叶酸在动物生产中的应用研究进展
的相互转化 ； ②参与胸苷酸的从 头合成 ； ③参与蛋
氨酸的合成 。当机体 叶酸含量不足时 ， 叶酸辅酶会 首先放弃核酸的合成而趋向于蛋氨酸的合成 。
与人类健康休戚相关的微量营养元素 ， 它不但能预
防某些疾病 的发生 ， 还能作为核酸 的重要组成部分 来 维 持基 因 的稳 定性 ； 同时 ， 在 畜禽 生 产 中 的应 用 研究表 明， 它在多胎动物繁殖和胚胎发育过程 中也 发挥着重要作用（ 苗淑彦等， ２ ０ ０ ７ ） 。 １叶酸 的 结构及 来 源 叶酸由喋啶环 、 谷氨酸和对氨基苯 甲酸 ３ 部分 构成 。由于其吡嗪环上取代物不同 ， 且氨基苯 甲酰 谷氨酸部分能结合不同数量的谷氨酸残基 ， 这样就 产 生 了二 氢 叶 酸 、 四氢 叶 酸 、 ５ 一甲酰 基 一四氢 叶 酸 、或 １ ０ 一甲酰基 一四氢叶酸 、 ５ ， ｌ Ｏ 一次甲基 一四
植物和微生物合成 ， 多为还原形式 ， 广泛存在 于各 类 动植 物食 品中 ， 动物 的肝 肾 、 蛋、 蔬菜 、 谷物 、 豆类 和酵母等均含有丰富的叶酸（ 崔学平等， ２ ０ ０ ８ ） 。
２叶 酸 的吸收 、 转 运及代 谢
力。叶酸的缺乏会造成动物免疫力的下降， 在 日粮 中补充 叶酸能促进动物机体免疫 细胞 的生成和免
４ ． ２家禽
薛安永等 （ ２ ０ ０ ８ ）在 肉杂鸡 日 粮 中分别 添加
１ ． ６ ４ 、 ２ ． １ ４和 ２ ． ６ ４ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ叶酸 ， 结果 １ ． ６ ４ ｍｇ ／ ｋ ｇ的 添
加量显著提高了肉杂鸡的采食量和平均 日增重 ， 并 显著提高了其血清 中果糖胺 的含量 ， ２ ． ６ ４ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ 水 添加量则显著提高了肉杂鸡血清尿酸的含量 ； 丑武 江等（ ２ ０ ０ ９ ） 在Ａ Ａ肉仔鸡 日粮中分别添加 ０ ． ７ ５ 、 １ ． ５ 和３ ． ０ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ叶酸 ，发现 叶酸 的添 加能 显著 提 高 ２ １ Ｅ ｔ 龄肉仔鸡血清蛋 白质的含量 ， ３ ． ０ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ 水平的添 加量还能显著提高 肉仔鸡的采食量和平均 日增重 ， 并能显著降低料重 比， 且发现叶酸与烟酸联用能极 显著提高 肉仔鸡的平均 日 增重 ； 葛文霞（ ２ ０ ０ ６ ） 研究 发现 ， 烟酸与叶酸联用能显著降低肉仔鸡 的腹脂重 和腹脂率 ， 显著提高胸肌重 、 腿肌重和腿肌率 ， 并能 显著提高肉仔鸡的胸腺指数 、 脾脏指数和法氏囊指
先降解为喋酰单谷氨酸后才能被小肠吸收。 叶酸穿 过肠黏膜主要依赖两种途径 ： ①与钠离子偶联 的载 体转运 ； ②简单扩散 ， 这种机制在肠腔 ｐ Ｈ值较高或 叶酸浓度达到药理水平时 占主导地位 。 叶酸结合蛋 白 （ Ｆ Ｂ Ｐ ）对叶酸的几种衍生物均具有较高的亲和 性， 能介导叶酸进入细胞 ， 对叶酸的消化 、 分布和贮 存起着关键作用 Ｊ ｅ ｓ ｕ ｓ 等， １ ９ ９ ８ ｏ叶酸在生物体 内 的代谢 主要包括 ３ 个部分 ： ①参与丝氨酸和甘氨酸
３叶酸 的生物 学 功能
生物学功能主要有 以下几方面： ①参与核酸及 蛋白质的合成。一方 面， 叶酸能参与嘌呤和嘧啶的 合成 ， 另一方 面 ， 叶酸能协 助丝氨酸和甘氨酸 的相 互转化 ， 促进组氨酸 的降解及蛋氨酸的合成 ； ②改 善动物的生产 Ｉ 生 能和繁殖性能 ； ③提高动物的免疫
会对机体造成严重的氧化损伤。
４叶酸在动物生产 中的应用研究
４ ． １猪
Hale Waihona Puke 【 作者简 介１ 罗佳捷 ， （ １ ９ ８ ４ 一 ） ， 男， 博 士研 究生 ， 主要研 究方 向： 动物营养生理 ， Ｅ － ｍ ａ ｉ ｌ ： ｋ ａ ｋ ａ ａ ｄ ｒ ｉ ａ ｎ ｏ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｍ。
刘静波等 （ ２ ０ １ ０ ） 研究发现 ， 在母猪 日 粮 中添加
・
２ ７・
广东饲料 第 ２ ２ 卷第 ２ 期
２ ０ １ ３ 年２ 月
３ ０ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ 水平 的叶酸能极显著提高初产母猪 和新 生仔猪血清中的叶酸含量 ， 极显著降低血清同型半 胱 氨 酸 含 量 ，并 可 以 缓 解 宫 内 发 育 迟 缓 对
Ｄ Ｎ Ｐ Ｔ 一 １ 、 ｐ ５ ３和 Ｂ ｃ ｌ 一 ２基 因表达 的影 响 ，还 能显 著 上 调宫 内发育 迟 缓仔 猪 肝脏 热 应 激 蛋 白 ９ ０ 、脂 水 解酶 、 顺 乌 头 酸酶 、 琥 珀酸 脱 氢 酶 和 亚 氨 甲基 转 移
径 ，显著提高抗细胞凋亡基因 Ｂ ｃ ｌ 一 ２的表达量 ， 显 著降低促细胞凋亡基 因 Ｂ ａ ｘ 和Ｐ ５ ３的表达量 。
广东饲料 第 ２ ２ 卷第 ２ 期
２ ０ １ ３ 年２ 月
叶酸在动物生产中的应用研究进展
罗佳捷 张 彬 王 洁 ｚ 陈登科
（ １ ． 湖南农业大学动物科学技术学院， 湖南 长沙 ４ １ ０ １ ２ ８ ） （ ２ ． 长沙市动物防疫监督站 ， 湖南 长沙 ４ １ ０ ０ １ ３ ； ３ ． 唐人神集团股份有限公司， 湖南 株洲 ４ １ ２ ０ ０ ７ ）
代谢机 制、 生物 学功能 、 在 动物 生产 中的应 用及影响叶酸需要量的 因素等方面进行 了综述 ， 并展望 了其应 用前景 。 【 关键词】 叶酸 ； 生物学功能 ； 动物 生产
叶酸（ 喋酰单谷氨酸 ） 是指具有相关生物活性 的一类 同效维生素 ， 其不同的辅酶形式可 以作为一 碳单位的供体或载体来发挥作用。叶酸于 １ ９ ３ ０ 年 和１ ９ ４ １ 年被分别从酵母 和菠菜 中分离 出来 ，并于 １ ９ ４ ５ 年被正式命名为叶酸。研究表明 ， 叶酸是一种
【 中图分类号】 Ｓ ８ １ ６ ． ７ 【 文献标识码】 Ａ 【 文章编号】 １ ０ Ｏ ５ — ８ ６ １ ３ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ２ 一 ｏ ｏ ２ ７ 一 ｏ ３
【 摘 要】 叶酸是一种重要 的营养素 ， 在动物的新 陈代谢过程 中发挥着重要 的作用。文章对叶酸的 结构及 来源、 吸收 、 转运和
疫酶的合成 ， 进而改善动物 的免疫功能 ； ④提高动 物的抗氧化能力 。叶酸可与 自由基竞争结合 ， 从而 清除动物机体内的 自由基 ， 防止其对生物体造成伤
叶酸被动物摄食后 ， 多谷氨酸形式的叶酸必须
【 收稿 日￣］ ２ ０ １ ２ － １ ２ －１ ８
害， 当叶酸不 足时 ， 高半胱 氨酸启动 的脂肪过氧化
叶酸的研究进展
酸： （ １ ） 吡嗪 环被 部分 还原一 二氢 叶酸 ； （ ２ ） 吡嗪 环被
完 全 还 原一 四氢 叶 酸 ； （ ３ ） 吡 嗪环 被 甲酸氧 化 一５ 一 甲酰 基一 四氢 叶 酸或 １ ０ 一 甲酰基 一 四氢 叶酸 或 ５ ， １ ０ 一 次 甲基一 四氢 叶酸 ； （ ４ ） 吡 嗪 环 被 甲醛 氧 化一 ５ ， １ Ｏ 一
叶酸 四氢叶酸 一碳 基 团
文童编号 ： １ ０ ０ ３ — ４ ３ ３ １ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ２ — ０ ０ ３ ４ — ０ ３
酸对人类 某些疾病的影响及 其应 用状 况及展 望进行 介绍。
关键 词
文 献 标识 码 ： Ａ
１ 叶酸概 述
化为 ５ ， １ ０ 一 亚 甲基 四氢 叶酸 ， 该反 应是 可逆 的； 在 亚
素Ｂ 在 蛋氨 酸合 成酶 作用 下 ， ５ 一 甲基 四氢 叶酸 为
其 提供 甲基 ， 合成 蛋氨 酸 。
１ ． ３ 叶酸的营养生理功 能及缺乏原 因 叶酸对 生
物 体 的作用 主 要表现 在 以下 几个 方面 ：参与遗 传 物 质 和蛋 白质 的代谢 ； 影 响动物 繁殖 性 能； 影 响动物胰 腺 的分 泌 ； 促 进动 物 的生长 ； 提 高机 体 免疫力 。叶 酸 缺 乏 的可能 原 因包 括摄 入量 不足 ； 需要 量增加 ； 肠 道 吸 收 障碍 ； 维 生 素 Ｃ缺 乏 ； 使 用 叶 酸拮 抗 药 ； 肝 脏 疾
ｍａ ｉ ｎ ｓ ｏ ｆ Ｂ ｃ ｌ － ２ ａ ｒ ｅ ｒ ｅ ｑ ｕ ｉ ｒ ｅ ｄ ｆ ｏ ｒ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ
（ ４ ６ ７ ８） ： １ ０ ９ ７ ．
叶酸相关文献整理
• • • • 元素整理： 叶酸在专著中偏向于使用英文简写（FA）表示，FA应该是比较共识性的叶酸表示方法 FA对人体血管内皮细胞有保护作用，而且它是通过促进反应而非直接反应；“保护— 卫士”是叶酸在心血管方面的元素 复合维生素用剂在效果上也许优于单一叶酸试剂
3、掩盖维生素B12缺乏的早期表现，而导致神经系统受损害。
《叶酸与肿瘤发生》、《叶酸重要性》报告整理
