检验程序确认和验证
检验方法的验证确认步骤及详细计算方法
检验方法的验证确认步骤及详细计算方法验证和确认是研究中非常重要的步骤，它们在科学研究、工程应用和质量控制等领域起着至关重要的作用。
在本文中，我将详细介绍验证和确认步骤以及计算方法。
验证是指通过实验、模拟或者理论分析来检验一些事物、方法或者模型是否正确、可行和有效。
验证的目标是确定一个事物是否符合预期的要求或者是否达到设计或规范的要求。
验证的步骤通常包括以下几个方面：1.确定验证目标：明确验证的目标和要求，例如确定一些新方法是否能够实现预期的效果。
2.设计验证试验：根据验证目标，设计相应的试验方案。
这包括制定试验步骤、选取适当的试验参数和测量方法，以及选择合适的实验样本和实验条件。
3.进行实验或模拟：根据试验方案，进行实验或模拟验证。
实验过程中需要准确记录实验数据和观察结果，以便后续分析和评估。
4.分析和评估实验结果：对实验数据进行统计分析和评估。
常用的方法包括计算平均值、标准差、置信区间等统计指标，以及使用图表和图像进行数据可视化和比较。
5.判断验证结果：根据分析和评估的结果，判断验证的结论。
如果实验结果符合预期要求或者设计规范，则验证被认为是成功的。
如果实验结果不符合要求，则需要重新进行验证或者修改设计。
确认是指通过重复实验或者观测来验证验证结果的可靠性和重复性。
确认的目标是确定验证结果的偶然误差和系统误差范围，并提供可靠的实证依据。
确认的步骤通常包括以下几个方面：1.设计确认试验：根据验证结果，设计相应的确认试验方案。
确认试验需要考虑到验证试验中的不确定性和可能存在的偶然误差，并增加重复试验的次数和重复观测的次数。
2.进行重复实验或观测：根据确认试验方案，进行重复实验或观测。
实验或观测的过程要保持一致性，并记录实验数据和观察结果。
3.分析和评估确认结果：对重复实验或观测的数据进行统计分析和评估。
同样可以使用计算平均值、标准差、置信区间等统计指标，以及使用图表和图像进行数据可视化和比较。
4.判断确认结果：根据分析和评估的结果，判断确认的结论。
例行检验和确认检验程序
例行检验和确认检验程序1.0 目的为了确保通过强制性认证的产品，批量生产的成品关键元器件、材料与型式试验样机的一致性、符合性，满足强制性产品认证的质量要求。
2.0 适用范围本程序适用于公司所有通过强制性认证产品的例行检验和确认检验过程。
3.0 职责3.1 质检部负责所有通过强制性认证产品的例行检验。
3.2 检测中心负责所有通过强制性认证产品的确认检验。
3.3质检部负责保存例行检验记录，检测中心负责保存确认检验记录。
3.4检测中心负责将本部门不能完成的确认检验项目委托第三方认证机构完成。
4.0 业务程序4.1定义4.1.1例行检验是在生产的最终阶段对生产线上的产品进行的100%检验，例行检验应于机器老化之后进行，由线上QC执行检验。
4.1.2确认检验是为验证产品持续符合标准要求进行的抽样检测，确认试验应按标准的规定进行。
4.2工程部编制例行检验的作业指导书，明确例行检验的检验项目、检验方法、检验仪器、判定依据等内容。
4.3质检部按作业指导书要求对认证产品进行例行检验/验证，其检验项目为：（1）电源线破损使金属线外露或电源插头绝缘破损使带电部分可触及；（2）耐压绝缘测试安全检验。
4.4 检测中心根据已批量生产的认证产品的生产计划，编制认证产品的周期检验的试验计划，已通过强制性认证并批量生产的产品确认检验的周期为电磁兼容检验项目为：每年一次，安全检查项目为：每半年一次。
4.5 检测中心根据试验计划，负责从成品库的合格产品中随机抽取一台相应的产品，按强制性认证产品的要求进行检测，本部门检测不了的项目安排送到国家指定认可的检测机构检测；5.0 引用文件《3C认证工厂质量保证能力要求》6.0 质量记录《QC产品检验日报表》《重点工位点检表》《确认检验报告》。
确认与验证的区别
新版GMP条款：第一百四十九条应当根据验证的结果确认工艺规程和操作规程。
问题：该条款是否混淆了确认和验证的定义？新版中的确认和验证定义是否科学？讨论：1、根据新版术语释义，确认证明厂房、设施、设备能正确运行并可达到预期结果的一系列活动。
