生化检验项目校准知识分享
生化检验知识点归纳总结
生化检验知识点归纳总结一、生化检验的基本原理1. 生化检验的定义：生化检验是通过对人体的生化物质进行定量或定性的分析，以达到对体内生化状态和功能的了解的一种检验方法。
2. 生化检验的基本原理：生化检验是通过测定人体内的生化物质，如葡萄糖、蛋白质、脂类、酶等物质的含量和活性，以及相关代谢产物的浓度来反映体内生化过程的变化，为疾病的诊断、鉴别诊断和疗效监测提供重要的实验依据。
二、常用指标及其临床意义1. 血糖：血糖是人体内最主要的能量来源，其测定对糖尿病、甲状腺功能异常、妊娠、垂体功能异常等有重要的临床意义。
2. 肝功能指标：包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、球蛋白、谷氨酰转肽酶等指标，可以反映肝功能的变化，对肝炎、肝硬化、药物中毒等疾病的诊断和鉴别诊断有重要意义。
3. 肾功能指标：包括肌酐、尿素氮、尿酸、血尿酸、尿蛋白、尿微量白蛋白等指标，可以反映肾脏的排泄功能和肾小球滤过功能的变化，对肾炎、肾结石、肾功能衰竭等疾病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。
4. 血脂指标：包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等指标，可以反映血脂代谢的变化，对高血脂症、动脉粥样硬化等疾病的诊断和鉴别诊断有重要意义。
三、常见的生化检验项目1. 血清蛋白电泳：通过电泳分离血清蛋白，以及对蛋白的定量和鉴定，可以对免疫性疾病、肝病、肾病、恶性肿瘤等疾病进行诊断和鉴别诊断。
2. 血清肝功能指标：主要包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、白蛋白、球蛋白等指标的测定，用于评价肝细胞功能和肝细胞损伤的程度。
3. 血清肾功能指标：主要包括肌酐、尿素氮、尿酸、尿微量白蛋白等指标的测定，用于评价肾小球滤过功能和肾小管功能的变化。
4. 血清电解质及酸碱平衡指标：包括钠、钾、氯、钙、镁、磷酸盐、二氧化碳结合力等指标的测定，用于评价电解质的平衡和酸碱的调节功能。
四、生化检验的标本采集与储存1. 血液标本采集：在采集静脉血时一定要选择适当的静脉针头，遵循正确的穿刺技术和取血流程，尽量避免静脉内血栓的形成，尽量避免血细胞破裂。
生化校准方案
生化校准方案一、背景介绍在生化实验过程中，为了确保仪器的准确性和可靠性，需要进行生化校准。
本文将介绍一个生化校准方案，以保证实验结果的准确性。
二、实验材料和仪器本实验所需材料和仪器如下：1. 校准血液样本2. 动脉血气分析仪3. pH校准液4. 电解质标准液5. 血糖标准液6. 酶标仪7. 读板仪或分光光度计三、实验步骤1. 动脉血气分析仪校准a) 确保动脉血气分析仪处于正常工作状态。
b) 使用pH校准液对仪器进行初始校准，调整pH值至标准值。
c) 使用电解质标准液对仪器进行电解质校准。
2. 血糖测定仪校准a) 确保血糖测定仪处于正常工作状态。
b) 使用血糖标准液进行初始校准，调整血糖测定仪的读数。
c) 检查仪器的准确性，并对照标准曲线检测测定结果。
3. 酶标仪校准a) 确保酶标仪处于正常工作状态。
b) 使用校准曲线测定标准品，根据标准曲线调整酶标仪的读数。
c) 对未知样本进行测试，根据标准曲线计算浓度。
4. 读板仪或分光光度计校准a) 确保读板仪或分光光度计处于正常工作状态。
b) 使用校准标准溶液进行初始校准，调整读数至标准范围。
c) 对待测样本进行测试，记录读取的吸光度值。
四、数据处理与分析1. 校准数据处理在校准过程中，记录每次校准的数据，包括校准前和校准后仪器读数，校准液的浓度等信息。
2. 校准曲线绘制根据校准数据，绘制相关的校准曲线，以用于后续样本测定结果的计算。
3. 样本测定与结果分析使用校准后的仪器对待测样本进行测定，根据校准曲线计算出样本浓度或吸光度等结果。
根据实验要求进行数据分析和结果判断。
五、实验注意事项1. 严格按照实验步骤操作，确保校准过程的准确性。
2. 注意使用标准溶液和校准曲线进行仪器的校准，确保后续实验结果的可靠性。
3. 校准结果应准确记录，包括校准前后的仪器读数，校准液的浓度等信息。
4. 注意实验室安全，遵守相关实验操作规范和仪器操作说明。
六、总结生化校准方案是确保实验结果准确可靠的关键步骤。
演示文稿生化检验项目校准
logit-log4p对数函数法中的一种，适用于浓度升 高而吸光度表现为收束的工作曲线。
