医学形态学——实验课PPT课件
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微生物形态学检验-PPT
➢ 培养特性：在沙氏培养基或营养琼脂上培养5-7日 可见菌落，菌落表面有皱折、呈颗粒状、黄色或深 橙色；在血琼脂平板上菌落较小、凸起、呈白色
肠杆菌科 Enterobacteriaceae
➢ 基本特征：在血琼脂平板上生长，在麦康凯、伊红 亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上形成发酵和不发酵乳糖 的菌落；在三糖铁或克氏双糖底层、上层产酸、产 气、氧化酶试验阴性
伤寒沙门氏菌 S.typhi
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌，菌体细长，有周鞭毛
➢ 培养特性：在麦康凯上形成无色、透明菌落，SS平 板上呈无色、透明菌落、但大部分菌落中央呈黑色
肺炎克雷伯氏菌K.pneumoniae
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌，单个、成双或短链排 列，荚膜染色可见外周有透明、环状荚膜
细菌分离培养及鉴定
➢ 细菌分离培养：使细菌在平板上分散生长，便 于观察菌落特征，也易于挑取单个菌落进行生 化鉴定或血清学试验
➢ 细菌鉴定：形态与培养特性：形态、染色、培 养特性和菌落特征是鉴定细菌的初步依据
细菌形态与染色特点
➢ 染色性：革兰阳性、阴性，抗酸染色阳性、阴性等 ➢ 形状、大小和排列：球菌、杆菌、螺形菌，菌体大小、
荧光假单胞菌 P.fluorescens
➢ 形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、端鞭毛 ➢ 培养特性：在麦康凯上呈无色半透明菌落，在营养
琼脂上形成荧光色的菌落
恶臭假单胞菌 P.putida
➢ 形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、极端鞭毛 ➢ 培养特性：在麦康凯上呈较大无色、湿润菌落，在营
养琼脂上形成黄绿色菌落，紫外线下可见荧光
炭疽芽孢杆菌 B.anthracis
➢ 形态与染色：为致病细菌中最大的革兰阳性杆菌， 两端截平，体外培养后形成长链，排列呈竹节形。 在体内常单个存在或短链，有荚膜，在人工培养基 上可见芽孢，卵圆形并位于菌体中央，菌体不膨大
医学形态学实验
医学形态学实验山东大学医学院《医学形态学实验》课程教学大纲课程名称: 医学形态学实验英文名称: Medical morphological Experiment 课程编号:实验课性质:融合创新性实验课程负责人:开放实验项目数:8大纲主撰人: 武玉玲、张庆慧、郝晶等人大纲审核人:一、学时、学分课程总学时: 32 实验学时: 32课程总学分: 实验学分:二、适用专业及年级供基础、临床医学、预防、口腔医学、护理学5、6、7年制专业用三、实验教学目的与基本要求通过医学形态学融合性实验教学，将人体解剖学、组织胚胎学和病理解剖学三个相关学科的交叉内容进行有机整合，形成系统化的知识。
通过创新实验的学习，使学生学会使用医学形态学实验常用的仪器，熟悉科研常用的技术方法，培养学生动手能力、提高学生利用所学知识解决实际问题的能力，启迪学生的科研思维和创新精神，以适应研究型大学培养人才的要求。
四、主要仪器设备1(动物: Wistar大鼠，昆明小鼠2(仪器设备:显微图像观察系统、恒温培养箱，手术器械、微量注射器、常用染料。
五、实验课程内容和学时分配指已学实导开序实验项目时验实验内容教 /号名称分要师未配求开1(第1、2趾蹼间隙皮下注射0.2ml 丁未Patent blue，10分钟后在腘窝及兆开腹股沟处切开皮肤，寻找蓝染的淋习巴管及淋巴结(可追踪至腹膜后隙)。
观察淋巴管及淋巴结的形态和分布。
2(将一段小肠系膜平铺于透明的载物台上，用显微图像观察系统观察小肠系膜内淋巴管的运动。
注意分寻找淋巴管的瓣膜。
小淋巴系统1 3(小肠浆膜下注射适量Patent 4 组的组成 blue。
观察淋巴管的吸收功能及引进流。
行 4(追踪腹膜后隙染色的淋巴结。
5(在腹股沟处结扎、切断腹股沟淋巴结和淋巴管，造成淋巴引流障碍，观察淋巴淤滞和淋巴水肿的形成。
6(观察淋巴引流注射标本，淋巴结和淋巴管组织切片。
总结淋巴系统的组成和功能。
邢未1、将Wista大鼠麻醉固定于手术台。
《形态学实验技术》PPT课件
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第一章 组织切片制作技术
