生化仪器中的空白定标和质控
生化检验中的定标
定标的意义：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。
它是由仪器与试剂状态确定下来的。
当我们测定一个标本时，无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性。
那就要乘上一个K值，计算并打印出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般上最低要求是由试剂空白与标准品。
经过仪器测定出两个吸光度。
K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。
无论什么样的标本，用其吸光度乘以K值我们就得到了答案。
因此，K值具有非常决定性的意义，可以决定标本的准确性。
K值的决定因素：我们看看K值会受到什么影响呢？第一，标准液的浓度一定要准确（标准液最好与标本一样是以血清为基质的）。
第二，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器状况、试剂状况的影响，如果您的仪器相当稳定，试剂是影响K值的一个主要因素。
如何确定K值是正确的？一般我们用质控血清来检查，最好是两种水平的质控来检查，如果质控结果很好，可以说K 值是准确的，用这个K值计算出来病人的结果也是准确的，所以K值非常关键。
K值的真面目：K值实际上代表了斜率，截距代表试剂空白，试剂空白每天都在变化，所以K值的稳定性决定您的仪器与试剂，如果仪器与试剂都十分稳定，那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值：一是计算出来的理论K值；K = (TV × 1000)/(SV × L × ε)二是用有酶项目的定标液得出K值：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目。
生化检验中的各种空白概念时间:2009-5-8 9:54:09,点击:61 对所谓"试剂空白""样本空白""水空白""杯空白"等"空白"名词,有些同行可能感到困惑.特此汇集了一下各种言论(包括本论坛高手们发表的一些意见)并结合自己的理解,总结如下,希望大家指正和补充:空白概念区别要点:**空白=只含**的空白（吸光度）1、试剂空白：由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度，所以从理论上说，所有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除。
生化常见概念
关于参考范围、质控范围、靶值、定标浓度、重复性、cv值、相对误差概念及相互关系参考范围：通过临床试验选定不少于100个正常人群血样本，经全自动生化分析仪测定，所得测定值用统计学方法处理，并计算参考范围。
在我们生化仪软件项目参数设置中指的就是每一个测定项目都有一个正常的范围值。
定标是前提质控是保证质控范围：质控（Quality Control）为达到规范或规定对数据质量要求而采取的作业技术和措施。
就是把它当成标本来测试有的有商家给定的靶値有的没有都可以通过绘制质控图了解机器的稳定性相对误差则是绝对误差与真值的比值，因此它是一个百分数。
一般来说，相对误差更能反映测量的可信程度。
相对误差等于测量值减去真值的差的绝对值除以真值，再乘以百分之一百。
如上图所示，0SD就是靶值即浓度，测定项目时肯定会有偏差，在+-1SD以内质控测试非常好，+-2SD以内还勉强可以，+-3SD 以内质控结果需再重新测试定标和质控。
靶值：移除无关值后,参与的全部试剂反应的平均值.先按照分析仪的仪器类型对参加实验室进行分组，以各组的加权均值作为靶值。
在我们仪器中靶值即是质控液的浓度。
定标浓度：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（A=KCL）。
它是由仪器与试剂状态确定下来的。
当我们测定一个标本时，无论您是用手工的方法还是全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没什么意义，我们要把吸光度转换成一个浓度或是酶的活性，那就要乘上一个K值，计算并打印出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们定标出来的。
定标时我们需要的修改的参数有：定标液浓度（说明书上都有，多标准浓度计算后浓度由小到大依次排序）、杯号（定标液放在样品杯的位置）、定标模式、重复次数、重复性：也是CV值。
Cv：变异系数（coefficient of variation）。
标准变异系数是一组数据的变异指标与其平均指标之比，它是一个相对变异指标。
变异系数有全距系数、平均差系数和标准差系数等。
日立全自动生化分析仪使常规用指导
4.清除昨日安排及结果
操作步骤：
点击观看图例
删除选定数据
Batch Delete
删除全部数据
一、质控的测定
质控
1.质控编排：由于质控项目、靶值、标准差等参数是由 实验室该仪器的管理人员固定设置好的,因此不需要参照 操作手册每日进行操作。
