食用菌栽培学实验指导书
食用菌生产技术实训指导教材
《食用菌生产技术》实训指导教材
实训一食用菌形态结构观察
一、目的要求
观察食用菌菌丝体的生长状态，利用显微镜认识食用菌的营养体和繁殖体的微观结构，利用徒手切片观察食用 菌子实体的微观结构，通过对食用菌子实体形态特征的观察，让学生们了解和熟悉各种食用菌子实体的类型和特征 ，并能根据子实体的外形进行分类。
三、内容和方法步骤
（一）菌丝体形态特征观察
1、菌丝体宏观形态观察。①观察平菇、草菇、金针菇、木耳、银耳及香灰菌、蘑菇、猴头、灵芝等食用菌的试 管斜面菌种或PDA平板上生长的菌落，比较其气生菌丝的生长状态，并观察菌落表面是否产生无性胞子。②观察菌 丝体的特殊分化组织：蘑菇菌柄基部的菌丝束；密环菌的菌索；茯苓的菌核；虫草等子囊菌的子座。
3、灭菌：
若采用高压蒸汽灭菌，则标准为1.5kg∕c/128C,1〜2h。如果采用常压蒸汽灭菌，则标准为I。(
TC下8〜10h。
(三)接种
将已灭菌的培养料瓶移入事先消毒过的接种箱内，母种管、用具及手要进行消毒。等培养料温降至35℃左右时 ，按无菌操作方法进行接种，用接种铲取菌种一块放入种瓶内培养料的孔隙边，并使菌丝紧贴在培养料上，塞上棉 签，贴上标签，注明菌种名称和接种日期。
2、菌丝体微观形态观察。①菌丝水浸片的制作：取一载玻片，滴一滴无菌水于载片中央,用接种针挑取少量平 菇菌丝于水滴中，用两根接种针将菌丝拔散。盖上盖玻片，避免气泡产生。②显微观察：将水浸片置于显微镜的载 物
台上，先用10倍的物镜观察菌丝的分支状态，然后转到40倍物镜下仔细观察菌丝的细胞结构等特征，并辩认有 无菌丝锁状联合的痕迹。
4、狗子滤纸保藏法将蘑菇或灵芝置入己消毒的接种箱里的插菇铁丝架上，插菇铁丝架立于装有灭菌滤纸条的培 养皿内，待担抱子弹射在滤纸条上之后，用无菌锻子将载有担抱子的滤纸条移入灭菌的空试管内，塞入棉塞剪平,用 石蜡融封,干燥、低温保藏。
《食用菌栽培技术》实验课程教学大纲
《食用菌栽培技术》实验课程教学大纲一、课程基本信息课程名称：食用菌栽培技术英文名称：The techniques of edible mushroom cultivation课程性质：专业发展课课程属性：非独立设课适用专业：生物科学学时学分：课程总学时：36；课程总学分：2开设学期：第七学期先修课程：基础化学微生物学植物学植物生理学遗传学生态学二、课程简介食用菌学是一门应用学科，在教学实验和实践中，首先要求培养学生的实践技能。
同时，要求学生不仅要学会如何栽培食用菌，而且应当理解某些技术步骤和技术程序中的具体措施或组合栽培的原理，使感性认识提高到理性认识的水平。
这样的毕业生就能在生产实践中，具备较多的自由权，具有更高的独立思考能力和技术革新的能力。
三、实验课程目的与要求学习本门课程的目的：本课程是与食用菌栽培技术理论教学同步开设的必不可少的教学环节。
通过本实验课的学习，使学生掌握食用菌的生物学基础知识，食用菌母种、原种及栽培种制种技术及常见和珍稀食用菌的栽培技术。
学习本门课程的要求：1. 要求学生在实验前认真做好预习准备，了解实验原理方法步骤，独立或分组完成实验，实验结束后需提交实验报告；2. 通过实验，要求学生掌握菌种分离、培养技能与主要食用菌栽培技术，能在生产实践中，具备较多的自由权，具有更高的独立思考能力和技术革新的能力。
四、考核方式实验报告：1. 预习报告做得规范、全面；2. 在进行实验时，认真记录实验结果，实验报告应该有实验情况分析、实验结论；3. 设计性、综合性实验必须事先做好实验方案并按方案实施；4. 报告的最后要完成要求解答的思考题。
