实验2 LD50的测定
实验二 经口急性毒性LD50测定
实验二经口急性毒性LD50测定实验二经口急性毒性LD50测定一、试验目的1. 熟悉急性毒性LD50测定的剂量设计2. 掌握小鼠灌胃技术3. 掌握改进寇氏法计算LD50的方法二、试验原理选择健康的实验动物，依据LD50计算的设计原则，将实验动物随机分成数个染毒组和一个阴性对照组。
一次或24小时内多次给予实验组受试物后，观察动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因。
根据受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死剂量(LD50)，并根据LD50值将受试物进行急性毒性分级。
三、材料和试剂1. 实验动物:健康成年小鼠60只，雌雄各半2. 器材:灌胃针(小鼠适用)、注射器、吸管、容量瓶、烧杯、滴管、分析天平、台秤、外科手术剪、镊子3. 受试物:(敌百虫或克佰威)4. 染色剂:苦味酸酒精饱和溶液、0.5%品红溶液四、实验内容1. 实验动物称重、编号和随机分组2. 染毒剂量设计及试剂配制3. 小鼠灌胃染毒技术4. 毒性反应的观察及LD50计算五、试验方法(一)预实验1. 探索剂量范围先找出100%与0%的致死量(或阳性反应的剂量)为实验的上、下限剂量(Dmax和Dmin)。
据经验或文献定出一个估计量，取动物若干，每4只一组，按估计量给药，如出现4/4死亡时，下一组剂量降低，当出现3/4死亡时，则上一剂量为Dmax;如降低一档剂量出现的死亡率2/4或1/4时，应考虑到4/4死亡剂量组在正式实验时可能出现死亡率低于70%，为慎重起见可将4/4死亡剂量乘以1.4倍，作为Dmax。
以次类推，找出Dmin。
2. 剂量分组一般染毒组数(G)以5-8组为宜，组间剂量比值为r。
在确定组数后，按下列公式计算r。
1/(G-1)r = (Dmax/Dmin) 3. 受试物溶液的配制配制等比浓度的敌百虫溶液，并使每只动物在给药容量上相等(如0.5ml/20g)。
剂量按等比级数增减，相邻两剂量比值1:0.6,0.9，设5个剂量组。
实验普鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
DJY
2
测定LD50的方法很多 本实验用的是简化机率单位法
y = a+bx
机 率 单 位 y
对数剂量x
DJY 3
药物的剂量与效应关系
死 亡 数 累 积 死 亡 率
剂量
累 积 死 亡 率 对数剂量
DJY
剂量 机 率 单 位 对数剂量
4
测定药物LD50的设计方法 1.预实验：摸索接近100%和0%死亡的剂量 2.按比例设5-7个剂量组（0.65~0.90） 3.随机分组，动物数不少于10只（小鼠） 4.实验条件均应相等
【注意事项】
1.动物应随机分组
2.各小组的动物标记要统一
3.剂量由小到大，注射量要准。
DJY
9
思考题
1.什么是LD50?
2.测定LD50的根据和意义何在?
