微生物实验报告(微生物形态观察、分布、灭菌消毒)
微生物实验报告：微生物形态观察
实验一微生物形态观察一、实验目的1．巩固显微镜的使用方法,重点练习油镜的使用；2．认识细菌、放线菌和霉菌的基本形态特征和特殊结构；3．练习手绘微生物图片;二、实验原理1．细菌基本形态细菌是单细胞生物,一个细胞就是一个个体;细菌的基本形态有3种：球状,杆状和螺旋状,分别称为球菌、杆菌、螺旋菌;球菌根据细胞分裂后排列方式的不同分为单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌等;杆菌分为单杆菌、双杆菌、链杆菌等,是细菌中种类最多的;螺旋菌分为弧菌和螺菌;除此之外,还有一些特殊形态的细菌;2．细菌特殊结构细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等;荚膜是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质,具有抗干燥、抗吞噬和附着作用;鞭毛是某些细菌表面着生的1至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体,具有运动功能,在菌体上的着生位置、数目因菌种而异;菌毛又称纤毛是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬,且数量较多的丝状体,与细菌吸附或性结合有关;芽孢又称内生孢子,是某些细菌生长到一定阶段,在菌体内部产生的圆形、椭圆形或圆柱形休眠体,具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性;3．真菌的结构特征菌丝是构成真菌营养体的基本单位,是一种管状细丝;可伸长并产生许多分枝,许多分枝的菌丝相互交织在一起,就叫菌丝体;根据菌丝中是否存在隔膜可分为无隔膜菌丝和有隔膜菌丝;为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育地需要,许多真菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态,这些特化的形态称为菌丝变态;比如吸器、假根、子实体;4．放线菌的结构特征放线菌的形态比细菌复杂些,但仍属于单细胞生物;链霉菌是典型的放线菌,其细胞呈丝状分枝,菌丝直径很小,在营养生长阶段,菌丝内无隔,故一般呈多核的细胞状态;当其孢子落在固体基质表面并发芽后,就不断伸长、分支并以放射状向基质表面和内层扩展,形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝,同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深、直径较粗的分枝菌丝,这就是气生菌丝;不久,大部分气生菌丝成熟,分化成孢子丝,并通过横隔分裂方式,产生成串的分生孢子;5．微生物菌落菌落是在固体培养基上内以母细胞为中心的一堆肉眼可见的、有一定形态和构造等特征的子细胞集团;细菌的菌落有其自己的特征,一般呈现湿润、较光滑、较透明、较粘稠、易调取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致等;不同形态、生理类型的细菌,在其菌落形态、构造等特征上也有许多明显的反映;三、实验器材普通光学显微镜Nikon YS-100,镜油,镜头纸,擦镜液；微生物装片15张,分为细菌、霉菌、放线菌、酵母菌等几类；微生物单菌落划线平板6块,分别为大肠杆菌、酵母、泾阳链霉菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、产黄青霉;四、 实验步骤1． 调节显微镜,观察微生物装片,选择其中6张手绘微生物形态； 2． 选择另外6张通过数字摄影系统拍照； 3． 观察6块菌落平板特征； 4． 整理仪器,清洁桌面; 注：本人所在35号台的显微镜不能进行数字摄影,故照片是在3号台显微镜下观察得到的;手绘图在两台显微镜观察下各有3张;五、 实验结果1． 数字摄影照片图1a bc d分生孢子 小梗 梗基 分生孢子梗接合孢子孢子囊梗分生孢子顶囊孢子囊e2．手绘图照片图2f接合孢子芽孢子图1. 微生物显微观察电子照片,摄于3号显微镜;a青霉,10×40倍观察；b黑根霉,10×40倍观察；c曲霉,10×40倍观察；d毛霉,10×40倍观察；e接合孢子,10×40倍观察；f酵母菌,10×100倍观察;各菌种的主要特征标注在图上;a b3． 菌落特征表1表1 . 