白木香组织培养研究进展

Ｏ ＥＥ Ｈ Ｒ ＵＴ Ｒ Ｂ Ｔ Ａ Ｔ ＨＩ Ｓ Ｏ ＴＩ Ｌ Ｕ Ｅ Ａ Ｓ Ｒ Ｃ Ｓ Ｎ Ｃ
白木香组织培养研 究进展
张 健 。 王 颖。 吴坤鑫 陈雄庭。 。
（ 南大 学农 学院 ，海南 儋州 ５ １５ ；２ 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 ，海南 海 口 ５ １０） １海 ７ ７ ７ ７ １１
为热带林木遗传育种 。
接种于 培养基 中，最终获得较好 的灭 菌效 果。另外 ，只 用
０ ０ ％Ｈｇ 日 ．５ Ｃｌ 少许吐温一 ０ ２ 消毒 １ ｎ，再用无菌水冲洗 ０ ｍｉ 也达 到 了很 好的灭 菌效 果。若 以 白木 香种 子作为 外植体 ， 接种前 的消毒 处理主要有两种 方式 ：（） １先剥去 种子的外壳 再进行 消毒处理 ，兰 芹英等在对外 植体进行处 理时 ，先将
种 子 剥 去 外 壳 ， 用 ７ ％ＣＨ５ Ｈ浸 泡 １ ｍｉ 然 后 用 ０ １ ５ ２ Ｏ ｎ ．％的
通讯作者 ：陈雄庭， 研究员，博士， 博士生导师。 －ａ ｈ ｘ６９８６ Ｅｍ ｉ ｃｔ６８０３
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项 目来 源 ：国家 自然科学基 金资助项 目（０６０８ ：国家科技支 ３６０９）
一
香 ，为瑞 香科（ ｈ ｍｅ ｅ ｃａ ） 香属植 物 ，该 属有 １ 种 ， Ｔ ｙ ｌ ａｅ ｅ沉 ａ ５ 我 国有２ 。白木香树干可分泌出一种能制取名贵中药的物 种
质— — 沉 香 ，沉 香 是 我 国 、 印度 以 及 其 他 东 南 亚 国 家 的 传
，
外 植体的取 材部位 、大 小等直接影 响到植物组 织培 养
芽 的 增 殖 率 ；另 外 ，芽 苗 对 Ｎ ＡＡ的 反 应 比 较 敏 感 ，生 根 率 比较 高 ，而 对 Ｉ Ａ反 应 则 相 对 比 较 迟 钝 ， 生 根 率 不 高 。 Ｂ 叶 勤 法 等 发 现 白 木 香 腋 芽 外 植 体 在 含 ０ ０ ｍｇ Ｌ Ａ ．５ ／ Ｂ Ｐ 的 ＭＳ 本 培 养 基 上 芽 增 殖 系 数 最 高 ，且 当 培 养 基 中 不 含 基 激 动 素 时 芽 的增 殖 系 数 较 低 。 兰 芹 英 等 对 白木 香 成 熟 胚 的 组 织 培 养及 植 株 再 生 研 究 中发 现 ，在 １ ２ ＭＳ 添 Ｊ Ｂ ／ 中 Ｊ Ａ ２ Ｉ ｍｇ Ｌ ＮＡ ０ ５ｍｇ Ｌ 利 丛 芽 的 诱 导 ，但 苗 易 玻 璃 化 ， ／ 和 Ａ ． ／ 有 而 添 Ｊ ＫＴ ２ ｍｇ Ｌ ＮＡＡ ０ ０ ／ 对 侧 芽 的 诱 导 和 生 ／ ／ ＊ Ｎ ．２ ｍｇ Ｌ 长 较 有 利 ， 幼 苗 用 １ ０ ０ ｍｇ Ｌ ＮＡＡ浸 泡 ２ ｉ ０ ／ 的 ０ｒ ｎ，生 根 ａ 率 达 ８ ％。 ５
处理后 ，在无 菌条件下 ，用７ ％的酒精 浸泡 消毒８ ０ Ｓ ５ ～１ ， 然后置于０ １ ．％的升汞溶液 中灭 菌消毒５ ｎ ～８ｍｉ ，再用无菌
水 洗 涤７ １次 ，在接 种 时 ，将 白木 香 种 子 的 种 壳 及 附 属 物 ～ ０ 剖 去 ，取 出胚 ，接 种 到 培 养 基 中 。 这 两 种 方 法 都 取 得 了较
３ ，接 着用０ １ 汞液 浸泡７ ｍｉ ０Ｓ ．％升 ｎ，最后 用无 菌水冲 洗
