丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展教学提纲

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展教学提纲
丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展教学提纲

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展

梁化亮

(生物与食品工程学院,江苏常熟 215500)

Progress on antimicrobial peptide

[摘要]蛋白酶抑制剂(PIs)是一类能抑制蛋白酶水解酶的催化活性的蛋白或多肽,广泛存在于生物体内,在许多生命活动过程中发挥必不可少的作用。根据活性位点氨基酸种类不同可将蛋白酶抑制剂分为四大类型:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、天冬氨酸蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。其中尤以丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体内一些重要生理活动中起关键性的调控作用。其能对蛋白酶活性进行精确调控,包括分子间蛋白降解,转录,细胞周期,细胞侵入,血液凝固,细胞凋亡,纤维蛋白溶解作用,补体激活中所起的作用。[关键词]丝氨酸蛋白酶抑制剂分类临床应用防御

1 丝氨酸蛋白酶抑制剂

免疫系统是由组织,细胞,效应分子构成,并逐渐进化形成用于阻挠病原微生物的侵入攻击,限制它们扩散进入宿主内环境。这其中起到主要作用的是宿主产生的蛋白酶抑制剂,广泛存在于生物体内的蛋白酶抑制剂在机体内与相应的蛋白酶形成一个动态的系统,在生物体系以及一系列的生理过程中起着调控作用[1],是生物体内免疫系统的重要组成部分。它不仅能使侵入体内的蛋白酶失活并且能将其清除,使附着在宿主表面的病原细菌无法附着生存。其中丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体内一些重要生理活动中起关键性的调控作用[2]。

丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor)泛指具有抑制丝氨酸蛋白酶水解活性的一类物质,广泛存在于动物、植物、微生物体中[3]。在动物体中,丝氨酸蛋白酶抑制剂是维持体内环境稳定的重要因素,一旦平衡失调即导致多种疾病,任何影响其活性的因素也会造成严重的病理性疾病。它们最基本的功能是防止不必要的蛋白水解,调节丝氨酸蛋白酶的水解平衡。作为调控物,丝氨酸蛋白酶抑制剂参与机体免疫反应,对生物体内的血液凝固、补体形成、纤溶、蛋白质折叠、细胞迁移、细胞分化、细胞基质重建、激素形成、激素转运、细胞内蛋白水解、血压调节、肿瘤抑制以及病毒或寄生虫致病性的形成等许多重要的生化反应和生理功能有重要的影响[4]。鉴于其重要的生理功能,丝氨酸蛋白酶抑制剂一直倍受研究者的关注,目前已分离得到多种天然丝氨酸蛋白酶抑制剂,同时如何将其更好地应用于食品、医药领域也成为近来研究热点。

1.1 丝氨酸蛋白酶抑制剂分类

目前,典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂基于其序列、拓扑结构及功能的相似性,至少可分为18个家族[5],如表1-1所示。不同家族抑制剂的空间结构也不同。通常这类抑制剂是β片层或混合了α螺旋和β片层的蛋白质,也可能是α螺旋或富含二硫键的不规则蛋白质。但它们都拥有规范的反应活性位点环的构象,从而使这些非相关的蛋白质具有相似的生物学功能[6]。因此典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂最明确最广泛地代表了蛋白质的趋同进化。

1.2 Serpins

Serpins是一类分子量较大的丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族,氨基酸残基数为350-500个,具有保守的空间结构。Serpins多为单一肽链蛋白,其肽链结构可表示为N端-P15~P9~P1~P1,~P9~P15-C端,Pl是被靶酶中的底物识别位点识别的氨基酸[7]。距C端30-40个氨基酸部位含有RCL(reactive central loop),RCL暴露于蛋白表面,是serpins与目的蛋白相互作用的部位。Serpins最开始被认为起源于原核组织内,但是到目前为止已经在许多细菌和太古代的生物中发现[8-10]。但是这些原核生物的基因是否为原核serpins或侧生基因转移产物的祖先还尚不得而知。

1.2.1 Serpins的结构

结构生物学对于我们理解serpins的结构和功能起着重要作用。至今为止超过80种serpins结构具有不同构象,尽管serpins结构多变,但是无论是无抑制活性的卵清蛋白(ovalbumin)或有活性的抗胰蛋白酶(antitrypsin)却有着一些共同结构[11-12]。典型的serpins如antitrypsin和ovalbumin都拥有3个β-片层(命名为A,B,C)和8-9个α-螺旋(hA-hI)。Serpins还有一个反应活性环(RCL),它是一个凸出的,延伸的,暴露的环,它与蛋白酶凹陷的反应位点高度互补,是抑制剂与目的蛋白相互作用的部位。二者的结合方式

与酶与底物的作用方式相似。RCL的氨基酸顺序决定了抑制剂的选择性。改变RCL的氨基酸顺序,尤其是Pl位点的氨基酸,也就改变了该抑制剂的蛋白酶选择性。多数Serpins的P1部位均为精氨酸,并且他们能抑制不同的丝氨酸蛋白酶。RCL易被靶酶之外的蛋白酶切除.比较不同Serpins的氨基酸顺序发现:虽然典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂的同一个家族成员中,氨基酸序列呈现出高度的多样性,但RCL的主链构象却很相似,即RCL及其相邻部位的几个氨基酸顺序在该家族中是保守的。即使在不同家族中也一样,在同酶形成复合物后,RCL 的主链构象就更加相似了[13-14]。

Serpins能以多种结构稳定存在[15]:

(1)与靶酶作用之前的结构。与卵清蛋白等其它晶体结构类似,含有五条A B-折叠链和一个RCL螺旋区;

(2)RCL被剪切的serpin,其铰链区与RCL镶嵌于A-折叠;

(3)C-折叠解离出l链,使得铰链区及RCL在无键断裂的情况下可以完全插入到A-折叠片段中(如PAI-2、抗凝血酶等):

