第四章 非细胞微生物-病毒与亚病毒习题及答案

第四章病毒习题

一、名词解释

1．烈性噬菌体(virulent phage)

2．溶源性(lysogeny)

3．温和噬菌体(temperate phage)：

4．原噬菌体

5．溶源性细菌

6．自发裂解

7．诱发裂解

8．半数致死剂量

9．包涵体

10．卫星RNA

11．类病毒(viroid)：

12．一步生长曲线

13．逆转录病毒

14．噬菌斑(plaque)

二、填空题

1、病毒的存在范围是病毒能够感染并在其中复制的。

2、从原核生物中分离的病毒统称噬菌体，它们包括、和等。

3、病毒属名的词尾是、科名的词尾是、亚科名的词尾是，目名的词尾是。

4、纯化的病毒制备物应保持其和。

5、血凝抑制试验是根据异性的病毒抗体与病毒表面蛋白作用可能抑制性质设计的。

6、螺旋对称病毒体的直径是由决定的，而其长度则是由所决定的。

7、病毒蛋白质根据其是否存在于毒粒中分为和两类。

8、病毒包膜糖蛋白是由多肽链骨架与寡糖侧链，通过将糖链的与肽链的连接形成。

9、由一步生长曲线可获得病毒繁殖的两个特征性数据，即潜伏期和裂解量。前者为所需的最短的时间，后者为的平均数目。

10、病毒的复制过程依其发生事件顺序分为以下、、、和5个阶段。

三、选择题

1、病毒显著区别于其他生物的特征是（）。

A．具有感染性 B.独特的繁殖方式

C．体积微小 D.细胞内寄生

2、病毒纯化方法均是根据病毒的基本理化性质建立的，包括（）

A.病毒的核酸是DNA或是RNA;

B.病毒的主要化学组成是蛋白质;

C.病毒含有脂类和糖类;

