食品中蛋白质的测定实验报告
蛋白质检验实验报告
一、实验目的1. 掌握蛋白质的定性检验方法。
2. 学习使用双缩脲试剂进行蛋白质的定量分析。
3. 了解蛋白质在生物体中的重要功能及其检测的意义。
二、实验原理蛋白质是由氨基酸通过肽键连接而成的大分子化合物，具有复杂的空间结构和多样的生物活性。
蛋白质的检验方法主要包括定性检验和定量分析。
1. 定性检验：通过观察蛋白质与特定试剂反应产生的颜色变化，判断蛋白质的存在与否。
2. 定量分析：利用双缩脲试剂与蛋白质中的肽键反应，生成紫色络合物，根据颜色深浅测定蛋白质的含量。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：鸡蛋清、牛奶、豆浆、大豆粉、玉米粉、牛肉、鸡肉、猪肉、鱼、虾、蛋壳、鱼鳞、羽毛等。
2. 试剂：双缩脲试剂A（硫酸铜溶液）、双缩脲试剂B（氢氧化钠溶液）、无水乙醇、蒸馏水、标准蛋白质溶液（如牛血清白蛋白）等。
四、实验步骤1. 蛋白质定性检验- 取少量待测样品，加入双缩脲试剂A，振荡均匀。
- 加入双缩脲试剂B，振荡均匀。
- 观察溶液颜色变化，与标准蛋白质溶液颜色对比，判断蛋白质的存在与否。
2. 蛋白质定量分析- 准备一系列已知浓度的标准蛋白质溶液。
- 分别吸取一定量的标准蛋白质溶液和待测样品，加入双缩脲试剂A和B。
- 在相同条件下，测定溶液的吸光度。
- 以标准蛋白质溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
- 根据待测样品的吸光度，从标准曲线中查得蛋白质浓度。
五、实验结果与分析1. 蛋白质定性检验结果- 鸡蛋清、牛奶、豆浆、大豆粉、牛肉、鸡肉、猪肉、鱼、虾等样品均呈阳性反应，说明这些样品中含有蛋白质。
- 蛋壳、鱼鳞、羽毛等样品呈阴性反应，说明这些样品中蛋白质含量较低或不含蛋白质。
2. 蛋白质定量分析结果- 通过绘制标准曲线，可以计算出待测样品中蛋白质的浓度。
六、实验讨论1. 本实验采用双缩脲试剂进行蛋白质的检验，操作简便，结果可靠。
2. 蛋白质在生物体中具有重要的生理功能，如构成细胞结构、运输营养物质、调节生理活动等。
检测食物营养实验报告(3篇)
第1篇一、实验背景随着生活水平的提高，人们对食品的营养价值越来越关注。
为了了解食物中的营养成分，本实验旨在通过检测食物中的蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质等营养成分，为人们提供科学的饮食指导。
二、实验目的1. 了解食物中主要营养成分的种类及含量。
2. 掌握检测食物营养成分的方法。
3. 为合理搭配膳食提供依据。
三、实验原理食物中的营养成分主要包括蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质等。
本实验采用以下方法检测：1. 蛋白质：采用双缩脲法检测，通过蛋白质与双缩脲试剂反应生成紫色复合物，根据紫色深浅判断蛋白质含量。
2. 脂肪：采用索氏抽提法检测，通过有机溶剂提取食物中的脂肪，测定提取物重量，计算脂肪含量。
3. 碳水化合物：采用费林试剂法检测，通过碳水化合物与费林试剂反应生成红色沉淀，根据沉淀颜色深浅判断碳水化合物含量。
4. 维生素：采用高效液相色谱法检测，通过提取食物中的维生素，测定其含量。
5. 矿物质：采用原子吸收光谱法检测，通过测定食物中矿物质的吸收光谱，计算其含量。
四、实验材料1. 实验仪器：天平、烘箱、索氏抽提器、分光光度计、高效液相色谱仪、原子吸收光谱仪等。
2. 实验试剂：双缩脲试剂、索氏抽提剂、费林试剂、维生素提取剂、矿物质提取剂等。
3. 实验样品：鸡蛋、牛奶、大米、面粉、蔬菜、水果等。
五、实验步骤1. 蛋白质检测：（1）称取一定量的食物样品，加入双缩脲试剂，振荡均匀。
（2）将混合液放入水浴锅中，加热至沸腾，保持5分钟。
（3）取出混合液，冷却至室温，用分光光度计测定吸光度。
（4）根据标准曲线计算蛋白质含量。
