秀丽隐杆线虫

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秀丽线虫综述 (1)

秀丽线虫综述 (1)

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喂养方法
➢ 用冰M9缓冲液清洗虫体 ➢ 置4℃环境20min ➢ 1000r离心,弃上清,沉淀物用M9缓冲液重悬 ➢ 置4℃环境20min 弃上清 ➢ 取200ul沉淀物以靠接法接种到涂有大肠杆菌OP50的 NGM培养基上 ➢将培养基放置到16℃生化培养箱中,72h后可繁育至第二 代
精选课件
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• 冻存 准备1mlEP管,加入700ul30%甘油(s缓冲
秀丽隐杆线虫的饲养及研究用途
精选课件
By 王传杰
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介绍
• 秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans),属于线形动物 门、线虫纲。体形非常小,成虫只有1mm左右。 线 虫 是 细 胞 定 数 动 物 , 两性 成虫 只有 9 5 9 个 体 细 胞 , 雄 性 成 虫 只 有 1 0 3 1 个 体细 胞 , 其 中 1 3 1个 细 胞 注 定 要 接 一 定 的发 育 程 序 陆续 死 亡 。 神 经 系 统解 剖结 构 十 分 简 单 , 仅有 3 0 2个细 胞 , 约 占整 个 动 物 体 细 胞 总 数 的 三 分 之 一 。它身体透明,能感 知气味和味道,对光线、温度有反应。研究者很容易在显 微镜下对其细胞和组织进行跟踪观察
显微注射后的整合
•目前常用的整合方法有:用 y射线和 X射线照射,或用光敏剂补骨脂素 加长波紫外线照射整合(TMP/UV integration). 基本策略是大量筛选经 •射线照射过的转基因线虫,一般挑取数百只 F1 代繁殖,筛选 F4 代, 检测是否有 100%的转基因表达,若是则说明整合成功. 一般一次整合 能得到若干个独立种系,可选择最好的一个进行实验.

容易脱水 而死
后的性腺被液体充 满.
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神奇的模式生物—秀丽隐杆线虫

神奇的模式生物—秀丽隐杆线虫

神奇的模式生物—秀丽隐杆线虫摘要:本文对秀丽隐杆线虫的模式生物一般特征入手,介绍了线虫形态学、生物学特征和繁殖、基因组和遗传学等方面的内容。

关键词:秀丽隐杆线虫模式生物基因组最近,秀丽隐杆线虫用于生物实验材料倍受科学家们的关注。

进入21世纪以来,已经有六位科学家利用秀丽隐杆线虫为实验材料揭开了生命科学领域的重大秘密而获得了诺贝尔奖。

1974年英国科学家悉尼·布雷内(Sydney Brenner)第一次把秀丽隐杆线虫作为模式生物,成功地分离出线虫的各种突变体,发现了在器官发育过程中的基因规则而获得了2002年诺贝尔生理学或医学奖。

与悉尼·布雷内共同分享诺贝尔奖的有两名科学家,其中一位科学家是英国约翰·苏尔斯顿(John E. Sulston),通过显微镜活体观察线虫的胚胎发育和细胞迁移途径,于1983年完成线虫从受精卵到成体的细胞谱系。

另一位科学家是美国的罗伯特·霍维茨(H. Robert Horvitz),是利用秀丽隐杆线虫作为研究对象进行了“细胞程序性死亡”研究。

克雷格·梅洛(Craig C. Mello)和安德鲁·菲尔和(Andrew Z. Fire)利用秀丽隐杆线虫实验发现一种全新的基因调控方式—RNA干扰(RNAi)而获得2006年诺贝尔生理学或医学奖。

此外,Martin Chalfie证明了GFP(绿色荧光蛋白)作为多种生物学现象的发光遗传标记的价值。

在最初的一项实验中,他用GFP使秀丽隐杆线虫的6个单独细胞有了颜色,由此获得了2008年化学奖。

究竟什么原因使秀丽隐杆线虫成为如此富有盛名的实验材料?1.秀丽隐杆线虫一般特征秀丽隐杆线虫是一种食细菌的线形动物,学名是Caenorhabditis elegans,通常缩写成C.elegans其成体长仅1mm,全身透明,以细菌为食,居住在土壤中,被称为“自由生活线虫”。