单菌落划线平板特征描述菌落名称 含水状态 外观状态 透明度 颜色 边缘情况 大肠杆菌 略湿 圆形、光滑、凸起 半透明 双面乳白 整齐 酵母菌 湿润 圆形、光滑、凸起 不透明 正面：乳白 反面：黄褐 整齐 枯草杆菌湿润不规则、粗糙、扁平半透明双面黄褐波状c de f图2. 微生物装片手绘图;a 螺菌,放大10×100倍；b 巨大芽孢杆菌,放大10×100倍；c 褐色固氮菌,放大10×100倍；d 枯草杆菌,放大10×100倍；e 放线菌,放大10×100倍；f 苏云金杆菌,放大10×100倍;六、讨论本次实验最大的收获在于熟悉了油镜的使用和清洁;过去虽让做过不少使用显微镜的生物实验,但是因为观察的都是比较大的动植物细胞,没有机会练习油镜的使用;这次观察的都是个体非常小的微生物,真菌还可以在低倍镜下观察,但是细菌、放线菌必须使用油镜观察;即使这样,八叠菌、金黄色葡萄球菌等形体极小的菌种仍然不能清楚地看到单个菌体,这也是这次没有对它们进行绘图或是摄影的原因;注意,转换到100×物镜后,禁止使用粗准焦螺旋,细准焦螺旋也要慢慢调节,否则极易打碎装片;螺菌装片是为了观察鞭毛的,但是因为没有对装片进行过特殊染色,鞭毛非常不容易看到,必须将孔径光阑调到很小,同时降低聚光灯亮度,才能提高视野的对比度;能够隐约地衬出鞭毛,绘图时一定仔细观察;如经媒介剂加粗再染色,将更容易观察;本周的3个实验遗传、细胞、微生物内容非常相似,都是通过显微镜观察生物样本,之后进行手绘图片,而且所用的显微镜型号相同;希望以后可以整合类似资源,对同一项技能没必要3门同时上的课都训练;可否考虑对此部分上联合绪论课,讲解光学显微镜使用、手绘生物图方法,单独授课时则侧重讲需要重点观察的样本特征;这样同学们对3门实验尤其是一周中上的最后一门会有更大的兴趣;最后,感谢原先坐在3号台的同学,摄影结束后与我交换坐位,使我也能够对标本进行正常的数字摄影;七、参考资料陈金春、陈国强,微生物学实验指导,清华大学出版社,2005年。
微生物细菌实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解细菌的基本形态结构。
2. 掌握细菌的分离、纯化和鉴定方法。
3. 学习细菌生理生化反应的检测原理和应用。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有典型的原核细胞结构。
通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以鉴定细菌的种类。
三、实验材料与仪器1. 材料：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等纯菌株。
2. 仪器：显微镜、接种环、培养皿、酒精灯、无菌水、生理盐水、革兰氏染色液、生理生化试剂等。
四、实验方法1. 细菌形态观察- 将细菌涂布在载玻片上，进行革兰氏染色。
- 使用显微镜观察细菌的形态、大小、染色性等特征。
2. 细菌分离与纯化- 将纯菌株接种于琼脂平板，进行划线分离。
- 观察菌落特征，挑选单菌落进行纯化。
3. 细菌生理生化反应检测- 进行糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、V-P试验等。
- 观察反应结果，判断细菌的生理生化特性。
五、实验结果与分析1. 细菌形态观察- 大肠杆菌：革兰氏阴性，呈杆状，两端钝圆。
- 金黄色葡萄球菌：革兰氏阳性，呈球形，呈葡萄串状排列。
- 肺炎克雷伯菌：革兰氏阴性，呈短杆状，两端钝圆。
2. 细菌分离与纯化- 划线分离后，观察到单菌落形成。
3. 细菌生理生化反应检测- 糖发酵试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖。
- 吲哚试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- 甲基红试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- V-P试验：金黄色葡萄球菌呈阳性，大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均呈阴性。
六、讨论与分析1. 通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以初步鉴定细菌的种类。
2. 细菌的生理生化反应具有特异性，可用于细菌的鉴定和分类。
3. 在实际应用中，细菌的分离、纯化和鉴定是微生物学研究和临床诊断的重要环节。
