急性肾功能衰竭动物模型的复制
急性肾衰竭动物模型的复制及实验性治疗
ｉ ｎ ｆ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｔ ｅ ｒ ｎ ａ ｌ ｊ ｕ ｇ ｕ ｌ ａ ｒ ｖ ｅ ｉ ｎ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｂ ｂ ｉ ｔ ｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｔ ｒ ｅ ａ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｒｏ ｇ ｕ ｐ ． Ｓ ｅ ｒ ｕ ｍ ｕ ｒ ｅ ａ ｎ ｉ ￣ ｏ ｇ ｅ ｎ（ Ｂ Ｕ Ｎ） ，
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教学 中广泛应用．
肌肉注射 ５ ０ ％甘油复制急性 肾衰模型 的方法 可靠 ， 可作为综 合性实 验教学方 法在基础 实验
关键词 ： 急性 肾衰竭 ； 甘油 ； 综 合性 实验
中图分类号 ： Ｒ ５ ｔ ｅ Ｒｅ ｎ ａ ｌ Ｆａ ｉ ｌ ｕ ｒ ｅ ｉ ｎ Ｒａ ｂ ｂ ｉ ｔ ｓ ａ ｎ ｄ
急性肾功能损伤模型的建立及药物治疗
急性肾功能损伤模型的建立及药物治疗急性肾功能损伤（ARF）是一种常见的肾脏疾病，它是一种肾脏功能突然恶化的状况，通常是由于肾脏受到伤害引起的。
这种突然恶化的肾脏功能可能会对患者的生命带来严重的威胁。
因此，ARF的治疗至关重要。
目前，许多研究人员致力于探索ARF的模型建立和治疗方法。
建立ARF模型的意义建立ARF模型可以为研究人员提供理想的试验平台，以便模仿和研究ARF的生理和病理机制。
这有助于揭示ARF的发病机制，为ARF的早期诊断和治疗提供新的思路和方法。
目前，建立ARF模型已成为研究人员的一项重要研究工作。
ARF模型的建立通常采用动物实验，这种实验有利于模拟人体内的生理过程，并使研究人员可以检测肾脏的功能改变和病理学变化。
同时，ARF模型的建立还对剖析ARF的基本病理生理过程，如细胞凋亡、氧化应激、炎症反应等，提供了可靠的手段。
建立ARF模型的方法常见的ARF模型建立方法包括：肾脏缺血/再灌注（IR）模型、肾脏毒性模型、肾脏移植模型等。
肾脏缺血/再灌注（IR）模型是最常用的ARF模型之一，常用于研究组织缺血再灌注所引起的肾脏损伤。
通过切断供血，引起缺血，再经过缺血的肾脏部位重新供血，旨在模拟临床上肾脏血流严重不足（如休克、心力衰竭、手术等）后的再灌注现象。
在这一模型中，IR可由肾动脉夹层或肾切除实现。
缺血时间的选择通常会影响后续研究的有效性，而重新灌注时间长短的选择则会直接影响组织损伤的程度。
肾脏毒性模型是另一种常用的ARF模型，它通过注射有害物质来研究肾脏的损伤。
该模型可以使用多种有毒物质，如氨基糖苷类抗生素、非甾体抗炎药等，这些物质通过损伤肾小球滤过膜和肾小管细胞，而导致肾脏功能急剧恶化。
肾移植模型则主要用于研究肾移植后肾脏损伤和修复机制。
肾移植开展之后，信号分子、免疫分子、炎症和凋亡等都可能会协调起来导致肾脏损伤。
治疗ARF的药物目前，治疗ARF主要依赖于利尿剂等容积复苏和肾脏替代治疗（RRT）。
《机能学实验》实验教学大纲(临床等)
《机能学实验》实验教学大纲（供五年制本科临床医学、麻醉学等专业使用）Ⅰ前言机能实验学是以生理学、病理生理学、药理学为基础，通过对三学科实验教学的优化、融合、重组形成的一门独立的综合性实践课，是以动物实验和人体功能观察为手段，探讨人体机能活动规律及其在疾病状态或药物干预下的变化规律及其机制的综合性实验课程，是机能学教学的重要组成部分和重要的医学基础课程。
主要内容包括基本实验技能、基本的经典实验、综合性实验和设计性实验。
