急性酒精性脂肪肝斑马鱼模型的建立 戴文聪
TSPAN8参与小鼠非酒精性脂肪性肝病的脂质代谢
非酒精性脂肪性肝病（NAFLD ）是与脂代谢异常有关的世界范围内最常见的慢性肝病［1］。
据估计全球NAFLD 患病率约为25%，近几十年来其患病率日益增长［2,3］。
NAFLD 疾病谱广泛，从轻度脂肪变性（即肝细胞内的脂滴沉积）到以脂肪变性、炎症和肝细胞气球样变性为特征的非酒精性脂肪性肝炎（NASH ）［4］。
单纯性肝脂肪变性是良性和可逆的；然而，NASH 是一种潜在的严重疾病，可进一步发展为肝硬化和肝细胞癌（HCC ）［5,6］。
目前该病的发病机制还未完全阐明，多种理论的提出如：二次打击学说、多次打击学说、脂质异位沉积、肠道菌群失调等都只是冰山一角［7］。
尽管其发病机制复杂，但NAFLD/NASH 的一个不变特征是它总是在肝脂肪变性的背景下发展，即肝细胞中异常脂滴的积累。
当各种细胞内和细胞外应激事件与脂肪变性相结合时，肝细胞会经历应激/损伤反应，最终导致细胞损伤和死亡，这是NAFLD 的关键特征［8］。
因此，探索脂质代谢的相关机制对于了解NAFLD 的病理生理学至关重要。
四跨膜蛋白8（TSPAN8）是一种具有四次跨膜结构的小相对分子质量的膜蛋白，其通过与自身和其他各种细胞信号分子相互作用形成TSPAN8介导的蛋白质复合物。
这些蛋白质复合物有助于构建富含四跨膜蛋白TSPAN8is involved in lipid metabolism in non-alcoholic fatty liver disease in miceZHANG Jia,XUE Wei,ZHANG Shujun,ZHU Yali,YANG Cheng,GAO Yue,SHI Lingfeng,HUANG WenxiangDepartment of Infectious Diseases,First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China摘要：目的探讨四跨膜蛋白8（TSPAN8）在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD ）发生发展中的变化及其在脂质代谢中的作用。
酒精性肝损伤造模
酒后饮绿茶对小鼠肾功能影响的实验性研究李佳陈路军陈洁徐立思齐慧娟陆妙君指导老师：黄品贤（上海中医药大学03中西（七）上海201203）[摘要]目的观察给最佳酒醉状态的小白鼠灌茶对肾功能的影响。
方法检测给小白鼠0.15ml/10g白酒后20min灌入低、中、高浓度茶、解酒阳性对照药枳椇子各0.20ml/10g，连续7天后血肌酐、血尿素蛋及尿蛋白含量。
结果⒈高中浓度茶组、模型组的尿蛋白与正常组相比有显著差异，P<0.05。
⒉各组生存曲线比较的Log-rank检验结果：χ2=20.39，P<0.01。
⒊肾脏病理改变：低浓度茶组小鼠肾小球、肾小管未见明显病变，但间质血管扩张充血明显，有较多量红细胞漏出，可见炎症反应，间质未见纤维化；中浓度茶组肾组织结构完整，肾小球、肾小管未见明显病理变化，间质未见明显充血，少量红细胞漏出，间质未见纤维化；高浓度茶组肾脏组织结构与中浓度茶组接近。
阳性对照组肾组织结构基本完整，肾小球、肾小管未见明显病理变化，间质少量充血。
结论根据尿蛋白、实验小鼠的生存曲线分析、肾脏的病理结果的一致性得出：⒈酒后饮茶均可导致小鼠的死亡，但是酒后高浓茶对肾脏的损害作用最小。
⒉酒后饮淡茶及阳性解酒药枳椇子能起到一定解酒作用，但对肾脏有明显的损害。
但本次实验由于死亡率高致样本含量不够，确切的结论有待继续研究。
[关键词]酒，茶，小白鼠，肾功能，病理学在中国，茶能解酒是自古以来就流传的说法。
日常生活中，人们通常用绿茶来帮助消食解酒，且认为茶越浓解酒效果越好。
人们认为，饮茶能够使人大脑兴奋、清醒，酒后饮茶能够让被酒精冲昏了的头脑清醒一些，从而达到“醒酒”的效果。
但近年来，有越来越多的报道指出：过量饮酒后饮茶对肾脏有害无益。
其理论依据为：绿茶的主要成分茶碱有利尿作用，浓茶中的大量茶碱更能迅速发挥利尿作用，促使尚未分解的酒精代谢产物——乙醛过早地进入肾脏，而乙醛对泌尿系统有很大的损害作用。
本实验采用56度白酒以最佳致醉量对小鼠灌胃后，用等量不同浓度的绿茶及阳性对照药物枳椇子对醉酒小鼠进行灌胃的方法，通过检测鼠尿中的尿蛋白、血样中血肌酐、尿素氮指标及对肾脏组织病理切片的观察，对以上两种观点的正确性作出验证。
斑马鱼血管性认知障碍模型的建立研究
第37卷第2期哈尔滨商业大学学报(自然科学版)Vol.37No.2 2021年4月Journal of Harbin University of Commerce(Natural Sciences Edition)Apr.2221斑马鱼血管性认知障碍模型的建立研究刘琳，王伟佳，杨寓迪，康靖飞，王冬雪(哈尔滨商业大学药学院，哈尔滨150276)摘要：利用氮气鼓泡法建立斑马鱼血管性认知障碍模型,为后期血管性认知障碍模型研究提供参考.采用氮气鼓泡法建立血管认知障碍模型；采用T迷宫以斑马鱼进入EC区作潜伏期为指标;社交实验以接触时间、接触次数为指标，检测斑马鱼认知功能；斑马鱼血管性认知障碍模型于建模后60d测定斑马鱼脑匀浆中含总超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)量.氮气模型组结果显示，T迷宫在45d出现非常显著性差异(P<2.21)并持续至66d,与37d相比,45,66d均出现非常显著性差异(P<2.21)；社交实验中37~66d时追逐时间次数呈非常显著性下降(P<2.21)，在37d第2次和4次互相交流时间出现非常显著性下降(P<2.21)；在66d第3次和4次被追逐时间出现显著上升(P<2.21)；与对照组相比，SOD测定结果显示，氮气组显著性下降(P<2.25)；MDA测定结果显示，氮气组显著升高(P<2.25).氮气鼓泡法建立血管性认知障碍模型出现认知功能损伤，同时出现脑内脂质过氧化造成的脑损伤，表明模型成功建立2关键词：斑马鱼;T迷宫；学习记忆；认知障碍模型；氮气鼓泡法；社交实验；超氧化物歧化酶中图分类号：R135文献标识码：A文章编号:1676-2946(2221)22-2145-26Study on establishmeni of a model of zeSrafish vasculan cognitive impairmeni LIU Lin,WANG Wei-jia,YANG Yu-di,KANG Jing-fei,WANG Dong-xue(School of Pharmacy,Harbin University of Commerce ,Harbin135276,Chiga)Abstraci:Tn estaMish a zeirafisOi vescelar cognitiye impaicneet molei by nigo—e buUblingmethod ta provine refereece for tie later study of vescelar cognitive impaimleet.A nitrogeebuUbling meteoo was usee ta estailisC a vescelar coonitive impaibneei mooe;a T maze wasused ta tae the zeerafisC's eet.inta the EC zone as the inceUdtion peboo as an indicator；a sociai6X960111^0usee cootact timr ang nnmber of centacts as indicatorr ta detect zebrafisC's coonitive function;in tac known onstacic moOet；O ic conteet of totai supeoxincdismutase(SOD)ant malonnialdeeyde(MDA)in zeeraasC brain homoneeatc was deterx收稿日期：2222-09-26.