1.1分类地位秀丽隐杆线虫属于线虫门(Phylum nematoda)、侧尾腺纲(Secernentea)、小杆线虫目(Rhabditida)小杆线虫科(Rhabditidae)小杆线虫属(Caenorhabditis)。

植物秀丽隐杆线虫的生命史和生物学特性研究

植物秀丽隐杆线虫的生命史和生物学特性研究

植物秀丽隐杆线虫的生命史和生物学特性研究植物秀丽隐杆线虫是一种微小的线虫,通常生活在植物根际以及土壤中。

这种线虫体形柔软,虚弱,但却有着十分耐久的生命力。

在自然界中,植物秀丽隐杆线虫是一种常见的有害生物,它会在农作物的生长过程中带来许多危害,导致产量降低和质量下降。

但是,对于科学家和生物学家们来说,植物秀丽隐杆线虫却是一个十分有趣的研究对象。

植物秀丽隐杆线虫的生命周期包括卵、孵化、四个幼虫期和成虫期。

它们通常在土壤中以卵的形式存活。

一旦卵孵化,秀丽隐杆线虫就开始进入其四个幼虫期。

在每个幼虫期,它们会通过脱皮来适应其环境,同时也会增长其身体大小。

在第四个幼虫期结束后,秀丽隐杆线虫就成长为成虫。

成虫期通常只持续几天。

在这段时间里,秀丽隐杆线虫会寻找适合繁殖的环境并进行交配。

交配过后,雌性线虫会产生大量的卵,以保证下一代线虫的繁殖。

植物秀丽隐杆线虫的生物学特性十分独特。

一方面,它们是一种无性繁殖的生物。

在一些极端环境下,秀丽隐杆线虫可以通过无性生殖形式来繁殖后代。

这种能力使得它们具有更强的环境适应性和生命力。

另一方面,植物秀丽隐杆线虫也是一种寄生性生物。

它们依靠吸食植物的汁液来维持生命。

在植物上寄生的时候,植物秀丽隐杆线虫会带来许多的害处。

它们可以带来大量的病原体,使得植物易感染疾病。

另外,它们还会阻碍植物的营养吸收,导致植物的生长和发育受到限制。

为了对植物秀丽隐杆线虫有更深刻的理解,许多科学家和生物学家们对其进行了大量的研究工作。

他们发现,植物秀丽隐杆线虫和其他许多线虫一样,具有一些非常重要的遗传特征和发育特性。

这些特征不仅是对于研究其生命史和行为学特征有帮助,而且也对于构建运用于其他生物的众多遗传学和生物学模型具有指导意义。

尽管植物秀丽隐杆线虫是有害生物,但它们作为一个重要的研究对象,对于生命科学的进一步发展具有重大的意义。

通过对植物秀丽隐杆线虫的生物学特性和遗传学特征进行研究,不仅有助于我们更好地了解其在自然界中的地位和作用,还有助于我们在理解其他生物的生命史和行为学特征上得到更多的启发和指导。

