农用微生物菌剂
农用微生物菌剂标准
农用微生物菌剂标准
农用微生物菌剂标准主要涉及《农用微生物菌剂GB20287-2006》这一标准。
这一标准主要对微生物肥料进行了规定，包括农用微生物菌剂和有机物料腐熟剂两大类产品。
对于农用微生物菌剂，标准中主要对其有效活菌数（cfu）进行了规定，要求液体产品的有效活菌数（亿/g（mL））不低于2.0，颗粒产品的有效活菌数不低于1.0。
同时，对于复合微生物菌剂，要求每一种有效菌的数量不得少于0.01亿/g(mL)，以单一的胶质芽胞杆菌(Bacillus mucilaginosus)制成的粉剂产品中有效活菌数不少于1.2亿/g。
此外，还对杂菌率、含水量、保质期等指标进行了规定。
农用微生物菌剂的使用方法
农用微生物菌剂的使用方法
农用微生物菌剂的使用方法主要有以下几种：
1. 蘸根：液态菌剂需要稀释10～20倍，在幼苗移栽前把根部浸入蘸湿后立即取出即可。
2. 喷根：当幼苗很多时，将10～20倍稀释液喷湿幼苗根部即可。
3. 灌根、冲施：按1∶100的比例将菌剂稀释，搅拌均匀后灌根或冲施。
4. 叶面喷施：在作物生长期内可以进行叶面追肥，把菌剂稀释500倍左右或按说明书要求的倍数稀释后，选择阴天无雨的日子或晴天下午以后，均匀喷施在叶子的背面和正面。
此外，产品的质量应与该产品包装上标注的相应标准一致。
如需了解更多使用方法，可以咨询农学专家或查阅农学书籍。
农用微生物菌剂在小白菜上的应用肥效试验总结
农用微生物菌剂在小白菜上的应用肥效试验总结引言一、农用微生物菌剂及其作用原理农用微生物菌剂是指利用农业微生物、特定微生物和微生物代谢物，通过生物技术手段提取、培养、选育以及复壮的微生态制剂，广泛用于农业生产中。
农用微生物菌剂不仅能够提高土壤肥力，减少化肥施用，还能够增强作物的抗逆性和抗病能力，对环境友好，并且可有效改善土壤生态环境。
农用微生物菌剂在农业生产中具有广阔的应用前景。
（二）作用原理农用微生物菌剂对小白菜的作用原理主要包括以下几个方面：1.提高土壤肥力：微生物菌剂中的有益微生物可以分解有机质，促进土壤中氮、磷、钾等无机养分的释放，大大提高土壤肥力。
2.促进植物生长：微生物菌剂中的有益微生物能够产生生长素和植物生长调节物质，促进植物的根系生长和株高增加。
3.抑制病虫害：微生物菌剂中的有益微生物能够产生抗生素和抗真菌物质，对小白菜生长中的病原微生物具有一定的抑制作用。
4.改善土壤环境：微生物菌剂中的有益微生物能够促进土壤团粒结构的形成，提高土壤保水保肥能力。
（一）试验设计为了全面了解农用微生物菌剂在小白菜上的应用效果，我们设计了以下试验方案：1. 随机选取一块面积相当的小白菜种植地，分为对照组和试验组。
2. 对照组采用常规施肥方式，试验组在常规施肥基础上使用农用微生物菌剂。
3. 对小白菜的生长情况、产量、品质等指标进行监测。
（二）试验结果经过一段时间的观察和实验，我们得到了以下结论：1.小白菜的生长情况：试验组小白菜的生长状况较对照组更加健壮，叶片色泽更加鲜绿，株高和叶片数量也较对照组明显增加。
2.小白菜的产量：试验组小白菜的产量较对照组有所提高，表明农用微生物菌剂对小白菜的生长产生了积极的促进作用。
三、结论与展望通过本次试验，我们得出了以下结论：2.农用微生物菌剂在小白菜上的应用相对于传统施肥方式，能够减少对化肥的需求，有利于环境保护和土壤改良。
展望未来，我们将进一步深入研究农用微生物菌剂的作用机制，探索更加适合小白菜生长的微生物菌剂制剂配方，并将其推广应用到更多的农业生产中，为打造绿色、健康的农产品做出更大的贡献。
农用微生物菌剂在小白菜上的应用肥效试验总结
农用微生物菌剂在小白菜上的应用肥效试验总结
农用微生物菌剂是一种利用生物技术代替化学肥料的新型肥料。
该菌剂可以促进植物
生长、改善土壤质量、提高产量和品质。
为了探究农用微生物菌剂在小白菜上的应用效果，我们进行了肥效试验，并总结如下：
1.试验设计
本试验采用完全随机化设计（CRD），设置以下4个处理组每组3个重复样：
