细菌培养实验报告(新)
培养细菌实验报告
一、实验目的1. 学习细菌培养的基本原理和方法。
2. 掌握细菌纯培养的操作步骤。
3. 了解培养基的制备和灭菌方法。
4. 通过实验，观察细菌的生长情况，并学会对细菌进行初步鉴定。
二、实验原理细菌是一类单细胞微生物，它们需要一定的营养物质、水分、适宜的温度和pH等条件才能生长繁殖。
在实验室中，我们通常使用培养基来为细菌提供所需的营养物质。
培养基的制备和灭菌是细菌培养过程中的关键步骤。
通过纯培养，可以得到单一的细菌菌株，便于对其进行观察和鉴定。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：牛肉膏蛋白胨培养基、普通琼脂培养基、无菌水、接种环、接种针、培养皿、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等。
2. 试剂：牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠、氢氧化钠、盐酸、硫酸铜、碘液等。
四、实验步骤1. 培养基的制备（1）称取牛肉膏5g、蛋白胨10g、氯化钠5g，加入100mL蒸馏水。
（2）加热溶解，用氢氧化钠溶液调节pH至7.2-7.4。
（3）加入1.5g琼脂，加热溶解。
（4）分装到无菌培养皿中，待冷却凝固。
2. 培养基的灭菌将制备好的培养基放入高压蒸汽灭菌器中，121℃灭菌15分钟。
3. 细菌接种（1）将待培养的细菌接种环在火焰上灼烧，待冷却后，蘸取少量细菌，轻轻划线于琼脂平板上。
（2）重复上述操作，接种3-5个平板。
4. 培养与观察将接种好的平板倒置，放入37℃恒温培养箱中培养24小时。
5. 细菌鉴定（1）观察菌落特征，如大小、形状、颜色、边缘等。
（2）进行初步生化试验，如氧化酶试验、葡萄糖发酵试验等。
五、实验结果与分析1. 细菌生长情况在37℃恒温培养箱中培养24小时后，观察到平板上有明显的菌落生长。
菌落呈圆形、表面光滑、边缘整齐，颜色为白色。
2. 细菌鉴定（1）菌落特征：根据菌落大小、形状、颜色、边缘等特征，初步判断该细菌为革兰氏阳性菌。
（2）生化试验：进行氧化酶试验和葡萄糖发酵试验，结果显示该细菌为氧化酶阳性、葡萄糖发酵阳性。
六、实验总结通过本次实验，我们学习了细菌培养的基本原理和方法，掌握了细菌纯培养的操作步骤，了解了培养基的制备和灭菌方法。
细菌培养实验报告模板(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉细菌培养的基本原理和方法。
2. 学习观察细菌的生长特征。
3. 掌握无菌技术操作，提高实验技能。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有繁殖速度快、形态多样等特点。
在适宜的培养基和条件下，细菌可以生长繁殖，形成肉眼可见的菌落。
通过细菌培养，可以观察其生长特征，为后续研究提供基础。
三、实验材料1. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基等。
2. 细菌：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
3. 实验仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、移液器、无菌操作台等。
4. 实验试剂：无菌水、无菌棉签、无菌生理盐水等。
四、实验方法1. 培养基制备：按照说明书配制牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基，高压蒸汽灭菌后备用。
2. 细菌接种：将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基中。
3. 恒温培养：将接种后的培养基放入恒温培养箱中，分别于37℃和30℃下培养24小时。
4. 观察记录：观察细菌在培养基上的生长情况，记录菌落形态、大小、颜色等特征。
5. 无菌技术操作：在无菌操作台中，进行接种、移液等操作，防止污染。
五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好，形成圆形、金黄色、表面光滑的菌落。
2. 大肠杆菌在营养肉汤培养基上生长良好，形成乳白色、浑浊的菌液。
六、实验分析1. 通过本次实验，掌握了细菌培养的基本原理和方法。
