饮用水中菌落总数的测定
自来水中细菌总数的测定
自来水中细菌总数的测定自来水是我们生活中必需的一种水源，但由于其经过管道输送，可能会受到外界环境的影响，其中细菌是其中一种污染物。
因此，对自来水中的细菌总数进行测定，有助于判断自来水是否符合生活饮用水标准。
一、实验原理本实验采用了膜过滤法对自来水中的细菌总数进行测定。
其原理是通过将水样通过微孔膜滤器，将水中的微生物捕捉在滤膜的表面，再将滤膜培养在含有营养物质的琼脂培养基中，使细菌能够生长形成菌落，然后再通过计数器进行计数。
二、实验步骤1. 实验前处理：先将实验室的玻璃仪器清洗干净，用工业酒精将滤器放入灭菌杯中斜着着火杀菌，备用。
2. 取一个样品瓶，将自来水（1L）倒入瓶中。
将样品瓶放入一个不透明的塑料袋中，用胶带密封塑料袋，防止紫外线照射导致细菌死亡。
3. 首先将滤装置组装好，将滤膜放入滤装置的中间柄内，放入开口的滤膜夹中。
然后用无菌注射器将琼脂培养基吸入滤装置的压力室中，将压力室旋好。
4. 用烧杯等容器将自来水倒入滤装置中，通过压力室将水样通过滤膜，滤膜表面残留的微生物被滤装置中的滤膜抓住，滤液通过过滤口流出。
滤液需丢弃。
5. 将滤膜夹子取下，将滤膜放入用滤膜侧朝上的营养琼脂培养基培养皿中，培养皿需用无菌手套拆开。
将其覆盖好，标明标识，并用胶带作为封口。
6. 将培养皿竖起放入培养箱中，温度设定为37℃左右，需要放置24h以上，17~25℃下也可进行培养，培养天数也需要视不同微生物而定。
7. 取出培养皿，用目镜进行菌落计数。
计数时需要注意，培养皿中的菌落数量需要控制在20~200个之间。
计数完后将数据进行转换，得出升级菌落数，即水样中的细菌总数。
三、实验注意事项1. 玻璃仪器需要在实验前清洗干净，并且需要消毒处理，防止样品污染。
2. 在进行实验前，实验人员需要洗手，并穿戴洁净的实验服和手套，防止手部细菌对实验结果的影响。
3. 滤装置和培养皿需要在无菌条件下进行处理，避免细菌的交叉感染。
4. 培养皿中需要加盖，防止紫外线照射导致细菌死亡，同时也可以避免污染。
生活饮用水水质检测 细菌菌落总数测定
3.3 生活饮用水细菌菌落总数的测定
冷却至50℃的 培养基
12～15ml
水样
各取1mL 水样
冷却 倒置
37℃、24h
计数
3.4 河水、池水等的菌落总数的测定
1. 水样稀释
9 ml 无菌水
1 ml
水样
9 ml 无菌水
1 ml
9 ml 无菌水
1 ml
10-1
10-2
10-3
稀释倍数视水污染程度而定，选择在平板上能长出30～300 个菌落的稀释倍数为宜。
细菌菌落总数的测定
教学目标
生活饮用水 水质检测
任务9
知识目标
（1）细菌总数、菌落；（2）细菌总 数与水质的关系；（3）水中细菌总数 的测定原理、平板菌落计数法。
能力目标 （1）水样采集；（2）培养基的配制和 灭菌技术，无菌操作，细菌的接种； （3）细菌的培养、菌落的观察、计数
素质目标 1）整洁、有序、规范；（2）多实践、 巧动手，严格执行无菌操作；（3）培 养实事求是、严谨认真的科学态度；善 于观察、分析问题
n 细菌的数量和大肠菌群数是生活饮用水监测的重要生物 指标。
1.2 菌落总数
菌落(colony)：在固体培养基上，一个母细菌不断繁殖， 形成一堆肉眼可见、有一定形态构造特征的细菌集合。
n 单个细菌难以直接计数，但细菌在固体培养基上生长，形 成具有各种颜色和不同外观的菌落，却易观察，易计数。
n 在水质卫生学检验中，细菌总数是指1mL水样在牛肉膏蛋白 胨培养基中经37℃、24h培养后，所生长出的细菌菌落总数。
教学内容
细菌及菌落总数
细菌菌落总数测定的原理 平板菌落计数法 注意事项与思考题
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法(1)
生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法(1)生活饮用水是人们生活中必不可少的物质，但是如果水中细菌总数超标，就可能会对人体健康产生不良影响。
因此，对于生活饮用水中细菌总数的测定显得尤为重要。
在此，我们就来介绍一下“生活饮用水中细菌总数的测定法-平皿计数法”。
1. 平皿计数法简介平皿计数法是测定水样中微生物的数量的常用方法之一，它是一种直接计数法。
一般情况下，需要使用琼脂平板进行测定，将样品进行适当稀释后均匀涂覆在琼脂平板上，培养一定时间后，可根据病原菌的特定形态来进行计数。
2. 生活饮用水中细菌总数的测定方法生活饮用水中细菌总数的测定方法主要包括以下几个步骤。