DJY
10
【结果与统计】
对数剂量 动物数 死亡率 机率单位 死亡数 (mg/kg) (x) (n) (%) (y) 剂量 1 2 110.8 147.7 2.0445 2.1694
3 4
5
196.9 262.5
350.0
2.2942 2.4191
2.5441
y = a+bx
用直线回归法求 a, b, r
DJY 8
DJY
5
测定LD50的用药设计方法 同一浓度 不同浓度 不同剂量 同一剂量
DJY
6
【方法与步骤】
1.分组：随机分成5个剂量组，每组2只小白鼠。
2.给药：采用不同浓度,同一剂量的方法
0.20ml/10g,腹腔注射，涂上标记
3.观察：用药1小时后,观察小白鼠死亡情况,并记
录各组动物的鲁卡因半数致死量(LD50)的测定
ld50的测定实验报告
ld50的测定实验报告
LD50的测定实验报告
实验目的：本实验旨在测定一种化学物质对实验动物的半数致死量（LD50），以评估其毒性水平。
实验材料和方法：我们选取了实验室常用的小鼠作为实验动物，以及待测化学物质。
首先，我们将小鼠随机分为不同剂量组，每组包含5只小鼠。
然后，我们分别给不同剂量组的小鼠口服待测化学物质，并观察其死亡情况。
根据实验结果，我们利用经典的Probit分析法计算出LD50值。
实验结果：经过实验观察和数据统计分析，我们得出了待测化学物质的LD50值为X mg/kg。
根据国际毒性标准，我们将其毒性水平评定为（低/中等/高）。
实验讨论：LD50值是评估化学物质毒性水平的重要参数，它可以帮助我们确定合理的安全使用剂量，并指导相关毒性评价和风险评估工作。
通过本次实验，我们对待测化学物质的毒性水平有了清晰的认识，并为其在实际应用中提供了科学依据。
结论：本次实验成功测定了待测化学物质的LD50值，并对其毒性水平进行了评估。
我们将继续深入研究，以便更好地了解该化学物质的毒性机制，并为其安全使用提供更多的科学依据。
通过本次实验，我们对LD50的测定方法有了更深入的了解，并对化学物质的毒性评估工作有了更清晰的认识。
我们相信，这将有助于更好地保障人类和环境的安全。
ld50的测定实验报告
ld50的测定实验报告LD50的测定实验报告概述：LD50是一种常用的毒性测定指标，用于衡量某种物质对于生物体的毒性程度。
本实验旨在通过测定某种化学物质对小白鼠的LD50值，评估其毒性，并为毒性研究提供参考。
实验材料与方法：实验所需材料包括小白鼠、待测物质、标准饲料、饮水、实验器材等。
按照以下步骤进行实验：1. 实验组织与分组：将小白鼠随机分为若干组，每组10只。
其中一组为对照组，其余组为实验组。
2. 毒性物质的制备：待测物质按照一定浓度配制成溶液。
3. 毒性物质的给药：将待测物质溶液按照一定剂量注射到小白鼠体内，对照组注射生理盐水。
4. 观察与记录：观察小白鼠在给药后的行为、食欲、体重等变化，并记录观察结果。
5. LD50的计算：根据实验数据，利用统计学方法计算出LD50值。
实验结果与分析：根据实验数据统计，不同剂量的待测物质对小白鼠产生了不同程度的毒性反应。
观察到高剂量组小白鼠出现明显的行为异常、食欲减退、体重减轻等现象，而低剂量组则没有明显异常。
LD50值是指在给定时间内，使一半实验动物死亡的物质剂量。
通过计算LD50值，可以评估待测物质的毒性程度。
LD50值越小，表示物质对生物体的毒性越高。
实验的结果显示，待测物质的LD50值为X mg/kg。
根据国际毒理学标准，该物质被归类为高毒性物质。
这意味着在相同剂量下，该物质对生物体的毒性较强，需谨慎使用。
实验的局限性与改进：本实验仅使用小白鼠作为实验对象，其生物体特征与人类存在差异，因此对于人体的毒性评估仍需谨慎。
此外，实验中仅测定了一种待测物质，结果无法推广到其他物质。
为了提高实验的准确性和可靠性，可以考虑以下改进措施：1. 使用多种动物模型，如小鼠、大鼠、兔子等，以更全面地评估待测物质的毒性。
2. 增加实验组数和样本量，以提高统计学分析的可靠性。
3. 结合其他毒性指标，如生化指标、组织病理学等，对待测物质的毒性进行更全面的评估。
结论：LD50测定实验是一种常用的毒性测定方法，通过计算LD50值可以评估待测物质的毒性程度。
ld50测定的实验报告
ld50测定的实验报告LD50测定的实验报告引言：药物的安全性评价是药物研发过程中至关重要的一环。
在药物研发的早期阶段，需要进行一系列的实验来评估药物的毒性。
其中，LD50测定是评估药物毒性的重要方法之一。
本实验旨在通过LD50测定，评估某药物对实验动物的毒性，为进一步的药物研发提供参考。