对照组：不施肥处理；
化学肥料组：使用化肥进行肥料供应；
微生物菌剂组1：施用推荐剂量的微生物菌剂（1g/L）；
微生物菌剂组2：施用2倍剂量的微生物菌剂（2g/L）。
2.试验结果
（1）生长情况
使用微生物菌剂的小白菜生长情况良好，植株高度和叶面积均比对照组和化学肥料组
高出很多，微生物菌剂组2的生长情况更好。
（2）产量
使用微生物菌剂的小白菜产量显著增加，微生物菌剂组1的增产率为39.2%，微生物
菌剂组2的增产率为49.6%。
对照组和化学肥料组的产量无明显变化。
（3）品质
3.分析
微生物菌剂可以增加土壤微生物的数量和种类，促进植物的生长和发育，改善土壤的
质量。
微生物菌剂中含有大量的生长因子、胺基酸和微量元素，可以促进植物的吸收和利用。
另外，微生物菌剂还可以抑制土传病原菌和害虫的发生，提高植物的抗病能力。
因此，使用微生物菌剂可以提高小白菜的品质和产量。
4.结论
本试验结果表明，使用微生物菌剂可以显著提高小白菜的产量和品质，并且对土壤和
环境没有负面影响。
因此，微生物菌剂具有广泛的应用前景和推广价值。
农用微生物菌剂安全管理制度
农用微生物菌剂安全管理制度一、制度概述农用微生物菌剂安全管理制度旨在保障农产品质量安全，促进农业可持续发展。
通过规范农用微生物菌剂的生产、流通和使用等环节，确保农业生产过程中微生物菌剂的安全性和合法性，维护农民利益和消费者权益。
二、安全管理要求1.生产记录和追溯管理（1）微生物菌剂生产企业应建立完善的质量保证体系，确保生产过程符合相关法规和标准。
（2）生产企业应建立生产记录制度，对原料采购、加工、包装和检验等环节进行详细记录，确保可追溯性。
（3）产品应按照批次进行编号，记录其生产日期、数量、原料来源等信息，确保产品可追溯至源头。
2.质量控制和检测（1）生产企业应设立专门的质量控制部门，负责对原材料、半成品和成品进行质量检验。
（2）生产企业应按照相关标准进行微生物菌剂的质量控制，确保产品质量稳定且符合要求。
（3）产品出厂前应进行抽样检测，确保产品无害、有效，并符合相关规定。
3.包装和标识（1）微生物菌剂的包装材料应符合相关法规和标准，确保产品的安全性和稳定性。
（2）产品包装上应清晰标明产品名称、生产厂家、地址、生产日期、使用说明等信息。
（3）产品标识应采用规范的文字和图案，不得含有虚假、误导性内容。
4.运输和储存（1）微生物菌剂的运输应符合国家有关危险品运输的法规和标准，确保产品质量和安全。
（2）产品储存场所应干燥、通风、防潮，并远离高温和污染源。
（3）产品储存过程中应定期检查，防止过期、变质或污染。
三、安全使用要求1.适用作物和环境（1）微生物菌剂适用于农业生产中的各类作物，但在使用前应了解其适用范围和使用条件。
（2）使用前应对作物种类、生长阶段和土壤环境等因素进行评估，确保微生物菌剂的有效性和安全性。
2.使用方法和剂量（1）使用微生物菌剂时，应按照生产厂家提供的使用说明进行操作，确保使用方法和剂量的准确性。
（2）使用过程中应避免长时间暴露在高温、强光和潮湿环境中。
3.注意事项（1）使用微生物菌剂时，应确保个人和环境的安全，避免对人体和农产品造成危害。
农用微生物菌剂生产原料
农用微生物菌剂生产原料农用微生物菌剂是一种利用生物工程技术培养微生物菌种，经过发酵、提取和加工而制成的用于农业生产中的生物制剂。
它能够促进土壤养分的循环利用，改善土壤结构，提高农作物的抗性和产量，减少化肥和农药的使用量，对环境友好，因而被农业生产者广泛应用。
农用微生物菌剂的生产原料主要包括培养基和菌种。
培养基是微生物生长和发酵的营养物质的来源，菌种则是微生物生产菌剂的主要原料。
下面将详细介绍农用微生物菌剂生产原料的相关内容。
**一、培养基**培养基是微生物生长和发酵的营养物质的来源，它直接影响着微生物的生长速度和产量。
在农用微生物菌剂的生产中，常用的培养基有以下几种：1.碳源：碳源是微生物生长和菌种生产的基本物质，常用的碳源有葡萄糖、麦芽糖、甘油等。
