农用微生物菌剂
农用微生物菌剂标准
农用微生物菌剂标准
农用微生物菌剂标准主要涉及《农用微生物菌剂GB20287-2006》这一标准。
这一标准主要对微生物肥料进行了规定，包括农用微生物菌剂和有机物料腐熟剂两大类产品。
对于农用微生物菌剂，标准中主要对其有效活菌数（cfu）进行了规定，要求液体产品的有效活菌数（亿/g（mL））不低于2.0，颗粒产品的有效活菌数不低于1.0。
同时，对于复合微生物菌剂，要求每一种有效菌的数量不得少于0.01亿/g(mL)，以单一的胶质芽胞杆菌(Bacillus mucilaginosus)制成的粉剂产品中有效活菌数不少于1.2亿/g。
此外，还对杂菌率、含水量、保质期等指标进行了规定。
微生物菌剂使用方法
微生物菌剂使用方法微生物菌剂是一种利用微生物代谢产物来促进植物生长的生物制剂，它可以改善土壤环境、增加土壤肥力、提高作物产量和品质。
在农业生产中，正确的使用微生物菌剂对于提高作物产量、改善土壤质量具有重要意义。
下面将介绍微生物菌剂的使用方法。
1. 选用适合的微生物菌剂。
首先，根据作物种类和生长环境选择适合的微生物菌剂。
不同的微生物菌剂对不同的作物有不同的促进效果，因此在使用微生物菌剂之前，需要对土壤和作物进行充分的调查和分析，以确定最适合的微生物菌剂种类。
2. 合理施用微生物菌剂。
微生物菌剂的施用量应该根据土壤肥力、作物品种和生长期等因素进行合理调整。
通常情况下，可以将微生物菌剂与有机肥料一起使用，或者与种子一起拌匀后直接播种。
在施用微生物菌剂时，要注意均匀施用，避免出现局部过量或者不足的情况。
3. 注意施用时机。
微生物菌剂的施用时机对于促进作物生长起着至关重要的作用。
一般来说，微生物菌剂可以在作物生长的不同阶段进行施用，但最佳的施用时机通常是在播种前、苗期和开花期。
在这些时期，作物对微生物菌剂的吸收能力较强，能够更好地发挥微生物菌剂的促进作用。
4. 注意施用方式。
在使用微生物菌剂时，需要注意施用方式。
通常情况下，可以将微生物菌剂与水稀释后喷施在作物叶面或土壤表面，也可以直接将微生物菌剂均匀撒播在土壤表面。
无论采用哪种施用方式，都需要确保微生物菌剂能够充分接触到土壤或作物表面，以发挥最大的促进作用。
5. 注意施用环境。
最后，需要注意微生物菌剂的施用环境。
在施用微生物菌剂时，需要选择晴朗的天气，避免在雨天或高温天气施用，以免影响微生物菌剂的活性。
此外，还需要避免在强风天气下施用微生物菌剂，以防微生物菌剂被风吹散而影响施用效果。
总之，正确的使用微生物菌剂对于提高作物产量、改善土壤质量具有重要意义。
通过选择适合的微生物菌剂、合理施用微生物菌剂、注意施用时机、施用方式和施用环境，可以最大限度地发挥微生物菌剂的促进作用，从而实现农业生产的可持续发展。
微生物菌剂小知识
微生物菌剂小知识
微生物菌剂是由微生物制成的一种生物农药，具有高效、环保、安全等特点，可以用于农业、畜牧业、渔业等领域。
以下是微生物菌剂的一些小知识：
1. 微生物菌剂包括细菌、真菌等多种微生物，如乳酸菌、链霉菌等。
这些微生物可以产生有益的代谢产物，如有机酸、酶类、激素等，对植物、动物、水体等有良好的调节作用。
2. 微生物菌剂可以用于增加土壤肥力、改善土壤结构、提高作物产量和品质等。
比如，施用链霉菌可以分解有机质，释放营养元素，促进植物生长；施用乳酸菌可以降低土壤酸度，改善土壤结构，提高土壤抗逆性。
3. 微生物菌剂可以用于控制农业害虫、病原菌、臭味等。
比如，施用拮抗菌可以抑制植物病原菌的生长，减轻农业病害的发生；施用微生物菌剂还可以降解畜禽粪便中的有害物质，减少臭气和污染。
4. 微生物菌剂可以与化学农药、肥料等联合使用，提高作用效果，降低对环境的影响。
比如，施用微生物菌剂可以减少农药的用量，减轻对昆虫和环境的损害；施用微生物菌剂可以增加农作物对肥料的吸收利用率，降低肥料浪费和污染。
5. 微生物菌剂的使用需要注意一些问题，如存储条件、施用方法、剂量等。
要选择适合的微生物菌剂，并按照说明书的要求进行操作，以达到最佳效果。
同时，也需要遵守相关的环保法规，保护环境和人类健康。