• • • • • • • • 六、富含叶酸的食物 绿色蔬菜莴苣、菠菜、西红柿、胡萝卜、青菜、龙须菜、花椰菜、油菜、小白菜、扁 豆、豆荚、蘑菇等 新鲜水果橘子、草莓、樱桃、香蕉、柠檬、桃子、李、杏、杨梅、海棠、酸枣、山楂、 石榴、葡萄、猕猴桃（首选）、梨、胡桃等 动物食品动物的肝脏、肾脏、禽肉及蛋类，如猪肝、鸡肉、牛肉、羊肉等 豆类、坚果类食品黄豆、豆制品、核桃、腰果、栗子、杏仁、松子等 谷物类大麦、米糠、小麦胚芽、糙米等 核桃油里也含有叶酸 这里可以从大众对于叶酸补充的常识认知方面采集元素，熟悉的一些蔬果形象可以代 表叶酸的属性
《叶酸与肿瘤发生》、《叶酸重要性》报告整理
• • 五、过量危害 叶酸是水溶性维生素，一般超出成人最低需要量20倍也不会引起中毒。凡超出血清与 组织中和多肽结合的量均从尿中排出。服用大剂量叶酸可能产生的毒性作用有：
1、干扰抗惊厥药物的作用，诱发病人惊厥发作；
2、口服叶酸350mg可能影响锌的吸收，而导致锌缺乏，使胎儿发育迟缓，低出生体重儿增加；
•
此处由叶酸的作用，我们可以提炼它功效性的一些元素：一 碳单位（一碳单位(one caron unit)指某些氨基酸分解代谢过 程中产生含有一个碳原子的基团，包括甲基、亚甲基、甲烯 基、甲快基、甲酚基及亚氨甲基等。）代谢；骨髓幼细胞
叶酸对蛋鸡生产性能、血液指标和抗氧化酶活性的影响
叶酸对蛋鸡生产性能、血液指标和抗氧化酶活性的影响李锐瑞,武笑天,白彦,王瑞,杨玉（山西农业大学动物科学学院，山西太谷030801）摘要:选取30周龄体况和产蛋率相近的京红1号蛋鸡648只鸡，设6个饲粮叶酸添加水平（0、1、3、6、12、24mg/kg ），研究不同叶酸水平对蛋鸡生产性能、血清指标和抗氧化酶活性的影响。
结果表明，饲粮添加叶酸对蛋鸡生产性能无显著影响，但可以缓解蛋鸡产蛋高峰期产蛋率自然下降的幅度；饲粮添加叶酸显著提高蛋鸡血清叶酸含量和亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR ）活性，同型半胱氨酸含量和二氢叶酸还原酶（DHFR ）活性显著降低；饲粮添加叶酸可显著提高血清谷胱甘肽过氧化物酶和总超氧化物歧化酶活力，降低丙二醛含量。
饲粮中添加适宜水平的叶酸能提高蛋鸡的抗氧化性能，缓解蛋鸡产蛋高峰期产蛋率自然下降的幅度，以添加3.78～6.40mg/kg 叶酸效果较好。
关键词:叶酸；蛋鸡；生产性能；血液指标；抗氧化酶活性中图分类号:S831.5文献标识码:A文章编号:1002-2481（2021）05-0662-06Effect of Folic Acid on the Production Performance ，Serum Index andAntioxidant Enzyme Activity of Laying HensLI Ruirui ，WU Xiaotian ，BAI Yan ，WANG Rui ，YANG Yu（College of Animal Science ，Shanxi Agricultural University ，Taigu 030801，China ）Abstract ：648Jinghong 1laying hens aged 30weeks with similar body condition and laying rate were selected.Six dietary folic acid levels （0,1,3,6,12,24mg/kg ）were set up to study the effects of dietary folic acid levels on the production performance,serum indexes and antioxidant enzyme activities of laying hens.The results showed that dietary folic acid supplementation had no significant effect on the production performance of laying hens,but could alleviate the natural decline of laying rate during the peak laying period.Dietary folic acid supplementation significantly increased serum folic acid content and methylenetetrahydrofolate reductase （MTHFR ）activity,while homocysteine content and dihydrofolate reductase （DHFR ）activity significantly decreased.Dietary folic acid supplementation significantly increased the activities of serum glutathione peroxidase and total superoxide dismutase,and decreased the malondialdehyde content.Dietary supplementation of folic acid at an appropriate level could improve the antioxidant capacity of laying hens and alleviate the natural decline of laying rate during the peak period of laying.The effect of 3.78-6.40mg/kg folic acid was better.Key words ：folic acid;laying hen;production performance;serum index;antioxidant enzyme activity收稿日期:2020-12-13基金项目:山西功能农业共性关键技术研究与示范（201703D211001-05）；晋中市科技重点研发计划（农业）（Y182011）；山西省现代农业鸡产业技术体系（20201102）作者简介:李锐瑞（1996-），男，山西临汾人，在读硕士，研究方向：动物环境生理与高效生产。
育王时额外添加叶酸对西方蜜蜂蜂王质量的影响
动物营养学报２０１８，３０（７）：２６１９⁃２６２５ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ㊀ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃２６７ｘ．２０１８．０７．０２１育王时额外添加叶酸对西方蜜蜂蜂王质量的影响张㊀波㊀廖春华㊀赵方媛㊀王子龙㊀吴小波∗（江西农业大学蜜蜂研究所，南昌３３００４５）摘㊀要：本试验旨在确定育王时额外添加不同浓度的叶酸对西方蜜蜂蜂王质量的影响㊂控制蜂王产卵８ｈ，孵化后进行人工移虫育王，从移虫第２天起每天用微量进样器给王台内的小幼虫饲喂２μＬ分别含有０（Ⅰ组）㊁０．０５（Ⅱ组）㊁０．２５（Ⅲ组）㊁１．００ｍｇ／ｋｇ叶酸（Ⅳ组）的糖水，连续饲喂３ｄ㊂蜂王出房时，测其初生重㊁胸宽，并采用荧光定量ＰＣＲ检测蜂王卵巢中储存蛋白１１０（ｈｅｘ１１０）㊁储存蛋白７０ｂ（ｈｅｘ７０ｂ）和卵黄蛋白原（Ｖｇ）基因的相对表达量㊂结果表明：Ⅱ组蜂王初生重显著高于Ⅰ组㊁Ⅲ组和Ⅳ组（Ｐ＜０．０５），Ⅰ组㊁Ⅲ组和Ⅳ组之间差异不显著（Ｐ＞０．０５）；蜂王胸宽４组之间差异不显著（Ｐ＞０．０５）；Ⅰ组㊁Ⅲ组蜂王卵巢中Ｖｇ基因的相对表达量显著高于Ⅳ组（Ｐ＜０．０５），但Ⅰ组㊁Ⅱ组及Ⅲ组之间差异不显著（Ｐ＞０．０５），Ⅱ组与Ⅳ组之间差异也不显著（Ｐ＞０．０５）；随着叶酸浓度的增加，蜂王卵巢中ｈｅｘ１１０基因的相对表达量先增加后降低，且４组之间差异显著（Ｐ＜０．０５），并以Ⅱ组最高；Ⅰ组㊁Ⅱ组及Ⅲ组蜂王卵巢中ｈｅｘ７０ｂ基因的相对表达量显著高于Ⅳ组（Ｐ＜０．０５），但Ⅰ组㊁Ⅱ组及Ⅲ组之间差异不显著（Ｐ＞０．０５）㊂由此得出，在育王时额外添加叶酸对西方蜜蜂蜂王质量存在影响，额外添加低浓度的叶酸可以增加蜂王的初生重及上调卵巢中ｈｅｘ１１０基因的表达，但额外添加高浓度的叶酸会抑制蜂王卵巢中Ｖｇ㊁ｈｅｘ１１０及ｈｅｘ７０ｂ基因的表达，因此，育王时可添加０．０５ｍｇ／ｋｇ的叶酸来提高蜂王质量㊂关键词：西方蜜蜂；育王；叶酸；蜂王卵巢；基因表达中图分类号：Ｓ８９４．１㊀㊀㊀㊀文献标识码：Ａ㊀㊀㊀㊀文章编号：１００６⁃２６７Ｘ（２０１８）０７⁃２６１９⁃０７收稿日期：２０１７－１１－２０基金项目：国家自然科学基金资助项目（３１３６０５８７，３１４０２１４７）；江西省杰出青年人才资助项目（２０１６２ＢＣＢ２３０２９）作者简介：张㊀波（１９９０ ），男，江苏宿迁人，硕士研究生，研究方向为养蜂学㊂Ｅ⁃ｍａｉｌ：９７１６６９７２２＠ｑｑ．ｃｏｍ∗通信作者：吴小波，副教授，硕士生导师，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｗｕｘｉａｏｂｏ２１＠１６３．