槐米中芦丁的提取分离与鉴定(1)
槐米中芦丁的提取分离与鉴定(1)剖析44页PPT
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71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
槐米中芦丁的提取分离与鉴定(1)剖析
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6、黄金时代是在我们的前面，而不在 我们的 后面。
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7、心急吃不了热汤圆。
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8、你可以很有个性，但某些时候请收 敛。
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9、只为成功找方法，不为失败找借口 (蹩脚 的工人 总是说 工具不 好)。
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10、只要下定决心克服恐惧，便几乎 能克服 任何恐 惧。因 为，请 记住， 除了在 脑海中 ，恐惧 无处藏 身。-- 戴尔． 卡耐基 。
槐米中芦丁的提取及分离工艺研究
槐米中芦丁的提取及分离工艺研究
槐米是一种常见的食品，其含有丰富的营养物质和活性成分。
其中，芦丁是一种具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物学活性的物质，具有重要的医药、保健和化妆品等应用前景。
本文针对槐米中芦丁的提取和分离工艺进行了研究，探讨最佳的工艺条件，为芦丁的应用提供基础研究。
一、实验材料和设备
实验材料：鲜槐米，浸提剂改性乙酸乙酯，乙醇，氯仿，芦丁标准品。
实验设备：电动磨、超声波清洗器、恒温水浴、滤纸、玻璃过滤器、烤箱、冷冻离心机。
二、实验步骤
（一）槐米粉的制备
取适量鲜槐米，洗净晾干，用电动磨将其磨成细粉，并通过40目筛后存放备用。
（二）芦丁的提取
将10g槐米粉加入100mL改性乙酸乙酯中，超声波清洗器中超声提取1小时，离心5000rpm，取上清液置于烤箱中，温度为60℃，使其蒸发干燥，得到槐米提取物。
将得到的槐米提取物溶于乙醇，放入分液漏斗中，用氯仿进行液液分离，收集上层乙醇相，用玻璃过滤器过滤，静置后收取沉淀，用乙醇重结晶，得到纯的芦丁。
三、结果与分析
本实验通过改性乙酸乙酯的超声波提取技术，能够快速高效地提取槐米中的芦丁，且分离出的芦丁为白色固体，与相应的标准物质具有相同的紫外光谱。
四、结论
本文所述提取芦丁的方法简便、快速，能够得到高纯度的芦丁，为槐米中芦丁的研究和应用提供了可靠的基础数据。
值得一提的是，提取工艺中的超声波清洗器和过滤器是较为常见的实验室设备，因此该方法具有较高的实际可操作性。
槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定
槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定槐米为豆科植物槐（Sophora japonica L ．）的未开放花蕾。
味苦性凉、具清热凉血、止血之功。
常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。
槐米常炒炭应用。
槐米的主要化学成分为芦丁，其含量可达12～16％，其次含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。
芦丁具有Vitp 样作用，可降低毛细血管脆性和调节通透性。
临床上用作毛细血管脆性引起的出血症，常作为高血压症的辅助治疗药。
[目的要求]1．通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2．掌握槲皮素的制备原理及操作。
3．熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用4．通过芦丁的结构检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
[实验原理]芦丁（rutin ）：C 27H 30O 16·3H 2O ，浅黄色针状结晶，mp174～178℃（含三分子水）；188℃（无水物）。
难溶于冷水（1：8000～10000），可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。
