在体大鼠神经
大小鼠慢性电极植入手术
·手术熟练度
35
牙科水泥
生物胶
2.手术过程 ·麻醉量 ·固定 ·定位 ·钻孔 ·电极植入
37
3.术后
·饲养
·抗炎
植入电极后的小鼠应单独饲养在较深的容器中，不能饲养在鼠笼里， 防止笼盖与电极帽摩擦，损伤电极。小鼠休息恢复4-5天后，就可以 上机观察了。 根据小鼠的体重注射适量的消炎药，从手术之日起，一日2次，连续 3天。
但作为一新兴的研究技术， 它对硬件系统的要求较高，操作 步骤较复杂，牵涉到电极计与制作、慢性电极手术植入、多通 道实时数据采集与存储、单个神经元放电分离与归类、海量神 经数据分析等多个重要技术环节。
5
大小鼠慢性电极植入手术
手术 急性实验手术：麻醉动物，不需要牙科水泥埋植电极； 适用电极： 硅电极，微丝电极，MEA电极等
9
去毛·固定
耳棒固定：
-拉出舌头 -耳棒规格45°或18° -耳棒垂直高度一致，水平刻度相 同
10
三个标准检测
11
12
埋植电极阵列
所需材料：
1.琼脂粉，加入适量生理盐水或蒸馏水，加热到80℃ 以上，用来作为人工硬脑膜，保护脑组织；生物胶
大小鼠慢性电极植入手术介绍
张健强
MIVR
>
1 MIVR简介
目录
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2 手术
3 思考
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在体多通道电生理记录技术( multichannel invivo recording，MIVR)
简介
在体多通道电生理记录技术(multi-channel invivo recording，MIVＲ)，又称为中枢神经元放电的在体 多通道同步记录技术，是采用细胞外记录方法监测神 经元群的电活动。
大鼠脊神经结扎术手术步骤
①位于双侧髂前上棘连线大约为L4/5横突后,手术周围5cm范围剃毛,常规消毒皮肤,铺孔巾。
②以大鼠两骸前上脊连线的中点作中线,中线旁往左5mm,在L5-S1水平做一长约2cm的纵行切口,钝性分离皮下组织和椎旁肌肉。
③钝性分离至暴露L6下关节突,充分显露L6横突。
④用刮骨刀将L6横突周围的肌肉和结缔组织清除干净,暴露骨性结构。
⑤用小咬骨钳小心的咬除L6横突,仔细的分离L6横突下的筋膜,暴露下方的L4和L5神经,L4和L5神经以一定的夹角并排行走,通常靠里靠下粗大的神经为L5,操作时避免触碰到L4神经。
（可以先找坐骨神经，3分支时，中间的是坐骨神经，4分支时。
上2是坐骨神经）⑥用玻璃分针将L5神经充分的游离出来,用镊子将6-0铬肠线穿过L5神经并紧紧的打上两个结,在线结远端5mm处将L5神经剪断。
⑦用无菌生理盐水冲洗伤口,充分止血,擦干血渍,确认无活动性出血后,在伤口洒上链霉素粉防止术后伤口感染,逐层缝合伤口。
⑧手术后将大鼠置于温暖干净的鼠笼中苏醒,并给予自由进食和饮水。
⑨假手术组在进行套线后,不结扎剪断神经,其它步骤与手术组完全一样。
每天检查一次后续L5脊神经结扎的第十天,对大鼠行为学测试后,用戊巴比妥钠对大鼠进行腹腔麻醉。
打开胸腔,暴露其心脏,向左心室插入灌流针管,用止血钳将针管固定。
用憐酸盐缓冲液(O.Olmol/LPBS, pH7.4)冲洗大鼠体内血液。
再用4%多聚甲酸的磷酸盐缓冲液灌流、固定。
待大鼠组织固定后,取脊髓腰膨大节段,放在4%多聚甲醛中4°C冰箱内固定4小时。
后将脊髓转移到30%蔗糖溶液中,4°C冰箱脱水至组织下沉。
用冰冻切片机切片,脊髓厚度为35tim。
切好后将组织贴于载玻片上,放进一2(rc冰箱保存。
用PBS冲洗切片三次,每次7 —10分钟。
然后孵育一抗二抗4.2.1提取脊髓背角上蛋白大鼠断头,取脊髓腰膨大处脊髓背角侧半,保留SNL侧。
然后在装有液氮的碾钵中将组织碾磨成粉末状,移入EP管内,加入蛋白提取试剂,混合均勻放在冰上反应30min。
大鼠坐骨神经传导速度测定的方法学考察
姚鸿萍＊，封卫毅#，魏友霞，董海燕（西安交通大学医学院第一附属医院药学部，西安市 710061）