实验课的考核方式和成绩评定办法：从实验态度、实验动手和观察能力、实验报告完成情况三个方面进行考查。
评价结构比例：实验态度占10%、实验动手和观察能力占50％、实验报告占40％。
五、实验项目、学时分配情况六、实验内容实验一食用菌母种培养基的配制目的要求：学会母种培养基的配制方法；实验内容1、培养基配方2、培养基的配制3、分装试管理4、灭菌5、摆斜面主要仪器设备药品材料：超净工作台、高压灭菌锅、电炉、铝锅、天平、切菜小刀、切板、烧杯、捆扎绳、棉花、试管（18x180mm或20x200mm）、1.5mm厚的长木条、试管架、漏斗、漏斗架、橡皮管、玻璃管、止水夹、牛角勺、棉花、纱布、酒精灯、75%酒精、高锰酸钾、富尔马林、马铃薯、葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B计划时数：4实验类型：验证性实验性质：必做每组人数：2人实验二母种的转管及分离技术目的要求：1、掌握母种转管继代培养技术；2、掌握制作母种的基本技能。
食用菌栽培学实验---食用菌母种的制作实验
食用菌母种的制作实验一、目的要求了解无菌操作规程，熟练掌握PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)的制作、母种的转管与培养技术。
二、材料与用具(1) 材料:马铃薯、葡萄糖、琼脂、酒精棉球、高锰酸钾、37%甲醛溶液、紫外线灯、标签纸等。
(2)用具:锅、玻璃棒、18mm×180mm试管、棉塞、纱布、牛皮纸、1000mL量筒、手提式高压蒸汽灭菌锅、菜刀、砧板、天平、烧杯、接种箱、超净工作台、接种针、酒精灯、恒温培养箱等。
三、内容与方法(一)PDA母种培养基的制作1.PDA培养基配方去皮马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂18-20g，水1000mL,pH自然。
此配方培养基适用于香菇、黑木耳、金针菇、滑菇、灵芝、草菇、平菇等多种菌种，但不适用于双孢菇等有特殊营养要求的食用菌。
2.配制方法(1)确定使用量:根据人数确定使用量，一般每人制作10-20支培养基供接种用。
(2)制备营养液:马铃薯去皮、挖掉芽眼，切成黄豆大小的块。
称量后用略多于用量的水煮开，并维持10-20min，至马铃薯块酥而不烂，再用2层纱布过滤，取其滤液，定容至1000ml待用；琼脂称好后，用剪刀剪成小段，再用清水浸泡，以利于熔化;将琼脂条放人滤液申边煮边搅拌，至全部熔化。
再将溶液倒入量器中，加入葡萄糖，并不断搅拌使之完全溶解。
一般情况下，此营养液的pH不需要特意调节。
(3)营养液分装:趁热用注射器分装营养液。
营养液以装人试管容量(或高度)的1/5 左右为宜，一般18mmx180mm试管注人8-10ml营养液即可。
注意防止培养液粘到近管口的壁上装好后，塞好棉塞，每7支或10-12支捆成束，管口一端用防潮纸包扎好，待灭菌。
(4)灭菌:按照高压蒸汽灭菌锅的操作规程使用。
①加水:先向外锅加水，略超过支架。
②装锅:将灭菌物品装人锅内，不宜装得过满过紧，应留下1/5空间及空隙，以利蒸汽流通，并检查导管是否与排气网结合紧密，畅通。
③盖锅盖:对好内锅上插孔，盖好锅盖，对角将螺丝旋紧。
食用菌栽培学实验指导书