2. 脂肪检测：（1）称取一定量的食物样品，加入索氏抽提剂，进行索氏抽提。
（2）将提取物转移至烧杯中，用烘箱烘干至恒重。
（3）称量烘干后的提取物重量，计算脂肪含量。
3. 碳水化合物检测：（1）称取一定量的食物样品，加入费林试剂，进行水浴加热。
（2）观察沉淀颜色，根据颜色深浅判断碳水化合物含量。
蛋白质测定实验报告
蛋白质测定实验报告蛋白质测定实验报告引言：蛋白质是生命体内最基本的有机物之一，具有重要的生物学功能。
蛋白质测定实验是生物化学实验中常见的一种实验方法，通过测定样品中的蛋白质含量，可以了解生物体的营养状况、疾病发展以及药物疗效等方面的信息。
本实验旨在通过比色法测定蛋白质的浓度，并探究实验中可能遇到的问题和解决方法。
实验方法：1. 样品制备：将待测样品制备成适宜的浓度，通常需要进行稀释或浓缩处理。
2. 蛋白质与试剂反应：将样品与试剂按照一定比例混合，使蛋白质与试剂发生特定的反应。
常用的试剂包括伯胺蓝、比酚等。
3. 光度测定：将反应后的样品溶液置于分光光度计中，通过测量吸光度来间接测定蛋白质的浓度。
4. 标准曲线绘制：根据已知浓度的标准品，测定各标准品的吸光度，并将吸光度与浓度绘制成标准曲线。
5. 测定样品浓度：根据标准曲线，通过测定样品的吸光度，反推出样品中蛋白质的浓度。
实验结果与讨论：在本次实验中，我们使用了伯胺蓝作为试剂，制备了一系列不同浓度的标准品，并通过测定其吸光度绘制了标准曲线。
接下来，我们分别测定了三个未知样品的吸光度，并利用标准曲线计算出其蛋白质浓度。
实验中，我们发现了一些问题。
首先，样品的制备过程中，可能会出现蛋白质的损失或者污染，这会导致最终测定结果的误差。
为了解决这个问题，我们可以在制备过程中加入保护剂，如酶抑制剂或蛋白酶抑制剂，来减少蛋白质的降解。
其次，比色法本身对样品的颜色敏感，如果样品本身的颜色较深，会干扰吸光度的测定。
为了解决这个问题，可以通过稀释样品或者使用其他试剂来减少干扰。
在实验结果的讨论中，我们发现样品A的蛋白质浓度较高，样品B的蛋白质浓度较低，而样品C的蛋白质浓度与标准品相近。
这些结果提示我们样品A可能是一种富含蛋白质的食品，样品B可能是一种低蛋白质的食品，而样品C可能是一种未知的食品，需要进一步的研究来确定其成分。
结论：通过本次蛋白质测定实验，我们成功地测定了三个样品中蛋白质的浓度，并对实验中可能遇到的问题提出了解决方法。
蛋白质含量测定实验报告
蛋白质含量测定实验报告
实验目的：测定样品中蛋白质的含量。
实验原理：
蛋白质是生物体中重要的营养成分，其含量的测定对于食品、生物化学研究等都具有重要意义。
本实验采用双氧水法测定蛋白质的含量。
双氧水法原理是将双氧水与被测物中的蛋白质发生氧化反应，生成到氨基酸的过氧化氢，过氧化氢再与钼酸铵生成深蓝色化合物。
根据形成的深蓝色化合物的吸光度与蛋白质的含量成正比关系，可以通过比色法测定样品中蛋白质的含量。
实验步骤：
1. 将待测样品和标准蛋白质溶液分别取1ml到不同的试管中。
2. 加入4ml双氧水试剂，混匀。
3. 在室温下放置20分钟。
4. 加入适量的硫酸试剂，混匀。
5. 在60℃水浴锅中恒温加热10分钟。
6. 冷却至室温。
7. 分别将标准蛋白质溶液和待测样品溶液吸取1ml到比色皿中。
8. 用比色皿中的溶液分别测定吸光度，以比色皿中双氧水试剂为参比。
9. 根据标准曲线计算待测样品中蛋白质的含量。
实验结果：
根据吸光度测定值和标准曲线得到待测样品中蛋白质的含量为X mg/ml。
实验讨论：
蛋白质的含量测定是一项常见的实验，通过双氧水法可以快速准确地测定样品中蛋白质的含量。
在实验过程中，应注意操作的准确性和实验条件的控制，避免测定误差的产生。
此外，标准曲线的制备和测定结果的分析也是关键步骤，应进行仔细的处理和验证。
实验结论：
经过测定，得到待测样品中蛋白质的含量为X mg/ml。
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实验原理：
蛋白质是组成细胞的主要成分之一，也是组成食物的重要营养成分之一。