中图分类号 R965.2
文献标识码 A
文章编号 1001-040（8 2011）01-0018-03
摘 要 目的：比较 3 种测定大鼠外周运动神经传导速度（MNCV）方法的结果。方法：采用在体直接测定、在体间接测定、离体直 接测定考察正常大鼠坐骨神经 MNCV 值，并将研究结果在链脲佐菌素引起的糖尿病模型大鼠以及用降糖药格列奇特进行治疗的 模型大鼠上进行验证。结果：在体间接测定和离体直接测定正常大鼠坐骨神经 MNCV 值均与在体直接测定值有显著性相关关系 （r＝0.832 8、0.978 1，P＜0.01）；在体直接测定和在体间接测定模型大鼠坐骨神经 MNCV 值有相关关系（r＝0.879 7，P＜0.05）。结 论：3 种方法测得的大鼠 MNCV 值间均具有一致性，均能反映 MNCV 的变化情况。 关键词 神经传导速度；在体直接测定；在体间接测定；离体直接测定；大鼠；糖尿病模型
S1
S1：坐骨切迹处刺激电极
S（2 R1）：踝关节处刺激或记录电极
E
R2：足趾第一骨间肌肉处记录电极
S（2 R1） E
E：参考电极
R2
图 1 大鼠 MNCV 测定部位图 Fig 1 The determination site of MNCV in rats
用波宽 0.1 ms 的单脉冲方波刺激，逐渐增大刺激强度，可 以从记录电极上开始记录到双相的复合动作电位，逐渐减小 刺激强度，所记录的复合动作电位逐渐消失，反复调整刺激强 度，以复合动作电位出现或消失时的刺激强度为刺激阈值，记 录刺激阈值。以 1.5 倍阈值作为刺激强度进行测定，并记录测 定的肌电图或神经电位图，每 2 个刺激之间间隔 5 s 以上。将 双相复合动作电位的峰值至峰谷之间的电位值作为波幅值。 严格控制室温（20±0.5）℃，保持大鼠体温 37 ℃。计算机记录 刺激开始到动作电位出现的时间作为兴奋信号的传导时间， 重复测定 7～10 次，计算平均值。将大鼠后足以自然肢体状态 与脊柱成 45°夹角向斜后方拉直，沿坐骨神经经过部位和方 向，在大鼠体表准确测定刺激电极至记录电极之间的距离。 代入公式：MNCV（m·s－1）＝刺激电极与记录电极间的距离/传 导时间，计算测定部位的 MNCV。 2.2.2 在体间接测定：将直接测定方法中的刺激电极和记录 电极均作为刺激电极，于大鼠足趾第一骨间肌肉处用双针电 极记录，参考电极放置方法、刺激参数、记录方法及其他条件 同在体直接测定（见图 1）。计算机分别记录兴奋传导潜伏 期。重复测定 7～10 次，计算平均值。分别准确测定大鼠体表 2 刺激电极到记录电极之间的距离。代入公式：MNCV（m· s－1）＝2 刺激电极与记录电极之间距离差/2 刺激电极与记录电 极之间潜伏期之差，计算 MNCV。 2.2.3 离体直接测定：进行 MNCV 在体直接测定之后，标记电 极放置部位。剪开坐骨结节处和踝关节坐骨神经经过部位的 皮肤，小心分离坐骨神经，将电极对分别置于在体测定时所标 记部位的坐骨神经干上，闭合手术部位皮肤。以坐骨结节部 位电极对为刺激电极，远端电极为负极；踝关节部位电极作为 记录电极；参考电极置于刺激电极与记录电极之间、与记录电 极相距 1 cm 处的皮下（见图 1）。刺激参数、记录方法及其他实 验条件控制与在体直接测定相同，计算机记录神经冲动传导 时间。重复测定 7～10 次，计算平均值。然后分离坐骨神经， 测定刺激电极到记录电极之间的坐骨神经长度。代入公式： MNCV（m·s－1）＝刺激电极与记录电极间的坐骨神经长度/神 经传导时间，计算刺激电极与记录电极间的 MNCV。
在体大鼠神经-骨骼肌标本制作及收缩能力的测定
Ｐ ｙｉｌｇ ｎ ａｈ ｙｉｌｇ ｈ ｓｏｏｙａ ｄＰ ｔｏ ｓ ｏ ｙ，Ｙ ｎ ｉｎ Ｕｎｖ ｒｉ ｏｌ ｅｏ ｓ ｄｃｎ ，Ｋｅ ａ ｏ ａｏｙｏ Ｏｒ ａ ｉｍ ｕ ｃｉｎ ｌＦ ｃｏｓ ｏ ａ ｂａ ｉｅｓ ｙＣ ｌ ｇ Ｂａｉ Ｍｅ ｉｉｅ ｔ ｅ ｆ ｃ ｙ Ｌ ｂｒ ｔｒ ｆ ｇ ｎｓ Ｆ ｎ ｔ ａ ａ ｔｒ ｏ ｆ ｈ ｈ ｎ ｂ ｉＭｏ ｎａｎ，Ｍｉｉ ｒ Ｅｄ ｃ ｔ ｎ，Ｙ ｎ １ ３ ０ ｏ ｔｅＣ ａ ｇ ａ ｕ ｔｉ ｎｓ ｙ ｏ ｔ ｆ ｕａ ｉ ｏ ａ 珏 ３ ０ ０，Ｊｌ ｉｉ ｎ，Ｃ ｉａ） ｈｎ