材料与方法：1. 实验动物：选取同龄、同种、同性别的小鼠作为实验动物。
2. 药物制备：将待测药物按照一定比例配制成不同浓度的溶液。
3. 实验组设置：将小鼠随机分为若干组，每组6只，其中一组作为对照组，其余组分别注射不同浓度的药物溶液。
4. LD50测定：将药物溶液通过静脉注射的方式给予小鼠，记录注射后小鼠的行为、体重变化、呼吸等生理指标。
5. 数据处理：根据实验结果，计算出药物的LD50值。
结果与讨论：在实验过程中，观察到小鼠在注射药物后出现了一系列的生理反应。
随着药物浓度的增加，小鼠的行为异常、体重减轻、呼吸困难等现象逐渐加重。
通过对实验数据的统计分析，可以得出药物的LD50值。
LD50值是指将药物给予实验动物后，导致50%的动物死亡所需的药物剂量。
LD50值越小，说明药物的毒性越大；LD50值越大，说明药物的毒性越小。
通过LD50测定，可以初步评估药物的毒性，并为药物的安全性评价提供参考。
然而，需要注意的是，LD50测定只是评估药物毒性的初步方法，其结果并不能完全代表药物的毒性水平。
在实际的药物研发过程中，还需要进行更加全面、细致的毒性评价，包括长期毒性、亚慢性毒性和慢性毒性等实验。
此外，LD50测定也存在一定的局限性。
由于药物对不同物种的毒性可能存在差异，所以LD50值只能作为初步参考，不能直接推广到人体。
在进行LD50测定时，需要选择合适的实验动物，并进行合理的数据分析，以得出准确可靠的结果。
结论：LD50测定是评估药物毒性的重要方法之一。
通过LD50测定，可以初步评估药物的毒性水平，为药物研发提供参考。
ld50测定实验报告
ld50测定实验报告LD50测定实验报告引言：毒性测定是评价化学物质或其他物质对生物体的危害程度的重要手段之一。
其中，LD50测定是最常用的方法之一，用于确定半数致死剂量。
本实验旨在通过对小白鼠进行LD50测定，评估某种物质的毒性。
实验方法：1. 实验动物的选择与饲养：本实验选用健康的小白鼠作为实验动物。
在实验前，小白鼠需接受一段时间的适应饲养，以保证其体内没有其他药物残留。
实验动物的饲养环境应保持清洁、温度适宜，并提供充足的食物和水。
2. 实验物质的制备与稀释：实验物质应按照一定的浓度进行稀释，以便确定LD50值。
稀释过程中需注意保持实验物质的纯度和稳定性，避免因杂质或变质导致实验结果的误差。
3. 实验组的设定：将小白鼠随机分为若干组，每组包含一定数量的动物。
实验组应包括不同浓度的实验物质，以及对照组。
对照组给予生理盐水或其他无毒物质，用于与实验组进行比较。
4. 实验操作：将实验物质按照一定剂量注射到小白鼠体内，记录下注射的剂量和时间。
观察实验动物在注射后的行为、反应和症状，并记录下来。
在一定时间内观察动物的生存情况，并记录下死亡的动物数量。
实验结果与分析：根据实验数据，我们可以计算出不同剂量下的生存率，并绘制出生存率-剂量曲线。
LD50值即为使50%的实验动物死亡的剂量。
LD50值越小，说明物质的毒性越大。
实验结果显示，实验物质的LD50值为Xmg/kg。
这表明该物质具有较高的毒性，对生物体的危害较大。
LD50值的确定有助于评估物质的毒性，并为相关领域的研究和应用提供参考。
实验误差与改进：在实验过程中，可能存在一些误差，如实验动物个体差异、实验条件的变化等。
为减少误差，可以增加实验动物的数量，提高实验的重复性。
同时，控制实验条件的稳定性，如温度、湿度等因素的控制，有助于减少误差。
结论：通过LD50测定实验，我们成功评估了某种物质的毒性。
LD50值的确定对于评估物质的毒性和安全性具有重要意义。
ld50测定的实验报告
ld50测定的实验报告
LD50测定实验报告
摘要：本实验旨在通过LD50测定法评估某种化学物质对实验动物的毒性。
实
验结果表明，该化学物质的LD50值为Xmg/kg，属于中等毒性。
引言：LD50（半数致死量）是指一种化学物质对实验动物的毒性的一种度量标准，它表示在一定时间内，使一组实验动物中有50%死亡的最小剂量。
LD50的
测定对于评估化学物质的毒性和制定安全使用标准具有重要意义。
材料与方法：本实验选取了X只实验动物，分为X组，每组X只。
将化学物质
溶解在适量的溶剂中，然后按照一定的剂量分别给不同组的实验动物进行灌胃。
观察实验动物的死亡情况，并记录下各组动物的死亡数。
通过计算得出LD50值。
结果：实验结果显示，给予Xmg/kg剂量的化学物质后，第一组实验动物有X
只死亡，第二组有X只死亡，第三组有X只死亡，第四组有X只死亡，第五组
有X只死亡。
通过计算得出该化学物质的LD50值为Xmg/kg。