D.病毒体积微小

3、病毒物现颗粒计数方法测定的是（）。

A.有活力的病毒数量

B.无活力的病毒数量

C.有活力的病毒与无活力病毒数量的总和

D.致病性的病毒数量

4、描述螺旋对称壳体特征的参数有（）。

A.核酸的相对分子质量

B.螺旋长度与直径

C.螺旋的外观

D.蛋白质亚基大小

5、SsRNA能够按照它的极性或意义分为（）。

A.感染性核酸和和非感性核酸;B正链RNA，负链RNA和双意RNA; C.反意RNA 和正意RNA;D.嗜肝DNA 病毒

7、T4噬菌体的装配包括的亚装配过程有（）。

A.2个.B3个 C.4个 D. 5个

8、构成机体病毒感染的因素包括（）

A.病毒的感染途径和传传播媒介 C.病毒、机体和环境条件

C.病毒致病性和毒力

D.病毒的宿主范围

9、温和性噬菌体基因组在溶源性细菌内可以下列状态存在（）。

A.复制、表达产生子病毒

B.整合于宿主染色体或质粒形式

C.自发或经诱导进入裂解循环

D.产生成熟的病毒颗粒

10、DI颗粒的基因组有（）。

A.置换突变

B.缺失突变

C.移框突变

D.重组

四、是非题

1、病毒只含有一种核酸，DNA或是RNA。

2、病毒几乎可以感染的有的细胞生物，但就某一种病毒而言，它仅能感染一定种类的微生物、植物或动物。

3、ICTV是国际病毒命名委员会的缩写。

4、分离病毒的标本为避免细菌污染须加入抗生素除菌，亦可用离心或过滤方法处理。

5、以高浓度的噬菌体悬液接种细菌平板，经过一定时间培养后可形成单个噬菌斑。

6、在病毒分离时，经盲传3代仍无感染症状出现，便可认定没有病毒存在。

7、在终点测定中，病毒效价以50%试验单元出现感染反应的病毒稀释液的稀释度的对数值表示。

8、在拓朴等价多面体中，在表面积一定时以二十面体容积为最大，故病毒壳体多取二十面体对称结构。

9、病毒包膜系病毒以芽出方式成熟时自细胞膜衍生而来，故其结构和脂质种类与含量皆与细胞膜相同。

10、病毒具有感染性，且核酸是病毒的遗传物质，故所有病毒的基因组核酸都是感染性核酸。

五、简答题

1. 简述病毒的特点。

2．病毒区别于其他生物的特点是什么？

3．病毒分类原则与命名规则的主要内容有哪些？

4．病毒壳体结构有哪几种对称形式？毒粒的主要结构类型有哪些？

5．病毒核酸有哪些类型和结构特征？

6.简述烟草花叶病毒的构造。

7．简述腺病毒的构造。

8．表解偶数噬菌体的构造。

9．简述溶原性细菌的特点。

10．试述烈性噬菌体的侵染循环。

11．试述植物病毒的主要特点。

12．噬菌体效价？如何测定噬菌体的效价？

13．噬菌体感染可能给宿主细胞带来什么影响？

六、论述题

1、病毒的复制循环分为哪几个阶段，各个阶段的主要过程如何？

2、病毒与生产实际的关系。

3、亚病毒有哪些类，各类有何特点？

4．某发酵工厂的生产菌株疑为溶源菌，试设计一个鉴定该菌株是否为溶源菌的实验方案。

习题答案

一、名词解释

1．烈性噬菌体：感染细菌后，能在细胞内正常复制，并最终杀死细胞的噬菌体。

2．溶源性：感染细胞后噬菌体不能完成复制循环，噬菌体基因组长期存在于宿主细胞内，没有子代噬菌体产生的现象。

3．温和噬菌体(temperate phage)：能够导致溶源性发生的噬菌体，又称溶源性噬菌体。

4．原噬菌体：整合于细菌染色体或以质粒形式存在的温和噬菌体基因组。

5．溶源性细菌：细胞中含有以原噬菌体状态存在的温和噬菌体基因组的细菌。

6．自发裂解：自然情况下的溶源性细菌的裂解，但裂解量较少。

7．诱发裂解：经紫外线、环氧化合物等理化因子处理，溶源性细菌发生的大量裂解。

8．半数致死剂量：使半数试验宿主死亡的病毒剂量。

9．包涵体：病毒感染细胞内出现的特异性染色区域。不同病毒所形成的包涵体在细胞质和／或细胞核内的定位不同；其染色性质亦不同，即有的嗜酸性染料，有的嗜碱性染料；并且其大小、形态亦有所区别，所以包涵体在病毒的实验诊断具有一定的意义。包涵体是病毒复制所产生的复制复合物、转录复合物、装配中间体，所合成的核壳和毒粒累积在宿主细胞的特定区域内而形成的，称之为病毒工厂的结构。10．卫星RNA：必须依赖于辅助病毒进行复制的小分子单链RNA片段，它被包装在其辅助病毒的壳体中，其对于辅助病毒的复制不是必需的，它们与辅助病毒基因组无明显的同源性，但其存在往往可影响辅助病毒引起的感染症状。

11. 类病毒：是含有侵染性RNA分子，没有蛋白质外壳的一类植物病毒。

12. 一步生长曲线：以培养时间为横坐标，噬菌斑数为纵坐标所绘制的曲线，用以测定噬菌体侵染和成熟病毒体释放的时间间隔，并用以估计每个被侵染的细胞释放出来的噬菌体粒子数量的生长曲线称为一步生长曲线。

13. 逆转录病毒：这一类病毒含有逆转录酶，在该酶的作用下，能以病毒自身的（+）RNA为模扳，合成（-）DNA，再以（-）DNA为模板合成（+）DNA，（+）DNA可以作为模板转录mRNA后合成蛋白质。14．噬菌斑(plaque)：当寄主细胞被噬菌体感染后细胞裂解，在菌苔上出现的一些无色透明空斑（负菌落）。