提高BrdU标记成年大鼠在体脑神经干细胞增殖和分化效率的研究
［ ］ 崔卫刚 ， 灵 ， ３ 郭 曾庆堂 ， 提高腺病毒表达载体扩增效 率的研 等． 究 ［ ］解剖学研究 ， ０ ， （ ） ９ — ５ Ｊ． ２ ６２ ２ ： ９． ０ ８ ４
［ ４］ 邓祥发 ， 郭 灵， 曾庆堂 ， 提高重组腺病毒载体提纯 和滴定效 等． 率的研究［ ］ 广西医学 ，０ ６，８ １ ：３— ５ Ｊ． ２０ ２ （ ）２ ２ ．
ｉ ｒｔＪ ．ｔ ｋ ，０ ５，６ ４）８ ９—８４ ｎ ａ［ ］ Ｓ ｏｅ ２０ ３ （ ：５ ｒ ６．
（ 收稿 １期 ： ０ — ０— ９ 修回 １ ： ０ — １ ２ ） ３ ２ ８ １ １ ０ ３ ２ ８ １ － ３ 期 ０
提高 Ｂｄ ｒＵ标记成年大 鼠在体脑神经干细胞增殖和分化效率的研究▲
ＢａｎＲ ｓ２ ０ ， ０ １ １ ：４—４ ． ｒｉ ｅ ，０ ６ １ ８ （ ）３ ３
［ ］ Ｋ ｍ ｉ Ｏ ｂｓｉ Ｋｔ ｏ ｅ ｅ ａ． ｒｉ ｃｅ ｉ ｇ ｎｓ ｘ— ６ ｕ ａ Ｙ， ｏｏｈ ｉ ｚｎ ｔ Ｂａ ｉ ｈｍａａ ｍｅｔｅｏ Ｈ， ａ Ｔ， １ ｎｓ ｕ
【 关键词 】 Ｂｄ ； 经干细胞 ； 丝； 质原纤维酸性蛋 白； ｒＵ 脑神 神经 胶 半乳糖脑苷脂 ； 大鼠 【 中图分类号 】 Ｒ３２８ ． ２ ５ 【 文献标识码 】 Ａ 【 文章编号 】 ０５－ ０ （０９０ ６－ ２３ ３４２０ ）２ １２ ２ ４ ０ ０
Ｉ ｐ ｏ ｅ ｅ ｔ ｏ ｄ ｓｎｇ ｙ－ ａ ｋ ｄ ｏ ａ ｌ － ａ ｋ ｄ ｃ ｐａ ｉｉｓ ｏ ｍ ｒ ｖ ｍ ｎ ｓｆ ｒ Ｂｒ Ｕ ｉ ｌ ・ ｒ ｅ ｒ ｄ ｕｂ ｙ－ ｒ ｅ ａ ｃｔｅ ｆ ｍ ｍ ｐｒ ｌ ｅ ａ ｉ ｎ ｎｄ ｄｉ ｅ ｅ ｉ ｔｏ ｆ ｎ ｕｒ ｌｓｅ ｃ ｌ ｎ ｏ ｄ ｔｒ ｔ ｏｉ ｒ ｔｏ ａ ｆ ｒ ｎｔａ ｉ ｎ ｏ ｅ ａ ｔ ｍ ｅ ｌ ｉ ｆ ａ ｕｌ ａ ｓ ｆ ｓ
过度通气对在体大鼠脊髓背角WDR神经元兴奋性影响的实验研究
Ｄｏ ＲＳＡＬ ＯＲＮ ＤＲ Ｈ Ｗ ＮＥＵＲｏ Ｎ Ｎ Ｉ Ｏ Ｉ Ｖ Ｖ
Ｌ Ｙｕ — ｈ ｎ Ｌ Ｕ ｎ — ａ ， Ｕ ｅＣ ｕ ， Ｉ ＱｉｇＬ ｎ ＧＡＯ ｈ ｎＬ ｎ Ｌ Ｇｕ — ， ＨＥ Ｃ ｕ — ｉ， Ｖ ｏＹｉＺ ＮＧ ｏＳ ｎ Ｂａ — ｅ
（ｈ ｅｏ ｄ ｓｉ ｌ ｆ ｉ ｊ ｄｃｌ ｉ ｒ ｔ， ｉ ｊ ０ ２ Ｔ ｅＳｃ ｎ ｐｔ ａ ｉ ＭｅｉａＵｎｖ ｓｙ Ｔａ ｉ ３ ０ ） Ｈｏ ａ ｏ Ｔ ｎ ｎ ｅｉ ｎｎ １ １
过度通气对在体大 鼠脊髓背角 ＷＤ Ｒ神经元
兴奋性影 响的实验研究
卢悦淳 刘庆 兰 高春霖 吕国义 郑宝森
（ 天津 医科 大学第二医院麻醉科 ， 天津 ３０ １） ０ ２ １
摘要 目的 ： 考察 过度 通气对 大鼠脊髓 背角广动 力范围 （ ｄ ｙ ａ ｃｒｎ ｅ ＷＤＲ 神经 元 自发和 Ｗｉｅｄ ｎ ｍｉ ａｇ ， ） 疼 痛诱 发放 电频率 的影响。方法 ： ２ 将 ５只 Ｓ 大 鼠随机分 为 Ｎ（ Ｄ 正常通气 ） Ｈ（ 和 过度通 气 ） 两组。 两组 均在吸入麻醉下行椎板切 除 ， 录与大 鼠后足掌部 皮肤感觉对 应的脊髓 背 角ＷＤＲ神经元放 电 记 频率百分 比。Ｎ组 正常通 气 １０分 钟 ， ２ 旨在排除手术 创伤对 ＷＤＲ神经元 的影响 ； Ｈ组 实施过度通
ｎ ｕ ｏ ｘ ｉａ ｉｉｙ ｉ ｉ ｏ． ｅ ｈ ｄｓ ５ ａ ｕｌ Ｓｐ ａ ｕ — ａ ｌｙ ｒ ｔ ｅ ｅ ｒ ｎ ｏ ｌ ｉ ｉ ｅ ｎ ｏ ｔ ｏ ｅ ｒ ｎｓｅ ｃｔ ｂ ｌｔ ｎ ｖ ｖ Ｍ ｔ ｏ ：２ ｄ ｔ ｒ ｇ ｅ Ｄ ｗ ｅ ａｓｗ ｒ ａ ｄ ｍ ｙ ｄ ｖ ｄ ｄ ｉ ｔ ｗ