(4)抗凝血酶的部分铰链区插入于左折叠。

除此之外,最为重要的是与酶形成复合物时的Serpin结构。非功能性抑制子(卵清蛋白)和潜伏性抑制子(PAI-1)的RCL构型表现出两种极端的状态,卵清蛋白的S4链不插入A折叠,而PAI-1的RCL全部镶嵌到A一折叠中。然而,这两种具有极端结构的Serpin均不能抑制蛋白酶。对抗凝血蛋白酶、肝素共价因子Ⅱ、MENT、鼠类抗胰蛋白酶等抑制剂与靶酶的复合物进行X-射线晶体结构分析,发现RCL环的前两个氨基酸会插入顶部A-折叠中。这种部分插

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展教学提纲

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展 梁化亮 (生物与食品工程学院,江苏常熟 215500) Progress on antimicrobial peptide [摘要]蛋白酶抑制剂(PIs)是一类能抑制蛋白酶水解酶的催化活性的蛋白或多肽,广泛存在于生物体内,在许多生命活动过程中发挥必不可少的作用。根据活性位点氨基酸种类不同可将蛋白酶抑制剂分为四大类型:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、天冬氨酸蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。其中尤以丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体内一些重要生理活动中起关键性的调控作用。其能对蛋白酶活性进行精确调控,包括分子间蛋白降解,转录,细胞周期,细胞侵入,血液凝固,细胞凋亡,纤维蛋白溶解作用,补体激活中所起的作用。[关键词]丝氨酸蛋白酶抑制剂分类临床应用防御

1 丝氨酸蛋白酶抑制剂 免疫系统是由组织,细胞,效应分子构成,并逐渐进化形成用于阻挠病原微生物的侵入攻击,限制它们扩散进入宿主内环境。这其中起到主要作用的是宿主产生的蛋白酶抑制剂,广泛存在于生物体内的蛋白酶抑制剂在机体内与相应的蛋白酶形成一个动态的系统,在生物体系以及一系列的生理过程中起着调控作用[1],是生物体内免疫系统的重要组成部分。它不仅能使侵入体内的蛋白酶失活并且能将其清除,使附着在宿主表面的病原细菌无法附着生存。其中丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体内一些重要生理活动中起关键性的调控作用[2]。 丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor)泛指具有抑制丝氨酸蛋白酶水解活性的一类物质,广泛存在于动物、植物、微生物体中[3]。在动物体中,丝氨酸蛋白酶抑制剂是维持体内环境稳定的重要因素,一旦平衡失调即导致多种疾病,任何影响其活性的因素也会造成严重的病理性疾病。它们最基本的功能是防止不必要的蛋白水解,调节丝氨酸蛋白酶的水解平衡。作为调控物,丝氨酸蛋白酶抑制剂参与机体免疫反应,对生物体内的血液凝固、补体形成、纤溶、蛋白质折叠、细胞迁移、细胞分化、细胞基质重建、激素形成、激素转运、细胞内蛋白水解、血压调节、肿瘤抑制以及病毒或寄生虫致病性的形成等许多重要的生化反应和生理功能有重要的影响[4]。鉴于其重要的生理功能,丝氨酸蛋白酶抑制剂一直倍受研究者的关注,目前已分离得到多种天然丝氨酸蛋白酶抑制剂,同时如何将其更好地应用于食品、医药领域也成为近来研究热点。 1.1 丝氨酸蛋白酶抑制剂分类

跨膜丝氨酸蛋白酶研究进展

跨膜丝氨酸蛋白酶研究进展 郭晓强 (解放军白求恩军医学院生物化学教研室,石家庄050081) 摘要 跨膜丝氨酸蛋白酶(T MPRSSs),又名II型跨膜丝氨酸蛋白酶(TTSPs)是一类定位于细胞膜上具有保守丝氨酸蛋白酶结构域的蛋白家族,哺乳动物中已发现二十多个成员。T MPRSSs基本结构类似,C端蛋白酶结构域在胞外,N端位于胞内,还拥有单跨膜结构域,差异之处在于主干区。T MPRSSs具有多种重要生理功能,功能异常可造成耳聋、癌症、贫血和高血压等多种疾病。本文对T MPRSSs基本特征、结构、生理功能及相关疾病进行综述。 关键词 跨膜丝氨酸蛋白酶;耳聋;癌症;贫血;高血压 中图分类号 Q55 蛋白酶是一类水解蛋白质的酶类,最早于上世纪初在胃液中发现(胃蛋白酶),至今已鉴定多个成员。最早认为蛋白酶主要通过非特异性水解蛋白质参与食物消化,然而一系列研究表明哺乳动物体内还存在一些具有底物选择性的蛋白酶,它们参与更为多样的生理过程,如细胞周期、形态建成、细胞增殖和迁移、排卵、血管生成和细胞凋亡等,功能异常可造成代谢性疾病、神经退行性疾病、心血管疾病、关节炎和癌症等的发生(Puente等.2003)。相对于传统水溶性蛋白酶,新近发现一类特殊蛋白酶———具有单跨膜结构域的丝氨酸蛋白酶,并且C端位于胞外,因此被称为II型跨膜丝氨酸蛋白酶(type II trans me mbrane serine p r oteases,TTSPs)(Hooper等. 2001),又称跨膜丝氨酸蛋白酶(trans me mbrane p r o2 tease serines,T MPRSSs),这些新成员的发现和深入研究使人们对蛋白酶有了全新的认识[1]。 一、T M PRSS结构与基本特征 自1988年发现第一个跨膜丝氨酸蛋白酶T M2 PRSS1(hep sin)(Leytus等.1988)以来,至今已在人、小鼠和大鼠中发现二十多个成员,仅人类就有十几种(表1)。T MPRSS表达具有明显组织特异性,T M2 PRSS6主要在胎儿和成年肝脏中表达(Velasco等. 2002),而T MPRSS10主要存在于心脏(Yan等. 1999),这种表达模式说明不同T MPRSS参与不同生理过程。T MPRSS家族成员在分子量上差别巨大,如人T MPRSS1包含417个氨基酸残基,而T M2 PRSS10由1042个氨基酸构成,两者相差1倍以上,但基本结构却高度相似,均含四部分,从N端到C 端依次为短细胞质结构域、跨膜结构域、主干区和丝氨酸蛋白酶结构域,后两者位于胞外,不同成员区别主要集中于主干区。 根据主干区不同,T MPRSS可被进一步分为四个亚家族:HAT/DESC、hep sin/T MPRSS、matri p tase 和corin[1]。HAT/DESC亚家族包括T MPRSS11d (HAT)和T MPRSS11e(DESC1),它们结构最为简单,主干区仅由单一SE A(sea urchin s per m p r otein, enter opep tidase,agrin)结构域构成[2](图1)。hep2 sin/T MPRSS亚家族包括T MPRSS1~5和T MPRSS13等,是包含种类最多的一个亚家族,主干区包含清道夫受体富含半胱氨酸(scavenger recep t or cys2rich, SRCR)结构域和低密度脂蛋白A类受体(l ow densi2 ty li pop r otein recep t or class A,LDLa)结构域。matri p tase亚家族包括T MPRSS14(matri p tase21)、T MPRSS6(matri p tase22)和T MPRSS7(matri p tase23),其主干区除含有SEA结构域外,还包含2个CUB (comp le ment p r otein subcomponents C1r/C1s,urchin e mbryonic gr owth fact or and bone mor phogenetic p r o2 tein1)结构域及3到4个串联重复LDLa结构域。corin亚家族目前只发现一个成员T MPRSS10(cor2 in),其结构最为复杂,主干区包含8个LDLa结构域,2个frizzled结构域和1个SRCR结构域。 图1 几个典型T MPRSS结构特点[1]

