体外抗原抗体反应概述(ppt文档)
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第一章抗原抗体反应讲解学习
三、亲水胶体转化为疏水胶体
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的 血清学反应条件下均带有负电荷，使极化 的水分子在其周围形成水化层，成为亲水 胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。 当Ag与Ab结合后，表面电荷减少，水化层 变薄；而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水 接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏 水胶体。此时在电解质(如NaCl)的作用下， 使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形 成可见的Ag-Ab复合物。
抗原抗体结合力示意图
l. 静电引力
➢ 抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧 基基团之间相互的引力，称为静电引力， 又称库伦引力。
➢例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的 游离氨基(-NH3+)和酸性氨基酸的游离羧基 (-COO-)可与抗原分子上带相反电荷的对应 基团相互吸引。这种引力的大小与两个相 互作用基团间的距离平方成反比。
2.范德华引力
➢ 抗原和抗体相互接近时，由于分子的极 化作用而出现的引力，称范德华引力。
➢结合力的大小与两个相互作用基团的极化 程度的乘积成正比、与它们之间距离的 7 次方成反比，键能约为4.2-12.5kJ/moL。 这种引力的能量小于静电引力。
3.氢键结合力
➢ 供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引 力。在抗原抗体反应中，羧基、氨基和 羟基是主要供氢体，而羧基氧、羧基碳 和肽键氧等原子是主要受氢体。
➢氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离 的6次方成反比，键能约20.9kJ/mol。
4.疏水作用力
➢ 两个疏水基团在水溶液中相互接触时，由 于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水 作用力，或称为疏水键。
➢当抗原抗体反应时，抗原决定簇与抗体上 的结合点靠近，互相间正、负极性消失， 由静电作用形成的亲水层立即失去，从而 促进抗原与抗体的相互吸引而结合。疏水 作用力在抗原抗体反应中的结合是很重要 的。提供的作用力最大，约占总结合力的 50%。
抗原抗体反应的原理PPT课件
免疫细胞（Immune cells） 泛指所有参与免疫应答及与免疫应答活动相关的细胞。
免疫活性细胞（Immune competent cell，ICC） 能够接受抗原刺激、产生特异性的活化、增殖、分化并形成效
应产物的淋巴细胞。
第7页/共50页
免疫细胞的类型
红细胞 血小板 肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞 NK细
半抗原-C-O-C-O-CH2CH（CH3）2 + 蛋白质- NH2 半抗原-CO- NH -蛋白质 + HO-CH2CH（CH3）2
半抗原与载体直接联接
第43页/共50页
琥珀酸酐法
OO 半抗原-CH2 –OH + C-O-C
CH3 CH3
O 半抗原-CH2 –O-C-(CH2 ) 2-COOH
半抗原与载体间接联接
第4页/共50页
第二节 有关免疫学基本概念
一、抗原的概念与属性 二、免疫细胞的概念与分类 三、免疫应答的概念与过程
第5页/共50页
抗原的概念与属性
免疫原性——可识别、可反应性 （诱导机体产生免疫应答的特性） 免疫反应性 ——选择结合性 （和免疫应答产物特异性结合的特性）
第6页/共50页
免疫细胞的概念与分类
第8页/共50页
免疫应答的概念与过程