槲皮素（quercetin ）：C 15H 10O 7·2H 2O ，黄色结晶，mp313～314℃（2分子结晶水），316℃（无水物）。
能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。
芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。
利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。
芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。
通过纸色谱及紫外光谱进行黄酮及糖的鉴定。
[实验内容]一、芦丁的提取分离及精制方法⑴槐米粗粉（50g）置1000ml烧杯中，加入500ml饱和石灰水，加热，并维持pH8～9煮沸20分钟，趁热用脱脂棉滤过滤液药渣用300ml饱和石灰水煮沸10分钟，维持pH8～9趁热滤过滤液药渣（×）合并70℃下用浓HCl调pH至4 ～5沉淀低温（80℃）干燥，称重。
槐米中芦丁的提取、分离和鉴定
槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定张景清（⼴西科技⼤学⽣物与化学⼯程学院⼴西柳州545006）1.摘要:本实验以槐⽶为原料，采⽤碱提酸沉法从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。
该⽅法提取率⾼达26.3%，对提取的芦丁做了薄板识别及紫外分析，并与标准品做对⽐，结果表明提取的芦丁与标准品的纯度⼤致相等。
2.引⾔芦丁,亦称芸⾹苷,⼴泛存在于植物界中,现已发现的含芦丁的植物有50种以上,其中以槐⽶和荞麦叶中含量最⾼,可作为⼤量提取芦丁的原料。
芦丁属于黄酮类化合物,在⼼脑⾎管疾病的治疗上起到了举⾜轻重的作⽤,具有VP样作⽤。
有助于保持⽑细⾎管正常弹性,同时还有抗炎、抗病毒、抗氧化等作⽤。
其临床效果肯定,副作⽤少,同时也是⼀种植物原料药[1]。
黄酮类化合物的提取⽅法较多主要是依据其溶解性及酸性。
黄酮类化合物的提取⽅法⼀般有：①热⽔提取法②醇提法③碱提酸沉法④系统溶剂提取法本实验碱提酸沉法通过从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体操作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。
3.实验原理槐⽶中含芦丁、槲⽪素、皂苷、⽩桦、酯醇等多种成分。
芦丁是其主要成分，含量为16%-25%。
芦丁属于黄酮类化合物，结构中含有多个酚羟基，呈酸性，苷元为槲⽪素，糖基为芸⾹糖。
芦丁为浅黄⾊细⼩针状结晶，95-97℃脱⽔，熔点314℃，可溶于沸⼄醇、⽆⽔⼄醇、⼄酸⼄酯、丙酮，不溶于⽯油醚和⽔。
芦丁可溶于碱液中，呈黄⾊酸化后⼜析出，故可采⽤碱提酸沉法得到芦丁产品。
然后利⽤在冷⽔中不溶，在热⽔中微溶的溶解度差精制，可获得纯度⾼的微细针状结晶，最后利⽤芦丁、槲⽪素、及糖的性质予以鉴定。
4.实验部分4.1实验药品槐⽶（市售），氧化钙AR（西陇化⼯股份有限公司），盐酸AR（西陇科学有限公司），四硼酸钠AR（⼴东省台⼭市化⼯⼚），甲醇AR（天津市⼤茂化学试剂⼚），三氯甲烷AR（成都市科隆化学品有限公司）,氯仿（分析纯，成都市科龙化⼯试剂⼚），⼄醇（分析纯）4.2实验仪器JJ200电⼦天平（常熟市双杰测试仪器⼚），SHZ-D（III）循环⽔式多⽤真空泵（河南爱博特科技发展有限公司），ZNLC-GS 130*60智能磁⼒搅拌器（河南爱博特科技发展有限公司），薄层⾊谱展开缸，紫外分析仪（上海嘉鹏科技有限公司）4.3实验步骤4.3.1芦丁的提取⽅法⼀：称取槐⽶10.0g，在研钵中稍加研碎后，置于500ml烧杯中，加⼊250ml⽔，加热搅拌下添加⽯灰乳，保持PH=8-8.5。
槐米中芦丁的提取分离与鉴定
2.实验方法
芦丁粗品
0.5g芦丁粗品
1g芦丁粗品
按1:200加水，煮沸溶 解，趁热抽滤 滤液
放置析晶
2%H2SO4 80ml，直火回 流，加热30min，抽滤
芦丁精品
沉淀
滤液（PC）
水洗至中性，95%EtOH重 结晶 滤液
槲皮素精品
芦丁的精制：取0.5g芦丁粗品，置500mL烧杯中，
按1:200加水，加热至沸，使之充分溶解。
趁热过滤，滤渣再加入300mL水，直火加热0.5h。
趁热过滤，合并两次滤液。
放置，析出沉淀，抽滤，干燥得淡黄色芦丁粗品。
二 芦丁的精制和水解