编写本大纲的目的是要求学生通过该课程的学习，掌握常用实验仪器的原理及使用方法；掌握常用实验动物的选择和局部手术操作；掌握常用实验溶液的配制方法：学会实验资料的收集、整理和数据处理；学会对实验结果的分析、整理和实验报告的正确书写，从而提高对功能学科知识的进一步理解，提高解决实际问题的综合能力、提高科学思维的能力，培养对科学工作严谨求实的作风，为今后从事实际工作和科学研究奠定基础。
本大纲适用于五年制本科临床医学、临床妇产、急救医学、眼耳鼻喉科学、医学美容、医学影像学、麻醉学、法医学专业（方向）医学生使用。
现将大纲使用中有关问题说明如下：一为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲中每一实验均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。
教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容与教学要求级别对应，并统一标示（核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示）便于学生重点学习。
二教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内容。
三总教学参考学时：68学时。
四使用教材：《机能学实验指导》，自编，石京山，4版，2006年。
Ⅱ正文实验一概述一教学目的（一）明确机能实验课的目的和要求，严格遵守实验室的规章制度，认真做好每一次实验，在实验中不断掌握动物实验的基本操作技术。
（二）掌握BL-410、BL-420E和ASB240U生物信号采集系统操作。
氯化汞与家兔急性肾功能不全
氯化汞与家兔急性肾功能不全摘要：【目的】复制急性中毒性肾衰动物模型，通过对肾功能指标的检测及肾脏形态学改变的观察，了解中毒家兔肾功能的改变。
判断、分析致病因素及导致急性肾衰的可能发病机制【方法】取家兔两只，分为实验组（急性肾功能不全）和对照组，分别对家兔行心脏采血和膀胱取尿，分别测定并比较两兔的血清肌酐和尿肌酐含量以及酚红排泄率，比较肾衰家兔和正常家兔的肾脏排泄功能，最后取两兔肾脏观察比较。
【结果】与正常家兔相比，急性肾衰家兔尿肌酐、尿/血肌酐比值（<10:1）、酚红排泄率均明显下降，血肌酐含量也有所下降，肾比重减小，肾脏外观苍白肿大，切面苍白，皮髓质分界不清。
【结论】氯化汞可直接损伤肾小球和肾小管引起器质性肾功能衰竭，引起肾小管上皮细胞变性坏死，肾血管收缩，肾血流减少，肾灌注压下降，肾小管排泌功能、肾小管上皮细胞重吸收功能障碍。
【关键词】氯化汞；急性肾功能不全；血肌酐；尿肌酐；尿肌酐/血肌酐；酚红排泄率【引言】肾脏是一个多功能器官，其主要功能之一是泌尿功能。
肾脏通过调节肾血流、肾小球滤过率、肾小管排泌与重吸收以及排泄体内代谢物质以维持机体内环境的稳定。
当肾血流量减少，肾小球滤过率下降或肾小管排泌重吸收功能障碍时，肾的泌尿功能受到影响，从而导致肾功能不全。
[1]1、实验材料和方法1.实验材料1.1实验对象：家兔1.2药品和试剂：氨基甲酸乙酯、生理盐水、葡萄糖、酚红、NaOH、醋酸、碱性苦味酸、肌酐标准应用液1.3实验器材：手术器械一套、试管、分光光度计、水浴锅、离心机2.实验方法2.1复制肾功能衰竭模型：于实验前一天，取两只家兔，称重，一只皮下或肌肉注射1％HgCl2(o．8～1．0ml／kg)造成急性肾功能衰竭，为实验组兔；另一只皮下或肌肉注射等量的生理盐水(1．0ml／kg)作为对照组兔。
2.2麻醉手术：家兔称重，按5 ml/kg体重剂量于耳缘静脉缓慢注射200 g/L氨基甲酸乙酯麻醉。
急性肾衰竭实验报告
一、实验背景急性肾衰竭（Acute Renal Failure，ARF）是指各种原因导致的肾功能在短时间内迅速下降，血肌酐和尿素氮水平急剧升高，尿量减少或无尿，严重时可危及生命。
