消毒液过滤效果确认方案
消毒剂、注射用水除菌过滤效果验证方案目录1.1 概述 (1)1.2 目的 (1)1.3 职责 (3)1.4 验证前培训 (3)1.5 文件记录要求 (3)1.6 验证对象描述 (4)1.7 可接受标准 (4)1.8 验证步骤及结果 (4)1.9 偏差 (9)1.10 变更 (9)1.11 参考文件 (9)1.12 修订历史 (10)1.13 附录列表 (10)1.1概述1.1.12010版GMP附录无菌第九章第四十四条：A/B级洁净区应当使用无菌的或经无菌处理的消毒剂和清洁剂。
本公司在A/B级洁净区使用的消毒剂有75%乙醇溶液、1%PAA溶液，清洁剂为注射用水。
1.1.2冻干粉针剂车间根据生产实际情况，B级区使用消毒剂在C级区消毒液配制间配制，C级区消毒液配制间取用。
过滤器、接收用不锈钢桶经湿热灭菌后在B级区层流罩下安装，过滤管道经灭菌后从B级灌装间经传递窗旁孔通到消毒液配制间。
按2010版GMP第七章第一百四十条规定对该除菌方式进行验证。
1.2目的为验证上述除菌及传递方式的可靠性和稳定性，特制订本验证方案，进行验证。
1.3职责1.3.1设备使用部门负责确认文件的起草，确认工作的组织与实施。
1.3.2QC负责样品的检测。
1.3.3QA负责现场取样及确认工作实施的监督。
1.3.4QA经理负责相关确认文件的审核。
1.3.5质量管理负责人负责相关确认文件的批准。
1.3.6QA文档管理员负责给出确认文件的文件编号，以及相关文件的发放、回收及归档。
1.4验证前培训验证小组应在本确认方案批准后进行本确认方案的专项培训，并确保所有参加本确认工作的人都已熟知本方案要求，并记录在《培训记录表》（QA-MAN-005-H）。
1.5文件记录要求1.5.1严格按照《良好的文件记录规范》（QA-MAN-003）中对质量记录填写的要求进行确认报告的填写及记录。
1.5.2确认操作及记录应至少两人进行，确保所有的确认测试均完成，并有足够的确认数据被提供。
1.6验证对象描述1.6.175％乙醇溶液的主要消毒成分为乙醇，属中效消毒剂，其作用机理是（1）使蛋白质变性：乙醇作用于细菌细胞首先起到脱水作用，乙醇分子进入到蛋白质分子的肽链环节，使蛋白质发生变性沉淀；（2）破坏细菌细胞壁：乙醇具有很强的渗透作用，60％～85％的乙醇比较容易渗透到菌体内，使得细菌细胞破坏溶解。
（3）对微生物酶系统破坏：乙醇通过抑制细菌酶系统，特别是脱氢酶和氧化酶等，阻碍了正常代谢，抑制细菌生长繁殖。
1.6.21%PAA是一种系广谱、速效、高效灭菌剂，本品是强氧化剂，可以杀灭一切微生物，对病毒、细菌、真菌及芽孢均能迅速杀灭，可广泛应用于各种器具及环境消毒。
0.2%溶液接触10分钟基本可达到灭菌目的。
用于空气、环境消毒、预防消毒。
1.7验证所需设备、仪器及物品1.8验证步骤及结果1.8.1人员确认在本确认方案批准后，按照SOP《培训管理》（QA-MAN-005）的要求，组织对相关人员进行本验证方案及本验证相关SOP、技术资料的专项培训，并确保所有参加本次确认工作的人都已悉知本方案及相关SOP、技术资料的要求，并填写《培训记录》（QA-MAN-005-H）。
1.8.2文件确认执行此确认方案前，应确认以下文件已制定并被批准。
确认人/日期: 复核人/日期：1.8.3过滤前准备1.8.3.1不锈钢桶清洗后在C级消毒剂配制间准备好注射用水，待过滤；1.8.3.2不锈钢桶清洗后在C级消毒剂配制间按要求（清洁剂和消毒剂的配制、使用规定）配制消毒剂，待过滤（消毒剂为75%乙醇、1%PAA，清洁剂为注射用水）；1.8.3.3消毒剂配制：75%乙醇（12670ml）：取95%乙醇10000ml加注射用水至12670ml；1%PAA（4000ml）：取PAA溶液40ml加注射用水至4000ml。
清洁剂：注射用水40000ml。
1.8.3.4过滤用的硅胶管道、除菌过滤器、器具及接收用不锈钢桶已清洗，经脉动真空灭菌柜（工器具灭菌柜）121℃×20分钟灭菌；1.8.3.5灭菌后物品从B+A级灌装区侧灭菌柜门取出，放于B级区的层流（FFU）下待用。