一 实验原理 1.芦丁的精制是根据芦丁在热水中溶解度大，冷水中溶解度小的性 质进行重结晶而获得芦丁粗品。
2.芦丁是黄酮苷类，可进行酸水解，苷键断裂生成苷元槲皮素，葡 萄糖和鼠李糖。
4.熔点测定：芦丁
熔点测定：槲皮素
THANKS
一，芦丁的提取
1.实验原理：芦丁在冷水中的溶解度为1:10000，在热水中的 溶解度为1：200，在冷乙醇中的溶解度为1:650.因此，采用 水煎法提取芦丁经济，效率高。
2.实验方法
槐米20g，研碎
药渣
滤液
300ml，煎煮0.5h，过滤 滤液
芦丁粗品
取20g槐米，研碎。
置于400mL沸水中，直火煎煮1h(需补充蒸发掉的水分)。
（2）因糖的极性差异造成Rf值，与对照品比较鉴定
（3）黄酮类的显色反应特异性较强，故可与聚酰胺产 生氢键缔合，常用于分离和鉴别。
1.糖的纸色谱（圆形滤纸）鉴定 取澄清的水解液20mL，加碳酸钡中和至中性，滤去生成的硫 酸钡沉淀，滤液浓缩至小体积1mL，供纸色谱点样用。
槐米中芦丁的提取分离与鉴定(1)
芦丁
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
用于治疗毛细管脆弱引 起的出血病，并用作高 血压的辅助治疗剂。
芦丁
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
性状：黄色针状结晶（稀乙醇）。 溶解度：冷乙醇中1:300，热乙醇中 1:23。可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、 冰乙酸、吡啶，不溶于水、氯仿、乙 醚、苯和石油醚等。
注意观察现象：未加热时，瓶悬 液逐渐变为澄清液（芦丁易溶于热水）， 继续加热，有鲜黄色沉淀析出（槲皮素不 溶于水）
滤液处理： 取芦丁水解后的滤液15m1，加 氢氧化钡粉 中和至中性（搅拌下进行）滤去白色的硫酸 钡沉淀(漏斗滤纸），滤液在沸水浴上蒸干后， 加1－2 ml乙醇溶解，作为糖的供试液。 （如果加 氢氧化钡加过量后可以加少量的硫 酸回调pH)
天然药物化学实训
项目一 槐米中芦丁的提取分离 与鉴定
实训目的
能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对 槐米中的芦丁进行提取分离 能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进 行水解 能够运用纸色谱、薄层色谱法和化学法鉴别 芦丁、槲皮素和糖类化合物
实训结果
得到两个单体化合物
OH OH
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三 芦丁 和槲皮素的鉴别
糖 的 鉴 定
残渣
水解所得滤液20ml
用饱和Ba(OH)2调PH值至中 性，折叠滤纸过滤
滤液 蒸干，放冷 加2-3ml乙醇溶解 供试品溶液 纸色谱
中药化学 实验 槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备
槲皮素的制备
精品芦丁(0.2g)
放入150ml圆底烧瓶中，加入2%稀硫酸50ml, 空气冷 凝直火加热（电炉上放石棉网）40分钟，放冷抽滤。
沉淀
滤液
水洗至中性抽滤、干燥。 取10ml，加氢氧化钡约1g,调PH7.5,过滤。
沉淀
滤液 水浴浓缩至1~2ml
浓缩液（备检查糖用）
4、芦丁、槲皮素的鉴定
（1）试管定性反应： ①HCI-Mg粉反应
行酸水解得到槲皮素
[实验流程]
1、提取
槐米（20g）
加水煎煮两次，趁热过滤合并煎煮液
药渣
煎煮液
放置4~5h，抽滤
沉淀
自然干燥
粗品芦丁
2、精制
粗品芦丁
加甲醇15~20ml，水浴加热（空气冷凝） 溶解， 至无黄色物，趁热过滤。
沉淀
滤液
放置，待结晶析出，抽滤至干。
沉淀
干燥
精品芦丁
注意：
1、甲醇量可以适当增加。 2、注意控制回流温度。 3、回流时间以芦丁完全溶解为准。
取样品的乙醇溶液1ml加少许镁粉，再加浓 HCI 1~2滴，观察颜色。 ②FeCl3反应
取样品的乙醇溶液1ml加1%的FeCl3乙醇溶 液2~3滴，观察颜色。 ③中性醋酸铅反应
取样品的乙醇溶液1ml加5%的中性醋酸铅溶 液1~2滴，观察现象。
④α-萘酚、浓H2SO4反应 取样品的乙醇溶液1ml加α-萘酚试液1~ 2滴
实验
槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备
[实验目的]
1.掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷、 苷元的结构研究的一般方法；