本研究旨在通过建立急性肾衰竭动物模型，探讨急性肾衰竭的病理生理机制，为临床治疗提供理论依据。
二、实验目的1. 建立急性肾衰竭动物模型。
2. 观察急性肾衰竭动物模型的临床表现。
3. 分析急性肾衰竭动物模型的肾功能变化。
4. 探讨急性肾衰竭的治疗方法。
三、实验材料与方法1. 实验动物：健康成年大鼠30只，体重200-220g，雌雄不限。
2. 实验试剂与仪器：10%氯化钠溶液、10%葡萄糖溶液、生理盐水、尿液分析仪、血生化分析仪、电子天平等。
3. 实验方法：（1）动物分组：将大鼠随机分为三组，每组10只，分别为正常对照组、模型组、治疗组。
（2）模型建立：模型组大鼠给予10%氯化钠溶液腹腔注射，剂量为5ml/kg，建立急性肾衰竭模型。
治疗组在模型建立后，给予10%葡萄糖溶液腹腔注射，剂量为5ml/kg，作为治疗措施。
（3）观察指标：观察各组大鼠的生理指标、肾功能变化、尿量变化及死亡率。
（4）数据处理：采用SPSS 22.0统计软件对实验数据进行统计分析。
四、实验结果1. 生理指标：与对照组相比，模型组大鼠的血压、心率、呼吸频率等生理指标均无明显差异（P>0.05）。
2. 肾功能变化：与对照组相比，模型组大鼠的血肌酐、尿素氮水平显著升高（P<0.01），表明肾功能受损；治疗组大鼠的血肌酐、尿素氮水平较模型组显著降低（P<0.05），表明治疗效果显著。
3. 尿量变化：与对照组相比，模型组大鼠的尿量显著减少（P<0.01），表明尿量减少；治疗组大鼠的尿量较模型组显著增加（P<0.05），表明治疗效果显著。
4. 死亡率：模型组大鼠的死亡率为30%，治疗组大鼠的死亡率为10%，表明治疗组大鼠的死亡率明显降低。
急性肾衰竭动物模型研究进展
１ ． ３ 部分结扎腹主动脉模 型 叶志斌等 报 道腹腔注射
麻醉大 鼠， 右股动脉 内插 入 Ｐ Ｅ一５ ０导 管监测血 压 。做 腹部 正 中切 口， 切除右 肾。分离 、 暴露 出肠 系膜上 动脉及左 肾动脉 ， 在
故 目前实验研究应用较少 。 １ ． ２ 缺血／ 再灌 注肾损 伤模 型
治提供理论方 向。但模 型挤 压伤 后心 肌组 织亦继 发损 伤 ， 心 功 复制 的动物模型从病 因和对 肾脏 的损伤上更符合临床实际 。 能下降 ， 并可能导致死 亡 。同时 因其存 在个体 差异 ， 且作 用
力难以控制 ， 故而稳 定性 差 ， 难 以建立 典型 的 Ａ Ｒ Ｆ动物 模 型 ，
・
６ ５ ４・
中国中西医结合 肾病杂志 ２ ０ １ ３年 ７月第 ｌ ４卷第 ７期
Ｃ Ｊ １ Ｔ ＷＮ Ｊ ｕ ｌ ｖ ２ ０１ ３． Ｖｏ １ ． １ ４． Ｎ０ ． ７
．
急 性 肾衰 竭 动物 模 型研 究进 展
陶 琦① 姚 源璋②
急性肾衰竭 （ Ａ Ｒ ｔ ） 是一组 以肾小球 滤过 率迅速下 降 为特 采用雄性 ｓ Ｄ大 鼠， 戊 巴 比妥 钠腹 腔注 射麻 醉 ， 做 腹部 正 中切 点 的临床综合征 。其临床指标为肌酐 、 尿 素及 其他代谢 废物及 口， 暴露右 肾并切除 ， 钝 性分 离左 肾动脉 ， 靠近 。 肾门处 用无损 伤 体液 的潴 留， 重要 的临床表现与水钠潴 留 、 容 量超负荷 、 高血钾 血管夹夹闭肾动脉观察肾脏 由鲜红色逐渐 变为 暗红 ， ６ ０ ｍ ｉ ｎ后 及酸 中毒有 关 。运 用 动物 模 型有 助 于有 效地 认 识 Ａ Ｒ Ｆ的发 松开动脉夹 ， 恢 复灌 流， 逐层缝合关闭腹腔 。
急性肾功能衰竭动物模型的研究进展
２ 缺 血 性 Ａ Ｆ模 型 Ｒ
之 一 。操 作方 法 ： 鼠 禁 水 １ 大 ６ｈ后 ， ５ ％甘 油 １０ 以 ０ ０
ｋ
体重 分别 在 两 侧 后 肢 肌 肉 注射 Ｉ 。为 ＿ 于 多 次采 血 ， ｏ ＿ 厂便 也