1.8.4过滤装置安装1.8.4.1打开不锈钢套管两头的密封盖；1.8.4.2硅胶管道一头连接除菌过滤器→接收容器，放于B级区的层流（FFU）下，另一头经过墙体不锈钢套管连接蠕动泵→配料桶；1.8.4.3连接过滤器时，必须按过滤器底下的箭头方向连接，如没有箭头方向，则按“短进长出”连接；过滤器与接收桶相连时用硅橡胶管接至接收桶进液口，接收桶下嘴口阀门关闭。
1.8.4.4过滤示意图注：①配料桶②蠕动泵放于C级消毒液配制间③除菌过滤器、④接收容器放于B级1.8.5过滤及存放1.8.5.1确认管道连接无误，打开蠕动泵电源，除菌过滤器先放去少量空气拧紧放气阀，调整蠕动泵运转速度至正常过滤。
1.8.5.2过滤顺序：75%乙醇、注射用水、1%PAA。
1.8.5.3灌装人员将除菌过滤后的注射用水、消毒剂接收桶加盖密闭，放于指定位置，按需取用。
1.8.5.4过滤结束配料桶、过滤用的硅胶管道、除菌过滤器、器具及接收容器经传递窗（B级传出）传至C级工器具清洗间清洗，用洁净压缩空气吹干后存放。
1.8.6滤芯完整性测试确认1.8.6.1目的：确认滤芯水侵入可以测试合格。
1.8.6.2方法：将滤芯安装在滤壳内，连接好仪器后按照水侵入法测试0.2μm滤芯完整性。
滤芯为密理博5英寸0.2μm折叠式滤芯，用密理博XIT4N0001 型完整性测试仪检测。
1.8.6.3可接受标准：0.22μm滤芯水侵入检测合格。
确认人/日期: 复核人/日期：1.8.7取样1.8.7.1使用灭菌取样瓶接取B级区不锈钢桶内消毒剂或注射用水（消毒剂取50ml，注射用水取500ml。
每种样品各取3个样，过滤前中后）。
1.8.7.2使用灭菌取样瓶接取C级区配液桶内消毒剂或注射用水（消毒剂取50ml，注射用水取500ml。
每种样品各取1个样）。
1.8.8消毒剂过滤效果确认1.8.8.1消毒剂中和剂选择1%PAA 20g/L硫代硫酸钠溶液75%乙醇pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液1.8.8.2薄膜过滤法（滤过前样品测试微生物限度）1.8.8.2.1吸取中和产物溶液（以1份消毒剂50ml加9份中和剂450ml配制而成）混匀，采用薄膜过滤法处理，冲洗后，取出滤膜，菌面朝上置于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基平皿上。
将营养琼脂平板放于30～35℃培养箱培养3天，玫瑰红钠琼脂平板放置于23～28℃培养5天，计数。
结果见附录A：《微生物检查记录》（VPL-IW-OTH-15-009-A-01）。
1.8.8.2.2注射用水：取注射用水100ml，采用薄膜过滤法处理，冲洗后，取出滤膜，菌面朝上置于营养琼脂或玫瑰红钠培养基平皿上。
将营养琼脂平板放于30～35℃培养箱培养3天，玫瑰红钠琼脂平板放置于23～28℃培养5天，计数。
结果见附录A：《微生物检查记录》（VPL-QC-MV-15-005-A-01）。
1.8.8.3无菌检查（过滤后样品测试）1.8.8.3.175%酒精A. 阳性对照组取供试品50ml，用450mlpH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，冲洗后，加入100ml硫乙醇流体培养基或改良马丁培养基。
分别接种1ml的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌于相应的硫乙醇酸盐流体培养基滤筒内；接种1ml的白色念珠菌于改良马丁培养基滤筒内。
将上述硫乙醇酸盐流体培养基按30～35℃、改良马丁培养基按23～28℃，培养5天，逐天观察。
B. 中和剂阴性对照组用450ml pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，冲洗后，加入100ml硫乙醇流体培养基或改良马丁培养基。
将上述硫乙醇酸盐流体培养基按30～35℃、改良马丁培养基按23～28℃，培养14天，逐天观察。
C. 供试品对照组取供试品50ml，用450ml pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗，冲洗后，加入100ml硫乙醇流体培养基或改良马丁培养基。
将上述硫乙醇酸盐流体培养基按30～35℃、改良马丁培养基按23～28℃，培养14天，逐天观察。
