cDNA合成中mRNA的保护，体外转录和体外翻译，制备RNase-free的抗体，原位杂交和mRNA定位等，它是一个在任何应用中对付潜在RNase污染的十分有用处的试剂。
单位定义：
抑制5ng核糖核酸酶A50％的活性所需的核糖核酸酶抑制剂的量为一个单位即1U。
储存缓冲液：
20mM Hepes-KOH，pH7.6；50mM KCl；8mM DTT和50%甘油。
质量控制：
1．浓度为40U/µl。
2．未检出核酸酶活性。
3．用200U核糖核酸酶抑制剂未检出核糖核酸酶活性(未经处理及预热)。
4．用200U核糖核酸酶抑制剂未检出蛋白酶活性。
注意事项：
长期储存(非频繁使用;每月1-2次):-70ºC；每天或每周使用:-20ºC。
尽量避免多次冻融。
切勿暴露在温度波动较大之处。
这些波动对产品的稳定性有极大影响。
相关试剂：
RP1100通用RT-PCR试剂盒(M-MLV)
RP1200通用RT-PCR试剂盒(AMV)
R1100Triquick Resgent总RNA提取试剂
R1600DEPC处理水（无酶无菌水）
PC11202×Taq PCR MasterMix(含染料）。