ｃｏｍ㊀㊀蜜蜂是与人类以及自然界关系密切的社会性昆虫，它不仅可以为人类提供营养丰富的蜂产品，而且通过授粉来增加农作物的产量，并维护生态平衡，对保护和维持生物多样性起到重要作用［１］㊂蜂王是蜂群中唯一具有繁殖特性的雌性个体，蜂王的质量对于蜂群起着决定性作用，高质量的蜂王具有更强的产卵能力以及抵抗疾病的能力，因此培育高质量的蜂王对于生产尤为重要［２］㊂蜂王在幼虫期和产卵期的食物都是蜂王浆，其营养成分主要包括蛋白质㊁游离氨基酸㊁脂肪酸㊁糖㊁维生素等［３］㊂维生素是昆虫生长和代谢所必需的微量有机物质，是辅酶的主要组成成分，维生素缺乏不仅会影响细胞代谢，使昆虫的生长发育受阻，而且会引起组织和细胞发生病变㊂维生素参与蜜蜂机体内三大营养物质的氧化还原反应和新陈代谢，与蜜蜂的健康㊁生长发育和繁殖密切相关㊂昆虫一般自身不能合成维生素，必须从食物中获取［４］㊂叶酸作为维持生物体正常生命活动所必需的一类有机物质，通常被机体吸收后最终以至少５种有活性的辅酶形式来参与到机体内一碳单位的转移，对嘌呤㊁嘧啶㊁核酸和蛋白质的生物合成以及细胞的分裂生长具有特别重要的作用［５］㊂蜂王浆中叶酸的含量在０．１６ ０．５０μｇ／ｇ，昆虫在发育过程中虽然对叶酸需要量很少，但如果缺少叶酸会对高龄幼虫和蛹的发育造成影响［６］，而叶酸对于蜂王质量的影响还鲜有报道㊂蜂王质量包括蜂王㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３０卷初生重㊁胸长㊁胸宽㊁产卵能力以及相关基因表达等，其中，卵黄蛋白原（ｖｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎ，Ｖｇ）基因是一种多效性基因，与蜜蜂卵巢活性㊁寿命㊁免疫力等均具有一定相关性［７］㊂储存蛋白１１０（ｈｅｘａｍｅｒｉｎ１１０，ｈｅｘ１１０）和储存蛋白７０ｂ（ｈｅｘａｍｅｒｉｎ７０ｂ，ｈｅｘ７０ｂ）是蜜蜂体内重要的储存蛋白，担负着变态发育㊁级型分化㊁性别决定㊁产卵㊁寿命㊁免疫等生物学功能［８－１４］㊂鉴于此，为了揭示叶酸对蜂王质量的影响，本试验以西方蜜蜂（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）为研究对象，探索额外添加叶酸对所培育蜂王初生重㊁胸宽以及卵巢中Ｖｇ㊁ｈｅｘ１１０和ｈｅｘ７０ｂ基因表达的影响，为培育更高质量的蜂王提供参考㊂１㊀材料与方法１．１㊀试验动物㊀㊀试验动物为江西农业大学蜜蜂研究所饲养的西方蜜蜂，试验开展时间为２０１７年５月至２０１７年７月㊂１．２㊀主要试剂及器材㊀㊀叶酸（纯度ȡ９８％）和焦炭酸二乙酯（ＤＥＰＣ）水（北京索莱宝科技有限公司），氯化钠（分析纯，北京西陇化工有限公司），Ｔｒｉｚｏｌ总ＲＮＡ提取试剂盒和ＲＮＡ酶抑制剂（北京全式金生物技术有限公司），反转录酶Ｍ⁃ＭＬＶ（２００Ｕ／μＬ）㊁ｄＮＴＰＭｉｘ⁃ｔｕｒｅ（２．５ｍｍｏｌ／Ｌ）和荧光染料（ＴａＫａＲａ公司），Ｏｌ⁃ｉｇｏ（ｄＴ）（由美国英杰生命技术公司合成），定量ＰＣＲ仪（ｉＱＴＭ２，美国Ｂｉｏ⁃Ｒａｄ公司），核酸蛋白测定仪（德国Ｉｍｐｌｅｎ公司），生化培养箱（ＧＺ－２５０－ＧＳＩ，韶关市广智科技设备发展公司）㊂１．３㊀试验设计１．３．１㊀育王及药物处理㊀㊀选取一群蜜蜂为虫源群，控制蜂王产卵８ｈ㊂３ｄ后，按照标准人工育王方法分别在群势基本一致的４群西方蜜蜂蜂群中培育西方蜜蜂蜂王，每群１框，每框２排，每排２０个王台㊂从移入幼虫的第２天起，按照每框的不同区域，随机用微量进样器分别给王台内的小幼虫饲喂２μＬ含有０㊁０．０５㊁０．２５㊁１．００ｍｇ／ｋｇ叶酸的糖水，并分别标记为Ⅰ组㊁Ⅱ组㊁Ⅲ组㊁Ⅳ组，连续饲喂３ｄ㊂１．３．２㊀蜂王外部指标测定㊀㊀蜂王羽化出房后，利用电子天平称其初生重；剪下蜂王胸部，去掉翅足后，利用形态观察系统测量蜜蜂的胸宽㊂１．３．３㊀荧光定量ＰＣＲ测定卵巢中Ｖｇ㊁ｈｅｘ１１０及ｈｅｘ７０ｂ基因的相对表达量１．３．３．１㊀样品采集㊀㊀刚出房的蜂王测完初生重㊁胸宽后立即解剖，采集卵巢，装入１．５ｍＬＲＮａｓｅ⁃ｆｒｅｅ的ＥＰ管并迅速放入液氮中，用于后续指标检测㊂１．３．３．２㊀总ＲＮＡ的提取以及ｃＤＮＡ的合成㊀㊀参考秦秋红［１５］的试验方法对样本总ＲＮＡ进行提取，用核酸蛋白测定仪检测提取的总ＲＮＡ的纯度（ＯＤ２６０／２８０在１．９ ２．１，符合标准），琼脂糖凝胶电泳评估ＲＮＡ的２８Ｓ㊁１８Ｓ和５Ｓ这３个条带的完整性㊂使用反转录试剂盒对总ＲＮＡ进行反转录，反转录产物保存于－８０ħ冰箱保存㊂１．３．３．３㊀荧光定量ＰＣＲ引物的设计及荧光定量ＰＣＲ㊀㊀根据ＧｅｎＢａｎｋ中的相关序列，用Ｐｒｉｍｅｒ５．０软件设计引物序列，由上海生物有限公司合成（表１），以β－肌动蛋白（β⁃ａｃｔｉｎ）作为内参基因㊂荧光定量ＰＣＲ的反应体系为１０μＬ，包括ｃＤＮＡ１μＬ，ＳＹＢＲＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑＴＭⅡ５μＬ，Ｒｏｘ０．２μＬ，上游㊁下游引物各０．４μＬ，超纯灭菌水３μＬ，混匀后放入荧光定量ＰＣＲ仪中进行扩增㊂反应条件：９５ħ３０ｓ；９５ħ１０ｓ，６０ħ１ｍｉｎ，４０个循环；之后５０ħ加热到９０ħ（每６ｓ升高１ħ）㊂建立熔解曲线，收集目的基因与内参基因的Ｃｔ值［１６］，并参考Ｑｉａｎｇ等［１７］的方法计算各个目的基因的相对表达量㊂１．４㊀数据处理㊀㊀试验数据用ＳＰＳＳ１７．０软件中的ＡＮＯＶＡ程序进行差异显著性比较分析㊂２㊀结果与分析２．１㊀叶酸对西方蜜蜂蜂王初生重及胸宽的影响㊀㊀由表２可知，Ⅱ组蜂王的初生重显著高于Ⅰ组㊁Ⅲ组及Ⅳ组（Ｐ＜０．０５），而Ⅱ组㊁Ⅲ组及Ⅳ组之间差异不显著（Ｐ＞０．０５）；蜂王的胸宽４个组的结果比较接近，差异均不显著（Ｐ＞０．０５）㊂２．２㊀叶酸对西方蜜蜂蜂王卵巢中Ｖｇ基因相对表达量的影响㊀㊀由图１可知，Ⅰ组㊁Ⅲ组蜂王卵巢中Ｖｇ基因的相对表达量显著高于Ⅳ组（Ｐ＜０．０５），但Ⅰ组㊁Ⅱ组及Ⅲ组之间差异不显著（Ｐ＞０．０５），Ⅱ组与Ⅳ组之间差异也不显著（Ｐ＞０．０５）㊂０２６２７期张㊀波等：育王时额外添加叶酸对西方蜜蜂蜂王质量的影响表１㊀基因引物序列Ｔａｂｌｅ１㊀Ｐｒｉｍｅｒｓｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆｇｅｎｅｓ基因名称Ｇｅｎｅｎａｍｅｓ上游引物序列Ｆｏｒｗａｒｄｐｒｉｍｅｒｓｅｑｕｅｎｃｅ（５ᶄ ３ᶄ）下游引物序列Ｒｅｖｅｒｓｅｐｒｉｍｅｒｓｅｑｕｅｎｃｅ（５ᶄ ３ᶄ）储存蛋白１１０ｈｅｘ１１０ＡＡＣＧＴＧＣＣＡＧＧＣＧＣＡＧＴＴＧＴＴＴＣＡＣＣＡＧＣＡＴＧＧＡＧＧＴＴＣＴＧＧＡ储存蛋白７０ｂｈｅｘ７０ｂＴＧＣＣＧＣＣＡＡＴＧＴＡＣＧＡＧＧＴＧＧＣＴＣＧＧＧＣＡＣＧＴＴＧＴＧＴＴＴＧ卵黄蛋白原ＶｇＣＧＣＡＴＣＡＣＧＡＡＴＡＣＧＡＣＴＡＡＧＡＡＣＧＣＴＣＣＴＣＡＧＧＣＴＣＡＡＣＴＣβ－肌动蛋白β⁃ａｃｔｉｎＴＣＣＴＧＣＴＡＴＧＴＡＴＧＴＣＧＣＡＧＴＴＧＣＣＡＴＴＴＣＣＴＧＴＴＣ表２㊀叶酸对西方蜜蜂蜂王初生重和胸宽的影响Ｔａｂｌｅ２㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄｏｎｂｉｒｔｈｗｅｉｇｈｔａｎｄｃｈｅｓｔｗｉｄｔｈｏｆｑｕｅｅｎｓｆｏｒＷｅｓｔｅｒｎｈｏｎｅｙｂｅｅ（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）组别Ｇｒｏｕｐｓ初生重Ｂｉｒｔｈｗｅｉｇｈｔ／ｍｇ胸宽Ｃｈｅｓｔｗｉｄｔｈ／ｍｍⅠ２３３．８２ʃ１．７３ａ４．４８ʃ０．６６Ⅱ２４６．１８ʃ２．０２ｂ４．４６ʃ０．１３Ⅲ２３５．４３ʃ１．５４ａ４．５０ʃ０．７５Ⅳ２３７．４６ʃ１．５１ａ４．４１ʃ０．１８㊀㊀同列数据肩标无或相同字母表示差异不显著（Ｐ＞０．０５），不同字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）㊂㊀㊀Ｖａｌｕｅｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈｎｏｏｒｔｈｅｓａｍｅｌｅｔｔｅｒｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｍｅａｎｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５），ｗｈｉｌｅｗｉｔｈｄｉｆ⁃ｆｅｒｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）．㊀㊀数据柱标注相同字母表示差异不显著（Ｐ＞０．０５），不同字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５）㊂下图同㊂㊀㊀Ｄａｔｅｃｏｌｕｍｎｓｗｉｔｈｔｈｅｓａｍｅｌｅｔｔｅｒｓｍｅａｎｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５），ｗｈｉｌｅｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆ⁃ｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｓａｍｅａｓｂｅｌｏｗ．图１㊀叶酸对蜂王卵巢中Ｖｇ基因相对表达量的影响Ｆｉｇ．１㊀ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄｏｎｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＶｇｇｅｎｅｉｎｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎｓｆｏｒＷｅｓｔｅｒｎｈｏｎｅｙｂｅｅ（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）２．３㊀叶酸对西方蜜蜂蜂王卵巢中ｈｅｘ１１０基因相对表达量的影响㊀㊀由图２可知，随着叶酸浓度的增加，卵巢中ｈｅｘ１１０基因的相对表达量先增加后降低，其中Ⅱ组显著高于Ⅰ组㊁Ⅲ组和Ⅳ组（Ｐ＜０．