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Y27632对体外培养的大鼠神经干细胞增殖和分化的影响的开题报告
Y27632对体外培养的大鼠神经干细胞增殖和分化的
影响的开题报告
一、研究背景
神经干细胞是一类具有自我更新和多能分化潜能的细胞。
在生物医
学领域，神经干细胞的应用前景非常广泛，例如可用于治疗神经系统退
行性疾病和中枢神经系统损伤等领域。
因此，提高神经干细胞的增殖和
分化效率是研究的重点之一。
而Y27632是一种针对Rho激酶的抑制剂，具有诱导形态学改变、增强细胞粘附和改变细胞骨架等作用，因此被广
泛应用于细胞培养中。
本研究旨在探究Y27632对于大鼠神经干细胞体外培养的影响。
二、研究内容
1.探究Y27632对大鼠神经干细胞增殖的影响。
选取一定浓度的Y27632加入到大鼠神经干细胞培养基中，采用
MTT法检测细胞增殖情况，观察加入Y27632后神经干细胞增殖程度的变化。
2.探究Y27632对大鼠神经干细胞分化的影响。
将大鼠神经干细胞培养在不同剂量的Y27632培养基中，观察神经干细胞的分化情况，并运用Immunofluorescence染色和实时荧光定量PCR 等技术方法对各细胞类型进行鉴定。
三、研究意义
探究Y27632对大鼠神经干细胞增殖和分化的影响，能为神经干细胞的体外培养提供新的方法和途径，进一步推进干细胞研究领域的发展。
同时，该研究还能为神经系统疾病和损伤的治疗提供有力的基础研究支持。
大鼠周围神经损伤后外周血内皮祖细胞动员及相关因子含量变化
实验研究大鼠周围神经损伤后外周血内皮祖细胞动员及相关因子含量变化赵斌，赵志虎，骆巍，马剑雄，马信龙△摘要：目的 探讨大鼠周围神经损伤（PNI）后外周血内皮祖细胞（EPCs）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血管内皮生长因子（VEGF）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平变化及EPCs与其他指标的相关性。
方法 42只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、PNI 1 d组、PNI 3 d组、PNI 5 d组、PNI 7 d组及PNI 14 d组，每组7只，除对照组外其余组均采用钳夹法建立坐骨神经损伤模型。
对每组在预定时间点采用活体心脏穿刺法采血；采用Ficoll密度梯度离心法提取单个核细胞，CD34和CD133双阳性细胞标记EPCs，应用流式细胞仪检测各组EPCs数量。
采用酶联免疫吸附试验检测各组外周血bFGF、VEGF及MMP-9含量，分析EPCs数量与bFGF、VEGF、MMP-9水平的相关性。
结果 与对照组相比，PNI 3 d组、PNI 5 d组、PNI 7 d组外周血EPCs数量升高，PNI 3 d组、PNI 5 d组、PNI 7 d组及PNI 14 d组外周血bFGF含量升高，其余各组外周血VEGF含量升高，PNI 5 d组、PNI 7 d组及PNI 14 d组外周血MMP-9含量升高（P＜0.05）。
PNI 5 d组和PNI 7 d组外周血EPCs数量与血清bFGF水平呈正相关（r分别为0.784和0.788，P＜0.05），与血清VEGF水平呈正相关（r分别为0.889和0.852，P＜0.05）；PNI 5 d组、PNI 7 d组和PNI 14 d组外周血EPCs数量与血清MMP-9水平呈正相关（r分别为0.788、0.852和0.873，P＜0.05）。
结论 EPCs与bFGF、VEGF和MMP-9共同参与了PNI后血供修复的病理生理过程。