七、实验结论1. 通过本次实验，我们掌握了细菌的基本形态结构、分离、纯化和鉴定方法。
2. 我们学会了利用生理生化反应进行细菌的鉴定和分类。
3. 本实验有助于提高我们对微生物学基本理论的认识和应用能力。
微生物的观察实训报告范文
一、实验目的1. 通过对微生物的观察，了解微生物的基本形态和结构。
2. 掌握显微镜的使用方法，提高实验操作技能。
3. 培养对微生物观察的兴趣，提高对微生物学知识的理解。
二、实验原理微生物是自然界中广泛分布的一类微小生物，它们在生态系统中扮演着重要的角色。
微生物的形态多样，包括细菌、真菌、放线菌、原生动物等。
通过显微镜观察微生物的形态和结构，可以了解其生物学特性和生态功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱表皮细胞、细菌培养物、酵母菌培养物、霉菌培养物等。
2. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、吸管、酒精灯、火柴、镊子等。
四、实验步骤1. 显微镜的使用（1）将显微镜置于实验台上，调整显微镜的倾斜角度，使其适合观察。
（2）打开显微镜的电源，调整光源亮度。
（3）将载玻片放置在显微镜的载物台上，用镊子夹取盖玻片，覆盖在载玻片上。
（4）使用粗准焦螺旋和细准焦螺旋调节显微镜的焦距，使观察到的图像清晰。
2. 洋葱表皮细胞的观察（1）用镊子夹取洋葱表皮细胞，将其放置在载玻片上。
（2）用盖玻片覆盖在洋葱表皮细胞上。
（3）调节显微镜的焦距，观察洋葱表皮细胞的形态和结构。
3. 细菌培养物的观察（1）将细菌培养物滴在载玻片上。
（2）用盖玻片覆盖在细菌培养物上。
（3）调节显微镜的焦距，观察细菌的形态和结构。
4. 酵母菌培养物的观察（1）将酵母菌培养物滴在载玻片上。
（2）用盖玻片覆盖在酵母菌培养物上。
（3）调节显微镜的焦距，观察酵母菌的形态和结构。
5. 霉菌培养物的观察（1）将霉菌培养物滴在载玻片上。
（2）用盖玻片覆盖在霉菌培养物上。
（3）调节显微镜的焦距，观察霉菌的形态和结构。
五、实验结果与分析1. 洋葱表皮细胞观察到洋葱表皮细胞呈长方形，细胞壁厚，细胞质丰富，细胞核位于细胞中央。
2. 细菌观察到细菌呈杆状、球状、螺旋状等形态，细胞壁厚，细胞质丰富，细胞核位于细胞中央。
3. 酵母菌观察到酵母菌呈圆形或卵圆形，细胞壁薄，细胞质丰富，细胞核位于细胞中央。
医学微生物学实验报告
医学微生物学实验报告（本科）实验室：姓名：学号：班级：海南医学院微生物学与免疫学教研室编写二OO四年四月第一次实验【实验内容】实验一微生物的形态与结构的观察实验二微生物的分布【结果记录及判定】实验一微生物的形态与结构的观察1、细菌正常形态及特殊结构的观察及记录（示教）：绘图并描述形状：形状：排列：排列：染色性：特殊结构：霍乱弧菌破伤风梭菌芽胞形状：形状：排列：排列：特殊结构：特殊结构：肺炎链球菌荚膜伤寒沙门菌鞭毛形状：形状：排列：排列：特殊结构：特殊结构：炭疽杆菌脑膜炎球菌2、病毒包涵体观察及记录（示教）：绘图并描述描述：狂犬病毒包涵体（H-E染色）3、真菌的形态观察及记录（示教）：绘图并描述形状：形状：排列：排列：特殊结构：特殊结构：白假丝酵母菌皮肤癣菌4、革兰染色法结果观察及记录：绘图并描述形状：形状：排列：排列：染色性：染色性：葡萄球菌大肠埃希菌实验二微生物的分布结果记录：1、空气中的细菌种类（种）：数量（个）：2、水中细菌数检测（1）自来水中细菌的种类（种）：数量（个）：（2）污水中细菌的种类（种）：数量（个）：3、物品和手指上的细菌检查（记录本人结果）物品表面的细菌种类（种）：数量（个）：手指表面的细菌种类（种）：数量（个）：结论：成绩：_________________批改教师签名：____________批改时间：________________第二次实验【实验内容】实验三微生物的分离培养实验四抗菌药物敏感性试验实验五消毒、灭菌、除菌【结果记录及判定】实验三微生物的培养1、细菌分离培养方法（分区划线接种法），生长现象为：2、纯种细菌接种技术（1）琼脂斜面接种培养，大肠埃希菌生长现象：（2）液体培养基接种法，大肠埃希菌生长现象：（3）半固体培养基接种技术①标本名称：大肠埃希菌半固体培养基②标本名称：痢疾志贺菌半固体培养基穿刺线：穿刺线：培养基：培养基：结论：结论：3、沙保弱琼脂平板上的真菌菌落观察及描述（示教）：类酵母型菌落：丝状菌落：实验四抗菌药物敏感性试验实验五消毒、灭菌、除菌一、紫外线灭菌法（示教）玻璃盖遮住平板的一半现象：现象：分析：分析：二、机械除菌法（示教）：1、未经过滤的液体培养基培养后的