结果见附录B：《无菌检查记录》（VPL-IW-OTH-15-009-B-01）。
1.8.8.3.21%PAAA. 阳性对照组取供试品50ml，用450ml灭菌后的20g/L硫代硫酸钠溶液冲洗，冲洗后，加入100ml硫乙醇流体培养基。
接种1ml枯草芽孢杆菌于硫乙醇酸盐流体培养基滤筒内。
将上述硫乙醇酸盐流体培养基按30～35℃，培养5天，逐天观察。
B. 中和剂阴性对照组用450ml20g/L硫代硫酸钠溶液冲洗，冲洗后，加入100ml硫乙醇流体培养基或改良马丁培养基。
将上述硫乙醇酸盐流体培养基按30～35℃、改良马丁培养基按23～28℃，培养14天，逐天观察。
C. 供试品对照组取供试品50ml，用450ml灭菌后的20g/L硫代硫酸钠溶液冲洗，冲洗后，加入100ml硫乙醇流体培养基或改良马丁培养基。
将上述硫乙醇酸盐流体培养基按30～35℃、改良马丁培养基按23～28℃，培养14天，逐天观察。
结果见附录B：《无菌检查记录》（VPL-IW-OTH-15-009-B-01）。
1.8.8.3.3注射用水取供试品100ml冲洗滤膜，冲洗后，加入100ml硫乙醇流体培养基或改良马丁培养基。
将上述硫乙醇酸盐流体培养基按30～35℃、改良马丁培养基按23～28℃，培养14天，逐天观察。
结果见附录B：《无菌检查记录》（VPL-IW-OTH-15-009-B-01）。
1.8.8.4可接受标准：1.8.8.4.1过滤前微生物限度检查1.8.8.4.2过滤后无菌检查1.9偏差1.9.1若在整个方案执行过程中所发生的偏差，按照SOP：QA-MAN-011《偏差处理》进行处理，并填写《偏差调查处理报告单》。
1.9.2对于过程中出现的偏差进行总体评估，确认偏差原因及其影响，并提出改进方案及预防、纠正偏差的方法。
1.10变更1.10.1当执行方案的过程中，发现方案内容或要求与实际执行情况不一致，需对其进行变更，应按照SOP：QA-MAN-008《变更控制》进行处理，并填写《首次确认/验证变更单》。
1.11参考文件1.11.1QA-V AL-001：《验证管理》1.11.2QC-OPE-414：《无菌检查法标准操作规程》1.11.3QC-V AL-003：《微生物、无菌分析方法验证/管理标准操作规程》1.12修订历史1.12.1版本：01新建文件1.13附录列表。
消毒剂消毒效果确认方案
浓度&级别
编号
有效期至
PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液
0.1%卵磷脂+0.1%吐温80+0.1%蛋白胨缓冲液
5.3菌种
微生物检验方法验证方案适用。
菌种
传代次数
编号
有效期至
金黄色葡萄球菌
铜绿假单胞菌
大肠埃希菌
枯草芽孢杆菌
白色念珠菌
黑曲霉
5.4培养基
培养基
批号
灭菌批号
有效期至
胰酪大豆胨液体培养基
胰酪大豆胨琼脂培养基
第四组：取消毒剂和中和剂1:1的混合液4.5ml+工作菌液0.5ml，混匀作用10min，取混合液A0.5ml+稀释液4.5ml，混匀作用10min后，用稀释剂进行10倍系列稀释成10-2、10-3。取相应稀释级0.5ml注皿，各平行制备2皿。
第五组：取稀释液4.5ml+工作菌液0.5ml，混匀作用10min，取混合液A0.5ml+稀释液4.5ml，混匀作用10min后，用稀释剂进行10倍系列稀释成10-2、10-3。取相应稀释级0.5ml注皿，各平行制备2皿。
6.1.4菌液准备
6.1.4.1菌液的制备：见XXXX《菌种传代、保藏、使用和灭活标准操作规程》。
6.1.4.2菌液计数确认：将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌的新鲜培养物用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液按10倍梯度稀释成10-6、10-7、10-8三个浓度。枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液按10倍梯度稀释成10-5、10-6、10-7三个浓度。
消毒剂消毒效果确认方案
姓名
职位
签名
日期
制定人
格式审核人
消毒剂消毒效果验证方案-精选.