PS(磷脂酰丝氨酸)--脑营养素

PS(磷脂酰丝氨酸) ---脑营养素 一、PS(磷脂酰丝氨酸)的定义 磷脂酰丝氨酸,英文名Phosphatidylserine,简称PS,又称丝氨酸磷脂,二酰甘油酰磷酸丝氨酸,由天然大豆榨油剩余物提取。是细胞膜的活性物质,尤其存在于大脑细胞中。其功能主要是改善神经细胞功能,调节神经脉冲的传导,增进大脑记忆功能。 二、PS(磷脂酰丝氨酸)的性质 是一类普遍存在的磷脂,通常位于细胞膜的内层,磷酯化合物中的磷酸甘油酯类,是细胞膜组分之一,与一系列的膜功能有关。尤其在人体的神经系统,是大脑的细胞膜的重要组成成分之一,同时对大脑的各种功能(尤其是对大脑的记忆力和情绪的稳定)起到重要的调节作用,如它能影响着细胞膜的流动性、通透性,并且能激活多种酶类的代谢和合成。 如人红细胞膜上就有磷脂酰胆碱(占19%)、鞘磷脂(占8%)、磷脂酰乙醇胺(占16%)和磷脂酰丝氨酸(占10%)。并且只有后者在细胞膜上具有净负电荷,有助于膜的不对称性。还能活化已损伤表面凝血酶原。并与磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺在体内可互相转化。由于R1和R2的各不相同而使磷脂酰丝氨酸实际成了一类化合物的总称。 三、PS(磷脂酰丝氨酸)的组成 1942年由Jordi Folch首次提取并定性PS由三部分组成:亲水性的甘油骨架为头部,两个较长烃链的亲油基团为尾部。头部由三个基团组成:丝氨酸残基与磷酸残基结合后与 C-3位甘油的羟基连接;甘油的另外两个羟基分别与脂肪酸成酯后组成尾部。甘油C-2位的脂肪酸与C-1位的脂肪酸相比,碳链一般更长,而且不饱和键更多。磷脂酰丝氨酸(PS)指的是一组化合物,而并非单一成分,这是由于不同来源的原料提取的产品脂乙酰残基变化非常大。PS具有双亲性,即它有亲水性的同时又具有亲油性。其结构决定了它的独特性质,带有负电荷的头部为亲水性(或水溶性),由脂肪酸组成的尾部为亲脂性(或脂溶性)。 四、PS(磷脂酰丝氨酸)的功效 (1)提高大脑机能,改善老年痴呆症:随年龄增长,磷脂酰丝氨酸和其它重要的脑内化学物质会逐渐减少,从而导致记忆力、认知力减弱。补充磷脂酰丝胺酸能增加脑突刺数目、脑细胞膜的流动性及促进脑细胞中葡萄糖代谢,从而使脑细胞更活跃。意大利、斯堪的纳维亚半岛和其他欧洲国家都广泛应用磷脂酰丝氨酸补充剂来治疗衰老引发的痴呆症及老年记忆损失。 (2)帮助修复大脑损伤,磷脂酰丝氨酸是脑部神经的主要成分之一,具有营养和活化脑中各种酶的活性,可延缓神经递质的减少进程,有助于修复、更新大脑受损细胞和清除有害物质。 (3)缓解压力,促进用脑疲劳的恢复、平衡情绪:多项研究表明,磷脂酰丝氨酸能显著降低工作紧张者体内过多的应激激素的水平,减轻压力,缓解脑部疲劳,还可以促进注意力集中、提高警觉性和记忆力,缓解不良情绪。