2. 观察到金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在不同培养基和温度下的生长特征，为后续研究提供了基础。
3. 在实验过程中，注意无菌技术操作，防止污染。
七、实验讨论1. 细菌在不同培养基和温度下的生长情况有何差异？2. 如何提高细菌培养的效率？3. 在实验过程中，如何避免污染？八、实验总结通过本次细菌培养实验，我们了解了细菌的基本特征和生长规律，掌握了无菌技术操作，为后续研究奠定了基础。
在实验过程中，我们要注重细节，严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性。
细菌克隆培养实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习并掌握细菌克隆培养的基本原理和操作方法。
2. 熟悉细菌分离纯化的过程，提高实验操作技能。
3. 了解不同细菌的生长特性和生化反应，为后续实验研究奠定基础。
二、实验原理细菌克隆培养是指通过特定的培养方法，使细菌在培养基上形成单个菌落，从而实现细菌的分离纯化。
实验过程中，需注意以下几点：1. 选择合适的培养基，为细菌生长提供必要的营养物质。
2. 掌握无菌操作技术，防止污染。
3. 严格控制培养条件，如温度、pH值等，确保细菌正常生长。
三、实验材料1. 实验菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂平板培养基等。
3. 实验器材：无菌操作台、接种环、酒精灯、培养皿、恒温培养箱等。
四、实验步骤1. 准备培养基：按照配方配制牛肉膏蛋白胨培养基，分装于培养皿中，高压灭菌后待用。
2. 制备接种环：用无菌操作台上的酒精灯灼烧接种环，待冷却后进行接种。
3. 接种：将实验菌种接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养过夜。
4. 纯化菌落：取过夜培养的菌液，用接种环分别涂布于琼脂平板培养基上，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
5. 观察菌落：观察菌落特征，如大小、形状、颜色等，挑取单个菌落进行纯化。
6. 重复接种：将纯化后的菌落分别接种于新的琼脂平板培养基上，重复上述步骤，直至获得纯化的单菌落。
7. 记录实验结果：记录菌落特征、纯化次数、实验时间等信息。
五、实验结果与分析1. 实验菌种在牛肉膏蛋白胨培养基中生长良好，过夜培养后菌液浑浊，说明细菌繁殖旺盛。
2. 在琼脂平板培养基上，实验菌种形成了不同特征的菌落，如大肠杆菌菌落呈白色、圆形、光滑；金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色、圆形、凸起。
3. 通过重复接种，成功获得纯化的单菌落，实验菌种纯度较高。
六、实验讨论1. 在实验过程中，无菌操作至关重要，需严格按照无菌操作规程进行，防止污染。
2. 培养基的选择对细菌生长和纯化至关重要，需根据实验目的选择合适的培养基。
细菌培养实验结果汇报内容
细菌培养实验结果汇报内容
实验结果汇报：
本次实验旨在进行细菌培养，以观察不同培养条件下细菌的生长情况。
在实验中，我们选取了常见的培养基和控制变量的方法，经过一段时间的观察和数据记录，得出以下结果。
首先，我们以琼脂平板为基础培养基，分别在室温和恒温器下进行培养。
室温
组的细菌在培养期间呈现稀疏分布，菌落直径较小；而恒温器组的细菌生长情况更好，菌落数量较多且直径较大。
这表明恒温器提供了更适宜的生长环境，促进了细菌的繁殖和生长速度。
其次，我们在琼脂平板中添加了不同浓度的抗生素，以观察其对细菌生长的影响。
实验结果显示，抗生素浓度越高，细菌生长受到的抑制作用越明显。
高浓度抗生素组的菌落数量明显减少，直径也较小，而低浓度抗生素组的细菌生长受到的抑制作用较弱。
此外，我们还进行了pH值的调节实验。
将琼脂平板的pH值分别调整为酸性、中性和碱性，并分别进行细菌培养。
结果显示，细菌在中性环境中的生长最为良好，菌落数量和直径较大。
而在酸性和碱性环境中，细菌的生长受到一定程度的抑制。
综上所述，通过本次实验，我们发现恒温器提供的稳定温度、合适浓度的抗生
素以及中性的pH环境，有利于细菌的繁殖和生长。
这些结果对于了解细菌生长的
适宜条件以及控制细菌生长具有一定的参考意义。
细菌的培养实验报告
一、实验目的1. 学习细菌培养的基本原理和方法。
