水产生物遗传育种学：2009研究生试题

1什么是选择育种？家系选择、混合选择是怎样进行的？选择育种应注意哪些问题？
2 什么是雌核生殖？鱼类的雌核生殖是怎样诱导的？结合实例说明如何结合性反转技术获得单性鱼？
3用性激素诱导鱼类性反转可以采用哪些方式？如何操作？性激素诱导鱼类性反转的技术关键是什么？
1（1）混合选择又叫集体选择，个体选择，是从来源不同的鱼群种选择表型有两的个体混养在一起，混合交配，繁殖后代，繁殖的后代再混养在一起，再选种，这样混合选拔留种，连续几代培育出一个新品种。

混合选择又一次混合法和多次混合法。

优点：操作简单，占用池塘少，可结合生产进行，不需要隔离。

能避免自交繁殖引起的生活力的衰退，使后代保持较高的活力，常用在良种繁育。

缺点：混合选择进程缓慢，对改良品种的效果比较有限。

家系选择是将一雌一雄的优良亲鱼单独交配，建立若干家系，后代以累代近亲繁殖为基础，在尽可能相同的条件下饲养亲鱼，比较鉴定各家系的经济性状，从中选出最好家系的雌雄个体建立品系，这样的选择方法是家系选择。

优点:家系选择建立在近亲繁殖的基础上，基因必定向纯和方向发展，加上人工选择，最终能育出优良纯种群.
缺点：由于近亲交配，产生近交衰退，出现畸形和有缺陷的个体，注意即使淘汰。

(2)选择育种的注意事项：
A、在相同饲养条件下饲养亲鱼（尤其是产卵前）
B、为提供选择所需鱼苗，所需杂交试验应同时进行
C、鱼卵的孵化、鱼苗的培育应保持相对稳定一致的条件
D、对供选鱼群的饲养必须控制在适当的密度，不应过稀或过密，应与生产水平相当
E、分池饲养在不同条件下的实验材料，选择前不许混杂
F、试验鱼种投入水体的日期尽可能接近，最好在同一天进行
G、重要性状的选择应在性状充分表达以后进行，对体长、体重、生长速度的选择应达到商品规格的年龄。

2 雌核发育：合子的发育是在卵子细胞核的控制下完成的
（1）1）获得遗传上失活的精子：用化学的或物理的方法在授精前处理精子，目的是要破坏精子的精核，但并不破坏精子入卵和激发卵子发育的能力。

如甲苯胺兰、乙烯脲吖啶黄等处理可以使精子遗传失活，进而诱发雌核发育，只是需要找出适当的处理浓度和处理时同。

也可以用紫外线、X射线或γ射线等处理后的失活精子来“受精”
2）卵子染色体的二倍化：可以采用以下方法
A物理方法
冷休克处理：微管蛋白在37℃的温度条件下其二聚体能装配成微管，而低温条件微管则解聚成二聚体，并能阻止微管蛋白聚合成微管。

从而阻止纺锤丝形成
热休克处理：热休克处理诱导贝类多倍体其机制在于，若细胞处于较高温度境中，细胞内一些进行生命活动的重要酶类如ATP酶就会遭到破坏，从而使其供能途径受阻。

静水压处理：当贝类受精卵处于高压情况下微管所保持的结构失去原有的空间构型和刚性，微管发生可逆性裂解，破坏纺锤丝的形成，使处于减数分裂Ⅰ第～次有丝分裂期的染色体不能向两极移动，从而诱导出多倍体。

去除压力的作用后受精卵会正常发育下去。

电脉冲处理：在一定的电场条件下，细胞会发生融合，从而诱发多倍体。

B化学方法
细胞松弛素B（CB）处理：细胞松驰素B是真菌的代谢产物，它能可逆性切断细胞分裂末期细胞质形成的收缩环的微丝，使细胞质的分裂受到抑制，从而阻止细胞分裂。