作者简介:刘琳(197-),女,副教授，博士，研究方向:中药神经药理学；通信作者:王冬雪(1991-),女,工程师，硕士，研究方向：中药神经药理学•-146-哈尔滨商业大学学报（自然科学版）第37卷mined60days after modeling.The results of the nitrogen model group showed that there wasa veiy signincant difference in thn T mazn at45d(P<0.04)and lasted paredwith37d,45d ant66d haa vere significant differencnu(P<0.01);in thn sociat experiment37d at66d,thr nnmbdr of ceasing tinm decredsed sinnificantly(P<0.0)),ant thrtimr of thr secong ang fourth interactions at37d decredsed sianiacantty(P<0.0));thrtimr of chd at the thircl ant fourth111X110of66d,there was a sinniacagt igcredsu(P<0.01);compared with the cootrol groop,the SOD mcasuremegt results showed a siania-cagt decredsu in thr nitroned groop(P<0.05);thr MDA medsuremedt results s U ow I asianificagt igcredsu in thr nitroned groop(P<0.05).Nitroned methoO to estaniisha vvscalar coonitivv impairmeet moOe has impaimieets in ledrning ant memoiy,as welt asdiffereet deerees of brain damage,the success of the moOe.Key words:zeerafish；T maze;leeming ant memoe；coonitivv impaianedt moOet;nitrooeebuPblmg mehoO;sociat experimedt；superoxine dismutase血管性认知障碍主要由脑缺血缺氧损害所引起，是致老年性痴呆的重大原因,且分类较多,按病因可分成:神经病变性急性、脑血管病、代谢障碍疾病等，其发病率仅次于阿尔茨海默病,是脑血管病后产生的进行性智能障碍综合征［）］.现今相关研究愈来愈热，其中大鼠模型是最为常见的,但其存在模型建立周期长费用昂贵等缺点⑵•斑马鱼作为一种新型模式生物，以其胚胎和幼鱼透明易观察、个体小易于饲养、繁殖周期短、产卵量大、卵子体外受精和发育、对药物敏感、适合高通量药物的筛选等优点，目前广泛用于人类疾病的研究中，已成为疾病研究的最佳模式生物之一⑻.目前建立血管性认知障碍模型方法主要有2-VO法、3-VO法、低压缺氧法、化学试剂法、急性重复缺氧法等⑷.而现今对斑马鱼的缺氧痴呆模型探究较少，鉴于实验室前期成功建立阿尔茨海默症模型基础，本实验采用鼓泡法的方式摸索斑马鱼在不同条件下造成痴呆的程度,通过氮气鼓泡法建立缺氧模型，并检测其T迷宫、社交行为、神经生化指标来探究其发病过程，这样可以更加有效的了解人发病的情况，为实验室后续研究提供依据.）实验部分）.1实验材料）-1.1实验动物及分组野生型AB系成年斑马鱼140条，购自武汉国家斑马鱼资源中心,野生健康红色斑马鱼22条,购自x x花鸟鱼市场.所有斑马鱼均6~8月龄,体长2.5~3.5c叫饲养于独立的循环养殖系统,水温恒定在（28±0.5）°C,pH值为6.8~7.5,电导率为450-550^S/cm,光照/黑暗周期为14h：10h,每日定时喂食2次冰冻丰年虾.将140条野生型AB系成年斑马鱼随机分为对照组5=66）、氮气模型组5=60）.）.1.0实验仪器及设备酶标分析仪（RAYTO公司），紫外可见分光光度计（尤尼柯仪器有限公司），斑马鱼T迷宫（View Poitt公司），斑马鱼社交箱（View Poitt公司），红外线照明系统50cm（View Poitt公司），斑马鱼养殖系统（上海海圣生物实验设备有限公司），净化供水单元（RO纯水机）（上海海圣生物实验设备有限公司）,笔试溶氧仪（上海亚荣生化仪器厂）-）.1.8实验试剂零氧试剂,总蛋白（TP）测定试剂盒，总超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒，微量丙二醛（MDA）测定试剂盒,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-P p）,过氧化氢酶（CAT）测定试剂盒.）.0实验方法）.0.1氮气模型））氮气模型建立在实验开始前,将高纯氮气以大流速充入装有500mL纯净水的广口瓶中，实时用溶氧仪检测水第2期刘琳，等:斑马鱼血管性认知障碍模型的建立研究-147-中的溶氧量直至降到2.2mg/L以下，达到斑马鱼缺氧环境.将模型组放入广口瓶中，并继续以222 mL/min的流速向装有模型组的广口瓶中充入高纯氮气5mt,计时结束后将气管拿出并用保鲜膜密封放置,8h后再一次进行氮气缺氧，每天相同时间点，每天2次,连续充66 d.2)溶氧溶氧含量是指水中氧气的溶解量,斑马鱼是通过溶解在水中的氧气呼吸生存的,溶氧量在水中生存的重要指标之一.