蛋白质在酸性条件下，能与双氨基苯酚（Folin-Ciocalteu试剂）反应，在蓝色复合物的形成下吸光度增加。
利用这一现象可以测定蛋白质的含量。
实验步骤：
1. 食品的预处理
取适量的食品，如鸡蛋、瘦肉、豆腐等，先将食品在研钵中打碎，然后加入适量的蒸馏水，混合均匀，并将混合液倒入过滤纸筒中，收集澄清液并备用。
2. 制备标准曲线
取不同浓度的牛血清蛋白标准溶液（0.1ug/mL、0.2ug/mL、0.4ug/mL、0.6ug/mL、0.8ug/mL），各加入1mL NaOH（0.1mol/L）及2.5mL双氨基苯酚溶液，室温下混合放置，15min后加入 2mLNa2CO3溶液（0.2mol/L），混合均匀，最后用蒸馏水定容至25mL。
利用分光光度计测定吸光度值，制备标准曲线。
3. 测定样品
4. 计算样品中蛋白质的含量
根据标准曲线求出样品中蛋白质的含量。
实验结果：
样品 | 吸光度值 | 蛋白质含量（g/100g）
---|---|---
鸡蛋 | 0.21 | 12.56
瘦肉 | 0.55 | 20.00
豆腐 | 0.45 | 8.90
通过该实验，我们成功地测定了食品中蛋白质的含量，结果表明瘦肉的蛋白质含量最高，豆腐的蛋白质含量最低。
这有助于我们选择更健康的食物。
同时，我们还注意到样品的吸光度值与蛋白质含量呈正相关，这也说明了利用双氨基苯酚对蛋白质进行测定的可行性。
实验一食品中蛋白质含量测定凯氏定氮法
营养技能实训指导≤烹饪营养与安全≥课程组福州黎明职业技术学院药学系2007年02月目录1、实训一食物中蛋白质含量测定（凯氏定氮法）2、实训二食物中脂肪含量的测定（索氏抽提法）3、实训三荧光法测定食物中维生素B24、实训四大学生食谱编制与计算5、实训五用配餐软件配制幼儿园一周食谱6、实训六烹饪营养配餐与菜单设计7、实训七厨房用具砧板的卫生调查（细菌菌落总数测定）8、实训八厨房卫生调查（大肠菌群快速检测法）实训一食物中蛋白质含量测定（凯氏定氮法）一、目的与要求1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。
2、掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。
二、实验原理蛋白质是含氮的化合物。
食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵，留在消化液中，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数，即得蛋白质含量。
因为食品中除蛋白质外，还含有其它含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白三、仪器与试剂（一）试剂1、硫酸铜（CuSO4·5H20）2、硫酸钾3、硫酸（密度为1.8419g/L）4、硼酸溶液（20g/L）5、氢氧化钠溶液（400g/L）c——盐酸标准滴定溶液浓度（mol/L）；0.0140 ——1.0mL 盐酸[c(HCl) 1.000mol / L]标准滴定溶液相当的氮的质量（g）；m——样品的质量（g）；F——氮换算为蛋白质的系数，一般食物为6.25；乳制品为6.38；面粉为5.70；高梁为6.24；花生为5.46；米为5.95；大豆及其制品为5.71；肉与肉制品为6.25；大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83；芝麻、向日葵5.30。
计算结果保留三位有效数字。
六、注意事项及说明1、本法也适用于半固体试样以及液体样品检测。
半固体试样一般取样范围为2.00g~5.00g；液体样品取样10.0mL~25.0mL（约相当氮30mg~40mg）。
蛋白含量测定实验报告
一、实验目的1. 掌握双缩脲试剂法测定蛋白质含量的原理和方法；2. 熟悉实验操作步骤，提高实验技能；3. 了解蛋白质含量测定的意义和实际应用。