人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽的基因克隆研究

人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽的基因克隆研究 发表时间:2014-08-01T17:32:41.840Z 来源:《中外健康文摘》2014年第21期供稿作者:杨勇1 林琳2 [导读] 过表达的蛋白酶抑制因子或者人工合成的蛋白酶抑制因子都能有效地阻断蛋白酶活性。 杨勇1 林琳2 (1大连市妇幼保健院检验科辽宁大连 116033;2大连市友谊医院心内科辽宁大连 116001) 【摘要】目的:阐明人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽的基因克隆过程,获得人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽克隆载体,为后续构建Hespintor原核表达载体奠定基础。方法:提取pMD19-T Simple Vector-Hespintor克隆质粒后,应用RT-PCR法扩增Hespintor成熟肽基因片段,对Hespintor成熟肽克隆载体进行构建,及双酶切反应鉴定。结果:琼脂糖凝胶电泳,在约230bp处可见1条特异性条带;蓝斑和白斑斑点数量比对大约为1:1,说明转化效率大约为50%左右;经Bam HⅠ和Hind Ⅲ双酶切鉴定,约230bp处的条带为所克隆的人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽基因片段。结论:重组克隆质粒pMD19-T Simple Vector-Hespintor成熟肽基因构建成 功。 【关键词】人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽基因克隆 RT-PCR 【中图分类号】R39 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2014)21-0078-02 在肿瘤的生长、血管生成以及侵润和转移过程中,除了生长因子与抑癌基因突变、细胞周期改变等尚有机制的参与外,蛋白酶扮演了最终共同途径的角色,并且在功能性或病理性组织重建过程中起到重要的作用[1]。蛋白酶的活性可由多个层次进行调控[1-3],但最直接的方法还是阻断蛋白酶的活性。过表达的蛋白酶抑制因子或者人工合成的蛋白酶抑制因子都能有效地阻断蛋白酶活性,防止细胞外基质的降解[1,2,4]。因此,蛋白酶抑制因子的作用被更多的研究和关注,其中对组织金属蛋白酶抑制因子的研究最为深入,遗憾的是其临床应用效果并不理想[2]。 丝氨酸蛋白酶抑制因子是一类丝氨酸蛋白酶活性调节因子,参与血凝、纤溶、炎症、免疫反应、胚胎发生和个体发育过程。根据它们的序列、二硫键数目和三维结构,至少可以归类为18个非同源蛋白质家族。其中,Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子是较为保守的家族之一,目前已发现10多种,其成员主要包括PSTI、TATI、RECKA、ECRG2以及鸟类的卵清蛋白、顶体蛋白抑制因子、弹性蛋白抑制因子、溶血酶抑制因子等[5-7]。 应用抑制性差减扣除杂交技术研究了HBV DNA聚合酶反式调节靶基因,从肝母细胞瘤细胞系HepG2中筛选得到一未知功能新基因,经RT-PCR验证后,结合生物信息学确定该新基因属于一种新Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子,命名为hespintor[8]。同源分析表明,hespintor 具有与食管癌相关基因2高度同源的serpin基本结构。由于ECRG2具有抑制肿瘤细胞的增值、侵袭及转移等作用,因此提示hespintor可能也具有抑制肿瘤的侵袭与转移的能力,它在细胞中的生物学功能以及抗肿瘤作用有待于深入研究[9-11]。 为了研究hespintor对肿瘤细胞的增值、侵袭和转移的抑制作用,采用基因克隆技术建立hespintor的原核表达体系及纯化方法,观察hespintor重组表达蛋白在体内外是否对肿瘤细胞而行增值具有抑制作用。本文主要是阐明人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽的基因克隆过程,从而获得人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽克隆载体,为后续构建Hespintor原核表达载体奠定基础。 1.材料与方法 1.1材料 1.1.1菌株与质粒 (1)大肠杆菌菌株E.coil DH5α感受态细胞由本大连大学医学院中心实验室提供。 (2)pMD19-T Simple Vector购自宝生物工程(大连)有限公司。 1.1.2引物设计与合成 根据GenBank上公布的人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor基因序列, 通过运DNAman version4.0软件设计引物扩增人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor成熟肽基因。引物F1、F2自行设计交由宝生物工程(大连)有限公司合成。 F1 5'-GGATCCGCCTAAGCCCCG-3' F2 5'-GCGCAAGCTTATCACATTTTCCATATTTTTC-3' 1.1.3 主要试剂 1.1.4主要设备 1.2方法 1.2.1提取pMD19-T Simple Vector-Hespintor克隆质粒 质粒提取试剂盒由TaKaRa公司提供,操作过程严格按照说明书进行,产物置于-40℃保存。 1.2.2 PCR扩增Hespintor成熟肽基因片段 采用2×Taq PCR MasterMix,以pMD19-T Simple Vector-Hespintor克隆质粒为模板, F1/F2为引物,扩增Hespintor基因片段。

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展 梁化亮 (生物与食品工程学院,常熟 215500) Progress on antimicrobial peptide [摘要]蛋白酶抑制剂(PIs)是一类能抑制蛋白酶水解酶的催化活性的蛋白或多肽,广泛存在于生物体,在许多生命活动过程中发挥必不可少的作用。根据活性位点氨基酸种类不同可将蛋白酶抑制剂分为四大类型:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、天冬氨酸蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。其中尤以丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体一些重要生理活动中起关键性的调控作用。其能对蛋白酶活性进行精确调控,包括分子间蛋白降解,转录,细胞周期,细胞侵入,血液凝固,细胞凋亡,纤维蛋白溶解作用,补体激活中所起的作用。 [关键词]丝氨酸蛋白酶抑制剂分类临床应用防御

1 丝氨酸蛋白酶抑制剂 免疫系统是由组织,细胞,效应分子构成,并逐渐进化形成用于阻挠病原微生物的侵入攻击,限制它们扩散进入宿主环境。这其中起到主要作用的是宿主产生的蛋白酶抑制剂,广泛存在于生物体的蛋白酶抑制剂在机体与相应的蛋白酶形成一个动态的系统,在生物体系以及一系列的生理过程中起着调控作用[1],是生物体免疫系统的重要组成部分。它不仅能使侵入体的蛋白酶失活并且能将其清除,使附着在宿主表面的病原细菌无法附着生存。其中丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体一些重要生理活动中起关键性的调控作用[2]。 丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor)泛指具有抑制丝氨酸蛋白酶水解活性的一类物质,广泛存在于动物、植物、微生物体中[3]。在动物体中,丝氨酸蛋白酶抑制剂是维持体环境稳定的重要因素,一旦平衡失调即导致多种疾病,任何影响其活性的因素也会造成严重的病理性疾病。它们最基本的功能是防止不必要的蛋白水解,调节丝氨酸蛋白酶的水解平衡。作为调控物,丝氨酸蛋白酶抑制剂参与机体免疫反应,对生物体的血液凝固、补体形成、纤溶、蛋白质折叠、细胞迁移、细胞分化、细胞基质重建、激素形成、激素转运、细胞蛋白水解、血压调节、肿瘤抑制以及病毒或寄生虫致病性的形成等许多重要的生化反应和生理功能有重要的影响[4]。鉴于其重要的生理功能,丝氨酸蛋白酶抑制剂一直倍受研究者的关注,目前已分离得到多种天然丝氨酸蛋白酶抑制剂,同时如何将其更好地应用于食品、医药领域也成为近来研究热点。 1.1 丝氨酸蛋白酶抑制剂分类 目前,典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂基于其序列、拓扑结构及功能的相似性,至少可分为18个家族[5],如表1-1所示。不同家族抑制剂的空间结构也不同。通常这类抑制剂是β片层或混合了α螺旋和β片层的蛋白质,也可能是α螺旋或富含二硫键的不规则蛋白质。但它们都拥有规的反应活性位点环的构象,从而使这些非相关的蛋白质具有相似的生物学功能[6]。因此典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂最明确最广泛地代表了蛋白质的趋同进化。 1.2 Serpins Serpins是一类分子量较大的丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族,氨基酸残基数为