2.熟悉根光谱的测定方法。
实验原理
➢提取原理：芦丁在冷热水中的溶解度差异； ➢纯化原理：芦丁在冷热甲醇中的溶解度差异 ➢制备原理：槲皮素为芦丁的苷元，因此可进
槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定
槐米中芦丁的提取与分离摘要：利用芦丁在沸水中溶解度大的性质将其在沸水中进行提取，而芦丁与其他水溶性化合物可借助聚酰胺柱色谱予以分离。
关键词：槐花米；芦丁；槲皮素；提取；分离；鉴定1 引言芦丁（Rutin ）又称芸香苷，广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。
尤以槐花米（为植物Sophora japonica L 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高(含量可达12-16%)，可作为大量提取芦丁的原料。
芦丁是由槲皮素（Quercetin ）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose ）〔葡萄糖（Glucose ）与鼠李糖（Rhamnose ）组成的双糖〕脱水形成的苷。
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有3分子结晶水，熔点为174~178℃，不含水的芦丁熔点为188℃。
含2分子结晶，熔点为313~314℃。
水溶解度：冷水中为1:10000；沸水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。
微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
不含结晶水的槲皮素熔点为316℃，它们的结构式如下：OHOHO O OHO OOH OHOH OHOH CH 2CH 3OH O O OH芦丁（Rutin ）O OHO OH OHOH槲皮素（Quercetin ）芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液，酸化后又可析出，因此，本实验采用碱提取酸沉淀法提取芦丁。
2 实验内容与步骤2.1仪器与试剂仪器：紫外灯 蒸馏装置一套 250mL 烧杯（一只） 500mL 烧杯（两只） 100mL 三角瓶（两只） 纱布 色谱柱（Ф1.5×30cm ） 玻璃板 硅胶G 板试剂：甲醇 70%工业乙醇 槐米 层析用聚酰胺（60-100目） 芦丁标准样2.2 芦丁的提取将粉碎好的槐米10g 倒入500mL 烧杯中，加沸水150mL ，煮沸1h(在煮沸的过程中可补加水），趁热用纱布过滤，残渣加入100mL 水，再煮沸30分钟，共进行两次，将两次滤液混合，放置，冷却，即有大量黄色沉淀生成，抽滤。
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需要的仪器设备
每组需要抽滤设备（需要1000ml的抽滤瓶）、 滤纸、 玻璃棒、1000ml烧杯、加热回流设 备（电热套、冷凝管、烧瓶）、小烧杯、浓 硫酸、浓盐酸
芦丁的提取分离与鉴定
提 取 与 精 制
第一次实验所得滤液 抽滤，少量水洗涤沉淀至中性 滤液 沉淀（粗品芦丁）
重结晶 取粗制芦丁3g,加蒸馏水 400ml,煮沸10分钟后，趁 热抽滤 滤液
天然药物化学实训
项目一 槐米中芦丁的提取分离 与鉴定
实训目的
能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对 槐米中的芦丁进行提取分离 能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进 行水解 能够运用纸色谱、薄层色谱法和化学法鉴别 芦丁、槲皮素和糖类化合物
实训结果
得到两个单体化合物
OH OH
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
新华一号滤纸 标本缸
倒入缸内约30毫升的展开剂
芦丁的提取分离与鉴定
糖 的 纸 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 色 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点) 谱 鉴 定 试验记录： 粘附纸色谱，并计
算斑点的Ｒf值 当溶剂走到溶剂前沿6－ 8cm即可，约需40分钟
１ ２ ３