二、实验原理双缩脲试剂法是一种常用的蛋白质定量方法，其原理是蛋白质分子中的肽键在碱性条件下与铜离子反应，生成紫红色络合物。
紫红色络合物的吸光度与蛋白质含量在一定范围内呈线性关系，通过测定吸光度，可以计算出蛋白质的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 蛋白质标准品- 双缩脲试剂A：硫酸铜溶液- 双缩脲试剂B：酒石酸钾钠溶液- 0.1mol/L氢氧化钠溶液- 0.9%氯化钠溶液- 试管、移液器、分光光度计、天平等2. 实验仪器：- 双缩脲试剂瓶- 磁力搅拌器- 水浴锅- 721型分光光度计四、实验步骤1. 配制标准蛋白质溶液：准确称取一定量的蛋白质标准品，用0.1mol/L氢氧化钠溶液溶解，配制成一定浓度的标准蛋白质溶液。
2. 混合试剂：将双缩脲试剂A和双缩脲试剂B按照一定比例混合，配制成双缩脲试剂。
3. 设置实验组：取若干支试管，分别加入不同浓度的标准蛋白质溶液、待测蛋白质溶液和0.9%氯化钠溶液。
4. 添加试剂：向每组试管中加入适量的双缩脲试剂，混匀。
5. 水浴加热：将试管放入水浴锅中，加热至60℃，保持10分钟。
6. 冷却：取出试管，置于室温下冷却。
7. 测定吸光度：用721型分光光度计在540nm波长下测定吸光度。
8. 绘制标准曲线：以标准蛋白质溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
9. 计算待测蛋白质含量：根据待测蛋白质溶液的吸光度，从标准曲线上查得相应的蛋白质浓度，计算待测蛋白质含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据实验数据，绘制标准曲线。
2. 待测蛋白质含量计算：根据待测蛋白质溶液的吸光度，从标准曲线上查得相应的蛋白质浓度，计算待测蛋白质含量。
六、讨论与心得1. 实验过程中，要注意实验操作的准确性，避免误差产生。
2. 双缩脲试剂法测定蛋白质含量具有操作简便、快速、灵敏等优点，但在实际应用中，要注意选择合适的试剂和仪器，以保证实验结果的准确性。
测蛋白质含量实验报告
测蛋白质含量实验报告测蛋白质含量实验报告蛋白质是生物体内最基本的组成部分之一，具有重要的生理功能。
因此，准确测定蛋白质含量对于生物学研究和食品科学等领域具有重要意义。
本文将介绍一种常用的测定蛋白质含量的方法——布拉德福法，并通过实验结果探讨其应用范围和局限性。
布拉德福法是一种基于蛋白质与染料结合的原理来测定蛋白质含量的方法。
该方法利用染料与蛋白质之间的亲和作用，通过测定染料的吸光度来间接测定蛋白质的含量。
在实验中，我们使用了布拉德福试剂和标准蛋白质溶液，以及待测样品。
首先，我们需要制备一系列不同浓度的标准蛋白质溶液。
通过将已知浓度的标准蛋白质与布拉德福试剂混合，形成一种混合物。
然后，利用分光光度计测定该混合物的吸光度，并绘制标准曲线。
标准曲线的横坐标为标准蛋白质的浓度，纵坐标为吸光度。
通过测定待测样品的吸光度，并利用标准曲线，我们可以计算出待测样品中蛋白质的浓度。
在实验过程中，我们发现布拉德福法具有一定的优点和局限性。
首先，该方法操作简单，结果可靠。
布拉德福试剂与蛋白质结合后会发生颜色变化，通过测定吸光度可以准确测定蛋白质的含量。
其次，该方法适用范围广。
无论是高浓度还是低浓度的蛋白质溶液，布拉德福法都可以进行测定。
此外，该方法对于不同种类的蛋白质也适用。
无论是动物蛋白质还是植物蛋白质，布拉德福法都可以准确测定其含量。
然而，布拉德福法也存在一些局限性。
首先，该方法对于某些特定的蛋白质可能不适用。
某些蛋白质的氨基酸组成可能会影响其与布拉德福试剂的结合情况，从而导致测定结果的不准确。
其次，该方法对于含有干扰物的样品可能会出现误差。
某些样品中可能存在与蛋白质结合的其他物质，这些物质可能会干扰布拉德福试剂与蛋白质的结合，导致测定结果的偏差。
综上所述，布拉德福法是一种常用的测定蛋白质含量的方法，具有操作简单、适用范围广的优点。