农业生产中常见的微生物菌剂(一)2024
农业生产中常见的微生物菌剂（一）引言概述：农业生产中常见的微生物菌剂在现代农业中扮演着重要的角色。
微生物菌剂可以改善土壤环境、提高植物免疫力、促进植物生长和增加产量等多种作用。
本文将介绍农业生产中常见的微生物菌剂，并分为五个大点进行阐述。
一、固氮菌菌剂1. 通过与根瘤菌共生，促进植物吸收有机氮。
2. 能够固定大气氮，提供给植物供应。
3. 可以降低农作物对化学氮肥的需求。
4. 有助于改善土壤的氮素循环和保护环境。
二、解磷菌菌剂1. 能够释放固定在土壤中的磷，提高磷素的有效性。
2. 帮助植物吸收并利用磷素。
3. 改进土壤结构，增加土壤肥力。
4. 降低农作物对磷肥的使用量。
三、植物生长促进菌菌剂1. 产生植物生长激素，促进植物生长。
2. 改善植物根系的发育和分枝。
3. 提供植物所需的微量元素。
4. 抑制病原菌的生长，增强植物免疫力。
四、有益真菌菌剂1. 改善土壤结构，增强团聚力。
2. 促进土壤有机质分解和养分释放。
3. 抑制土传病原真菌的生长。
4. 有助于植物根系的吸收养分和水分。
五、抗逆菌菌剂1. 提高植物对环境逆境的抵抗能力。
2. 缓解气候变化和环境污染对农作物的影响。
3. 保护植物免受病原菌和其他有害微生物的侵袭。
4. 增加农作物产量和品质。
总结：微生物菌剂在农业生产中具有广泛的应用前景。
固氮菌菌剂、解磷菌菌剂、植物生长促进菌菌剂、有益真菌菌剂和抗逆菌菌剂在提高农作物产量、改善土壤质量和保护环境等方面发挥着重要的作用。
然而，对于微生物菌剂的研究和应用仍需进一步深入，以满足不同地区和不同作物的需求。
微生物菌剂名录
微生物菌剂名录全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：微生物菌剂作为一种新型的农业生物制剂，受到了越来越多农业生产者的关注和认可。
微生物菌剂通过改善土壤环境和促进植物生长，从而提高作物产量和品质，减少对化学农药的依赖，降低农业生产成本，对于实现绿色、可持续农业发展具有重要意义。
本文将介绍一些常见的微生物菌剂品种及其作用，帮助读者更好地了解和选择合适的微生物菌剂产品。
一、固氮微生物菌剂1. 红皮根固氮菌剂：本产品是一种能固氮的微生物菌剂，主要应用于大豆、绿豆、蚕豆等豆类植物上，通过与这些植物共生，促进植物吸收氮素，提高产量和品质。
2. 根瘤固氮菌剂：根瘤固氮菌剂是一种专门用于豆科植物的固氮菌剂，通过与这些植物的根系结合形成根瘤，帮助植物吸收大气中的氮气，提高氮素利用率，增加产量。
3. 甲烷氧化细菌固氮菌剂：这种微生物菌剂主要应用于水稻田和沼气池中，通过降解甲烷，促进氮素的循环和利用，从而增加氮肥利用效率，减少氮肥使用量。
二、生物促生菌剂1. 复合多效细菌促生菌剂：这种微生物菌剂是一种复合菌剂，包含多种对植物生长有益的细菌，可以促进作物生长、增加产量，提高植物对逆境的抗性。
2. 生长激素合成细菌促生菌剂：这种微生物菌剂可以合成生长激素，促进植物生长和分化，增加产量，改善作物的品质和抗逆性。
3. 铁磷促生菌剂：这种微生物菌剂富含产酸、溶磷细菌，可以提高土壤中铁、磷的有效性，促进植物吸收铁、磷，增加产量。
三、生物保护菌剂1. 根际拮抗细菌保护菌剂：这种微生物菌剂主要是一种对作物病原菌具有拮抗作用的细菌，可以在作物根际形成保护层，减少病原菌对作物的侵害。
2. 抗逆生物保护菌剂：这种微生物菌剂包含一些具有抗逆性的细菌，可以帮助作物应对逆境环境，增强作物的抗逆性，提高产量和品质。
3. 抗生素生物保护菌剂：这种微生物菌剂含有一些能产生抗生素的细菌，可以对抗作物病原菌，减少作物病害发生，提高农作物的生产效率。
综上所述，微生物菌剂在现代农业生产中具有重要的应用前景和发展潜力。
nyt883-2004 农用微生物菌剂生产技术规程
NYT883-2004农用微生物菌剂生产技术规程一、简介1.1 农用微生物菌剂的定义农用微生物菌剂是指利用微生物或微生物代谢产生物质在农业生产中起到促进作物生长、增强植物抗病性、改良土壤环境等作用的产品。
农用微生物菌剂包括微生物农药、微生物肥料和微生物调理剂。