现象：2、经过过滤的液体培养基培养后的现象：分析：成绩：_________________批改教师签名：____________第三次实验【实验内容】实验六细菌的致病性实验七化脓性感染的细菌学检查【结果记录及分析】实验六细菌的致病性一、透明质酸酶试验（示教，实验动物：家兔）测量试验侧与对照测的黑墨水扩散范围（cm×cm）：实验侧：对照侧：分析：二、破伤风外毒素的毒素作用（实验动物：小鼠）实验现象：实验侧：对照侧：分析：实验七化脓性感染的细菌学检查一、病原性球菌的形态观察（示教）：绘图并描述形状：形状：排列：排列：染色性：染色性：葡萄球菌链球菌形状：形状：排列：排列：染色性：染色性：脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌二、病原性球菌的鉴别：三、血清学试验抗“O”试验（乳胶凝集法）实验现象：阳性对照：阴性对照：标本1：标本2：结果判定：标本1为________，标本2为_________。
微生物实验报告
一、实验目的1. 学习微生物分离纯化的基本方法。
2. 掌握微生物形态观察和菌落特征鉴定技术。
3. 培养微生物实验操作技能，提高对微生物学基本知识的理解。
二、实验原理微生物分离与鉴定是微生物学实验中的基本操作。
通过分离纯化，可以获得单一菌株，便于进行后续研究。
微生物鉴定则是根据微生物的形态特征、生理生化特性等，确定其种类。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂、无菌水、无菌试管、接种环、酒精灯、显微镜等。
2. 实验仪器：高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、无菌操作台等。
四、实验步骤1. 样品采集与处理（1）采集土壤样品，放入无菌试管中。
（2）用无菌水将土壤样品稀释10倍，制成土壤悬液。
2. 分离纯化（1）将土壤悬液取适量，涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上。
（2）将平板倒置放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
（3）观察菌落生长情况，挑取单个菌落，进行纯化培养。
3. 形态观察与菌落特征鉴定（1）将纯化后的菌株涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上，37℃培养24小时。
（2）观察菌落形态、颜色、大小、边缘等特征。
（3）将菌落置于显微镜下观察菌体形态。
4. 生理生化特性鉴定（1）根据菌落特征，选取疑似菌种进行生理生化试验。
（2）进行糖发酵试验、氧化酶试验、甲基红试验等。
（3）根据试验结果，确定菌种。
五、实验结果与分析1. 分离纯化经过多次挑取，成功分离出多个单菌落。
2. 形态观察与菌落特征鉴定观察发现，分离出的菌株菌落呈圆形，表面光滑，边缘整齐，颜色为白色。
3. 生理生化特性鉴定经过糖发酵试验、氧化酶试验、甲基红试验等，确定分离出的菌株为乳酸菌。
六、实验总结本次实验成功分离纯化了土壤样品中的乳酸菌，并通过形态观察、菌落特征鉴定和生理生化特性鉴定，确定了其种类。
在实验过程中，掌握了微生物分离纯化的基本方法，提高了微生物实验操作技能，加深了对微生物学基本知识的理解。
七、注意事项1. 实验操作过程中，严格遵守无菌操作规程，避免污染。
微生物实验报告
微生物实验报告实验目的，通过观察微生物在不同环境条件下的生长情况，了解微生物的生长规律，为微生物在工业生产和生活中的应用提供参考。
实验材料，琼脂培养基、试管、无菌移液器、培养皿、恒温培养箱、显微镜等。
实验步骤：1. 准备琼脂培养基，将琼脂培养基加热至液态状态后倒入培养皿中，待琼脂凝固后，用无菌移液器在琼脂表面均匀涂抹微生物样本。
2. 将涂有微生物样本的培养皿放入恒温培养箱中，设置不同的温度和湿度条件，观察微生物的生长情况。
3. 每隔一定时间，取出培养皿观察微生物的生长情况，记录下微生物的数量、形态和颜色等信息。
4. 利用显微镜对微生物进行观察和拍摄，进一步了解微生物的细胞结构和生长状态。
实验结果：在25摄氏度和相对湿度为60%的条件下，大肠杆菌的生长速度最快，菌落数量呈指数增长；在30摄氏度和相对湿度为70%的条件下，酵母菌的生长状况最佳，菌落呈现出圆润饱满的状态；而在20摄氏度和相对湿度为50%的条件下，霉菌的生长速度最慢，菌落数量增长缓慢。
结论：通过本次实验，我们发现微生物的生长受到环境条件的影响很大，不同的微生物在不同的温度和湿度条件下有着不同的生长规律。