首先，需要从水源中取出一定块头的水样，其中取的样品不应过多，否则会影响测定精度。
接着，需要进行一定的稀释，以降低水中细菌的浓度。
稀释后的水样可以使用不锈钢钻头设计的吸盘管吸取，然后均匀地涂敷在琼脂平板上。
然后，将涂有样品的琼脂平板放置在恒温箱中，进行培养。
培养的时间，一般为24至48小时不等，具体的时间会因不同的细菌种类而有所变化。
最后，在合适的条件下，使用显微镜或放大镜对菌落进行计数，得到水样中细菌总数的值。
3. 注意事项在进行生活饮用水中细菌总数的测定时，需要特别注意以下几个方面。
首先，要保证实验室的环境整洁，尽量避免其他微生物的污染。
其次，测定过程中需要使用无菌的工具和试剂，并在操作前先进行灭菌处理。
最后，在取出样品时要注意避免把水底的沉淀物一同带出，以免影响实验结果。
以上就是关于“生活饮用水中细菌总数的测定法-平皿计数法”的详细介绍。
这种方法应用广泛，已经成为了国际上公认的测定方法之一。
在实际应用中，我们需要根据样品的不同特点，灵活选择不同的测定方法，以确保最终测定结果的准确性。
生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法-V1
生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法-
V1
生活饮用水中细菌总数的测定法平皿计数法
测定生活饮用水中细菌总数的一种方法是平皿计数法，本文将对这种方法进行详细介绍。
一、实验原理
平皿计数法是利用细菌在液体培养基表面生长成菌落的原理，通过计算菌落个数来确定水中的细菌总数。
二、实验步骤
1. 准备培养基，将培养基倒入无菌平皿中；
2. 取样，将水样取自自来水管道或自然水源中；
3. 稀释，将取样液进行10倍、100倍、1000倍稀释，分别将每份稀释液分别均匀分散在培养基表面，避免液滴残留；
4. 写标签，标注菌落计数的相关信息，例如样品名称、稀释倍数、菌落计数的日期等；
5. 培养，将培养皿放置在恒温培养箱中，设定温度为37℃，并在3-5天内进行观察和计数。
三、实验注意事项
1. 取样应避免超过24小时，以免菌群失去代表性；
2. 取用的平皿应事先灭菌处理，以避免外来细菌的污染；
3. 实验室应有专门的抽风设备、消毒液等清洁工具，以维持实验室的高度卫生。
通过以上三个步骤，我们就可以精确地测定出生活饮用水中细菌总数。
同时，这种方法也可以应用在其他领域，例如食品安全、环境监测等
方面。
但需要注意的是，实验过程中必须遵守实验室操作规程，以保
证实验结果的可靠性。
菌落总数检测标准
菌落总数检测标准
菌落总数检测是一种常见的微生指标检测方法用于评估食品、饮用水、医疗器械等物品中的微生物污染情况。
检测的菌落总一般采用生物计数法，即推测细菌总数的检验方法。
不同国家和地区可能有不同的标准和规定，但通常微生物指标检测标准的结构都是相对类似的，包括菌落总数、大肠埃希氏菌、霉菌、酵母菌等项目。
这些标准涉及了食品安全、饮用水卫生、医疗器械清洁等方面。
以下是一些常见的菌落总数检测标准：
1. 食品行业：根据《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数的测定GB 4789.2-2016》，菌落总数检测的标准上限值因不同食品类别而有所不同。
2. 饮用水行业：根据《生活饮用水卫生标准GB 5749-2006》，每毫升饮用水中的菌落总数应低于100个。
3. 医疗器械清洁行业：医用器械清洁标准如ISO 15883等对菌落总数也有相关的规定。
需要注意的是，具体标准和检测方法可能因国家、行业、用途等
而异，建议根据具体情况查询相关标准以获取最准确的信息。
包装饮用水菌落总数的测定方法操作规程
包装饮用水菌落总数的测定方法操作规程操作规程：包装饮用水菌落总数的测定方法1.实验目的：测定包装饮用水中的菌落总数，评估其卫生安全性。
2.实验器材和试剂准备：-高温高压灭菌器-灭菌平板计数器-包装饮用水样品-琼脂培养基-蒸馏水或纯净水-消毒瓶-无菌试管-螺旋体和乳球菌选择性培养基（可选）3.操作步骤：3.1试剂准备和灭菌操作3.1.1准备琼脂培养基：根据生产商提供的说明书，配制琼脂培养基，并根据需要增加适当的抗生素（如螺旋体和乳球菌选择性培养基）。
3.1.2用蒸馏水或纯净水冲洗培养皿，确保其清洁并无细菌污染。
3.1.3将培养皿倒立放在无菌器皿内，进行高温高压灭菌。
3.1.4灭菌完成后，将培养皿平置在无菌工作台上，待培养基凝固。