第一节概述
组织切片的制作技术属于组织病理学范 畴它是指采用包埋剂使组织内渗入某种支 持物质，使组织保持一定的硬度，然后利 用切片机切成薄片，经染色在显微镜下观 察。根据支持物的不同，有石蜡切片、明 胶切片、塑料切片、冷冻切片等类别。制 成的切片捞置于载物网上，经烘干后可进 行染色或备用。
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常用的透明方法
二甲苯透明法（常用）：彻底脱水的组织 块 二甲苯1 二甲苯2，此二步总的时 间不超过40分钟。
氯仿透明法：彻底脱水的组织块按 3：1 氯仿、纯酒精混合液1小时 氯仿1 - 2小 时 1：1氯仿石蜡混合液1小时。
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五、浸蜡与包埋
浸蜡(paraffin infiltrating)和包埋(embedding)
剂相混溶，又能与包埋剂（石蜡）相混溶，起 到桥梁作用。
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大多数脱水剂不能和包埋剂（石蜡）混溶， 故必须通过透明剂置换出脱水剂后才能进 行后续程序。 常用的透明剂 二甲苯：为最常用的透明剂，有毒、易燃、 易挥发；沸点1380C-1400C,长期接触对 粘膜有刺激作用。 氯仿:易挥发微溶于水，易溶于醇、醚、苯 等。它比二甲苯透明力差，但不宜使组织 变脆，使大块组织的良好透明剂
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固定的目的：
1.迅速防止组织细胞的死后变化,防止自 溶与腐败使之尽量保持生前的形态结 构。
2.使细胞内的蛋白质、糖、脂肪、酶等 成分变为不溶性物质，以保持其原有 形态及特定位置。
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3.能将细胞的半液体状变成半固体状， 使组织变硬以利切片。
4.可使组织内的各种成分产生不同的折 光率。
《形态学实验技术》课件
荧光显微镜技术
利用荧光物质标记细胞或 组织，通过特定波长的激 发光激发荧光，观察细胞 或组织的荧光标记。
组织制片技术
石蜡切片技术
将组织块包埋在石蜡中， 经过切片、染色等步骤， 制成永久性的切片。
冰冻切片技术
将新鲜组织快速冷冻后切 片，常用于免疫组织化学 染色等实验。
组织印片技术
将新鲜组织印在载玻片上 ，经过染色等步骤，观察 细胞或组织的形态结构。
分类
形态学实验技术可以根据研究对象和应用领域进行分类，如动物形态学、植物 形态学、组织形态学、胚胎形态学等。
实验目的与意义
目的
通过形态学实验技术，探究生物或组织的形态特征、结构特 点、功能机制和演化规律，为生物学、医学、农学等领域的 研究提供基础数据和理论支持。
意义
形态学实验技术在生物学和医学领域具有重要意义，通过对 生物或组织形态的研究，可以深入了解其生长发育、生理病 理和演化等方面的机制，为疾病诊断、治疗和新药研发等提 供理论依据。
《形态学实验技术》ppt课件
• 形态学实验技术概述 • 实验前的准备 • 形态学实验技术方法 • 实验结果分析 • 实验技术应用与展望
01
形态学实验技术概述
定义与分类
定义
形态学实验技术是一种基于形态学原理和方法的实验技术，通过对生物或组织 形态的观察、描述、测量和分析，探究其结构、功能和演化等方面的规律。
通过形态学实验技术对植物病害进行诊断和防治，如病原菌分离 、显微镜检查等技术。
农业生物技术
利用形态学实验技术对农业生物技术进行研究和应用，如基因编 辑、细胞培养等技术。
农产品质量检测
借助形态学实验技术对农产品质量进行检测和评价，如显微镜观 察、化学分析等技术。
形态学实验技术
基因敲除与转基因技术
总结词
基因敲除与转基因技术是利用现代分子生物学手段，对生物体的基因进行操作，实现基因的缺失、添 加或替换。
详细描述
基因敲除技术通过特定的基因编辑工具（如CRISPR-Cas9系统）将特定基因从生物体中剔除，以研究 基因功能和表型变化。转基因技术则将外源基因导入生物体，实现基因的添加或替换，用于改良生物 性状、生产转基因生物或治疗遗传性疾病。
通过观察肿瘤转移和侵袭过程中的形 态学特征，研究肿瘤转移和侵袭的机 制，为肿瘤治疗提供理论支持。
肿瘤细胞增殖与凋亡分析
利用特定的染色方法和显微镜观察技 术，对肿瘤细胞增殖和凋亡的过程进 行分析，以研究肿瘤的生长和进展机 制。