可 使 用 家 兔 ； ５ ％ 甘 油 生 理 盐 水 按 １ ｒ／ 体 重 进 行 双 用 ０ ５ｒ ｋ 正 后 肢 大 腿 皮 下 注 射 。 一 般 在 ２ｈ后 出 现 血 红 蛋 白 尿 ，４ｈ即 ２ 有 尿 素 氮 升 高 ， 尿 或 无 尿 致 病 机 制 ： 射 甘 油 后 会 造 成 少 注
物模 型研 究方 面更取 得了许 多进 展。本 文将 就 Ａ Ｆ 型 的类 Ｒ 模
型 殳其 与 临 床 病 程 的 相 似 性 作 一 综 迂 。 ｌ Ａ Ｆ模 型 的 种 类 Ｒ
目 前 使 用 的 Ａ Ｆ模 型 种 类 很 多 ， 机 制 上 可 分 为 缺 血 性 Ｒ 从
和 中毒 性 Ａ Ｆ两 类 模型 ｕ 。制 备 缺皿 性 Ａ Ｒ Ｊ ＲＦ模 型 方 法
２ １ 一侧 肾缺 血／ ． 再灌 注 加 对 侧 肾切 除பைடு நூலகம்模 型
实验动物模型的制备
病理生理学实习指导一、缺氧模型的实验性复制㈠目的与原理通过给动物低氧环境，影响 Hb 的带氧能力及使组织不能利用氧等方法，复制不同类型 缺氧模型，经呼吸、机能状态、皮肤粘膜颜色等指标，显示了其不同症状与特征， 制模型的方法及原理又有大概的了解， 有利于深入和研究各缺氧症的发生、律。
低张性缺氧 一氧化碳中毒 氰化钾中毒1低氧性缺氧⑴将小白鼠至于250ml 广口瓶（内装钠石灰吸收二氧化碳）中观察上述指标。
⑵:将瓶塞紧，同时记录时间，每 5min 重复观察上述指标一次（如有变化则随时记录）直到动物死亡为止。
2•—氧化碳中毒性缺氧⑴如图8-3-1装好一氧化碳发生装置。
⑵）将小白鼠一只放入瓶中，观察上述指标。
⑶取甲酸3ml 放入试管内，加入浓硫酸2ml ,塞紧。
如气泡产生较少，可用酒精灯加热， 加速一氧化碳的产生（但不可过热以至液体连续沸腾， 因一氧化碳产生过快，动物迅速死亡， 血液颜色改变不明显）。
⑷在整个过程中，注意观察上述指标。
（注）：一氧化碳产生原理：H 2SO 4HCOOHCOT +H 2O△3•氰化钾中毒性缺氧⑴称小白鼠体重，观察上述指标，预先准备1%亚硝酸钠及10%硫代硫酸钠各10ml Kg -1, 以备急救用。
同时对复 发展和转归的规㈡实验对象 小白鼠。
㈢器材与药品缺氧瓶（装有管道瓶塞的和2ml 刻度吸管，粗天平（附砝码）钠石灰（氢氧化钠、氧化钙） 10%硫代硫酸钠溶液。
㈣步骤与观察250ml 广口瓶），酒精灯，一氧化碳发生器, ，剪刀，普通镊。
，甲酸，浓硫酸，0.125%氰化钾溶液, 1ml 注射器，5ml 1%亚硝酸钠溶液,表 8-3-1 观察指标呼吸（频率、幅度）机能状态 （活动度）皮肤粘膜颜色图8-3-1 一氧化碳发生装置⑵腹腔注射0.125%氰化钾9ml Kg-1，立即观察上述指标。
⑶待小白鼠出现共济失调或竖尾时，将准备好的急救药注入腹腔。
⑷重复步骤⑵，不予抢救。
⑸⑸将三种缺氧实验动物尸体打开腹腔，比较血液或肝脏颜色。
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机能实验学实验设计大纲实验名称：急性肾功能衰竭动物模型的复制课题来源：自选
设计班级：2004级临床本科乙班
设计人员：庞路人杜泽东朱慕风黄波梁军设计日期：2006年9月30日
指导老师：张晓荣成
成都医学院实验技术教研室
2006年制
表1-2
夹闭后（1-10min ） 心率 血压 呼吸
B1 B2 B10
表1-3
夹闭后（10-30） 心率 血压 呼吸 B1 B2 … B10
表1-4
夹闭后（30-60min ） 心率 血压 呼吸 B1 B2 … B10
（5）统计数据分析：本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数±标准差（±a）表示，A,B 两组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，组间两比较行q 检验.