1、验证方案的起草2、验证方案的审批3、验证方案的批准目录1 前言2 职责3 验证的方法及步骤4 异常情况及偏差处理5. 验证结果评价及建议6、再验证周期1.前言消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染的一种化学剂。
由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种以上的消毒剂。
交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应性。
本实验方案针对①75%乙醇、②1%新洁尔灭、③3%甲酚皂杀菌剂、④3%的过氧化氢溶液共4种消毒剂进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。
1.1验证的目的本验证的目的在于制定方法及可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。
1.3验证的范围75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O21.4验证内容：本验证先在实验室对所使用的消毒剂，用六种控制菌做生物指示剂挑战性实验；然后做现场消毒考察实验，即现场消毒后用棉签取样法对消毒后的表面取样，做表面残留微生物限度检查。
通过对指示菌的杀灭对数值和现场消毒后洁净区表面微生物的残留限度来确认消毒剂的消毒效果。
2. 职责2.1验证小组成员：2.2职责2.3验证进度3. 验证方法及步骤3.1实验材料3.3.1 菌株（1）细菌：金黄色葡萄球菌 (ATCC6538)铜绿假单胞菌(ATCC15442)大肠杆菌(ATCC25922)伤寒杆菌(ATCC6539)（2）细菌芽孢：枯草杆菌芽孢(ATCC9372)（3）真菌：白色念珠菌(ATCC10231)3.3.2 培养基无菌大豆胰蛋白胨琼脂培养基(TSA)、营养肉汤培养基。
3.3.3 稀释液：1%蛋白胨-0.03mol/L PBS 溶液3.3.4 中和剂：0.1%卵磷脂+1%吐温 80 溶液； 0. 5%硫代硫酸钠（3%过氧化氢）3.3.5 无菌试管3.3.6 无菌平皿(90mm)3.3.7消毒剂：75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O23.3.8移液器及配套无菌吸头:0-100ul，100-1000ul3.2中和剂效力确认①中和剂效力及毒性试验目的在化学消毒试验中，达到规定消毒时间终点时，要求立即终止残留消毒剂的继续作用，以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物及其数量。
5消毒剂消毒效果验证方案
8. 消毒剂消毒效果验证内容8.1 消毒剂消毒效果的验证8.1.1 菌悬液配制接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌新鲜培养物至营养琼脂培养基中，于30～35 ℃培养18～24 h；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中，于23～28 ℃培养24～48 h，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1 ml 含菌数100cfu（菌落形成单位）的菌悬液。
接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基上，23～28 ℃培养5～7 d，加入3～5 ml 0.9％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，然后用管口带有无菌棉花的无菌毛细吸管吸出孢子悬液至无菌试管内，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1 ml 含菌数（孢子数）100 cfu 的菌（孢子）悬液。
试验菌悬液应在24 h 内使用。
8.1.2 消毒剂消毒效果验证8.1.2.1 设置三组平行试验，如下图所示分组用量（ml）菌悬液培养基 3.0%过氧化氢水溶液0.9%氯化钠溶液A 1 100 10 0B 0 1 10 100C 1 100 0 18.1.2.2 根据验证菌的特性，分别选择贴于营养琼脂培养基平皿及玫瑰红钠琼脂培养基平皿上，分别于30~35 ℃培养72 h、23~28 ℃培养120 h，记录各平皿上菌落数。