常见蛋白酶抑制剂

当前位置:生物帮 > 实验技巧 > 生物化学技术 > 正文 蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全 日期:2012-06-13 来源:互联网 标签: 相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展 摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度 恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销! Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统 广州赛诚生物基因表达调控专题 蛋白酶抑制剂 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂 PMSF 1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 2)10mg/ml溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; 4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L); 5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。 EDTA 1)抑制金属蛋白水解酶; 2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;

磷脂酰丝氨酸项目投资建议书

磷脂酰丝氨酸项目 投资建议书 投资建议书参考模板,仅供参考

摘要 该磷脂酰丝氨酸项目计划总投资4340.58万元,其中:固定资产 投资3349.89万元,占项目总投资的77.18%;流动资金990.69万元,占项目总投资的22.82%。 达产年营业收入7518.00万元,总成本费用5896.41万元,税金 及附加82.31万元,利润总额1621.59万元,利税总额1927.57万元,税后净利润1216.19万元,达产年纳税总额711.38万元;达产年投资 利润率37.36%,投资利税率44.41%,投资回报率28.02%,全部投资回收期5.07年,提供就业职位131个。 报告根据我国相关行业市场需求的变化趋势,分析投资项目项目 产品的发展前景,论证项目产品的国内外市场需求并确定项目的目标 市场、价格定位,以此分析市场风险,确定风险防范措施等。 本磷脂酰丝氨酸项目报告所描述的投资预算及财务收益预评估基 于一个动态的环境和对未来预测的不确定性,因此,可能会因时间或 其他因素的变化而导致与未来发生的事实不完全一致。

磷脂酰丝氨酸项目投资建议书目录 第一章磷脂酰丝氨酸项目绪论 第二章磷脂酰丝氨酸项目建设背景及必要性第三章建设规模分析 第四章磷脂酰丝氨酸项目选址科学性分析 第五章总图布置 第六章工程设计总体方案 第七章风险应对说明 第八章职业安全与劳动卫生 第九章进度方案 第十章投资估算与经济效益分析

第一章磷脂酰丝氨酸项目绪论 一、项目名称及承办企业 (一)项目名称 磷脂酰丝氨酸项目 (二)项目承办单位 xxx集团 二、磷脂酰丝氨酸项目选址及用地规模控制指标 (一)磷脂酰丝氨酸项目建设选址 项目选址位于xxx经济开发区,地理位置优越,交通便利,规划电力、给排水、通讯等公用设施条件完备,建设条件良好。 (二)磷脂酰丝氨酸项目用地性质及规模 项目总用地面积13866.93平方米(折合约20.79亩),土地综合利用率100.00%;项目建设遵循“合理和集约用地”的原则,按照磷脂酰丝氨酸行业生产规范和要求进行科学设计、合理布局,符合规划建设要求。 (三)用地控制指标及土建工程