验证是证明任何操作规程（或方法）、生产工艺或系统能够达到预期结果的一系列活动。
所以该条款将两者混为一谈，增加了大家对条款的误解。
正解是根据验证的结果确定是否批准工艺规程和操作规程。
验证只是证明工艺规程和操作规程的可靠性和重现性，而不是确认工艺参数。
2、条款对两者的定义欠妥，只是规定了对象的不同，而对其目的却表述的一模一样，都是证明达到预期结果。
两者的区别恰恰就在目的上。
确认是已经有了明确的要求或者标准，确认结果是证明对象与设计要求或标准的符合性验证是已经有了明确的目的（确保产品质量），验证结果是证明对象（过程）的可靠性和重现性看了GMP的讨论,常常谈到"验证",其实是确认(validation)的内容,觉得应该纠正过来:一不同的定义ISO9000-2000 3.8.5 验证verification通过提供客观证据对规定要求已得满足的认定注1:”已验证”一词用于表示相应的状态.注2:认定可包括下述活动,如:--变换方法进行计算;--将新设计规范与已证实的类似设计规范进行比较;--进行试验和演示;--文件发布前的评审.ISO9000-2000 3.8.6 确认validation通过提供客观证据对特定的预期用途或应用要求已得到满足的认定. 注1:”已确认”表示相应的状态.注2:确认所使用的条件可以是实际的或是模拟的.用这不同的定义来解释以下几个实例:洁净厂房的洁净度是否达到十万级,是需要验证的,可以用测试的方法来验证.但洁净度十万级的环境是否能满足生产的需要,是要通过对生产过程进行确认的.厂房熏蒸是个过程,应该用多少时间,用多少剂量可以达到预期目的,对这过程需要确认,而每次的熏蒸应该验证是否是用了这些时间和剂量.产品设计后,各技术指标是否达到(标准的)要求,要进行设计验证,一般用检测的方法,如心电监护仪的”频率响应”,超声诊断仪的”分辨率”,输液器的”连接牢固度”等等.但”频率响应”能否满足临床监护的需要/”分辨率”能否满足临床诊断的需要”连接牢固度”能否满足临床使用的需要是需要通过设计的确认来证实,二长期混淆的原因这二个定义显然是有区别的,在我们医药行业内,引入国外的GMP管理经验,但在翻译时,并没有仔细推敲,所以把validation 翻译成了”验证”,包括许多资料也是这样翻译的,如Validation of Aseptic Pharmaceutical Processes 翻译为”无菌制药工艺的验证”([美]弗里德里克.卡利登编上海医药行业协会译).这样长期以来对这二个不同的定义混淆在一起,在执行GMP中也有模糊的理解.ISO9000对这二个概念进行了不同的定义,所以GB/T19000很准确地翻译成我们现在所用的验证和确认,包括YY/T0287 所用到的这二个定义.如”设计的验证”和”设计的确认”,如”当生产和服务提供过程的输出不能有后续的监视和测量加以验证时,组织应对任何这样的过程实施确认”,都区别了这二个概念.三/在概念混淆下的现状由于概念的混淆不清,目前有些应该确认的过程用验证所替代了,如果这样,质量保证的水平大为降低.,案例:制水(工艺用水)是个过程,这过程的结果是水达到预期的要求(如纯水/注射用水),是否能够达到要求,可以用检测的方法来验证,但生产中用检测的方法是不可能的,如某个技术要求的检测(试验)需要较长的周期(无菌检测需要14天),所以这样的制水过程是个特殊的过程,需要对这过程进行确认,这确认应该通过客观证据证明这个制水过程能够在相当长的时间持续地制备出符合要求的水,这确认过程包括了设备的安装验证(IQ)/制水系统的运行验证(OQ)和制水结果的性能验证(PQ)[Qualification直译是”资格”,这里译为验证更准确],其中的”PQ”是可以用检验的方法来验证的.这样经过确认,这系统运行的结果认为是能够满足要求的不需要再经过检验而投入生产.但目前很多的企业,把这过程用验证来来取代了确认,往往只检验了某次制水过程的结果.这保证水平有局限.这样的案例很多,如无菌医疗器械包装的确认等等.另外一个说法，就是确认一个设备或者系统，（Qualification），验证一个工艺（validation）。