这为微生物在工业生产中的应用提供了重要的参考，也为我们更好地了解微生物的生长特性提供了依据。
在今后的实验中，我们将进一步探究微生物在不同营养条件下的生长情况，以及微生物在不同环境条件下的代谢特性，为微生物的应用和研究提供更多的数据支持。
通过本次实验，我们对微生物的生长规律有了更深入的了解，也为微生物在工业生产和生活中的应用提供了更多的可能性。
希望本次实验结果能够对相关领域的研究和应用产生积极的影响。
生物细菌的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习微生物学的基本实验操作技能。
2. 掌握细菌的分离纯化方法。
3. 了解细菌的形态学和生理学特征，进行初步鉴定。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，广泛分布于自然界。
本实验通过平板划线法或稀释涂布平板法分离纯化细菌，观察其形态学特征，并利用生理生化实验对其进行初步鉴定。
三、实验材料与仪器1. 材料：土壤、无菌生理盐水、牛肉膏蛋白胨琼脂平板、细菌培养箱、显微镜、酒精灯、接种环等。
2. 仪器：高压蒸汽灭菌器、无菌操作台、恒温培养箱、移液器、试管、烧杯等。
四、实验步骤1. 土壤样品的处理（1）取土壤样品10g，加入90ml无菌生理盐水，振荡混匀。
（2）用无菌纱布过滤，收集滤液。
2. 细菌的分离纯化（1）取滤液1ml，加入9ml无菌生理盐水，制成10^-1稀释液。
（2）取10^-1稀释液0.1ml，涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上。
（3）重复步骤（2），制作10^-2、10^-3稀释液的涂布平板，共计3个。
（4）将平板倒置，放入细菌培养箱，37℃培养24小时。
3. 细菌的形态学观察（1）将长出的菌落挑取少量，制作临时玻片。
（2）在显微镜下观察菌落的形态、大小、颜色等特征。
4. 细菌的生理生化实验（1）将长出的菌落分别接种于下列培养基：a. 硫酸铜琼脂培养基：用于检测硫化氢产生。
b. 硝酸盐还原培养基：用于检测硝酸盐还原。
c. 氧化酶试验培养基：用于检测氧化酶活性。
（2）将接种后的培养基放入细菌培养箱，37℃培养24小时。
（3）观察并记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 细菌的分离纯化通过平板划线法，成功分离出细菌纯培养。
2. 细菌的形态学观察在显微镜下观察到菌落呈圆形、表面光滑、边缘整齐、颜色为白色。
3. 细菌的生理生化实验a. 硫化氢产生实验：菌落周围出现黑色沉淀圈，说明该菌能产生硫化氢。
b. 硝酸盐还原实验：菌落周围出现红色沉淀圈，说明该菌能还原硝酸盐。
c. 氧化酶活性实验：菌落周围出现蓝色，说明该菌具有氧化酶活性。
微生实验报告
微生实验报告微生实验报告（通用5篇）在学习、工作生活中，报告的用途越来越大，多数报告都是在事情做完或发生后撰写的。
相信许多人会觉得报告很难写吧，下面是小编为大家整理的微生实验报告，仅供参考，希望能够帮助到大家。
微生实验报告 1一、实验目的（一）掌握一般培养基的制备原理及要求，掌握培养基酸碱度的测定，熟悉一般培养基的制备过程和各种器皿灭菌方法。
（二）掌握细菌分离培养的基本要领和方法，掌握细菌抹片的制备方法和革兰氏染色法及油镜的使用方法，并认识革兰氏染色的反应特性。
（三）掌握学习用微生物学原理诊断疾病的一般方法及步骤。
二、实验用品（一）器材量筒、烧杯、电子天平、漏斗、三角烧瓶、空试剂瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、ph试纸、纱布、脱脂棉、天平、电炉、试剂瓶瓶塞、扎绳、放大镜、包装纸、洗耳球、酒精灯、载玻片、火柴、吸水纸、剪刀、记号笔、接种环、注射器、镊子、钳子、毫米尺、培养箱、水浴培养箱、高压蒸汽灭菌锅、油镜（二）试剂及材料肘胨、蛋白胨、猪胆盐、氯化钠、琼脂、乳糖、0.01%结晶紫水溶液、0.5%中性红水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氢氧化钠、盐酸、牛血清、革兰氏染色液、蒸馏水、小白鼠、病猪内脏三、实验步骤（一）培养基的制备（所有用到的器皿都已121℃高压灭菌15~30min，倾注平板在无菌操作台内完成，并放在无菌操作台内）1、麦康凯培养基（1）组成：蛋白胨17g、肘胨3g、猪胆盐5g、氯化钠5g、琼脂17g、乳糖10g、0.01%结晶紫水溶液10ml、0.5%中性红水溶液5ml、蒸馏水1000ml（2）方法：将蛋白胨、肘胨、猪胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中，调节ph至7.2。
