生化检验中的定标复习课程
生化检验中的定标教学文稿
生化检验中的定标定标的意义：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时，无论是手工或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性，那就要乘上一个K 值，计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定，经过仪器测定出这两个吸光度，即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准－A试剂空白) PS：A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。
任何标本，用其吸光度乘以K 值就得到了其浓度值。
因此，K值具有非常决定性的意义，可以决定标本的准确性。
K值的决定因素：我们看看K值会受到什么影响呢？第一，标准液的浓度一定要准确（标准液最好与标本一样是以血清为基质的）。
第二，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响，如果仪器稳定，试剂也稳定，那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的？一般我们用质控血清来检查，最好是两种水平的质控来检查，如果质控结果很好，可以说K值是准确的，用这个K 值计算出来病人的结果也是准确的，所以K值非常关键。
K值的真面目：K值实际上代表了斜率，截距代表试剂空白，试剂空白每天都在变化，所以K值的稳定性由仪器与试剂决定，如果仪器与试剂都十分稳定，那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值：一是计算出来的理论K值；K = (TV × 1000)/(SV × L × ε)二是用有酶项目的定标液得出K值（K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)）：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目。
生化检验中的定标
精心整理定标的意义：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时，无论是手工或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性，那就要乘上一个K值，计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定，经过仪器测定出这两个吸光度，即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)PS：A表示吸光度以K值就得到了其浓度值。
因此，KK值的决定因素：我们看看K值会受到什么影响呢？K值是准确的，用这K值的稳定性由仪器与试剂决定，多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值：一是计算出来的理论K值；K=(TV×1000)/(SV×L×ε)二是用有酶项目的定标液得出K值（K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)）：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目。
生化检验中的各种空白概念时间:2009-5-8 9:54:09,点击:?61 对所谓"试剂空白""样本空白""水空白""杯空白"等"空白"名词,有些同行可能感到困惑.特此汇集了一下各种言论(包括本论坛高手们发表的一些意见)并结合自己的理解,总结如下,希望大家指正和补充:2、样本空白：???由于溶血、脂血、黄疸等情况，会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。
所以对样本本身吸光度的测量，即样本空白，可以去除这方面的影响。
测量方法是按照正常测试的试剂和样本量，把试剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量。
自动生化仪上，很难界定样本空白。
生化仪器中的空白定标和质控幻灯片PPT
胆红素等反应 掉，再加入R2开始测定反应。在一 定范围内都可以消除样本空白。 c).现代全自 动生化仪大多采用双波长测定.双波长测定的原则 是根据干扰组分和待测物质吸收光谱的峰形特征， 选择两个波长和 ，使干扰组分在这两个波长处的 吸光系数相等，而使待测物质在两波长处的吸光 系数有显著差别。以两波长分别测定分析溶液的 吸光度， 以两个吸光度值之差(△A)计算。这也可 以扣除一部分样本空白. d).有些仪器,例如日立 系列,有专门的“血清信息”功能的设置。做法都 是单 独占用一个空白通道来计算，这也叫做样品 空白校准。 3、水空白： 比色杯在加入水以后 的吸光度。水空白的意义主要是对光路系统进行 检查和校正，如光源，比色杯等，同时在计算中 起到消除“杯差”的 作用。日立7060中的Cell Blank（杯空白）测定的就是水空白。
2 常用的质控规则
质控规则以符号AL表示： (1)A是指超过质控限(L)的质控测定值的个数
(2)L是质控界限。
(3) 1 2s质控规则,A=1,L=2s 当质控测定值超过了规定某规则要求时，
应判该批分析违背此规则。
1 2s：有1个质控测定值超过X±2s，该规则 称为“警告规则”。
13s规则：1个质控测定值超过X±3s质控限。 此规则多由随机误差造成
③具有低的假失控或假报警概率；
④当失控时，能确定产生失控的分析误差的 类型，由此可帮助确定失控的原因以寻找 解决问题的办法。
最初的Westgard多规则通常有六个质控规 则，即12s、13s、22s、R4s、41s、10x。
其中12s规则是是一种警告规则也是 Westgard法的启动规则，它有助于对质控 数据的快速判断。