8.1.2.3 每步操作应充分震荡混合，并将每组混合液分为两组，将上述样品混合后，采用薄膜过滤法，按《微生物检查SOP》进行操作，检查微生物数量。
8.1.2.4 回收率的计算要求C组的回收率大于70%时，消毒剂消毒效果验证可认为有效。
8.1.2.5 不符合评估标准，为不合格。
依据数据分析原因，以便总结经验，对验证方案进行修改、完善。
8.1.2.6 依据验证检测记录进行项目结果评估。
见附录4《消毒剂消毒效果验证结果与评估》。
8.2 消毒剂微生物挑战试验8.2.1用已校验的1 mL 移液管吸取＜100 cfu/mL 菌悬液，分别接种至含消毒液10ml的试管中，盖紧试管塞，振荡，室温放置10 min后，将试管内消毒液转至含培养基100ml的瓶中，振荡混匀，采用薄膜过滤法，按《微生物检查SOP》进行操作，检查微生物数量。
消毒液消毒效果验证
消毒液消毒效果验证方案目录一、目的：二、范围：三、试验用品四、验证方法1. 洁净室消毒液消毒效果验证1.1 可接受标准1.2 洁净室清洁消毒1.3 洁净室采样1.4 验证周期1.5 测定结果2. 洁净室人员手部消毒效果验证2.1 可接受标准2.2 手指采样2.3 验证周期2.4 测定结果3. 消毒液浓度验证3.1 验证方法3.2 75%乙醇溶液含量测定3.3 检查标准3.4 检测结果五、验证效果评价及结论六、验证报告批准七、附录：消毒验证培养基准备计划表消毒验证表面附着菌测定记录消毒验证沉降菌测定记录消毒验证浮游菌测定记录消毒验证手部消毒测定记录手消毒液浓度测定记录相关文件：沉降菌监测方法浮游细菌采样器操作规程浮游菌监测方法洁净室空气消毒操作规程洁净工作室清洁和消毒操作规程各类清洁、消毒液配制操作规程人员卫生管理规程食用酒精质量检验操作规程（B）洁净室消毒液消毒效果验证方案洁净室的清洁和灭菌是清除微生物的主要手段，但必须保障灭菌的有效性、彻底性，因此必须对洁净室的消毒、灭菌效果进行验证。
洁净室消毒效果的验证是以物理、化学、及微生物方法考察洁净室人员的手部、操作间、器具应用相应消毒剂消毒后消毒效果，确保消毒剂使用的有效性，为生产合格产品提供无菌环境保障。
本公司生产用洁净室分别采用空气杀菌和消毒液消毒。
因此本验证方案分别对各种消毒液进行消毒效果验证。
一、目的公司对于洁净室的消毒采用：洁净室操作台、设备表面、器具及净化室墙壁、地面、门窗等消毒，用0.1％新洁尔灭溶液、0.5％ 84消毒液擦拭消毒；洁净室人员手部消毒用75％乙醇溶液。
消毒液品种每三个月更换一次消毒液品种。
此次消毒验证主要为针对公司所用消毒液进行消毒有效性的试验，以确保生产环境得以控制。
二、范围1. 洁净室人员手部、操作间（工作台、设备表面、墙壁、地板、门窗）、器具所使用的各种消毒液的消毒效果验证。
涉及消毒剂有：0.1％新洁尔灭溶液、75％乙醇溶液、0.5％84消毒剂。
消毒剂消毒效果验证方案
文件编号：版本号：消毒剂消毒效果验证方案药业有限公司审批起草审核终审批准文件修订情况目录审批 (2)目录 (3)1.概述 (4)2.目的 (4)3.范围 (4)4.验证机构组成 (4)4.1 验证委员会组成 (4)4.2 验证小组成员及工作职责 (5)5.进度计划 (5)6.培训 (5)7.参考资料 (5)7.1 验证依据 (6)7.2 验证所需文件 (6)8.验证准备 (6)8.1 验证用培养基和稀释液的确认 (6)8.2 所用仪器设备的确认 (6)8.3 所用菌种的确认 (6)8.4 菌液的制备 (6)8.5 消毒剂的配制 (7)9.验证过程 (7)9.1 消毒剂消毒效果确认 (7)9.2 消毒剂的有效期确认 (10)10.异常情况处理 (11)11.结论和建议 (11)12.验证报告会签 (11)13.验证证书 (11)14.再验证 (12)15.附件 (12)1.概述洁净区设施设备长时间放置时，在适宜的温湿度条件下会导致微生物滋生繁殖，因此需要适当的消毒措施来保障设施设备不被污染。
75%浓度下的乙醇分子具有很强的渗透力，能穿过细菌表面的膜，进入细菌内部，使构成细菌生命基础的蛋白质凝固，将细菌杀死。