2. 掌握培养基的制备、灭菌及接种技术。
3. 熟悉细菌生长曲线的观察与分析。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，在适宜的条件下能够生长繁殖。
细菌培养是研究细菌生物学特性的基础，也是微生物学实验的重要环节。
培养基为细菌生长提供必要的营养物质，灭菌是为了防止杂菌污染，接种是将细菌引入培养基中。
三、实验材料1. 实验材料：大肠杆菌、牛肉膏蛋白胨培养基、普通琼脂平板、接种环、酒精灯、无菌水等。
2. 实验器材：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、显微镜、试管、培养皿等。
四、实验步骤1. 培养基的制备与灭菌- 称取牛肉膏蛋白胨培养基粉末，加入适量无菌水，搅拌均匀，煮沸10分钟。
- 自然冷却至50-60℃，加入琼脂，继续搅拌至琼脂完全溶解。
- 分装至无菌培养皿中，每个培养皿约15-20ml。
- 将培养皿放入高压蒸汽灭菌器中，121℃灭菌15分钟。
- 灭菌后，待培养基冷却至50℃左右，倒入平板，待凝固。
2. 接种- 将大肠杆菌菌种从冰箱中取出，复苏。
- 用接种环取少量菌液，在平板上划线，划线方向交错。
- 用无菌镊子将平板翻转，使划线面向上。
- 将平板放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
3. 观察与分析- 观察平板上菌落的生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。
- 利用显微镜观察菌落特征，如菌体形态、鞭毛、芽孢等。
- 根据菌落特征，对细菌进行初步鉴定。
4. 生长曲线的绘制- 将大肠杆菌菌种接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基中，37℃培养。
- 分别在培养0、1、2、4、6、8、10、12、24小时取样，测定菌液浓度。
- 以时间为横坐标，菌液浓度为纵坐标，绘制细菌生长曲线。
五、实验结果与分析1. 菌落观察- 菌落呈圆形、光滑、湿润、边缘整齐，菌落颜色为白色。
- 镜下观察，菌体呈杆状，无鞭毛，无芽孢。
2. 生长曲线- 细菌生长曲线呈典型的S型，分为四期：延滞期、对数生长期、稳定期和衰亡期。
细菌培养过程实验报告
一、实验目的1. 学习掌握细菌培养的基本原理和方法。
2. 掌握无菌操作技术。
3. 熟悉细菌生长的观察和记录。
二、实验原理细菌培养是利用人工方法提供适宜的生长条件，使细菌生长繁殖的过程。
细菌生长繁殖需要一定的营养物质、水分、温度和pH等条件。
在实验过程中，通过无菌操作技术，将细菌接种到培养基上，观察细菌的生长和繁殖情况。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：牛肉膏蛋白胨培养基、细菌样本、无菌平板、无菌棉签、无菌镊子、酒精灯、无菌操作台、恒温培养箱等。
2. 试剂：无菌生理盐水、无菌蒸馏水、无菌培养基等。
四、实验步骤1. 准备培养基：将牛肉膏蛋白胨培养基按照说明书进行配制，高压灭菌后备用。
2. 无菌操作：在无菌操作台中，用无菌棉签将细菌样本涂抹在牛肉膏蛋白胨培养基表面。
3. 接种：用无菌镊子将涂抹有细菌的棉签放入无菌平板中，轻轻旋转平板，使细菌均匀分布在培养基表面。
4. 倒置培养：将接种后的平板倒置放置，避免培养基表面的水分蒸发，同时防止杂菌污染。
5. 观察记录：将平板放入恒温培养箱中，根据细菌的生长特性设置合适的温度和培养时间。
观察细菌的生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。
6. 细菌鉴定：根据菌落特征，对细菌进行初步鉴定。
五、实验结果与分析1. 细菌生长情况：在恒温培养箱中，细菌在适宜的温度和培养基条件下生长繁殖，形成单菌落。
菌落形态、颜色、大小等特征与细菌种类有关。
2. 菌落特征：通过观察菌落形态、颜色、大小等特征，对细菌进行初步鉴定。
例如，金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，表面光滑；大肠杆菌菌落呈乳白色，表面湿润。
六、实验总结1. 本实验成功掌握了细菌培养的基本原理和方法，了解了无菌操作技术的重要性。
2. 通过实验观察，学会了细菌生长的观察和记录，为后续的细菌鉴定和实验研究奠定了基础。
3. 实验过程中，要注意无菌操作，避免细菌污染。