生化检验中的各光度为相对吸光度，所以从理论上说，所 有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光 度扣除。试剂本身的吸光度就是 试剂空白。 测量方法是按照正常测试的试剂和样本量
生化仪器中的空白定标和质控
2、样本空白： 由于溶血、脂血、黄疸等情况， 会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。 所以对样本本身吸光度的测量，即样本空白，可 以去除这 方面的影响。测量方法是按照正常测试 的试剂和样本量，把试剂换成蒸馏水或生理盐水 来进行测量。自动生化仪上，很难界定样本空白。 与消除样本空白有关的大约有如下几点: a).在双 试剂测定时，加入试剂1和样品后的吸光度可一定 程度上扣除样本空白，所以有单 试剂不能扣除样 本空白的说法。 b).现在优质的试剂的抗干扰能 力都比较强，比如有些双试剂，R1加入后先和样 本孵育一段时间，将血红蛋白、脂肪
生化检验中的各种空白概念
1、试剂空白： 由于生化测试测量的吸 光度为相对吸光度，所以从理论上说，所 有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光 度扣除。试剂本身的吸光度就是 试剂空白。 测量方法是按照正常测试的试剂和样本量
把样本换成蒸馏水来测量。 在传统手工方法 中,每次测定都要做至少三个管:测定管、标准管、 空白管。其中空白管是试剂加蒸馏水，测出来也 就是试剂空白。因为 操作环境、仪器状态、试剂 稳定性等变异，所以要求每次都要测定试剂空白， 称为实时试剂空白。 在全自动分析仪上，大 体上是模拟手工操作。但许多全自动分析仪为追 求速度，在设计上采用一些折中方法来测定试剂 空白。以日立全系 列生化仪为例。该系列分析仪 是做不了实时试剂空白，因为它们全是先加入样 本后加试剂，为了折中，只好在定标时做一个试 剂空白，保 存起来，需要扣除试剂空白时再减这 个预先保存的值。这种做法，对于比较稳定的试 剂来讲，对结
（二）分析中质控
建立项目操作程序 标准化的操作规程（SOP文件）。 室内质控和结果分析 对各个项目进行室内质量控制，并对质控结 果进行分析与处理。
生化定标及质控操作说明教学内容
生化定标及质控操作说明生化定标及质控操作说明⊙定标液及质控液在溶解之后避光、-20℃保存一个月一．定标程序1.设置定标液：点击定标→定标液设置一般选用的都是线性定标；设置2个定标点一个是蒸馏水，另一个是定标液。
（蒸馏水要求是干净新鲜的，要是没有蒸馏水就使用0.9%的生理盐水代替，不要用注射器抽取生理盐水那样瓶塞会污染生理盐水，直接倒出适量生理盐水即可）再点击添加设置①名称：例如：水②批号、浓度水平一般无意义可以不设置③有效期：尽量设的时间长一些，在每次定标的时候要注意是否超过有效期，保证定标过程顺利④位置：因为样本检测是从1盘开始的，所以设置的时候设置虚拟盘例如：10盘作为定标的专用位置，此位置不能进行其他测试，只能用于定标⑤在项目列表一栏选中项目，并将定标项目的靶值浓度输入浓度一栏。
设置完成后点击确认。
2.设置定标规则点击参数→项目设置→选中项目→点击定标规则→在定标列表中选中所使用的定标液→重复测量次数为3.每个项目都要设置3.定标申请①点击定标→点击定标申请，在定标类型上选择定标，在项目选择选择要定标的项目（注明：使用双试剂终点法检测的项目如：TB、DB、GLu、UA四个项目要做试剂空白，需要在定标类型上选择试剂空白，然后在项目选择中选择以上四个项目）然后点击确认。
②将蒸馏水放在样本盘1号位置，把定标液放在2号位置。
点击换杯换上干净杯子。
因为一个项目的定标需要6个杯子，所以要保证杯子够用。
4.质控定标做的好不好主要是看质控做的怎么样。
做完定标后接着做质控。
（1）设置质控液点击质控→点击质控液设置→设置①批号、有效期一定是质控液上标示的数字②位置：1号盘40号位，此位置是质控专用位置，不可用于样本检测，如果样本量多，可将样本编在2号盘上。
在项目列表一栏上选择项目并填上质控液的浓度和标准差，全部设置好后，点击确认。
（2）操作做质控有两种方法，一种是：把质控当样本做。
第二种是点击质控申请，选中项目进行测试，此过程查询结果比较麻烦。
生化检验中的定标
生化检验中的定标集团标准化办公室：[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]定标的意义：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时，无论是手工或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性，那就要乘上一个K值，计算出来的结果对我们就有意义了。
K 值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定，经过仪器测定出这两个吸光度，即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)PS：A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。
任何标本，用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此，K值具有非常决定性的意义，可以决定标本的准确性。
K值的决定因素：我们看看K值会受到什么影响呢？第一，标准液的浓度一定要准确（标准液最好与标本一样是以血清为基质的）。
第二，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响，如果仪器稳定，试剂也稳定，那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的？一般我们用质控血清来检查，最好是两种水平的质控来检查，如果质控结果很好，可以说K值是准确的，用这个K值计算出来病人的结果也是准确的，所以K值非常关键。