1.2 规程的适用范围本规程适用于农用微生物菌剂的生产过程控制和质量管理，以及对生产设备、人员操作等方面的要求进行规定，保障农用微生物菌剂的生产质量和安全性。
二、质量管理2.1 原材料采购（1）对原材料的来源、质量要求进行认真审查，确保原材料符合生产要求。
（2）建立原材料供应商档案，定期进行评估和审查。
2.2 生产过程控制（1）制定严格的生产工艺流程，确保每个环节的质量控制。
（2）定期对生产设备进行维护和保养，确保设备的正常运转。
2.3 产品质量检验（1）建立完善的产品质量检验流程，包括原材料检验、中间品检验和成品检验。
（2）建立产品质量档案，对产品的质量进行追溯和记录。
三、环境管理3.1 厂房环境要求（1）坚持“清洁、整洁、干燥”的原则，确保生产环境符合卫生标准。
（2）对生产厂房进行定期的清洁和消毒处理。
3.2 废物处理（1）建立科学的废物处理制度，合理处理生产废水、废气和废渣。
（2）严格遵守环保法规和标准，确保废物排放达标。
四、安全管理4.1 生产人员培训（1）对生产人员进行岗前培训，确保他们了解生产工艺和安全操作规程。
（2）定期组织安全生产教育和培训，提高员工的安全意识。
4.2 事故应急预案（1）建立健全的事故应急预案，明确应急组织和责任。
（2）定期组织应急演练，提高员工应对突发事件的能力。
五、质量管理体系建设5.1建立质量管理文件（1）制定并不断完善质量管理文件，确保生产过程的标准化和规范化。
（2）建立质量管理档案，对相关文件进行管理和归档。
5.2 质量管理体系审核（1）建立质量管理体系审核制度，定期对质量管理体系进行内部审核。
（2）接受外部审核机构的审核，确保质量管理体系符合法律法规和标准要求。
微生物菌剂作用功效
微生物菌剂作用功效
微生物菌剂是一种生物农药，其中包含了一定数量的有益微生物，可以发挥多种作用和功效：
1. 生物防治：微生物菌剂中的有益微生物可以与有害生物竞争或直接对其进行杀灭，从而起到生物防治的作用。
如一些含有拮抗菌的微生物菌剂可以有效控制植物病原菌或害虫的生长和繁殖。
2. 促进植物生长：微生物菌剂中的有益微生物可以释放出促进植物生长的生长因子、激素或其他有益物质，帮助植物提高养分吸收和利用效率，增加产量和抗逆性，改善品质。
3. 改善土壤环境：微生物菌剂中的有益微生物可以分解有机物质，释放出植物营养素，改善土壤结构，提高土壤肥力，促进土壤生态系统的健康发展。
4. 降解有害物质：微生物菌剂中的某些微生物具有降解污染物的能力，可以有效分解农药、重金属等有害物质，降低对环境的污染。
5. 增强植物抗逆性：微生物菌剂中的有益微生物可以诱导植物产生抗逆酶系统、抗逆蛋白等物质，增强植物的抗寒、抗干旱、抗盐碱等逆境能力，提高植物的生存和生长能力。
总的来说，微生物菌剂可以利用微生物的多样性和多功能性，对农业生产和生态环境起到积极的促进和改善作用。
农业生产中常见的微生物菌剂(二)
农业生产中常见的微生物菌剂（二）引言概述:农业生产中常见的微生物菌剂是一种用于促进植物生长、预防病虫害和改善土壤质量的生物制剂。
这些微生物菌剂可以提供微生物的种群，通过与植物共生促进营养吸收和免疫力增强，同时还可以抑制一些病原微生物的生长。
本文将介绍农业生产中常见的一些微生物菌剂及其应用。
一、枯草杆菌1. 枯草杆菌可以制造溶解植物细胞壁的酶，帮助植物吸收养分。
2. 枯草杆菌具有抗病原菌的能力，可以对抗多种土壤传播的病虫害。
3. 枯草杆菌可以通过产生抗生素抑制其他有害菌的生长。
4. 枯草杆菌可促进作物的营养吸收，提高作物的产量和质量。
5. 枯草杆菌还可以增加土壤有机质含量，改良土壤结构。
二、乳酸菌1. 乳酸菌能够分解有机物质，产生大量的有机酸，有助于降低土壤的pH值。
2. 乳酸菌具有快速繁殖的能力，可以形成菌群在植物根部共生。
3. 乳酸菌可以生成大量的抗生素，具有抑制致病菌生长的作用。
4. 乳酸菌可以提高植物叶片中的叶绿素含量，增加光合作用效率。
5. 乳酸菌还可以降解土壤中的污染物，减少土壤的污染程度。
三、根瘤菌1. 根瘤菌与豆科作物共生，形成根瘤，为植物提供氮源。