05
形态学实验技术在医学研究中的应用
在病理学研究中的应用
02
01
03
病理诊断
形态学实验技术
目
CONTENCT
录
• 形态学实验技术概述 • 形态学实验基本技术 • 形态学实验高级技术 • 形态学实验技术在生物学研究中的
应用 • 形态学实验技术在医学研究中的应
用 • 形态学实验技术的挑战与展望
01
形态学实验技术概述
定义与特点
定义
形态学实验技术是指通过观察和实验手段，研究生物体或其组织 的形态、结构、功能以及发育过程的一门科学。
技术局限性及改进方向
技术局限性
当前形态学实验技术存在一些局限性，如实 验结果的重复性差、实验过程耗时费力、实 验结果的主观性强等。
改进方向
为了克服这些局限性，需要加强实验技术的 标准化和规范化，提高实验结果的准确性和 可靠性；同时，开发自动化和智能化的形态 学实验技术，提高实验效率；此外，加强形 态学实验技术与其它相关技术的交叉融合， 拓展形态学实验技术的应用领域。
医学形态学——实验课
正确持镊是用拇指对 食指与中指。
(1)正确持镊
实用文档
(2)错误持镊
缝针
➢ 缝针是用于各种组织缝合 的器械，它由三个基本部 分组成，即针尖，针体和 针眼。
➢ 圆针：弧度大者多用于深 部组织及软组织。
➢ 三角针：前半部为三棱形 ，较锋利，用于缝合皮肤 、软骨、韧带等坚韧组织 ，损伤性较大。
➢ 铲头针：临床较少用。
实验课要求
1.进入实验室须穿白大衣，实验室要保持安静，有秩序 ，手机要保持关闭或无声状态，以免影响他人。
2.必须严肃、认真地进行实验操作，观察实验结果。 3.动物室需保持清洁，定期确认饲料和水瓶，注意观察
动物。 4.取及动物时，注意个人安全。
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5.鼠笼及垫料需要每周更换１－２次，用过的鼠笼必 须及时清洗干净。
6.如有死亡动物，应及时报告并按规定处理。 7.爱护公共财物，节约各种试剂,每次实验结束后都
要轮流值日，将实验室打扫干净，关好门窗和水电 后方可离开实验室。
实用文档
形态学实验（一）
实用文档
实验主要内容
➢小白鼠的捉拿与固定、注射方法 ➢动物麻醉及正确使用手术器械方法 ➢肝硬化模型制备方法 ➢解剖小白鼠并观察腹腔脏器及解剖位置 （重点观察胆总管）
实用文档
常用给药途径与方法
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
２）口服给药法：饲料给药 胃管给药
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腹腔注射方法
➢ 小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将 注射针头于左下腹部刺入皮下，使针头向前推0.5～1.0cm， 再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤 及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。 ➢ 可先回抽注射器，确认 无血管或脏器刺破。 ➢ 切勿用力过猛，以免刺 伤内脏器官。
优选医学形态学实验课
优选医学形态学实验课
5.鼠笼及垫料需要每周更换１－２次，用过的鼠笼必
须及时清洗干净。
6.如有死亡动物，应及时报告并按规定处理实验室打扫干净，关好门窗和水电后 方可离开实验室。
形态学实验（一）
实验主要内容
➢小白鼠的捉拿与固定、注射方法 ➢动物麻醉及正确使用手术器械方法 ➢肝硬化模型制备方法 ➢解剖小白鼠并观察腹腔脏器及解剖位置 （重点观察胆总管）
• 给药时间：腹腔注射２次/周，共4周，最后 一次给药24h之后处死并取材。
• 药物剂量：20% CCl4 0.1ml/20g • 特点：成功率高、方法成熟，但动物个体
差异较大。
CCl4 : 橄榄油＝１:４ 即20％的CCl4注射
CCl4注射后肝脏变化
正常小白鼠肝脏
注射CCl4一个月后
正常组
CCL4 组
正确持镊法
正确持镊是用拇指对 食指与中指。
(1)正确持镊
(2)错误持镊
缝针
➢ 缝针是用于各种组织缝合 的器械，它由三个基本部 分组成，即针尖，针体和 针眼。
➢ 圆针：弧度大者多用于深 部组织及软组织。
➢ 三角针：前半部为三棱形， 较锋利，用于缝合皮肤、 软骨、韧带等坚韧组织， 损伤性较大。
➢ 铲头针：临床较少用。
CCL4 组
结扎胆总管肝硬化模型
固定
备皮
消毒
切开 皮肤
切开 腹膜
正常人体胆总管解剖