标准品：葡萄糖、鼠李糖 展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液 漏斗中，平衡后取上层备用。
子项目三
水解芦丁得到槲皮素
思考问题
1、芦丁是？苷（ N- 苷 、O-苷、S-苷or C苷? 2、苷键的裂解可以用什么方法 ？最常用的方 法是？ 影响酸水解速度的因素有哪些？ 2、芦丁水解后的产物是什么？ 3、如何进行苷类酸水解操作，如何分离得到 苷元成分？
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三
水解芦丁得到槲皮素
实验记录
颜色 样品 芦丁 槲皮素
直接观察 日光 UV
AlCl3 喷雾 日光 UV
R f值
注意：硅胶预制板，用之前105度烘半个小 时。
实验规则
1、预习实验内容：要明确实验目的与要求。对处方 中药物性质、配制原理、操作步骤、操作关键等， 做到“心中有数”，并合理安排实验时间。 2、遵守实验纪律：应保持实验室内肃静，不得无故 迟到或早退，不得擅离实验操作岗位，甚至高声 谈笑。如发生差错事故或异常现象，应随时报告 指导教师，查明原因，及时解释。注意安全，严 防火灾、烧伤或中毒事故发生。
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
性能：苦，性微寒。 功效：凉血止血、清肝泻火 应用：用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、 衄血、肝热目赤、头痛眩晕等。 主要含有芦丁、槲皮素，还含少量皂苷类及多 糖、粘液质等。近代研究表明槐米含芦丁可高 达23.5%，槐花开放后降至13.0%。
芦丁的提取分离与鉴定
需要配制的试剂: 1 苯胺—邻苯二甲酸试剂配法：苯胺0.93g和邻苯二甲酸 1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中。 （我们实验需要配 100ml）(用分液漏斗中加入50ml水和 100ml正丁醇震摇后 静置取上层即为水饱和的正丁醇） 2 10%α-萘酚乙醇溶液 25ml 3 2%三氯化铁乙醇溶液 20ml 4、展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）（我们实验需要 配300ml 5、5组配一瓶配200ml正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液 漏斗中，平衡后取上层备用 配两瓶 6、 2%AlCl3乙醇溶液 100ml 7、硅胶预制板，用之前105度烘半个小时。
实验规则
5、保持室内整洁：学生进入实验室必须穿戴工作衣 帽。实验完毕应将本组实验台、实验架等整理洁净方 可离开。实验小组轮流值日，主要负责实验室内、走 廊地面、门窗的卫生整洁，以及废物缸的清倒工作， 将水、电门窗关好，经指导教师验收后再离开实验室。 6、写好实验报告：实验报告是考查学生分析总结实 验资料能力和写作能力的重要方面，亦是评定实验成 绩的主要依据
试验记录
试剂
盐酸-镁粉反 应 Molish反应 FeCl3反应 试验现象 芦丁 槲皮素
结论及解释
芦丁的提取分离与鉴定
定 性 反 应
黄酮母核 盐酸-镁粉反应 将样品溶液1ml，先滴加1－2滴浓盐酸再加入少许 镁粉振摇，1-2min内，观察颜色变化。（注意顺序）
Molish反应
苷类
将样品溶液1ml，加入与样品等体积10%α萘酚溶液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加适量浓 硫酸（约2ml），至分层注意观察两界面产生的 变化。（不要摇动）
实验规则
3、杜绝差错事故：称取药品时，要在拿取、称量 和放回时进行核对。称量完毕应盖好瓶塞，放回原 处。实验成品应写明名称、规格、配制者、配制时 间及班组号，交实验指导教师验收。
实验规则
4、爱护仪器药品：实验仪器、药品应妥善保管、存 放和使用。如有破损缺少，必须立即报告实验指导 教师，并填写仪器药品报损表，然后到准备室补领。 实验小组合用的仪器药品，每次实验前应检查核对 后再取用。实验指导教师对破损缺少的仪器药品应 查明原因，按本院校对仪器药品破损处理办法提出 处理意见。 打破玻璃器皿和试 备要赔偿！
精制芦丁1.5g 加入2%硫酸或者 (1mol/lHCL)100ml，加热回 流30min(从有液滴滴下开始 计时），放冷静置，抽滤
沉淀 粗品槲皮素
注意观察整个过程的现 象！( 溶液澄明度和颜色 的变化)为什么出现这种 情况？
滤液
作糖的检识用
水解
抽滤
洗涤沉淀
干燥
称重