抗心磷脂抗体的研究进展

gens[J].EndocrinoIogy,1996,137:1063. [15]Akingbemi BT,Ge RS,KIinefeIter GR,et aI.A metaboIite of methoxychIor,2,2-bis(p-hydroxyphenyI)-1,1,1- trichIoroethane,reduces testosterone biosynthesis in rat Ieydig ceIIs through suppression of steady state messenger ribonucIeic acid IeveIs of the choIesteroI side-chain cIeavage enzyme[J].Bi- oI Reprod,2000,62:571. [16]Akingbemi BT,Youker RT,Sottas CM,et aI.ModuIation of rat Ieydig ceII steroidogenic function by di(2-ethyIhexyI)pathaIate [J].BioI Reprod,2001,65:1252. [17]Gray LE,Ostby J,Monosson E,et aI.EnvironmentaI antiandro-gens:Iow dose of the fungicide vincIozoIin aIter sexuaI differenti- ation of the maIe rat[J].ToxicoI Ind~eaIth,1999,15:48.[18]Sohoni P,Sumpter JP.SeveraI environmentaI oestrogens are aIso anti-androgens[J].J EndocrinoI,1998,158:327. [19]Vom saaI FS,Timms BG,Montano MM,et aI.Prostate enIarge-ment in mice due to fetaI exposure to Iow doses of estradioI or di- ethyIstiIbestroI and opposite effects at high doses[J].Proc NatI Acad Sci USA,1997,94:2056. [20]NagaI SC,Vom saaI FS,WeIshons WV.DeveIopmentaI effects of estrogenic chemicaIs are predicted by an in vitro assay incor- porating modification of ceII uptake by serum[J].J Steriod Biochem MoI BioI,1999,69:343. [21]Spearow JL,Doemeny P,Sera R,et aI.Genetic variation in susceptibiIity to endocrine disruption by estrogen in mice[J]. Science,1999,285:1259. [22]杜克久,徐晓白.环境雌激素研究进展[J].科学通报,2000,45:2241. ?综述? 抗心磷脂抗体的研究进展 王宇泓综述,杨锡强审校 (重庆医科大学附属儿童医院免疫室400014) 关键词:抗心磷脂抗体;抗磷脂;进展 中图分类号:R593文献标识码:A文章编号:1671-8348(2003)04-0447-04 抗磷脂抗体(antiphosphoIipid antibody,APA)是一种容易引起高凝状态和许多临床表现的自身抗体,分为狼疮抗凝集物(Iupus anticoaguIant,LAC)和抗心磷脂抗体(anticardioIipin anti-body,ACA)。1906年在梅毒病人体内发现第1种APA,其相关抗原被鉴定为心磷脂,于是在此基础上用VDRL实验检测梅毒,后来在大规模筛查梅毒时发现很多系统性红斑狼疮(SLE)病人VDRL实验阳性,但没有梅毒的临床或血清学证据。随着更新实验方法的建立,发现SLE病人中检测到的ACA与LAC、VDRL 实验假阳性结果及血栓形成密切相关。随后的研究发现许多自身免疫性疾病和一些感染性疾病均可检测到APA,于是对该抗体的研究随即在世界范围内得到重视。APA可导致体内不明原因的动静脉血栓形成、习惯性流产、血小板减少等症状,临床把与之相关的一组多系统受累症状称为抗磷脂抗体综合征(an-tiphosphoIipid antibody syndrome,APS)[1]。 LAC分IgG,IgM或IgG/IgM型,结合位于细胞膜的磷脂质,包括磷脂酸、心磷脂、磷脂酰丝氨酸等,其靶抗原为与磷脂结合的凝血酶原,在体外能延长磷脂依赖的凝血试验。部分LAC同时具有抗心磷脂活性,被鉴定为抗!2糖蛋白1(!2GPI)自身抗体。ACA是一组异质抗体,分IgG,IgA,IgM三类,可结合心磷脂、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰肌醇,其靶抗原尚有争议,可为心磷脂,可为血浆中的磷脂结合蛋白如!2GPI等或这些蛋白与磷脂组成的复合物,还可能针对复合物形成后构象改变暴露出的磷脂或 !2GPI上的新的抗原决定簇。根据与临床的关系分为两类,在自身免疫性疾病和APS中的ACA为自身免疫型,其靶抗原为磷脂结合蛋白,可引起凝血机制的紊乱。在梅毒及其它感染性疾病中检测到的为非免疫型ACA,其靶抗原为心磷脂,不依赖于血浆蛋白如!2GPI的存在。以年轻健康的人为对照组,约1%~ 5%可同时检测到ACA和LAC,与APS的临床表现关系不大。!APA引起高凝状态的机制 APA引起高凝状态的机制与结合细胞膜上磷脂后使花生四烯酸释放减少及前列环素(血小板聚集抑制剂)合成降低有关,可通过与膜磷脂的结合改变凝血酶调节蛋白的表达和活性。此外可活化血管内皮细胞,促进粘附分子表达和白细胞与内皮细胞的粘附能力,降低膜联蛋白"(annexin")在滋养层细胞和内皮细胞上的表达,促进高凝状态的产生;还可促进血小板活化和聚集;ACA和!2GPI可抑制活化的蛋白C的活性,使因子"和#灭活减少,促进血栓形成;APA还可降低抗凝血酶-$的活性,可抑制激肽释放酶原的激活,从而抑制纤溶;通过抑制!2GPI的功能增强纤溶酶原抑制因子-1的活性;在抗磷脂抗体综合征中,凝血酶和抗凝血酶复合物形成受损,凝血酶原片段12增加,凝血酶水平增加,使机体易形成血栓[2]。 "ACA检测对临床疾病的意义 ".!ACA与血栓形成很多文献报道ACA是血栓形成的指标之一,一些年轻人出现不明原因的多发性深部静脉栓塞、肾静脉栓塞、视网膜静脉栓塞,实验室检查唯一不正常的就是ACA的升高。有人对健康中年男性做前瞻性的群组研究得出结论:高水平ACA是发生心肌梗塞的独立的危险因素[3]。亦有人报道脑梗塞、心肌梗塞患者ACA阳性率分别为63.3%和66.67%。Finnazzi等对360个未挑选的ACA或LAC阳性病人的研究提示高滴度ACA而不是LAC是预测血栓形成的有意义的指标[4]。"."ACA与反复流产Granger对387例复发性流产病人进行研究,16%可检测到APA。亦有报道在有不明原因反复流产史的其他方面健康的妇女中约12%ACL阳性。而在总的产龄妇女人群中检测到APA的比例不超过2%[5]。可能部分病人存在亚临床性的自身免疫性疾病。研究发现在自身免疫性疾病,某些因感染、药物导致的疾患中,如果ACA阳性,则习惯性流产的发生率较高,约28%左右,且高滴度的IgG ACA可作为预测高危妇女流产发生的一种较为敏感的指标。确切机理尚不清楚,可能与以下几点有关:ACA可使胎盘血管出现多发性梗塞,胎盘血流减少;能抑制胎儿血管内前列腺素产生,引起循环障碍;

