常用溶液配制
溶液配置
实验常用试剂配置1.铜标准贮备溶液：称取1.000±0.005g金属铜(纯度99.9%)置于150ml烧杯中，加入20ml1+1硝酸，加溶解后，加入10ml1-1硫酸并加热至冒白烟，冷却后，加水溶解并转入1L容量瓶中，用水稀释至标缓。
此溶液每毫升含1.00mg铜。
2.铜标准溶液：吸取5.00ml铜标准贮备溶液于1L容量瓶中，用水稀至标线。
此溶液每毫升含5.0μg铜。
3.二乙基二硫代氨基甲酸钠0.2%(m/v)溶液：称取0.2克二乙基二硫代氨基甲酸钠三水合物(C5H10NS2Na •3H2O，或称铜试剂cupral)溶于水中并稀释至100ml，用棕色玻璃瓶贮存，放于暗处可用两星期。
4.EDTA-柠檬酸铵-氨性溶液：取12g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na-EDTA•2H2O)、2.5g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7]，加入100ml水和200ml浓氨水中溶解，用水稀释至1L，加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液，用四氯化碳萃取提纯。
4.1EDTA-柠檬酸铵溶液：将5g乙二胺四乙酸二钠二水合物(Na2-EDTA•2H2O)20g柠檬酸铵[(NH4)3•C6H5O7]溶于水中并稀释至100ml，加入4滴甲酚红指示液，用1+1氨水调至PH=8～8.5(由黄色变为浅紫色)，加入少量0.2%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液，用四氯化碳萃取提纯。
5.氯化铵-氢氧化铵缓冲溶液将70g氯化铵(NH4Cl)溶于适量水中，加入570ml浓氨水，用水稀释至1L。
6.甲酚红指示液0.4g/L：称取0.02克甲酚红(C21H18O5S)溶于50ml195%(v/v)乙醇中。
7.碘溶液C=0.05mol／L：称12.7g碘片，加到含有25g碘化钾+少量水中，研磨溶解后用水稀释至1000mL。
8.丁二酮肟[(CH3)2C2(NOH)2]溶液5g／L：称取0.5g丁二酮肟溶解于50mL浓氨水中，用水稀释至100mL9.丁二酮肟乙醇溶液，10g／L：称取1g丁二酮肟，溶解于100mL乙醇(3.4)中。
实验室常用溶液配制
实验室常用溶液配制实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解，抽滤后1mL分装到离心管中，于-30℃冻存X-gal：贮存浓度为20mg/mL称取20mg X-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中，-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存，不需要过滤除菌IPTG：贮存浓度为0.84mol/L称取2g IPTG溶于8mL超纯水中，用水定容到10mL，用0.22um 的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2：贮存浓度为1mol/L称取1.11g CaCl （或者CaCl:2H2O 1.4698g）溶于8mL超纯水中，定容到10mL，用0,22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中，并于-30℃保存LB培养基：胰蛋白胨（Tyrtone）10g/L酵母提取物（Yeast Extraction）5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6，然后高压蒸汽灭菌，注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶：将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/L Tris-Cl（PH7.5）、15mmol/L NaCl 中，配成10mg/mL 的浓度，于100℃加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20℃Bradford 贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG 250 0.35g室温下可储存，一般4℃Bradford 工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO450 mM 6.81 gEDTA 1 mM 0.292 g (EDTA-2Na-2H2O) 0.372 g定容至1 L，调pH至8.0包涵体洗涤液KCl 300 mM 22.37 gKH2PO4 50 mM 6.81 gEDTA 5 mM 1.46 g (EDTA-2Na-2H2O) 1.86 g尿素 2 M 120 gTriton X-100 0.5% 5 ml脱氧胆酸钠盐0.1% 1 g定容到1 L 调pH至8.0匀浆缓冲液（pH=7.5）成分：20mM HEPES 0.002mol=0.476g 加入0.952g1.5mM MgCl20.00015mol=0.0036g 加入0.0072g 0.2mM EDTA 0.00002mol=0.00584g 加入0.01168g 0.1M NaCl 0.01mol=0. 