溶氧仪可以用来检测现场或实验室内被测样品水溶液内的溶氧含量，通过溶氧电极将产生氧化反应，由此生成的扩散电流和溶液中的氧呈一定关系的原理制作，用于测量水中氧气含量，根据测量数据指标可以更直观有效的看到斑马鱼是否达到低氧、缺氧指标•因此本实验通过使用溶氧仪每次后水中的溶氧量，从而更直观有效的观察斑马鱼所处的环境是否达到低氧,缺氧的指标.1.2.2T迷宫行为学检测以实验室前期建立的T迷宫实验方法为标准⑸，于建立模型后的32、45、66d进行学习记忆能力检测•1)适应性训练:将整组斑马鱼放入T迷宫中自由活动，不设置EC区，每组适应1h.2)实验前期准备:实验前向迷宫中注入斑马鱼养殖水直到短臂相比于其他位置水位高6cm，短臂的两端分别用红色、绿色卡纸包住,左臂用绿色卡纸包住后设置为目标臂并在底部铺满白色砂石，臂中加入人工绿植.3)训练及测试期:每天早上7:02在相同时间点进行实验，将)条斑马鱼放到通道起点处，观察并记录鱼在6min内从起点到第1次进入EC区的潜伏期(当鱼找到并停留37s后才算进入了EC区)，并在EC区内给予食物奖赏.未找到EC区的鱼,6min后引导其进入EC区并停留37 e，食每的独立小鱼缸,测试完后放回原组中•每天1次，每天训练6mt,连续训练4次，第5次为测试期.实验期间在夏天进行,并保证T迷宫未受室内光源光照的影响，周围外部环境安静.1.2.3社交实验检测于建立模型后32、45、66d测试斑马鱼社交行为⑷，全程在社交箱中进行•实验开始前1h将整组斑马鱼分别在独立小鱼缸进行被测鱼单独隔离,避免实验时激发出更多社交行为•社交行为箱中注入养殖水直至水位在7cm,隔离完毕后开始正式实验,将社交鱼(野生红色斑马鱼)放入社交箱后,再取模型组中1条被测鱼放入，让2条鱼适应并进行社交，实验时间为6min,前5min适应熟悉并记录后2min的接触时间及次数，被测鱼追逐社交鱼时接触记为追逐、社交鱼追逐被测鱼时接触记为被追逐、2条鱼互相交流接触时记为互相，为避免社交鱼出现社交疲乏状态，同1条社交鱼跟3条被测鱼进行社交行为测试,也可保证其实验的随机性,测试后放回原组中，每天1次，连续4次.实验期间确保实验室内灯光、物品等空间参照物位置摆放不变,其他实验人员不得发出噪声及进行走动.1-2.2神经生化指标检测1)样品采集处理模型建立后62d,将对照组氮气组进行样品采集•将鱼置于冰上，待鱼麻醉后快速取脑,准确称重,按照质量(/):体积(mL)=19的比例制备12%匀浆，采用低温高速离心机在2552r/min离心10min,取上清液用于生化指标的检测.2)按照总蛋白(TP)测定试剂盒、总超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒、微量丙二醛(MDA)测定试剂盒并按照说明说同比例稀释后测定.1-2.2数据处理应用SPSS22.2软件进行数据处理，结果以平均值土标准差(土S,s)表示.当数据符合正态分布时,采用独立样本T检验和方差分析进行处理;当数据不符合正态分布时,则采用非参数检验秩和检验.P<2.25为显著性差异,P<2.21为有非常显著性差异.2实验结果2- 1氮气模型溶氧量检测用溶氧仪分、后进行连续66d监测.在氮气鼓泡后的溶氧量有一定波动，数据显示明显比实验前低，并且较稳定的保持在低氧状态下，见图1--147 -哈尔滨商业大学学报(自然科学版)第76卷图1 60 d 内溶氧量变化Fivurc 1 Dissolved oxygen amouni cUanget witUin 60 das2.2氮气模型T 迷宫实验结果T 迷宫实验结果如图2所示，与对照组相比，氮气组45、60 d 均出现显著性差异(P OH)；与32 d 相比，对照组在6。
代谢相关脂肪性肝病自然史研究进展
作者单位:200092上海市上海交通大学医学院附属新华医院消化内科第一作者:曾静,女,33岁,医学博士,主治医师㊂E-mail: zjupup@通讯作者:范建高,E-mail:fattyliver2004@ ㊃专家论坛㊃代谢相关脂肪性肝病自然史研究进展曾静,范建高㊀㊀ʌ关键词ɔ㊀非酒精性脂肪性肝病;代谢相关脂肪性肝病;自然史㊀㊀DOI:10.3969/j.issn.1672-5069.2023.06.001㊀㊀Natural history of metabolic dysfunction-associated fatty liver diseases㊀Zeng Jing,Fan Jiangao.Department of Gastroenterology,Xinhua Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University School of Medicine,Shanghai200092,China ㊀㊀ʌKey wordsɔ㊀Non-alcoholic fatty liver diseases;Metabolic dysfunction-associated fatty liver diseases;Natural history㊀㊀非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver diseases,NAFLD)是由于遗传易感个体营养过剩和代谢功能障碍引起的脂肪性肝病,现被更名为代谢相关性脂肪性肝病(metabolic dysfunction-associated fatty liver diseases,MAFLD,或metabolic dysfunction-associated steatotic liver diseases,MASLD)[1-3]㊂超重/肥胖㊁2型糖尿病(type2diabetes mellitus, T2DM)㊁代谢综合征是NAFLD的重要危险因素,并且NAFLD与代谢功能障碍互为因果㊂代谢综合征是NAFLD患者全因死亡㊁肝脏相关死亡和动脉硬化性心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)相关死亡的独立预测指标,而不伴代谢紊乱的NAFLD患者预后与无肝病患者的普通人群相同[4,5]㊂本文介绍了NAFLD/MAFLD/MASLD患者在自然转归方面的研究进展,旨在为脂肪性肝病患者的随访㊁监测和防治提供依据㊂1㊀肝硬化㊁肝癌及其相关死亡风险上升对NAFLD自然史的荟萃分析显示,40.8%非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)患者再次肝活检时肝纤维化程度加重,每年纤维化平均进展0.09期㊂NAFLD和NASH患者全因死亡率(分别为15.44和25.56/1000人/年)㊁肝病相关死亡率(分别为0.77和11.77/1000人/年)较普通人群分别增加1.05和1.94倍[5]㊂尽管NASH是NAFLD的严重类型,但影响NAFLD患者结局的主要因素并非NASH而是肝纤维化㊂此外,年龄也是影响NAFLD患者预后的重要因素㊂对美国1773例肝活检确诊的NAFLD队列中位随访4年发现,NAFLD患者全因死亡率随纤维化程度加剧而升高[6]㊂F0~F2期㊁F3期和F4的NAFLD患者每1000人/年分别死亡0.32例㊁0.89例和1.76例,每100人/年食管胃静脉曲张出血(0.00㊁0.06㊁0.70)㊁腹水(0.04㊁0.52㊁1.20)㊁肝性脑病(0.02㊁0.75㊁2.39)和肝细胞癌(HCC)(0.04㊁0.34㊁0.14)发病率亦随肝纤维化加重而升高,肝脏失代偿事件使NAFLD患者全因死亡风险增加6.8倍,静脉曲张出血㊁腹水㊁肝性脑病发生率与NAFLD患者全因死亡率增加独立相关㊂在一组美国退伍军人NAFLD前瞻性队列研究发现,在平均9年随访期间,在271906例NAFLD患者中有22794例进展为肝硬化,253例并发HCC[7]㊂NAFLD患者肝病进展风险随着代谢综合征组分数量的增多而升高㊂与无代谢紊乱的NAFLD患者比,高血压和血脂紊乱使肝硬化或HCC风险升高1.8倍,而高血压㊁血脂紊乱㊁肥胖㊁T2DM并存的NAFLD 