秀丽隐杆线虫核转位实验

秀丽隐杆线虫核转位实验

秀丽隐杆线虫核转位实验秀丽隐杆线虫(C. elegans)是一种常用的模式生物,在生物学研究中具有重要的地位。

其基因组小且具有透明的身体结构,使其成为研究基因功能和发育过程的理想模型。

核转位是一种常见的基因重组现象,指的是DNA片段的移动,导致基因组中的基因位置发生改变。

秀丽隐杆线虫是第一个被用于研究核转位的模式生物之一。

通过观察秀丽隐杆线虫的核转位现象,科学家们可以更好地理解基因组的结构和功能。

秀丽隐杆线虫的核转位实验通常使用转座子(transposon)作为研究工具。

转座子是一种可以移动到基因组中不同位置的DNA片段。

在实验中,科学家会将转座子引入到秀丽隐杆线虫的基因组中,并观察转座子在不同个体间的移动情况。

通过对大量的秀丽隐杆线虫个体进行观察,科学家们发现,转座子的移动是一个随机的过程。

转座子可以在染色体上任意位置插入或删除,从而改变基因的排列顺序。

这种基因重排可以导致不同个体之间的基因差异,进而影响个体的表型特征。

除了观察核转位现象外,科学家们还通过分子生物学技术对转座子进行深入研究。

他们发现,转座子可以通过酶的介导而发生移动。

这些酶包括转座酶,它能够识别特定的DNA序列,并在该序列上切割DNA链。

转座酶的活性使得转座子能够在基因组中移动。

研究者还发现,转座子的移动可以导致基因组的变异和重组。

这些变异可能对生物的适应性和进化起到重要作用。

通过观察秀丽隐杆线虫的核转位现象,科学家们可以更好地理解基因组的进化和适应性机制。

核转位实验还能够为研究其他生物的基因组重组提供参考。

虽然不同物种之间的基因组结构存在差异,但核转位的基本原理是相似的。

通过观察秀丽隐杆线虫的核转位现象,科学家们可以揭示基因组重组的一般规律,为进一步研究其他生物的基因组提供指导。

秀丽隐杆线虫核转位实验是一项重要的研究工具,能够帮助科学家们更好地理解基因组的结构和功能。

通过观察转座子的移动情况,科学家们可以揭示基因组的重排和重组机制,进而深入研究生物的遗传变异和进化过程。

秀丽隐杆线虫研究综述

秀丽隐杆线虫研究综述

秀丽隐杆线虫研究综述一、本文概述秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,简称C. elegans)是一种微小的、透明的、生活在土壤中的线虫,自20世纪60年代以来,它已成为生物学研究的重要模型生物之一。

由于其生命周期短、繁殖迅速、基因组小且相对简单等特点,秀丽隐杆线虫被广泛用于研究细胞生物学、发育生物学、神经生物学、遗传学、基因组学等多个领域。

本文旨在对秀丽隐杆线虫的研究进行全面的综述,从基础生物学特性、基因组学进展、到其在各个领域的应用研究,以期为读者提供一个清晰、全面的秀丽隐杆线虫研究图景。

二、秀丽隐杆线虫的基本生物学特性秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,简称C. elegans)是一种具有独特生物学特性的小型线虫,其身体长度仅约1毫米,属于线虫动物门、无尾感器纲、小杆目、小杆科。

自1974年被悉尼·布伦纳(Sydney Brenner)选为遗传学研究的模式生物以来,秀丽隐杆线虫已成为生物学和医学领域广泛研究的对象。

生命周期与繁殖:秀丽隐杆线虫的生命周期大约为3天,在适宜的环境下,它们能以极快的速度繁殖。

它们通常以细菌为食,尤其是大肠杆菌(Escherichia coli),并通过摄取这些细菌来获取所需的营养。

成年线虫通过自交或雌雄同体交配繁殖,产生的后代数量巨大,每个成虫一生可以产生多达300个子代。

基因组与遗传学:秀丽隐杆线虫的基因组相对较小,约含有1亿个碱基对,使其成为研究基因功能和基因相互作用的理想模型。

由于其生命周期短、繁殖迅速,科学家能够迅速地进行遗传筛选和基因编辑,以研究特定基因的功能。

神经系统与行为:秀丽隐杆线虫拥有相对简单的神经系统,仅由302个神经元组成。

尽管如此,这些神经元足以控制线虫的各种复杂行为,如觅食、逃避、交配等。

这使得秀丽隐杆线虫成为研究神经生物学和行为学机制的重要工具。

衰老与疾病模型:秀丽隐杆线虫因其短寿命和快速的生理变化而成为研究衰老机制的理想模型。

秀丽线虫综述(1)

秀丽线虫综述(1)