58g 加入1.16g0.5mM 钒酸钠0.00005mol=0.0092g 加入0.0184g 加100mL水进行溶解，NaOH调pH至7.50.2mM DTT 总体积500μL加入0.1μL0.4mM PMSF 总体积500μL加入20μL1%SDS 加入50μL 10% SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入，SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液，溶于0.01M乙酸钠（pH=5.2）中，过滤除菌PMSF配成10mM母液，溶于异丙醇10*PBSNaCl 80.0669 gKCl 2.0129 gNa2HPO414.1960 gKH2PO4 2.4496 g水定容至1L，使用时稀释10倍，用NaOH调pH至7.4Start with 800 mL of distilled water to dissolve all salts. Adjust the pH to 7.4 with HCl. Add distilled water to a total volume of 1 liter. The resultant 1x PBS should have a final concentration of 10 mM PO43?, 137 mM NaCl, and 2.7 mM KClIf used in cell culturing, the solution can be dispensed into aliquots and sterilized by autoclaving (20 min, 121°C, liquid cycle). Sterilization may not be necessary depending on its use. PBS can be stored at room temperature or in the fridge. However, concentrated stock solutions may precipitate when cooled and should bekept at room temperature until precipitate has completely dissolved before use.转膜缓冲液（含有SDS）1L剂量甘氨酸 2.9gTris 5.8gSDS 0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris 碱(Mr 121.14) 30.2g甘氨酸(Mr 75.07) 188gSDS (Mr 288.38) 10 g加水至1L用时稀释10倍即可30％丙稀酰胺1L 剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中，加热至37℃溶解，补足体积至1L，过滤，且pH不大于7.01 M Tris-Cl（pH6.8）60.55 g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml1.5 M Tris-Cl（pH8.8）90.83g Tris 碱溶解于400ml 蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml。
溶液的配制
1、硝酸15%
量取15ml浓硝酸稀释100ml刻度混匀
2、硫酸（1+3）
量取100ml浓硫酸缓慢注入300ml水中
3、硝酸（1+1）
一份硝酸和一分水混匀
4、钼酸铵20%
称固体钼酸铵20克溶解于水中稀释至100ml
5、氢氧化钾溶液20%
称固体氢氧化钾20克溶解于水中稀释至100ml
6、三乙醇胺（1+2）
一份三乙醇胺2分水混匀
7、酒石酸5%ml
称取酒石酸5克，以水溶解并稀释至100ml
8、钼酸铵5%
称取钼酸铵5克，以水溶解过滤并稀释至100ml
9、酒石酸钾钠5%
称取酒石酸钾钠5克，以水溶解并稀释至100ml
10、铜试剂1%
称取二乙基二硫代氨基甲酸钠（铜试剂）1克，以水溶解并稀释至100ml
11、氯化铵10%
称固体氯化铵10克，以水溶解并稀释至100ml
12、洗液
浓硝酸65ml、水5ml、固体K2Cr2O72克配一份
13、氢氧化钠标准溶液0.1424mol/L
配制，称取氢氧化钠5.696g于500ml塑料烧杯中加水300ml，于冷水盆中不断搅拌使之溶解，加入氢氧化钡（10%）1 ml用水稀释至1000 ml，移入塑料壶中，摇匀，静止，待碳酸钡沉淀下沉后，虹吸上层清液于另一塑料瓶中。
标定滴定度后使用
14、EDTA标准溶液0.01mol/L
配制，称取EDTA3.7226g置于300ml烧杯中，加水适量溶解，移入1000ml容量瓶中，冲刻度摇匀。
15、硝酸钾+乙醇洗液
10g硝酸钾加90ml水溶解后，加无水乙醇10ml摇匀备用
16、混合指示剂
中性红0.05%+亚甲基蓝0.05%（乙醇溶液）。
常用的45种缓冲溶液的配制
常用的45种缓冲溶液的配制1.乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L 氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。
2.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。
3.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。
4.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。
5.乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。
6.巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。
7.巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。
8.巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。
9.甲酸钠缓冲液(pH3.3)取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。