碳源的种类和浓度对微生物的生长和发酵过程有着重要的影响。
2.氮源：氮源是微生物合成蛋白质和核酸的必需元素，常用的氮源有硝酸铵、硝酸钠、尿素等。
氮源的种类和浓度也会影响微生物的生长和发酵过程。
3.矿物盐和微量元素：矿物盐和微量元素是微生物生长和发酵的必需元素，它们通常以硫酸锌、硫酸镁、氯化钠等形式存在，能够满足微生物的生长和代谢需求。
4.生长因子：生长因子是一些有机化合物，是微生物生长和发酵的必需物质，常用的生长因子有烟酰胺、生物素、泛酸等。
它们能够促进微生物的生长和发酵，提高菌剂的产量和品质。
综上所述，培养基的组成成分及配比对于微生物的生长和发酵过程有着重要的影响，合理选用和配置培养基，可以提高微生物的生长速度和产量，提高菌剂的质量和效果。
**二、菌种**菌种是农用微生物菌剂的主要原料，决定着菌剂的种类和效果。
常用的菌种主要包括以下几种：1.两栖类菌种：两栖类菌种是常见的泥炭菌、根际菌，能够与作物根系共生，促进植物生长和养分吸收，提高作物的产量和品质。
2.固氮类菌种：固氮类菌种是一些能够将空气中的氮气转化为植物可利用的氨、硝酸盐和硫酸盐的微生物，它们能够提供植物所需的氮源，减少对化肥的需求，改善土壤肥力。
农用微生物菌剂在小白菜上的应用肥效试验总结
农用微生物菌剂在小白菜上的应用肥效试验总结
农用微生物菌剂是一种能够促进植物生长和改善土壤环境的生物制剂。
本次试验旨在探究农用微生物菌剂对小白菜生长和肥效的影响。
以下是试验总结。
本次试验选取了小白菜作为试验植物，分为对照组和微生物菌剂处理组。
对照组只施用了常规化肥，而微生物菌剂处理组在常规化肥的基础上加入了农用微生物菌剂。
试验过程中，每个处理组分为三个重复。
经过一段时间的观察和测量，得到以下试验结果。
从植物的生长情况来看，微生物菌剂处理组的小白菜生长更加茂盛。
与对照组相比，微生物菌剂处理组的小白菜株高、叶片数量和根系发育都更好。
这表明微生物菌剂能够促进小白菜的生长。
土壤肥力方面，微生物菌剂处理组的土壤含氮、含磷和含钾量显著高于对照组。
这表明微生物菌剂能够提高土壤的养分含量，有助于植物的吸收和利用。
微生物菌剂处理组的土壤 pH 值也有所改善，更加适宜植物的生长。
微生物菌剂处理组的小白菜品质也有所提升。
经过品尝和化验分析，微生物菌剂处理组的小白菜口感更加鲜嫩，而且含有更多的营养物质。
这可以归因于微生物菌剂的作用，它可以分解土壤中的有机物质，释放出植物所需的营养元素，并促进植物对这些元素的吸收。
农用微生物菌剂在小白菜上的应用能够显著促进小白菜的生长和改善土壤环境。
通过增加土壤中的养分含量和改善土壤 pH 值，微生物菌剂能够提高小白菜的产量和品质。
推荐农民在小白菜生产中使用农用微生物菌剂，以获得更好的农作物产量和经济效益。
微生物菌剂 营业执照范围
微生物菌剂营业执照范围微生物菌剂是一种应用于农业、环境保护等领域的有益微生物制剂，在提高农作物产量、改善土壤质量及水环境净化等方面具有重要作用。
本文主要介绍微生物菌剂营业执照的范围和相关规定。
二、微生物菌剂的定义微生物菌剂是指由细菌、真菌、放线菌、病毒等微生物制备而成的农用制剂，其作为菌剂主要是为了改善土壤生态环境，提高农作物产量和质量，减少农药使用，达到绿色、环保的农业生产目的。
三、微生物菌剂营业执照的范围1. 生物制剂生产企业的申请：从事微生物菌剂的生产、销售及相关技术服务的企业，需按照相关规定在工商部门申请微生物菌剂营业执照。
2. 营销企业的申请：从事微生物菌剂的销售及相关技术服务的企业，应按照相关规定在工商部门申请微生物菌剂营业执照。
3. 技术服务机构的申请：提供微生物菌剂技术服务、培训等支持的机构，需要具备相关资质，并按照要求在工商部门申请微生物菌剂营业执照。
4. 研究机构的申请：从事微生物菌剂研究的机构，需具备相关资质，并按照规定在工商部门申请微生物菌剂营业执照。
四、微生物菌剂营业执照的申请程序1. 预备工作：申请单位应准备好相关资质证明、申请书、申请表格等文件。