2.运行质控：
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二、质控数据的确认
1.日内质控数据确认
在完成环境因 素分析和SWOT 矩阵的构造后, 便可以制定出 相应的行动计 划。
SW优势与劣势分析 内部环境分析
……
产品的 质量
服务 态度
提高公司 盈利性
服务的 及时性
产品的 适用性
产品线 的宽度
竞争优势可以指消费者眼中一个 企业或它的产品有别于其竞争对 手的任何优越的东西。
产品价 格
产品的 可靠性
PEST法
政治／法律:
•垄断法律 •环境保护法 •税法 •对外贸易规定 •劳动法 •政府稳定性
经济
•经济周期 •GNP趋势 •利率 •货币供给 •通货膨胀 •失业率 •可支配收入 •能源供给 •成本
社会文化
•人口统比收入 分配 •社会稳定 •生活方式的变 化 •教育水平 •消费
技术
•政府对研究的 投入
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结果的传输
该仪器正常情况下应自动向LIS传输结果数据。 当遇LIS故障导致数据不能自动传输的情况下,执行以下操作
用鼠标选中需 要传输的结果
点击观看图例
注意：当遇LIS故障时可导致7180传输端口自动关闭。LIS故障排除 后应检查7180传输端口是否关闭,如关闭需打开后再进行手工传输操 作。
SWOT分析传统矩阵示意图
检验科生化室内质控办法
1检验科生化室内质控方法一、质控的概念。
质量控制是为了监测和评估本实验室的工作质量，以此决定本实验各检验可否发出的检查、控制手段。
二、1、OCV：表示本实验室在目前最佳条件下某项目所能达到的最好精密度水平。
其基本原则是，OCV测定需采用与常规工作相同的试剂、仪器及检测方法。
一般来说，实验室都用OCV测定来确定本室新开展的一项新项目的精密度，如果数值偏大，则说明该测定方法可能不稳定，不成熟，应该尽量避免在本实验室使用该方法。
三、2、RCV：表示本实验室在目前条件下，常规工作中某项目检验的精密度水平，是室内质控中靶值和允许误差范围确定的依据。
在第一次测定OCV后及每更换一次质控血清批号后，均应对新质控血清进行RCV测定。
一般实验室的质控工作都是以RCV为标准的。
四、3、RCVK：表示常规条件下对定值血清测定的变异。
在RCVK中，根据RCV数据所绘制的“空图”，对于同一批号的质控品是不变的。
不得将当月的检测结果代替RCV测定中的数据来绘制质控图。
五、4、RCVU。
常规条件下未定值血清测定的变异。
六、。
在建立七、二、准备工作。
八、1、建立质控的规章制度及普及质控知识。
质控工作的开展，是需要耗费大量的时间与精力的，还需要掌握大量的质控知识。
这就需要在平时的工作中下大力气规定出一些制度来实施质控的工作，并在检验科中多加强这方面的学习，使每个员工都掌握一定的质控知识，才能让员工在平时的工作中加以用心，把质控工作开展起来。
九、2、定期检校仪器。
对使用的仪器定期进行检查和校正，并建立完善的资料数据，以便在质控工作开展起来后，分析数据时加以应用。
十、3、制备生化质控血清。
质控工作的开展需要大量的质控血清，而假如全部从试剂公司购置的话，是笔不小的开支。
可以采取多份血清标本，混合后分装冻存作为质控血清使用。
自制质控血清最好一次性制备够半年甚至是一年的量。
在检验过程中应注意防止肝炎感染。
在使用冻存的质控血清时，必须使其完全融化并达到室温后方可测定。
生化质控规则
生化质控规则生化质控规则是在进行生化检验时，为了确保结果的准确性和可靠性而采用的一套质量控制方法。
这套规则主要包括以下几个部分：1.样本采集与处理：确保采集的样本符合标准，无污染、无变质。
处理过程中要遵循无菌操作原则，避免样本被污染。
同时，要保证样本的储存温度和时间符合要求，以保持其生物活性。
2.仪器与试剂：使用的生化分析仪应经过校准，确保测量准确。
试剂的品质、纯度以及有效期都要得到保证，避免因试剂问题导致的结果误差。
3.室内质控：通过采用已知浓度的质控品，在生化分析仪上进行多次测量，以评估仪器的稳定性。
通过室内质控可以及时发现仪器故障或操作中的问题，并进行相应的调整。
4.室间质评：通过与其他实验室进行比对，评估本实验室的生化检测结果是否与其他实验室一致。
室间质评有助于发现实验室的系统性误差，进一步提高结果的可靠性。
5.标准操作程序：制定并执行标准化的操作程序，确保每一步实验操作都符合规范。
这包括样本的采集、处理、分析、存储和报告等环节。
通过标准化操作，可以减少人为误差，提高实验的一致性。
6.数据审核与复查：对每一个生化检测结果进行审核，确认其是否合理、可靠。
对于异常值或离群点，应进行复查或重新实验，以排除可能的误差来源。
7.持续改进与培训：定期对生化质控规则进行更新和改进，以满足技术和标准的不断提高。
同时，对实验室人员进行培训和教育，提高他们的技能和意识，确保他们能够遵循这些规则。
通过以上七个方面的生化质控规则，可以有效地提高生化检测的准确性和可靠性，为临床诊断和治疗提供可靠的依据。
小心生化项目“单点定标”作校准有误区
目前我国县级以上包括县医院均配置有全自动生化分析仪，甚至沿海县区的中心卫生院也配备了，绝大部分为自建检测系统。