方法选择、验证及确认程序
为保证检验检测结果的正确性和有效性，对检验检测活动中所采用的方法进行有效控制，特制定本程序。
本程序适用于检验检测活动中检验检测方法的选择、确认以及新工作的开展，非标准试验检测方法的管理。
3.1 技术负责人负责组织开展新工作前的检验检测方法评审并进行确认，批准检验检测作业指导书等文件，维护本程序的有效性。
3.2 生产技术部负责提出需要开展的新工作及本部门的执行标准，制定检测服务活动的检测服务程序及抽样活动以及不确定度分析。
3.3 资料档案室负责对标准规范进行查新，对标准规范有效性进行确认，建立现行有效规范台账。
3.4 试验中心、检测中心及项目试验室负责人负责检验检测方法的选用、制定和验证；标准方法和非标准发放（规定、偏离）的验证。
3.5 经营质管部负责检验检测资质、参数增项、标准变更的申报。
本程序使用的术语，依据下列表述以及质量手册和其他程序文件的规定进行定义，不作无限制的延伸4.1方法验证：方法验证的目的是确认检验检测机构能够正确实施检验检测方法，获得准确、有效的结果；4.1.1方法验证适用于：标准规范（含：国家标准、行业标准、地方标准、技术规范、国际标准等）中的检验检测方法；以及经过了方法确认的非标准方法（见4.2）；4.2方法确认：方法确认的目的是确认某种检验检测方法能否合理地使用，并达到预期的功能、效果和目的；4.2.2方法确认适用于非标准方法：机构自行设计和研发的方法、超出规定范围使用的标准方法、部分修改的标准方法等。
5.1 方法的选择及验证5.1.1 方法的选择⑴检验检测机构应采用满足客户需求，并满足检验检测要求的方法，包括抽样的方法。
⑵保证配置的技术资源满足检验检测需要，选用的检验检测方法（包括抽样方法）应满足客户的需求并适用于检验检测。
⑶当客户指定的检验检测标准和要求的能力是在资质认定、资质许可的能力范围内时，进行合同评审后按照《合同评审管理程序》(GRJC-CX15-2023) 的要求与客户签立《试验检测委托单》或《检验检测合同（协议）》。
检验的确认与验证
如何进行方法确认
方法确认 = 简要的方法验证 以含量为例，一般应确认：准确度、精密度 （系统重复性、分析重现性）、专属性。操作 及限度要求同方法验证。 一是确认产品是否适用这个检验方法，尤其是 制剂处方中的辅料是否有干扰。 二是确认实验室的条件能否用这个方法获得准 确的结果，包括仪器设备、环境、人员等。
2、分析方法验证
这部分内容在ICH Q2部分有明确的阐述，但只是在概念上比较 清晰，在实践应用中却不是特别明确，在这里只是对其需要特别 注意的事项作一个补充。 有关物质检测的方法验证具有一定的特殊性，也是最容易被质疑 的方法，这里暂不提到，更多的是其他方面的常见问题。 验证的方法与检验方法不一致是最常见的问题！即使CDE和一 些药检机构可能也没有注意到这一点，而且由于国内注册中大家 都知道的原因造成没有大量数据的积累，进而不会在注册中发现 这个问题所造成的巨大影响，举个例子说明。
如何计算
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
计算时应该采用哪个呢，A、B还是平均值？ 答案其实是都可以，只要检查通过！因为二者 都是正确的，而且你也没办法证明哪个更准确， 也就不能说明平均值会更好。
为什么要平行测定
含量测定时都采用双对照品，请问：计算时应 该采用A还是B，或者是A和B的平均值，抑或其 他，为什么？ 采用两份的平均值会不会增加准确性？ 为什么要做两份，做三份、五份行不行？
平行测定的目的
做两份的目的是用以证明你的称量和配制过程是没有问题的！ 任何操作本身就有误差，就如我们前面所说的那样，你所用的仪 器设备都要确认过的，而且像天平每天都要做校验，但仍然不能 避免误差，更何况还有可能出现人为误差，而这些误差并不见得 你在操作过程中就可以发现（发现了你就该重新配了）。在你的 仪器例如HPLC已经确认完成的基础上，进样平行样品，如果有 操作导致的误差可能被发现（当然三份时发现的机会就更大）。 简单举个例子，你在称量时出现洒的机率是1%，那么称两份时 出现洒的机率就是万分之一。