2. 根瘤菌能够固氮，将无机氮转化为可供作物利用的有机氮。
3. 根瘤菌可以通过分泌生长激素，促进作物的生长和发育。
4. 根瘤菌能够和植物根系形成复合体，抵抗病原微生物的侵袭。
5. 根瘤菌还能够分解难降解有机物，促进土壤的有机质转化。
四、木霉菌1. 木霉菌可以分解植物残渣和有机肥料，释放出养分供植物吸收。
2. 木霉菌能够产生多种酶，对土壤中的有机物质进行分解。
3. 木霉菌能够促进植物的根系生长，增加根系吸收面积。
4. 木霉菌具有抗菌作用，可以抑制一些土壤病原微生物的生长。
5. 木霉菌还可以分解一些有毒物质，减少土壤重金属的污染。
五、腐败菌1. 腐败菌能够快速分解植物残渣和有机肥料，提供养分给植物。
2. 腐败菌能够产生酶，增加土壤中的有机物质供植物吸收。
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农用微生物菌剂（GB 20287-2006）前言本标准的5.1、5.3和第8章条文为强制性条款，其余为推荐性条款。
本标准的附录A、附录C和附录D为规范性附录，附录B为资料性附录。
农用微生物菌剂1范围本标准规定了农用微生物菌剂（即微生物接种剂）的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。
本标准适用于农用微生物菌剂类产品。
2规范性引用文件（略）3术语和定义（略）4产品分类产品按剂型可分为液体、粉剂、颗粒型；按内含的微生物种类或功能特性可分为根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂等。
5要求5.1菌种生产用的微生物菌种应安全、有效。
生产者应提供菌种的分类鉴定报告，包括属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据等完整资料。
生产者应提供菌种安全性评价资料。
采用生物工程菌，应具有允许大面积释放的生物安全性有关批文。
5.2产品外观（略）5.3产品技术指标5.3.1农用微生物菌剂产品的技术指标见表1，其中有机物料腐熟剂产品的技术指标按表2执行。
表1 农用微生物菌剂产品的技术指标表2 有机物料腐熟剂产品的技术指标5.3.2农用微生物菌剂产品中无害化指标见表3。
表3 农用微生物菌剂产品的无害化技术指标6试验方法6.1仪器设备（略）6.2试剂（略）6.3产品参数的检测6.3.1外观(感官)的测定取少量样品放到白色搪瓷盘(或白色塑料调色板)中，仔细观察样品的颜色、形状、质地。
6.3.2有效活菌数的测定采用平板计数法，根据所测微生物的种类选用适宜的培养基。
若采用最大可能数（Most Probable Number，MPN）5管法，遵照附录C的规定。
6.3.2.1系列稀释称取样品10 g（精确到0.01 g），加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中)，静置20 min，在旋转式摇床上200 r/min 充分振荡30 min，即成母液菌悬液（基础液）。
用无菌移液管分别吸取5.0mL上述母液菌悬液加入45 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×101，1:1×102，1:1×103，1:1×104……稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。
6.3.2.2加样及培养每个样品取3个连续适宜的稀释度，用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。
每一稀释度重复3次，同时以无菌水作空白对照，于适宜的条件下培养。
6.3.2.3菌落识别根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。
当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应重做。