七、实验讨论1. 在实验过程中，如何避免细菌污染？2. 如何根据菌落特征对细菌进行初步鉴定？3. 细菌培养在微生物学研究和应用中具有哪些意义？八、实验拓展1. 尝试通过不同培养基和培养条件，观察细菌的生长情况，探讨细菌的生长特性。
细菌培养实验报告分析
一、实验背景细菌培养是微生物学实验中一项基本且重要的技术，通过对细菌进行培养，可以观察其生长特性、分离纯化、鉴定以及进行各种生化实验等。
本实验旨在通过平板划线法分离培养细菌，并对所分离的菌落进行形态观察、生化实验和药敏试验，以分析细菌的种类和特性。
二、实验材料与方法1. 实验材料（1）菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等。
（2）培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、琼脂平板等。
（3）试剂：酚红指示剂、葡萄糖、乳糖、靛基质、甲基红、V-P试剂、革兰氏染色液等。
2. 实验方法（1）平板划线法分离细菌：将待分离的细菌接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，用无菌接种环进行划线操作，重复划线直至菌落分离。
（2）观察菌落特征：观察分离的菌落形态、大小、颜色、边缘、表面等特征。
（3）进行生化实验：对分离的菌落进行葡萄糖发酵、乳糖发酵、靛基质试验、甲基红试验、V-P试验等生化实验。
（4）药敏试验：采用纸片扩散法进行药敏试验，观察细菌对多种抗生素的敏感性。
三、实验结果与分析1. 菌落特征通过平板划线法分离，我们得到了形态各异的菌落。
大肠杆菌菌落呈白色、光滑、圆形、边缘整齐；金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色、光滑、圆形、边缘整齐；枯草芽孢杆菌菌落呈白色、粗糙、圆形、边缘不整齐。
2. 生化实验结果（1）葡萄糖发酵：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖，产生红色沉淀；枯草芽孢杆菌不发酵葡萄糖。
（2）乳糖发酵：金黄色葡萄球菌能发酵乳糖，产生红色沉淀；大肠杆菌、枯草芽孢杆菌不发酵乳糖。
（3）靛基质试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均产生靛基质，使培养基呈蓝绿色；大肠杆菌不产生靛基质。
（4）甲基红试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应；大肠杆菌呈阳性反应。
（5）V-P试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应；大肠杆菌呈阳性反应。
3. 药敏试验结果大肠杆菌对氨苄西林、头孢噻肟、头孢曲松等抗生素敏感；金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺等抗生素敏感；枯草芽孢杆菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟等抗生素耐药。
细菌培养的实验报告
细菌培养的实验报告细菌培养的实验报告引言：细菌是微生物世界中最常见的生物之一，它们广泛存在于自然界的各个角落。
细菌的培养是研究细菌生长、繁殖和代谢的重要手段。
本实验旨在通过培养细菌，观察其生长特征，并探讨不同培养条件对细菌生长的影响。
材料与方法：1. 培养基：本实验采用LB培养基，其成分包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠等。
2. 细菌菌株：选择了大肠杆菌（Escherichia coli）作为实验菌株。
3. 实验仪器：培养皿、试管、移液器等。
4. 实验步骤：a. 准备培养基：按照配方将LB培养基溶解在适量的蒸馏水中，加热至溶解完全后，用自动过滤装置过滤消毒。
b. 接种细菌：将一支细菌液接种于含有LB培养基的试管中，摇匀后倒入培养皿中。
c. 培养条件：将培养皿放入恒温培养箱中，设置适当的温度和培养时间。
d. 观察生长：每隔一段时间，取出培养皿，观察细菌的生长情况。
结果与讨论：在实验过程中，我们观察到细菌在LB培养基中的生长情况。
初始时，培养皿中的细菌数量较少，呈现为透明的液体状态。
随着培养时间的延长，我们观察到细菌开始生长并形成了白色的菌落。