检验方法的验证、确认步骤及详细计算方法
检验方法的验证、确认步骤及详细计算方法一、检验方法验证的基本内容检验方法验证的基本内容包括方案的起草及审批，检测仪器的确认。
适用性验证（包括准确度试验、精密度测定、线性范围试验、专属性试验等）和结果评价及批准四个的方面。
二、检验方法验证的基本步骤首先是制定验证方案，然后对大型精密仪器进行确认，最关键的一步是检验方法的适用性试验，最后是检验方法评价及批准。
1、验证方案的制定检验方法的验证方案通常由质量验证小组提出。
根据产品的工艺条件、原辅料化学结构、中间体、分解产物查阅有关资料，提出规格标准，确定检查项目，规定杂质限度，即为质量标准草案。
根据质量标准草案确定检查和试验范围，对检验方法拟定具体操作步骤，最后经有关人员审批方可实施。
2、大型精密仪器的确认分析测试中所用的检测仪器一般可分为三类：A、普通仪器：崩解仪，折光仪、分析天平、酸度计、溶点测定仪、电导仪等：B、较精密仪器：旋光仪、永停滴定仪、费休氏水分测定仪、自动滴定仪、药物溶出度仪、可见分光光度计、电泳仪等；配大型精密仪器：紫外分光光度计、红外分光光度计、气相色谱仪、高效液相色谱仪、薄层扫描仪等。
为了保证分析测试数据准确可靠，每台检测仪器在投入正式使用之前都应进行确认。
检测仪器的确认是检验方法验证的基础，应在其它验证试验开始之前首先完成。
检测仪器确认工作内容应根据仪器类型。
技术性能而定，通常包括：安装确认、校正、适用性预试验和再确认。
3、校正校正是仪器确认及检验方法验证中的一个重要环节，应当在验证试验以前进行校正。
紫外分光光度计校正包括波长校正、吸收度测试、准确度测试、杂散光检查。
气相色谱仪与高效液相色谱仪均要求做系统适用性试验。
在规定的色谱条件下测定色谱柱的最小理论塔板数。
分离度和拖尾因子，并规定变异系数应不大于2％。
对于化学检验中使用的计量仪器包括容量瓶、移液管、滴定管、分析天平亦均应校正。
4、适用性预试验仪器的安装确认完成以后，在其功能试验符合要求的情况下，应用标准品或对照品对其进行适用性检查，以确认仪器是否符合使用要求。
确认与验证程序
• 3、验证是主要考察（
）
• A 生产工艺 B 操作规程 C 检验方法
D 清洁方法
十、验证文件管理
• （二）验证文件管理要求 • 主管验证的常设机构或兼职机构对验证文件进行整理、标识
与归档保存。
练 一练
• 1、验证方案的内容包括（
）。
• A 验证目的
B 验证要求
C 质量标准 D 验证总结
• 2、制药企业的验证项目一般可分为（
）。
• A厂房、设施与设备 B检验及计量 C生产过程 D产品
料等都要设定验证项目。
四、制定验证方案
（一）验证方案的制定 1、合作商提供验证方案：新建项目或大的改造项目 2、企业制订验证方案：工艺性、检验性、清洁消毒类及规 程类验证方案
四、制定验证方案
（二）验证方案的内容
验证方案
验证方案在实施过程中，有时会出现 需要补充和修改的情况，此时应起草 一个补充性验证方案。
七、验证的实施
•按安装确认、运行确认、性能确认、工艺验证、产品验证 等阶段实施验证方案，并做好各阶段报告的起草工作。 •注意：在组织实施中监督是关键，验证是做出来的，不是 写出来的。
八、验证报告及其审批
• 验证报告是验证工作的总结，以简要的技术报告形式汇集了整个验证
过程的记录，结果及评估的文件。它可能还包括对工艺流程和（或）
验证小组成员 验证目的与范围 验证要求与内容 所需条件 质量标准 测试方法
时间进度表 原始记录表格 实验的批次数
五、审批验证方案
➢书面的验证方案在正式实施前必须得到审查、分析和批准。 ➢审查要求： ➢1、要证实验证方案所有书面文件的内容完整和条理清晰。 ➢2、要审查书面的检验规程，证实其与质量标准和GMP要求的一致性。 ➢3、审查有关人员如技术人员、操作人员的资格。 ➢4、审查认可的验证方案要由批准人签名并署以日期。
检验方法的验证及确认
检验方法是指实验室用于实施检验检测工作所依据的标准检验方法和技术规范。
检验方法是实验室实施检验工作的主要依据，是开展检验检测工作所必须的资源，如果方法及程序不同就会造成结果不同。