患者肝硬化或HCC风险升高2.6倍,并且代谢紊乱与新发HCC的关联强于肝硬化,以T2DM与HCC发病风险的关联最强㊂对501例T2DM成人通过MRI -PDFF㊁MRE和VCTE联合检查发现,NAFLD㊁进展期肝纤维化和肝硬化患病率分别为65%,14%和6%,在29例肝硬化患者中发现2例HCC和1例胆囊癌[8]㊂多元回归分析显示,肥胖(OR2.50,95% CI1.38~4.54)和使用胰岛素(OR2.71,95%CI 1.33~5.50)与T2DM患者进展期肝纤维化风险增加独立相关㊂在一组纳入64项研究累计625984例成人HCC 发病率的荟萃分析显示,NAFLD相关HCC汇总发病率为1.25/1000人/年(95%CI1.01~1.49),合并进展期肝纤维化或肝硬化的NAFLD患者HCC发病率高达14.46/1000人/年(95%CI10.89~18.04)[9]㊂NAFLD肝硬化患者HCC发病率为0.3 ~4.7/100人/年,而非肝硬化的NAFLD患者HCC 发病率仅为0.01~0.13/100人/年,目前全球大约10%(1%~38%)HCC与NAFLD相关[10]㊂2012~ 2017年期间全球肝硬化和HCC死亡人数增加了11.4%,NAFLD分别占肝硬化和HCC死亡病例的9%和8%,研究期间NAFLD相关肝硬化和HCC年龄标化死亡率(age-standardized mortality rate, ASDR)每年分别增加0.29%和1.42%,并成为全球肝病死亡逐年增加的主要原因[11]㊂2㊀心血管疾病及其相关死亡风险上升尽管NAFLD是一种慢性进展性肝病,然而在20~25年的随访期间仅5%NAFLD患者发生肝硬化,1%~2%患者最终需要肝移植或死于肝病,高达97%~99%NAFLD患者死于肝外合并症,动脉硬化性CVD是NAFLD患者的首要死亡原因[5]㊂一项包括38篇论著累计67070例NAFLD患者CVD患病率的系统综述显示,NAFLD患者冠心病患病风险增加1.33倍,中重度脂肪肝患者冠心病患病率为37.5%,显著高于轻度脂肪肝患者的29.6%㊂NAFLD患者临床和亚临床冠状动脉疾病汇总患病率分别为38.7%和55.4%[12]㊂有关NAFLD与CVD发病率的荟萃分析显示,5802226例中年人在随访中位6.5年期间99668例新发致命性和非致命性CVD事件㊂NAFLD独立于传统的代谢心血管危险因素与致命性和非致命性CVD事件风险中等度增加相关[集合随机效应(HR)=1.45,95%CI1.31 ~1.61)],并且CVD事件发病风险升高与NAFLD 患者肝纤维化分期相关(HR2.50,95%CI1.68~3.72)[13]㊂然而,前瞻性队列研究显示随访中位4年期间不同肝纤维化分期的NAFLD患者CVD事件发生风险相似[6]㊂NAFLD还与心力衰竭发病风险中等度增加独立相关(HR1.50,95%CI1.34~1.67)[14]㊂荟萃分析显示,7951例NAFLD患者颈动脉硬化汇总患病率为35.0%,颈动脉硬化风险较普通人群增加3.2倍㊂25839例NAFLD患者脑卒中汇总患病率为5.0%,缺血性和出血性脑卒中汇总患病率分别为6.1%和2.2%,NAFLD使脑卒中风险增加1.9倍㊂超声判断的脂肪肝程度与颈动脉硬化和脑卒中风险增加密切相关[15]㊂因此,NAFLD与CVD 关系密切,两者享有许多共同危险因素,NAFLD是CVD风险增加的独立危险因素和预测指标㊂然而, PNPLA3等基因多态性相关NAFLD患者CVD事件和死亡风险并不显著增加,但其全因死亡和肝病相关死亡风险增加[16]㊂并存的代谢心血管危险因素显著增加NAFLD患者CVD风险㊂然而,现有的大多数观察性研究设计并不能证明NAFLD和CVD之间的因果关联㊂3㊀肝脏以外恶性肿瘤发病风险中等度增加NAFLD患者并存的代谢性炎症㊁免疫异常和肠道微生态失衡等也会增加肝外癌肿发病风险㊂开滦的一项前瞻性研究队列累计54187例成年男性(其中32.3%有NAFLD)恶性肿瘤患病率的数据显示, NAFLD与总体癌症(HR1.22,95%CI1.10~ 1.36)㊁甲状腺癌(HR2.79,95%CI1.25~6.21)㊁肺癌(HR1.23,95%CI1.02~1.49)发病风险升高密切相关,并且甲状腺癌风险随NAFLD患者血液ALT水平升高而上升,但是NAFLD仅增加吸烟者结直肠癌(HR1.96,95%CI1.17~3.27)和肺癌(HR 1.38,95%CI1.03~1.84)的患病风险,NAFLD与肾癌的关联(HR1.57,95%CI1.03~2.40)仅见于无糖尿病患者[17]㊂荟萃分析显示,10项队列研究累计182202例中年人(其中24.8%有NAFLD)在随访中位5.8年期间8485例新发各种部位的肝外癌肿[18]㊂NAFLD患者食管癌㊁胃癌㊁胰腺癌和结直肠癌高发,NAFLD使消化系统恶性肿瘤发病风险增加1.5~2.0倍㊂NAFLD还使肺癌㊁乳腺癌㊁妇科或泌尿系统癌肿发病风险增加1.2~1.5倍㊂NAFLD相关肝外恶性肿瘤风险上升独立于年龄㊁性别㊁吸烟㊁肥胖㊁糖尿病或其他可能的风险因素㊂基于人口统计学和临床参数评估NAFLD相关恶性肿瘤发病率的64项研究荟萃分析显示,NAFLD患者肝外恶性肿瘤发病率为10.58/1000人/年(95%CI8.14~ 13.02),发病率依次为子宫内膜癌㊁乳腺癌㊁前列腺癌㊁结直肠癌和肺癌[9]㊂NAFLD患者肝外恶性肿瘤发病风险是HCC的8倍多,但是合并进展期肝纤维化或肝硬化的NAFLD患者肝外恶性肿瘤发病率并不显著增加,NAFLD患者10年内肝外恶性肿瘤发病风险独立于肝纤维化分期呈中等程度的上升[9,18]㊂进一步的研究需要破译NAFLD与癌症发病之间的复杂联系㊂4㊀T2DM使慢性肾脏疾病发病风险增加33项队列研究累计501022成人(30.8%为NAFLD)随访中位5年期间27953例新发T2DM, NAFLD患者T2DM发病率较对照群体显著升高(HR 2.19,95%CI1.93~2.48),并且T2DM发病风险随着肝纤维化程度的加重而显著升高(HR3.42,95% CI2.29~5.11)[19]㊂NAFLD患者T2DM风险增加独立于年龄㊁性别㊁肥胖和其他常见代谢心血管危险因素㊂这项研究提示NAFLD使糖尿病发病风险增加2.2倍,并且发病风险与NAFLD潜在的严重程度相关㊂慢性肾脏疾病(chronic kidney disease,CKD)也是NAFLD患者常见的合并症,CKD的诊断主要依据估算的肾小球滤过率<60mL/min/1.73m2,伴或不伴显性蛋白尿㊂在13项研究累计1222032例成人(28.1%为NAFLD),随访中位9.7年期间33840例新发CKD[20]㊂在调整了年龄㊁性别㊁肥胖㊁高血压㊁糖尿病和其他传统风险因素后,NAFLD与CKD 发病风险中度增加相关(HR1.43,95%CI1.33~ 