样条函数法（spline）：是将每一标准液测定的 吸光度连接起来（点对点），形成一个完整曲线 ，即为曲线拟合。该曲线拟合优于折线法校准。
•logit-logXp与样条函数法
•抛物线型(左下图)，则多考虑用logic方法拟合。 •曲线类型不确定时，或校准曲线类型如图12-37所示 的S型非线性校准类型，则多考虑Splain方法拟合。
K因数法适用的分析方法有一点终点法，两点 终点法，两点速率法，多点速率法。
线性校准（Linear）：其反应为线性（直线） ，一般只需一个校准品进行校准。
非线性法：又称非直线性校准法 非线性法包 括logit-log法、指数函数法、样条函数法等 方法 Logit-log3p对数函数法中的一种，适用于浓 度升高而吸光度表现为收束的工作曲线。P表 示参数之意，由3个参数（S1Abs、k、a）参与 计算。S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜 率，a表示近似常数。
案例分析
一、现象： 某品牌HCY试剂（仪器：雅培 C8000），校准无法通过
，出现“校准失败”的报警。 试剂参数为：Primary wavelength：340nm；
Secondary wavelength：700nm； Main read time：31-33； Blank read time：26-28； Sample volume：10ul； R1 reagent volume：185ul； R2 reagent volume：50ul； Calibration method：Spline； 校准品个数设置：3；
（优选）生检验项目校准
校准：在规定条件下，为确定测量仪器(或 测量系统)所指示的量值，或实物量具(或参考 物质)所代表的值，与对应的由标准所复现的量 值之间关系的一组操作。
生化检验之校准
生化检验之校准1、校准（Calibration）的定义在一定条件下的一系列操作来确认检测仪器和检测系统所指示的量值，或者某一物质，或者参考物质代表的值，与相应标准量值之间的关系。
包括校准和校准验证两个方面。
2、校准的意义确保检测系统的检验结果在规定的报告范围内的稳定性和可靠性。
3、校准方法1)、线性（Linear）法：①、1点线性法（K系数法）：通过测定空白液（或第1标准液）的吸光度和输入的K值而得出工作曲线。
②、2点线性法：通过空白液（或第1标准液）和标准液（第2标准液）浓度与吸光度之间的关系，采用线性回归法制成线性工作曲线。
③、多点线性法：通过空白液（或第1标准液）和标准液（第2标准或第6标准液）浓度与吸光度之间的关系，采用线性回归法制成线性工作曲线。
④、同工酶法（线性法）：检测的样本中含有两种不同的同工酶，如果含有抑制剂的试剂不能完全抑制对检测有干扰的同工酶活性。
采用同工酶法进行校准，可测定同工酶的总活性（同工酶P）和所检测同工酶的活性(同工酶Q)。
2）、非线性法：①、Logit-log3P法：对数函数法中的一种，适用于随浓度的升高而吸光度表现为收束的工作曲线。
“P”表示参数(parameter)之意，由3个参数（S1Abs、K、a）参与计算。
注：S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜率，a表示近似常数。
②、Logit-log4P法：对数函数法中的一种，同样适用于随浓度的升高而吸光度表现为收束的工作曲线。
由4个参数（S1ABS、K、a、b）参与计算。
③、Logit-log5P法：对数函数法中的一种，适用于随浓度的升高而吸光度表现为收束较明显的工作曲线。
因该方法由5个参数（S1Abs、K、a、b、c）参与计算，而使结果更加精确。
④、指数函数法（Exponential）：该方法的工作曲线随着浓度的升高而吸光度出现离散的趋势。
由5个参数（S1Abs、K、a、b、c）参与计算。
⑤、样条函数法（Spline）：是将每一标准液测定的吸光度值连接起来（点对点），形成一个完整曲线，即为曲线拟合。
生化检验项目校准
冰冻产品的处理步骤：从-70℃或-20℃冰箱中取出 样本，置室温（18-25）℃下平衡，使之完全融化 ，温和混匀。 冻干产品的复溶步骤： 从冰箱中取出样本，置室 温（18-25）℃下平衡，并放置在水平桌面上，轻 拍小瓶，以确保所有物质已沉淀在该小瓶底部，小 心拔开胶塞，采用已校准的移液管沿瓶壁缓慢精确 加入规定体积的去离子水，压胶塞到原位后置室温 下使之完全溶解，温和混匀。 应按厂家提供说明书操作。