75%乙醇溶液主要用于墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒。
本次消毒剂效果验证是指生产过程中使用的消毒剂的消毒效果验证。
生产过程中消毒剂的消毒方式分为两种：浸泡式/液封消毒和表面擦拭/喷洒消毒。
在实验室内对这两种消毒方式进行模拟（表面擦拭/喷洒消毒时选择的材质应与设施设备表面材质相同或相似），根据实验结果判定该种消毒剂的消毒效果。
2.目的本验证确定75%乙醇溶液的消毒效果并确定消毒剂的有效期和更换周期，确保消毒剂在有效期内和更换周期内的消毒效果能够符合要求。
3.范围本验证适用于消毒剂75%乙醇溶液消毒效果、有效期和更换周期的确认。
4.验证机构组成公司成立验证委员会，负责所有验证工作的领导和组织，负责审批验证方案和验证报告、发放验证证书。
消毒方法及效果验证方案及效果验证记录报告
YZJS000300消毒方法及效果验证方案1引言1.1 概述：医药工业洁净室与其他工业洁净室不同，不仅要控制空气中一般的悬浮粒子，还要控制活微生物数。
另一方面，不能认为进入洁净室的空气无菌了，室内各种表面就不沾污细菌了。
如果这些地方有营养源，细菌繁殖的可能性就存在。
在洁净室中人体是主要菌源之一，不仅皮肤带有细菌，人体通过呼吸、讲话也会散布细菌，所以在洁净室中除戴口罩外，对洁净室表面消毒仍是一个重要措施。
药品生产时由于在洁净室的地面、墙面、顶棚、机器、人体及衣服表面可能有活的微生物存在，当温度合适时，细菌即在这些表面繁殖，并不时被气流吹散到室内，因此洁净室一般只安排两班生产，使每天有足够的时间用于清洁、消毒。
1.2 消毒方法及其特点使用的消毒方法有紫外线消毒、消毒剂消毒、臭氧消毒等。
1.2.1 紫外线消毒紫外线消毒主要用层流罩、传递窗、风淋室乃至整个洁净房间的消毒。
1.2.1.1 紫外灯的特点a、紫外线波长为136-390nm，以253.7 nm的杀菌力最强，但其穿透力很弱，只适用于环境消毒及表面消毒。
b、紫外灯的杀菌力随使用时间增加而减弱。
国产紫外灯平均寿命一般为2000h，超过平均寿命时就达不到预期的灭菌效果，因此必须到期更换。
c、紫外灯杀菌力随菌种不同而不同，杀霉菌的照射量要比杀杆菌大40-50倍。
d、紫外灯通常按相对湿度为60％的基准设计，室内湿度增加时，照射量应相应增加。
e、紫外线强度要求在操作面上达40μw/cm2以上。
1.2.1.2 紫外灯的安装方法紫外灯一般安装在顶棚上，其杀菌效果最好。
如图：吊顶1.2.2 消毒剂消毒洁净区墙表面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、车、桌、椅等及手表面都应定期清洁，并用消毒剂消毒。
常用的消毒剂有：75％的乙醇、2％甲酚皂溶液、0.2％新洁尔灭溶液等。
1.2.2.1 75％乙醇乙醇属中效消毒剂，具有中效、速效、无毒、对皮肤粘膜有刺激性、对金属无腐蚀性，受有机物影响很大，易挥发、不稳定等特点。
消毒剂消毒效果验证方案设计
1、验证方案的起草2、验证方案的审批3、验证方案的批准目录1 前言2 职责3 验证的方法及步骤4 异常情况及偏差处理5. 验证结果评价及建议6、再验证周期1.前言消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染的一种化学剂。
由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种以上的消毒剂。
交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应性。
本实验方案针对①75%乙醇、②1%新洁尔灭、③3%甲酚皂杀菌剂、④3%的过氧化氢溶液共4种消毒剂进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。
1.1验证的目的本验证的目的在于制定方法及可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。
1.3验证的范围75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O21.4验证内容：本验证先在实验室对所使用的消毒剂，用六种控制菌做生物指示剂挑战性实验；然后做现场消毒考察实验，即现场消毒后用棉签取样法对消毒后的表面取样，做表面残留微生物限度检查。