二、填空

1、宿主种类和组织细胞种类；

2、噬菌体，噬蓝藻体，噬支原体；

3、virus viridae virinae virales；

4、

感染性，理化性质的均一性；5、.病毒的血细胞凝集；6、蛋白质亚基的大小，病毒核酸分子的长度；7、.结构蛋白，非结构蛋白；8、β-N-糖苷键，N一乙酰葡糖胺天冬酰胺残基；9、.病毒吸附于细胞到子代病毒释放每个受染细胞释放的子代病毒；10、吸附、侵入脱壳病毒大分子合成装配与释放

三、选择题

1.B、

2.B、

3.C、

4.B、

5.B、

6.A、

7.C、

8.B、

9.B、10.B

四、是非题

1.√、

2.√、

3.×、

4.√、

5.×、

6.×、

7.×、

8.√、

9.√、10.×

五、简答题

1. 简单叙述病毒的特点。

答：①个体极小。大多数直径小于150纳米。

②专性寄生。

③没有细胞结构，只有一种核酸类型，化学组成和繁殖方式都较简单。

④没有或缺乏完整的酶和能量合成系统，也没有核糖体。

⑤在寄主细胞内的病毒对各种化学药剂和抗菌素不敏感（对干扰素敏感）。

⑥经提纯的病毒结晶能保持侵染力

2．病毒区别于其他生物的特点是什么？

答：结构简单，独特的繁殖方式，绝对的细胞内寄生，生命形式的竺童性

3．病毒分类原则与命名规则的主要内容有哪些？

答：分类原则，包括病毒形态、毒粒结构，基因组、复制、化学组成在内的毒粒性质，病毒的打原性质及生物学性质。

命名规则：分类等级、病毒“种”及种的命名，病毒属、病毒科、病毒亚季及病毒目的相应名的词尾。4．病毒壳体结构有哪几种对称形式？毒粒的主要结构类型有哪些？

答：螺旋对称、二十面体对称、复合对称。裸露的螺旋对称毒粒和二十面体毒粒，有包膜的毒粒和二十面体毒粒、复杂毒粒图像。其优良性状。

5．病毒核酸有哪些类型和结构特征？

答：病毒DNA分子有线状和环状之分。病毒核酸有正链（＋）和负链（—）的区分：因此，就病毒核酸链的单与双以及正和负有以下六种类型：①(±)DNA——大部分DNA病毒；②(±)RNA——动物呼肠孤病毒；③（＋）DNA ——大肠杆菌fX174噬菌体；④（＋）RNA——所有单链RNA病毒\大部分植物病毒；

⑤（-）DNA——腺病毒；⑥（-）RNA ——流感病毒。

6．简述烟草花叶病毒的构造。

答：（1）外形：直杆状，长300nm，宽15nm，中空（内径4nm）；

（2）成分；衣壳蛋白（占95%）+ssRNA（占5%）

（3）构造

①衣壳：由2130个称作衣壳的蛋白亚基组成；每个衣壳含158个氨基酸；衣壳粒以逆时针方向做螺旋状排列（共130圈）。

②核心：为一长链状ssRNA（含6390个核苷酸）；相对分子量2X106。

7．简述腺病毒的构造。

答：（1）形态：球形（直径70-80nm），二十面体对称（有12个角，20个面，30条棱）

（2）构造：

①衣壳：由252个衣壳粒组成（五邻体12个，六邻体240个），每个五邻体上突出一根有顶球的刺突。

②核心：由线状dsDNA组成（长度36500bp）。

8．表解偶数噬菌体的构造。

T偶数噬菌体（T even phage），即大肠杆菌T2噬菌体，T4噬菌体，T6噬菌体。三者形态为复合对称，蝌蚪状，由头部、颈部和尾部构成。

┌衣壳：由212个衣壳粒组成。

┌头部│

│└核心：为线状dsDNA（1.7X105bp）

│┌颈环:为六角形蛋白质盘状物

蝌蚪状（复合对称）│颈部│

│└颈须:长在景环上的6根蛋白质撕状物.