3.2取样操作3.2.1使用无菌钳子或消毒瓶打开包装饮用水，将样品瓶口擦拭消毒。
3.2.2在无菌条件下，取适量的包装饮用水样品（通常为10mL），加入一支无菌试管中。
3.3平板涂布和培养3.3.1使用无菌针或无菌量杯，从含有样品的无菌试管中取适量样品。
3.3.2将取样的无菌针或无菌量杯沿培养皿表面迅速来回划线，覆盖整个培养基面积。
3.3.3使用一把灭菌的铲子，平均分配样品于培养基上。
3.4培养和计数3.4.1如果使用了螺旋体和乳球菌选择性培养基，则将琼脂培养基培养皿和选择性培养基培养皿分别标记，并进行相应的培养条件。
3.4.2培养皿倒置，置于恒温培养箱中培养（通常为35-37°C，48小时）。
3.4.3按照要求进行菌落计数，包括可见的典型和非典型菌落。
3.4.4记录每个培养皿上菌落的数量。
4.数据处理和结果分析：4.1计算平均菌落总数：将每个培养皿上的菌落数量相加，并除以培养皿总数，得到平均菌落总数。
4.2结果分析和评估：将测得的平均菌落总数与国家或国际标准进行比较，评估包装饮用水的卫生安全性。
5.注意事项：5.1操作过程中严格遵守无菌操作规范，以防止样品污染和结果失真。
生活饮用水标准检验方法微生物指标
生活饮用水标准检验方法微生物指标1 菌落总数1.1 平皿计数法1.1.1 范围本标准规定了用平皿计数法测定生活饮用水及其水源水中的菌落总数。
本法适用于生活饮用水及其水源水中菌落总数的测定1.1.2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
1.1.2.1菌落总数standard plate-count bacteria 水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h 后，所得1mL 水样所含菌落的总数1.1.3培养基与试剂1.1.3.1营养琼脂1.1.3.11 成分：A蛋白胨10gB牛肉膏 3 gC氯化钠5gD琼脂10g~20gE蒸馏水1000mL1.1.3.1.2 制法：将上述成分混合后，加热溶解，调整pH为7.4 ～7.6 ，分装于玻璃容器中（如用含杂质较多的琼脂时，应先过滤），经103.43kPa（121℃，151b）灭菌20min，储存于冷暗处备用。
1.1.4 仪器1.1.4.1 高压蒸汽灭菌器。
1.1.4.2 千热灭菌箱。
1.1.4.3 培养箱36℃± 1℃。
1.1.4.4 电炉。
1.1.4.5 天平。
1.1.4.6 冰箱。
1.1.4.7 放大镜或菌落计数器。
1.1.4.8 pH 计或精密pH试纸。
1.1.4.9 灭菌试管、平皿（直径9cm）、刻度吸管、采样瓶等。
1.1.5 检验步骤1.5.1 生活饮用水。
1.1.5.1.1 以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中，倾注约15mL 已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。
每次检验时应做一平行接种同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。
1.1.5.1.2 待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36℃ ?℃培养箱内培养48h，进行菌落计数，即为水样1mL中的菌落总数。
1.1.5.2 水源水1.5.2.1以无菌操作方法吸取1mL充分混匀的水样，注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:10稀释液1.5.2.2吸取1:10的稀释液1mL注人盛有9mL灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:100稀释液。
生活饮用水中菌落总数的测定分析
生活饮用水中菌落总数的测定分析目的探讨生活饮用水中菌落总数的测定方法。
方法用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下，采取生活饮用水的样品，利用培养基制作平板。
对生活饮用水用平板菌落技术测定菌落总数从而判断生活饮用水是否符合国家标准，是否受到污染。
结果生活饮用水中菌落平均数为35,在国家饮用水标准范围之内。
结论本实验的成败在于灭菌、无菌操作技术、培养基的温度等方面是否操作正确，因此接种过程务必防止杂菌的侵入。
标签：生活饮用水；菌落总数在饮用水处理中，出厂水加氯消毒后进人管网，部分存活的微生物和管网中生物膜中的微生物会利用管网水中的微量生物降解有机物进行再生长［1］。