6.3.2.4菌落计数以出现20~300个菌落数的稀释度的平板为计数标准（丝状真菌为10~150个菌落数），分别统计有效活菌数目和杂菌数目。
当只有一个稀释度，其平均菌落数在20～300个之间时，则以该平均菌落数计算。
若有两个稀释度，其平均菌落数均在20～300个之间时，应按两者菌落总数之比值决定。
若其比值小于等于2应计算两者的平均数；若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。
有效活菌数按式（1）或式（2）计算：n m= x kv1/(m0v2) ×10-8 (1)n v = x kv1/(v0v2) ×10-8 (2)式中：n m —质量有效活菌数，亿/gn v —体积有效活菌数，亿/mLx—菌落平均数，个k —稀释倍数v1 —基础液体积，mLv2 —菌悬液加入量，mLv0 —样品量，mLm0 —样品量，g6.3.3霉菌杂菌数的测定采用马丁培养基，测定方法同6.3.2。
6.3.4杂菌率的测定除样品有效菌外其它的菌均为杂菌。
样品中杂菌率按式（3）计算：m = n1/(n1+n)×100 (3)式中：m —样品杂菌率，%n1 —杂菌数，亿/g(mL)n—有效活菌数，亿/g(mL)6.3.5水分的测定将空铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃烘干0.5 h，冷却后称量记录空铝盒的质量。
然后称取2份平行样品（颗粒型样品，应先粉碎过1.0 mm试验筛），每份20 g（精确到0.01 g），分别加入铝盒中并记录质量。
将装好样品的铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃下烘干4 h~6 h。
取出置于干燥器中冷却20 min后进行称量。
水分含量按式（4）计算（结果为两次测定的平均值）：w = (m1- m2)/( m1- m0) ×100 (4)式中：w —样品水分含量，%m0 —空铝盒的质量，gm1 —样品和铝盒的质量，gm2 —烘干后样品和铝盒的质量，g6.3.6细度的测定6.3.6.1粉剂样品称取样品50 g（精确到0.1 g），放入300 mL烧杯中，加200 mL水浸泡10 min~30 min后倒入孔径0.18 mm的试验筛中，然后用水冲洗，并用刷子轻轻地刷筛面上的样品，直至筛下流出清水为止。
将试验筛连同筛上样品放入干燥箱中，在105 ℃±2 ℃烘干4 h ~6 h。
冷却后称量筛上样品质量。
样品细度按式（5）计算：s={1- m1/[ m0（1-w）]} ×100 (5)式中：s —筛下样品质量分数，%m0 —样品质量， gw—样品含水量，%m1 —筛上干样品质量， g6.3.6.2颗粒样品称取样品50 g（精确到0.1 g），将两个不同孔径的试验筛（1.0 mm和4.75 mm）摞在一起放在底盘上(大孔径试验筛放在上面)。
样品倒入大孔径试验筛内筛样品，然后称小孔径试验筛上的样品质量。
颗粒细度按式（6）计算：g = m1 /m0 ×100 (6)式中：g —样品质量分数， %m1 —小孔径试验筛上样品质量，gm0 —样品质量， g6.3.7pH值的测定打开酸度计电源预热30 min，用标准溶液校准。
pH值的测定，每个样品重复三次，计算三次的平均值。
6.3.7.1液体样品用量筒取40mL样品放入50 mL的烧杯中，直接用酸度计测定，仪器读数稳定后记录。
6.3.7.2粉剂样品称取样品15 g，放入50 mL的烧杯中，按1:2(样品:无离子水)的比例将无离子水加到烧杯中(如果样品含水量低，可根据基质类型按1:3~1:5的比例加无离子水)，搅拌均匀。
然后静置30 min，测样品悬液的pH值，仪器读数稳定后记录。
6.3.7.3颗粒样品样品先研碎过1.0 mm试验筛，按照6.3.7.2的方法测定。
6.3.8粪大肠菌群数的测定应符合GB/T 19524.1《肥料中粪大肠菌群的测定》的规定。
6.3.9蛔虫卵死亡率的测定应符合GB/T 19524.2《肥料中蛔虫卵死亡率的测定》的规定。