小白鼠胆总管位置
剑突
肝脏
胆总管
十二指肠 上动脉
十二指肠
结扎胆总管
进腹后提出十二指肠，近十二指肠处游离胆总管，两端丝线结扎
切断胆总管、缝合
结扎胆总管手术过程
Curr Protoc Toxicol. 2012 May;Chapter 23:Unit 23.1
5.鼠笼及垫料需要每周更换１－２次，用过的鼠笼必
须及时清洗干净。
6.如有死亡动物，应及时报告并按规定处理实验室打扫干净，关好门窗和水电后 方可离开实验室。
形态学实验（一）
实验主要内容
➢小白鼠的捉拿与固定、注射方法 ➢动物麻醉及正确使用手术器械方法 ➢肝硬化模型制备方法 ➢解剖小白鼠并观察腹腔脏器及解剖位置 （重点观察胆总管）
• 给药时间：腹腔注射２次/周，共4周，最后 一次给药24h之后处死并取材。
• 药物剂量：20% CCl4 0.1ml/20g • 特点：成功率高、方法成熟，但动物个体
差异较大。
CCl4 : 橄榄油＝１:４ 即20％的CCl4注射
CCl4注射后肝脏变化
正常小白鼠肝脏
注射CCl4一个月后
正常组
CCL4 组
正确持镊法
正确持镊是用拇指对 食指与中指。
(1)正确持镊
(2)错误持镊
缝针
➢ 缝针是用于各种组织缝合 的器械，它由三个基本部 分组成，即针尖，针体和 针眼。
➢ 圆针：弧度大者多用于深 部组织及软组织。
➢ 三角针：前半部为三棱形， 较锋利，用于缝合皮肤、 软骨、韧带等坚韧组织， 损伤性较大。
➢ 铲头针：临床较少用。
CCL4 组
结扎胆总管肝硬化模型
固定
备皮
消毒
切开 皮肤
切开 腹膜
正常人体胆总管解剖
小白鼠胆总管位置
剑突
肝脏
胆总管
十二指肠 上动脉
十二指肠
结扎胆总管
进腹后提出十二指肠，近十二指肠处游离胆总管，两端丝线结扎
切断胆总管、缝合
结扎胆总管手术过程
Curr Protoc Toxicol. 2012 May;Chapter 23:Unit 23.1
临床形态学质量控制ppt课件
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分析前质量管理——送检
涂片后应及时送检，因为多数细胞 化学染色均需新鲜涂片。每张涂片中都应注明 患者的姓名、取材日期、编号，血片用PB、骨 髓片用BM表示。每份骨髓标本都应认真核对申 请者姓名、性别、年龄、床号、住院号等，并 做好骨髓编号，登记工作，以便查找和档案管 理。
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分析后质量管理——存档
血液涂片存档至少要保存48小时。骨髓 细胞形态检查档案保存使用两种方法同时进行。 传统方法：手工编号，填写相关资料，保存原始 申请单和报告单。优点：骨髓涂片和组织化学染 色保存完整，便于今后阅片和带教，总结资料。 缺点：需要较大场地，查找不便。细胞图像技术： 优点：报告图像直观，便于保存，查找方便，便 于进行统计。缺点：采集图象在局限性，带教不 便。
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分析中质量管理——组化
血细胞化学染色是以形态学为基础，结合 化学和生物化学技术，对血细胞各化学成分，代谢 产物作定位、定性、半定量和定量观察的方法。血 细胞化学染色也按统一标准执行。
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分析中质量管理——报告
血液涂片及时报告，一般不超过2h，常见 病骨髓片8h内发出报告比较恰当，疑难骨髓片48h内 发出，临床急于了解。病情可以口头或电话方式简 单报告，但以正式报告为准。一般常见病骨髓报告 有一名有经验检验者阅片后即可报告，疑难片最少 需要2名有经验检验者共同阅片，甚至进行全科讨论 或者患者所在科室临床医生进行沟通，结合临床骨 髓形态学和其它相关检查，进行综合分析，加以诊 断。
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分析后质量管理——反馈
反馈是指在工作结束或行为发生之后， 通过对工作的回顾、总结和评价，发现工作中 的偏差，并针对已经发生的偏差采取相应的纠 正措施。血细胞形态学结果的反馈还必须加强 与临床和患者的联系，报告与临床资料和治疗 效果进行随访、观察，检验报告的准确性。
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特点：优点是使用方法简便、麻醉过程平稳， 且一次用药便可维持较长时间等；缺点是动物的苏 醒较慢，麻醉深度和使用量较难控制。