关键词：周围神经损伤；坐骨神经；内皮祖细胞；基质金属蛋白酶9；血管内皮生长因子；碱性成纤维细胞生长因子中图分类号：R651.3 文献标志码：A DOI：10.11958/20231111Changes in peripheral blood endothelial progenitor cell mobilization and related factors afterperipheral nerve injury in ratsZHAO Bin, ZHAO Zhihu, LUO Wei, MA Jianxiong, MA Xinlong△Digital Orthopedic Technology Clinical Application Center, Tianjin Hospital, Tianjin 300211, China△Corresponding Author E-mail:**********************Abstract: Objective To study changes and correlation of peripheral bold endothelial progenitor cells (EPCs) and serum bFGF, VEGF and MMP-9 in rats with peripheral nerve injury (PNI). Methods Forty-two SD rats were divided into the control group, the PNI 1 d group, the PNI 3 d group, the PNI 5 d group, the PNI 7 d group and the PNI 14 d group according to random number table method, with 7 rats in each group. The sciatic nerve injury model was established in all groups except the control group. In each group, blood samples were collected by living heart puncture at a predetermined time point. Mononuclear cells were extracted by Ficoll density gradient centrifugation. CD34 and CD133 double positive cells were labeled with EPCs, and the number of EPCs in each group was detected by flow cytometry. The contents of bFGF, VEGF and MMP-9 in peripheral blood of each group were detected by enzyme-linked immunosorbent assay, and the correlation between the number of EPCs and bFGF, VEGF and MMP-9 was analyzed. Results Compared with the control group, EPCs in peripheral blood were increased in the PNI 3 d group, the PNI 5 d group and PNI 7 d group. bFGF contents in peripheral blood were increased in the PNI 3 d group, the PNI 5 d group, the PNI 7 d group and the PNI 14 d group, and VEGF contents in peripheral blood were increased in the other groups. The content of MMP-9 in