2. 提交申请：将准备好的文件提交至所在地工商部门，递交申请费用并填写相关申请表格。
3. 审核和核准：工商部门对提交的申请进行审核，审查申请材料的真实性和合法性，并核准是否发放微生物菌剂营业执照。
4. 缴纳费用和办理手续：费用核算完成后，申请单位需缴纳相应的手续费用，并按要求完成相关办理手续。
5. 领取执照：完成上述步骤后，申请单位可在约定时间内到工商部门领取微生物菌剂营业执照。
五、微生物菌剂营业执照的管理和审查1. 有效期限：微生物菌剂营业执照的有效期限为三年，有效期届满后需重新办理续期手续。
2. 监督检查：工商部门对持有微生物菌剂营业执照的企业和机构进行定期或不定期的监督检查，确保其经营活动符合相关规定和法律法规。
3. 违规处理：对存在违法违规行为的微生物菌剂企业和机构，工商部门将按照相关法律法规进行处理，包括但不限于警告、罚款、吊销执照等处罚。
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农用微生物菌剂（GB 20287-2006）前言本标准的5.1、5.3和第8章条文为强制性条款，其余为推荐性条款。
本标准的附录A、附录C和附录D为规范性附录，附录B为资料性附录。
农用微生物菌剂1范围本标准规定了农用微生物菌剂（即微生物接种剂）的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。
本标准适用于农用微生物菌剂类产品。
2规范性引用文件（略）3术语和定义（略）4产品分类产品按剂型可分为液体、粉剂、颗粒型；按内含的微生物种类或功能特性可分为根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂等。
5要求5.1菌种生产用的微生物菌种应安全、有效。
生产者应提供菌种的分类鉴定报告，包括属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据等完整资料。
生产者应提供菌种安全性评价资料。
采用生物工程菌，应具有允许大面积释放的生物安全性有关批文。
5.2产品外观（略）5.3产品技术指标5.3.1农用微生物菌剂产品的技术指标见表1，其中有机物料腐熟剂产品的技术指标按表2执行。
5.3.2农用微生物菌剂产品中无害化指标见表3。
6试验方法6.1仪器设备（略）6.2试剂（略）6.3产品参数的检测6.3.1外观(感官)的测定取少量样品放到白色搪瓷盘(或白色塑料调色板)中，仔细观察样品的颜色、形状、质地。
6.3.2有效活菌数的测定采用平板计数法，根据所测微生物的种类选用适宜的培养基。
若采用最大可能数（Most Probable Number，MPN）5管法，遵照附录C的规定。
6.3.2.1系列稀释称取样品10 g（精确到0.01 g），加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中)，静置20 min，在旋转式摇床上200 r/min充分振荡30 min，即成母液菌悬液（基础液）。
用无菌移液管分别吸取5.0mL上述母液菌悬液加入45 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。
6.3.2.2加样及培养每个样品取3个连续适宜的稀释度，用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。
每一稀释度重复3次，同时以无菌水作空白对照，于适宜的条件下培养。
6.3.2.3菌落识别根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。
当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应重做。
6.3.2.4菌落计数以出现20~300个菌落数的稀释度的平板为计数标准（丝状真菌为10~150个菌落数），分别统计有效活菌数目和杂菌数目。