1.54)㊂与F0~F2期NAFLD患者比,F4期患者有更高的T2DM(7.53对4.45/100人/年)和肾功能恶化(2.98对0.97/100人/年)发病率㊂基线50岁及以上的NAFLD患者在随访过程中慢性肾脏疾病发病风险高于肝硬化和HCC发病风险㊂T2DM与NAFLD并存时慢性肾脏疾病发病风险显著高于单纯的NAFLD或T2DM患者[21]㊂5㊀MAFLD比NAFLD患者预后更差在过去的几十年里,NAFLD的诊断必须建立在排除可能引起脂肪肝的其他病因,尤其是过量饮酒㊂然而,随着NAFLD成为全球性的健康问题,结合NAFLD患者的临床特征,临床医生和患者自身应该不仅关注 非酒精性 或其他肝脏疾病,还应关注关键的代谢紊乱,包括胰岛素抵抗和其他代谢综合征组分㊂因此,更名的MAFLD的诊断标准更重视代谢紊乱的存在,并且可与其他肝病共存㊂在一组纳入17项研究累计9808677例成人队列,对MAFLD+/ NAFLD+㊁MAFLD+/NAFLD-㊁MAFLD-/NAFLD+等亚组患者汇总分析发现,大约80%脂肪肝患者同时满足NAFLD和MAFLD诊断标准,15%和5%左右脂肪肝患者分别仅满足MAFLD或NAFLD诊断标准[22]㊂为了阐明NAFLD更名为MAFLD的临床意义, Younossi et al[23]报道美国在第3次全民健康与营养调查(NHANES)超声诊断的12878名脂肪肝患者,随访中位访23年后30%患者死亡㊂除了酒精滥用以外,NAFLD患者和MAFLD患者的临床特征相似,NAFLD和MAFLD患者完全调整模型后的死亡率亦无显著差异,导致NAFLD患者死亡风险上升的原因是其并存的代谢功能障碍而非脂肪肝㊂满足MAFLD但不满足NAFLD标准的脂肪肝患者随访中死亡率显著高于无脂肪肝的对照人群(风险比为1.22),而在对酒精性肝病进行了额外的调整后, MAFLD不再是脂肪肝患者肝病相关死亡的重要危险因素,提示并存的酒精性肝病是MAFLD患者肝病死亡率增加的主要原因㊂基于4因子的肝纤维化指数(FIB-4)ȡ2.67(提示可能存在进展期肝纤维化)是MAFLD(风险比为17.2)和NAFLD患者(风险比为9.3)肝病相关死亡的重要预测因素,并且MAFLD 患者肝病相关死亡率较NAFLD患者升高近50%㊂在美国第三次全国健康和营养调查脂肪肝队列研究随访中位23年的数据,MAFLD患者全因死亡率升高17%(风险比1.17),以心血管死亡率升高最显著[24]㊂MAFLD+/NAFLD-患者全因死亡风险升高最为显著(风险比1.66),而MAFLD/NAFLD+患者死亡率甚至显著低于无脂肪肝的对照组(风险比0.6),可能的原因是该类脂肪肝患者缺乏代谢功能障碍㊂在1076名肝活检证实的慢性乙型肝炎患者, 296例(27.5%)有MAFLD[25]㊂在随访中位9.8年期间,MAFLD与慢性乙型肝炎患者无HCC时间㊁无肝移植时间及无HCC和无肝移植生存率的显著降低密切相关,MAFLD是慢性乙型肝炎患者肝病不良结局的预测因素[25]㊂总之,NAFLD/MAFLD/MASLD是一种累及全身各系统器官的慢性进展性肝病,MAFLD与T2DM和代谢综合征互为因果,共同促进肝硬化㊁CVD㊁CKD㊁以及肝脏和肝外恶性肿瘤的发病[3]㊂NAFLD/ MAFLD/MASLD患者肝外不良结局发生风险大于肝脏不良结局,遗传和表观遗传㊁胰岛素抵抗㊁代谢综合征和T2DM是影响NAFLD/MAFLD/MASLD患者预后的重要因素,MAFLD患者比NAFLD患者肝脏和肝外结局发生不良风险更高㊂CVD和恶性肿瘤是不同纤维化分期的NAFLD/MAFLD/MASLD患者病死的主要原因,而肝病并发症和死亡风险主要随肝纤维化程度加剧而升高㊂无进展期肝纤维化的NAFLD/MAFLD/MASLD患者主要不良结局是CVD 和非肝脏恶性肿瘤,肝硬化㊁HCC及其相关死亡主要发生在合并进展期肝纤维化或肝硬化的患者㊂然而,至今世界卫生组织和我国都仍未将NAFLD/ MAFLD/MASLD纳入慢病管理清单㊂当前,亟需加强对NAFLD/MAFLD/MASLD的规范化管理,在社区㊁基层医院和三级医院的健康管理学科推进对NAFLD/MAFLD/MASLD高危人群的筛查和分层管理工作十分重要㊂建议对NAFLD/MAFLD/MASLD 患者常规筛查代谢综合征组分,特别是T2DM,常规评估进展期肝纤维化和CVD风险,并根据相关指南坚持参加基于年龄分层的非肝脏肿瘤的筛查,肝硬化患者还需要常规监测HCC㊁食管静脉曲张和肝脏功能失代偿,从而改善患者的生存率和生存质量[26-28]㊂ʌ参考文献ɔ[1]Eslam M,Newsome PN,Sarin SK,et al.A new definition for met-abolic dysfunction-associated fatty liver disease:An international expert consensus statement.J Hepatol,2020,73(1):202-209.[2]Rinella ME,Lazarus JV,Ratziu V,et al.A multi-society Delphiconsensus statement on new fatty liver disease nomenclature.J Hep-atol,2023,S0168-8278(23)00418-X.[3]范建高,李小英.NAFLD更名MAFLD㊁MASLD:背景㊁异同㊁对策.中华肝脏病杂志,2023,31(8):789-792.[4]Younossi ZM,Otgonsuren M,Venkatesan C,Mishra A.In patientswith non-alcoholic fatty liver disease,metabolically abnormal indi-viduals are at a higher risk for mortality while metabolically normal individuals are not.Metabolism,2013,62(3):352-360. [5]Younossi ZM,Koenig AB,Abdelatif D,et al.Global epidemiologyof nonalcoholic fatty liver disease-Meta-analytic assessment of prev-alence,incidence,and outcomes.Hepatology,2016,64(1): 73-84.[6]Sanyal AJ,Van Natta ML,Clark J,et al.Prospective study of out-comes in adults with nonalcoholic fatty liver disease.N Engl J Med, 2021,385(17):1559-1569.[7]Kanwal F,Kramer JR,Li L,et al.Effect of metabolic traits on therisk of cirrhosis and hepatocellular cancer in nonalcoholic fatty liver disease.Hepatology,2020,71(3):808-819.