│┌尾鞘:由衣壳粒排成24环的螺旋管

││尾管:位于尾鞘内的24环螺旋管

└尾部│基板:六角形蛋白质盘状物

│刺突:长在基板上的6个尖钉状突起物质

└尾丝;长在基板上的6根蛋白丝(长140nm)

9．简述溶原性细菌的特点。

答：①可稳定遗传性：子代细菌都含有原噬菌体，均具有溶原性；②自发裂解：温和噬菌体的核酸也可从宿主DNA上脱落下来，恢复原来的状态，进行大量的复制，变成烈性噬菌体，自发裂解几率10-2～10-5；

③诱导裂解：用化学、物理方法诱导；④具有免疫性：即溶原性细菌对其本身产生的噬菌体或外来的同源（相关）噬菌体不敏感，这些噬菌体虽可进入溶原性细菌，但不能增殖，也不能导致溶原性细菌裂解；

⑤溶原性细菌的复愈。⑥溶源转变：由于溶原菌整合了温和噬菌体的核酸而使自己产生一些新的生理特征。10．试述烈性噬菌体的侵染循环。

答：烈性噬菌体侵入寄主的过程如下：

（1）吸附：噬菌体与敏感的寄主细胞的特异性受点相结合，直至达到饱和吸附，设定噬菌体数量为N。游离噬菌体→与宿主相遇→尾丝与宿主表面受体接触→以刺突和基板固着在宿主表面。

（2）侵入：噬菌体核酸注入细胞中，壳体留在细胞外，表面看到的壳体数仍为N。尾丝收缩→尾鞘收缩→尾管端的溶菌酶水解宿主细胞壁肽聚糖→核酸注入宿主细胞。

（3）核酸复制及生物合成：此阶段在细胞内进行，此阶段看不到噬菌体，称潜伏期。噬菌体核酸向宿主发出指令→宿主代谢系统转向→大量的噬菌体核酸、蛋白质和酶类被合成。

（4）粒子成熟：噬菌体粒子在细胞内组装完成。噬菌体DNA分子缩合→DNA经衣壳包裹后形成头部→装上颈部→安装基板、尾管和尾鞘→再状上尾丝后形成游离噬菌体粒。

（5）寄主细胞裂解：噬菌体大量释放出来，设此时噬菌体数为M，则M N。

所释放出的病毒粒子如遇适当寄主，可立即进行吸附直至完成下次侵染循环。

11. 试述植物病毒的主要特点。

答：植物病毒种类繁多，绝大多数种子植物均能发生病毒病。但植物病毒有其共同的主要特点：

（1）大多数植物病毒是单链RNA病毒，多为杆状，线状等；

（2）植物病毒为寄生物，但专性不强，一种病毒往往能寄生于不同种属的植物上；

（3）一种病毒引起不同植物患病时，其症状不同；混合感染时引起的症状与单独感染完全不同；

（4）植物病毒主要靠昆虫传播或伤口传染或通过胞间连丝传播。

12. 噬菌体效价？如何测定噬菌体的效价？

答：噬菌体效价表示每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数，又称噬菌斑形成单位（pfu）或感染中心

测定方法：双层平板法、电镜直接记数法。

用双层平板法测出的效价比用电镜直接记数得到的效价低。前者是计有感染力的噬菌体粒子，后者是计噬菌体的总数。

13．噬菌体感染可能给宿主细胞带来什么影响？

答：①抑制宿主细胞大分子合成：抑制宿主基因的转录、蛋白质合成、DNA合成；改变宿主限制系统；

②噬菌体释放对细胞的影响：细胞表面免疫学性质的改变，细胞膜失去稳定；

③溶源性感染对细胞的影响：免疫性、溶源性转变。

六、论述题

1．病毒的复制循环分为哪几个阶段，各个阶段的主要过程如何？

答：吸附：病毒吸附蛋白、细胞受体、辅助受体、病毒的吸附过程；侵人：噬菌体、动物病毒、植物病毒的侵人方式；脱壳：病毒的包膜和／或壳体除去而释放出病毒核酸；病毒大分子合成：噬菌体、动物病毒、植物病毒大分子合成的特点；装配与释放：噬菌体、动物病毒、植物病毒装配与释放的方式。

