巨噬细胞吞噬
巨噬细胞吞噬功能 检测指标
巨噬细胞吞噬功能检测指标
巨噬细胞的吞噬功能是其重要的免疫反应机制之一，用于摄取和消化病原微生物、细胞残骸、死亡细胞等。
以下是常用于检测巨噬细胞吞噬功能的指标：
1. 吞噬指数（Phagocytic index）：用于评估巨噬细胞吞噬能力的定量指标。
它代表了单个巨噬细胞吞噬过的颗粒数量。
2. 吞噬率（Phagocytic rate）：表示巨噬细胞吞噬某种颗粒的能力，通常以百分比形式呈现。
它反映了吞噬事件在总细胞群中的发生率。
3. 吞噬效能（Phagocytic efficiency）：衡量巨噬细胞吞噬过程中的效率，即吞噬活跃度与吞噬细胞总量的关系。
4. 黏附因子（Adhesion molecules）：这些分子介导巨噬细胞与被吞噬物颗粒的结合，对吞噬功能起着重要作用。
常用的黏附因子有CD14、CD11b等。
5. 溶酶体活性（Lysosomal activity）：巨噬细胞内的
溶酶体是吞噬过程中的关键器官，其酶活性可以反映巨噬细胞的消化能力。
这些指标可以通过多种实验方法进行测定，如流式细胞术、显微观察、免疫组化等。
评估巨噬细胞吞噬功能的变化可帮助了解免疫系统活性和疾病状态。
实验八巨噬细胞吞噬现象的观察
实验八巨噬细胞吞噬现象的观察
一、实验原理
巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成, 然后进入血液到达各组织内, 并进一步分化为各种巨噬细胞, 当病原微生物或其它异物侵入机体时, 能招引巨噬细胞, 而巨噬细胞又有趋化性, 能响应招引因子的招引, 产生活跃的变形运动, 主动向病原体和异物移行, 在接触到病原体和异物时, 即伸出伪足, 将之包围并内吞入胞质, 形成吞噬体, 继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合, 形成吞噬性溶酶体, 通过其中水解酶等作用下, 将病原体杀死, 消化分解, 最后将不能消化的残渣排了出细胞外。
台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂, 台盼蓝染料进入细胞, 细胞变蓝, 即为坏死。
如果细胞膜完整, 细胞不为台盼蓝染色, 则为正常细胞或凋亡细胞。
此方法对反映细胞膜的完整性, 区别坏死细胞有一定的帮助。
二、实验步骤
1. 在小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤（含台盼蓝）1ml。
2．24h后注射1%鸡红细胞悬液1ml, 轻按腹部使分散。
3. 20分钟后脱颈骨处死小鼠。
4. 开腹取腹腔液（慎防小鼠血污染）。
5．腹腔液滴于载玻片上, 盖上盖玻片。
6. 显微镜观察吞噬现象。
三、实验结果
四. 结果讨论。
巨噬细胞吞噬功能检测
肿瘤
肿瘤是指机体细胞异常增生形成的肿块，巨噬细胞在肿瘤的发生和发展过程中也起着重要作用。巨噬细胞能够通过吞噬作用 清除受损或变异的细胞，防止肿瘤的形成。
当巨噬细胞吞噬功能异常时，机体对肿瘤细胞的清除能力减弱，容易引起肿瘤的发生和恶化。例如，某些肿瘤细胞能够逃逸 巨噬细胞的吞噬作用，在体内迅速增殖，形成恶性肿瘤。
巨噬细胞能够释放出生长因子等生物 活性物质，促进受损组织的修复和再 生。
参与免疫应答
巨噬细胞是机体免疫系统的重要组成 部分，能够通过吞噬、加工和呈递抗 原，激活淋巴球和抗体反应，参与免 疫应答。
吞噬作用的过程
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识别和接触
巨噬细胞通过识别被吞噬物质 的表面特征，与其接触并形成
吞噬泡。
内陷和形成吞噬泡
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巨噬细胞通过与被吞噬物 质的特异性受体结合，对 其进行吞噬。
免疫吞噬
巨噬细胞通过识别抗原， 对其进行吞噬并加工呈递， 参与免疫应答。
02 巨噬细胞吞噬功能的检测 方法
荧光染色法
总结词
荧光染色法是一种常用的巨噬细胞吞噬功能检测方法，通过荧光物质标记被吞噬的物质，在荧光显微镜下观察荧 光信号的强弱，判断巨噬细胞吞噬功能。
IL-1、IL-6和IL-10等细胞因子可以影响巨噬细胞的吞噬活性。IL-1通常促进吞 噬作用，而IL-6和IL-10则可能抑制吞噬功能。
肿瘤坏死因子（TNF）
TNF-α对巨噬细胞吞噬功能的影响较为复杂，低浓度时可促进吞噬，而高浓度 时则可能抑制。
免疫抑制剂
糖皮质激素
糖皮质激素如地塞米松、泼尼松等 是常见的免疫抑制剂，它们可以抑制 巨噬细胞的吞噬功能，这与其抗炎和 免疫抑制作用有关。