食用菌栽培学实验指导书食用菌栽培学实验指导书(请仔细阅读实验内容步骤,每组必须完成实验,每次实验实习签到制,学习委员负责签到，实验分组按照调整后的快速繁殖实验分组)完，做后五个，其中第三个不做，到时候改前言1．实验总体目标《食用菌栽培》是农学、生物技术、食品科学与工程三个专业的选修课程。
根据课程性质要求，在实践教学中，注重基本技术的实训和制种能力、栽培能力的培养，主要任务是完成食用菌生产技术的操作训练，掌握制种中的基本技术和方法，具备制作母种、原种和栽培种的能力；掌握食用菌生产中的主要技术和病虫害防治技术，具备当前主栽品种的栽培能力和生产经营能力。
培养学生具备独立进行食用菌生产的能力。
⒉ 适用专业年级：农学，生物技术，食品科学与工程；第5学期⒊ 实验课时分配每实验项目实验实验组要求类型人数实验一母种培养基的制备必做验证 5 实验二无菌操作与母种转接扩繁必做综合 3 实验三组织分离与孢子分离培养技术（这个实验不做，到时候改做蘑菇必做综合 3 组织分离）实验四原种与栽培种的制种技术必做综合 5 实验五平菇栽培技术与管理方法必做探索 54. 实验环境：环境洁净，用房较多。
食用菌生产最怕污染，需要洁净的环境条件；贮料、配料、灭菌、接种、发菌、出菇等对环境要求各不相同，需要相对隔离。
5. 实验总体要求：本实验体系为学生独立进行食用菌生产能力所必需的最低要求。
学生必须掌握每个实验的主要技术要点。
6. 本课程的重点、难点及教学方法建议实验学时3 3 3 3 4（1）重点：无菌操作技术，平菇栽培技术与管理方法（2）难点：无菌操作技术，出菇管理（3）教学方法建议：对无菌操作多进行严格训练，对各个实验技术要点进行抽查考核，对平菇栽培成立兴趣小组，由兴趣小组负责出菇管理。
实验一母种培养基的制备（培养基已配完，大家直接去把木耳菌种和观赏性平菇接到PDA培养基上即可）一、实验目的：使学生掌握母种培养基的制备技术、试管棉塞的制作技术、试管捆扎技术等。
食用菌栽培学实验指导大纲(上实验课用)
实验一食用菌分类与形态观察•目的: 了解食用菌分类方法, 学会观察食用菌形态结构。
•材料: 各种伞菌的新鲜子实体（香菇、平菇、金针菇、茶树菇、白灵菇、杏孢菇、白平菇）, 子囊菌的干品, 野生食用菌的标本。
平菇、香菇的孢子印。
分类参考书, 显微镜等。
•方法：1.取新鲜子实体观察伞菌的结构, 绘图说明。
2.观察平菇孢子印颜色、大小、形状。
•完成下列表中内容。
食用菌分类与形态观察表1. 中生2. 偏生3. 侧生4. 无菌柄5。
圆柱形 6. 棒状7. 纺锤形8. 棒锤形9. 分枝状10. 基部联合11. 基部膨大呈球形12. 基部膨大呈臼状13. 菌柄扭转14. 基部延长呈假根状圆形 2. 半圆形 3. 圆锥形 4. 卵圆形 5. 钟形 6. 半球形7. 斗笠形8. 匙形9. 扇形10. 漏斗形11. 喇叭形12. 浅漏斗形13. 圆筒形14. 马鞍形1. 子囊菌门盘菌目羊肚菌科(子囊果具蜂窝形或吊钟形菌盖)块菌目块菌科和地菇科角菌目麦角、虫草2. 担子菌门木耳目、银耳目、花耳目属于胶质菌类,非褶菌目、伞菌目鬼笔目和马勃目属于腹菌类实验二母种培养基制作一、实验目的掌握斜面试管培养基的配制、消毒与灭菌等制作过程, 为菌种转管、组织分离制作母种打下基础。
二、常用培养基配方1. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)去皮马铃薯200克, 葡萄糖20克, 琼脂20克, 水1000毫升, pH自然。