免疫应答（immune response） 免疫系统接触抗原后，免疫细胞对抗原进行识别；并使特异性淋巴细胞
活化、增殖；表现出免疫效应的过程。 免疫应答的阶段 1、抗原识别阶段（antigen-recognizing phase） 2、淋巴细胞活化阶段（lymphocyte-activating phase） 3、抗原清除阶段（antigen-eliminating phase）
免疫活性细胞（Immune competent cell，ICC） 能够接受抗原刺激、产生特异性的活化、增殖、分化并形成效
应产物的淋巴细胞。
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免疫细胞的类型
红细胞 血小板 肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞 NK细
半抗原-C-O-C-O-CH2CH（CH3）2 + 蛋白质- NH2 半抗原-CO- NH -蛋白质 + HO-CH2CH（CH3）2
半抗原与载体直接联接
第43页/共50页
琥珀酸酐法
OO 半抗原-CH2 –OH + C-O-C
CH3 CH3
O 半抗原-CH2 –O-C-(CH2 ) 2-COOH
半抗原与载体间接联接
第4页/共50页
第二节 有关免疫学基本概念
一、抗原的概念与属性 二、免疫细胞的概念与分类 三、免疫应答的概念与过程
第5页/共50页
抗原的概念与属性
免疫原性——可识别、可反应性 （诱导机体产生免疫应答的特性） 免疫反应性 ——选择结合性 （和免疫应答产物特异性结合的特性）
第6页/共50页
免疫细胞的概念与分类
第8页/共50页
免疫应答的概念与过程
免疫应答（immune response） 免疫系统接触抗原后，免疫细胞对抗原进行识别；并使特异性淋巴细胞
活化、增殖；表现出免疫效应的过程。 免疫应答的阶段 1、抗原识别阶段（antigen-recognizing phase） 2、淋巴细胞活化阶段（lymphocyte-activating phase） 3、抗原清除阶段（antigen-eliminating phase）
详细介绍抗原抗体反应
• “应”——指抗原刺激机体产生免疫应答产物即抗体或免疫效应细胞； • “答”——指相应抗原与免疫应答产物结合并将其排除体外。
抗原的理化性质
✓抗原多是分子量在4000以上的生物大分子。无机物溶解于水以后以离子的形 式存在，不能与抗原识别受体形成足够数量的非共价键，故不能成为抗原。
✓蛋白质、多糖、脂多糖和DNA等是常见的抗原。
详细介绍抗原抗体反应
• 抗原的基本知识 • 抗原决定簇 • 抗原-抗体相互作用
2
一、抗原的基本知识
抗原(Antigen)
• 是指那些能够通过TCR和BCR特异性结合而激活T或B淋巴细胞、诱导正或负免 疫应答的物质。
• 正应答导致抗体和效应T细胞的产生，而负应答则引起宿主对抗原的无反应状 态，即免疫耐受。
42
四、阶段性
第一阶段：抗原与抗体发生特异性结合阶段 特点：反应快
第二阶段：反应可见阶段 特点：反应时间较长
43
抗原抗体反应影响因素
影响抗原抗体反应的因素很多，主要有两个方面：一是抗原抗体本身的因素； 另一方面是反应环境因素。 一、反应物自身因素 抗原抗体反应中，抗原和抗体是反应的主体，所以它们的特性直接影响其结合 情况。 (一)抗原 抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体反应的结 果。
21
三、抗原-抗体相互作用
• 抗原抗体反应的原理 • 影响抗原抗体反应的因素 • 抗原抗体反应的应用
放免测定、Elisa、Western Blot······
22
抗原抗体反应的原理
抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结 合反应。
体内：体液免疫应答的效应作用 包括
体外：各种免疫学检测技术
44
抗原的理化性质
✓抗原多是分子量在4000以上的生物大分子。无机物溶解于水以后以离子的形 式存在，不能与抗原识别受体形成足够数量的非共价键，故不能成为抗原。
✓蛋白质、多糖、脂多糖和DNA等是常见的抗原。
详细介绍抗原抗体反应
• 抗原的基本知识 • 抗原决定簇 • 抗原-抗体相互作用
2
一、抗原的基本知识