在不同培养条件下，细菌的生长情况也有所差异。
首先，我们改变了培养温度。
在较低温度下（如20℃），细菌的生长速度较慢，菌落也较小。
而在较高温度下（如37℃），细菌的生长速度明显加快，菌落也较大。
这说明温度对细菌的生长具有重要影响。
其次，我们调整了培养基的pH值。
在较酸性的条件下（pH 5.0），细菌的生长受到抑制，菌落较小且数量较少。
而在较碱性的条件下（pH 9.0），细菌的生长较为良好，菌落较大且数量较多。
这表明pH值对细菌的生长也起着重要作用。
此外，我们还尝试了添加不同浓度的抗生素到培养基中。
结果显示，在低浓度抗生素的存在下，细菌的生长受到一定程度的抑制。
而在高浓度抗生素的条件下，细菌的生长几乎完全被抑制。
这说明抗生素对细菌的生长具有显著的影响。
结论：通过本实验，我们成功培养出了大肠杆菌，并观察到了不同培养条件对细菌生长的影响。
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篇一：培养基的制备与灭菌实验报告陕西师范大学远程教育学院生物学实验报告报告题目培养基的制备与灭菌姓名刘伟学号专业生物科学批次/层次指导教师学习中心培养基的制备与灭菌一、目的要求1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基：是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌：主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。
三、实验材料1. 药品：牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。
2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。
3. 其他物品：药匙、称量纸、ph试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤（一）玻璃器皿的洗涤和包装1．玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。
将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中．用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。
移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来水及蒸馏水冲洗。
洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。
2．灭菌前玻璃器皿的包装（1）培养皿的包扎：培养皿由一盖一底组成一套，可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。
包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。
（2）移液管的包扎：在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉)，它的作用是避免外界及口中杂菌进入管内，并防止菌液等吸入口中。
塞入此小段棉花应距管口约0.5cm 左右，棉花自身长度约1~1.5cm。
塞棉花时．可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。
棉花要塞得松紧适宜，吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。
先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条，然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45℃角，折叠纸条包住尖端，用左手握住移液管身，有手将移液管压紧．在桌面上向前搓转，以螺旋式包扎起来。
上端剩余纸条，折叠打结，准备灭菌。
（二）液体及固体培养基的配制过程1．液体培养基配制（1）称量（假定配制1000ml培养基）按培养基配方比例依次准确地称取3.0g牛肉膏、10.0 g蛋白胨、5.0gnacl放入烧杯（或1000ml 刻度搪瓷杯）中．牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。
