小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验
巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验报告
巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验报告巨噬细胞吞噬实验&沉淀实验实验报告实验二一巨噬细胞吞噬功能实验【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞，局域活跃的吞噬功能。
吞噬细胞受抗原刺激后活化，可使吞噬功能明显增强。
在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷亚甲蓝染色，显微镜下计数吞噬红细胞的百分数，及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目，以判断吞噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。
【方法】体内法：（1）实验前3小时，小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
（2）实验时，每只小鼠注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使其在腹腔中分布均匀，利于吞噬。
（3）30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用载玻片轻擦腹腔，使腹腔液均匀涂于载玻片过，再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液，盖上盖玻片。
（4）高倍镜下进行观察，计数。
【结果】【分析】在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液，可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
二沉淀反应双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，二者均可发生扩散，并且随扩散距离的增大浓度降低，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
本实验是定性实验，常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。
【方法】（1）制板：将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml（2）打孔：待琼脂凝固后，将载玻片置于打孔样板上，用打孔器打孔（3）加样：在中央孔内加抗体，上下两孔加抗原1，左右加抗原二，每孔加10μl（4）结果观察：将琼脂板置于湿盒，37℃一天后观察结果。
【结果】在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线，有抗原抗体反应，为阳性反应，说明抗原1与抗体相对应。
中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线，说明抗原2与抗体之间不相对应。
免疫学实验10 小鼠巨噬细胞功能测定
实验10 小鼠巨噬细胞功能测定
1.实验目的
了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理； 熟悉和掌握巨噬细胞吞噬试验的方法。
2.实验原理ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
巨噬细胞具有吞噬、分泌和参与免疫应答的各种 功能，是机体免疫水平和功能的重要指标，与抗肿瘤免 疫也有重要关系。本试验将鸡红细胞注入小鼠腹腔时， 会被腹腔中的巨噬细胞吞噬。取小鼠腹腔液涂片、染色 ，在显微镜下观察可见鸡红细胞被吞噬的现象。计算吞 噬百分率和吞噬指数，可判断巨噬细胞的吞噬功能，据 此可判断机体的非特异性免疫水平。
3.实验器材
（1） 器具：注射器、离心管、载玻片、平皿、烧 杯、橡皮乳头、解剖剪和镊子、解剖盘。 （2） 材料：Hank’s液、6%淀粉肉汤液、瑞氏染 色液、 1%鸡红细胞悬液、 小鼠。
4.实验方法（小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能体内测定法）
（1）实验前3d，给小鼠腹腔内注射无菌6%淀粉肉汤液1ml。 （2）实验当天，给小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液1ml ，轻 揉腹部使鸡细胞分散，令其活动20~30min。 （3）然后颈椎脱臼处死小鼠，仰卧固定。常规消毒腹部皮肤， 左手持镊提起腹中部皮肤。右手用剪子剪长5mm的小口， 从剪口处朝头、尾部用力，撕开皮肤，暴露腹壁。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的巨噬细胞
5.注意事项
（1）涂片的薄厚要适当，否则影响计数。 （2）小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。 （3）如小鼠腹腔液过少，可腹腔注入适量Hank’s液揉动 后再取。 （4）剪开小鼠腹腔时应避免出血，否则将影响试验结果。 （5）被吞噬的鸡红细胞时间过长可被消化，时间过短未 被吞噬，必须掌握好吞噬作用时间。
巨噬细胞吞噬实验报告结果分析
巨噬细胞吞噬实验报告结果分析
【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞,局域活跃的吞噬功能。