2.PDA综合培养基去皮马铃薯200克, 葡萄糖20克, 琼脂20克, 磷酸二氢钾3.0克, 硫酸镁1.5克, 维生素B10.05克, 水1000毫升, pH自然。
三、实验材料和用具天平、电炉, 18×180毫米试管, 止水夹。
纱布, 棉塞, 牛皮纸, 皮筋, 手套、菜板、刀、恒温箱, 三角漏斗、支架（每组一套）。
手提式高压灭菌锅。
马铃薯、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂等。
四、实验步骤与方法1. PDA培养基的配制2. 装管、捆把3. 灭菌锅内加适量水→灭菌物品放内锅→加热→压力表0.05Pa 时放气→压力表1.15Pa (121-126℃)时计时30分钟。
食用菌栽培学实验指导书
食用菌栽培学实验指导书(请仔细阅读实验内容步骤,每组必须完成实验,每次实验实习签到制,学习委员负责签到，实验分组按照调整后的快速繁殖实验分组)1.资源方向六个实验，发酵两个，选前两个！2.资源的第一个已经做完（培养基我们已陪完，做后五个，其中第三个不做，到时候改蘑菇组织分离）3、发酵方向的实验不用做，直接抄报告就行前言1．实验总体目标《食用菌栽培》是农学、生物技术、食品科学与工程三个专业的选修课程。
根据课程性质要求，在实践教学中，注重基本技术的实训和制种能力、栽培能力的培养，主要任务是完成食用菌生产技术的操作训练，掌握制种中的基本技术和方法，具备制作母种、原种和栽培种的能力；掌握食用菌生产中的主要技术和病虫害防治技术，具备当前主栽品种的栽培能力和生产经营能力。
培养学生具备独立进行食用菌生产的能力。
⒉适用专业年级：农学，生物技术，食品科学与工程；第5学期⒊实验课时分配实验项目实验要求实验类型每组人数实验学时实验一母种培养基的制备必做验证 5 3 实验二无菌操作与母种转接扩繁必做综合 3 3 实验三组织分离与孢子分离培养技术（这个实验不做，到时候改做蘑菇组织分离）必做综合 3 3 实验四原种与栽培种的制种技术必做综合 5 3 实验五平菇栽培技术与管理方法必做探索 5 44. 实验环境：环境洁净，用房较多。
食用菌生产最怕污染，需要洁净的环境条件；贮料、配料、灭菌、接种、发菌、出菇等对环境要求各不相同，需要相对隔离。
5. 实验总体要求：本实验体系为学生独立进行食用菌生产能力所必需的最低要求。
学生必须掌握每个实验的主要技术要点。
6. 本课程的重点、难点及教学方法建议（1）重点：无菌操作技术，平菇栽培技术与管理方法（2）难点：无菌操作技术，出菇管理（3）教学方法建议：对无菌操作多进行严格训练，对各个实验技术要点进行抽查考核，对平菇栽培成立兴趣小组，由兴趣小组负责出菇管理。
实验一母种培养基的制备（培养基已配完，大家直接去把木耳菌种和观赏性平菇接到PDA培养基上即可）一、实验目的：使学生掌握母种培养基的制备技术、试管棉塞的制作技术、试管捆扎技术等。
食用菌制种与栽培教案
食用菌制种与栽培教案第一篇：食用菌制种与栽培教案食用菌制种与栽培教案实验一食用菌形态结构的观察一、实验目的认识和掌握常见的栽培的食用菌形态特征二、实验原理常见的栽培的食用菌主要是担子亚门层菌纲和腹纲的一些种类，它们由双核菌丝分化形成子实体，子实体是有性孢子着生的器官，其孢子外生在担子上，并聚集成一层子实层，但它们的子实体形状因种类不同而有很大差别，是认识食用菌类别的主要标志。
三、实验器材1、新鲜的食用菌，浸、干制标本。
2、解剖刀。
四、实验方法识别香菇、双孢蘑菇、平菇、猴头、口蘑、木耳、竹荪、草菇、银耳、金针菇等形态特征。