然而，该方法也存在一定的局限性，对于某些特定的蛋白质和含有干扰物的样品可能会出现误差。
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1.目的
掌握凯氏定氮法测蛋白质的原理、操作、条件、注意事项。
2.原理
蛋白质是含氮有机化合物。
食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解。
分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后在以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量计算含氮量再乘以换算系数，即为蛋白质含量。
3.试剂
3.1浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾，所有试剂均用不含氮的蒸馏水配制
3.2混合指示液
1份（1g/L）甲基红乙醇溶液与5份1g/L溴甲酚氯乙醇溶液临用时混合。
也可用2份甲基红乙醇溶液与1份1g/L次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
3.3氢氧化钠溶液（400g/L）
3.4标准滴定溶液
硫酸标准溶液［c（1/2H2SO4）=0.0500mol/L］或盐酸标准溶液［c（HCl）
0.0500mol/L］
3.5硼酸溶液（20g/L）
4.仪器
定氮蒸馏装置
5.样品
全蛋（2.47g）
6.操作
6.1样品处理
准确称取2—5g半固体样品，小心移入干燥洁净的500mL凯氏烧瓶中，然后加入研细的硫酸铜0.5g，硫酸钾10g和浓硫酸20mL，轻轻摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜放于加有石棉网的电炉上，小火加热，待内容物全部炭化后，泡沫完全消失后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色呈请透明后，再继续加热0.5h，取下放冷，慢慢加入20mL水。
放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。
取与处理样品相同的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
6.2连接装置
装好定氮装置，于水蒸气发生器内装水至2/3处，加甲基红指示剂数滴及少量硫酸，以保持水呈酸性，加入数滴玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，
加热至水沸腾。
6.3蒸馏、吸收及滴定
向接收瓶（锥形瓶）内加入10mL20g/L硼酸溶液及混合指示剂1-2滴，并使冷凝管的下端插入液面下。
用移液管移取10.00mL样品消化稀释液有小漏斗室流入反应室，在将10mL 400g/L氢氧化钠溶液倒入碱液管中，提起玻璃塞使其缓缓流入反应室，并加水于小漏斗中以防止漏气。
开始蒸馏。
蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏5min，移动接收瓶，是冷凝管下端离开液面，再蒸馏1min，然后用少量的水冲洗冷凝管下端外部。
取下接收瓶，以0.05 mol/L盐酸标准溶液滴定至由蓝色变为微红为终点，记录盐酸溶液用量。
同时吸取10.00mL空白消化液按以上操作为空白实验，记录空白试验消耗盐酸标准溶液的体积。
7.数据记录
7.1原始数据
7.2可疑值弃留
实验获得的数据均合理，无可疑值。
7.3整理数据
精滴/mL
粗滴/mL
平行试验1 平行试验2 平行试验3 空白试验
5.90 5.30 5.50 5.60 0.45
8.计算
（V标-V0）×Ca×0.014
X = ———————————— ×100×K
m样/V定×V测
式中：X—样品中蛋白质含量，%；
V标—主试验（测定用液）消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积，mL；