吞噬细胞受抗原刺激后活化,可使吞噬功能明显增强。
在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞,30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷亚甲蓝染色,显微镜下计数吞噬红细胞的百分数,及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目,以判断吞噬细胞的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。
【方法】体内法: (1)实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
(2)实验时,每只小鼠注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使其在腹腔中分布均匀,利于吞噬。
(3)30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用载玻片轻擦腹腔,使腹腔液均匀涂于载玻片过,再滴一滴0.03%冷亚甲蓝溶液,盖上盖玻片。
(4)高倍镜下进行观察,计数。
【结果分析】在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液,可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验
生物检测技术实验安排实验五小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验1.目的要求掌握活细胞检测的原理和操作方法2.原理吞噬细胞包括血液中的中性粒细胞、单核细胞和组织中的巨噬细胞。
当与颗粒物质(如鸡红细胞)混合孵育一定时间后，颗粒物质被吞噬，涂片染色镜检。
根据吞噬率和吞噬指数可反映该细胞的吞噬功能。
3.试剂设备鸡红细胞，小鼠3-5只，5 %EDTA或枸橼酸钠，生理盐水，丙酮，甲醇，Giemsa 染液（吉姆萨粉末0.5g先溶于少量甘油，研磨30min，至看不见颗粒止，再将全部33mL剩余甘油倒入，于56℃温箱内保温1-24h。
然后加入甲醇33mL，搅匀，保存于棕色瓶。
此母液放入冰箱可长期保存，保存时间越长越好。
临用时用pH 6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。
）显微镜，1、5、10 ml注射器各2支，滴管15支，载玻片一盒，恒温水浴锅，恒温箱，大平皿6-10个4.步骤1）鸡红细胞制备无菌采集血（1%EDTA），1：5加生理盐水，洗涤备用。
（试验前24 h预先于小白鼠腹腔注射5%淀粉液1ml后轻柔腹部,以刺激小白鼠腹腔巨噬细胞渗出）2）细胞吞噬受试小鼠腹腔注射20%鸡红细胞悬液1mL, 轻柔腹部,30min后。
3）巨噬细胞获取向腹腔注射1mL生理盐水，再揉一揉，使腹腔液稀释，3分钟后，颈椎脱臼处死动物,将其仰位固定于鼠板上,正中剪开腹壁皮肤。
4）细胞涂片吸腹腔洗液1mL,滴几滴于2张载玻片上, 置37℃温育30 min。
用生理盐水漂洗, 晾干。
5）固定以1: 1丙酮甲醇溶液固定。
6）染色与观察 Giemsa染色10min,（染色步骤：(1)自然干燥的细胞涂片(预先滴加甲醇固定更好)水平置于染色架上。
(2)将I液(用缓冲液或蒸馏水5-10倍稀释)滴盖涂片上，lO-30分钟。
(3)倒弃涂片上的I液，自来水漂洗干净。
(4)立即滴盖Ⅱ液(用缓冲液或蒸馏水5-10倍稀释)在涂片上染色10-30分钟。
(5)倒弃涂片上的Ⅱ液，自来水漂洗干净。
巨噬细胞小鼠实验报告
一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。
2. 研究巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中的作用。
3. 探讨不同刺激条件下巨噬细胞吞噬功能的变化。
二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中的重要组成部分，具有强大的吞噬和清除病原微生物、衰老细胞和坏死组织的能力。
吞噬作用是巨噬细胞识别、结合并摄取病原微生物或异物的重要机制。
本实验通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，评估其吞噬功能。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：6-8周龄健康小白鼠。
2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、无菌生理盐水、冷亚甲蓝染色液、甲醇、橄榄油等。
3. 实验仪器：显微镜、离心机、恒温水浴箱、计时器等。
四、实验方法1. 实验分组：将小白鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 实验操作：（1）实验组：每只小鼠腹腔注射1ml鸡红细胞悬液，对照组腹腔注射1ml无菌生理盐水。
（2）注射后30分钟，将小鼠处死，无菌操作取出腹腔液。
（3）将腹腔液离心，弃去上清液，加入适量冷亚甲蓝染色液，混匀后制片。
（4）显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。
3. 数据统计：计算吞噬鸡红细胞的巨噬细胞百分比和吞噬指数。
五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分比和吞噬指数均显著高于对照组（P<0.05）。
2. 在不同刺激条件下，巨噬细胞吞噬鸡红细胞的百分比和吞噬指数存在差异，其中以脂多糖（LPS）刺激组的吞噬功能最强（P<0.05）。