０５），Ⅲ组显著高于Ⅰ组和Ⅳ组（Ｐ＜０．０５），Ⅰ组显著高于Ⅳ组（Ｐ＜０．０５）㊂图２㊀叶酸对蜂王卵巢中ｈｅｘ１１０基因相对表达量的影响Ｆｉｇ．２㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄｏｎｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｈｅｘ１１０ｇｅｎｅｉｎｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎｓｆｏｒＷｅｓｔｅｒｎｈｏｎｅｙｂｅｅ（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）２．４㊀叶酸对西方蜜蜂蜂王卵巢中ｈｅｘ７０ｂ基因相对表达量的影响㊀㊀由图３可知，Ⅰ组㊁Ⅱ组及Ⅲ组蜂王卵巢中ｈｅｘ７０ｂ基因的相对表达量显著高于Ⅳ组（Ｐ＜０．０５），但Ⅰ组㊁Ⅱ组及Ⅲ组之间差异不显著（Ｐ＞０．０５）㊂１２６２㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３０卷图３㊀叶酸对西方蜜蜂蜂王卵巢中ｈｅｘ７０ｂ相对表达量的影响Ｆｉｇ．３㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄｏｎｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｈｅｘ７０ｂｇｅｎｅｉｎｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎｓｆｏｒＷｅｓｔｅｒｎｈｏｎｅｙｂｅｅ（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）３㊀讨㊀论㊀㊀营养是影响蜜蜂健康的重要因素，合理㊁均衡的营养物质供应以及适宜的环境条件是蜜蜂健康生长的重要条件㊂蜜蜂的营养需要主要包括碳水化合物㊁蛋白质㊁矿物质㊁脂类及维生素需要等［１８］㊂虽然维生素的需要量相对较少，但维生素对蜜蜂的生长发育至关重要㊂蜂王的质量决定蜂群群势的强弱，蜂王的初生重与蜂王的质量成正比关系，初生重大的蜂王，具有发育良好的卵巢和数量较多的卵巢管，这种蜂王具有较强的产卵力［１９］㊂本研究发现：额外添加低浓度的叶酸可增加蜂王的初生重，额外添加高浓度的叶酸对蜂王的初生重没有显著影响，可能由于叶酸作为维持生物体正常生命活动所必需的一类有机化合物，被机体吸收后转变成辅酶，参与机体内一碳单位的转移，对嘧啶㊁嘌呤㊁核酸和蛋白质的生物合成以及细胞的分裂生长具有特别重要的作用，促进了基因表达及细胞的分裂增长［５］，从而提高了蜂王的初生重；过量的叶酸可能未被蜂王幼虫所吸收，同时还可能影响了蜜蜂其他代谢过程，从而影响其他机能，如蜂王卵巢相关基因的表达等㊂㊀㊀Ｖｇ是一类大分子量的糖脂复合蛋白质，广泛存在于卵生脊椎动物和非脊椎动物的血淋巴脂肪体和卵等器官中，是蜜蜂卵黄发生的关键物质，具有激活卵巢㊁生殖竞争㊁行为构建㊁延长寿命㊁转化食物等多种功能，Ｖｇ是卵黄蛋白的前体，卵黄蛋白为胚胎发育提供蛋白质㊁必需氨基酸等多种营养物质，卵巢发育好的蜂王，具有较高的Ｖｇ基因表达量，因此Ｖｇ基因的表达量也是衡量蜂王质量的重要指标［２０－２８］㊂本研究发现，高浓度叶酸组（Ⅳ组）蜂王卵巢中Ｖｇ基因的相对表达量显著低于对照组（Ⅰ组），而低浓度叶酸组（Ⅱ组）和中浓度叶酸组（Ⅲ组）与对照组差异不显著，这也说明过量的叶酸会抑制蜂王卵巢中Ｖｇ基因表达，从而影响蜂王的发育㊂㊀㊀储存蛋白是昆虫储存起来供以后作为营养物质使用的蛋白质㊂储存蛋白一般是由６个亚基构成的六聚体蛋白，是由幼虫脂肪体细胞合成并分泌释放到血淋巴内，蜜蜂体内有４种储存蛋白基因，按照其分子质量大小分别命名为ｈｅｘ１１０㊁储存蛋白７０ａ（ｈｅｘａｍｅｒｉｎ７０ａ，ｈｅｘ７０ａ）㊁ｈｅｘ７０ｂ和储存蛋白７０ｃ（ｈｅｘａｍｅｒｉｎ７０ｃ，ｈｅｘ７０ｃ）［１３］㊂研究发现储存蛋白在许多昆虫中与雌性昆虫产卵有关，而且储存蛋白的表达与其产卵能力密切相关［２９－３２］㊂本研究发现，随着叶酸浓度的增加，蜂王卵巢中ｈｅｘ１１０基因的相对表达量先增加后降低，以Ⅱ组最高㊂这说明，在育王时额外添加低浓度的叶酸可促进卵巢中ｈｅｘ１１０基因的表达，过高浓度的叶酸会抑制ｈｅｘ１１０基因的表达㊂ｈｅｘ１１０是蜂王卵巢中重要的基因［３３］，在产卵蜂王卵巢中高表达，ｈｅｘ１１０的高表达有利于蜂王卵巢的发育，提高蜂王的繁殖性能［１３］，ｈｅｘ１１０基因表达量相对较低，则不利于蜂王卵巢的发育㊂本研究发现，高浓度叶酸组蜂王卵巢中ｈｅｘ７０ｂ基因的相对表达量显著低于对照组㊁低浓度叶酸组和中浓度叶酸组，但低浓度叶酸组和中浓度叶酸组与对照组之间差异不显著，这说明过量的叶酸也抑制了蜂王卵巢中ｈｅｘ７０ｂ基因的表达㊂ｈｅｘ７０ｂ是富含蛋氨酸和亮氨酸的储存蛋白，不仅与蜜蜂级型分化有关，还与蜂王以及雄蜂的性腺发育有关［１３］，ｈｅｘ７０ｂ基因的表达下降影响着蜂王卵巢发育质量㊂本研究发现，额外添加高浓度（１．００ｍｇ／ｋｇ）的叶酸后蜂王卵巢中Ｖｇ㊁ｈｅｘ１１０和ｈｅｘ７０ｂ基因的相对表达量均显著低于对照组㊂Ｐｉｃｋｅｌｌ等［３４］研究发现，过量的叶酸会引起ＤＮＡ的过甲基化，改变其表观遗传学特征，高浓度叶酸摄取会引起胚胎发育紊乱从而影响基因表达㊂４㊀结㊀论㊀㊀在育王时额外添加叶酸对西方蜜蜂蜂王质量２２６２７期张㊀波等：育王时额外添加叶酸对西方蜜蜂蜂王质量的影响存在影响，额外添加１．００ｍｇ／ｋｇ的叶酸导致蜂王卵巢中Ｖｇ㊁ｈｅｘ１１０和ｈｅｘ７０ｂ基因的相对表达量显著下降；额外添加０．２５ｍｇ／ｋｇ的叶酸显著提高了蜂王卵巢中ｈｅｘ１１０基因的相对表达量；额外添加０．０５ｍｇ／ｋｇ的叶酸显著提高了蜂王的初生重㊁卵巢中ｈｅｘ１１０基因的相对表达量㊂由此可知，育王时可添加０．０５ｍｇ／ｋｇ的叶酸来提高蜂王质量㊂参考文献：［１］㊀吴小波，王子龙，石元元，等．婚飞对中华蜜蜂性成熟处女蜂王ｓＲＮＡｓ表达的影响［Ｊ］．中国农业科学，２０１３，４６（１７）：３７２１－３７２８．［２］㊀廖春华，邹垂彬，谢国秀，等．饲粮粗蛋白质水平对中华蜜蜂育王质量的影响［Ｊ］．动物营养学报，２０１６，２８（９）：２９９８－３００４．［３］㊀方国桢，方建生，田树革．蜂王浆成分及其分析方法研究进展［Ｊ］．中国乳品工业，１９９４，２２（６）：２７８－２８６．［４］㊀冯倩倩，胥保华，刘锋，等．维生素对蜜蜂生长发育的影响［Ｊ］．中国蜂业，２０１１，６２（１）：１４－１５．［５］㊀杨玉柱，王储炎，焦必宁．叶酸的研究进展［Ｊ］．农产品加工（学刊），２００６（５）：３１－３５，３９．［６］㊀郭芳彬．神奇的蜂王浆［Ｍ］．北京：中国农业出版社，１９９７：３２－３３．［７］㊀张卫星，胥保华．蜜蜂卵黄原蛋白的研究进展［Ｊ］．蜜蜂杂志，２０１４，３４（５）：５－７．［８］㊀ＣＲＩＳＴＩＮＯＡＳ，ＮＵＮＥＳＦＭＦ，ＢＡＲＣＨＵＫＡＲ，ｅｔａｌ．Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｐｒｏｆｉｌｅｏｆｈｅｘａｍｅｒｉｎｇｅｎｅｓｏｆｔｈｅｐａｒａｓｉｔｉｃｗａｓｐＮａｓｏｎｉａｖｉｔｒｉｐ⁃ｅｎｎｉｓ（Ｈｙｍｅｎｏｐｔｅｒａ：Ｐｔｅｒｏｍａｌｉｄａｅ）［Ｊ］．ＩｎｓｅｃｔＭｏｌｅｃ⁃ｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，２０１０，１９（Ｓｕｐｐｌ．１）：１３７－１４６．［９］㊀ＣＵＮＨＡＡＤ，ＮＡＳＣＩＭＥＮＴＯＡＭ，ＧＵＩＤＵＧＬＩＫＲ，ｅｔａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｈｅｘａｍ⁃ｅｒｉｎｃＤＮＡｆｒｏｍｔｈｅｈｏｎｅｙｂｅｅ，Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｓｅｃｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００５，５１（１０）：１１３５－１１４７．［１０］㊀ＭＡＲＴＩＮＳＪＲ，ＮＵＮＥＳＦＭＦ，ＳＩＭÕＥＳＺＬ，ｅｔａｌ．Ａｈｏｎｅｙｂｅｅｓｔｏｒａｇｅｐｒｏｔｅｉｎｇｅｎｅ，ｈｅｘ７０ａ，ｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｇｏｎａｄｓａｎｄｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｌｙｒｅｇｕｌａｔｅｄｉｎａｄｕｌｔｆａｔｂｏｄｙ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｓｅｃｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００８，５４（５）：８６７－８７７．［１１］㊀ＢＩＴＯＮＤＩＭＭＧ，ＮＡＳＣＩＭＥＮＴＯＡＭ，ＣＵＮＨＡＡＤ，ｅｔａｌ．ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅＨｅｘ１１０ｇｅｎｅｅｎｃｏｄｉｎｇａｇｌｕｔａｍｉｎｅ⁃ｒｉｃｈｈｅｘａｍｅｒｉｎｉｎｔｈｅｈｏｎ⁃ｅｙｂｅｅＡｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ［Ｊ］．ＡｒｃｈｉｖｅｓｏｆＩｎｓｅｃｔＢｉｏｃｈｅｍ⁃ｉｓｔｒｙａｎｄＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００６，６３（２）：５７－７２．