6.3.10纤维素酶活、蛋白酶活的测定应符合附录D的规定。
6.3.11砷、镉、铅、铬、汞的测定应符合GB 18877—2002中的5.12~5.17的规定。
6.3.12保质期的检验在产品说明书标明的保质期前，按6.3.1~6.3.11方法测定产品相应指标。
7检验规则本标准中产品技术指标的数字修约应符合GB 8170的规定；产品质量合格判定应符合GB 1250中修约值比较法的规定。
7.1抽样按每一发酵罐菌液（或每批固体发酵）加工成的产品为一批，进行抽样检验，抽样过程严格避免杂菌污染。
7.1.1抽样工具无菌塑料袋(瓶)，金属勺、抽样器、量筒、牛皮纸袋、胶水、抽样封条及抽样单等。
7.1.2抽样方法和数量一般在成品库中抽样，采用随机法抽取。
抽样以件为单位，小包装以每一包装箱为一件。
随机抽取3~5件，每件中随机抽取一袋(瓶)；若每袋(瓶)包装小于500 g（mL）的产品，应多抽几件。
大包装产品以一袋(桶)为一件，随机抽取5~10件，在无菌条件下，每件取样500 g(mL)，然后将抽取样品混匀，按四分法分装3袋(瓶)，每袋（瓶）不少于500 g(mL)。
7.2检验分类（略）7.3判定规则7.3.1具下列任何一条款者，均为合格产品a. 检验结果各项技术指标均符合标准要求的产品；b. 在产品的外观、水分、细度、pH值等检测项目中，有1项不符合要求，而其它各项技术指标符合要求的产品。
7.3.2具下列任何一条款者，均为不合格产品a. 有效活菌数不符合技术指标；b. 霉菌杂菌数不符合技术指标；c. 杂菌率不符合技术指标；d. 粪大肠菌群不符合技术指标；e.蛔虫卵死亡率不符合技术指标；f. 砷、镉、铅、铬、汞中任一含量不符合技术指标；g. 有机物料腐熟剂产品中所测酶活不符合技术指标；h. 在外观、水分、细度、pH值等检测项目中，有2项（含）以上不符合要求。
8包装、标识、运输和贮存参见NY 885-2004《农用微生物产品标识要求》附录 A 常用检测培养基参见NY/T 1114-2004《微生物肥料实验用培养基技术条件》附录 B（资料性附录）常用染色剂B.1革兰氏染色剂B.1.1结晶紫染色液（Hucker氏配方）甲液：结晶紫（Crystal violet） 2.0 g乙醇(95%) 20.0 mL乙液：草酸铵[(NH4)2C2O4•H2O] 0.8g蒸馏水 80.0 mL甲、乙两液相混，过滤，棕色瓶保存。
B.1.2卢哥(Lugol)氏碘液碘(I2)片 1.0 g碘化钾(KI) 2.0 g蒸馏水 300 mL先溶碘化钾于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，可稍加热，最后加足蒸馏水，棕色瓶保存。
B.1.3脱色液95%的乙醇液。
B.1.4复染液0.5%的番红水溶液（Safranin O)2.5%的番红酒精溶液 20 mL蒸馏水 80 mLB.2芽胞染色液B.2.1孔雀绿染色液（Malachite green）孔雀绿 5.0 g蒸馏水 100 mLB.2.20.5%番红染色液B.3石碳酸复红染色液甲液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 g95%酒精 10.0 mL乙液：石碳酸(Phenoecrystals C.P) 5.0 g蒸馏水 95 mL将甲、乙两液混合后即得石碳酸复红染色液原液。
染色时，将原液稀释5~10倍使用。
附录 C（规范性附录）稀释法（MPN 5管法）C.1稀释称取样品10.0 g，加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL 加入90 mL的无菌水中)，静置20 min，在旋转式摇床上200 r/min充分振荡30 min，即得到1×101稀释度的菌悬液。
用无菌移液管吸取5.0mL上述菌悬液加入到装有45mL无菌水的三角瓶中，充分振荡摇匀，得到1×102稀释度的菌悬液，依此方法制成1×103、1×104、1×105……稀释度的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。