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校准后的验证
•校准后用校准品当样本进行测试，看其值与定值 之间的差异 •测定室内质控，看结果是否在控。 •参加室间质评或返测已知浓度的室间质评样本。
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•记录每次校准结果，与之前的校正结果进行比较。
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生化检验项目校准
泸州市人民医院
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校准：在规定条件下，为确定测量仪器(或 测量系统)所指示的量值，或实物量具(或参考 物质)所代表的值，与对应的由标准所复现的量 值之间关系的一组操作。
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仪器的性能验证：
• • • • • • • • • 零点漂移 波长准确度及重复性 杂散光 吸光度正确度 吸光度重复性 吸光度线性误差 交叉污染率 温度正确度 比色杯间差距
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三、处理： 1. 分别对10umol/L、33umol/L的校准品进行对倍 稀释，得到5umol/L、16.5umol/L浓度的校准； 2. 把参数中校准品个数修改为：5； 3. 浓度设置修改为0、5、10、16.5、33umol/L。 4. 仍采用Spline定标模式重新进行校准，后校准 顺利通过，结果如下：
生化检验项目校准
0 umol/L
umol/L 33 umol/L
• 如果测量方法的反应信号与被测量浓度不成线性反应（如免 疫分析方法），则应选用非线性校准模式，需涉及3至6个校 准品，采用曲线拟合、多项式、对数等方式建立非线性函数。
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K因子法（+ -）： 理论k值：根据理论摩尔消光系数来计算。通常试剂生产厂家给出的 k值都属于。 实测K值：是根据仪器实测的摩尔消光系数来设置K值 校准k值：是根据仪器当前的实际状态，试剂的稳定性等通过校准品 校准后得到的K值。
冰冻产品的处理步骤：从-70℃或-20℃冰箱中取出样本，置室温 （18-25）℃下平衡，使之完全融化，温和混匀。
冻干产品的复溶步骤： 从冰箱中取出样本，置室温（18-25）℃下 平衡，并放置在水平桌面上，轻拍小瓶，以确保所有物质已沉淀在该 小瓶底部，小心拔开胶塞，采用已校准的移液管沿瓶壁缓慢精确加入 规定体积的去离子水，压胶塞到原位后置室温下使之完全溶解，温和 混匀。 应按厂家提供说明书操作。
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校准品浓度水平及个数选择 • 校准至少包含你需要报告结果的内容/范围。 • 校准范围也定义为分析方法的工作范围。 • 个数要与仪器要求相匹配
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案例分析
一、现象： 某品牌HCY试剂（仪器：雅培 C8000），校准无法通过，出现“校准失败”
K因数法适用的分析方法有一点终点法，两点终点法，两点速率 法，多点速率法。
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线性校准（Linear）：其反应为线性（直线），一般只需一个 校准品进行校准。
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生化分析仪的校准
(三)、 校准方法
例如日立(Hitachi)系列您必须购买宝灵曼 (Boehringer)的试剂及其校准的说明书设置 参数，用c.f.a.s.校准血清进行校准，即可获 得各项目的校准K值，同时观察一下各项目 测定时反应进程图，检查各项目参数设置 是否在最佳位置，如不在最佳位置应予以 重新设置并测定。此时得到的K值即为准确 的校准K值.
证分析仪能够正常运行的重要手段。 分析仪要严格根据操作手册的要求 进行维护，一般包括每天维护、每 周维护、每月及不定期维护等几方 面。
1．每天维护
①清洗样品针，试剂针，特别是
搅拌棒容易缠上纤维蛋白，是最 常见的交叉污染源. ②管路清洗.
