有关抗氧化能力分析
玉米抗氧化实验报告
一、实验目的1. 探究玉米中的抗氧化成分及其活性。
2. 评估玉米提取物的抗氧化能力。
3. 分析玉米提取物的抗氧化机制。
二、实验材料与仪器材料：- 新鲜玉米（品种：黄玉米）- 无水乙醇- 超声波清洗器- 离心机- 721型分光光度计- 抗氧化活性测定试剂盒仪器：- 电子天平- 超声波处理仪- 恒温水浴锅- 移液器- 试管三、实验方法1. 玉米提取物的制备：- 将新鲜玉米去皮去须，洗净后切成小块。
- 使用无水乙醇对玉米进行超声波提取。
- 提取液经离心后得到玉米提取物。
2. 抗氧化活性测定：- 采用抗氧化活性测定试剂盒对玉米提取物进行活性测定。
- 依据试剂盒说明书进行操作，测定玉米提取物的抗氧化活性。
3. 抗氧化机制分析：- 通过自由基清除实验（DPPH自由基清除实验、超氧阴离子自由基清除实验等）和抗氧化酶活性测定（超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等）来分析玉米提取物的抗氧化机制。
四、实验结果1. 玉米提取物的制备：- 通过超声波提取法，成功制备了玉米提取物。
2. 抗氧化活性测定：- 玉米提取物的抗氧化活性测定结果显示，其DPPH自由基清除率可达70%以上，超氧阴离子自由基清除率可达60%以上。
3. 抗氧化机制分析：- DPPH自由基清除实验结果表明，玉米提取物对DPPH自由基具有较强的清除作用。
- 超氧阴离子自由基清除实验结果表明，玉米提取物对超氧阴离子自由基具有一定的清除作用。
- SOD、GSH-Px活性测定结果显示，玉米提取物能够提高细胞内SOD、GSH-Px活性，从而清除自由基，发挥抗氧化作用。
五、讨论1. 玉米中含有丰富的抗氧化成分，如多酚、黄酮类化合物等，这些成分具有清除自由基、抗氧化、抗炎等作用。
2. 通过超声波提取法，可以有效地提取玉米中的抗氧化成分，提高提取物的抗氧化活性。
3. 玉米提取物对DPPH自由基和超氧阴离子自由基具有较强的清除作用，表明其具有较强的抗氧化活性。
抗氧化性能测试
实验步骤及操作
▪ 实验条件的设定
1.根据抗氧化性能测试的要求，设定合适的实验温度、时间和 湿度等条件。 2.确保实验条件的稳定性和可控性，以减小实验误差。
▪ 实验过程的操作
1.按照实验步骤，准确添加试剂和样品，避免操作失误。 2.实时监测实验过程，记录实验数据，发现异常及时处理。 3.保持实验过程的连贯性和稳定性，确保实验结果的可靠性。
抗氧化性能测试
结果分析与解读
结果分析与解读
▪ 结果总览
1.所有测试数据均表明，我们的系统在抗氧化性能测试中表现 出色。 2.与市场上的其他同类产品相比，我们的系统在多项指标上具 有优势。 3.我们的系统在持续高压和极端温度条件下的抗氧化性能尤其 突出。
▪ 抗氧化性能与时间的关系
1.随着时间的推移，系统的抗氧化性能始终保持在高水平，没 有明显下降。 2.在长时间运行后，系统的抗氧化性能依然稳定，没有出现明 显的性能损耗。
▪ 数据趋势分析与预测
1.通过数据分析，找出数据背后的趋势和规律，为决策提供支 持。 2.建立数据预测模型，对未来一段时间的抗氧化性能进行预测 。 3.结合行业趋势和发展动态，对数据趋势和预测结果进行全面 评估。 在抗氧化性能测试中，通过对历史数据的分析，可以揭示抗氧 化性能的变化趋势，为产品研发、改进和决策提供依据。同时 ，通过数据预测，可以为企业规划未来发展方向提供参考。 ---
▪ 数据处理技术与方法
1.掌握并运用先进的数据处理技术，如数据挖掘、数据清洗、数据分析等。 2.根据测试需求，选择合适的数据处理方法，确保结果的准确性和可靠性。 3.定期对数据处理技术进行更新和学习，保持与前沿技术的同步。 抗氧化性能测试涉及大量数据处理工作，合理运用相关技术和方法能够提高测试效 率，确保结果的准确性，并为进一步的研究提供有力支持。 ---
抗氧化剂测定方法的分类
抗氧化剂测定方法的分类抗氧化剂是一类能够延缓或抑制自由基反应的物质，可以有效保护人体免受氧化损伤。
目前，针对抗氧化剂的测定方法主要可以分为化学法、生物学法和物理学法三大类。
下面将对这三类方法进行详细介绍。
一、化学法1.化学分析法：通过化学反应或反应产物的测定来确定抗氧化剂的含量。
常用的化学测定方法包括铁还原能力测定法、嗜氧性猝灭活性测定法、总酚测定法等。
这些方法的基本原理是抗氧化剂与氧化剂发生反应，通过反应后的色变、电流变化或物质的生成来测定抗氧化剂的含量。