[8]Ajmera V,Cepin S,Tesfai K,et al.A prospective study on theprevalence of NAFLD,advanced fibrosis,cirrhosis and hepatocellular carcinoma in people with type2diabetes.J Hepatol, 2023,78(3):471-478.[9]Thomas JA,Kendall BJ,Dalais C,et al.Hepatocellular and extra-hepatic cancers in non-alcoholic fatty liver disease:A systematic review and meta-analysis.Eur J Cancer,2022,173:250-262.[10]MännistöVT,Salomaa V,FärkkiläM,et al.Incidence of liver-re-lated morbidity and mortality in a population cohort of non-alcoholic fatty liver disease.Liver Int,2021,41(11):2590-2600. 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急性肝损伤模型的建立课件
3 改变细胞因子活性 CCl4 引发机体产生 的脂质过氧化产物,如丙二醛和42羟基壬醛, 可引发转化生长因子2β1、TNF2α,白细胞 介素等细胞因子的高表达,后者在CCl4 诱导 的肝纤维化的过程中发挥着重要作用。
3. 在制模过程中可以加入戊巴比妥或乙醇代 替饮水，以加速肝损伤进程。
大鼠急性肝损伤的动物模型
前景
• 目前,肝损伤动物模型的复制主要有生物性、免疫 性、化学性等方法,生物学方法要求实验条件高且 费用昂贵,限制了应用。
• 免疫方法是造成免疫肝损伤,主要用于通过免疫机 制而抗肝损伤的药物研究。如：卡介苗(BCG) 加 脂多糖(LPS) 诱导法 、刀豆蛋白A 诱导法。
• 化学方法则是通过化学性肝毒物质,如四氯化碳、 氨基半乳糖、硫代乙酰胺、黄曲霉素等致肝损伤。
4 引起细胞凋亡 CCl4引发机体产生的自
由基的代谢紊乱会引起脂质过氧化产物的 积累,进而促进肝细胞的直接死亡或者凋亡。 其中,羟基自由基是促使肝细胞凋亡的重要 体内物质。CCl4 引发肝细胞凋亡的机制复 杂,一般认为都是通过激活死亡受体实现的。 另外,CCl4 也可引起肝星形细胞的凋亡。 CCl4 可激活核因子2κB ,引起细胞凋亡。
• 这里我们以四氯化碳性肝损伤模型的建立来浅谈 一下。
实验目的
1.掌握四氯化碳对肝脏的毒性机理，成功建 立其急性肝损伤模型。
2.熟悉建模过程中的各个环节，并能解决相 关问题，真正感受造模的过程，为将来真 正进入实验做铺垫。
四氯化碳性肝损伤的机制
1 引起氧化应激 氧化应激在CCl4 引发肝 损伤的早期发挥着重要作用。X介导的炎症反应相关; 4 (3) 导致肝星形细胞活化。
油酸诱导单纯性肝脂肪变性细胞模型的建立及应用
油酸诱导单纯性肝脂肪变性细胞模型的建立及应用董丽红;张瑞芬;黄菲;魏振承;张名位【摘要】目的探讨人肝癌HepG2细胞单纯肝脂肪变性细胞模型的建立方法与模型的应用.方法体外培养HepG2细胞,以不同浓度的油酸处理24 h诱导细胞脂肪变性,油红O和尼罗红染色定性观察细胞内脂滴蓄积情况,并测定细胞内甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)以及培养液中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平,确定最佳模型浓度;同时,利用此模型观察黄酮类化合物对脂肪变性肝细胞内TG的影响.结果油酸终浓度为0.4mmol·L-1时,肝细胞内有大量脂滴形成,且细胞内TG含量明显增加,而MDA含量、SOD活性及培养液中ALT、AST释放量较正常组无明显变化;槲皮素和表儿茶素可明显降低模型细胞内TG含量.结论采用0.4 mmol·L-1油酸可成功诱导HepG2细胞发生脂肪变性,建立单纯性肝细胞脂肪变性模型,该模型适用于预防非酒精性脂肪肝病的天然降脂药物研究.%Aim To establish an in vitro cell model for investigating hepatic steatosis in the primary stage of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD).Methods Cultured HepG2 cells were divided into different group exposed to different concentrations of oleic acid for 24 h respectively.Lipid droplets in the cells were observed with Oil Red O staining and Nile red staining.The contents of intracellular TG,MDA and SOD and the levels of ALT and AST in the cell supernatant were evaluated to verify the cell model,and the effect of flavonoids on the TG accumulation was observed in oleic acid-induced HepG2.Results A large number of lipid droplets were found in the model group with 0.4 mmol · L-1 oleic acid,which showed markedly increased level of triglyceride without significant changes ofintracellular MDA content and SOD activity and the levels of ALT and AST in the cell supernatant,compared with the control group.Intervention with different doses of quercetin and epicatechin significantly decreased the TG content in the cell model.Conclusion Hepatic steatosis HepG2 cell model can be establishe d by 0.4 mmol · L 1 oleic acid for the studies on lipid-lowering natural drugs in the prevention of NAFLD.