本文就来聊聊如何对检验方法进行确认。
文章为原创大赛往期作品回顾，在此仅作为对大家的启发之用。
欢迎批评指正。
<<实验室资质认定评审准则>> 条款中规定：“实验室应确认能否正确使用所选用的新方法。
如果方法发生了变化，应重新进行确认。
实验室应确保使用标准的最新有效版本。
”在条款中也有相应的规定。
实验室采用的检测方法包括样品的抽取、处理、运输、存储和制备等各个环节，确认时应当记录确认所获得的结果、使用确认的程序、确认对方法是否适合于预期的用途等，必要时还应包括不确定度和分析数据的统计学处理技术。
下面谈谈就方法发生了变更时或颁布新标准时，对方法如何进行确认：1.在首次对外出具数据之前应确认（证实）标准方法已被正确的运用。
2.标准方法发生了变化应重新确认。
3.对标准方法定期清理或者查新，以确保最新有效版本。
一、检测方法的选择及使用要求实验室资质认定(或认可)现场考核时确定的检测项目的依据是国家标准、行业标准和地方标准。
所以说，当没有国际、国家、行业、地方规定的检验方法时，实验室应尽可能选择已经公布或由知名的技术组织或有关科技文献或杂志上公布的方法，但应经实验室技术主管确认。
如是在实验室计量认证或认可批准业务范围内，因客户的特殊要求而发生的情况，其检验结果和报告上应有明确的说明。
另外需要使用非标准方法时，这些方法应征得委托方同意，并形成有效文件，使出具的报告为委托方和用户所接受。
这是指必须在实验室计量认证或认可批准业务范围内使用，所谓有效文件是指甲乙双方对使用非标准方法检测达成协议，一般来说应有双方签字盖章，也可以在检测委托（协议）书上注明，实验室在检测报告中也必需加以说明。
因此，在检测方法的选择上，优先使用国家标准，然后是行业标准、地方标准，非标准方法仅限于委托方同意才使用。
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检验程序确认和验证（2）测量区间定义•measuring interval•又称工作区间working interval•在规定条件下，由具有一定测量不确定度的测量仪器或系统能测出的一组同类量的量值（VIM）。
–注1：在某些领域，也称“测量范围”。
–注2：测量区间下限不应与“检出限”相混淆。
线性、线性范围定义•线性：linearity•指待测标本中能直接按比例关系给出分析物浓度结果的能力。
注1：线性代表整个测量系统的反应。
注2：一个测量系统的线性由不同已知浓度的分析物测定得到。
•线性范围：linear range•指测量系统所能覆盖的可接受线性范围，非线性误差小于设定标准。
分析测量范围定义analytical measurement range 患者标本未经任何处理（稀释、浓缩或其他预处理），由测量系统直接测得的可靠结果范围，在此范围内，一系列不同标本分析物测量值与实际浓度呈线性关系。
临床可报告范围定义clinical reportable range是定量检测项目向临床能报告检测范围，患者标本可经稀释、浓缩或其他预处理。
区别线性评价-CLSI文件•EP6-A，Evaluation of the Linearity of Quantitative MeasurementProcedures，2003•EP10-A3，Preliminary Evaluation of Quantitative Clinical Laboratory Measurement Procedures，2006 EP6-A方案和要求1.设备熟悉阶段–检验人员应熟悉检测系统的操作、正确的质控和校准、恰当的标本制备。
2.线性评估实验–实验室验证厂商声明：5～7个浓度*重复2次。
–厂商建立新方法：9～11个浓度*重复2～4次。
–实验室改良已建立的方法：7～9个浓度*重复2～3次。
–时间：最好一天内完成。
EP6-A方案和要求•样品准备：可接受的基质1.病人混合标本：1份标本的分析物浓度应接近可报告范围上限，另1份标本的分析物浓度应接近检出限。
2.用推荐稀释液稀释病人混合标本：标本中分析物浓度应为高浓度，稀释液应按厂商推荐。