5%水合氯醛，按0.2m1/20g腹腔注射
医学形态学——实验课
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麻醉药给药途径
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
２）口服给药法：灌胃法 ３）其他途径：呼吸道给药
医学形态学——实验课
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腹腔注射方法
➢ 小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将 注射针头于左下腹部刺入皮下，使针头向前推0.5～1.0cm， 再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤 及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。
➢ 可先回抽注射器，确认 无血管或脏器刺破。
➢ 切勿用力过猛，以免刺 伤内脏器官。
CCl4结构式
✓ 无色、易挥发、不易燃的液体。具 氯仿的微甜气味。化学性质稳定。
✓ 分子量153.84，微溶于水，可与乙 醇、乙醚、氯仿及石油醚等混溶。
✓ 操作注意事项：有毒，加强通风。
医学形态学——实验课
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CCl4对肝脏损伤机理
CCl4通过肝微粒体细胞色素P450氧化酶激活后, 产生自由基CCl3-及Cl
医学形态学——实验课
4
小白鼠的生物学特性
１）体型小，体重20-40g，寿命一般为2-3年。 ２）性情温顺，胆小怕惊，对外来刺激极为敏感。 ３）属杂食性，胃容量小，不耐饥饿。对温、湿度 变化敏感。 ４）性成熟早，繁殖力强。
医学形态学——实验课
5
小白鼠的捉拿与固定方法
先用右手将鼠尾抓住并提起，
将其旋转数周后放在实验台面
CCl3-与肝细胞内大分子发生共价结合,破坏肝细胞功能
肝纤维化、肝硬化
医学形态学——实验课
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CCl4模型制备过程
• 给药时间：腹腔注射２次/周，共4周，最 后一次给药24h之后处死并取材。
• 药物剂量：20% CCl4 0.1ml/20g • 特点：成功率高、方法成熟，但动物个体
差异较大。
CCl4 : 橄榄油＝１:４ 即20％的CCl4注射
➢ 铲头针：临床较少用。
圆针 铲头针
医学形态学——实验课
三角针
直针
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器械打结法
医学形态学——实验课
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肝硬化造模的主要方法
➢化学性肝硬化模型
➢结扎胆总管肝硬化模型
➢实验性免疫肝硬化模型
➢血吸虫虫卵所致肝硬化模型
➢转基因肝硬化模型
➢复合法
医学形态学——实验课
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化学性肝硬化模型
四氯化碳（ CCl4 ）：carbon tetrachloride
医学形态学——实验课
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医学形态学——实验课
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正确持镊法
正确持镊是用拇指对 食指与中指。
(1)正确持镊
(2)错误持镊
医学形态学——实验课
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缝针
➢ 缝针是用于各种组织缝合 的器械，它由三个基本部 分组成，即针尖，针体和 针眼。
➢ 圆针：弧度大者多用于深 部组织及软组织。
➢ 三角针：前半部为三棱形， 较锋利，用于缝合皮肤、 软骨、韧带等坚韧组织， 损伤性较大。
医学形态学——实验课
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CCl4注射后肝脏变化
正常小白鼠肝脏
注射CCl4一个月后
医学形态学——实验课
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正常组