2. 高效液相色谱法（HPLC）：是一种利用不同的色谱柱和溶剂系统来分离和测定抗氧化剂的含量的方法。
通常采用紫外-可见光（UV-Vis）检测器进行定量分析，根据抗氧化剂在特定条件下的色谱峰进行定量测定。
3.气相色谱法（GC）：是一种将样品中的抗氧化剂挥发成气态，然后通过气相色谱柱进行分离和测定的方法。
通常需要将样品预处理成蒸馏、萃取或衍生化产物，然后再进行气相色谱分析。
常用的检测器有质谱检测器、火焰离子化检测器等。
二、生物学法1.抗氧化酶活性测定法：通过检测抗氧化酶（如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶等）的活性来间接测定抗氧化剂的含量。
这种方法的优势在于能够直接反映生物体内的抗氧化反应，但同时也受到许多因素的干扰，如样品的处理、温度、PH值等。
2.活性氧自由基测定法：通过检测氧自由基的产生或消失来测定抗氧化剂的活性。
常用的方法包括二苯基胺试验法、邻苯二酚试验法等。
这种方法的优势在于可以直接测定抗氧化剂对活性氧自由基的清除能力，但需要较为复杂的实验操作。
三、物理学法1.电化学法：通过利用电流和电势的变化来测定抗氧化剂的含量和活性。
常用的电化学方法包括循环伏安法、计时安培法等。
这种方法的优势在于测定灵敏度高、实时性强，但需要较为复杂的仪器和操作。
2.荧光分析法：通过测定样品中发生的荧光自发射和荧光猝灭现象来测定抗氧化剂的含量和活性。
常用的方法有荧光共振能量转移法、荧光强度比较法等。
机体抗过氧化能力指标
机体抗过氧化能力指标
机体抗氧化能力指标是评估生物体对抗氧化应激的能力的指标。
抗氧化能力是指生物体对抗氧化应激的能力，包括清除自由基、修
复氧化损伤、维持氧化还原平衡等方面。
以下是一些常见的机体抗
氧化能力指标：
1. 抗氧化酶活性，包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）等酶的活性。
这些酶能够清
除自由基，减少氧化损伤。
2. 抗氧化物质含量，包括维生素C、维生素E、谷胱甘肽、类
胡萝卜素等抗氧化物质的含量。
这些物质能够中和自由基，减少氧
化损伤。
3. 氧化应激标志物，包括丙二醛（MDA）、羟基自由基（·OH）等氧化应激标志物的含量。
这些标志物的含量可以反映机体的氧化
损伤程度。
4. 抗氧化基因表达，包括抗氧化相关基因（如SOD、CAT、GPx
等基因）的表达水平。
这些基因的表达可以影响抗氧化能力。
5. 细胞膜的稳定性，包括细胞膜的流动性、渗透性等指标，稳定的细胞膜可以减少氧化损伤。
综上所述，机体抗氧化能力指标涉及到酶活性、抗氧化物质含量、氧化应激标志物、抗氧化基因表达以及细胞膜的稳定性等多个方面，通过综合评估这些指标可以全面了解机体对抗氧化应激的能力。
抗氧化物活性测定方法总结
抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性测定方法法:铁离子还原抗氧化能力测定法[1]FRAP(ferric ion reducing antioxidant power)方法，在低pH值的溶液中，Fe3+-TPTz(Fe3+-三吡啶三嗪)被抗氧化剂还原成有色的Fe2+-TPTZ。
反应的结果常以Fe2+当量或标准物质的抗氧化能力表示。
该法快速简便、易于操作、重复性好，但FRAP反应属于电子转移(SET)反应，因此FRAP方法不能够测定氢转移反应(HAT)起作用的物质。
而且该法实际测定的是待测生物活性物质将Fe3+还原为Fe2+的能力，因此没有抗氧化能力的生物学相关性。
法(trolox equivalent antioxidant capacity)ABTS(2,2'-amino-di(2-ethyl-benzothiazoline sulphonic acid-6)ammonium salt,2,2'氨基-二(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸-6)铵盐)与过氧化物酶和氢过氧化物在一起形成ABTS+阳离子自基。
在抗氧化剂存在时，这种自基混合物的光吸收值下降，下降程度取决于抗氧化剂的抗氧化能力，测得的结果以TEAC表示，即被测抗氧化剂清除ABTS·+的能力(吸光度大小的变化)与标准抗氧化剂trolox(VE的水溶性类似物)清除ABTS·+的能力的比值。
TEAC法十分简单，适用于大量样品的分析检测。