［１２］㊀ＤＡＮＴＹＥ，ＡＲＮＯＬＤＧ，ＢＵＲＭＥＳＴＥＲＴ，ｅｔａｌ．Ｉｄｅｎ⁃ｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｐｒｏｆｉｌｅｓｏｆｈｅｘａｍｅｒｉｎｓｉｎａｎｔｅｎｎａａｎｄｈｅｍｏｌｙｍｐｈｏｆｔｈｅｈｏｎｅｙｂｅｅＡｐｉｓｍｅｌｌｉｆ⁃ｅｒａ［Ｊ］．ＩｎｓｅｃｔＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，１９９８，２８（５／６）：３８７－３９７．［１３］㊀ＭＡＲＴＩＮＳＪＲ，ＮＵＮＥＳＦＭＦ，ＣＲＩＳＴＩＮＯＡＳ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｆｏｕｒｈｅｘａｍｅｒｉｎｇｅｎｅｓｉｎｔｈｅｈｏｎｅｙｂｅｅ：ｓｔｒｕｃ⁃ｔｕｒｅ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎｄｅｄｕｃｅｄｆｒｏｍｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｉｎｑｕｅｅｎｓ，ｗｏｒｋｅｒｓａｎｄｄｒｏｎｅｓ［Ｊ］．ＢＭＣＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，２０１０，１１：２３．［１４］㊀ＣＡＭＥＲＯＮＲＣ，ＤＵＮＣＡＮＥＪ，ＤＥＡＲＤＥＮＰＫ．Ｂｉ⁃ａｓｅｄｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｅａｒｌｙｈｏｎｅｙｂｅｅｌａｒｖａｌｄｅｖｅｌｏｐ⁃ｍｅｎｔ［Ｊ］．ＢＭＣＧｅｎｏｍｉｃｓ，２０１３，１４：９０３．［１５］㊀秦秋红．东方蜜蜂与西方蜜蜂学习记忆比较及蜜蜂学习记忆相关分子机理分析［Ｄ］．硕士学位论文．南昌：江西农业大学，２０１３．［１６］㊀ＷＡＮＧＷＸ，ＴＩＡＮＬＱ，ＨＵＡＮＧＱ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆ１０⁃ｈｙｄｒｏｘｙ⁃２⁃ｄｅｃｅｎｏｉｃａｃｉｄｏｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｈｏｎｅｙｂｅｅ（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）ｌａｒｖａｅ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｐｉ⁃ｃｕｌｔｕｒａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１４，５３（１）：１７１－１７６．［１７］㊀ＱＩＡＮＧＨ，ＫＲＹＧＥＲＰ，ＬＥＣＯＮＴＥＹ，ｅｔａｌ．ＳｕｒｖｉｖａｌａｎｄｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｄｒｏｎｅｓｏｆａＮｏｓｅｍｏｓｉｓｔｏｌｅｒ⁃ａｎｔｈｏｎｅｙｂｅｅｓｔｒａｉｎｔｏｗａｒｄｓＮ．ｃｅｒａｎａｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｖｅｒｔｅｂｒａｔｅＰａｔｈｏｌｏｇｙ，２０１２，１０９（３）：２９７－３０２．［１８］㊀王颖，马兰婷，胥保华．蜜蜂营养需要研究的必要性及策略［Ｊ］．动物营养学报，２０１１，２３（８）：１２６９－１２７２．［１９］㊀谢代癸．对蜂王初生体重与质量的研究［Ｊ］．中国蜂业，１９８３，３３（２）：１３－１４，１１．［２０］㊀王秀秀，杨明华，李昌，等．东方蜜蜂卵黄原蛋白基因ｃＤＮＡ克隆及其基本生物信息学特征［Ｊ］．中国蜂业，２０１５，６６（３）：１２－１５．［２１］㊀ＢＬＡＮＫＳ，ＳＥＩＳＭＡＮＮＨ，ＭＣＩＮＴＹＲＥＭ，ｅｔａｌ．Ｖｉ⁃ｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎｓａｒｅｎｅｗｈｉｇｈｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓａｎｄａｌｌｅｒｇｅｎｓ（Ａｐｉｍ１２ａｎｄＶｅｓｖ６）ｏｆＡｐｉｓｍｅｌｌｉｆ⁃ｅｒａａｎｄＶｅｓｐｕｌａｖｕｌｇａｒｉｓｖｅｎｏｍ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１３，８（４）：ｅ６２００９．［２２］㊀ＷＡＮＧＹ，ＢＲＥＮＴＣＳ，ＦＥＮＮＥＲＮＥ，ｅｔａｌ．Ｇｕｓｔａｔｏｒｙｐｅｒｃｅｐｔｉｏｎａｎｄｆａｔｂｏｄｙｅｎｅｒｇｙｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｒｅｊｏｉｎｔｌｙａｆｆｅｃｔｅｄｂｙｖｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎａｎｄｊｕｖｅｎｉｌｅｈｏｒｍｏｎｅｉｎｈｏｎ⁃ｅｙｂｅｅｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳＧｅｎｅｔｉｃｓ，２０１２，８（６）：ｅ１００２７７９．［２３］㊀ＫＡＰＨＥＩＭＫＭ，ＳＭＩＴＨＡＲ，ＩＨＬＥＫＥ，ｅｔａｌ．Ｐｈｙｓｉ⁃ｏｌｏｇｉｃａｌｖａｒｉａｔｉｏｎａｓａｍｅｃｈａｎｉｓｍｆｏｒｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｃａｓｔｅ⁃ｂｉａｓｉｎｇｉｎａｆａｃｕｌｔａｔｉｖｅｌｙｅｕｓｏｃｉａｌｓｗｅａｔｂｅｅ．［Ｊ］．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＲｏｙａｌＳｏｃｉｅｔｙＢ：ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉ⁃ｅｎｃｅｓ，２０１２，２７９（１７３２）：１４３７－１４４６．３２６２㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３０卷［２４］㊀ＣＡＲＤＯＥＮＲ，ＥＲＮＳＴＵＲ，ＶＡＮＶＡＥＲＥＮＢＥＲＧＨＭ，ｅｔａｌ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓｉｎｄｅｑｕｅｅｎｅｄｈｏｎｅｙ⁃ｂｅｅｃｏｌｏｎｉｅｓｒｅｖｅａｌｓｌｏｗｅｒｖｉｒａｌｌｏａｄｉｎｈｅｍｏｌｙｍｐｈｏｆｆｅｒｔｉｌｅｗｏｒｋｅｒｂｅｅｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１１，６（６）：ｅ２００４３．［２５］㊀ＧＡＵＴＨＩＥＲＬ，ＲＡＶＡＬＬＥＣＭ，ＴＯＵＲＮＡＩＲＥＭ，ｅｔａｌ．ＶｉｒｕｓｅｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｏｖａｒｉａｎｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｉｎＡｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａＬ．ｑｕｅｅｎｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１１，６（１）：ｅ１６２１７．［２６］㊀ＡＭＤＡＭＧＶ，ＰＡＧＥＲＥ，Ｊｒ．Ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｇｅ⁃ｎｅｔｉｃｓａｎｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙｏｆｈｏｎｅｙｂｅｅｓｏｃｉｅｔｉｅｓ［Ｊ］．Ａｎｉ⁃ｍａｌＢｅｈａｖｉｏｕｒ，２０１０，７９（５）：９７３－９８０．［２７］㊀ＮＵＮＥＳＦＭＦ，ＳＩＭÕＥＳＺＬＰ．Ａｎｏｎ⁃ｉｎｖａｓｉｖｅｍｅｔｈ⁃ｏｄｆｏｒｓｉｌｅｎｃｉｎｇｇｅｎｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｉｎｈｏｎｅｙｂｅｅｓｍａｉｎ⁃ｔａｉｎｅｄｕｎｄｅｒｎａｔｕｒａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＩｎｓｅｃｔＢｉｏｃｈｅｍｉｓ⁃ｔｒｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，２００９，３９（２）：１５７－１６０．［２８］㊀ＷＨＥＥＬＥＲＤＥ，ＫＡＷＯＯＹＡＪＫ．Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｈｏｎｅｙｂｅｅｖｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎ［Ｊ］．Ａｒ⁃ｃｈｉｖｅｓｏｆＩｎｓｅｃｔＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，１９９０，１４（４）：２５３－２６７．［２９］㊀ＨＡＨＮＤＡ，ＷＨＥＥＬＥＲＤＥ．Ｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆａｓｉｎｇｌｅａ⁃ｂｕｎｄａｎｔｓｔｏｒａｇｅｈｅｘａｍｅｒｉｎｉｎｂｏｔｈｌａｒｖａｅａｎｄａｄｕｌｔｓｏｆｔｈｅｇｒａｓｓｈｏｐｐｅｒ，Ｓｃｈｉｓｔｏｃｅｒｃａａｍｅｒｉｃａｎａ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｓｅｃｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００３，４９（１２）：１１８９－１１９７．