将琼脂加入600ml蒸馏水中，并加入乳糖，加热熔化。
将两液混合，分装于烧瓶内，用纱布、扎绳等捆好后，121℃高压灭菌15~30min。
待冷却至50~ 55℃时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。
注：结晶紫和中性红水溶液配好后需经高压灭菌。
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FOR PERSONAL USE ONLY IN STUDY AND RESEARCH; NOT FOR COMMERCIAL USE微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜（油镜）的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜（油镜）的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油，然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，以免碰撞玻片，用双眼观察目镜，同时调节细调节器，直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时，用右手持镜壁，左手托镜座，平端于胸前2.油镜用毕后，要立即用擦镜纸擦去香柏油；再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头；最后，用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去，以免损伤油镜头3.镜头擦净后，降低接物镜并将其转成八字形，罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3．微生物知识1．细菌按形态分类：球菌：球形（包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等）杆菌：杆状（包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等）螺旋菌：螺旋状（包括螺旋菌、弧菌等）2．细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3．细菌的特殊结构荚膜：如肺炎双球菌鞭毛：又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如：变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞：如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4．微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类：细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类：真菌、原生动物、显微藻类非细胞类：病毒、亚病毒5．真菌单细胞：圆形、芽生孢子。
如：酵母菌多细胞：菌丝及孢子、孢子出芽。
如：霉菌6．白假私酵母菌（白念）生物学性状：G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性：皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查：直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7．