（1）平均数公式：x=x1+x2+…+xn/n= Σxi/n x=均数 Σ= 总和n =变量值的个数
（标准差）：a=sqr(Σ(xi-u)^2/n) a:总体标准差 xi:观测数的各个变量u:总体均数
四组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，如各组肺系数总体均值的比较，其方法如下： （1）建立检验假设 H0：1μ=2μ(A.B 两组间的各项生理指标相同）。
H1：1μ、2μ、不等或不全相等，α＝0.05。
（2）计算统计量
夹闭前心率血压呼吸
A1
A2
…
A10
夹闭后（10-30min）心率血压呼吸
A1
A2
…
A10
夹闭后（30-60min）心率血压呼吸
A1
A2
…
A10
（5）统计数据分析
本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数±标准差（±s）表示，A.B间实验数据比较行完全随机单因素方差分析（1）建立检验假设
μ=2μ（各组肺系数总体均值相等）。
H0：1
μ、2μ、不等或不全相等，α＝0.05
H1：1
（2）计算统计量
利用统计学专业软件SPSS做One-way ANOV A 。
( 3 ) 查F值表，确定P值，得出结论。
4、实验方法设计
家兔
实验技术方法
(1).随机抽样：随机20只正常的家兔，并分别编号，再随机平分成2组，
(2)．实验步骤：
（1）取兔、称重、麻醉、固定、备皮。
取家兔两只，编号，用婴儿称体重后按1ml/kg从耳缘静脉注入3%戊巴比妥钠溶液，五点法固定于兔台上，剪去颈部和腹部被毛。
（2）手术：1. 颈正中切口，分离出气管，在甲状软骨下方第3～4个环状软骨上做一个倒“T”切口，插入“Y”字形气管插管，用线固定，接上张力换能器，设定输入信号为“张力”。
2. 动脉插管：分离一侧颈总动脉，穿双线备用，结扎远心端，近心端用动脉夹夹闭，靠近结扎线处用眼科剪剪一“V”形切口，将连接好的动脉插管打满肝素，插入血管内，结扎固定，将压力换能器连上，放开动脉夹，设定输入信号为“压力”。
3. 将A兔沿腹白线剖开，找到两侧肾动脉，并用动脉夹夹闭，造成A兔急性肾功能衰竭，B兔不做此手术。
观察A、B两兔呼吸、心率、血压，并做记录。
4.用导尿管到尿并做尿钠：尿0.1ml+无水乙醇1.9ml，振荡后置10分钟，2500r/min离心5min，取上清夜备用，按表1-4加好试剂后，混匀，于520nm处比色。
计算：Na+（mmol/l）=OD测/OD标*6.5mg*20 肾衰指数=（尿钠mmol/l）/（尿肌酐/血肌酐）＞2。
5技术路线：
夹闭肾动脉→肾血流量减少→肾小球毛细血管压降低→肾小球有效滤过压降低→肾小球滤过压↓→缺血时间过长→急性肾功能衰竭
6可行行分析：
⑴本实验动物来源方便。
⑵急性肾功能衰竭动物的复制流程易于操作。
⑶实验
器材和药品普遍，实验室能提供充足的条件。
⑷所需资金不多，防止了实验过程中
资金不足足带来的问题。
7．预期结果：
术后的兔子血压升高，呼吸加深加快，心率加快，血钾和血钠含量升高，尿少
且比重降低，肌酐的浓度低，各项症状明显易于测定。
8、时间安排，见表1-5
表1-5 时间安排表
时间工作安排
1-10min 麻醉、固定、备皮 10-30min 气管、动脉插管
30-50min 观察各项正常生理指标
50-70min 复制肾衰模型
70-130min 观察各项生理指标的变化
130-160min 尿钠测定
180-190min 完成实验、整理实验室
三、完成时间的条件：实验器械，实验动物，实验药品。
实验设备：
注射器（若干 5ml）、试管（若干）、水浴锅、分光光度计、计算机、压力感受器、张力感受器、塑料管、动脉夹、哺乳动物手术器械一套、玻片
实验动物：
家兔（20只）
实验药品：
3%戊巴比妥钠溶液、、蒸馏水、碱性苦味酸、12.5%NaOH、Na+标准液、
附表
表1-4 尿钠测定的操作表
成分标准管测定管
空白管
尿上清澈— 0.2
—
Na+标准液 0.2 —
—
蒸馏水——
0.2
2%焦锑酸钾 5.0 5.0
5.0
精品文档
. 教研室评审意见。