医学形态学——实验课
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CCL4 组
医学形态学——实验课
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CCL4 组
医学形态学——实验课
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结扎胆总管肝硬化模型
固定
备皮
消毒
医学形态学——实验课
切开 皮肤
切开 腹膜
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正常人体胆总管解剖
医学形态学——实验课
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动物术前准备
实验前动物需： 禁食 12-24小时 禁水 4-6小时
以免手术时出现呕吐及窒息死亡等现象
医学形态学——实验课
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动物实验常用麻醉剂
（１）吸入性麻醉剂：乙醚、氯仿等
特点：a.麻醉量与致死量相差大；b.麻醉深度 易于掌握；c.麻醉后恢复快
（２）非吸入性麻醉剂：巴比妥类、氨基甲酸乙酯 、水合氯醛、氯胺酮等
实验课要求
1.进入实验室须穿白大衣，实验室要保持安静，有秩序 ，手机要保持关闭或无声状态，以免影响他人。
2.必须严肃、认真地进行实验操作，观察实验结果。 3.动物室需保持清洁，定期确认饲料和水瓶，注意观察
动物。 4.取及动物时，注意个人安全。
医学形态学——实验课
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5.鼠笼及垫料需要每周更换１－２次，用过的鼠笼必
脊髓内给药 直肠内给药
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麻醉效果的观察
➢呼吸：深慢而平稳 ➢反射活动：明显迟钝 ➢肌张力：全身肌肉松弛 ➢皮肤夹捏反应：皮肤夹捏反射消失
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正确持剪刀法
为拇指和第四指分别插入剪刀柄的两环，中指放在第 四指环的剪刀柄上，食指压在轴节处起稳定和向导作 用，有利操作。
医学形态学——实验课
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小白鼠胆总管位置
剑突
肝脏
胆总管
十二指肠 上动脉
十二指肠
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结扎胆总管
进腹后提出十二指肠，近十二指肠处游离胆总管，两端丝线结扎
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切断胆总管、缝合
医学形态学——实验课
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结扎胆总管手术过程
Curr Protoc Toxicol. 2012 May;Chapter 23:Unit 23.1
须及时清洗干净。
6.如有死亡动物，应及时报告并按规定处理。 7.爱护公共财物，节约各种试剂,每次实验结束后都要
轮流值日，将实验室打扫干净，关好门窗和水电后 方可离开实验室。
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形态学实验（一）
医学形态学——实验课
3
实验主要内容
➢小白鼠的捉拿与固定、注射方法 ➢动物麻醉及正确使用手术器械方法 ➢肝硬化模型制备方法 ➢解剖小白鼠并观察腹腔脏器及解剖位置 （重点观察胆总管）
上，在小白鼠向前爬行时用力
向后拉尾，此时用左手的拇指
和食指捏住小白鼠两耳和头颈
部皮肤，然后将鼠置于左手心
中，拉直后肢并用左手无名指
和小指压紧尾巴和后肢，右手
即可作注射、灌胃等实验操作
医学形态学——实验课
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常用给药途径与方法
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
２）口服给药法：饲料给药 胃管给药
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术后１周后胆管明显扩张