通过对指示菌的杀灭对数值和现场消毒后洁净区表面微生物的残留限度来确认消毒剂的消毒效果。
2. 职责2.1验证小组成员：2.2职责2.3验证进度3. 验证方法及步骤3.1实验材料3.3.1 菌株（1）细菌：金黄色葡萄球菌 (ATCC6538)铜绿假单胞菌(ATCC15442)大肠杆菌(ATCC25922)伤寒杆菌(ATCC6539)（2）细菌芽孢：枯草杆菌芽孢(ATCC9372)（3）真菌：白色念珠菌(ATCC10231)3.3.2 培养基无菌大豆胰蛋白胨琼脂培养基(TSA)、营养肉汤培养基。
3.3.3 稀释液：1%蛋白胨-0.03mol/L PBS 溶液3.3.4 中和剂：0.1%卵磷脂+1%吐温 80 溶液； 0. 5%硫代硫酸钠（3%过氧化氢）3.3.5 无菌试管3.3.6 无菌平皿(90mm)3.3.7消毒剂：75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O23.3.8移液器及配套无菌吸头:0-100ul，100-1000ul3.2中和剂效力确认①中和剂效力及毒性试验目的在化学消毒试验中，达到规定消毒时间终点时，要求立即终止残留消毒剂的继续作用，以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物及其数量。
消毒剂效力验证方案与报告
文件制修订记录验证方案审批记录方案起草验证小组组成方案审核方案批准实施日期：本方案计划于年月日至年月日完成。
1 验证概述 Introduction消毒剂是制药洁净区保障环境卫生、控制微生物污染的重要物料。
杀菌效力是消毒剂的主要考察指标，本次验证是根据2010 年版药品GMP 指南(无菌药品) 第293-297 页所介绍的实验室消毒剂效力硬表面测试法，测试消毒剂perform®classic concentrate QB、perform®classic concentrate PAA 和quartasept® plus 对于USP 规定的标准菌株以及重庆某某的典型环境菌的杀灭效力。
2 验证目的Validation purpose确认作为消毒剂使用的perform®classic concentrate QB、perform®classic concentrate PAA 和quartasept® plus 对于标准菌株金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、白色念珠菌、黑曲霉、枯草芽孢杆菌的杀灭效力，并考察对于重庆某某的典型环境菌的杀灭效力，确保消毒剂杀菌效力符合生产要求。
3 验证范围Validation scope适用于作为消毒剂使用的perform®classic concentrate QB、perform®classic concentrate PAA 和quartasept® plus。
4 验证小组职责Responsibility4.1供应商某有限公司4.1.1起草相应的方案与操作规程；4.2.2负责消毒剂的准备、检测、并做好相应的记录；4.2质量部（QA）4.2.1起草相应的质量标准和检验标准操作规程；4.2.2负责验证报告的审核；4.2.3负责参与拟定再验证周期。
5 引用标准Reference《药品GMP 指南（无菌药品）》13.3 章节：实验室消毒剂效力硬表面测试法、《消毒技术规范》2002 版、USP 1072、EN 13697、EN 1276、EN 1650、《消毒剂配制使用标准操作规程》6 验证程序及内容6.5 实验室消毒剂效力硬面测试法方法Test method 6.5.1 试验材料Materials and reagents培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)、营养肉汤培养基(NB) 稀释液：灭菌0.9% NaCl溶液消毒剂测试液：浓缩型：使用无菌纯水配制成所要考察的浓度的稀释液，每种约200 ml，装入无菌喷雾瓶中备用。
消毒剂消毒效果及有效期验证方案要点