取平菇、香菇，首先观察其子实体的组成部分及其形态特征。
再用解剖刀纵切子实体观察其菇盖组成。
菌肉的颜色、质地、菌褶形状和着生情况(离生、延生、直生、弯生)。
再观察其菌柄的组成，菌柄的质地，中空或中实。
五、作业绘制香菇子实体形态及纵剖面简图，并注明各部位名称。
实验二食用菌母种培养基的制备与灭菌一、实验目的1、掌握食用菌母种培养基的配制方法。
2、熟练掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法。
二、基本原理培养基是按照食用菌生长发育所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的营养基质。
其中含有碳源、氮源、矿质元素、生长因子和水分等物质。
由于食用菌在生长发育过程中，还必须在适宜的酸碱条件下，才能表现最大的生活力。
因此，对不同种类食用菌还须将培养基调节到一定的PH值范围。
食用菌的培养基可分为母种培养基、原种培养基和栽培种培养基。
对于母种培养基一般多采用固体培养基，因此需在培养基中加入一定量的凝固剂。
三、实验器材马铃薯(去皮)200g，琼脂16-18g，葡萄糖20g，大试管、棉塞、灭菌锅、漏斗、铁架台、胶管。
四、实验步骤1、选好马铃薯洗净去皮(挖去芽眼)，切成薄片，取200g放在铝锅中，加水1000mL，煮沸20分钟，双层纱布过滤，取滤液并补足水至1000mL，加琼脂，小火加热，玻璃棒搅拌至琼脂全部溶解，再加入葡萄糖使其溶化。
食用菌栽培技术实验报告
食用菌栽培技术实验报告食用菌栽培技术实验报告⒈摘要在本次实验中，我们对食用菌栽培技术进行了研究和实践。
通过合理的选择菌种、培养基配方以及环境控制等措施，成功地培育出优质食用菌。
⒉引言食用菌作为一种受人们喜爱的食品，具有较高的经济和营养价值。
为了提高食用菌的产量和质量，有必要对其栽培技术进行深入研究和优化。
⑴目的本次实验的目的是探究食用菌栽培技术的关键因素，以提高产量和质量。
⑵背景食用菌的栽培技术涉及多个方面，包括选种、培养基配方、菌丝生长、环境控制等。
通过合理的操作和控制，可以使菌种生长良好并提高其产量和质量。
⒊材料与方法●食用菌菌种●培养基原料●生长箱●pH计●湿度计●温度计⑵实验步骤⒈菌种培养：选取优质的食用菌菌种，并进行前期培养准备。
⒉培养基配制：根据菌种的需要，配制适宜的培养基。
⒊感染孢子：将菌种接种到培养基上，并进行孢子感染。
⒋菌丝生长：控制培养箱的温度、湿度和光照等条件，促进菌丝的生长。
⒌产菌环境：调节培养环境，提供适宜的温度、湿度和氧气等条件，促进菌丝的发育和产菌。
⒍收获和储存：根据不同的食用菌，掌握合适的收获时机，采摘食用菌，并进行适当的存储。
⑴菌丝生长情况在适宜的环境条件下，菌丝呈现出良好的生长态势，无明显异常现象。
⑵产菌情况经过一段时间的培养，食用菌成功产菌，产量达到预期。
⒌讨论通过本次实验，我们发现在食用菌栽培过程中，合理控制环境因素对菌丝的生长和产菌起到重要的作用。
⒍结论通过本次实验的研究和实践，我们成功地培育出优质的食用菌，为食用菌栽培技术提供了一定的参考和指导。
⒎附件⒈实验数据表格⒉图表和图片⒊其他实验相关资料⒏法律名词及注释●本文档中涉及的法律名词及注释如下：⒈法律名词1：注释1.⒉法律名词2：注释2.⒊法律名词3：注释3.。