［３０］㊀ＰＡＮＭＬ，ＴＥＬＦＥＲＷＨ．Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ⁃ｒｉｃｈｈｅｘａｍｅｒｉｎａｎｄａｒｙｌｐｈｏｒｉｎａｓｐｒｅｃｕｒｓｏｒｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓｆｏｒｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｍｅｔａｍｏｒｐｈｏｓｉｓｉｎｆｅｍａｌｅｌｕｎａｍｏｔｈｓ［Ｊ］．ＡｒｃｈｉｖｅｓｏｆＩｎｓｅｃｔＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，１９９６，３３（２）：１４９－１６２．［３１］㊀杨文静．西方蜜蜂（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）储存蛋白ｈｅｘ７０ｂ和ｈｅｘ１１０的表达与功能研究［Ｄ］．硕士学位论文．福州：福建农林大学，２０１６．［３２］㊀ＣＨＩＮＺＥＩＹ，ＨＡＲＵＮＡＴ，ＭＩＵＲＡＫ，ｅｔａｌ．Ｐｕｒｉｆｉｃａ⁃ｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｂｉｌｉｖｅｒｄｉｎ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｃｙａｎ⁃ｏｐｒｏｔｅｉｎｆｒｏｍｅｇｇｓａｎｄｈｅｍｏｌｙｍｐｈｏｆｔｈｅｂｅａｎｂｕｇ，Ｒｉｐｔｏｒｔｕｓｃｌａｖａｔｕｓ（Ｈｅｔｅｒｏｐｔｅｒａ：Ａｌｙｄｉｄａｅ）［Ｊ］．ＩｎｓｅｃｔＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９０，２０（６）：５４５－５５５．［３３］㊀庞倩，王莹，王康，等．不同移虫日龄蜂王卵巢中ｈｅｘ⁃ａｍｅｒｉｎ１１０㊁ｈｅｘａｍｅｒｉｎ７０ｂ的差异表达分析［Ｊ］．环境昆虫学报，２０１７，３９（１）：６２－６７．［３４］㊀ＰＩＣＫＥＬＬＬ，ＢＲＯＷＮＫ，ＬＩＤＱ，ｅｔａｌ．Ｈｉｇｈｉｎｔａｋｅｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄｄｉｓｒｕｐｔｓｅｍｂｒｙｏｎｉｃｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｉｎｍｉｃｅ［Ｊ］．ＢｉｒｔｈＤｅｆｅｃｔｓＲｅｓｅａｒｃｈＰａｒｔＡ：ＣｌｉｎｉｃａｌａｎｄＭｏ⁃ｌｅｃｕｌａｒＴｅｒａｔｏｌｏｇｙ，２０１１，９１（１）：８－１９．４２６２７期张㊀波等：育王时额外添加叶酸对西方蜜蜂蜂王质量的影响∗Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ，ａｓｓｏｃｉａｔｅｐｒｏｆｅｓｓｏｒ，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｗｕｘｉａｏｂｏ２１＠１６３．ｃｏｍ（责任编辑㊀菅景颖）ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＡｄｄｉｎｇＥｘｔｒａＦｏｌｉｃＡｃｉｄｏｎＱｕａｌｉｔｙｏｆＱｕｅｅｎｓｆｏｒＷｅｓｔｅｒｎＨｏｎｅｙｂｅｅ（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）ｄｕｒｉｎｇＲｅａｒｉｎｇＱｕｅｅｎｓＺＨＡＮＧＢｏ㊀ＬＩＡＯＣｈｕｎｈｕａ㊀ＺＨＡＯＦａｎｇｙｕａｎ㊀ＷＡＮＧＺｉｌｏｎｇ㊀ＷＵＸｉａｏｂｏ∗（ＨｏｎｅｙｂｅｅＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＪｉａｎｇｘｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００４５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｄｅｓｉｇｎｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｄｄｉｎｇｅｘｔｒａｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄｏｎｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｑｕｅｅｎｓｆｏｒＷｅｓｔｅｒｎｈｏｎｅｙｂｅｅ（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）ｄｕｒｉｎｇｒｅａｒｉｎｇｑｕｅｅｎｓ．Ｑｕｅｅｎｓｗａｓｃａｇｅｄｔｏｌａｙｅｇｇｓｆｏｒ８ｈｏｕｒｓ．Ｔｈｅｌａｒｖａｅｈａｔｃｈｅｄｆｒｏｍｔｈｏｓｅｅｇｇｓｗｅｒｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄｉｎｔｏｑｕｅｅｎｃｅｌｌｓｆｏｒｑｕｅｅｎｒｅａｒｉｎｇ，ａｎｄｆｅｄｗｉｔｈ２μＬｓｙｒｕｐｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄ［０（ｇｒｏｕｐⅠ），０．０５（ｇｒｏｕｐⅡ），０．２５（ｇｒｏｕｐⅢ）ａｎｄ１．００ｍｇ／ｋｇ（ｇｒｏｕｐⅣ）］ｆｏｒ３ｄａｙｓｓｉｎｃｅｔｈｅ２ｎｄｄａｙｏｆｌａｒｖａｌｓｔａｇｅｕｓｉｎｇａｍｉｃｒｏｓａｍ⁃ｐｌｉｎｇｓｙｒｉｎｇｅｉｎｊｅｃｔｏｒ．Ｔｈｅｂｉｒｔｈｗｅｉｇｈｔａｎｄｔｈｏｒａｘｗｉｄｔｈｏｆｎｅｗｌｙｅｍｅｒｇｅｄｑｕｅｅｎｆｒｏｍｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｍｅａｓ⁃ｕｒｅｄ，ａｎｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｖｉｔｅｌｌｏｇｅｎｉｎ（Ｖｇ），ｈｅｘａｍｅｒｉｎ１１０（ｈｅｘ１１０）ａｎｄｈｅｘａｍｅｒｉｎ７０ｂ（ｈｅｘ７０ｂ）ｇｅｎｅｓｉｎｑｕｅｅｎｏｖａｒｉｅｓｗｅｒｅａｌｓｏａｓｓａｙｅｄｂｙｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅａｌ⁃ｔｉｍｅＰＣＲ（ｑＰＣＲ）．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｂｉｒｔｈｗｅｉｇｈｔｏｆｑｕｅｅｎｓｉｎｇｒｏｕｐⅡｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｇｒｏｕｐｓⅠ，ⅢａｎｄⅣ（Ｐ＜０．０５），ｗｈｉｌｅｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｍｏｎｇｇｒｏｕｐｓⅠ，ⅢａｎｄⅣ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｏｒａｘｗｉｄｔｈｏｆｑｕｅｅｎｓａｍｏｎｇｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．ＴｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＶｇｇｅｎｅｉｎｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎｓｉｎｇｒｏｕｐｓⅠａｎｄⅢｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｇｒｏｕｐⅣ（Ｐ＜０．０５），ｗｈｉｌｅｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｍｏｎｇｇｒｏｕｐｓⅠ，ⅡａｎｄⅢａｓｗｅｌｌａｓｂｅｔｗｅｅｎｇｒｏｕｐｓⅡａｎｄⅣ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｈｅｘ１１０ｇｅｎｅｉｎｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎｓｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｆｉｒｓｔｌｙａｎｄｔｈｅｎｄｅｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｈｅｘ１１０ｇｅｎｅｉｎｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎｓａ⁃ｍｏｎｇｔｈｅｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄｔｈａｔｉｎｇｒｏｕｐⅡｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ．Ｔｈｅｒｅｌａ⁃ｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｈｅｘ７０ｂｇｅｎｅｉｎｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎｓｉｎｇｒｏｕｐｓⅠⅡａｎｄⅢｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｇｒｏｕｐⅣ（Ｐ＜０．