peripheral blood was increased in the PNI 5 d group, the PNI 7 d group and the PNI 14 d group (P＜0.05). The number of EPCs in peripheral blood in the PNI 5 d group and the PNI 7 d group was positively correlated with serum bFGF level (r=0.784 and 0.788, P＜0.05) and serum VEGF level (r=0.889 and 0.852, P＜0.05). The number of EPCs in peripheral blood of the PNI 5 d group, the PNI 7 d group and the PNI 14 d group was positively correlated with serum MMP-9 level (r=0.788, 0.852 and 0.873, P＜0.05), and it was positively correlated with serum VEGF level (r=0.889 and 0.852, P＜0.05). The number of EPCs in 基金项目：国家自然科学基金青年基金项目（81501061）；天津市卫生健康行业高层次人才选拔培养工程-青年医学新锐（TJSQNYXXR-D2-136）；天津市卫生健康科研项目（TJWJ2023QN049） 作者单位：天津市天津医院数字骨科技术临床应用中心（邮编300211） 作者简介：赵斌（1988），男，副主任医师，主要从事骨科及周围神经损伤修复方面研究。
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在体大鼠神经 骨骼肌标本制作及收缩能力的测定
【摘要】探讨在体大鼠神经 骨骼肌标本制作方法.［方法］腹腔注射给予大鼠氯醛糖进行麻醉，切开后肢背侧皮肤，分离坐骨神经干，只留下支配腓肠肌和比目鱼肌的神经，剥离带有血管和神经的腓肠肌和比目鱼肌标本；利用多道生理记录仪记录骨骼肌收缩曲线.［结果］所采用的方法制作标本简便，收缩力学实验数据可靠.
【关键词】肌骨骼收缩大鼠
The method of detect rat’s nerve skeletal muscle contractility in vivo
ABSTRACT:OBJECTIVETo introduce the prepareing method of nerve skeletal muscle sample in rat in vivo.METHODSAfter anesthetizing with chloralose by intraperitoneal injection, the hindlimb dorsi skin of rat was slit, sciatic nerve trunk was separated, sural nerve and soleus muscular nerve branch stem were only stayed, and soleus and gastrocnemius with blood vessels and nerves were dissected. After appropriate physiological stimulation, the skeletal muscle contraction curve was record by using multichannel
recorder.CONCLUSIONThis method is easy to make the sample and the contractive experimental data is trustworthy.