（2）溶化在上述烧杯中先加入少于所需要的水量（如约700ml），用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积（1000ml）；如果配制固体培养基时，将称好的琼脂放人已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。
（3）调ph调ph：一般用ph试纸测定培养基的ph。
用剪刀剪出一小段ph试纸，然后用镊子夹取此段ph 试纸，在培养基中蘸一下，观看其ph范围，如培养基偏酸或偏碱时，可用1mol/l naoh或1mol/l hcl溶液进行调节。
调节ph时，应逐滴加入naoh或hci溶液，防止局部过酸或过碱，破坏培养基中成分。
边加边搅拌，并不时用ph试纸测试，直至ph达7.4-7.6。
反之，用1mol／lhcl 进行调节。
2．固体培养基的配制配制固体培养基时，应将已配好的液体培养基加热煮沸，再将称好的琼脂(1.5~2％)加入，并用玻棒不断搅拌，以免糊底烧焦。
继续加热至琼脂全部融化，最后补足因蒸发而失去水分。
（三）培养基的分装根据不同需要，可将已配好培养基分装入试管或三角瓶内，分装时注意不要使培养基沾污管口或瓶口，造成污染。
如操作不小心，培养基沾污管口或瓶口时，可用镊子夹一小块脱脂棉，擦去管口或瓶口的培养基，并将脱脂棉弃去。
1．试管的分装取一个玻璃漏斗，装在铁架上，漏斗下连一根橡皮管，橡皮管下端再与另一玻璃管相接，橡皮管的中部加一弹簧夹。
分装时，用左手拿住空试管中部，并将漏斗下的玻璃管嘴插入试管内，以右手拇指及食指开放弹簧夹，中指及无名指夹佐玻璃管嘴，使培养基直接流入试管内。
装入试管培养基的量视试管大小及需要而定，若所用试管大小为15×150 mm时，液体培养基可分装至试管高度1／4左有为宜；如分装固体或半固体培养基时，在琼脂完全融化后，应趁热分装于试管中。
用于制作斜面的固体培养基的分装量为管高1／5(约3—4mi)，半固体培养基分装量为管高的1／3为宜。
2．三角瓶的分装用于振荡培养微生物时，可在250 m1用于制作平板培养基用时，可在250 m1三角瓶中加入150ml粉(按2％计算)，灭菌时瓶中琼脂粉同时被融化。
（四）棉塞的制作及试管、三角瓶的包扎为了培养好气性微生物，需提供优良通气条件，同时为防止杂菌污染，则必须对通入试管或三角瓶内空气预先进行过滤除菌。
通常方法是在试管及三角瓶口加上棉花塞等。
1．试管棉塞的制作制棉塞时，应选用大小、厚薄适中的普通棉花一块，铺展于左手拇指和食指扣成的团孔上，用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞．然后直接压入试管或三角瓶口。
也可借用玻璃棒塞入，也可用折叠卷塞法制作棉塞。
制作的棉塞应紧贴管壁，不留缝隙，以防外界微生物沿缝隙侵入，棉塞不宜过紧或过松，塞好后以手提棉塞，试管不下落为准。
棉塞的2／3在试管内，1／3在试管外。
目前也有采用硅胶塞代替棉塞直接盖在试管口上。
将装好培养基并塞好棉塞或硅胶塞的试管捆成一捆，外面包上一层牛皮纸。
用记号笔注明培养基名称及配制日期，灭菌待用。
2．三角瓶棉塞制作通常在棉塞外包上一层纱布，再塞在瓶口上。
有时为了进行液体振荡培养加大通气量，则可用8层纱布代替棉塞包在瓶口上，目前也有采用硅胶塞直接盖在瓶口上。
在装好培养基并塞好棉塞或包扎八层纱布或盖好硅胶塞的三角瓶口上，再包上一层牛皮纸并用线绳捆好，灭菌待用。
（五）培养基的灭菌将上述培养基以0.103mpa，l21℃，20min高压蒸气灭菌。
灭菌过程：1. 加水：首先将内层锅取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面没过加热蛇管，与三角搁架相平为宜。
切勿忘记检查水位，加水量过少，灭菌锅会发生烧干引起炸裂事故。
2. 装料：放回内层锅，并装入待灭菌的物品。
注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
装有培养基的容器放置时要防止液体溢出，三角瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包扎的纸而透入棉塞。
3. 加盖：将盖上与排气孔相连的排气软管插入内层锅的排气槽内，摆正锅盖，对齐螺口，然后以对称方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气，并打开排气阀。