当只有一个稀释度，其平均菌落数在20～300个之间时，则以该平均菌落数计算。
若有两个稀释度，其平均菌落数均在20～300个之间时，应按两者菌落总数之比值决定。
若其比值小于等于2应计算两者的平均数；若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。
有效活菌数按式（1）或式（2）计算：n m= kv1/(m0v2) ×10-8 (1)n v = kv1/(v0v2) ×10-8 (2)式中：n m —质量有效活菌数，亿/gn v —体积有效活菌数，亿/mL—菌落平均数，个k —稀释倍数v1 —基础液体积，mLv2 —菌悬液加入量，mLv0 —样品量，mLm0 —样品量，g6.3.3霉菌杂菌数的测定采用马丁培养基，测定方法同6.3.2。
6.3.4杂菌率的测定除样品有效菌外其它的菌均为杂菌。
样品中杂菌率按式（3）计算：m = n1/(n1+n)×100 (3)式中：m —样品杂菌率，%n1 —杂菌数，亿/g(mL)n—有效活菌数，亿/g(mL)6.3.5水分的测定将空铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃烘干 0.5 h，冷却后称量记录空铝盒的质量。
然后称取2份平行样品（颗粒型样品，应先粉碎过1.0 mm试验筛），每份20 g（精确到0.01 g），分别加入铝盒中并记录质量。
将装好样品的铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃下烘干4 h~6 h。
取出置于干燥器中冷却20 min后进行称量。
水分含量按式（4）计算（结果为两次测定的平均值）：w = (m1- m2)/( m1- m0) ×100 (4)式中：w —样品水分含量，%m0 —空铝盒的质量，gm1 —样品和铝盒的质量，gm2 —烘干后样品和铝盒的质量， g6.3.6细度的测定6.3.6.1粉剂样品称取样品50 g（精确到0.1 g），放入300 mL烧杯中，加200 mL水浸泡10 min~30 min后倒入孔径0.18 mm的试验筛中，然后用水冲洗，并用刷子轻轻地刷筛面上的样品，直至筛下流出清水为止。
将试验筛连同筛上样品放入干燥箱中，在105 ℃±2 ℃烘干4 h ~6 h。
冷却后称量筛上样品质量。
样品细度按式（5）计算：s={1- m1/[ m0（1-w）]} ×100 (5)式中：s —筛下样品质量分数，%m0 —样品质量， gw—样品含水量，%m1 —筛上干样品质量， g6.3.6.2颗粒样品称取样品50 g（精确到0.1 g），将两个不同孔径的试验筛（1.0 mm和4.75 mm）摞在一起放在底盘上(大孔径试验筛放在上面)。
样品倒入大孔径试验筛内筛样品，然后称小孔径试验筛上的样品质量。
颗粒细度按式（6）计算：g = m1 /m0 ×100 (6)式中：g —样品质量分数， %m1 —小孔径试验筛上样品质量，gm0 —样品质量， g6.3.7pH值的测定打开酸度计电源预热30 min，用标准溶液校准。
pH值的测定，每个样品重复三次，计算三次的平均值。
6.3.7.1液体样品用量筒取40mL样品放入50 mL的烧杯中，直接用酸度计测定，仪器读数稳定后记录。
6.3.7.2粉剂样品称取样品15 g，放入50 mL的烧杯中，按1:2(样品:无离子水)的比例将无离子水加到烧杯中(如果样品含水量低，可根据基质类型按1:3~1:5的比例加无离子水)，搅拌均匀。
然后静置30 min，测样品悬液的pH值，仪器读数稳定后记录。
6.3.7.3颗粒样品样品先研碎过1.0 mm试验筛，按照6.3.7.2的方法测定。
6.3.8粪大肠菌群数的测定应符合GB/T 19524.1《肥料中粪大肠菌群的测定》的规定。
6.3.9蛔虫卵死亡率的测定应符合GB/T 19524.2《肥料中蛔虫卵死亡率的测定》的规定。
6.3.10纤维素酶活、蛋白酶活的测定应符合附录D的规定。