10.邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
溶液配制方法
溶液配制方法一、指示剂配制1.0.3%二甲酚橙指示剂：称取0.15g二甲酚橙，加5ml无水乙醇，用水稀释至50ml。
2.5g/L液体铬黑T：称取0.5g铬黑T和2.0g氯化羟胺，溶于乙醇，用乙醇稀释至100ml，此使用前配备。
贮存于100ml棕色试剂瓶中。
3.固体铬黑T：称取1.0g铬黑T和100g氯化钠研磨混合均匀，贮存于100ml棕色广口瓶中备用。
4.1%紫脲酸胺：1g紫脲酸胺与100g固体氯化钠混合，研磨，烘干。
5.1g/L酚酞指示剂：称取0.1g酚酞指示剂，加乙醇100ml溶解混合。
6.10 g/L酚酞指示剂：称取1.0 g酚酞指示剂，加乙醇100ml溶解混合。
7.甲基红—溴甲酚绿指示剂：1份2g/L甲基红乙醇溶液与三份1g/L溴甲酚绿乙醇溶液混合。
8.甲基红-亚甲基蓝指示剂：一份甲基红乙醇溶液（1g/L）与两份亚甲基蓝乙醇溶液（1g/L）混合。
9.品红试剂（0.15%）：称取0.15g酸性品红，加75ml水，加热到品红溶解，冷却到室温，加4ml盐酸搅拌。
再加15ml10%亚硫酸钠溶液搅匀，放置过夜，加活性炭过滤于100ml容量瓶中。
二、标准溶液的配制1．钴标准溶液：称取3.000g金属钴（99.98%）置于250ml烧杯中，加少量蒸馏水润湿，盖上表面皿，缓慢加入20ml硝酸，加热溶解完全后，洗表面皿及烧杯壁于烧杯中，移入1000ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
此溶液1ml含钴3.000mg。
2．铁氰化钾标准溶液：C﹝K3Fe(CN)6﹞=0.03mol/L,称取9.9g铁氰化钾溶于水中，并稀释至1000ml，摇匀，贮存于棕色瓶中。
3．硫酸钴标准溶液：C（CoSO4）=0.15mol/L，称取4.2g硫酸钴（CoSO4·7H2O）溶于水中，并稀释至1000ml，摇匀，此溶液1ml含钴大约0.9mg。
4．锂标准贮存溶液：称取 5.3228g光谱纯级碳酸锂（预先于110℃、烘2个小时置于干燥器中冷却）置于250ml烧杯中，加少量水润湿，盖上表面皿，沿杯壁缓慢加入15ml盐酸，待溶解后转入1000ml容量瓶中，用蒸馏水定容。
化学试剂配制-常用标准溶液的配制
常用标准溶液的配制1、常用标准滴定溶液的制备氢氧化钠标准溶液的配制（1）配制浓度为c(NaOH)=1mol/L、c(NaOH)=0.5mol/L、c(NaOH)=0.1mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液：称取100g氢氧化钠，溶于100mL水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮，用塑料管虹吸下述规定体积的上层清液，注入1000mL无二氧化碳的水中，摇匀。
c(NaOH)（mol/L）氢氧化钠饱和溶液（mL）1 520.5 260.1 5（2）标定：称取下述规定量的于105~110℃烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾，称准至0.0001g，溶于下述规定体积的无二氧化碳的水中，加2滴酚酞指示剂，用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，同时做空白实验。
c(NaOH) 邻苯二甲酸氢钾无二氧化碳的水1 6 800.5 3 800.1 0.6 50（3）计算：氢氧化钠标准溶液的浓度按下式计算：c(NaOH)＝m/（V1－V0）×0.2042式中：c(NaOH)－－氢氧化钠标准溶液之物质的量浓度m－－邻苯二甲酸氢钾的质量V1－－氢氧化钠溶液的用量V0－－空白试验氢氧化钠溶液的用量0.2042－－与1.00mL氢氧化钠标准溶液相当的以克表示的邻苯二甲酸氢钾的质量。
（4）比较法：量取30.00~35.00mL下述规定浓度的盐酸标准溶液，加50mL无二氧化碳的水及2滴酚酞指示剂，用配制好的氢氧化钠溶液滴定，近终点时加热至80℃，继续滴定至溶液呈粉红色。
c(NaOH) c(HCL)1 10.5 0.50.1 0.1氢氧化钠标准溶液的浓度按下式计算：c(NaOH)＝V1c1/V式中：V1－－盐酸标准溶液的用量c1－－盐酸浓度V－－氢氧化钠溶液的用量。
HCL标准溶液的配制（1）配制浓度为c（HCL）=1、0.5、0.1mol/L的盐酸标准滴定溶液：量取下述规定体积的盐酸，注入1000mL水中，摇匀。
c（HCL）/（mol/L）盐酸/mL1 900.5 450.1 9（2）标定：称取下述规定量的于270~300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠，称准至0.0001g，溶于50mL水中，加10滴溴甲酚绿－甲基红混合指示剂，用配制好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色，同时做空白试验。
常用溶液的配置
常用溶液的配置试剂配制（1）液体LB培养基（-）1000ml蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g去离子水溶解并定容至1000ml高压灭菌，4℃保存。
（2）氨苄青霉素溶液（100mg/ml）10ml氨苄青霉素1g去离子水溶解并定容至10ml过滤除菌，-20℃分装保存。
（3）卡那霉素溶液（100mg/ml）10ml卡那霉素1g去离子水溶解并定容至10ml过滤除菌，-20℃分装保存。
（4）固体LB培养基（-）1000ml蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g琼脂糖粉15g去离子水溶解并定容至1000ml高压灭菌后铺平板（6cm培养皿），冷却后4℃保存。