实验五巨噬细胞吞噬现象的观察-文档资料
2、实验前一天，给小白鼠腹腔注射含台盼蓝的淀粉肉
汤的目的是什么？巨噬细胞内有哪几种结构对执行复 杂的吞噬功能最重要？
下次实验：细胞核和线粒体的分级分离
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
思考题
1、在高倍镜下绘出在不同吞噬阶段的巨噬细胞图各一
个（如鸡红细胞附于巨噬细胞表面、部分吞入红细胞、 吞入后形成吞噬体等），示吞噬作用的过程。
巨噬细胞是机体免疫应答的主要细胞之一，对实验动物巨噬 细胞吞噬能力的测定，是其非特异免疫能力的检测的一项重要指 标，目前本实验在病理、免疫、肿瘤学研究领域仍然广泛使用。 由于巨噬细胞含有大量的溶酶体、吞噬体和残余体，因此以台盼 蓝、卡红染料注射到实验动物体内，可以见到巨噬细胞胞质内聚 集很多蓝色、红色颗粒，而其他细胞则不摄取或仅少量摄取染料 颗粒，因此常用该方法鉴别巨噬细胞和其他细胞。
巨噬细胞的生成
单核细胞（上）和巨噬细胞（下）
吞噬作用
吞噬作用
溶酶体的功能
巨噬细胞正在吞噬衰老的红细胞
巨噬，镊子，离心机，注
射器，吸管，玻片，吸水纸。
2.材料 ：小白鼠，1%鸡红细胞悬液（取无污染的鸡血
1ml，放入盛有4ml Alsever溶液瓶中，混匀置4℃冰箱 保存备用，一周内使用。使用前加入0.85%生理盐水 以1500r/min离心10min，洗涤两次，再用生理盐水配 成1%浓度悬液。
片，置显微镜下观察。
6、每人取一张干净载玻片，滴一滴没有注射淀粉肉汤
吞噬现象观察实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。
2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，加深对吞噬作用机制的理解。
二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞，能够识别、吞噬并消化各种抗原物质，如细菌、病毒、细胞碎片等。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，了解吞噬作用的过程和机制。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：清洁级雄性小鼠（体重20-25g）。
2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。
3. 实验仪器：超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 麻醉小鼠，打开腹腔，收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次，制成细胞悬液。
3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，置于37℃水浴中温育30分钟。
4. 取出混合液，用台盼蓝染色液染色，置于显微镜下观察。
5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。
五、实验结果在显微镜下观察到，巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。
具体表现为：1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞，表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。
2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变。
3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。
六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，这与巨噬细胞的免疫功能相一致。
2. 吞噬过程中，巨噬细胞表面出现鸡红细胞，说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。
3. 吞噬后，巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变，说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。
4. 吞噬鸡红细胞过程中，部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化，说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。