Key words:muscle, skeletal;constriction;rats
骨骼肌收缩的效能是产生张力或发生缩短，取决于骨骼肌的收缩能力［1］.目前，关于骨骼肌收缩能力的研究，常用的方法为在离体条件下刺激所支配的神经或肌肉，观察肌肉的收缩情况.此方法虽然在研究骨骼肌的兴奋 收缩耦联及单纯机械性收缩原理等方面发挥重要作用，但因离体条件下肌肉无血液供应，无法进行反复的刺激实验，骨骼肌的神经 肌接头易出现疲劳现象［2］.本文探讨了大鼠在体骨骼肌模型的制作和利用RM6240型多道生理信号采集处理系统测量骨骼肌收缩能力的方法.
1 材料与方法
1.1 实验动物与仪器实验动物选用Wistar系雄性大鼠，体重为180～220g.所用主要仪器有成都泰盟科技有限公司生产的RM6240型多道生理信号采集处理系统及JZJ101型压力换能器.
1.2 腓肠肌及比目鱼肌标本的制作腹腔注射给予大鼠100g/L水合氯醛（300mg/kg）行麻醉后，俯卧位固定于手术板上，剃去大鼠后肢及躯干后背部的毛，沿着后肢内侧自踝部向上至大腿根部上方3cm处剪开皮肤，小心剥离，暴露肌层.沿踝部正中线长轴向上纵行切开股二头肌，待其向两侧分离，确认中间有下行腓肠肌后，从 窝处分离腓肠肌内外侧头至踝关节，游离腓肠肌内侧头肌腱，并用1号手术线结扎，剪断.提起腓肠肌内侧头肌腱，即可在其下见到起自腓骨背面上部和胫骨并向下移行与腓肠肌肌腱合成跟腱的且颜色较深的比目鱼肌.游离比目鱼肌肌腱并用2号手术线结扎，提起肌腱小心剥离至比目鱼肌下神经和血管分支处(图1).在大鼠臀部寻找坐骨神经，细心剥离周围结缔组织，切断胫神经外的其他分支.
1.3 测定方法将张力换能器固定于支架后，将输出线连接至
RM6240系统通道输入口，分别将腓肠肌和比目鱼肌肌腱上的结扎线与张力换能器金属片连接，此时结扎线的走行方向应与肌肉自然位置一致，且使肌肉处于自然状态下的长度.打开RM6240系统电源，使系统处于示波状态，调整零点.将RM6240系统刺激器输出口与双极氯化银刺激电极连接，并将刺激电极搭在坐骨神经干上.选择刺激器的刺激参数，波宽为0.2ms，延迟1min，刺激频率根据需要使用单刺激或连续刺激，连续刺激的频率f=(T/1000) ×20（T为骨骼肌单收缩时的收缩时间），刺激强度在单刺激时从零开始逐渐递增，寻找引起骨骼肌发生最大收缩的最小刺激强度.
1.4 测定指标单收缩：利用2倍于最大刺激的刺激强度，观察测定骨骼肌收缩的单收缩曲线的潜伏期（CT）、最大收缩幅度(Pt)及1/2舒张时间(HRT).强直收缩：利用2倍于最大刺激的刺激强度给予连续刺激后，测定强直收缩曲线的潜伏期（CT）、最大收缩幅度（Pt）和疲劳指数（FI），见图
2.1：比目鱼肌；2：腓肠肌
2 结果与讨论
通过该方法，可测定出代表大鼠在体骨骼肌收缩能力的各项指标，如单收缩中的潜伏期、最大收缩幅度、1/2舒张时间和强直收缩中的潜伏期、最大收缩幅度、疲劳指数等，这些指标在记录骨骼肌的单收缩及复合收缩中均可较好地反映刺激强度与骨骼肌的收缩关系.
【参考文献】
［1］郭进,田振军,唐亮.应用dF／dtmax指标测定骨骼肌收缩能力［J］.中国应用生理学杂志， 2003,19(4)：413.
［2］阳建莹,蔺艳.中枢、神经 肌接头、肌肉疲劳的实验模型及其应用研究［J］.。