六、实验分析1. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，且吞噬功能受到LPS等刺激因素的影响。
2. 巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中发挥重要作用，其吞噬功能与机体抵抗力密切相关。
3. 本实验为研究巨噬细胞在免疫调节中的作用提供了实验依据。
七、实验讨论1. 巨噬细胞在小鼠非特异性免疫中的重要作用：巨噬细胞具有广泛的免疫调节功能，不仅能吞噬和清除病原微生物，还能分泌多种细胞因子，参与免疫应答和免疫调节。
吞噬现象观察实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。
2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，加深对吞噬作用机制的理解。
二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞，能够识别、吞噬并消化各种抗原物质，如细菌、病毒、细胞碎片等。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，了解吞噬作用的过程和机制。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：清洁级雄性小鼠（体重20-25g）。
2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。
3. 实验仪器：超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 麻醉小鼠，打开腹腔，收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次，制成细胞悬液。
3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，置于37℃水浴中温育30分钟。
4. 取出混合液，用台盼蓝染色液染色，置于显微镜下观察。
5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。
五、实验结果在显微镜下观察到，巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。
具体表现为：1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞，表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。
2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变。
3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。
六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，这与巨噬细胞的免疫功能相一致。
2. 吞噬过程中，巨噬细胞表面出现鸡红细胞，说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。
3. 吞噬后，巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变，说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。
4. 吞噬鸡红细胞过程中，部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化，说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。
七、实验结论通过本实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，加深了对吞噬作用机制的理解。
实验结果表明，巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用，具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。
巨噬细胞吞噬功能检测
巨噬细胞吞噬功能测定【实验原理】巨噬细胞对颗粒性异物具有很强的吞噬功能。
当鸡红细胞被注入小鼠腹腔时，会被腹腔中的巨噬细胞吞噬。
取小鼠腹腔液涂片、染色，在显微镜下可见到鸡红细胞被吞噬的现象。
计算吞噬百分率和吞噬指数，可判断吞噬细胞的吞噬功能。
【试剂和器材】1. 动物体重20-25g的健康小鼠。
2. 1%鸡红细胞（CRBC）悬液自鸡液静脉或心脏采血，放Alsever液中保存（鸡血与Alsever 液1：5混合），置4℃可有效保存1个月，临用前用生理盐水将CRBC洗3次，按红细胞压积配成1%CRBC悬液。
3. 6%可溶性淀粉肉汤培养基肉汤培养基100ml加入可溶性淀粉6g，混匀，置100℃水浴煮沸消毒。
4. 其他试剂瑞氏（Wright）染液、生理盐水等。
5. 器材无菌注射器及针头、剪刀、镊子、解剖盘、载玻片、显微镜等。
【步骤和方法】1.试验前3天，于小鼠腹腔注射6%可溶性淀粉肉汤培养基1ml。
2.于试验当天，小鼠腹腔注入1%CRBC悬液0.5ml，并轻轻揉腹。
3.30min后小鼠颈椎脱臼处死，取腹腔液涂片，自然干燥后瑞氏染色，用油镜观察。
【结果判定】镜下可见吞噬细胞核呈蓝色，被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形，其胞浆呈红色而核被染成蓝色。