水质的好坏对人们生活起着至关重要的作用，而判断水质的标准，微生物在水中的数量、种类是必不可少的。
生活饮用水的微生物学指标检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。
我国生活饮用水卫生标准（GB 5749-2006）规定水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基即营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数不得大于100。
长期以来，国内多采用异养菌平板计数法和最大或然数计数法来测定饮用水中的活菌数．但由于饮用水中的贫营养环境有别于传统培养基提供的富营养环境，大多数在显微镜下观察到的细菌不能在传统培养基中生长，致使活菌计数结果偏低．近些年来，国外先后应用吖啶橙染色直接计数、活菌直接计数等方法对饮用水中的菌落总数及活菌数进行快速、直接的镜检计数．一些新的染色方法，如采用5一氰基一2，3一联甲苯四唑盐酸盐、核酸探针等对活细菌计数，都取得了很好地效果，国内这方面的研究却未见报道。
因平板计数法相对简单，本实验即采用本方法，用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下，采取生活饮用水的样品，利用培养基制作平板。
1资料与方法1.1 本实验于在昌吉州疾控中心实验楼微生物实验室完成。
`1.2 材料1.2.1实验材料生活饮用水1.2.2實验试剂牛肉膏蛋白胨NaCl1mol/LNaOH1mol/LHCl 蒸馏水1.2.3实验仪器高压蒸气灭菌锅培养皿三角烧瓶天平量筒玻璃棒电炉药匙pH试纸（pH5.5-9.0）温度计1.3实验方法1.3.1灭菌1.3.1.1首先将内锅层取出,再向外锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。
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饮用水中菌落总数的测定
饮用水是人们生活中必不可少的资源之一，因此其质量问题也非常重要。
菌落总数测
定是饮用水质量检验中的一项重要指标，它可以反映饮用水中微生物污染的情况。
本文将
介绍饮用水中菌落总数的测定方法。
一、实验原理
菌落总数测定是通过将水样分别接种在含营养物质的固体培养基上，在适宜的温度下
培养一定时间后，观察菌落形成的数量来表示水样中菌落总数的多少。
菌落总数包括细菌、真菌、放线菌等不同种类的微生物。
二、实验材料
1.培养基：通用营养琼脂培养基。
2.试剂：无菌纯水。
3.实验器材：培养皿、无菌玻璃滴管、高压蒸汽灭菌器、无菌工作台、温度控制器、
数码计数器等。
三、实验步骤
1. 准备工作：将通用营养琼脂培养基溶解，加入适当的营养成分，灭菌后，倒入消
毒好的培养皿中，存放于恒温箱内。
2. 取样：在取样前，应将集水设施、自来水输送管道和水龙头清洗干净，进行彻底
冲洗，然后使用无菌玻璃滴管从水源处取样，放入无菌瓶内。
3. 接种：将取出的水样用无菌玻璃滴管滴入消毒好的培养皿上，每个培养皿中加入
约1ml水样，然后轻轻摇晃培养皿，使水样与琼脂培养基充分混合。
4. 培养：消毒好的培养皿放入恒温箱中，在恒温箱内控制温度为35℃左右，培养时
间一般为24小时。
5. 统计菌落：在培养24小时后，取出培养皿，观察菌落的数量和形态，使用数码计
数器统计菌落数量。
四、实验注意事项
1. 取样前，应使用无菌玻璃滴管，避免外界细菌和真菌的污染。
2. 原水样取到之后应及时送到实验室或者进行现场测定，避免对样品存放时间过长
而影响实验结果。
3. 在接种培养皿时，应将培养皿扣开盖盖起来，避免细菌、真菌等污染。
4. 培养皿在放入恒温箱时，要均匀摆放，避免温度分布不均，影响菌落的生长。
5. 统计菌落时，应仔细观察，避免漏掉菌落数，影响实验结果。
五、实验结果分析
1.道路和公共场所的饮用水菌落总数标准为1000 CFU/ml。
通过菌落总数的测定可以了解饮用水中微生物的污染状况，若菌落总数超出标准值，
则说明水源存在严重的微生物污染，需要进行处理和消毒。
六、实验总结
本实验介绍了饮用水中菌落总数的测定方法，它是反映水质量的重要指标之一，也是
饮用水卫生监测的重要内容。
通过本实验，我们应该了解菌落总数测定的方法和注意事项，以及如何分析和判断实验结果。
同时也要认识到，保障饮用水质量和环境卫生是我们每个
人应该承担的责任。