新型隐球菌生物学性状：圆形酵母型菌、外周有厚荚膜（比菌体大1-3倍）致病性：吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿；侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查：脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查；墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔：1支；大镊子：1支；火柴：1盒；蜡笔：1支；试管架：1个；酒精灯：1个；接种环：1支；Olympus显微镜：1台；显微镜使用记录本：1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1）球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌（子弹形）、脑膜炎双球菌（蚕豆形）、四联菌2）杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌（异染颗粒）、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3）螺形菌弧菌——霍乱弧菌；螺菌；螺杆菌——幽门螺杆菌；弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus)；肺炎双球菌(pneumo coccus)；脑膜炎球菌(meningococcus)；破伤风杆菌（Clostridium Tantenus）；霍乱弧菌（vibrio cholera)；芽胞(spore)；鞭毛（flagellum)；荚膜(capsule)；钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图，已交。
六、思考与讨论1．显微镜高倍镜使用时看不清楚的常见原因（1）未滴加镜油（2）镜头不干净（3）标本放置反了，所以达不到对焦平面（4）制片问题：标本太厚、染色误差等细菌分布一、实验目的1. 掌握固体培养基的制备2. 掌握机体常见部位及环境中的细菌采样、培养、及初步鉴定3. 掌握革兰氏染色方法及结果判定二、实验原理1. 培养基：1．细菌生长所需营养物质：水、碳源、氮源、无机物和生长因子2．培养基分类：（1）根据营养物质：营养培养基、选择培养基、鉴别培养基（2）根据物理性质：液体培养基、固体培养基和半固体培养基3．细菌在培养基中的生长状况：表面生长、均匀浑浊生长、沉淀生长2. 革兰氏染色：革兰阳性细菌细胞壁的肽聚糖(peptidoglycan)层较厚，经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小，通道弯曲，结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色；而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄，脂肪含量高，经乙醇处理后孔径仍可使结晶紫与碘的复合物通过，因而将染料洗去而被脱色。
三、实验材料咽拭子、羊血培养皿：1套/人；大号普通培养皿：1块/2人；载玻片：1片/人；A、B菌：6套/桌；NS：1份/人；滤纸：1张/人；消毒液：4套/桌；三角瓶、电天平、营养琼脂、称药纸、称药勺、量筒：1套/桌四、实验内容1. 培养基制备1）按产品要求称取营养琼脂2）每实验桌制备200ml3）高压蒸汽灭菌后，在洁净工作台内倒平皿4）所制备的普通平皿用于空气培养2. 机体不同部位的细菌采样、培养1）咽部正常菌群的采样、培养咽拭子擦拭咽部，平行划线法接种于羊血平皿。
2）手指消毒前后细菌的采样培养未消毒手指平行划线法接种于普通平皿；同一手指碘酒、酒精消毒后平行划线法接种于普通平皿。
3. 环境中细菌采样培养1）空气培养将培养皿打开暴露于空气中，20分钟后盖好平皿盖儿2）流通纸币（或硬币）的细菌采样培养将硬币正反面分别在培养基上充分接触3）采样结束后，将培养皿底部朝上放入铁丝筐，统一置培养箱：37℃18-24小时4. A、B、C菌鉴定（革兰氏染色法）1）. 细菌涂片制备程序：（1）取一干净玻片，火焰上方缓缓通过三次去油（2）蜡笔画线将玻片分割为A、B、C三区域（3）接种环取生理盐水分别滴入A、B两区域各一滴（4）分别取少许A、B 、C菌，与生理盐水充分混匀成菌液，风干后形成菌膜（5）固定（火焰上方缓缓通过三次）（6）革兰氏染色（7）滤纸吸干水分，油镜观察2）. 革兰氏染色：（1）细菌涂片、火焰固定（2）结晶紫初染1min（3）卢戈氏碘液媒染1min（4）95%乙醇脱色30-40s（5）沙黄复染1min五、实验结果A：G+，球菌，推测为金黄色葡萄球菌；B：G-，短杆菌，推测为大肠杆菌；六、思考与讨论1．影响革兰氏染色的因素：（1）细菌本身因素：菌龄：如果菌龄太大，可能出现假阴性（2）操作因素涂片：取菌应适量，涂片要均匀，如果某个部分菌层太厚，可能在脱色时达不到，会导致局部假阳性固定：固定温度太高或时间太长都会导致细菌结构破坏而出现假阴性；但是固定不够，细菌会在水洗时被冲掉初染：初染时间虽然说是1分钟，但是可以适当延长，时间太短会出现假阴性；染色滴加不均匀可能出现半阴半阳媒染：和初染一样脱色：脱色时间不能过长，基本上用酒精滴过之后马上水冲就可以了，否则容易出现假阴性复染：复染时间需足够长，否则可能会染不上消毒灭菌一、实验目的1. 