3.病人混合标本添加分析物：若没有干扰的话，含分析物的添加物无需高纯物质。
4.病人混合标本用低浓度经处理的材料稀释或经处理的混合材料稀释。
5.商品质控品/校准品/线性材料。
6.病人混合标本用生理盐水或其他稀释液稀释。
7.不稀释或过度稀释的商品质控品。
8.水溶液。
EP6-A方案和要求•实验要求–测量顺序：应随机。
如存在明显携带污染或漂移，选择对后续标本影响最小的顺序进行。
–分析范围：应接近或等于最低和最高厂商声明的性能范围。
EP6-A方案和要求•样品制备：足量混合血清。
–X1：低值混合血清。
–X2：3份X1+1份X5。
–X3：2份X1+2份X5。
–X4：1份X1+3份X5。
–X5：高值混合血清。
–更多水平：X4+X1 、X3+X2 、X2+X3 、X1+X4。
EP6-A方案和要求•数据处理和分析：1.初步数据检查–有无极端明显差异或错误；–X-Y图上有无离群值；–每组数据有无漂移或趋势性变化。
2.离群值检查–单个测定结果明显偏离其他检查结果；–单个离群值可删除，不用增加数据；–提示存在非线性或系统误差。
3.确定分析测量范围–作一元一次（直线）、二次（抛物线）或三次（S形）多项回归分析。
阶别回归方程自由度一次Y=b0+b1X 2二次Y=b0+b1X+b2X2 3三次Y=b0+b1X+b2X2+b3X3 4–一元一次：直线，是判断某种方法是否为线性的最适方程。
–一元二次：抛物线，有增加趋势或减少趋势。
–一元三次：S形，呈非线性，b2和b3做t检验证明非线性。
4.非线性程度：计算线性偏差（DL）。
–用户定义线性程度要求或非线性允许误差范围，取决于偏移目标或测量误差。
5.考虑随机误差–是否因随机变异导致非线性，用方差来估计，即S r。
线性评价：Westgard混合物记录均值1 2 3X1（0％） 6 6 6 6X2（25％）138 138 138 138X3（50％）278 277 279 278X4（75％）410 411 411 411X5（100％）545 546 543 545混合物均值(Y) 理论值(X) 偏倚误差％X1 6 0（X3均值×0）+6 N/A X2 138 139（X3均值×0.5）-1 -0.7％X3 278 278（X3均值）0 0X4 411 417（X3均值×1.5）-6 -1.4％X5 545 556（X3均值×2.0）-11 -2.0％验证：临床可报告范围•实验方法：尚无公认方法。
•实验结果与分析–计算回收率：回收率=（实测值/预期值）*100% –按厂商说明书要求判断结果。
举例（最高）稀释倍数实测值预期值回收率1:10 6688.9 6688.9 100.01:20 7193.8 6688.9 104.91:100 7509.3 6688.9 112.31:200 7560.8 6688.9 113.0可报告范围上限：20*6688.9=133778举例（最低）稀释倍数实测值预期值回收率1:10 92.5 85.70 107.91:40 23.6 21.42 110.21:50 19.6 17.14 114.41:100 11.3 8.57 131.91:200 6.75 4.29 157.3可报告范围下限：85.70/5=17.14测量系统的灵敏度定义•sensitivity of a measuring system•简称灵敏度sensitivity•测量系统的示值变化除以相应被测量的量值变化所得的商。
•注1：测量系统的灵敏度可能与被测量的量值有关。
•注2：所考虑的被测量值的变化必须大于测量系统的分辨力。
检出限定义detection limit，limit of detection•在给定测量程序获得的测得值，其声称的物质成分不存在的误判概率为β，声称物质成分存在的误判概率为α。
•注1：国际理论和应用化学联合会（IUPAC）推荐α和β的默认值为0.05。
•注2：有时使用缩写词LOD。
•注3：不要用术语“灵敏度”表示“检出限”定量检测限定义 limit of quantitation，LoQ在规定可接受精密度和正确度条件下，能定量测出标本中分析物的最小量。
也称为确定低限、检测范围的低限。