2 6－二甲基氨基嘌呤（6－DMAP）处理：它是一种嘌呤霉素类似物，作为一种蛋白激酶抑制药物，它可以破坏中期纺锤体并有促使染色体凝集的作用。

洗除该药物后，受精卵可以正常发育。

聚乙二醇(PEG)：该药是一种常用的细胞融合剂，它能使细胞发生融和作用从而使细胞染色体加倍
咖啡因（CF）处理：咖啡因作为细胞有丝分裂中期对拉动纺锤体起关键作用的微管的特异性药物，它可以阻断微管蛋白组装成微管结构，从而阻止细胞分裂。

秋水仙素处理：秋水仙素能抑制微管的组装，使已有的微管解聚合，从而阻止纺锤体的形成或破坏已形成的纺锤体，阻碍纺锤体行使机能，抑制着丝粒的分裂和发育，使染色体加倍后的细胞不发生分裂。

去除秋水仙素的作用后细胞恢复正常的生理状态。

C生物处理方法
种间杂交或先行种间杂交再伴随温度休克处理是产生异源多倍体的方法，也是诱发水产动物多倍体的方法之一
（2）在雌性同配的情况下，每个卵子含有x染色体，经过人工诱导二倍化后，此时的雌核发育二倍体含有两条x染色体，是遗传的雌体，其表型也是雌鱼，鲤鱼、草鱼、虹鳟和银大麻哈鱼等的性别属于这一类型，由它们的卵子所诱导的雌恢发育二倍体全是雌鱼。

若将这些雌鱼在其个体发育的性腺分化阶段用雄性激素处理，使之反转为功能性雄鱼，那么这些雄体的遗传型仍为XX型，若用这样的雄鱼与正常雌体<xx)交配，所产生的后代全为雌体，无需鉴别。

如用兴国红鲤雌性纯合系作母本，与经雄激素反转的散鳞镜鲤雌核发育二倍体雄鱼(xx)杂交，产生了具有生长优势的全雌后代，已在生产中推广，获得良好的经济效益。

在雌性异配的情况下，雌体所产生的卵子中，约有半数含有z染色体，另外半数含有w染色体。

含有z染色体的卵子经过处理二倍化，其二倍体含有两条z染色体(zz)为雄鱼。

若将这些雄性个体用激素反转为功能上的雄鱼(ZZ)，再与正常雄鱼(zz)交配，所严生的后代均为雄鱼，无需鉴定。

3（1）饲料添加法先姜激素溶解于95%酒精，再倒入饲料拌匀晾干或烘干。

此法简单，但用量大，过量导致不育在消化道中容易降解，如虹鳟24小时讲解 99%。

(2)浸泡技术：在含性激素的水中连续或间歇浸泡，Hunter（1983）把孵化后4天和11天的大鳞大马哈鱼在400微克/升甲基睾丸酮的水中浸泡2小时，再在孵化后47天头尾甲基睾丸酮的饲料3~9周，得到假雄鱼，与正常雌鱼受精，得到哦全雌个体，已到实用阶段。

此法用于冷水鱼，便宜，简单，不需要技巧。

主要用于胚胎孵化后期，高强度导致反常性反转。

（3）注射法：用药少，仅仅为饲料添加法的 10分之一，对于那些有特殊摄食习性和性腺分化晚的种类来说，前2种方法无效。

如草鱼和鲢鱼，可用此法。

此法可使快速性反转，但技术要求高，仔鱼阶段不行。

（4）硅胶管移植法：做成直径1.5毫米，长0.8厘米的药囊在近肛门腹部开口塞入，碘酒消毒。

此法激素释放均匀，用于性别分化晚的种类。

性激素诱导鱼类性反转的技术关键一是处理的开始时间，要在性别分化前采用，宜早不宜迟，二是药物剂量，药物剂量不好把握，如低剂量 MT（1~5ppm）促进金鱼、鲤鱼生长，中剂量（1—50ppm）使金鱼、罗非鱼性反转，高剂量（100ppm 以上）对XX罗非鱼有雌性化作用，三是药物处理的持续时间不好把握。