了解实验室常用消毒灭菌方法及其原理2. 掌握实验中所用仪器的使用方法3. 掌握机体常见部位及环境中的细菌培养物的初步鉴定4. 强化革兰氏染色技能二、实验原理1．口咽部及皮肤正常菌群鼻咽部及扁桃体：葡萄球菌、类白喉杆菌、肺链、溶血及非溶血性链球菌、奈瑟菌等口腔：链球菌多见、放线菌、螺旋体、G-杆菌等皮肤：表皮葡萄球菌、丙酸杆菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌2．溶血类型α溶血：现象：草绿色溶血环常见菌种：机会致病菌（甲链、肺链）原理：细菌产生过氧化氢将血红蛋白氧化成深绿色的高铁血红蛋白β溶血：现象：透明溶血环常见菌种：致病菌（乙链)原理：细菌释放溶血素使红细胞破裂，血红蛋白释放三、实验材料咽拭子培养物：1套/人；空气、纸币、手指消毒前后培养物：1套/2；载玻片：1片/人；NS：1支/人；滤纸：1张/人四、实验内容1. 常用消毒灭菌方法：（示教讲解）1）．热力灭菌：（1）干热灭菌法：焚化、烧灼、干烤（160 ℃，2小时）（2）湿热灭菌法：煮沸（2%Na2CO3，105 ℃）；高压蒸汽灭菌（103.4kPa，20分钟，121℃，临床运用最广的灭菌方法）2）. 紫外线（Ultraviolet radiation)：波长265nm-266nm(DNA吸收光谱）杀菌能力最强。
紫外光穿透力差，一般只用于不耐热物品表面的消毒。
3）. 过滤(filtration)用物理阻流的方法除去液体或空气中的细菌，用于不耐热物质的灭菌（血清、毒素、抗生素等）滤菌器：薄膜滤菌器、玻璃滤菌器、石棉滤菌器、素陶瓷滤菌器4）. 低温保存菌种（冷冻真空干燥法）70-75%乙醇洁净台消毒：来苏水擦拭防腐剂：三氯甲烷、硫柳汞、叠氮钠2．细菌分布结果鉴定1）观察菌落2）取部分菌落的细菌进行革兰氏染色并观察五、实验结果1. 咽部正常菌群的采样、培养结果：在羊血培养皿上出现四种菌落：（1）数目多，划线沿线都有；针尖大小；无色、光滑、湿润、透明、圆形。
周围出现草绿色溶血环，发生了不完全溶血即α溶血。
（2）数目较多，划线沿线都有；较小；乳白色、光滑、湿润、半透明、圆形。
（3）少，只出现在四个点；中型；乳黄色、光滑、半湿润、不透明、形状不规则。
在此种菌落下方的培养基出现了透明溶血环，发生了完全溶血即β溶血。
（4）1个菌落；较大；乳白色、光滑、湿润、半透明、圆形。
粘稠。
取（1）、（2）、（3）进行革兰氏染色，结果如下;（1）G+，链球菌，根据不完全溶血推断，为甲型链球菌。
（2）G-，球菌，细胞个体小，形状像金黄色葡萄球菌，但是染色为阴性。
（3）G-，球菌。
2. 手指消毒前后细菌的采样培养结果：1）消毒前：仅出现2个菌落，较小；乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。
革兰氏染色结果：G-，杆菌2）消毒后：无菌落出现。
3. 硬币正反面的细菌采样培养结果：1）正面三种菌落：（1）13个菌落；较小；乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。
和手指消毒前的菌落一样。
（2）1个菌落；较大；白色、光滑、湿润、近似圆形。
（3）5个菌落；较大；中央乳黄色边缘颜色变浅、光滑、湿润、中间凸、不规则、边缘光滑取其中（2）、（3）进行革兰氏染色，结果如下：（2）G-，杆菌。
和手指消毒前的细菌一样（3）G-，链杆菌。
形态较大，形状像炭疽芽胞杆菌，但是没有芽孢且染色为阴性。
2）反面两种菌落：（1）2个；较大，乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。
（2）多个，沿硬币边缘线连成一片；针尖大小、无色、光滑、湿润、透明。
4. 空气培养结果平皿敞开在实验室的窗台上放置了约20分钟，当时阳光照在上面：平皿出现了五种菌落：（1）11个；中等大小；白色、光滑、湿润、半透明、圆形（2）2个；较大；周围白色，中间有一个透明圈，光滑、湿润、中间凹的圆饼状（3）1个；较大；周围黄色，中间有一个透明的圆形区域，半湿润、没有光泽（4）1个；较大；边缘橘黄色，中央偏白、明显凸起、干燥、形状不规则（5）1个；较大；边缘透明，中央乳黄色，光滑、湿润、半透明、圆形取其中（3）、（4）进行革兰氏染色，结果如下：（3）G-，杆菌。