6.3.11砷、镉、铅、铬、汞的测定应符合GB 18877—2002中的5.12~5.17的规定。
6.3.12保质期的检验在产品说明书标明的保质期前，按6.3.1~6.3.11方法测定产品相应指标。
7检验规则本标准中产品技术指标的数字修约应符合GB 8170的规定；产品质量合格判定应符合GB 1250中修约值比较法的规定。
7.1抽样按每一发酵罐菌液（或每批固体发酵）加工成的产品为一批，进行抽样检验，抽样过程严格避免杂菌污染。
7.1.1抽样工具无菌塑料袋(瓶)，金属勺、抽样器、量筒、牛皮纸袋、胶水、抽样封条及抽样单等。
7.1.2抽样方法和数量一般在成品库中抽样，采用随机法抽取。
抽样以件为单位，小包装以每一包装箱为一件。
随机抽取3~5件，每件中随机抽取一袋(瓶)；若每袋(瓶)包装小于500 g（mL）的产品，应多抽几件。
大包装产品以一袋(桶)为一件，随机抽取5~10件，在无菌条件下，每件取样500 g(mL)，然后将抽取样品混匀，按四分法分装3袋(瓶)，每袋（瓶）不少于500 g(mL)。
7.2检验分类（略）7.3判定规则7.3.1具下列任何一条款者，均为合格产品a. 检验结果各项技术指标均符合标准要求的产品；b. 在产品的外观、水分、细度、pH值等检测项目中，有1项不符合要求，而其它各项技术指标符合要求的产品。
7.3.2具下列任何一条款者，均为不合格产品a. 有效活菌数不符合技术指标；b. 霉菌杂菌数不符合技术指标；c. 杂菌率不符合技术指标；d. 粪大肠菌群不符合技术指标；e. 蛔虫卵死亡率不符合技术指标；f. 砷、镉、铅、铬、汞中任一含量不符合技术指标；g. 有机物料腐熟剂产品中所测酶活不符合技术指标；h. 在外观、水分、细度、pH值等检测项目中，有2项（含）以上不符合要求。
8包装、标识、运输和贮存参见NY 885-2004《农用微生物产品标识要求》附录 A 常用检测培养基参见NY/T 1114-2004《微生物肥料实验用培养基技术条件》附录 B（资料性附录）常用染色剂B.1革兰氏染色剂B.1.1结晶紫染色液（Hucker氏配方）甲液：结晶紫（Crystal violet） 2.0 g乙醇(95%) 20.0 mL乙液：草酸铵[(NH4)2C2O4•H2O] 0.8g蒸馏水 80.0 mL甲、乙两液相混，过滤，棕色瓶保存。
B.1.2卢哥(Lugol)氏碘液碘(I2)片 1.0 g碘化钾(KI) 2.0 g蒸馏水 300 mL先溶碘化钾于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，可稍加热，最后加足蒸馏水，棕色瓶保存。
B.1.3脱色液95%的乙醇液。
B.1.4复染液0.5%的番红水溶液（Safranin O)2.5%的番红酒精溶液 20 mL蒸馏水 80 mLB.2芽胞染色液B.2.1孔雀绿染色液（Malachite green）孔雀绿 5.0 g蒸馏水 100 mLB.2.20.5%番红染色液B.3石碳酸复红染色液甲液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 g95%酒精 10.0 mL乙液：石碳酸(Phenoecrystals C.P) 5.0 g蒸馏水 95 mL将甲、乙两液混合后即得石碳酸复红染色液原液。
染色时，将原液稀释5~10倍使用。
附录 C（规范性附录）稀释法（MPN 5管法）C.1稀释称取样品10.0 g，加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中)，静置20 min，在旋转式摇床上200 r/min充分振荡30 min，即得到1×101稀释度的菌悬液。
用无菌移液管吸取5.0mL上述菌悬液加入到装有45mL无菌水的三角瓶中，充分振荡摇匀，得到1×102稀释度的菌悬液，依此方法制成1×103、1×104、1×105……稀释度的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。