５ 次 ，用 无 菌 吸 水 纸 吸 干 后 ，切 去 与 药液 直 接 接 触 的 伤 ～６
口部分 ，将枝条切成 １５ ． ｍ长的枝段（ １ 个 叶芽） ． ～２ ５ ｃ 带 ～２
第 一 作 者 简 介 ：张 健 （９４ ，男 ，硕士研究生 ；研究方 向 １８ 一）
统名贵 的药材和天然香料 ，有降气 、平 肝 、镇静 、止 痛等 多种功能 。白木香树皮纤 维发达 ，为造 纸和人造棉 的好原
料 ；种 子 富 含 油 脂 ，有 重 要 的 工 业 用 途 ， 白木 香 具 有 极 高 的 经 济 价 值 。 白 木 香 主 要 分 布 于 我 国热 带 及 亚 热 带 地 区 ， 海 南 、广 东 、 广 西 、福 建 以 及 台 湾 等 地 均 有 分 布 ，然 而 长 期 以 来 受 自然 灾 害 和 人 为 破 坏 ， 白木 香 野 生 资 源 量 不 断 减 少 ， １８ 年 白木 香 被 列 为 国 家 珍 稀 濒 危 三 级 保 护 植 物 ， ９７ １９ 年 被 列为 国家 二 级 重 点 保护 野 生 植 物 。 ９９ 植 物 组 织 培 养 是 在 植 物 细 胞具 有 全 能 性 的 理 论 基 础 上 发 展 起 来 的一 项 成 熟 技 术 。植 物 组 织 培 养 可 用 于 苗木 的 快
撑计划二级子课题 （０６ Ａ Ｏ Ａ ６ ３ ；中央级公益性科研 院所基本 ２ ０Ｂ Ｄ １０ — ） 科研业务费资助项 目（Ｔ Ｂ Ｄ ７ １ 。 ＩＢ Ｚ ０ １）
Ｈｇ １ 菌５ ｍｉ ，再用无菌水冲洗３ 次 。（） Ｃ２ 灭 ｎ ～４ ２先对种子进 行消毒处理后再 剥去外 壳 ，张翘等 以 白木香新鲜 的成熟种
般 用 于 白木 香 组 织 培 养 类 型 为 ＭＳ 本 培 养 基 。 当 基
然 ， 白木 香 组 织 培 养 不 同 的 阶 段 采 用 培 养 基 的 量 也 有 所 不 同 ，何 旭 君 等 认 为 沉 香 树 组 培 快 繁 中 ，不 定 芽 诱 导 用 １ ２ ／ ＭＳ 养 基 ，芽 的 继 代 增 殖 用 ２ ３ ＭＳ 养 基 ，生 根 用 １ ３ 培 ／ 培 ／ ＭＳ 养 基 效 果 较 好 。叶 勤 法 等 利 用 白木 香腋 芽外 植体 组 织 培 培 养时 发 现 ，采 用 ＭＳ 养 基 对 芽 的 诱 导 和 增 殖 有 较 好 的效 培 果 ，而 生 根 采 用 １ ２ ＭＳ 养 基 较 好 。徐 强兴 等 利 用土 沉 香 ／ 培
段 作 外 植 体 ，进 行 白 木 香 的 组 培 快 繁 。也 可 采 用 不 带 芽 茎
段和 叶片作为外植 体进行培 养 ，以获得 愈伤组织 。对 于白
木 香 胚 培 养 ，一 般 选 用 成 年 树 种 子 的 成 熟 胚 作 为 外 植 体 ， 并 获 得 了再 生植 株 。
繁 、无病 毒苗木的培 育、种 质资源的 离体保存 ，同时 也能
的效果 。选用外植 体时还应 考虑供体植株 的生理状 况。从 理论 上讲 ，植物 细胞具有全 能性 ，所 以无论选用植物 的哪
一
部 分 作 外 植 体 都 能 诱 导 成 株 。 但 是 研 究 表 明 ，一 棵 植 株
的不同组织或部 位在器官发 生能力上有相 当大的差 别。白 木 香组织 培养 常用 的外植体 有腋 芽 、茎 尖 、茎 段 、叶 片 、 种子 、胚轴 、子 叶等。在 白木 香组织培养 中常采用带 芽茎