七、实验结论通过本实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，加深了对吞噬作用机制的理解。
实验结果表明，巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用，具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。
巨噬细胞拓展知识点
巨噬细胞是人体免疫系统中非常重要的一类细胞，它们在感染和炎症过程中发挥着关键的作用。
巨噬细胞能够吞噬和消化细菌、病毒和其他微生物，同时也参与到组织修复和免疫反应中。
在本文中，我们将逐步介绍巨噬细胞的起源、功能和调控机制。
1. 巨噬细胞的起源巨噬细胞起源于造血干细胞，这些干细胞能够分化成各种不同类型的血液细胞。
在骨髓中，造血干细胞分化为巨噬细胞前体细胞，经过一系列的分化和成熟过程，最终形成功能成熟的巨噬细胞。
2. 巨噬细胞的功能巨噬细胞具有吞噬、消化和抗原递呈等重要功能。
当身体受到感染时，巨噬细胞能够主动迁移到感染部位，并通过识别和吞噬病原体来清除感染。
吞噬作用是巨噬细胞最为突出的功能之一，它通过细胞膜上的受体识别病原体，并将其囊泡化，形成吞噬体。
然后，巨噬细胞将吞噬体与溶酶体融合，释放出消化酶，最终将病原体分解为无害的物质。
除了吞噬作用，巨噬细胞还能够递呈抗原给其他免疫细胞，如T细胞和B细胞。
通过递呈抗原，巨噬细胞能够有效地激活其他免疫细胞，增强免疫反应的效力。
此外，巨噬细胞还参与到组织修复和炎症调节中。
在组织损伤后，巨噬细胞能够清除坏死细胞和组织垃圾，并促进伤口愈合。
在炎症过程中，巨噬细胞能够分泌多种炎症介质，如细胞因子和趋化因子，调节炎症反应的强度和持续时间。
3. 巨噬细胞的调控机制巨噬细胞的活性受到多种因素的调控。
免疫系统中的细胞因子，如干扰素和白细胞介素，能够刺激巨噬细胞的活化和功能增强。
此外，巨噬细胞也能够通过细胞表面上的受体与其他细胞进行相互作用。
例如，病原体和细胞垃圾上的分子模式识别受体能够与巨噬细胞上的受体结合，触发巨噬细胞的吞噬和炎症反应。
在巨噬细胞的调控中，核因子-κB (NF-κB) 通路起着重要的作用。
NF-κB 是一种转录因子，能够促进多种免疫相关基因的转录和表达。
巨噬细胞的活化和功能增强往往与 NF-κB 信号通路的激活密切相关。
此外，巨噬细胞的表型和功能也会受到微环境的影响。
巨噬细胞吞噬作用原理
巨噬细胞吞噬作用原理
巨噬细胞吞噬作用是指巨噬细胞通过将其周围的物质包裹和消化以清除异物和病原体。
巨噬细胞的吞噬作用是免疫系统中的重要防御机制之一。
巨噬细胞的吞噬作用原理包括以下几个步骤：
1. 辨识和粘附：当巨噬细胞接触到异物或病原体时，细胞表面的受体会将其识别为外来物质，并通过粘附结合物质的方式将其固定在细胞表面。
2. 吞噬：吞噬过程分为两个阶段。
首先，巨噬细胞通过细胞膜的膜泡形成将异物或病原体包裹起来，形成吞噬体。
然后，吞噬体与巨噬细胞内部的溶酶体融合，形成吞噬体内含物与溶酶体内消化酶相结合的消化泡。
3. 消化和杀伤：在溶酶体内，消化酶会将异物或病原体内的蛋白质、核酸和其他有机物质降解为小分子。
此外，溶酶体内还含有一些产生活性氧物质的酶，这些物质可以在消化过程中杀死微生物。
吞噬作用的启动与调控与细胞内的信号传导途径密切相关。
巨噬细胞表面的受体能够识别并与外界物质结合，并通过一系列酶促反应和信号传导分子的激活来启动吞噬作用。
这些信号传导途径包括Toll样受体、细胞磷酸酶C、蛋白激酶C等。
总之，巨噬细胞的吞噬作用通过辨识、粘附、吞噬、消化和杀
伤等过程来清除外来物质和病原体。
这是一种重要的免疫防御机制，对维护机体健康起着关键的作用。
巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告
巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告实验目的：观察巨噬细胞的吞噬作用，了解巨噬细胞在防御机体内外侵犯的微生物和异物时的作用机制。
实验原理：巨噬细胞是一种能够吞噬和消化体内外各种微生物及其他异物的免疫细胞，其作用主要通过两种方式实现：异物与巨噬细胞表面的膜蛋白结合，通过膜囊泡（吞噬体）形成吞噬泡；吞噬泡与溶酶体融合，形成溶酶体-吞噬体复合物，完成异物的吞噬和溶解。
实验步骤：1.实验前准备1.1. 预先培养巨噬细胞至对数生长期，并调整细胞浓度为1×10^6 cells/mL；1.2.准备巨噬细胞富集培养液、悬浮液和含有正常培养液的对照组，分别标记为A、B和C组；1.3.准备大肠杆菌溶菌液；1.4.准备各组的显微镜载玻片。