但是，ABTS·+并非生理自基，缺乏生理相关性，而且与FRAP方法相似，ABTS·+与不同抗氧化剂问的氧化反应时间不同，因此，只能定性不能定量评价样品的抗氧化能力。
法[2，3](2，2-diphenyt-l-picrylhydrazyl radical scavenging capacity) DPPH·(二苯代苦味肼基自基)法是较常用的方法之一。
DPPH·是一种稳定的以氮为中心的自基，其醇溶液呈深紫色,在517nm 处有一吸收峰。
抗氧化能力分析方法
超氧阴离子（O2-·）清除能力的测定
采用邻苯三酚自氧化法，略有修改。
25℃恒温条件下，在10mL容量瓶中依次加入pH为8.3的0.05mol/L Tris-HCl 溶液5.0mL，加不同浓度的样品液0.5mL，加入蒸馏水3.3mL，加入2mmol/L邻苯三酚0.2mL，总体积共9mL。
以二次蒸馏水作对照，邻苯三酚最后加入，迅速混匀后，测定A322，每隔1min测一次，直到反应后第5min，求斜率V。
VC和BHA做样品对照。
清除率K(%)=（V s-V）/V s×100%
式中：Vs——0.5mL蒸馏水与反应体系反应的速率
V——0.5mL样品液与反应体系反应的速率
羟基自由基（·OH）清除能力的测定
本实验采用羟基自由基试剂盒的方法测定。
原理：Fenton反应是最常见的产生羟基自由基的化学反应，H2O2的量和Fenton产生的.OH量成正比，当给予电子受体后，用griess试剂显色，形成红色物质，其呈色与.OH的多少成正比关系。
抑制率K1(%)=（OD1-OD2）/ OD1×100%
式中：OD1——对照管吸光度
OD2——样品管吸光度。
抗氧化能力指数_ORAC_测定原理及应用_续洁琨
AU C= 015 @ ( f0 + f1 ) @ $ t+ 015 @ ( f1 + f2 ) @ $ t+ , + 015 @ ( fx + fx+ 1 ) @ $ t+ , + 015 @ ( fn- 1 + fn ) @ $ t= 015 @ [ 2 @ ( f0 + f1 + , + fn- 1 + fn ) - f0 - fn ] @ $ t
1抗氧化能力分析
1.3.5.3 抗氧化活性分析（1） DPPH 清除力1,1-二苯基-2-苦基肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ，DPPH ）是一种稳定自由基，在可见光区有特征吸收，利用其在可见光区吸光值的变化可以有效评价物质的抗氧化活性。
本实验分别取0.005 mL 、0.01 mL 、0.02 mL 、0.03 mL 、0.04 mL 的样品，加入蒸馏水稀释到0.2 mL ，加入3 mL 0.06 mM 的DPPH （溶于无水乙醇中），手动混匀，室温下避光反应0.5 h ，然后在517 nm 处测定其吸光值，设定无水乙醇为空白对照组，0.5 g/L BHA 为阳性对照。
DPPH 清除率计算如下：DPPH 清除率（%）=（1-A 样品/A 空白）×100%式中：A 样品——样品吸光值，A 空白——为对照组吸光值（2）还原力物质还原能力即以该物质将Fe 3+还原为Fe 2+的能力为衡量指标，该能力与抗氧化活性有关。
分别取0.05 mL 、0.1 mL 、0.2 mL 、0.3mL 、0.4 mL 、0.5 mL 的样品，用蒸馏水稀释至0.5 mL ，加入2.5 mL 磷酸盐缓冲溶液（0.2 M ，pH 6.6）和2.5 mL 1%（w/v ）铁氰化钾溶液，将混合物在50o C 反应20 min ，再加入10% 三氯乙酸（w/v ），4000 r/min ，离心10 min ，取上清2.5 mL 加入2.5 mL 蒸馏水和0.5 mL 0.1%铁氰化钾反应10 min ，在700 nm 处测定其吸光值，蒸馏水为空白对照，0.5 g/L BHA 为阳性对照。
（3）螯合力过渡金属离子Fe 2+可以催化活性氧自由基的形成及促进脂质的过氧化作用，从而对细胞和组织造成损伤，如果将这些金属离子耦合即可消除其催化作用，提高抗氧化活性。
分别取0.03 mL 、0.05 mL 、0.07 mL 、0.09 mL 、0.1 mL 样品用蒸馏水稀释至2.5 mL ，然后加入0.05 mL 2 mM Fe S O 4，0.1 mL 5mM 菲啰嗪溶液，反应10 min ，在562 nm 处测定吸光值，蒸馏水作为对照组，0.28 g/mL 的柠檬酸作为阳性对照。
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番茄：