2．每周维护
①执行比色杯清洗程序对比色杯进行
清洗。(南京产分析仪要求每天清洗)这 是由于比色杯经过反复使用后，会在 比色杯内壁附有用常规方法难以彻底 冲洗的物质，这些物质会引起交叉污 染，通过使用专用的反应杯清洗剂能 比较彻底地对这些附着物进行清洗。
准品； 2.如有可能，校准品应能溯源到参考方 法或/和参考物质； 3.对不同的分析项目要根据其特性确立 各自的校准频率。”
对于一个临床检测项目，如果所用方
法的测定原理、试剂、仪器、校准品 中任何一个不同，都可能得到不同的 测定结果。如果我们想要得到准确可 靠的测定结果，而该结果又具有与其 他实验室的可比性.就应该自己建立一 个标准测定系统.
生化分析仪的校准和维护
普陀区人民医院 陈友土
一、 生化分析仪校准
(一)、 认识校准的重要性和必要性:
首先必须明确生化分析仪不论如何 先进，它还是一个比较器，它测试出 来的标本结果是随着标准限的设置不 同而变化的。卫生部临床检验中心明 确指出:对测定标本的仪器一定要求 进行校准.
生化检验知识点总结
生化检验知识点总结一、生化检验概述生化检验是临床医学中一项重要的检验手段，通过对患者血液、尿液、体液等样本进行化学成分和功能状态的检测，可以帮助医生判断疾病的诊断、疾病的发展和治疗效果，为临床诊断和治疗提供重要的参考依据。
二、生化检验的临床意义1. 疾病的诊断：生化检验可以帮助医生确定患者是否患有某些疾病，如心脏病、糖尿病、肝病、肾病等。
2. 疾病的分析：通过生化检验可以分析患者的病情，了解疾病的类型、程度以及影响范围，有助于医生制定治疗方案。
3. 治疗效果的评估：生化检验可以评估治疗效果，了解患者是否已经康复，是否需要调整治疗方案。
4. 预防和健康体检：生化检验可以帮助人们及早发现潜在的健康问题，预防疾病的发生。
三、生化检验的常见项目生化检验的常见项目包括血液生化指标、尿液生化指标、体液生化指标等。
1. 血液生化指标（1）血糖：血糖是人体能量的重要来源，血糖的检测可以帮助医生诊断糖尿病、低血糖等疾病。
（2）肝功能：肝功能指标包括谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、直接胆红素等，可以反映肝脏的功能状态。
（3）肾功能：肾功能指标包括肌酐、尿素氮、尿酸等，可以反映肾脏的排泄功能和肾小球滤过功能。
（4）血脂：血脂指标包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等，可以反映血液中脂质的代谢状况。
2. 尿液生化指标（1）尿酸：尿酸是人体代谢产生的一种废物，尿酸过高可以导致痛风等疾病。
（2）尿蛋白：尿蛋白可以反映肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能的异常。
3. 体液生化指标（1）血清蛋白：血清蛋白是人体液体中的一种重要成分，可以反映患者的蛋白质代谢状态。
（2）电解质：电解质包括钠、钾、氯等，可以反映患者的酸碱平衡和水盐代谢状态。
四、生化检验的常见异常及意义1. 血糖异常：血糖异常可以导致糖尿病、低血糖等疾病，严重影响患者的生活质量和健康状况。
2. 肝功能异常：肝功能异常可以导致肝炎、肝硬化、肝癌等疾病，严重影响患者的生活质量和寿命。
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冰冻产品的处理步骤：从-70℃或-20℃冰箱中取出 样本，置室温（18-25）℃下平衡，使之完全融化 ，温和混匀。
冻干产品的复溶步骤： 从冰箱中取出样本，置室 温（18-25）℃下平衡，并放置在水平桌面上，轻 拍小瓶，以确保所有物质已沉淀在该小瓶底部，小 心拔开胶塞，采用已校准的移液管沿瓶壁缓慢精确 加入规定体积的去离子水，压胶塞到原位后置室温 下使之完全溶解，温和混匀。
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logit-log4p对数函数法中的一种，适用于浓度升 高而吸光度表现为收束的工作曲线。
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样条函数法（spline）：是将每一标准液测定的 吸光度连接起来（点对点），形成一个完整曲线 ，即为曲线拟合。该曲线拟合优于折线法校准。
，出现“校准失败”的报警。 试剂参数为：Primary wavelength：340nm；
Secondary wavelength：700nm； Main read time：31-33； Blank read time：26-28； Sample volume：10ul； R1 reagent volume：185ul； R2 reagent volume：50ul； Calibration method：Spline； 校准品个数设置：3；
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三、处理： 1. 分别对10umol/L、33umol/L的校准品进行对倍