抗原(Antigen)
• 是指那些能够通过TCR和BCR特异性结合而激活T或B淋巴细胞、诱导正或负免 疫应答的物质。
• 正应答导致抗体和效应T细胞的产生，而负应答则引起宿主对抗原的无反应状 态，即免疫耐受。
42
四、阶段性
第一阶段：抗原与抗体发生特异性结合阶段 特点：反应快
第二阶段：反应可见阶段 特点：反应时间较长
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抗原抗体反应影响因素
影响抗原抗体反应的因素很多，主要有两个方面：一是抗原抗体本身的因素； 另一方面是反应环境因素。 一、反应物自身因素 抗原抗体反应中，抗原和抗体是反应的主体，所以它们的特性直接影响其结合 情况。 (一)抗原 抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体反应的结 果。
21
三、抗原-抗体相互作用
• 抗原抗体反应的原理 • 影响抗原抗体反应的因素 • 抗原抗体反应的应用
放免测定、Elisa、Western Blot······
22
抗原抗体反应的原理
抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结 合反应。
体内：体液免疫应答的效应作用 包括
体外：各种免疫学检测技术
44
《抗原抗体反应》课件
夹心反应
总结词
指抗原和抗体结合后，其复合物可与其 他物质结合，形成夹心结构所引发的反 应。
VS
详细描述
在夹心反应中，抗原和抗体结合后，其复 合物可以与另一种物质结合，形成一种夹 心的结构。这种反应可以显著增加反应的 灵敏度，常用于检测低浓度的抗原。例如 在酶联免疫吸附试验（ELISA）中，酶标 板上的抗体与抗原结合后，再与酶标记的 抗体结合，形成夹心结构。
抗体
指由抗原刺激机体免疫系统产生的，能与相应抗原特异性结合的 球蛋白。
抗原抗体的特性
特异性
抗原和抗体之间的结合具有高度的特异性，即一种 抗原只能与相应的抗体发生结合反应。
亲和力
抗原和抗体之间的结合力称为亲和力，亲和力的大 小决定了抗原抗体反应的强弱。
可逆性
抗原抗体结合后形成的复合物在一定条件下可以解 离，即抗原抗体反应具有可逆性。
凝集反应
观察抗原抗体结合后颗粒物的凝集情况，判断反 应结果。
荧光免疫技术
利用荧光物质标记抗体或抗原，通过荧光信号的 强弱判断反应结果。
06
抗原抗体反应的注意事项
实验前的准备
实验材料准备
确保抗原和抗体溶液的浓 度和纯度，选择适当的标 记物如荧光染料、酶等。
实验设备检查
检查实验所需仪器设备， 如离心机、显微镜、酶标 仪等，确保其正常运行。
02
抗原抗体反应的原理
抗原抗体的结合力
02
01
03
静电吸引
抗原和抗体带有相反的电荷，通过静电吸引相互结合 。
氢键
抗原和抗体中的极性基团形成氢键，增强结合力。
疏水相互作用
抗原和抗体的非极性基团相互靠近，形成疏水键。
抗原抗体的亲和力
《抗原抗体反应》课件
免疫测定技术
酶联免疫吸附试验（ELISA）
01
利用抗原抗体反应的原理，通过酶标记技术检测样本中微量抗
原或抗体的方法。
免疫荧光技术
02
利用抗原抗体反应标记荧光物质，通过荧光显微镜观察荧光信
号，对细胞或组织中的抗原进行定位和定性分析。
免疫印迹技术
03
将抗原抗体反应与电泳技术结合，分离并检测复杂样本中的抗
免疫学领域的发展趋势
免疫疗法
随着免疫疗法的发展，抗原抗体反应在肿瘤、感染等疾病的治疗中具有广阔的应用前景。
免疫预防
利用抗原抗体反应，研发新型疫苗，提高预防传染病的效果。
THANKS
感谢观看
亲和力定义
抗原和抗体结合时，它们 之间的亲和力是指它们相 互吸引的强度和稳定性。
亲和力常数
亲和力常数是用来描述抗 原和抗体结合强度的物理 量，其值越大表示结合越 稳定。
亲和力影响因素
亲和力受到多种因素的影 响，如抗原抗体的结构、 电荷分布、溶剂环境等。
抗原抗体反应的动力学
反应速率
抗原抗体反应的动力学特征包括 反应速率和反应机制。
等。
05
抗原抗体反应的实验操作
抗原抗体的制备
抗原的制备
选择适当的抗原物质，经过适当的处理和纯化，确保抗原的纯度和特异性。
抗体的制备
免疫动物以产生特异性抗体，通过细胞培养或杂交瘤技术制备单克隆抗体。
抗原抗体的纯化
亲和层析