V0—空白试验消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积，mL；
Ca—硫酸或盐酸标准溶液的物质的量浓度，mol/L；
0.014—氮的物质的量质量×103，g/mol；
m样—样品的质量（体积），g（mL）；
V定—消化液定容体积，mL；
V测—消化液参加测定（测定用液）的体积，mL；
K—氮换算为蛋白质的系数，蛋白质中的氮含量一般为15～17.6%，按16%计算乘以6.25即为蛋白质，乳制品为6038，面粉为5.70，玉米、高粱
为6.24，花生为5.46，米为5.95，大豆及其制品为5.71，肉或肉制品
为6025，大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83，芝麻、向日葵为5.30。
9.结果
V标=（V1+V2+V3）/ 3 =（5.30+5.50+5.60）/ 3 = 5.47
（V标-V0）×Ca×0.014 (5.47mL-0.45mL)×0.0500mol/L×0.014 X =——————————×100×K=—————————————————m样/V定×V测 2.47g/100mL×10mL ×100×6.25=8.89%
10.结果可靠性分析
10.1精密度
平均偏差=（0.17+0.03+0.13）/3=0.11
相对平均偏差=(0.11/5.47) ×100%=0.02%
10.2误差分析
10.2.1根据实际操作情况分析误差的产生原因
在做空白实验前可能由于定氮瓶未完全清洗干净，有之前的样液残留或者之前样液产生的氨气未排空而导致空白实验消耗的标准溶液过多，使实验结果偏低。
10.2.2误差的方向性
本实验产生误差为负误差。
11.结论
三次平行试验均吸取10mL消化液，产生的氨气经吸收后以0.05 mol/L盐酸标准溶液滴定，消耗盐酸浓度依次为5.30mL、5.50mL、5.60mL（相对平均偏差为0.02%）。
取三者平均值5.47mL计算得样品蛋白质含量为8.89%。
由于空白实验前定氮瓶未完全清洗干净，有之前的样液残留或之前样液产生的氨气未排空导
致空白实验消耗的标准溶液过多，结果偏低，产生误差为负误差。
12.思考题
12.1为什么叫粗蛋白？
样品中常含有核酸、生物碱、含氮类脂、卟啉以及含氮色素等非蛋白质的含氮化合物，非纯蛋白质，故称粗蛋白。
12.2试剂及用途？
浓硫酸：消化、氧化剂
硫酸铜：催化剂、指示消化终点
硫酸钾：使消化温度升高到400℃
混合指示剂：指示滴定终点
氢氧化钠溶液：用于蒸馏，使氨气溢出。
硼酸溶液：吸收液，将氨气固定于吸收液中，形成硼酸铵。
硫酸标准溶液或盐酸标准溶液：用于滴定，与硼酸铵反应
12.3各步终点？
消化终点：溶液由黑色变为蓝绿色澄清透明。
蒸馏终点：凯氏瓶内溶液变为深蓝色或产生黑色沉淀，然后用表面皿接几滴馏出液，用奈氏试剂检查，如无红棕色物生成，表示蒸馏完毕。
滴定终点：用盐酸标准溶液直接滴定至溶液由蓝色变为微红色即为终点。
12.4注意事项?
移液管不可交叉使用，防止酸碱试剂污染；蒸馏装置不能漏气；消化时，火力由弱到强，烧瓶倾斜呈45°；瓶口放一长颈漏斗；蒸馏与吸收，先进行吸收操作，冷凝管末端必须插入吸收液中，然后再进行蒸馏的操作；蒸馏结束时，将管离开液面，蒸馏1min，再用少量蒸馏水洗管外壁；滴定，先粗滴，后精滴。
12.5叙述整个实验中有关颜色的变化，为什么？
消化终点：由黑色变为蓝绿色澄清透明。
因为浓硫酸具有脱水性和氧化性，使有机物炭化呈黑色，待有机物全部被消化完后，不再有硫酸亚铜生成，溶液呈现清澈的蓝绿色。
蒸馏终点：凯氏瓶内溶液变为深蓝色或产生黑色沉淀。
加入氢氧化钠后，与硫酸铜反应生成氢氧化铜沉淀，在高温下分解呈氧化铜，产生黑色沉淀。
滴定终点：用盐酸标准溶液直接滴定至溶液由蓝色变为微红色即为终点。
硼酸铵是强碱弱酸盐，呈碱性，混合指示剂会显蓝色。
用盐酸滴定后，溶液呈酸性，因此指示剂显微红色。