需要确定荧光蛋白的连接不影响目的蛋白的功能; b. 目的基因与荧光标记基因共注射;c. 目的基因 与具有明显表型的标记基因共注射,我们通常使用易观察的 pmyo-3::TDimer II作为
荧光标记,它在所有体壁肌肉细胞表达,转基因效率高且本身对线虫的行为 和功能 没有 影响。
显微注射后的整合
•目前常用的整合方法有:用 y射线和 X射线照射,或用光敏剂补骨脂素 加长波紫外线照射整合(TMP/UV integration). 基本策略是大量筛选经 •射线照射过的转基因线虫,一般挑取数百只 F1 代繁殖,筛选 F4 代, 检测是否有 100%的转基因表达,若是则说明整合成功. 一般一次整合
CED-3:凋亡蛋白,与 ICE(caspase家族)同 源
低氧能够引起秀丽线虫发生相应的生理和行为学变 化,并可保护机体免受缺氧损伤。秀丽 线虫的低氧诱导因子(HIF-1)的恒定性调控通路和人 类的相应通路之间具有高度保守性,因此秀丽线虫 也已成为研究低氧应答调控通路进化保守性的重要 工具之一。阐明秀丽线虫的低氧应答机制将为了解 人类低氧相关疾病的发病机制提供有价值的线索。
注射时将 线虫挑至 琼脂糖固 定垫上, 调整线虫 使性腺暴 露,滴加 注射油覆 盖整个虫 体. 固定 好后的操 作要迅速, 否则线虫 容易脱水 而死
将琼脂糖固定垫放 在载物台上,40x物 镜下找到线虫,使 性腺聚焦在正确的 平面. 操作微操或 轻移滑动载物台, 将注射针尖刺入性 腺. 启动微量加压 器进行注射,能观 察到注射液在性腺 中快速流动,注射 后的性腺被液体充 满.
• 冻存 准备1mlEP管,加入700ul30%甘油(s缓冲 液溶解)
用冰M9缓冲液清洗虫体
置4℃环境20min,1000r离心弃去上清

蚂蝗作死实验报告

蚂蝗作死实验报告

一、实验背景蚂蝗,学名为秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans),是一种广泛分布于土壤中的线虫。

近年来,随着分子生物学、遗传学等领域的快速发展,蚂蝗因其易于培养、繁殖速度快、基因组成简单等特性,成为了研究生物学的理想模式生物。

然而,在实验过程中,我们不禁发现,蚂蝗有时会表现出一些“作死”的行为,给实验带来一定的困扰。

为了探究这种现象的原因,我们设计了一项关于蚂蝗作死行为的实验。

二、实验目的1. 了解蚂蝗作死行为的表现形式;2. 分析蚂蝗作死行为产生的原因;3. 探讨如何减少或避免蚂蝗作死行为,提高实验成功率。

三、实验材料与方法1. 实验材料(1)实验用蚂蝗:秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans);(2)实验用具:培养皿、移液枪、显微镜、温度计、计时器等;(3)实验试剂:N2培养基、细菌、抗生素等。

2. 实验方法(1)观察蚂蝗作死行为:在实验过程中,观察蚂蝗在培养皿中的行为,记录其作死行为的表现形式,如爬行速度、觅食行为、繁殖行为等。

(2)分析作死行为产生的原因:根据观察结果,分析蚂蝗作死行为产生的原因,如环境因素、生物因素、遗传因素等。

(3)减少或避免作死行为:针对分析出的原因,探讨如何减少或避免蚂蝗作死行为,提高实验成功率。

四、实验结果与分析1. 实验结果(1)蚂蝗作死行为的表现形式:在实验过程中,我们发现蚂蝗在以下情况下会表现出作死行为:① 培养基温度过高或过低:蚂蝗在过高或过低的温度下,会出现爬行速度减慢、觅食行为减弱、繁殖能力下降等现象;② 培养基中营养物质不足:蚂蝗在营养物质不足的情况下,会出现觅食行为减弱、繁殖能力下降等现象;③ 培养基中细菌过多:蚂蝗在细菌过多的培养基中,会出现繁殖能力下降、生长速度减慢等现象;④ 培养基中抗生素残留:蚂蝗在抗生素残留的培养基中,会出现生长速度减慢、繁殖能力下降等现象。

(2)作死行为产生的原因:① 环境因素:温度、营养物质、细菌数量、抗生素残留等环境因素都会影响蚂蝗的生长和繁殖,从而产生作死行为;② 生物因素:蚂蝗之间的竞争、寄生虫感染等生物因素也会导致作死行为;③ 遗传因素:蚂蝗的遗传基因可能存在缺陷,导致其在特定环境下表现出作死行为。