为 生 物 技 术 育 种 奠 定 基 础 。采 用 植 物 组 织 培 养 方 法 快 速 繁 殖 白木 香 ，既 可 以 保 护 资 源 ，又 可 以满 足 市 场 的 需 要 。 叶 勤 法 等 首 先 开 展 了 白木 香 的组 织 培 养 工 作 ， 已经 建 立 了 白 木 香 的组 织 培 养 植 株 再 生 体 系 ，通 过 不 同 外 植 体 离体 培 养 获 得 了再 生 植 株 。 此 后 ， 陆续 有 白木 香 不 同 器 官 组 织 培 养 成 功 的报 道 ，为 更 好 地 保 护 白 木 香 野 生 植 物 资 源 和 种 质 资 源 提 供 了 帮 助 。 由于 白木 香是 多 年 生 木 本 植 物 ， 多 酚 类 物 质含 量 高 等本 身 特 性 造 成 培 养 的 愈 伤 组 织 易 褐 化 、难 以 分
好 的 灭菌 效 果 。
上述这些 消毒方法 能够很好 的将外植体 表面的细 菌和 其他菌体清除，一般情况下 ，消毒时尽量避免伤害到外植体 ， 以防止接 种后外植体不能正 常生长或有效 形成愈伤组织 。
２ 培养基的选择 与生长调节物质的影 响
２ １ 培 养 基 的选 择 ．
在 离 体 培 养 条 件 下 ，不 同 外 植 体 对 营 养 条 件 的 要 求 不 尽 相 同 ，只 有 根 据 各 自的 特 殊 要 求 提 供 合 适 的 营 养 条 件 ， 才 可 能 使 外植 体 正 常 生 长 发 育 。
摘 要 ： 综 述 近 年 来 国 内外 对 白木 香 组 织培 养 的 研 究进 展 ， 包括 外植 体 的 选 择 与处 理 、 培 养 基 的选 择 与植 物 生 长
调 节物 质 的影 响 、培 养方 法 ， 以及 影 响 白木 香 组织 培 养 的化 学 因素 、 物 理 因素 等 ，展 望 白木 香 组 织培 养 的 工作 和
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Байду номын сангаас
３ 培 养 方 法
３ １ 茎 段 培养 ．
白木 香 的 茎段 培养 也 分 为 带 芽 茎 段 和 不 带 芽 茎 段 培 养 。
叶勤法等采用 白木 香当年抽 出的幼嫩 带腋 芽茎段作外植 体 ，
通 过 研 究 发 现 白 木 香 腋 芽 外 植 体 在 含 ０ ０ ／ ＡＰ ．５ ｍｇ Ｌ Ｂ 的 ＭＳ 本 培 养 基 上 增 殖 系 数 为 ４ ９ 。 采 用 间 接 法 诱 导 芽 生 基 ．３ 根 ，生 根 率 达 ９ ．％， 白 木 香 试 管 苗 移 栽 成 活 率 为 ９ ．％。 ４４ ３８ 何旭 君 等 用 经 筛 选 的 沉 香 树 种 子 苗 优 株 枝 段 作 为 快 速 繁 殖 的外 植 体 ，经 消 毒 处 理 后 将 枝 条 切 成 １５ ． ｃ ． ～２ ５ ｍ长 的 枝 段（ １ 个 叶 芽 ） 种 于 培 养 基 中 ， 研 究 发 现 沉 香 树 组 培 带 ～２ 接
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４ ２一
中国园艺文摘 ２ １年第６ ０ １ 期
子 为 外 植 体 ，对 外 植 体 进 行 处 理 时 先 将 种 子 用 洗 洁 精 轻 轻 荡洗 １ 后 ，在 自来 水 下流 动 冲 洗２ ～３ ｎ 遍 ０ ０ｍｉ，材 料 经上 述