稀释，得到5umol/L、16.5umol/L浓度的校准； 2. 把参数中校准品个数修改为：5； 3. 浓度设置修改为0、5、10、16.5、33umol/L。 4. 仍采用Spline定标模式重新进行校准，后校准
K因子法（+ -）： 理论k值：根据理论摩尔消光系数来计算。通常试 剂生产厂家给出的k值都属于。 实测K值：是根据仪器实测的摩尔消光系数来设置K 值 校准k值：是根据仪器当前的实际状态，试剂的稳 定性等通过校准品校准后得到的K值。
K因数法适用的分析方法有一点终点法，两点 终点法，两点速率法，多点速率法。
5、之后校准显示通过，质控在控，证明校准成功
四、分析： 1. 全自动生化分析仪的校准模式设置中均有线性或
非线性的选择。当我们对其进行设置时，会根据 试剂盒的反应原理选择合适的校准模式。 2. 通常情况下，常规的生化项目我们会选择线性模 式校准，而免疫比浊项目我们会选择非线性模式 校准。 3. 若选择线性校准，往往我们只需带一个校准品进 行两点校准即可。 4. 若选择非线性校准时，我们会带多个浓度校准品 进行多点校准。
校准品：含有已知量的欲测物，用以校准该测定 方法的数值，它与该方法、试剂、仪器是相关联 的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂 等造成的系统性误差。
最好为人血清基质，减少基质效应 仪器、试剂、校准品的配套性 如有可能校准品应溯源到参考方法或参考物质 要有明确的不确定度
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线性校准（Linear）：其反应为线性（直线） ，一般只需一个校准品进行校准。
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非线性法：又称非直线性校准法 非线性法包 括logit-log法、指数函数法、样条函数法等 方法 Logit-log3p对数函数法中的一种，适用于浓 度升高而吸光度表现为收束的工作曲线。P表 示参数之意，由3个参数（S1Abs、k、a）参与 计算。S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜 率，a表示近似常数。
顺利通过，结果如下：
Cal Factor 吸光度
0 umol/L 5 umol/L 10 umol/L
-87.2
-213.5
16.5 umol/L -279.6
33 umol/L -365.3
-0.0032 -0.0195 -0.0366 -0.0558 -0.0744
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一级标准品
决定性方法
参考方法
溯
二级标准品
校
源
厂家方法
准
校准品
常规分析
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项目校准主要涉及内容
• 校准方法的选择 • 校准品的选择及准备 • 校准频率的选择 • 校准后的验证 • 问题讨论
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校准方法的选择
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仪器的性能验证：
• 零点漂移 • 波长准确度及重复性 • 杂散光 • 吸光度正确度 • 吸光度重复性 • 吸光度线性误差 • 交叉污染率 • 温度正确度 • 比色杯间差距
检测项目校准
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校准目的是准确度的传递
应按厂家提供说明书操作。
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校准品浓度水平及个数选择 • 校准至少包含你需要报告结果的内容/范围。 • 校准范围也定义为分析方法的工作EOPLE’S HOSPITAL
案例分析
一、现象： 某品牌HCY试剂（仪器：雅培 C8000），校准无法通过
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•logit-logXp与样条函数法
•抛物线型(左下图)，则多考虑用logic方法拟合。 •曲线类型不确定时，或校准曲线类型如图12-37所示 的S型非线性校准类型，则多考虑Splain方法拟合。
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校准品的选择及准备
浓度分别设置为：0、10、33umol/L。
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二、了解情况： 查看校准结果，发现其每个浓度的吸光度实
际在该仪器上已做出测定，分别为：0：-0.0027 10：-0.0344 33：-0.0738，但参与最终结果 计算的Cal Factor（校准因数）却显示为0，说 明该仪器并未通过所测定的吸光度进行曲线拟合 ，故出现“校准失败”报警。