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2017(033)011【总页数】5页(P1622-1626)【关键词】油酸;HepG2细胞;脂肪变性;甘油三脂;细胞模型;黄酮类化合物【作者】董丽红;张瑞芬;黄菲;魏振承;张名位【作者单位】广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,农业部功能食品重点实验室,广东省农产品加工重点实验室,广东广州510610;广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,农业部功能食品重点实验室,广东省农产品加工重点实验室,广东广州510610;广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,农业部功能食品重点实验室,广东省农产品加工重点实验室,广东广州510610;广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,农业部功能食品重点实验室,广东省农产品加工重点实验室,广东广州510610;广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,农业部功能食品重点实验室,广东省农产品加工重点实验室,广东广州510610【正文语种】中文【中图分类】R322.47;R329.24;R344.3;R575.5;R977.6非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)是目前世界上广泛流行的一种慢性疾病，其发病过程可由早期阶段的单纯性脂肪肝逐渐发展到非酒精性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis, NASH)，甚至肝纤维化和肝硬化等严重病症。
急性酒精性肝损伤小鼠模型及早期诊断指标GSTA1的研究
急性酒精性肝损伤小鼠模型及早期诊断指标GSTA1的研究刘芳萍;马欣;赵常伟;常轶聪;蔺月霞;李敏敏;刘颖姝;周琼;李植【摘要】为研究谷胱甘肽S转移酶A1(GSTA1)在肝损伤早期诊断中的价值,本试验通过检测血清谷丙转氨酶(GPT)及肝组织指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)变化,成功复制急性酒精性肝损伤小鼠模型;通过时间-效应和剂量-效应关系研究血清中GSTA1和ALT变化.结果显示,给予小鼠灌服乙醇溶液后,2h血清中GSTA1含量变化与对照组相比差异极显著(P＜0.01),而ALT活性变化在6h才显示出一定的差异性(P＜0.05);当乙醇剂量为10 mL/kg体重时,血清中GSTA1含量变化与对照组相比差异极显著(P＜0.01),而当乙醇剂量达到14 mL/kg体重时,ALT活性变化与对照组相比差异极显著(P＜0.01).表明在急性酒精性肝损伤模型中,GSTA1的含量变化在肝损伤早期就可检测出来,作为肝损伤标记物,GSTA1比ALT更敏感.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2015(051)007【总页数】3页(P86-88)【关键词】GSTA1;急性酒精性肝损伤;动物模型;早期诊断指标【作者】刘芳萍;马欣;赵常伟;常轶聪;蔺月霞;李敏敏;刘颖姝;周琼;李植【作者单位】东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030【正文语种】中文【中图分类】S865.1+3研究表明，急性酒精性肝损伤的发病机制与其代谢产物引起的肝脏氧化应激[1]及肝细胞凋亡[2]密切相关。
葛根素缓解非酒精性脂肪肝小鼠肝脏代谢紊乱
葛根素缓解非酒精性脂肪肝小鼠肝脏代谢紊乱丁文姣1，葛晶晶1，吴优1，虞雨娟1，周峰2，阮征1*（1.南昌大学食品学院，江西南昌 330047）（2.苏州登顶医疗科技有限公司，江苏苏州 215000）摘要：高脂肪和/或高果糖摄入等因素导致过多的脂肪储存在肝脏形成非酒精性脂肪肝病（NAFLD），其全球发病率为25.2%，呈快速上升趋势。
该文采用高糖高脂诱导NAFLD小鼠模型，研究了葛根素对NAFLD的干预作用。
结果显示NAFLD小鼠体质量、肝指数分别下降13.7%、14.9%；H&E染色提示肝脏组织损伤减轻，脂肪空泡几乎消失；ELISA测定炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6浓度分别下降62.9%、60.5%和61.0%。
采用LC-MS非靶向代谢组学分析NAFLD小鼠的肝脏代谢，结果表明葛根素提高代谢物L-蛋氨酸、L-丝氨酸、L-天冬酰胺、L-苯丙氨酸和氨基己二酸的水平，调控了半胱氨酸和蛋氨酸代谢，甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢和苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成等途径的紊乱；下调脂质代谢物油酸水平，促进鞘脂降解；并调节磷酸戊糖代谢、维生素代谢、嘌呤及嘧啶代谢途径的代谢物水平。
因此，葛根素调控氨基酸代谢、脂质代谢等途径的紊乱，对高糖高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝发挥保护作用，为饮食调控脂肪代谢乃至脂肪肝奠定实验基础。
关键词：葛根素；非酒精性脂肪肝；非靶向代谢组学；代谢物文章编号：1673-9078(2024)04-8-17 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2024.4.0510Puerarin Relieves Liver Metabolic Disorders in Mice with NonalcoholicFatty Liver DiseaseDING Wenjiao1, GE Jingjing1, WU Y ou1, YU Yujuan1, ZHOU Feng2, RUAN Zheng1*(1.College of Food Science, Nanchang University, Nanchang 330047, China)(2.Suzhou Globalpeak High-tech Co, Ltd., Suzhou 215000, China)Abstract: High fat and/or high fructose intakes lead to excessive fat storage in the liver, resulting in nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD), whose global incidence rate is 25.2% and rising rapidly. In this study, the