蛋白酶抑制剂的研究进展

蛋白酶抑制剂的研究进展 郭川 微生物专业,200326031 摘要:自然界共发现四大类蛋白酶抑制剂:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂和酸性蛋白酶抑制剂,本文就各大类蛋白酶抑制剂的结构特点,活性部位的研究概况及其在各领域应用的原理及进展。 关键词:蛋白酶抑制剂;结构;应用 天然的蛋白酶抑制剂(PI)是对蛋白水解酶有抑制活性的一种小分子蛋白质,由于其分子量较小,所以在生物中普遍存在。它能与蛋白酶的活性部位和变构部位结合,抑制酶的催化活性或阻止酶原转化有活性的酶。在一系列重要的生理、病理过程中:如凝血、纤溶、补体活化、感染、细胞迁移等,PI发挥着关键性的调控作用,是生物体内免疫系统的重要组成部分。从Kunitz等最早分离纯化出一种PI至今,已有多种PI被发现,根据其作用的蛋白酶主要分以下几类:抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等的丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等的巯基蛋白酶抑制剂,抑制胃蛋白酶、组织蛋白酶D等的羧基蛋白酶抑制剂、抑制胶原酶、氨肽酶等的金属蛋白酶抑制剂等。而根据作用于酶的活性基团不同及其氨基酸序列的同源性,可将自然界发现的PI分为四大类:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂(半胱氨酸蛋白酶抑制剂)、金属蛋白酶抑制剂和酸性蛋白酶抑制剂[1]。 1 结构与功能 1.1丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine Protease Inhibitor,Serpin) 丝氨酸蛋白酶抑制剂是一族由古代抑制剂趋异进化5亿年演变而来的结构序列同源的蛋白酶抑制剂。Sepin为单一肽链蛋白质。各种serpin大约有30%的同源序列,疏水区同源性高达70%。血浆中的serpin多被糖基化,糖链经天东酰胺的酰胺基与主链相连。位于抑制性serpin表面、距C端30~40个氨基酸处的环状结构区RSL(reactive site loop)中,存在能被靶酶的底物识别位点识别的氨基酸P1[2];近C端与P1相邻的氨基酸为P1’,依此类推,即肽链结构表示为N端-P15~P9~P1-P1’~P9’~P15’-C端。在对靶酶的抑制中。Serpin 以RSL中的类底物反应活性位点与靶酶形成紧密的不易解离的酶-抑制剂复合物,同时P1-P1’间的反应活性位点断裂。几种perpin氨基酸序列比较发现,serpins各成员的抑制专一性是由P1决定的,且被抑制的酶特异性切点一致。如抗凝血酶,抑制以Arg羧基端为敏感部位的丝氨酸蛋白酶,其中P1为Arg[2]。 1.2巯基蛋白酶抑制剂(Cytsteine Proteinase Inhiitor,CPI) 对于丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPI)已有大量研究,巯基蛋白酶抑制剂(CPI)的研究则相对要晚一些。而动物和微生物来源的CPI已有一些研究,发现它们在结构上具有同源性,Barrett等将CPI统称为胱蛋白超家族,并按分子内二硫键的有无与数量,分子量大小等将此家族分为3个成员(F1、F2、F3)。在3个家族中,大多数F1和F3的CPI中都有Glu53-Val54-Val55-Ala56-Gly57保守序列,其同源序列在其它CPI中也被发现,如F2中的Gln-X-Val-Y-Gly和CHα-ras基因产物中的Gln-Val-Val肽段。人工合成的Glu-Val-Val-Ala-Gly 短肽也显示对木瓜蛋白酶有抑制活性,因此可以认为这一保守区段在抑制活性中起着全部或部分的关键作用[3]。对植物来源的CPI研究的不多,已有报道的有水稻、鳄梨和大豆。水稻巯基蛋白酶抑制剂(Oryzacystatin,OC) 具有102个氨基酸残基,有典型的Glu-Val-Val-Ala-Gly保守序列,应与动物CPI同源进化而来。从OCI没有二硫键来看,它应归为F1成员,但从序列比较看,则更接近F3。对OCIGlu---Gly保守序列进行点突变试验表明,突变使其抑制活性大幅度下降,其中当Glu被Pro替代时则活性全无,由此说明,这一段保守序列在OCI的抑制活性中,同动物CPI一样必不可少。除Glu---Gly保守区域外,OCI序列中其

磷脂酰丝氨酸是什么

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ 宝利美 https://www.360docs.net/doc/283825144.html, DHA+PS (磷脂酰丝氨酸) 磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine ,PS ) 又称丝氨酸磷脂,二酰甘油酰磷酸丝氨酸。 磷酯化合物中的磷酸甘油酯类,是细胞膜组分之一,尤其在人体的神经系统,是大脑的细胞膜的重要组成成分之一,同时对大脑的各种功能(尤其是对大脑的记忆力和情绪的稳定)起到重要的调节作用,如它能影响着细胞膜的流动性、通透性,并且能激活多种酶类的代谢和合成。 如人红细胞膜 上就有磷脂酰胆碱 (占19%)、鞘磷脂 (占8%)、磷脂酰乙 醇胺(占16%)和磷 脂酰丝氨酸(占1 0%)。并且只有后 者在细胞膜上具有 净负电荷,有助于 膜的不对称性。还 能活化已损伤表面凝血酶原。并与磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺在体内可互相转化。由于R1和R2的各不相同而使磷脂酰丝氨酸实际成了一类化合物的总称。 1942年由Jordi Folch 首次提取并定性。PS 由三部分组成:亲水性的甘油骨架为头部,两个较长烃链的亲油基团为尾部。头部由三个基团组成:丝氨酸残基与磷酸残基结合后与C-3位甘油的羟基连接;甘油的另外两个羟基分别与脂肪酸成酯后组成尾部。甘油C-2位的脂肪酸与C-1位的脂肪酸相比,碳链一般更长,而且不饱和键更多。 磷脂酰丝氨酸(PS )指的是一组化合物,而并非单一成分,这是由于不同来源的原料提取的产品脂乙酰残基变化非常大。PS 具有双亲性,即它有亲水性的同时又具有亲油性。其结构决定了它的独特性质,带有负电荷的头部为亲水性(或水溶性),由脂肪酸组成的尾部为亲脂性(或脂溶性)。 它的产品呈白色或淡黄色松散粉末,能乳化于水。不溶于乙醇、甲醇;溶于氯仿、乙醚、石油醚。人工合成物仅溶于氯仿。从牛脑提取物在室温内,又暴露于空气中,则每日变性约0.5%。天然物(L-α-磷脂酰-L-丝氨酸)多由牛(羊)脑或大豆等提取。由于R1和R2差异,实是诸多化合物的混合物。如牛脑制品其R1和R2的大致组成:16:0,约1%;1.8:0,40%~41%;18:1,28%~30%;18:3,约4%;18:4,约1%;20:4,约1%;20:5,约2%;22:6,9%~14%。人工合成产品具有很多异构体,纯化过程复杂。如合成产品1,2-二、二十六烷酰-rac-甘油-3-磷酸-L-丝氨酸,C38H74NO10P ,分子量336.0。 磷脂酰丝氨酸(PS)可由人体利用丝氨酸合成产生, 它可影响脑内化学讯息的传

常见蛋白酶抑制剂

蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全 标签: 相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展 摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度 恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销! Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统 广州赛诚生物基因表达调控专题 蛋白酶抑制剂 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。 常用抑制剂 PMSF 1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 2)10mg/ml溶于异丙醇中; 3)在室温下可保存一年; 4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L); 5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。 EDTA 1)抑制金属蛋白水解酶; 2)0.5mol/L水溶液,pH8~9; 3)溶液在4℃稳定六个月以上;