（5）含抗生素LB 固体培养基1000ml固体LB培养基溶液1000ml高压灭菌, 当培养基降温至50℃左右，加入终浓度为100μg/ml的氨苄青霉素或100μg/ml 卡那霉素，并铺平板（6cm培养皿），冷却后，4℃保存。
（6）0.1M CaCl2溶液—制备感受态1000ml氯化钙11.099g去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。
（7）0.1M MgCl2溶液---制备感受态1000ml氯化镁9.521g去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。
（8）0.1M CaCl2-15%甘油溶液----制备感受态1000ml氯化钙9.521g50%甘油300ml去离子水溶解，定容至1000ml高压灭菌后4℃保存。
（9）50％甘油溶液100ml甘油50ml去离子水50ml（10）0.5M EDTA溶液(PH=8.0) 500mlEDTA 93.05g去离子水溶解，NaOH调PH至8.0，定容至500ml。
（11）10%SDS溶液100mlSDS 10g去离子水溶解，定容至100ml。
（12）5M乙酸钾溶液100ml5M乙酸钾49.07g去离子水溶解，定容至100ml，室温保存。
（13）1MTris-HCl溶液（pH=8.0）100mlTris碱12.1g去离子水溶解，定容至100ml，浓盐酸调pH值至8.0，室温保存。
常用溶液的配制
常用溶液的配制一、常规溶液(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液Na2HPO49.465g蒸馏水加至1000ml乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液KH2P049.07g蒸馏水加至1000m1分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI pH 甲液ml 乙液mI5.29 5.595.916.24 6.47 6.64 2.55.010.020.030.040.097.595.090.080.070.060.06.816.987.177.387.738.0450.060.070.080.090.095.050.040.030.020.010.05.0(二)0.3％台盼兰染液称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。
(三)0.5％酚红指示剂酚红0.5g0.1N(0.4％)NaOH 15ml双蒸水85ml将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然后加入85ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。
(四)5.6％NaHCO3溶液称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4℃冰箱保存)(五)10μg／ml秋水仙素秋水仙素lOmg生理盐水100ml装入茶色瓶中，为贮备液，4℃冰箱中保存。
甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。
(六)0.4％KCl-0.4％柠檬酸钠低渗液将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。
(七)2％柠檬酸钠称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。
（八）0.2％次甲基兰染液称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。
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表一普通酸碱溶液的配制
名称
(分子式)
含量
（w/w%）
近似摩尔浓度
（mol/L）
欲配溶液的摩尔浓度（mol/L）
6
3
2
1
0.5
配制1L溶液所用的ml数（或g）
盐酸
（HCl）
36～38
12
500
250
167
83.3
41.7
硝酸
（HNO3）
65～68
15
400
200
133
66.7
黄
蓝
0.1%的20%乙醇溶液
中性红
7.4
6.8～8.0
红
黄橙
0.1%的60%乙醇溶液
百里酚蓝
（第二变色范围）
9.2
8.0～9.6
黄
蓝
0.1%的20%乙醇溶液
酚酞
9.4
8.0～10.0
无色
红
0.5%的90%乙醇溶液
百里酚酞
10.0
9.4～10.6
无色
蓝
0.1%的90%乙醇溶液
红
黄
0.1%的20%乙醇溶液
甲基橙
3.4
3.1～4.4
红
橙黄
0.05%水溶液
溴甲酚绿
4.9
3.8～5.4
黄Hale Waihona Puke 蓝0.1%的20%乙醇溶液或0.1g指示剂溶于2.9ml 0.05mol/L NaOH加水稀释至100ml
甲基红
5.0
4.4～6.2
红
黄
0.1%的60%乙醇溶液
溴百里酚蓝
（麝香草酚蓝）
7.3
6.2～7.3
6%----200
12%----400
氢氧化钠
（NaOH）
40 g·mol-1
（240）
（120）
（80）
（40）
（20）
氢氧化钾
（KOH）
56 g·mol-1
（336）
（168）
（112）
（56）
（28）
表二常用酸碱指示剂
指示剂
PKHIn
变色范围pH
酸色
碱色
配制方法
百里酚蓝
（麝香草酚蓝）
1.65
12.～2.8
33.4
硫酸
（H2SO4）
95～98
18
333.3
166.7
111.2
55.6
27.8
冰醋酸
（HAc）
99.9
17
353
177
118
59
36%醋酸
36
6
500
333
167
氨水
（NH3·H2O）
28
15
400
200
133
66.7
双氧水
（H2O2）
30
2%---66.7
3%----100
4%----133.3