讨论：根据LD50值的大小，我们可以判断该化学物质的毒性程度。
通常，
LD50值越小，表示该化学物质对实验动物的毒性越大。
在本实验中，该化学物质的LD50值为Xmg/kg，属于中等毒性。
因此，在使用该化学物质时，需要谨
慎操作，避免对人体和环境造成不良影响。
结论：通过LD50测定法，我们成功评估了该化学物质的毒性，并得出了其
LD50值。
这对于制定安全使用标准和保护人体健康具有重要意义。
在今后的工作中，我们将继续深入研究该化学物质的毒性机制，以及寻找相应的防护措施
和解毒方法。
急性毒性试验-LD50的测定
急性毒性试验-LD50的测定急性毒性试验是一种通过给实验动物注射、灌胃或其他途径给予高剂量试验物质来评估其致死或严重的毒性反应的试验。
LD50是一种常用的急性毒性指标，表示半数实验动物在接受单位剂量试验物质后死亡的剂量。
本文将介绍LD50的测定方法和其应用。
一、LD50的测定方法1. 实验动物的选择LD50实验通常使用小鼠、大鼠、兔子和狗等动物进行。
选用实验动物需要秉持道德原则，并考虑到动物的生物学特征、毒物代谢能力等方面的因素。
例如，小鼠和大鼠体型较小、代谢能力较低，适合于测定具有代谢性毒性的化合物的LD50；兔子和狗体型较大，代谢能力较强，适合于测定纯化、非代谢性毒性的化合物的LD50。
2. 给药途径和剂量选择通常使用口服、皮下注射、静脉注射等给药途径。
对于口服试验，需要注意试验物质的水溶性和毒性，对于毒性高的化合物，通常使用灌胃的方式。
实验的剂量需要考虑到实验动物体型、种类、代谢能力等因素，并进行逐步递增以确定LD50。
3. 实验计划设计实验计划设计需要考虑到试验物质的毒性、剂量效应关系和死亡率等因素。
一般采用正反两次递增的方法，进行急性毒性试验评估。
根据试验物质的毒性情况和实验者的安全考虑，同时采取风险预警措施。
4. 数据处理和计算完成实验后，需要统计每个剂量组的死亡率和死亡时间。
按照统计学原理，可以根据实验数据计算出LD50值。
LD50值表示使用单位剂量试验物质对半数实验动物致死的剂量。
该值越小，试验物质的毒性越高。
二、LD50的应用LD50值可以作为急性毒性评估的定量指标，用于比较不同化合物的毒性。
在化学品、药品等领域里进行LD50测定可以帮助人们更好地预测和评估一些原料与产品的安全性，以便于过程优化和产品开发，同时为相关政策制定提供科学依据。
LD50值的应用最为广泛的领域是毒性测试和安全性评估。
在毒理学和环境毒理学领域里，常用LD50为评估的标准；在某些国家的法律法规中，也要求企业对使用的化学品或产品进行毒性测试，以保证工人和消费者的安全。
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半数致死量的意义
测定药物的LD50是药物急性毒性实验的重 要内容。 LD50是恒量药物急性毒性的重要指标。
LD50的测定
一、测定LD50的常用方法：
1. 改良冠氏法：方法简单，计算简便。 2. 序贯法（上下法）：使用动物少，费时多， 不适于作用慢的药物 3. Biss法：设计严谨，结果可靠，是目前公认 的最佳方法，但计算复杂，一般需借助于计 算机或计算器才能进行计算。
100个自然数的随机排列
1 0 10 20 30 40 50 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
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60
70 80 90
26 23 49 51 04 00 58 15 70 64
03 08 34 52 53 27 83 90 63 88
86 20 97 47 98 40 78 57 67 59
37 36 66 83 43 29 23 95 32 64
19 54 65 28 63 05 04 20 89 00
62 81 78 59 48 17 52 68 15 79
47 30 84 92 94 26 71 99 02 08
10 55 61 13 85 33 88 69 87 97
16 86 53 56 80 06 74 67 90 22
86 19 34 69 13 54 26 99 30 22
09 94 96 60 77 01 47 50 55 23
48 73 15 98 06 40 18 88 21 16
53 92 95 85 11 29 58 25 78 83
63 59 28 02 91 42 41 71 56 33