4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml); 5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。 胃蛋白酶抑制剂(pepst anti n) l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D和凝乳酶; 2)1mg/ml溶于甲醇中; 3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月; 4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L) 5)在水中不溶解。 亮抑蛋白酶肽(leupeptin) 1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血浆酶和组织蛋白酶B; 2)lOmg/ml溶于水; 3)储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月; 4)工作浓度0.5mg/ml。 胰蛋白酶抑制剂(aprotinin) 1)抑制丝氨酸蛋白酶,如血浆酶,血管舒缓素,胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶; 2)lOmg/ml溶于水,pH7~8 3}储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月; 4)工作浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L); 5)避免反复冻融: 6)在pH>12.8时失活。 蛋白酶抑制剂混合使用 35ug/ml PMSF…………………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂 0.3mg/ml EDTA…………………………………金属蛋白酶抑制剂 0.7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)…………酸性蛋白酶抑制剂 0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)……………广谱蛋白酶抑制剂

磷脂酰丝氨酸的主要功能

磷脂酰丝氨酸的主要功能 ?提高大脑机能,集中注意力,改善记忆力 随年龄增长,磷脂酰丝氨酸和其他重要的脑内化学物质会逐渐减少,从而导致记忆力、认知力减弱。补充磷脂酰丝胺酸能增加脑突刺数目、脑细胞膜的流动性及促进脑细胞中葡萄糖代谢,从而使脑细胞更活跃,促进注意力集中、提高警觉性和记忆力。意大利、斯堪的纳维亚半岛和其他欧洲国家都广泛应用磷脂酰丝氨酸补充剂来治疗衰老引发的痴呆症及老年记忆损失。 ?帮助修复大脑损伤 磷脂酰丝氨酸是脑部神经的主要成分之一,具有营养和活化脑中各种酶的活性,可延缓神经递质的减少进程,有助于修复、更新大脑受损细胞和清除有害物质。 缓解压力,促进用脑疲劳的恢复、平衡情绪: 多项研究表明,磷脂酰丝氨酸能显著降低工作紧张者体内过多的应激激素的水平,减轻压力,缓解脑部疲劳;磷脂酰丝氨酸还可作用于大脑内影响心情的神经递质水平,帮助缓解不良情绪(如抑郁、沮丧等)。 科学趣闻:“情绪食品”热销英国 据东方卫视报道,最近几年,英国超市中的“情绪食品”越来越受到消费者的欢迎。这些食品是指含有欧米伽-3脂肪酸、y-氨基丁酸、L-茶氨酸、B族维生素和磷脂酰丝氨酸这几种营养素的食品,它们有利于提高人们的生活质量并增进健康。 专家认为,欧米伽-3脂肪酸能改善儿童的智力发育和行为举止。它可以添加在酸奶、面包、牛奶甚至糖果中。B族维生素在缓解紧张和抑郁情绪方面有功效,绿色蔬菜、肉类、大米和全麦面包都有B族维生素。磷脂酰丝氨酸有助于增强记忆力。而作为目前正在日本销售的平衡心态巧克力的一种成分,y-氨基丁酸能减轻焦虑。L-茶氨酸则存在于绿茶中,它有助于放松情绪和集中注意力。 生活小常识 1. 一般需要多少磷脂酰丝氨酸? 要想改善智力功能,需每天摄入200~500毫克磷脂酰丝氨酸。大多数临床试验每天使用300毫克。

PS的制备纯化方法(磷脂酰丝氨酸)

PS的制备方法 PS 20%、40%、50%、60%,90%(中国/美国) PS的制备方法主要有:1、大豆、动物内脏及大脑提取法;2、PLD催化合成法;3、化学合成法。前两种方法已经应用与工业化生产,化学合成法目前已经取得了重大的进展,但还没有应用于工业化生产。

2.大豆提取法(CN102964379A) 二、酶催化法 酶催化工艺流程

1.磷脂酶的制备 菌种通过各种培养基培养直至发酵,其目的就是得到磷脂酶(PLD),PLD是后面合成反应的催化剂,目前对PLD的利用有两种,如下: 1)利用发酵液通过细胞破碎后让胞内酶释放出来,过滤除掉菌体和一些培 养基等,PLD在滤液中,利用滤液做催化反应,当然此方法的的滤液中含有许多杂质(微生物代谢产物不只是PLD)。 2)(200810053813.1)对发酵液进行相应的处理,如盐析、除盐、离子交 换、凝胶层析等得到较为纯净的PLD,应用于酶合成催化反应。 2.催化反应 1)两相体系:正己烷(甲苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯等)---水体系(JP 2001-186898)PC70%,得50%PS反应收率85.2%,转化率60.8%,反应 成本较高,同时转化率较低。

2)水均质化(JP2002051794、DE102004002053)水的用量是原料的60%~95%, 需要有特殊的均质化设备,已达到理想的均质化水平,保证产品的转化 率。 3)水反应体系(CN200810017261.9):PC用3~10倍的水搅拌分散(因为 PC就是很好的表面活性剂),再加入含有丝氨酸、钙盐和缓冲溶液配制 成的无机体系,在PLD催化下反应。产品收率高,纯度高,其主要的副 产物为磷脂酸 4)均一有机溶剂反应体系(CN102676600):?—戊内脂和2-甲基四氢呋喃 混合溶剂:ps的产率可以达到90%以上 5)临界介质中反应。 说明:个人认为其中的1、3、4更可行,其三者中1、4更适合工业化, 3放大后对设备要求更高。 3.纯化 1)溶剂萃取法:根据产物和杂质在不同溶剂中的溶解度不同,选用合适的 溶剂进行萃取,如正己烷、石油醚、乙醚、氯仿等。 2)薄层色谱分离法:硅胶薄板,洗脱液氯仿—甲醇 3)柱色谱:硅胶和氧化铝,洗脱液氯仿—甲醇 4)高效液相色谱: 说明:适合大规模工业生产的只有1. 三、化学合成法

相关文档
最新文档