呈油镜下随机观察100个巨噬细胞，计数吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数和吞噬的鸡红细胞总数。
吞噬百分率= (吞噬CRBC的巨噬细胞数/100)*100%吞噬指数= 吞噬细胞吞噬的CRBC总数/100【注意事项】1.涂片的薄厚要适当，否则影响计数。
2.小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。
3.如小鼠腹腔液过少，可注入适量生理盐水。
4.剪开小鼠腹腔时应避免出血，否则将影响试验结果。
5.被吞噬的鸡红细胞时间过长可被消化，时间过短未被吞噬，必须掌握好吞噬作用时间。
阿氏液配方：葡萄糖 2.05克柠檬酸钠0.8克柠檬酸0.055克氯化钠0.42克加蒸馏水至100毫升，加热溶解后将pH值调到6.1，经过69千帕，15分钟的高压灭菌，放置在4℃的环境内，保存备用。
实验四 巨噬细胞的吞噬实验
注射后30分钟，处死小鼠。
（右手抓住鼠尾，用力向后拉， 左手拇指与食指同时向下按住 鼠头，使脊髓与脑髓间断开）
吸取腹腔液
在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向其中滴加一滴腹 腔液，静置10分钟，使腹水细胞贴壁，弃去生理盐水，待 其稍干后，进行瑞氏染色。
实验四 小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验
实验简介
细胞的胞吞胞吐是细胞进行新陈代谢的方 式之一。高等动物的细胞在摄取营养物质的同 时，有的细胞如单核细胞和巨噬细胞还有通过 识别与吞噬细菌、病毒等外来物质的作用来达 到机体防御的功能。本实验通过预先激活腹腔 巨噬细胞，然后腹腔注射鸡红细胞，从而引起 腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞。通过光镜可清楚 地观察到这一有趣的现象。
目的要求
1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程
基本原理
高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞，具 有吞噬的功能。它们广泛分布在组织和血液中，在机体的 非特异免疫功能中起着重要的作用。当病原微生物或其它 异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，而巨噬细胞又具有趋 化性，它通过产生活跃的变形运动，主动向病原体和异物 移行聚集，首先把异物吸附在细胞表面，随之，吸附区域 的细胞膜向内凹陷，伸出伪足包围异物，并吞入胞质，形 成吞噬泡，继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合， 形成吞噬溶酶体，把病原体杀死，异物消化分解。
方法与步骤
鸡翼下静脉取血后，用Alsever以1:4比例保存 于4度（可保存一周）。实验前加生理盐水离 心两次，然后根据获得的红细胞的体积加入适 量的生理盐水，调至鸡红细胞浓度为1%。
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噬
组织（巨噬细胞）
功能： 吞噬病原微生物（寄生虫
细
等），死亡细胞。
胞
来 源： 中性粒细胞
小 存在部位： 血液 、 炎症部
吞
位（全身）
噬 功
能：主要吞噬化脓菌
细
胞
三、实验用品
• 1．器材 • 显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、
注射器、吸管、吸水纸
• 2．试剂 • 生理盐水、Alsever溶液、瑞士染液 • 3．材料 • 小白鼠、1%鸡血红细胞。
但静息的巨噬细胞其分泌和杀伤功能低下，受到病原微 生物或炎症因子的刺激时，巨噬细胞成为激发或致敏状态， 分泌能力得以增强，但杀伤功能仍然很低。只有活化的巨噬 细胞才具有较强的吞噬能力，具有非特异抗感染和抗肿瘤作 用。
来源： 单核巨噬细胞
大 存在部位： 血液（单核细胞)
吞
全身结缔组织及小血管的基底 膜
四、实验步骤
• 实验前3天取小白鼠腹腔注射6％淀粉液1毫升（连
续注射三天效果较好）。
• 1．小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液2ml，
轻揉腹部使鸡细胞分散。
• 2 ． 25～30分钟后，用颈椎脱臼法处死小
鼠。并腹腔注射生理盐水2毫升
3.在干净的载玻片上滴加一滴生理盐水，向 其中滴加一滴腹腔液，静置10分钟，腹腔 巨噬细胞贴壁，弃去生理盐水，待其标本 稍干后瑞氏染液染色。
思考题
1.在高等动物中哪些细胞具有吞噬功能？ 2.在什么情况下巨噬细胞吞噬功能加强？
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬实验原理 • 仪器、材料与试剂 • 实验步骤 • 实验报告及思考题
目的要求
1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程
实 验原 理
在高等动物中，单核吞噬细胞系统和嗜中性粒细胞专司 吞噬功能，在细胞的非特异性免疫功能中发挥重要作用。单 核吞噬系统包括血液中的单核细胞和组织中固定和游走的巨 噬细胞。
• 4.瑞氏染色：滴加3~4滴瑞氏染液于标本上，以
完全盖住标本为宜。
• 5分钟后甩去玻片上的染液，自来水轻洗，吸水纸
吸干。
• 干燥后油镜镜检 • 5. 清洗油镜，解剖盘及器具，打扫桌面卫生、实
验室卫生，老鼠尸体要掩埋！
实验报告及思考题
实验报告
1.画图示出你所观察到的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬羊红细胞的各种形态。 2.计算吞噬百分比，即每一百个吞噬细胞中吞有羊红细胞的吞噬细胞数。