66 00 85 67 76 17 90 14 51 46
3.LD5095％的平均可信限： LD50±4.5×Sx50×LD50 (P=0.95) 说明： Xm：最大剂量组的剂量对数 i：相邻两组对数剂量的差值（大剂量组减小剂 量组） Pm：最大剂量组的死亡率 Pn：最小剂量组的死亡率 P：各组死亡率 n：每组动物数
Summary
• 根据实验情况而定
选择分组组数及剂量比值简表
4.观察： 给药后先密切观察12小时，以后每天观察 1-2次，连续观察7天。 5.饲养： 每组动物应♀♂分笼饲养。 6.记录： 每组动物死亡情况（死亡数、死亡时间、 死亡前症状）；中毒情况（中毒症状、出现时 间、消失时间）。 7. 统计计算： 求出LD50及其95％的可信限。
三、本次实验（自做）
89 70 U=79 20 R=0.034 45 08 30 05 81 62 84
剂量比（1：K）K= LD100/LD0 2左右 = 3左右 4左右 6左右 10左右 14左右 0.6 0.65 3-4组 4-5组 5-6组 6-7组 7组 0.7 0.75 0.8 0.85 0.88
返回
0.9
3-4组 4-5组 5-6组 6-7组
3-4组 4组 4-5组 5组 5-6组 6组 7-8组 8组 9-10组 8-9组 10组
（二） 正式实验： 1.剂量分组： 在预试测得的LD0及LD100的剂量范围，按 等比级数（一般按1：0.75-0.8）分成4-9个剂量 组。 Tab. 2. 动物分组： 一般每组可用10只动物，按均衡随机化原 则将动物分成4-9组。 Tab. 3. 给药： 每组动物按相应的浓度0.2ml/10g给药。
改良冠氏法测定解磷定的LD50及其95％ 的可信限。 1.LD50的计算： 1）最小剂量组的死亡率为0％；最大剂量组的 死亡率为100％时： LD50=lg-1〔Xm-i(∑p-0.5)〕 2）最小剂量组的死亡率大于0％而小于30％， 或（和）最大剂量组死亡率小于100％而大于 70％时： LD50=lg-1〔Xm-i〈∑p –(3-pm-pn)/4 〉〕 2.LD50的标准误：Sx50=i×√(∑p - ∑p2)/(n-1)
73 85 60 66 25 13 94 16 68 29
36 64 88 93 21 22 33 52 61 82
91 35 69 81 06 50 18 75 46 07
84 57 96 48 28 09 45 05 10 11
11 80 41 31 62 71 79 30 87 92
19 43 74 02 85 24 12 79 42 99
二、实验步骤：
（一）预试： 目的：找出LD0及LD100 。 方法： 每组用4只动物，分别给予10倍稀释的药 液0.2ml/10g，再在4/4及0/4组的上下分别按 0.14ml/10g、0.1ml/10g、0.07ml/10g、 0.05ml/10g剂量递减或按0.28ml/10g、0.4ml/10g 的剂量递增，直至找出较可靠的LD0及LD100。
51 U=76 93 34 R=0.0459 79 41 42 11 24 62 39
4
5
6
7
8
9
Back
20
30 40 50 60
70
80 90
44 31 72 80 52 43 07 92 65 39
12 64 03 75 79 36 24 49 57 93
07 61 89 82 04 27 97 74 10 60
76 U=74 72 R=0.0659 01 44 17 39 95 36 65 89
2
0 10 20 30 40 50 60
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
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70
80 90
48 96 88 44 14 70 27 60 07 21
73 31 09 25 45 91 75 72 58 50
12 57 03 98 76 46 40 01 35 49
4组 5组 7-8组 9组 10组
5-6组 6-7组 7-8组 6-8组 9组 9组 10组
实验动物的均衡随机分组
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1.首先将实验动物按性别分为两组 2.对两组动物分别进行称重、标号 3.按体重对动物进行分层 4.对每层的动物查随机号，Tab. 用随机号除欲 分组数，按余数进入相应的组。 5.依次分完全部动物后，再进行调节，使各组 动物数相等。