ORAC-total：53 µmol TE/g
ORAC-5.0：804µmol TE/g[3]
ORAC（Oxgen Radical Absorbance Capacity）指氧自由基吸收能力，即测试食品药品中抗氧化物的含量的国际通用标准单位。ORAC的含量超高，抑制自由基的抗氧化能力就越强。
对于一个未知样品，ORAC化学方法测试出样品的理论抗氧化值，并测出对各种自由基作用的具体数值，以寻找研发方向。然后通过ORAC生物细胞方法测试其生物利用度（被人体细胞所吸收的值），以验证其真实的效果。最后进行动物临床或人体临床，证实样品（产品）的实际效果。通过这种循序渐进、符合逻辑的研发方案步骤，企业可以安全、有效的研发出符合预期的新产品，建立起一套扎实的数据支撑体系。ORAC已建立从化学层面、生物细胞层面、临床层面纵向立体的分析方法。
常见蔬菜或水果的ORAC：
"ORAC-total"是指总抗过氧化自由基能力值；“ORAC-5.0”是指总抗自由基能力值；
芦荟：
ORAC-total：2737 µmol TE/g
ORAC-5.0：135,647 µmol TE/g
CAA：232.77 µmole QE/g
苹果（Fuji）：
ORAC-total：149 µmol TE/g
越橘：
ORAC-total：706 µmol TE/g
ORAC-5.0：4902 µmol TE/g
西兰花：ORACBiblioteka total：168 µmol TE/g
ORAC-5.0：921 µmol TE/g
哈密瓜：
ORAC-total：45 µmol TE/g
ORAC-5.0：636 µmol TE/g
胡萝卜（新鲜）：
有关抗氧化能力分析
ORAC (Oxygen radical absorbance capacity)即抗氧化能力指数，是目前抗氧化研究领域一个重要的评价方法。该方法以偶氮类化合物AAPH作为过氧自由基来源，以荧光素Fluorescence为荧光指示剂，维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准，使用荧光微孔板分析仪进行分析。与其他抗氧化能力分析方法相比, ORAC方法具有诸多显著的优点。该方法自1993年建立以来，经过不断发展和完善，可以说ORAC方法是目前评价抗氧化物质的抗氧化活性的最为简单、准确、灵敏度高、应用范围广和最具影响力的抗氧化能力研究方法之一。目前，ORAC方法已成功应用于生物样品、植物或食品提取物和纯化合物等多种样品的体内外抗氧化能力分析。
ORAC-5.0：1047 µmol TE/g
鳄梨：
ORAC-total：86 µmol TE/g
ORAC-5.0：241 µmol TE/g
香蕉（新鲜）：
ORAC-total：11 µmol TE/g
ORAC-5.0：69 µmol TE/g
香蕉：
ORAC-total：67 µmol TE/g
ORAC-5.0：186 µmol TE/g
ORAC-total：2 µmol TE/g
ORAC-5.0：7 µmol TE/g
胡萝卜：
ORAC-total：25 µmol TE/g
ORAC-5.0：504 µmol TE/g
樱桃：
ORAC-total：157 µmol TE/g
ORAC-5.0：1296 µmol TE/g
蓝莓：
ORAC-total：469 µmol TE/g
ORAC-5.0：3141 µmol TE/g
蔓越莓：
ORAC-total：297 µmol TE/g
ORAC-5.0：2300 µmol TE/g
猕猴桃：
ORAC-total：45 µmol TE/g
ORAC-5.0：1193 µmol TE/g
脐橙：
ORAC-total：111 µmol TE/g
科标检测，其团队通过多年的研究沉淀，通过模拟各种氧自由基在人体内的产生机制产生各种氧自由基，而这些自由基可破坏荧光探针的结构从而造成荧光信号的衰减。当具有抗氧化活性的样品加入到实验体系中时，可以不同程度的保护荧光探针不被氧自由基所损坏，因而通过检测荧光信号的不同，便可以计算出某种样品的抗氧化活性。在ORAC实验中，以水溶性维生素E(Trolox)为标准品，因此最终样品的抗氧化实验结果最终以每克或是每毫升样品含有多少Trolox当量的形式表示。通过ORAC5.0检测样品的抗氧化活性,为抗氧化食品、保健品、化妆品以及药品的研发提供了有效的检测手段。