秀丽隐杆线虫

秀丽隐杆线虫
C. elegans有五对常染色体(autosome)和一对性染色体(sex chromsome)。是一个染色体数很少的二倍 体。
研究历史
秀丽隐杆线虫1900年,Maupas把这种棒状的蠕虫命名为Rhabditis elegans,因为群体繁殖为“r-选择”的 缘故,早在1948年Dougherty and Calhoun便指出了它在遗传学研究中的重要性。1952年,Osche把它置于 Caenorhabditis亚属,1955年Dougherty最终把它命名为Caenorhabditis elegans(其中Caeno意为 recent; rhabditis意为 rod; elegans意为nice)。广泛使用N2 Bristol品系,由Staniland从英格兰Bristol附近的 蘑菇堆肥中分离,1965年被定为参考种N2。在此过程中,Dougherty建立了线虫的琼脂板接种,大肠杆菌的培养 方法和无菌单培养方法。对秀丽线虫的早期研究工作,主要集中在解剖、营养、生理和生殖等方面,直到1960s 中期,随着DNA双螺旋结构的揭示和遗传密码的发现,使得当时的生物学家认为,“人脑是生命科学研究的最后 堡垒。”
研究意义
细胞凋亡现象及其机理,最早是在线虫中被揭示的。凋亡(apoptosis)是一个希腊文来源的词语,这个字 眼表达的是花儿凋谢,树叶飘零的景色。“梧桐一叶落而知天下秋 ”、“搦搦兮秋风,洞庭波兮木叶下 ”的意 象恐怕正是说的这种意境:优雅,含蓄,还带点淡淡的忧伤,更因为飘落时那种虽然有些无奈却坦然以受之的美。 由于线虫研究开创了一个对今日生物医学发展,具有举足轻重的全新领域,同时也因为以线虫为基础的凋亡研究 对基础和应用生物学,产生的巨大推动作用,卡罗林斯卡医学院的诺贝尔奖评选委员,会将年2002年生理和医学 奖授予了,线虫生物学的开拓者:西德尼·布雷纳(Sydney Brenner)、约翰·萨尔斯顿(John Sulston)和 线虫凋亡之父罗伯特·霍维茨(Robert Horvitz)。
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分类号编号烟台大学毕业论文利用秀丽隐杆线虫筛选抗白色念珠菌活性物质Screening anti-Candida albicans substances using Caenorhabditis elegans利用秀丽隐杆线虫筛选抗白色念珠菌活性物质摘要:以秀丽隐杆线虫作为模型生物进展抗菌物质筛选。

用白色念珠菌感染线虫后,采用不同浓度的抗菌药物治疗,观察线虫存活情况,确定适宜用药浓度;采用微拟球藻提取物对白色念珠菌感染线虫治疗,观察线虫存活情况,与抗菌药物作用效果比照,从而筛选出可用于治疗白色念珠菌活性物质。

实验发现,添加10~20mg/L的氟康唑对感染白色念珠菌的秀丽隐杆线虫治疗效果较好,在一定剂量范围内,治疗效果和剂量成线性关联;微拟球藻提取物不具备抗菌活性。

关键词:秀丽隐杆线虫;白色念珠菌;抗菌物质Abstract: In the study, Caenorhabditis elegans were used as model organism to screen antibacterial agents. C.elegans were infected by Candida albicans and treated by different concentrations of antibacterial agents which had been known and extracts from Nannochloropsis OZ-1, observating the survival situation and comparing the effects of the two antibacterial agents, thus, the bioactive substance could be screened which cured the Candida albicans. The result showed that Candida albicans could be treated by 10~20 mg/L Fluconazole, moreover within the scope of the dose, treatment effect and the dose of a linear correlation. And the results showed that extracts from Nannochloropsis OZ-1 did not have antibacterial activity.Key words:C.elegans;Candida albicans;Antibacterial substances目录1 文献综述 (5)1.1 秀丽隐杆线虫 (5)1.2 秀丽隐杆线虫研究进展 (5)1.2.1 环境毒理学的研究 (6)1.2.2 程序性细胞死亡的研究 (6)1.2.3 秀丽隐杆线虫感染模型的建立 (6)1.2.4 抗菌物质作用机制的研究 (6)1.2.5 病菌致病机制和线虫免疫机制的研究 (7)1.3 白色念珠菌 (7)1.4 抗菌物质的筛选 (8)1.5 实验研究意义 (9)2 材料和方法 (10)2.1 材料 (10)2.1.1 实验药品 (10)2.1.2 实验仪器 (10)2.1.3 线虫和菌株 (11)2.1.4 培养基 (11)2.1.5 试剂 (11)2.2 方法 (11)2.2.1 线虫培养和保存 (11)2.2.2 线虫同步化 (11)2.2.3 线虫真菌感染 (12)2.2.4 线虫抗感染治疗 (12)2.2.5 观察 (12)3 实验结果分析 (9)3.1 氟康唑用药浓度的选择 (9)3.2 筛选可用于治疗白色念珠菌的微拟球藻提取物 (9)4 结论 (12)致谢 (13)参考文献 (14)1 文献综述1.1 秀丽隐杆线虫秀丽隐杆线虫[1]〔Caenorhabditis elegans〕〔图1〕是一种多细胞真核生物,个体很小,以细菌为食,可独立生存在温度恒定环境中,对人、动植物没有危害。