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食用菌栽培学实验指导书(请仔细阅读实验内容步骤,每组必须完成实验,每次实验实习签到制,学习委员负责签到，实验分组按照调整后的快速繁殖实验分组)1.资源方向六个实验，发酵两个，选前两个！2.资源的第一个已经做完（培养基我们已陪完，做后五个，其中第三个不做，到时候改蘑菇组织分离）3、发酵方向的实验不用做，直接抄报告就行前言1．实验总体目标《食用菌栽培》是农学、生物技术、食品科学与工程三个专业的选修课程。
根据课程性质要求，在实践教学中，注重基本技术的实训和制种能力、栽培能力的培养，主要任务是完成食用菌生产技术的操作训练，掌握制种中的基本技术和方法，具备制作母种、原种和栽培种的能力；掌握食用菌生产中的主要技术和病虫害防治技术，具备当前主栽品种的栽培能力和生产经营能力。
培养学生具备独立进行食用菌生产的能力。
⒉适用专业年级：农学，生物技术，食品科学与工程；第5学期⒊实验课时分配实验项目实验要求实验类型每组人数实验学时实验一母种培养基的制备必做验证 5 3 实验二无菌操作与母种转接扩繁必做综合 3 3 实验三组织分离与孢子分离培养技术（这个实验不做，到时候改做蘑菇组织分离）必做综合 3 3 实验四原种与栽培种的制种技术必做综合 5 3 实验五平菇栽培技术与管理方法必做探索 5 44. 实验环境：环境洁净，用房较多。
食用菌生产最怕污染，需要洁净的环境条件；贮料、配料、灭菌、接种、发菌、出菇等对环境要求各不相同，需要相对隔离。
5. 实验总体要求：本实验体系为学生独立进行食用菌生产能力所必需的最低要求。
学生必须掌握每个实验的主要技术要点。
6. 本课程的重点、难点及教学方法建议（1）重点：无菌操作技术，平菇栽培技术与管理方法（2）难点：无菌操作技术，出菇管理（3）教学方法建议：对无菌操作多进行严格训练，对各个实验技术要点进行抽查考核，对平菇栽培成立兴趣小组，由兴趣小组负责出菇管理。
实验一母种培养基的制备（培养基已配完，大家直接去把木耳菌种和观赏性平菇接到PDA培养基上即可）一、实验目的：使学生掌握母种培养基的制备技术、试管棉塞的制作技术、试管捆扎技术等。
二、实验主要设备及使用要求（1）仪器：电磁炉，煮液锅，天平，高压灭菌锅，小刀，试管架，漏斗，烧杯，剪刀（2）耗材：马铃薯、葡萄糖、琼脂、微生素B1、磷酸二氢钾、硫酸镁、棉花、棉线、扎绳、报纸、玻棒（3）使用要求：注意安全；人离开前要关电关窗，整理台面，打扫卫生。
三、实验原理、方法和手段用琼脂使供给食用菌菌丝生长的经高温杀菌的液体培养基固化试管中，使食用菌菌种在无菌条件下的试管中培养生长。
四、实验内容与步骤１、称量：按不同母种对营养要求的不同，选择所需配比称量出各种营养物质。
２、调配：将去皮、挖掉芽眼的马铃薯（200g）或洋葱、稻草、胡萝卜、子实体等切成小块，放入小钢筋锅或大烧杯中，加入一定量的水。
用文火煮沸３０分钟左右，双层纱布过滤，取汁；玉米粉或高粱粉加水后，一般加热至７０度左右。
并保持６０分钟，过滤取汁。
麦芽则加热至６０－６２度，保持６０分钟，过滤取汁。
其中玉米粉或高粱粉等淀粉类物质应先加少量水调成糊状，以避免成团；难溶物质应先加水、加热溶化。
加热过程中不断用玻棒搅拌以免糊锅。
３、加入琼脂溶解：先将滤液补足失水，再将琼脂（20g）预湿后加入滤液中，文火加热搅拌至全部溶化。
４、加入配方中其他营养物质：如糖（20g）、微生素B1（10mg）、磷酸二氢钾（3g）、硫酸镁（1.5g）等。
５、酸碱度测定与调整：充分搅拌均匀，用酸碱试纸测定酸碱度，并按食用菌所需的最适酸碱度进行调整。