空白限定义limit of blank，LoB•在规定可能条件下，空白标本被观察到的最大检测结果。
•注：①LoB不是实际检测到的浓度，是在实际浓度处的阳性信号，同样，LoB是在规定可能条件下，含有分析物等于LoD水平样品的预期最低值。
②是检测下限、最小可检测浓度。
概率分布曲线检出限评价-CLSI文件•EP17-A，Protocols for Determinationof Limits of Detection and Limits ofQuantitation，2004确认：EP17-A方案和要求•检测限（LoD）确认方案–对某一检验项目，用空白标本和非常低浓度系列标本进行多次重复检测，得到各自结果。
–空白标本的检测结果：用于确定某个响应量的临界点，高于该临界点的值被认为含有分析物，即为阳性结果。
–该临界点结合低浓度标本的标准差：用于确定可能的超过预期最高空白值的分析物浓度。
EP17-A方案和要求–空白限（LoB）：•在规定水平Ⅰ类错误和Ⅱ类错误。
α＝β＝5％•空白限（LoB）方法：–空白值呈正态分布，空白限：LoB＝μB+1.645σBμB：空白检测均值；σB：空白检测标准差。
–空白值呈非正态分布，空白限：估计95%位数：P X＝N B(95/100)+0.5，LoB=Pct B100-α如：ρ＝95，N B＝60，P X＝57.5，LoB＝（X57+X58）/2检出限（LoD）方法：–一种为实际标本等于LoB；–一种为实际标本浓度检测结果估计5％位点等于LoB。
LoD＝μB+1.645σB+1.645σsμs：低浓度标本检测均值；σs：低浓度标本检测标准差。
空白限&检出限•实验标本–来源：天然标本。
•空白标本：应为去除组分的标本，如抗体沉淀、酶降解、活性炭吸附。
•低浓度标本：配成有分析物标本，最好一组几个不同个体标本。
–数量：最好对5个以上标本。
–测定次数：标本数量越多，重复测定次数越多，估计的LoD越小，结果越可靠。
•LoB测定步骤：–建议至少60次测定，对1个或数个空白标本进行重复检测（NB）。
•LoD测定步骤–建议至少60次测定，对多个低浓度标本进行重复检测，浓度范围从LoB到4×LoB之间，至少4～6个标本。
举例LoD=LoB+1.645σs=0.01+1.645*0.011=0.03•LoQ测定步骤：–建议测定3～5个浓度标本，每个至少测定8次，共40个结果。
–计算标准差和差值均值，总误差=偏移+2*s。
若小于规定目标，则LoQ=LoD。
–LoB≤LoD≤LoQ。
举例WBC：允许误差范围为±15%。
验证：EP17-A方案和要求•LoB、LoD测定步骤：–使用厂商提供的LoB值（1份空白样品重复测定20次）和LoD值，不同天不同样品测定数据不少于20个；如有必要应验证LoB。
•LoQ测定步骤：–建议测定3～5个浓度标本，每个至少测定5次，至少25个结果。
–每个标本的测定结果与总允许误差目标进行比较，符合要求即可。
定量结果报告图示•定量结果的报告：–结果≤LoB：报告为不能检出。
–LoB<结果<LoD：报告为检出分析物，但浓度<LoQ。
–LoD≤结果<LoQ：报告为检出分析物，但浓度<LoQ；或报告结果，并告知有高不确定度的可能。
–结果≥LoQ：可直接报告结果。
定性检验•定义：–是仅给出阳性或阴性实验结果的试验。
真正定性是基于唯一医学判定值；某些定性检验源于二分类定量或顺序等级。
•分类：筛查试验（具有高敏感性以确保检出真阳性结果）；诊断试验、确认试验（具有高特异性以确保检出真阴性结果）。
48定性检验评价-CLSI文件•EP12-A2，Protocols for Evaluation ofQualitative Test Performance，2008确认：EP12-A2方案和要求•实验熟练阶段：–人员应熟悉和经培训，能正确掌握标本处理和保存、试剂处理和保存、实验操作、结果解释和质控操作。
•测定质控物：–若使用厂商提供质控物时，应按厂商要求做质控。
使用时应注意基质效应。
在评价期间尽可能使用相同质控物。
•新定性检验方法的性能评价1.重复性评价：评估检测方法精密度。