成虫1 mm左右,通体透明,在普通显微镜下可观察。

秀丽隐杆线虫有很少的雄性个体,大多数为雌雄同体d,平均寿命约为2~3周[2]。

雌雄同体个体产卵孵化后,会经历四个幼虫期〔L1-L4〕,L4期生有精子,并在成虫期产卵。

雄性也能使雌雄同体受精,且雌雄同体优先选择雄性的精子。

当族群拥挤或食物缺乏时,秀丽隐杆线虫会进入dauer幼虫期,dauer能对抗逆环境,而且不会老化。

秀丽隐杆线虫基因组测序完成,是第一个完成的多细胞动物基因序列测定的动物,它的基因组序列40%以上与人类同源。

秀丽隐杆线虫有5对常染色体和1对性染色体,其遗传背景清晰。

图1 秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans秀丽隐杆线虫研究进展秀丽隐杆线虫最开场被用于研究发育生物学和神经生物学,随科学技术开展,对秀丽隐杆线虫的广泛研究,人们发现了调节器官发育及细胞程序性死亡的关键性的基因,也证明了这些基因同样存在于高等动物中。

这些研究开辟了研究人体细胞的分化及演变的道路,有利于研究很多疾病的发病机制。

Brenner[1]选取了秀丽隐杆线虫线虫作为生物模型,开启了一个崭新的领域。

秀丽隐杆线虫具有构造简单、生命周期短、基因测序完成等优点,使其作为一种模型生物得到广泛应用。

秀丽隐杆线虫作为优秀的模型生物不仅用于抗菌药物的体内研究,还被广泛应用于毒理学、基因组学、环境生物学、人类疾病模型的复制和干预。

环境毒理学的研究随着环境污染的严重,线虫开场运用于环境毒理学的研究,环境中的重金属、电辐射等毒素对人类的安康状况产生严重的威胁,线虫可以用来研究它们的作用机制,评估其危害性。

线虫模型如果能模拟毒素的作用机制,那么线虫将更加广泛的用于环境毒理学的研究[3]。

程序性细胞死亡的研究秀丽隐杆线虫为程序性细胞死亡研究奠定了根底。

Horvitz等[4]在秀丽隐杆线虫身上发现了基因调控的程序性细胞死亡的存在,他们发现了两个基因ced-3和ced-4,认为它们是发生细胞死亡的前提。

后来,他们又发现了ced-9与ced-3和ced-4相互作用来阻止细胞死亡。

对于程序性的细胞死亡的认识,使我们对一些疾病的发病机制有了新的理解,调控程序性的细胞死亡的功能性缺陷导致的疾病大体分为两种,一种是由细胞病理性丧失过多,另一种是去除有害细胞的机能受损。

对疾病本身的认识的加强为疾病的治疗提供了思路,科学家现在已经开场利用程序性细胞死亡的机理来研究治疗恶性肿瘤的新方法[5]。

.3 秀丽隐杆线虫感染模型的建立研究细菌致病机制是用线虫模型研发抗菌药物的根底。

线虫是一种简单的模型生物,可以被很多病菌感染。

周雨蒙等[6]建立了线虫—耐药铜绿假单胞菌感染模型,在用抗生素治疗线虫的实验中发现,可以排除毒性高、体内外相关性差的化合物,此模型为筛选得到具有良好体内效果的新型抗菌化合物或生物活性物质打下了根底。

陈丽红等[7]建立了铜绿假单胞菌—线虫感染模型,确立了适宜的铜绿假单胞菌培养时间和线虫的感染时间,并研究了多种抗生素对线虫的存活时间的影响,可以用于未知物质用量相当于等状态下抗生素用量的计算。