利用抗原抗体特异性结合的特性，通 过亲和层析介质分离纯化抗体。
凝胶过滤层析
利用分子大小差异进行分离，排除杂 质，纯化抗原抗体。
详细描述
当抗原和抗体结合后，由于分子量增 大，可形成肉眼可见的沉淀物。这种 沉淀反应可用于检测抗原或抗体的存 在，如免疫比浊法测定抗原的浓度。
2章抗原抗体 Microsoft PowerPoint 演示文稿 (1)
Fab片段与抗原表位的结合能力。用结合常数K反应出亲和
力的大小。越大亲和力越高。
抗体
抗体
抗原 高亲和力
抗原 低亲和力
抗原抗体的亲和力示意图
多价抗体与抗原分子间的结合能力称为亲合力(avidity)。
Ag
Ig-Fab 亲和力
Ag
IgG 亲合力
Ag
IgM
亲合力
抗原抗体的亲和力和亲合力示意图
第二节 抗原抗体反应的特点
位
抗A抗体
特异反应与交叉反应示意图
交叉反应 特异反应 交叉反应
3.免疫学检验中也利用交叉反应进行诊断 变形杆菌与立克次氏体有相同的抗原表位，用变形杆菌代
替立克次氏体作为抗原来检测怀疑斑疹伤寒病人血清进行凝 集实验，称为外-斐(Weil-Felix)实验。
交叉反应可影响血清学诊断的准确性。
二、可逆性 抗原抗体结合是分子表面的非共价结合，形成的复合 物在一定条件下可以解离，称之为可逆性。
单价抗原与抗体结合无网格形成
二.抗体 1.抗体的来源
家兔抗体，等价带较宽，适用于做诊断试剂。 马抗体等价带较窄（等价带较窄对抗原抗体的比例要求较 高）一般做免疫治疗。 单克隆抗体不用于凝集或沉淀反应。
2.浓度 抗体浓度适宜。 过大过小都会影响抗原抗体复合物的形成。
3.亲和性 抗体的亲和性又称之为亲和力。 再次应答所产生抗体(IgG)的平均亲和力高于初次免
几乎无游离的抗原或抗体。 ③抗原过量：后带现象(postzone)。
沉
淀
物
抗体过剩带
形 成
prezone
量
①
等价带
equivalence zone
②
抗原过剩带 postzone
抗原抗体反应
是主要供氢体，而羧基氧、羧基碳和肽键氧等
原子是主要受氢体，能的大小取决于方向即氢
键具有高度的方向性，因此范德华力更具有特
异性。氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离
的6次方成反比，键能约20·9kJ/mol。
4.疏水作用力
❖
两个疏水基团在水溶液中相互接触时，
由于对水分子排斥而趋向聚集的力称为疏水作
用力，或称为疏水键。当抗原抗体反应时，抗
抗原决定簇与抗体超变区必须紧密接触，才能有
足够的结合力，使抗原抗体分子结合在一起。
一、抗原抗体结合力
❖
抗原和抗体的结合虽然是互补性的特异性
结合，但并不形成牢固的共价键，只是通 过非共价
键结合，结合方式类似蛋白质和细胞受体或酶与底
物之间的结合。抗原与抗体这种弱的结合力涉及下
列几种分子间的作用力。
l. 静电引力
❖ ×游离抗体浓度
❖
K代表抗体结合抗原的亲和力。K值
大的抗体与抗原牢固结合，不易解离，称该抗
体有高亲和力。
三、亲水胶体转化为疏水胶体
❖
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通
常的血清学反应条件下均带有负电荷，使极化
的水分子在其周围形成水化层，成为亲水胶体，
因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。当抗原与
❖
实验证明，在同一抗原抗体反应系统
中，不管抗原和抗体浓度如何变化，其沉淀反
❖ 比例性是指抗原与抗体发生可见反应需遵循一 定的量比关系，只有当二者浓度比例适当时，才出现 可见反应。以沉淀反应为例，在加入固定量抗体的一 排试管中再依次加入一定体积的递增浓度的抗原进行 反应时，发现随着抗原浓度的增加，沉淀很快大量出 现，但超过一定范围之后，沉淀速度和沉淀量随抗原 浓度增加反而迅速降低，甚至到最后不出现沉淀。沉 淀反应的速度反映了参加反应的抗原和抗体浓度的适 合程度，适合程度高反应快，反之则慢。通常把最迅 速出现沉淀时的抗原抗体的浓度比或量比称为抗原抗 体反应的最适比。
《抗原抗体反应原理》课件
免疫应答机制研究
通过研究抗原与抗体的相互作用，深 入了解免疫应答的机制和过程，为疫 苗研发、免疫治疗等提供理论基础。
自身免疫性疾病机制研究