６、过滤分装：用纱布过滤，取汁趁热分装。
试管规格一般以口径ｘ试管长度＝１８ｍｍｘ１８０ｍｍ为宜，培养基的分装量应为试管长度的１／５或１／４.操作时应尽量防止培养基黏在试管口或壁上，若已黏上应立即用纱布或脱脂棉擦净。
７、加棉塞、包扎：装好培养基的试管应及时塞上棉塞。
棉塞要用未脱脂的皮棉。
棉塞要大小均匀、松紧适宜，长度一般为４.５cm。
一般要求２／３留在试管内，１／３露在试管外。
然后把塞好棉塞的试管，每７支捆扎成一把，用牛皮纸或双层报纸包扎，再用皮套扎紧或棉线捆好，放入高压锅内灭菌。
８、灭菌：用高压蒸气锅进行灭菌。
步骤为：给高压锅补水，加热升温压力至０．０５ＭＰａ时，放汽阀打开，排冷气至压力为０，关闭排气阀继续升温，压力至０．１５ＭＰａ，维持２０－３０分钟，关闭热源，至压力降至０．９、摆斜面：灭菌完毕，让其压力和温度自然降至０后，立即取出培养基，在清洁的台面或桌面上倾斜摆放，摆成斜面，一般斜面长度以达试管全长的１／２－２／３为宜。
10、放置几天后，观察有无杂菌，判断灭菌是否彻底。
五、思考题1、为什么要用未脱脂的皮棉？2、为什么要用多层纱布过滤？3、为什么要调节pH值？4、为什么要每7支捆扎成一把？六、注意事项及其它说明1、马铃薯要去皮、挖掉芽眼2、加热过程中不断用玻棒搅拌以免糊锅。
3、高压锅使用前要补水4、自动高压锅要注意设置温度与时间5、非自动高压锅要在加温至102度左右时放气。
将锅内冷气放掉。
实验二无菌操作与母种转接扩繁一、实验目的使学生掌握无菌操作技术和母种转接扩繁培养技术等。
二、实验主要设备及使用要求（1）仪器：超净工作台，接种房，调温生物培养箱，接种铲，酒精灯，打火机（2）耗材：灯用酒精、医用酒精、甲醛、高锰酸钾、百菌清烟雾剂、速克灵烟雾剂、斜面试管培养基（3）使用要求：①注意安全；人离开前要关电关窗，整理台面，打扫卫生。
②超净工作台在使用前要检查空气通道是否有遮盖。
③超净工作台在使用时要保持一定风力向外吹。
三、实验原理、方法和手段使学生掌握无菌操作技术和母种转接扩繁培养技术等。
四、实验内容与步骤1、接种环境的消毒在分离菌种前，首先对接种环境（接种箱或接种室）进行严格的消毒。
①接种箱消毒：一般以甲醛高锰酸钾熏蒸，每立方米空间用甲醛6～10毫升，高锰酸钾4～5克。
先将高锰酸钾放入玻璃杯或搪瓷钵，后加进甲醛溶液(容器的容积大小，以两种药物反应后沸腾液不外溢为准)，使之产生甲醛气体，密闭0.5～1小时。
接种前同时打开紫外线灯消毒半小时后开始接种。
②接种室消毒：根据容积的大小，每立方米用甲醛(含量40%)20毫升，生石灰20克，浓硫酸2毫升，混合于陶瓷容器内，很快即气化。
消毒时，培养室温度保持24℃左右，密闭12小时以上。
或燃放百菌清烟雾剂。
③超净工作台消毒：打开超净工作台上的紫外线灯和风扇，半个时间后关闭紫外线灯，再开始接种操作。
2、母种扩繁接种前，手和试管口要用75%的酒精棉球揩擦。
接种时，点燃酒精灯，使火焰周围空间成为无菌区，然后左手平行并排拿起母种试管和供接种用的斜面试管，两支试管斜面要向上，管口要齐平。
另一手持接种针。
垂直或倾斜在火焰上烧红，用右手的小指、无名指和手掌，在火焰旁边分别夹下两管的棉塞，并使酒精灯火焰灼烧试管口，以杀灭管口上的杂菌，随后将管口移至距火焰1～2厘米处，用冷却了的接种针将母种纵横切割成许多小方块，然后挑取一小块，迅速移至被接种的试管斜面的中前部，轻轻抽出接种针后，随手塞上过火焰的棉塞。
如此连续操作，1支母种一般可扩接试管30～40支。