.4 抗菌物质作用机制的研究细菌的毒力的减弱是研发抗菌物质的一个靶点,Ho等[8]通过感染秀丽隐杆线虫研究发现,雷洛昔芬可以强烈的抑制铜绿假单胞菌的毒力的产生。

实验使用此药物对野生型铜绿假单胞菌进展治疗,结果发现细菌产生的绿脓菌素水平明显下降。

这些结果说明雷洛昔芬可能会被用于开发新型的疗法以此来靶向治疗铜绿假单胞菌的感染。

现在关于铜绿假单胞菌中的拮抗细菌群体感应系统的研究是一大热点。

以抑制QS系统为靶标的分子抑制物,可用于研发新的抗菌物质。

Sarabhai等[9]利用秀丽隐杆线虫模型实验发现诃子的果实中的鞣花酸衍生物具有拮抗QS系统,阻断了细菌细胞间的信号传递作用。

它的机制是,减少了QS系统中两个重要的基因的表达,同时减弱了革兰氏阴性菌的信号分子AHL的表达,最后减弱了野生型铜绿假单胞菌的毒力并增加了它的生物膜对妥布霉素的敏感性。

.5 病菌致病机制和线虫免疫机制的研究不同的病菌对线虫的的致病机制并不一样,线虫自身也具有免疫机制。

目前发现,可以感染线虫的病菌都是通过生理途径进展感染的。

Irazoqui等[10]研究了铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌感染线虫的致病机制。

铜绿假单胞菌侵占线虫肠道,产生与毒力因子有关的囊泡,在肠道细胞累积高电子密度生物被膜样物质,使肠道细胞变异。

而金黄色葡萄球菌迅速感染细胞,破坏肠道绒毛,溶解线虫细胞。

金黄色葡萄球菌经过热灭后仍可以感染线虫,这是因为其可以分泌有溶血活性的热毒力因子。

McEwan等[11]研究出铜绿假单胞菌会引起秀丽隐杆线虫肠道的天然免疫力。

线虫没有专门免疫细胞,线虫肠道上皮细胞充当防御系统,当铜绿假单胞菌积累在线虫肠道处,会增加线虫的机体损伤或抗微生物相关基因的表达量。

ToxA〔外毒素A〕是铜绿假单胞菌所表达的一种细菌毒素,线虫感染了铜绿假单胞菌后,ToxA可以抑制线虫体内蛋白质的合成,线虫通过识别ToxA激活体内免疫基因的表达来抵抗铜绿假单胞菌的感染。

白色念珠菌白色念珠菌〔Candida albicans〕〔图2〕又称白假丝酵母菌,是一种真菌,广泛的存在于自然界,也存在于人体的口腔、上呼吸道等地,在正常机体中一般数量较少,不会引起疾病,是一种条件致病菌。

白色念珠菌细胞呈圆形或卵圆形,直径3~6 um,革兰染色为阳性,出芽方式繁殖,真菌细胞出芽生成假菌丝,假菌丝长短不一,假菌丝收缩断裂又成为芽生的菌丝。

在适宜的培养基上芽生孢子及假菌丝生长,在假菌丝间其末端形成厚膜孢子。

白色念珠菌在沙保氏培养基上呈乳白色偶见淡黄色,外表光滑有浓酵母气味,培养时间稍长后那么菌落增大,颜色变深、质地变硬或有褶皱。

白色念珠菌感染和致病机制有附着、发芽、蛋白酶、菌落转换,可以侵犯人体许多部位,如皮肤、黏膜等,会引起皮肤念珠菌病、黏膜念珠菌病、内脏念珠菌病。

最早用于治疗酵母菌感染的特异性活性药物是多霉菌素,它是上世纪中期别离的一种聚烯类抗生素,此后又有很多抗真菌药物被研发出来,氟康唑是一种常用的抗白色念珠菌药物,抗菌谱较广,其机制主要为高度选择性干扰真菌的细胞色素P-450的活性,从而抑制真菌细胞膜上麦角固醇的生物合成,到达抑菌效果。

图2 白色念珠菌Fig. 2 Candida albicans1.4 抗菌物质的筛选抗生素的广泛应用,使越来越多的病菌具有了耐药性,而新型的抗菌药物的发现时间变的更长,新型的抗菌物质的研发进入了瓶颈,开发新型的抗菌物质成为一个非常重要的任务。

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