具体做法：芦丁水解方法： 取精制芦丁1.5g，研细后 置于250ml圆底烧瓶中，加入2％硫酸或 （1mol/lHCL)100m1，加热回流 30min，瓶中浑浊 液逐渐变为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀。 放冷沉淀，抽滤，保存滤液（应为澄清无色液体）， 作为糖的检查，沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用 蒸馏水洗至中性，抽干水分，晾干，称量。得粗制槲 皮素，再用乙醇重结晶得精制槲皮素。 1mol/lHCL配法:取约90毫升浓盐酸定容至1000毫升
注意观察现象：未加热时，瓶内为混悬
液（芦丁不溶于冷水），加热后，混悬 液逐渐变为澄清液（芦丁易溶于热水）， 继续加热，有鲜黄色沉淀析出（槲皮素不 溶于水）
滤液处理： 取芦丁水解后的滤液15m1，加 氢氧化钡粉 中和至中性（搅拌下进行）滤去白色的硫酸 钡沉淀(漏斗滤纸），滤液在沸水浴上蒸干后， 加1－2 ml乙醇溶解，作为糖的供试液。 （如果加 氢氧化钡加过量后可以加少量的硫 酸回调pH)
所需的试剂和设备
1、样品：槐花米 试剂：硼砂、CaO、浓盐酸 仪器：每一组需要： 电炉、1000ml烧杯、 小烧杯、 500ml烧杯、玻璃棒、pH试纸、玻 璃漏斗、滴管 公共需要：棉花、天平
芦丁的提取分离与鉴定
子项目一 槐米中芦丁的提取
提 取
槐花米 （25g） 加0.4%硼砂沸 水200ml
槲皮素
子项目一 槐米中芦丁的提取
思考问题
1、加入硼砂目的是什么？ 2、为什么要加入石灰水，在芦丁的提取中能 起到什么作用？ 3、酸沉pH值为什么不宜过低？
那个天然产物的实验，要算下得率,粗芦丁重 量/槐米的重量； 精制芦丁的重量/粗芦丁的 重量；并且计算下，每克芦丁分子中槲皮素 和糖所占的百分比。
芦丁的提取分离与鉴定
定 芦丁供试品溶液：取精制芦丁约5mg，用5ml甲 性 醇（无水乙醇）使溶液，备用。 反 应 槲皮素供试品溶液：取粗槲皮素约5mg，用5ml
甲醇（无水乙醇）使溶液，备用。
其余试剂：镁粉、浓盐酸、10%α -萘酚溶液、浓硫酸、2% 三氯化铁乙醇溶液 准备3支试管（一个空白管， 样品用蒸馏水代替，一个是芦丁、一个是槲皮素）
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三 芦丁 和槲皮素的鉴别
糖 的 鉴 定
残渣
水解所得滤液20ml
用饱和Ba(OH)2调PH值至中 性，折叠滤纸过滤
滤液 蒸干，放冷 加2-3ml乙醇溶解 供试品溶液 纸色谱
芦丁的提取分离与鉴定
糖 的 纸 色 谱 鉴 定
标准品：葡萄糖、鼠李糖
展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上层液 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点)
所需要的药品和设备：氢氧化钡、葡萄糖、鼠李糖、 正丁醇、乙酸、苯胺、邻苯二甲酸盐、无水乙醇、甲 醇、乙酸乙酯、甲酸、AlCl3、镁粉、浓盐酸、 α-萘酚溶液、浓硫酸、三氯化铁、紫外灯、新 华1号滤纸、点样毛细管、水浴锅、硅胶G预制板
11块、分液漏斗 喷雾器几个
每组需要：1个蒸发皿、玻璃漏斗、玻璃棒、10ml试 管8支、2个小烧杯、胶头滴管
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
槲皮素
芦丁
项目一
芦丁的提取分离与鉴定
子项目一 槐米中芦丁的提取
子项目二 槐米中芦丁的精制
子项目三 水解芦丁得到槲皮素
子项目四 芦丁和槲皮素的鉴别
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
槐花 槐米
槐花为豆科植物槐Sophora japonica L．的干燥 花及花蕾
残渣
冷却（可以用流动水快速冷却）静置 精制芦丁（备用） 抽滤， 干燥、称重
食品091班得到的精制芦丁大约（粗芦丁4克 精制后大约？）
减压抽滤装置
减压过滤操作 减压过滤也就是抽滤,利用抽气泵使抽滤瓶中的 压强降低,达到固液分离的目的. 装置:布式漏斗,抽滤瓶,胶管,抽气泵,滤纸 过程: 1、安装仪器,检查布式漏斗与抽滤瓶之间连接是否 紧密，抽气泵连接口是否漏气； 2、修剪滤纸，使其略小于布式漏斗，但要把所有 的孔都覆盖住，并滴加蒸馏水使滤纸与漏斗连接紧密； 3、将固液混合物转移到滤纸上； 4、打开抽气泵开关，开始抽滤。 5、过滤完之后，先抽掉抽滤瓶接管，后关抽气泵。 （防止倒吸）