1.概述2.验证范围3.验证目的4.验证参考文件5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容8.结论与评价9.再验证周期1.概述1.1.本公司的洁净区分为A级、B级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有三种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、2%甲酚皂溶液。
本次验证方案将选用以上3种消毒剂分别进行验证试验。
1.3.作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。
1.4.为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。
实验室考察部分，定量悬浮试验法适用于浸泡或液封方式的消毒方法；表面实验法适用于擦拭或喷洒方式的消毒方法。
洁净区设施表面材质有不锈钢、镀锌板及玻璃三种，故表面试验法选用不锈钢载片、镀锌板及玻璃载片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
现场考察试验部分选择冻干车间的配液间（C级洁净区）、灌装间（A/B级洁净区）、灌装间操作人员手部消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。
1.5.A/B级洁净区使用的消毒剂需经0.22pm除菌过滤。
2.验证范围本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
3.验证目的通过消毒剂消毒效果及有效期的确认，科学制订消毒程序，以保证各洁净级别的操作间及设备外表面、人员手部按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒防止污染的效果。
4.验证参考文件《药品生产验证指南》（2003版）；《医疗机构消毒技术规范》（2012年版）；《中国药典》（2010年版）；《药品GMP指南-无菌药品》、《现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术》。
5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容7.1.验证前参与实施验证的人员必须已经接受本方案的培训且考核合格。
见附表1。
消毒剂的消毒效果验证方案
消毒剂的消毒效果验证方案目录1. 目的 (2)2. 范围 (2)3. 参考文件 (2)4. 职责 (2)5. 验证计划 (2)6. 验证内容 (2)7. 验证实施 (2)8. 验证周期 (4)9. 验证结论 (4)1.目的通过对消毒剂的选择及消毒效果进行验证，以确定消毒剂的消毒效果和更换周期，使消毒效果始终保持有效性和稳定性。
2.范围本方案适用于洁净车间、检验室无菌操作人员用于手部消毒的消毒剂型。
3.参考文件3.1.GB15979-2002消毒与灭菌效果的评价方法与标准。
3.2.《中国药典》2020年版四部通则1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法。
4.职责4.1.管理者代表：负责验证方案和报告的批准。
4.2.质量部负责人：负责验证方案的审核，协调验证过程，保证验证顺利完成，对验证进行总结和评价。
4.3.生产员：负责方案的实施。
4.4.检验员：负责验证方案起草，质量控制和检测，出具相关记录和报告，验证用耗材、试剂、表单等的准备工作。
5.验证计划5.1.75%酒精溶液消毒效果确认，实施日期：XXXX年XX月XX日-XXXX年XX月XX日。
5.2.0.2%新洁尔灭溶液消毒效果确认，实施日期：XXXX年XX月XX日-XXXX年XX月XX日。
6.验证内容6.1.75%酒精溶液消毒后手部细菌数；6.2.0.2% 新洁尔灭溶液消毒后手部细菌数。
7.验证实施7.1.验证前准备工作操作人员按照洁净区7步洗手法将手洗干净，再将手烘干后取样；再使用喷壶喷出消毒液，双手均匀搓开，晾干后再次取样。
7.1.1.检验器具、试剂：立式压力蒸汽灭菌器、生化培养箱、可调移液器、微生物限度过滤系统、微孔过滤膜(0.45μm)、培养皿、培养基、PBS缓冲液。
7.1.2.实验用品准备培养基的配制：见《培养基配制记录》实验用品处理：将微生物限度仪泵头、移液枪头、镊子，放入不锈钢灭菌盒或用牛皮纸包扎好。
与洁净服一起放入灭菌锅，经高压蒸汽121℃灭菌30min。