2．病毒与生产实际的关系。

答：病毒可引起多种传染性疾病；发酵工业中噬菌体污染可导致倒罐；昆虫病毒可用作生物杀虫剂；有些细菌病毒可用于疾病治疗；基因工程中的载体。

3．亚病毒有哪些类，各类有何特点？

答：真病毒是一种极为简单的生命形式，却不是最简单的生命形式。而亚病毒没有真病毒的形态结构，能利用非自身编码的酶系统进行复制，有侵染性，并可在寄主中引起症状。

类病毒：只含有RNA，不含蛋白质的具侵染性的颗粒，为引起植物病害的病原体；拟病毒：一类包裹在真病毒中的裸露的RNA或DNA，复制必须依赖辅助病毒的协助，植物病毒和动物病毒中都有发现。

拟病毒：是一种类似于类病毒的病毒，其核酸组成，大小、二级结构（分子内部的碱基配对形成的二级结构）均与类病毒相似，碱基对350个左右，但需要依靠辅助病毒才能复制。

朊病毒：一类能引起哺乳动物亚急性海绵样脑传染病的致病因子。至今已发现能引起10余种人和动物疾病如人的库鲁病、克雅氏病、羊瘙痒症和疯牛病等。

卫星RNA（卫星病毒），是指一些必须依赖于辅助病毒才能复制的小分子单链RNA片段，它被包装在辅助病毒的包体中，本身对于辅助病毒的复制不是必需的，且它与辅助病毒的基因无明显的同源性。卫星病毒正如病毒利用寄主细胞的能量、原料及酶一样，故可以认为卫星病毒是寄生于辅助病毒的小分子寄生物。4．某发酵工厂的生产菌株疑为溶源菌，试设计一个鉴定该菌株是否为溶源菌的实验方案。

答：将供试菌株制成菌悬液，置于低剂量紫外线下照射处理后，与营养琼脂培养基混匀后倒平板，经培养后观察平板上长出的菌落情况，由于溶源菌细胞内的前噬菌体经低剂量紫外线下照射处理后，会转变成裂性噬菌体，进入裂解性循环，使细胞破裂，即诱发裂解，这时便会在菌苔上形成噬菌斑。如果出现噬菌斑，则证明该菌株为溶源菌。

5．论述三类主要昆虫病毒。

答：（1）核型多角体病毒（NPV）：是一类在昆虫细胞核内增殖、具有蛋白质包含体的杆状病毒。数量最多。如桑毛虫核型多角体病毒等，其杀虫过程是：病毒粒侵入宿主的中肠上皮细胞→进入体腔→经吸附后进入血细胞、脂肪细胞等多种细胞→大量增殖、重复感染→宿主生理功能紊乱→组织坏死→昆虫死亡。（2）质型多角体病毒（CPV）：是一类在昆虫细胞质内增殖，可形成蛋白质含体的球状病毒，如家蚕、马尾松毛虫和棉铃虫的质型多角体病毒等。其杀虫机理是：CPV金昆虫口腔进入消化道→碱性胃液溶解多角体→释放病毒粒→侵入中肠上皮细胞→在宿主细胞核内合成核酸→在细胞质内装配成病毒粒→病毒粒包埋入多角体中。

（3）颗粒体病毒（GV）：一类具蛋白质包含体且每一包含体内通常仅含有一个病毒粒的昆虫杆状病毒。如菜青虫、小菜蛾和菜粉蝶的颗粒体病毒。