０５），ｗｈｉｌｅｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｍｏｎｇｇｒｏｕｐｓⅠⅡａｎｄⅢ（Ｐ＞０．０５）．Ｉｎｃｏｎｃｌｕ⁃ｓｉｏｎ，ｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｑｕｅｅｎｓｆｏｒＷｅｓｔｅｒｎｈｏｎｅｙｂｅｅｄｕｒｉｎｇｒｅａｒｉｎｇｑｕｅｅｎｓｉｓａｆｆｅｃｔｅｄｂｙａｄｄｉｎｇｅｘｔｒａｆｏｌｉｃａｃｉｄ．Ａｄｄｉｎｇｅｘｔｒａａｌｏｗｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄｃａｎｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｂｉｒｔｈｗｅｉｇｈｔａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｈｅｘ１１０ｇｅｎｅｉｎｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎｓ，ｂｕｔａｄｄｉｎｇｅｘｔｒａｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｆｏｌｉｃａｃｉｄｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＶｇ，ｈｅｘ１１０ａｎｄｈｅｘ７０ｂｇｅｎｅｓｉｎｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎｓ．Ｓｏ，ｗｈｅｎｒｅａｒｉｎｇｑｕｅｅｎｓ，ｆｏｌｉｃａｃｉｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ０．０５ｍｇ／ｋｇｃａｎｂｅａｄｄｅｄｔｏｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｔｈｅｑｕｅｅｎｓ．［ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，２０１８，３０（７）：２６１９⁃２６２５］Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｗｅｓｔｅｒｎｈｏｎｅｙｂｅｅ（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）；ｒｅａｒｉｎｇｑｕｅｅｎｓ；ｆｏｌｉｃａｃｉｄ；ｏｖａｒｙｏｆｑｕｅｅｎ；ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ５２６２。
叶酸在鸡生产上的研究进展
1鸡机体脂代谢的特殊性肉鸡养殖产业是我国畜禽养殖产业中占比很大的一类，肉鸡养殖产业的发展对于整个畜牧养殖产业的进步有着非常关键的作用。
研究发现肉鸡机体的脂代谢过程和其他动物有所差异，首先是肉鸡脂肪酸的合成位点有所不同，常见的脊椎动物机体中脂肪酸的合成位点主要是消化道上的黏膜细胞、机体的肝脏组织以及脂肪组织等，部分哺乳动物的乳腺组织也是合成脂肪酸的重要位点[1]。
黏膜细胞主要通过利用饲料中的脂肪酸，对脂肪酸进行不同程度的转化，通常这些组织部位可以通过利用乙酰辅酶A 合成脂肪酸。
在反刍动物机体中，脂类物质的合成位点主要是机体中的脂肪组织，同时反刍动物在生长过程中，消化道通过吸收利用日粮中的碳水化合物，转化成为乙酸、丙酸和丁酸等，主要是瘤胃组织，乙酸是畜禽机体中合成脂类物质的重要前体物，包括脂肪组织和乳腺组织中，乙酸均是重要的脂类物质合成来源。
猪的机体中合成脂类物质的情况和反刍动物相类似。
而在肉鸡机体中，脂肪酸主要在肝脏中合成代谢，人类机体也与之类似。
啮齿类动物和兔子的机体中对于脂类物质的合成代谢主要发生在肝脏和脂肪组织中。
动物机体中的脂肪组织在不同的生长阶段的组成也有所差异，在人类机体和大部分哺乳动物机体中，脂肪组织可以分为白色脂肪组织和棕色脂肪组织，正常生理条件下，白色脂肪组织主要用于储存脂肪和能量，而褐色脂肪组织主要用于产热，机体中脂肪组织中成熟的中脂肪细胞占到总体的1/3～2/3，脂肪组织中还包括血细胞、周皮细胞、上皮细胞等，还存在很多不同分化程度的脂肪组织前体细胞，包括纤维母细胞、免疫细胞等。
在小鼠的试验中发现，小鼠在胚胎期和出生的时候，机体内还没有白色脂肪组织，但是人类机体中以及兔子和猪等动物中，在胚胎生长发育的后期阶段，机体中便会出现白色脂肪组织，肉鸡在胚胎孵化的第12天左右，鸡胚的腿部和颈部组织中便会开始出现白色脂肪组织，但是肉鸡机体中主要是白色脂肪组织，棕色脂肪组织在肉鸡机体中含量较低，而且在肉鸡机体中的研究主要集中在白色脂肪组织，同时肉鸡的脂肪组织中脂肪细胞纯度相对较高，而其他很多动物脂肪组织中不仅只有脂肪细胞，还有很多其他的细胞。
叶酸在畜禽生产中的应用
近年来，由于叶酸在膳食中的重要性逐渐被认识，叶酸与出生缺陷、心血管病、肿瘤以及老年性痴呆等研究的逐步深入，叶酸已成为与人类健康息息相关的重要微量营养元素。
通过对叶酸的不断研究，叶酸更是多胎动物繁殖和胚胎发育所必需，添加叶酸可以改善畜禽的生产性能；如提高母猪繁殖性能和雏鸡生产性能等。
本文阐述了叶酸在畜禽生产中的应用，并提出了需要进一步研究的问题。
1叶酸的生化结构和来源叶酸是B族维生素一种1930年英国科学家Lucy Wills从酵母中得到一种可以治疗营养性巨细胞贫血的因子，把它命名为“Wills因子”；1941年Mitchell从菠菜中分离出可以促进乳酸杆菌生长的因子，并把它称为叶酸；1945年科学家鉴定并合成了蝶酰谷氨酸，证实了这些因子活性成分本质上都是蝶酰谷氨酸或其衍生物，统称为叶酸。
叶酸的化学结构是由一个2一氨基一4一羟基蝶啶通过一个亚甲基桥与对氨基苯甲酸的第6位碳原子相结合成为蝶酸，再与谷氨酸结合而成。
自然界中的叶酸多为还原型形式，是由微生物和植物合成的，广泛存在于各类动植物性食品中．含量丰富的食物有动物肝脏和肾脏、蛋、牛奶、谷物饲料、酸乳酪、豆类、酵母、绿叶蔬菜等。
商品畜禽饲料的原料往往不能提供足够量的叶酸来满足动物全部的营养需要，需要额外添加。
2叶酸的生理功能四氢叶酸(FH4)是叶酸的生理活性形式。
四氢叶酸是一碳单位的重要受体和供体，在一碳单位转运过程中起辅酶作用。
叶酸参与嘌呤、嘧啶及氨基酸代谢过程，从而促进母猪胚胎DNA、RNA及各种蛋白质合成l11．直接影响胚胎形成和胎儿的生长发育。
叶酸是血红蛋白及肾上腺素、胆碱、肌酸合成收稿日期：2008—9—242所必需的物质，与红细胞代谢有关的矿物质元素有内在关系；能提高畜禽的免疫力，改善饲料养分的利用率，提高畜禽生产性能I 2l。
叶酸还可以通过克服先天代谢缺陷直接或问接预防NTDs以及巨幼红细胞性贫血、心血管疾病、一些癌症等。
3叶酸的吸收及影响因素3．1叶酸的吸收叶酸结合蛋白(船P)对叶酸和几种叶酸衍生物具有高亲和性，介导叶酸进入细胞内，对叶酸的消化、分布和贮存起着关键作用。
叶酸临床应用研究进展
叶酸临床应用研究进展叶酸是一种水溶性维生素，也被称为维生素B9、它在细胞的DNA合成、修复和甲基化过程中起着重要作用。
由于叶酸在胚胎发育和生长中的重要性，它在临床上具有广泛的应用。
以下是叶酸临床应用研究进展的主要方面。
1.叶酸与神经管缺陷：神经管缺陷是一种胎儿发育异常，其中最常见的类型是脑积水和脊髓脊膜膨出。
研究表明，叶酸缺乏是神经管缺陷的一个主要危险因素。
妊娠前和妊娠期补充叶酸可以降低神经管缺陷的发生风险。
2.叶酸与先天心脏病：先天性心脏病是儿童最常见的先天性缺陷之一、研究表明，孕妇补充叶酸可以降低出生时心脏病的风险。
叶酸的这种保护作用可能与叶酸在DNA和RNA合成中的重要作用有关。
3.叶酸与妊娠期贫血：妊娠期贫血是孕妇常见的问题，会导致孕妇出现疲劳、头晕和易患感染等症状。
叶酸在红细胞合成中的作用使其成为预防和治疗妊娠期贫血的关键营养素。
4.叶酸与癌症预防：研究发现，叶酸补充可以降低一些癌症的发生风险，特别是结肠癌和乳腺癌。
叶酸可能通过调节DNA甲基化来抑制癌细胞生长和转移。
然而，叶酸在癌症治疗中的具体作用仍需深入研究。
5.叶酸与心血管疾病：研究发现，血液中的叶酸水平与心血管疾病的发生和发展相关。
叶酸可能通过降低同型半胱氨酸水平来减少心血管病的风险。
此外，叶酸还可以降低高血压和动脉硬化的风险。
需要注意的是，叶酸的剂量和使用时机在临床应用中至关重要。
高剂量的叶酸补充可能导致叶酸掩盖维生素B12缺乏，进而导致神经系统损伤。
因此，在使用叶酸补充剂时，应遵循医生的建议并控制剂量。
总的来说，叶酸作为一种重要的维生素，在临床上具有广泛的应用。
不仅在妇产科领域，如神经管缺陷的预防和妊娠期贫血的治疗，还在其他领域，如癌症和心血管疾病的预防中发挥作用。
然而，关于叶酸的作用机制和最佳用量仍需进一步研究。
叶酸水平对母猪繁殖性能的影响
18生理代谢调控叶酸因能有效地防止神经管畸形，被强制性地广泛应用于怀孕早期妇女。
由于叶酸对繁殖性能的作用，特别是对繁殖母猪的影响，NRC（1979第8版）修订时将其列入营养需要表，对包括母猪在内的各类型猪的推荐量均为0.6 mg/kg，ARC（1981）和NRC（1981）的建议量与此相同，NRC（1998）建议，妊娠母猪和哺乳母猪同样添加1.3 mg/kg。
但生产实践中，母猪日粮中叶酸的添加量各有不同，效果各异。