effects of puerarin intervention on NAFLD were investigated in a mouse model induced by high-fructose and high-fat diets. The results show that the body weight and liver index of NAFLD mice decreased by 13.7% and 14.9%, respectively; the H&E staining indicated that the liver tissue damage was mitigated and the fat vacuoles almost disappeared; and the concentrations of inflammatory factors TNF-α, IL-1β, and IL-6 decreased by 62.9%, 60.5% and 61.0%, respectively, as determined by ELISA.LC-MS non-targeted metabolomic analysis of liver metabolism in the NAFLD mice showed that puerarin increased the levels of metabolites L-methionine, L-serine, L-asparagine, L-phenylalanine, and aminoadipic acid; modulated the disturbances 引文格式：丁文姣,葛晶晶,吴优,等.葛根素缓解非酒精性脂肪肝小鼠肝脏代谢紊乱[J].现代食品科技,2024,40(4):8-17.DING Wenjiao, GE Jingjing, WU You, et al. Puerarin relieves liver metabolic disorders in mice with nonalcoholic fatty liver disease [J]. Modern Food Science and Technology, 2024, 40(4): 8-17.收稿日期：2023-05-04基金项目：国家自然科学基金项目（32060539）作者简介：丁文姣（1997-），女，在读硕士研究生，研究方向：营养保健与功能食品，E-mail：通讯作者：阮征（1978-），男，博士，教授，研究方向：分子营养与功能食品，E-mail：8of cysteine and methionine metabolism pathways, glycine, serine, and threonine metabolism pathways, and phenylalanine, tyrosine and tryptophan biosynthesis pathways. In addition, puerarin down-regulated the levels of the lipid metabolite oleic acid and promoted the degradation of sphingolipids and regulated the levels of pentose phosphate metabolites, vitamin metabolites, and purine and pyrimidine metabolites. In summary, puerarin regulates the disturbances of amino acid and lipid metabolism pathways, and plays a protective role against NAFLD induced by high-fructose and high-fat diets, laying an experimental foundation for dietary regulation of fat metabolism and even fatty liver.Key words: puerarin; nonalcoholic fatty liver; non-targeted metabonomics; metabolites非酒精性脂肪肝病（NAFLD）是以肝细胞中脂肪过度沉积为特征的一类慢性综合征，发病率达到25.2%[1] 。
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戴文聪， 等．急性酒精性脂肪肝斑马鱼模型的建立
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戴文聪，刘 莉，王坤元，侯金林 １ ０ ５ １ ５ ） （ 南方医科大学南方医院 肝病中心，广州 ５
摘要： 目的 建立一种简单易行、 重复性好的急性酒精性脂肪肝斑马鱼模型。 方法 选取野生型斑马鱼 ２ ８ ８条， 随机均分为对 照组和 ２ ％、 ２ ． ５ ％、 ３ ％乙醇处理组， 于胚胎受精后 ５ｄ 给予相应体积浓度比乙醇处理。观察斑马鱼一般生存率和表型变化， 用整体 ％、 ２ ． ５ ％和 ３ ％ 乙醇处理组斑马鱼 ３ ２ｈ内生存率分别为 油红染色评判脂肪肝发生率， 石蜡切片观察肝组织病理形态。 结果 ２ １ ０ ０ ％、 （ ９ １ ． ２ １± １ ． ６ １ ） ％、 ０ ％。３ ％乙醇处理 ２ ４ｈ 即出现畸形。整体油红染色显示 ２ ％ 乙醇处理组斑马鱼在处理 ３ ２ｈ后脂肪肝发 生率显著高于对照组（ Ｐ＝ ０ ． ０ ０ ２ ） 。病理切片可见 ２ ％乙醇处理 ３ ２ｈ 后斑马鱼肝细胞肿胀， 肝内脂滴沉积增多， 脂肪肝形成。结论 利用 ２ ％乙醇处理胚胎受精后 ５ｄ 的幼鱼 ３ ２ｈ 成功地建立急性酒精性脂肪肝斑马鱼模型， 为进一步开展急性酒精性脂肪肝的发病 机制研究和药物筛选奠定实验基础。 关键词： 脂肪肝， 酒精性； 模型， 动物； 斑马鱼 中图分类号： Ｒ ５ ７ ５ ． ５ 文献标志码： Ａ 文章编号： １ ０ ０ １－ ５ ２ ５ ６ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ４－ ０ ２ ８ ６－ ０ ４
收稿日期： ２ ０ １ ２－ １ １－ ２ ２ 修回日期： ２ ０ １ ２－ １ ２－ １ ４ 作者简介： 戴文聪（ １ ９ ８ ７－ ） ， 女， 硕士， 主要从事脂肪性肝病研究。 通信作者： 侯金林， 电子信箱：ｊ ｌ ｈ ｏ ｕ ｓ ｍ ｕ ＠ｙ ａ ｈ ｏ ｏ ． ｃ ｏ ｍ ． ｃ ｎ 。
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目前， 酒精性脂肪肝已成为国内外研究的一大热 点。酒精性脂肪肝是过量酒精摄入后出现的一个早期 的和可逆的临床阶段， 可进展成为酒精性肝炎、 肝硬化
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