K值的真面目：K值实际上代表了斜率，截距代表试剂空白，试剂空白每天都在变化，所以K值的稳定性由仪器与试剂决定，如果仪器与试剂都十分稳定，那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值：一是计算出来的理论K值；K=(TV×1000)/(SV×L×ε)二是用有酶项目的定标液得出K值（K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)）：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目。
生化仪器中的空白定标和质控
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2、样本空白： 由于溶血、脂血、黄疸等情况， 会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。 所以对样本本身吸光度的测量，即样本空白，可 以去除这 方面的影响。测量方法是按照正常测试 的试剂和样本量，把试剂换成蒸馏水或生理盐水 来进行测量。自动生化仪上，很难界定样本空白。 与消除样本空白有关的大约有如下几点: a).在双 试剂测定时，加入试剂1和样品后的吸光度可一定 程度上扣除样本空白，所以有单 试剂不能扣除样 本空白的说法。 b).现在优质的试剂的抗干扰能 力都比较强，比如有些双试剂，R1加入后先和样 本孵育一段时间，将血红蛋白、脂肪
(仪器的精度、波长的准确度) 检测方法的选择和评价 （重复实验、回收实验、干扰实验、方法比较实验） 试剂和标准品的选择和评价 （线性范围测定、反应曲线的观察、稳定性实验） 标本准备 （血清、血浆、胸腹水等)
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胆红素等反应 掉，再加入R2开始测定反应。在一 定范围内都可以消除样本空白。 c).现代全自动 生化仪大多采用双波长测定.双波长测定的原则是 根据干扰组分和待测物质吸收光谱的峰形特征， 选择两个波长和 ，使干扰组分在这两个波长处的 吸光系数相等，而使待测物质在两波长处的吸光 系数有显著差别。以两波长分别测定分析溶液的 吸光度， 以两个吸光度值之差(△A)计算。这也可 以扣除一部分样本空白. d).有些仪器,例如日立 系列,有专门的“血清信息”功能的设置。做法都 是单 独占用一个空白通道来计算，这也叫做样品 空白校准。 3、水空白： 比色杯在加入水以后 的吸光度。水空白的意义主要是对光路系统进行 检查和校正，如光源，比色杯等，同时在计算中 起到消除“杯差”的 作用。日立7060中的Cell Blank（杯空白）测定的就是水空白。
生化检验中的定标
定标的意义：定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时，无论是手工或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性，那就要乘上一个K值，计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定，经过仪器测定出这两个吸光度，即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准－A试剂空白) PS：A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。
任何标本，用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此，K值具有非常决定性的意义，可以决定标本的准确性。
K值的决定因素：我们看看K值会受到什么影响呢？第一，标准液的浓度一定要准确（标准液最好与标本一样是以血清为基质的）。
第二，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响，如果仪器稳定，试剂也稳定，那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的？一般我们用质控血清来检查，最好是两种水平的质控来检查，如果质控结果很好，可以说K值是准确的，用这个K值计算出来病人的结果也是准确的，所以K值非常关键。
K值的真面目：K值实际上代表了斜率，截距代表试剂空白，试剂空白每天都在变化，所以K值的稳定性由仪器与试剂决定，如果仪器与试剂都十分稳定，那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适？这要看您试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值：一是计算出来的理论K值；K = (TV × 1000)/(SV ×L × ε)二是用有酶项目的定标液得出K值（K=标准浓度/(A标准－A试剂空白)）：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目。
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生化检验中的定标
定标的意义:
定标就是要找出一个参考点，就是一个K值（或F值）。
它是由仪器与试剂共同确定下
来。
当我们测定一个标本时，无论是手工或全自动生化分析仪，测出来的值只是一个吸光度，这个吸光度对我们没有什么意义，我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活
性，那就要乘上一个K值，计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找
出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定，经过仪器测定出这两个吸光度，即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
标准液的浓度我们是知道的，这两个吸光度可以由仪器测出，这样就得出一个K值。
任何
标本，用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此，K值具有非常决定性的意义，可以
决定标本的准确性。
K值的决定因素：
我们看看K值会受到什么影响呢?