通过对自身抗体与自身抗原的反应进 行研究，揭示自身免疫性疾病的发病 机制，为治疗提供新思路。
免疫细胞功能分析
利用抗原抗体反应检测免疫细胞表面 的抗原标志，分析免疫细胞的功能和 亚型，为免疫学研究提供有力工具。
抗体的纯化
通过一系列分离纯化技术，去除血清中的其 他成分，提高抗体的纯度，常用的方法有离 心、凝胶电泳、亲和层析、离子交换层析等 。
抗原抗体反应的检测方法
沉淀反应
抗原和抗体结合后，在一定条 件下形成肉眼可见的沉淀物， 常用的方法有单向免疫扩散、 双向免疫扩散、对流免疫电泳 等。
凝集反应
抗原和抗体结合后，引起颗粒 性抗原的凝集现象，常用的方 法有直接凝集、间接凝集等。
Байду номын сангаас
抗原抗体的分类
按作用对象分类
外源性抗原和内源性抗原。外源性抗原是指来自机体外部的抗原，如细菌、病 毒等；内源性抗原是指来自机体内部的抗原，如变性或损伤的组织细胞。
按功能分类
完全抗原和半抗原。完全抗原是指具有免疫原性和反应原性的抗原物质，能够 刺激机体产生免疫应答；半抗原是指仅有反应原性而无免疫原性的抗原物质， 不能刺激机体产生免疫应答。
影响因素
亲和力受到抗原和抗体分子间的电荷分布、空间构象、结合位点数目以及溶液环 境等多种因素的影响。
抗原抗体的特异性
特异性的含义
特异性是指抗原和抗体结合的专一性，即一种抗原只能与相 应的抗体发生特异性结合。
决定因素
抗原抗体的特异性是由其分子表面的化学基团决定的，这些 化学基团在空间构象上互补，使得抗原和抗体能精确地结合 在一起。
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第七章 抗原抗体反应
（2009级检验） 授课：微生物学与免疫学教研室 沈小波
目的要求
掌握：抗原抗体反应的原理及特点 前带、后带、亲合性、亲合力的概念
熟悉：影响抗原抗体反应的因素 了解：抗原抗体反应的基本类型
抗原（Antigen）
Ag 抗体(Antibody)
Ab Ag
Ab
体内
抗原抗体反应----抗原与相应抗体的特异性结 合反应
体外
第一节 抗原抗体反应的原理
抗原抗体反应的特异性：基于抗原抗体两种 分子间的结构互补性和亲和性。
反应分两个阶段
第一阶段： Ag-Ab发生特异性结合
第二阶段： 出现肉眼可见反应
一、抗原抗体结合力
氢键结合力
静电引力 范德华力 疏水作用力 （最主要）
Ab
O N
+-
Ag
H
N
H
O
+
+-
H2O
二、抗原抗体的亲和性和亲和力
第二节 抗原抗体反应的特点
特异性 比例性 可逆性
1、高度特异性（specificity)
抗原抗体反应的特 异性是指抗原分子上的 抗原决定簇和抗体分子 超变区结合的特异性， 由这两个分子间空间结 构的互补性决定。
Ab
Ag
抗原决定簇
抗
原
抗体
CDR
交叉反应
——两种不同的抗原具有部分相同或类 似结构的抗原决定簇，可与彼此相应的 抗血清（抗体）发生反应。
思考题
名词解释： 等价带、带现象、前带、后带、抗体的亲和力与亲合力
问答题： 1、有哪些因素可以影响抗原抗体反应？点？ 3、抗原抗体的结合反应有哪些分子间作用力参与？
起主要作用的是哪种？ 4、前带与后带的区别与意义？
凝集反应：
肉眼可见的 沉淀反应
颗粒性抗原 适量电解质 肉眼可见的凝集块 相应的抗体
（可溶性抗原吸附于与免疫无关的颗粒性载体上）
补体参与的反应：抗原抗体复合物可激活、 固定补体，利用补体的溶细胞效应测定抗体 或抗原。
中和反应：病毒或外毒素。 免疫标记技术：用荧光素、放射性物质、
酶、胶体金、生物素等标记抗原或抗体,以检 测相应的抗体或抗原。
Ab1
在抗原和抗体分子一方 或双方均以单效价存在 的情况下，两者之间的 结合力——亲和性
Ab1
在抗原和抗体分子均以双效 价或多效价存在的情况下， 两者之间的结合力——亲合 力（多价优势）
亲合力
• 多个抗原决定簇与多价抗体间的总结合力
Keq =
104
Affinity
106 Avidity
1010 Avidity
第三节 影响抗原抗体反应的因素
二、反应环境条件 1、电解质:才能形成大块复合物 2、pH值 3、温度 4、适度的震荡
第四节 抗原抗体反应的类型
凝集反应 沉淀反应 补体参与的抗原抗体反应 中和反应 免疫标记技术
抗原抗体反应的类型
沉淀反应： 可溶性抗原 适量电解质 相应抗体