每次接种完毕，都要把接种工具灼烧彻底灭菌，才能放回原处，以免污染环境。
试管从接种箱（室）取出之前，应逐支加紧棉塞，并在试管正面的上方贴上标签，注明菌种名称、接种日期及转管次数。
最后将试管置培养箱中，根据各类菌种菌丝生长的温度要求，调节至最适温度进行培养。
3、培养5至7天时，将无污染的优良母种转入冰箱保存。
五、思考题1、为什么超净工作台在使用时要保持风扇运转？2、为什么接种针（铲）要冷却后才能接触母种？3、为什么培养5至7天后要转入冰箱保存？六、注意事项及其它说斜面试管在使用前要检查是否有污染和是否干了。
实验三组织分离与孢子分离培养技术（这个实验不做，到时候改做蘑菇组织分离）一、实验目的食用菌菌种质量的优劣，直接影响到栽培的成败和产量的高低，只有优良的菌种，才能获得优质高产的食用菌。
因此食用菌的制种，是生产中一项极其重要的工艺。
优质的最原始的母种来自于组织分离和孢子分离培养后得到。
二、实验主要设备及使用要求（1）仪器：超净工作台，接种房，调温生物培养箱，接种铲，酒精灯，打火机，解剖刀，玻璃罩，三角瓶，注射器（2）耗材：灯用酒精、医用酒精、甲醛、高锰酸钾、斜面试管培养基、优良种菇、细铁丝、棉花等三、实验原理、方法和手段将成熟的优良食用菌子实体在无菌条件下，取少许菌肉至斜面试管培养成原始母种；获取少许孢子放入斜面试管中培养成变异菌株，以便选优。
四、实验内容与步骤1、子实体的选择：无论是用作孢子分离或组织分离的子实体，都要从产量高，长势好，适应性强，无杂菌虫害的群体中，选择朵大，生长健壮的单生子实体作为分离的材料。
选作分离的子实体，成熟度要适当，如蘑菇、草菇具有菌膜，最好选菌膜将破而未破的成熟度，这种子实体发育已成熟，子实层又未受污染，因此能很快散出大量的无菌孢子。
对没有菌膜或菌膜自幼已破的食用菌，如香菇、平菇等，则以选取八分熟，正在释放孢子的个体为最好；因为刚从担子弹射出来的孢子基本上也是无菌的。
2、组织分离法：是用食用菌幼嫩的组织块直接分离培养成纯菌种的方法。
选用的子实体先经0.1％开汞水或70％酒精表面消毒后。
用无菌水冲洗并用无菌纱布擦去表面水分。
用无菌解剖刀自菌柄处切开少许，再用手将子实体掰开为二，在菌盖与菌褶交界处，切取0.3～0.4立方厘米的一小块菌肉，移放在斜面培养基中央。
组织分离后将试管放在恒温箱中22℃左右培养。
待组织块周围萌发出菌丝，并向培养基蔓延生长后，再挑取生长健壮的菌丝进行转管培养。
3、孢子分离法：采集孢子的装置可用玻璃钟罩或玻璃漏斗做成。
平菇常用这种方法采集孢子。
具体做法是：把玻璃钟罩或玻璃漏斗，放在一个垫有几层纱布的瓷盘上，内放培养皿和不锈钢支架（漏斗内也可倒挂铁丝代支架），上端通气孔用棉花塞住，然后用二层大纱布将整个装置包起来，高压灭菌后；移入无菌室备用。
分离时把选好的种菇（八成熟），切去菌柄基部送入无菌室，用0.1％～0.2％的升汞溶液或75％的酒精表面消毒1～2分钟后，放在无菌水中漂洗，除去表面药液，再用灭菌纱布揩手，插到不锈钢支架上或铁丝构上，静置1～2天，菌褶上的孢子大量散落到培养皿内，形成一层粉末状孢子印时，取下种菇，用灭菌的注射器，吸取3～5毫升无菌水，注入盛有孢子的培养皿中，轻轻搅动，使孢子均匀地悬浮于水上，再将注射器插上针头，吸取沉于底部的饱满孢子，注l～2滴悬液于试管斜面培养基，并使其均匀分布于培养基表面。
或用接种针挑取少量的孢子直接在斜面培养基上划线。
待孢子萌发，生成菌落时，选孢子萌发快，生长良好的菌落，移接到新的斜面培养基上培养。