第一，标准液的浓度一定要准确（标准液最好与标本一样是以血清为基质的）。
第二，标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响，如
果仪器稳定，试剂也稳定，那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的？
一般我们用质控血清来检查，最好是两种水平的质控来检查，如果质控结果很好，可以说
K值是准确的，用这个K值计算出来病人的结果也是准确的，所以K值非常关键。
K值的真面目：
K值实际上代表了斜率，截距代表试剂空白，试剂空白每天都在变化，所以K值的稳定性
由仪器与试剂决定，如果仪器与试剂都十分稳定，那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适？
这要看您试剂的稳定性，质控结果不好，有些项目做试剂空白可以解决，有些项目要做两
点定标。
酶的项目如何确定K值：
一是计算出来的理论K值;
K = (TV X 1000)/(SV X L ) X £
二是用有酶项目的定标液得出K值（K=标准浓度/（A标准—A试剂空白））：目前各公司可以提供多项目的定标液，不仅有底物类的项目，也有酶类的项目。
生化检验中的各种空白概念
时间:2009-5-8 9:54:09, 点击:61 对所谓“试剂空白""样本空白""水空白""杯空白“等“空白“名词，有些同行可能感到困惑.特此汇集了一下各种言论（包括本论坛高手们发表的一些意见）并结合自己的理解，总结如下，希望大家指正和补充：
空白概念区别要点:**空白二只含**的空白（只含**的吸光度）
1、试剂空白：
由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度，所以从理论上说，所有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除，试剂本身的吸光度就是试剂空白。
测量方法是按照正常测试的试剂和样本量，把样本换成蒸馏水来测量。
在传统手工方法中，每次测定都要做至少三个管：测定管、标准管、空白管。
其中空白管是试剂加蒸馏水，测出来也就是试剂空白。
因为操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异，所以要求每次都要测定试剂空白，称为实时试剂空白。
在全自动分析仪上，大体上是模拟手工操作。
但许多全自动分析仪为追求速度，在设计上采用一些折中方法来测定试剂空白。
以日立全系列生化仪为例。
该系列分析仪是做不了实时试剂空白，因为它们全是先加入样本后加试剂，为了折中，只好在定标时做一个试剂空白，保存起来，需要扣除试剂空白时再减这个预先保存的值。
这种做法，对于比较稳定的试剂来讲，对结果影响不大。
通俗的讲，日立的仪器工作流程中首先是将标本加入到比色杯中，然后依次加入R1
试剂、R2试剂，所以试剂空白在每个测定项目曲线中是无法看到的。
但是7170从CALIBRATION
中是可以看到的，S1ABS就是代表试剂空白吸光度，在CALIBRAT ION画面里的下方找到
Reaction Monitor （反应监察），其中STD（1）就是代表试剂空白反应曲线.为了减小误差，日
立仪器会连续做两次测定，所以你看到FIRST和SECONDS条，计算时是取他们的平均值。
做
试剂空白目的之一就是观察试剂是否稳定，积极采取措施纠正。
对于日立的这种试剂空白测定很多仪器都采用这种方法，也叫做试剂空白校准。
总的说来，自动生化仪上的试剂空白一般表现为零点吸光度，该吸光度是通过校准确立的。
2、样本空白：
由于溶血、脂血、黄疸等情况，会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。
所以对
样本本身吸光度的测量，即样本空白，可以去除这方面的影响。
测量方法是按照正常测试的试
剂和样本量，把试剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量。
自动生化仪上，很难界定样本空白。
消除样本空白有关的大约有如下几点：
a).在双试剂测定时，加入试剂1和样品后的吸光度可一定程度上扣除样本空白，所以
有单试剂不能扣除样本空白的说法。
b).现在优质的试剂的抗干扰能力都比较强，比如有些双试剂，R1加入后先和样本孵育一段时间，将血红蛋白、脂肪、胆红素等反应掉，再加入R2开始测定反应。
在一定范围内都
可以消除样本空白。
c).现代全自动生化仪大多采用双波长测定.双波长测定的原则是根据干扰组分和待测物
质吸收光谱的峰形特征，选择两个波长和，使干扰组分在这两个波长处的吸光系数相等，而使
待测物质在两波长处的吸光系数有显著差别。
以两波长分别测定分析溶液的吸光度，以两个吸光度值之差(△ A)计算。
这也可以扣除一部分样本空白
d).有些仪器，例如日立系列，有专门的“血清信息”功能的设置。
做法都是单独占用一个空白通道来计算，这也叫做样品空白校准。
3、水空白:
比色杯在加入水以后的吸光度。
水空白的意义主要是对光路系统进行检查和校正，如光源，比色杯等，同时在计算中起到消除“杯差”的作用。
日立7060中的Cell Biank (杯空
白)测定的就是水空白。