3、可逆性(reversibility)
[Ag] + [Ab]
[AgAb]
[AgAb]结合常数） K=
[Ag][Ab]（解离常数）
影响因素：1、亲和力；2、环境因素
第三节 影响抗原抗体反应的因素
一、反应物自身的因素 1、抗原：理化性状、表面抗原决定簇的种类 和数量 2、抗体：来源、与抗原合适的比例、特异性、 亲和力和亲合力
2、比例性(proportionality)
抗原与抗体发生可见反应需要一定的量 比关系，只有二者浓度比例适当时，才形成 较大的抗原抗体结合物。
Ab Ag
沉 淀 物 总 量
前带 等价带 后带
抗原浓度
等价点：最迅速出现可见反应时的抗原抗体的浓度比或量比。 带现象：因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应。
（2009级检验） 授课：微生物学与免疫学教研室 沈小波
目的要求
掌握：抗原抗体反应的原理及特点 前带、后带、亲合性、亲合力的概念
熟悉：影响抗原抗体反应的因素 了解：抗原抗体反应的基本类型
抗原（Antigen）
Ag 抗体(Antibody)
Ab Ag
Ab
体内
抗原抗体反应----抗原与相应抗体的特异性结 合反应
体外
第一节 抗原抗体反应的原理
抗原抗体反应的特异性：基于抗原抗体两种 分子间的结构互补性和亲和性。
反应分两个阶段
第一阶段： Ag-Ab发生特异性结合
第二阶段： 出现肉眼可见反应
一、抗原抗体结合力
氢键结合力
静电引力 范德华力 疏水作用力 （最主要）
Ab
O N
+-
Ag
H
N
H
O
+
+-
H2O
二、抗原抗体的亲和性和亲和力
第二节 抗原抗体反应的特点
特异性 比例性 可逆性
1、高度特异性（specificity)
抗原抗体反应的特 异性是指抗原分子上的 抗原决定簇和抗体分子 超变区结合的特异性， 由这两个分子间空间结 构的互补性决定。
Ab
Ag
抗原决定簇
抗
原
抗体
CDR
交叉反应
——两种不同的抗原具有部分相同或类 似结构的抗原决定簇，可与彼此相应的 抗血清（抗体）发生反应。
思考题
名词解释： 等价带、带现象、前带、后带、抗体的亲和力与亲合力
问答题： 1、有哪些因素可以影响抗原抗体反应？点？ 3、抗原抗体的结合反应有哪些分子间作用力参与？
起主要作用的是哪种？ 4、前带与后带的区别与意义？
凝集反应：
肉眼可见的 沉淀反应
颗粒性抗原 适量电解质 肉眼可见的凝集块 相应的抗体
（可溶性抗原吸附于与免疫无关的颗粒性载体上）
补体参与的反应：抗原抗体复合物可激活、 固定补体，利用补体的溶细胞效应测定抗体 或抗原。
中和反应：病毒或外毒素。 免疫标记技术：用荧光素、放射性物质、
酶、胶体金、生物素等标记抗原或抗体,以检 测相应的抗体或抗原。
Ab1
在抗原和抗体分子一方 或双方均以单效价存在 的情况下，两者之间的 结合力——亲和性
Ab1
在抗原和抗体分子均以双效 价或多效价存在的情况下， 两者之间的结合力——亲合 力（多价优势）
亲合力
• 多个抗原决定簇与多价抗体间的总结合力
Keq =
104
Affinity
106 Avidity
1010 Avidity
第三节 影响抗原抗体反应的因素
二、反应环境条件 1、电解质:才能形成大块复合物 2、pH值 3、温度 4、适度的震荡
第四节 抗原抗体反应的类型
凝集反应 沉淀反应 补体参与的抗原抗体反应 中和反应 免疫标记技术
抗原抗体反应的类型
沉淀反应： 可溶性抗原 适量电解质 相应抗体
3、可逆性(reversibility)
[Ag] + [Ab]
[AgAb]
[AgAb]结合常数） K=
[Ag][Ab]（解离常数）
影响因素：1、亲和力；2、环境因素
第三节 影响抗原抗体反应的因素
一、反应物自身的因素 1、抗原：理化性状、表面抗原决定簇的种类 和数量 2、抗体：来源、与抗原合适的比例、特异性、 亲和力和亲合力
2、比例性(proportionality)
抗原与抗体发生可见反应需要一定的量 比关系，只有二者浓度比例适当时，才形成 较大的抗原抗体结合物。
Ab Ag
沉 淀 物 总 量
前带 等价带 后带
抗原浓度
等价点：最迅速出现可见反应时的抗原抗体的浓度比或量比。 带现象：因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应。