试验针对叶酸无毒和使用安全的特性，在总结前人研究的基础上，探讨叶酸水平对母猪繁殖性能的影响，以期对母猪日粮营养提供科学依据，提高母猪繁殖性能。
1 材料与方法 1.1 试验动物 选用体质量和胎次相近,产仔数超过8头的120 头（与配公猪为杜洛克）长×大经产母猪，随机分为4组，每组30头猪。
1. 2 日粮组成参照NRC(1998)《猪的营养需要》和猪场对经产母猪的实际饲喂水平配制基础日粮和试验日粮。
基础日粮按要求满足母猪各种营养的需要，特别是维生素A和维生素E的需要，其中日粮维生素A 和维生素E含量分别达4 000和44 IU/kg，2种维生素的添加形式分别为维生素A乙酸乙酯和生育酚醋酸酯。
试验日粮补加叶酸水平分别为1 （1组）、1.5（2组）、2 （3组） 和2.5 mg/kg （4组）。
其中叶酸（98 %）为四氢叶酸。
于断奶后开始饲喂试验料至妊娠30 d。
基础日粮组成及营养水平详见表1。
表1 基础日粮组成及营养水平组成含量 营养水平含量玉米/%49.00消化能/（ MJ・kg-1）12.75麸皮/%16.00粗蛋白质/ %14.94豆粕/%16.00钙 /%0.77米糠/%10.00总磷 /%0.62统糠/% 5.00赖氨酸 /%0.68预混料/% 4.00蛋氨酸 /%0.25注:基础日粮中4 %预混料分别提供(每千克饲粮中)维生素A 4 000、维生素D3 780和维生素E 44 IU，维生素K3 2、维生素B1 0.8、维生素B2 6、烟酸14和泛酸l0 mg，维生素B12 12 μg，铜10、铁80、锰50、锌80、碘0.15和硒0.15 mg。
叶酸可以影响哺乳期问哺乳仔猪和母猪的性能
（ 凯 年 摘 编 自：ｈＰｇ ｉ 李 Ｔ ｅｉＳｔ ｅ网站 ２ １— ２ ６ ０ １ １— ） 研 究 表 明感 染 ＭＲ Ａ 与猪 密切接 触 有关 Ｓ 自从 １６ ９ ０年代 ＭＲ Ａ（ 甲氧西 林金 黄 葡 萄球 Ｓ 耐
验 历 时 ２ 天 。试 验 结果 ，添 加 叶 酸 增加 了产 乳 量 １
在 ２组 和 ３组 的乳 蛋 白浓 度 也 表 现 显 着 增 加 （ ＜ ． Ｐ Ｏ Ｏ ）因此 ， １。 添加 叶 酸增加 了 窝断 奶重 、 均仔 猪 断奶 平 重 和平 均仔 猪 日增重 （ ＞ ．５ 。 验 结果 表 明 ， 哺 Ｐ ００ ） 试 在 乳 期 ，添 加 １ ． ～０ ｍ ２５ １０ ｇ叶酸 ／ｇ可 以增 加 产 乳 ｍｇ ｋ
Ｓ ３ ８是来 源 于猪 还是 来 源 于人 ， Ｔ９ 因此 ， 以通过 基 可
自治大学联合研究 了用压榨 （ Ｐ 油菜籽 粕替代 豆 Ｅ） 粕作 为能量和氨基酸来 源对断奶仔猪生长性 能和 Ｅ粮营养物质消化率的影响。研究用 ２ ０ ｔ ４ 头初重为
７３±０６ｋ ． ． ｇ的断 奶 仔 猪 。５种 含 有 ０ Ｐ、０ Ｐ ｇＥ ５ ｇ 、 Ｅ １０ Ｐ １０ Ｐ或 ２０ｇＥ ０ ｇ 、５ ｇ Ｅ Ｅ ０ Ｐ油 菜 籽 粕 的 颗 粒小 麦 基础 日粮 ，配制 的 日粮含 有 １．ＭＪ 能 （ Ｅ）ｋ ００ 净 Ｎ ／ｇ 和 １１ｇ标 准 化 回肠 可 消 化 （Ｉ 赖 氨 酸 ／ Ｅ。 ．８ ＳＤ） ＭＪ Ｎ 从 断奶 后 １周 １ ９日龄时 开始饲喂这些 日 ４ 研究 粮 周。 结果表 明， Ｅ 随着 Ｐ油菜籽粕含量的增加 ， 粮 中能量 、 日 干 物质和粗蛋 白的总 肠 道 消化 率 以及 可 消 化 能 量含 量 呈 线性 降低 。 试 验 的 ０ ２ 从 — ８天 ，Ｐ油 菜籽 粕 含量 的 Ｅ 增 加对 增 重 、 食 量 和饲 料 转 化率 没 有 影 响 。研 究 采 人 员认 为 ，可 以用 高达 ２０ｇｋ ０ ｇ的 Ｅ ／ Ｐ油菜 籽 粕 替
叶酸的代谢及其对肉鸭免疫反应调节作用
刘 懂兵
李助 南
个谷 氨酸残 基 ， 不需 共 轭酶 作用 可被 Ｌ ａ ｒ ｏ ｂ ａ ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｃ ａ ｓ ｅ ｉ ｆ Ａ Ｔ Ｃ Ｃ ７ ４ ６ ９ ） ￣ 用。总的叶酸含 量是指事先经过共轭酶作用后 ， 以Ｌ ｃ ａ ｓ ｅ “ Ａ Ｔ Ｃ ｃ ７ ４ ６ ９ ） 分 析所测得 的叶酸值 。消化过 程中 ， 多谷 氨酸 形式的叶酸先 由叶酸共轭 酶水解催化降解为蝶酰单 氨酸 ， 然后 才可被肠 粘膜 细胞 吸收。Ｊ ａ ｇ ｅ ｒ — ｓ ｔ ａ ｄ 等（ １ ９ ８ ７ ） ￣ Ｊ Ｅ 实， 体 内多种组织 器官都分 泌这种共轭 酶 ， ｉ ｎ ／ Ｊ ， 肠上皮 细胞 ， 肝脏 等。胰脏分泌 的酶 活性高 ， 且分 泌量大 ， 是其 主要来 源 。猪 小肠的粘膜刷状缘膜含有蝶酰多谷氨酸水解酶 ， 其适宜 ｐ Ｈ值和 含量对 抑制因子 的敏感性与细胞 内酶不 同。由此推测 ， 猪小肠 的刷状缘 的酶， 至少对饲粮中蝶酰多谷 氨酸的水解起部分作用（ Ｒ ｅ ｉ ｓ ｅ ｎ ａ ｕ ｅ ｒ 等， １ ９ ７ ９ ） 。 Ｆ ｒ ｉ ｄ ｒ ｉ ｃ ｈ （ １ ９ ８ ８ ） 把叶酸 的吸收分为 三个阶段 ： 穿过肠 腔膜 ， 在肠细胞 内暂时停 留和穿过基底膜 。吸收的主要部位在十二脂肠和空肠 。叶酸 穿过肠粘 膜的转运是 与Ｎ ａ ＋ 偶 联 的载体转运 过程 。单谷氨 酸叶酸 的肠 道转运 是一个载体介导 的过程 ， 这个过 程由还原和氧化 的单谷氨 酸衍 生物 和抗 叶酸 的氨 甲蝶呤所分担 。这个 转运过程对 ｐ Ｈ 值 的依赖性很 强 。最适 ｐ Ｈ值为 ５ ． ０ ～ ６ ． ０ ， 当ｐ Ｈ值升高 ， 转 运速度 明显下 降。第二个 转运机制 是简单扩散 。这种转运机制在 肠腔 ｐ Ｈ值较高或 叶酸浓度达 到药理水平时 占主导地位（ Ｚ ｉ ｅ ｇ ｌ ｅ ｒ 等， １ ９ ９ ６ ） 。 Ｒ ｅ ｉ ｓ ｅ ｎ ａ ｕ ｅ ｒ 等（ １ ９ ８ ７ ） 认为， 叶酸吸收 的限速步骤是透壁 吸收过程 而 不是叶酸水解过程 。但 Ｋ ｅ ｓ ａ ｖ ａ ｎ 等（ １ ９ ８ ３ ） 报 道， 当水解 酶受 到抑 制时 ， 叶 酸 的水 解过程是 吸收的限速步骤 。肠道的 ｐ Ｈ值急剧改 变也会影 响叶 酸 的吸收（ Ｍ ｃ ｄ ｏ ｗ ｅ ｌ ｌ ， １ ９ ８ ９ ） 。Ｗｏ ｌ ｆ （ １ ９ ９ ８ ） 指 出玉米 中一种常 见的真菌毒 ｌ ０～２ ０ ％。 素Ｆ ｕ ｍ ｏ ｎ ｉ ｓ ｍ Ｂ １ ， 可以阻止神经鞘酯类 的合成 ， 从而抑制叶酸的吸收。 １ ． ２叶 酸 的 结 合 形 式 ２ 、 叶酸对肉鸭免疫 反应调节作用 叶酸是通 过叶酸结合蛋 白而进行转运 的。Ｆ Ｂ Ｐ 是一类可溶性 的免 由于叶酸对畜禽 的影 响很难从外观 上把握 ， 对 叶酸敏感的是 一些 疫球蛋 白 ， 对 叶酸有 高结合能力 ， 并广 泛存在于动物体组 织和体液 中。 生理生化指标 如血液 常规指标等 ， 以及母 畜繁殖性能 等， 较 多的研 究对 自然存 在的叶酸 是还原形式的 叶酸 ， 即二氢叶酸 和四氢 叶酸 。这些 叶 于叶酸与畜禽 的生 产性能 （ 繁殖性能 除外 ） 之问 关系的说法相 差不 小 ， 酸大多 和蛋 白质形成键结或者与淀粉及 肝糖元键 结。Ｈ ｅ ｎ ｄ ｅ ｒ ｓ ｏ ｎ （ １ ９ ９ ０） 比较细致的研究很难 发现叶酸对 生产性能的确定影 响 ， 因此有必 要进 把 已发现 的叶酸结合蛋 白分为三类 ： 行 大量更加细致 的研 究以发现 叶酸对畜禽生产性能 的确定影 响 ， 特别 Ａ ． 高亲 和力 叶酸结 合蛋 白。倪志 勇（ １ ９ ９ ９ ） ￣道， 人 们对 四氢 叶酸 是进行 叶酸需要量 的研究 。 （ Ｔ Ｈ Ｆ ） 的稳定性 与结合蛋 白特性研究时发现 ， 多数 内源性 四氢 叶酸连 接 叶酸参与蛋氨酸 、 嘌 呤和嘧啶合 成 ， 从而和 Ｄ Ｎ Ａ ， Ｒ Ｎ Ａ 及蛋 白质的 于Ｈ Ｆ Ｂ Ｐ ， 没有被结合的 四氢叶酸很快降解在血浆 中， Ｈ Ｆ Ｂ Ｐ 保护四氢叶 合成密切相关 。另外还和其 它多种 氨基 酸（ 如甘氨酸 ， 丝 氨酸 ， 精氨酸 ， 酸不被 降解 和允许 四氢 叶酸在血浆 中稳定存在。 组氨酸） 的体 内转换 、 合 成和代 谢有关 。因此推测 日 粮 叶酸水平的增加 Ｂ ． 与膜 有关 的叶酸结合蛋 白。仅存在于原 生质膜上 。Ｗｏ ｌ ｆ （ １ ９ ９ ８ ） 对机体 内蛋 白沉积有影 响。但相关报道还很少。 曾对此结合蛋 白进行过结构与分布的综述。 四氢叶酸必须转 化为其它 的衍 生物 ， 才能发挥 其重要 的三大合成 ｃ ＿ 细胞 质结合 性叶酸结合蛋 白。这类 叶酸结合蛋 白存在 于细胞膜 作 用。但这种转化的第一步是 四氢叶酸形成 ５ ， １ ０ 一 亚甲基四氢叶酸 ， 此 上， 由一 系列与一碳单位代谢有关的特异酶组成 ， 对特定的叶酸还原产 反应和丝氨酸和甘氨酸转化有关。 日粮中这二者的含量对 四氢叶酸的 物有很 高的特异性 。叶酸结合蛋 白， 在叶酸的消化 、 分布和贮存中起着 代谢及 功能的影 响需进一步探讨 。 重要 的作用 （ 齐广海 ， １ ９ ９ ５ ） 。 目前 ， 肉鸡对各种饲料中叶酸利用率的测定并不多见 ， 从而限制 了 １ ． ３叶酸 的 消化 吸收 对肉鸡叶酸的需要量的研究。此外对肉鸡的叶酸营养来源 ， 包括饲料 、 饲 料中叶酸有 两种存在形式 ， 即游离 叶酸 和聚合叶酸 。饲 料中游 肠道微生物合成及外源添加等缺乏定量的描述 。 离叶酸的含量有 限， 而其总含量却较高 。游离 叶酸（ ｆ ｒ ￣ ｅ Ｍａ ｔ ｅ ） 含有 １ ～ ３ （ 上接第 １ ８ ７ 页）