2.差速计数法确定吞噬指数2.1.取3只显微镜载玻片，分别滴加A、B和C组巨噬细胞液，每个组各滴2滴；2.2.于25℃恒温槽中孵育15分钟；2.3.分别在显微镜下用10倍镜进行巨噬细胞数目计数；2.4.计算巨噬细胞吞噬指数，公式如下：吞噬指数=A-B/C-B。
3.吞噬试验3.1.在显微镜盖片上涂抹一层巨噬细胞富集液；3.2.将滴管中的巨噬细胞悬浮液加入巨噬细胞富集液之上，形成巨噬细胞层；3.3.在巨噬细胞层上滴加大肠杆菌溶菌液，并进行密封；3.4.将盖片置于37℃恒温槽中孵育30分钟；3.5.取出巨噬细胞盖片，用0.01%新洁尔灭溶液洗涤；3.6.加入吉姆萨酮染色试剂，显色15分钟后以洁净水洗净；3.7.在显微镜下观察巨噬细胞内的大肠杆菌数量。
4.数据处理4.1.统计吞噬细胞内大肠杆菌数量；4.2.分析吞噬指数和巨噬细胞内大肠杆菌数量的关系。
实验结果：根据差速计数法得出的巨噬细胞吞噬指数为0.67、在吞噬试验中观察到，巨噬细胞内存在许多吉姆萨酮染色的大肠杆菌。
实验讨论：巨噬细胞的吞噬作用是免疫系统中重要的第一道防线，可以吞噬和杀灭多种病原菌和异物。
实验结果表明，巨噬细胞吞噬指数为0.67，说明巨噬细胞具有较强的吞噬能力。
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1、熟悉并理解细胞吞噬活动的生理过程 2、掌握诱导产生小鼠腹腔巨噬细胞的方法
『实验用品』
光学显微镜、2ml注射器、载玻片、盖玻片、解剖器械、1％ 鸡红细胞液、小白鼠、6％淀粉肉汤(含台盼蓝)、生理盐水 试剂的配制： 6％淀粉肉汤：称取牛肉膏0.3g、蛋白胨1.0g、氯化钠O.5g和 台盼蓝(trypan blue)0.3g分别加入到100ml蒸馏水中溶解， 再加入可溶性淀粉6g，混匀后煮沸灭菌，置4℃保存，使用时 温浴溶解。
单核巨噬细胞
『实验内容和方法』 (一)标本制备 1、在实验前一天，每只小鼠腹腔注射6％淀粉肉汤(含4％ 的台盼蓝)lml。 2、实验时每组取一只经上述处理的小鼠，腹腔注射1％的 鸡红细胞悬液lml。然后轻揉小鼠腹部，使鸡红细胞分 散。(腹腔注射时不要刺伤内脏) 3、20分钟后向腹腔注射0.5 ml生理盐水，轻揉小鼠腹部， 使其腹腔液稀释。3分钟后用用颈椎脱臼法处死小鼠。 4、将小鼠置于解剖盘中或卫生纸上，剪开腹腔，把内脏 推向一侧，用吸管或不装针头的注射器吸取腹腔液。 5、每人取一干净载玻片，滴一滴腹腔液，盖上盖玻片， 标本便制备好了。 6、实验绘图。
『实验原理』
高等动物体内存在着具有防疫功能的吞噬细胞 系统，它由粒细胞和单核细胞等白细胞构成，是 机体免疫系统的重要组成部分。巨噬细胞是体内 的一种重要的免疫细胞，具有非特异性吞噬功能， 当机体受到细菌等病原体及其它异物侵入时，巨 噬细胞将向病原体或异物游走，当接触异物时， 伸出伪足将其包围并进行内吞作用，将病原体或 异物吞入细胞，形成吞噬泡，进而初级溶酶体与 吞噬泡发生融合，将异物消化分解掉。本实验将 观察到小鼠巨噬细胞对进入其体内的鸡血红细胞 进行吞噬的情况。
(二)观察
巨噬细胞体积较大，呈圆形或不规则形，表面 具有多个突起 ( 伪足 ) ，胞质中含有数量不等、大 小不一的蓝色颗粒，它们是细胞吞噬含台盼蓝的 淀粉肉汤后形成的吞噬体； 鸡红细胞呈椭圆形，淡黄色，具椭圆形的细胞 核。 在视野中仔细寻找巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不 同阶段。有的鸡红细胞紧贴在巨噬细胞表面；有 的红细胞已部分被吞入；有的巨噬细胞已吞入 1个 或多个红细胞，形成了吞噬泡。还可见有的吞噬 泡体积已缩小并呈圆形，这说明该吞噬泡已与溶 酶体发生融合，泡内的物质正在消化分解。
捉拿方法：
将小白鼠放在鼠笼盖铁网上，用右手持 其尾巴向后拉，小鼠则会尽力向前蹬。 用左手的拇指和食指抓住其头顶部皮肤， 然后用左手小指与手掌之间夹住其尾巴。
腹腔注射
给药方法： 小白鼠的给药途径有经口给药、腹腔内注射、尾静 脉注射、皮下注射、皮内注射和肌肉注射等。我们 常用的是腹腔注射外侧(避开膀胱和血管)用 酒精消毒后，首先将注射针头向头部方向刺入皮下， 进针1～2mm后，再以45°角刺穿腹部肌肉而进入腹 腔(刺穿腹肌时有一落空感)。针头刺入腹腔后切勿 左右摆动，以免损伤肠管或肝脏。注意每次注入的 液体量应为0.1～0.2ml／10克体重。
『思考题』 计算巨噬细胞吞噬率和吞噬指数。
吞噬率%= （吞噬鸡血红细胞的巨噬细胞÷100个巨噬细胞） ×100% 吞噬指数=100个巨噬细胞中吞噬鸡血红细胞的总数÷100个吞 噬鸡血红细胞的巨噬细胞