4. 排气：打开电源加热灭菌锅，将水煮沸，使锅内的冷空气和水蒸汽一起从排气孔中排出。
一般认为当排出的气流很强并有嘘声时，表明锅内的空气已排尽，沸腾后约需5分钟。
5. 升压：冷空气完全排尽后，关闭排气阀，继续加热，锅内压力开始上升。
6. 保压：当压力表指针达到所需压力时，控制电源，开始计时并维持压力至所需的时间。
如本实验中采用0.1mpa，121.5℃，20分钟灭菌。
灭菌的主要因素是温度而不是压力，因此锅内的冷空气必须完全排尽后，才能关闭排气阀，维持所需压力。
7. 降压：达到灭菌所需的时间后，切断电源，让灭菌锅温度自然下降，当压力表的压力降至“0”后，方可打开排气阀，排尽余下的蒸汽，旋松螺栓，打开锅盖，取出灭菌物品，倒掉锅内剩水。
压力一定要降到“0”后，才能打开排气阀，开盖取物。
否则就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基或试剂由于内外压力不平衡而冲出容器口，造成瓶口被污染，甚至灼伤操作者。
（六）斜面和平板的制作1．斜面的制作将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒或玻棒上，使成适当斜度，凝固后即成斜面。
斜面长度不超过试管长度l／2为宜。
如制作半团体或固体深层培养基时，灭菌后则应垂直放置至凝固。
2．平板的制作将装在三角瓶或试管中已灭菌的琼脂培养基融化后，待冷至50℃左右倾入无菌培养皿中。
温度过高时，皿盖上的冷凝水太多；温度低于50℃，培养基易于凝固而无法制作平板。
平板的制作应在火旁进行，左手拿培养皿，右手拿三角瓶的底部或试管，左手同时用小指和手掌将棉塞打开，灼烧瓶口，用左手大拇指将培养皿盖打开一缝，至瓶口正好伸入，倾入10~15ml 培养基，迅速盖好皿盖，置于桌上，轻轻旋转平皿，使培养基均匀分布于整个平皿中，冷凝后即成平板。
（七）培养基的灭菌检查灭菌后的培养基，一般需进行无菌检查。
最好取出1~2管(瓶)，置于37℃温箱中培养1~2天，确定无菌后方可使用。
篇二：微生物实验报告脓汁和粪便标本中病原菌的检测专业：学号：姓名：一、实验目的探究检测其病原菌的类型并通过一系列的观察与鉴定从而确定其病原菌的名称和性质。
在实践中学习培养基的制备、消毒和灭菌，细菌的分离与培养，细菌群体和个体形态特征的观察，细菌生化反应鉴定等技巧。
从而掌握微生物实验的各种操作方法，培养对微生物实验的兴趣。
二、实验材料器材打火机、油性笔、酒精灯、接种环、接种针、污物盘、普通冰柜、隔水式电热恒温培养箱、奥林巴斯cx21型生物显微镜、电炉、试管（带棉塞）、称量纸、药勺、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、尺子、锥形瓶、高压蒸汽灭菌器、镊子、玻片、吸水纸、拭镜纸试剂药品普通营养琼脂培养基、蒸馏水、脓汁标本、粪便标本、石蜡油、生理盐水、结晶紫、卢戈碘液、95%乙醇、稀释复红、葡萄糖微量发酵管（2支）、乳糖微量发酵管（2支）、青霉素抗菌素纸片、链霉素抗菌素纸片、庆大霉素抗菌素纸片、血浆、福氏志贺菌诊断血清三、方法与步骤干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌→（1）平板培养基：倾注平板10ml→琼脂完全凝固后，平板倒放→4℃冰箱保存备用。
（2）斜面培养基：培养基趁热斜放→琼脂凝固以后，4℃冰箱保存备用。
→贴上标签后灭菌使用。
①空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择采样地点（实验室、卫生间或任选地点）→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15min→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24h→观察结果。
②人体体表的细菌学检查甲乙常规洗手，丙丁标准洗手。
甲和乙、丙和丁共用1个平板按规定在普通平板上接种手指上的细菌。
第1格为洗手前，第2格为洗手后，第3格为消毒后，第4格空白对照。
接种环烧灼灭菌→分别取脓汁标本与粪便标本点在普通平板和依红美蓝平板上，各做两份，→烧掉接种环上多余的标本→冷却后，应用分区划线分离法，将脓汁标本接种于营养琼脂平板（2份），粪便标本接种于伊红美蓝平板（2份）→接种环烧灼灭菌→将平板倒置37℃培养18～24h →观察结果。