问及校准他们会拿出来的是K值记录，问及K值怎么得来的？都说用一个校准品的标示值来定标，K值自动显示。
把一点定标作为校准对待，这样做对吗？另一方面，使用校准品也有问题，这些都值得深思。
一、校准与定标有无区别？校准与定标均来自英文“Calibrate”一词，似乎没有什么区别。
让我们首先复习一下校准的定义和内涵。
我们查阅和温习了《临床实验室质量控制（QC）》的要求，上面对“校准”是这样描述的：“在一定条件下的一系列操作来确定检测仪器和检测系统所指示的量值，或者某一物质，或者参考物质代表的值，与相应标准所认识量之间的关系。
”接下来必需做“校准验证”，“就是要求按标本方式对校准品进步分析，以检查并证实仪器、试剂盒或检验系统的检验结果在规定的报告范围内保持稳定。
”这才是规范化的校准过程。
同时文件指出自己建立的检测系统必须建立校准方法：①选择合适的校（标）准品，包括校（标）准品的数目、类型和浓度；②如有可能，校（标）准品应溯源到参考方法和或参考物质；③确定校准的频度。
同时建立校准验证方法：①如有可能，方法应追溯到参考方法或己知值的参考品；②确定校（标）准品的数目类型和浓度，校准验证的接受限，以及校准验证的频度；③确定检验诘的报告范围，确定时必须包括一个最小值，中间值和此范围的上限的最大值。
同时还规定六个月以及有下列情况发生时，进行一次校验，如仪器或检测系统进行过一次大的预防性维护或者更换了重要部件；质控反映出异常趋势或偏移，或者超出了实验室规定的接受限，采取一般性纠正措施后，不能识别和纠正问题时。
最后特别强调所有进行过的校准和校准验证工作时必须记录并写成文件。
冯仁丰教授在《CLIA’88更新规则介绍》报告中也论及校准和校准验证(确认)：“要求校准的项目，你必须继续按照厂商要求，进行校准和校准确认(验证)。
生化仪的检定、校准、质控与比对
12s 质控规则
+3s
+2s +1s
平均数
-1s -2s
-3s
12s 规则 违背
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
当质控血清中的测定值处于±2s～±3s界限内，为“警报”信号。
20
13s 质控规则
+3s
+2s +1s
平均数
-1s -2s
-3s
13s 规则 违背
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
• 校准校正
校准时机
更换试剂批号 质控失控 ISE每天定标 仪器大维护或更换重要配件 至少每6个月进行一次
校准注意事项
选择合适的校准品，校准品应可溯源 不可用定值质控血清代替校准品进行校准 应避免基质效应的影响，最好使用人血清基质校
准品
校准验证
校正验证的目的是确定现有的校正设定(信号与分析物浓度 关系) 是否保持稳定，以及判断可报告范围内的校正是否 保持持续稳定及测定结果的准确性的检查方法。
• 进样系统 • 样本吸样系统 • 反应比色杯 • 试剂仓 • 试剂吸样系统 • 冲洗系统 • 混匀系统 • 光路系统
AU2700工作流程
• 加试剂 • 加样本 • 混匀 • 加试剂（必要时） • 混匀 • 比色 • 计算结果 • 复查（必要时）
双波长的优势
在单位时间内有两条波长不同的光束λ1和λ2交替照射 同一个溶液，由检测器测出的吸收度是这两个波长下 吸收度的差值△A。
质量管理是实验室为保证检测结果准确、可靠、 及时所采取的所有措施和管理手段的总和。包括 实验室管理的方方面面。
医学实验室质量控制是一个统计过程，用于监视 与评价产生患者结果的分析过程。
定标与质控简述
6
定标 VS质控 －概念 －必要性 定标品VS标准品 因素计算VS标准品校标 标准品溯源
标准品分级
标准品：是一个或几个已
知浓度的样本，它在检测 中作为一个或几个参照物， 使以后的所有的检测都与 之比校，以此来得到其它 样本的浓度。
标准品分级
⒈一级标准品 一级标准品（原级参考物）是已经确定的稳 定而均一的物质，它的数值已由决定性方法确定，或由高 度准确的若干方法确定，所含杂质也已经定量。 ⒉二级标准品 二级标准品（次级标准品）或是纯溶液（水 或有机溶剂的溶液），或存在于相似基质中。这类标准品 可由实验室自己配制或为商品，其中有关物质的量由参考 方法定值或用一级标准品比较而确定，主要用于常规方法 的标化或为控制物定值。 ⒊控制物 控制物有冻干的或溶液，可以用适当的标准品 （一级或二级）以参考方法定值，用于质量控制，不用于 标化（除经准确定值者）。
质控品应具有的特征是：
①人血清基质，分布均匀。 ②无传染性。
③添加剂和调制物的数量少。
④瓶间CV%酶类应小于2%，其它应小于1% 。 ⑤冻干品复溶后稳定，2～8℃时不少于24小时，－20℃时不少于20天；某些不稳定 成分（如BIL，ALP等）在复溶后4小时的变异应小于2% ⑥在实验室的有效期应在一年以上。 ⑦合理的成本。
定标 VS质控 －概念 －必要性 定标品VS标准品 因素计算VS定标品定标 标准品溯源
定标 VS质控 －概念 －必要性 定标品VS标准品 因素计算VS定标品定标 标准品溯源
定标及定标品
定标 calibrate ： 在规定条件下，建立测量 装置与一可追溯且已知参 考值不确定度的标准之间 关系的一整套操作活动。
定标品与标准品关系