肝脏
胆囊
胆囊
胃 胆囊管
肝总管
术后１周后可见胆囊、胆
囊管及肝总管明显扩张；
皮肤、肝脏明显变黄
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正常组
医学形态学——实验课
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BD医学形态学——实验课
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医学形态学——实验课
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每个组 4只
正常组 1只 加药组 3只
5%水合氯醛，按0.2m1/20g腹腔注射
医学形态学——实验课
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麻醉药给药途径
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
２）口服给药法：灌胃法 ３）其他途径：呼吸道给药
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腹腔注射方法
➢ 小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将 注射针头于左下腹部刺入皮下，使针头向前推0.5～1.0cm， 再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤 及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。
➢ 可先回抽注射器，确认 无血管或脏器刺破。
➢ 切勿用力过猛，以免刺 伤内脏器官。
CCl4结构式
✓ 无色、易挥发、不易燃的液体。具 氯仿的微甜气味。化学性质稳定。
✓ 分子量153.84，微溶于水，可与乙 醇、乙醚、氯仿及石油醚等混溶。
✓ 操作注意事项：有毒，加强通风。
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CCl4对肝脏损伤机理
CCl4通过肝微粒体细胞色素P450氧化酶激活后, 产生自由基CCl3-及Cl
医学形态学——实验课
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小白鼠的生物学特性
１）体型小，体重20-40g，寿命一般为2-3年。 ２）性情温顺，胆小怕惊，对外来刺激极为敏感。 ３）属杂食性，胃容量小，不耐饥饿。对温、湿度 变化敏感。 ４）性成熟早，繁殖力强。
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小白鼠的捉拿与固定方法
先用右手将鼠尾抓住并提起，
将其旋转数周后放在实验台面
CCl3-与肝细胞内大分子发生共价结合,破坏肝细胞功能
肝纤维化、肝硬化
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CCl4模型制备过程
• 给药时间：腹腔注射２次/周，共4周，最 后一次给药24h之后处死并取材。
• 药物剂量：20% CCl4 0.1ml/20g • 特点：成功率高、方法成熟，但动物个体
差异较大。
CCl4 : 橄榄油＝１:４ 即20％的CCl4注射
➢ 铲头针：临床较少用。
圆针 铲头针
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三角针
直针
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器械打结法
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肝硬化造模的主要方法
➢化学性肝硬化模型
➢结扎胆总管肝硬化模型
➢实验性免疫肝硬化模型
➢血吸虫虫卵所致肝硬化模型
➢转基因肝硬化模型
➢复合法
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化学性肝硬化模型
四氯化碳（ CCl4 ）：carbon tetrachloride
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正确持镊法
正确持镊是用拇指对 食指与中指。
(1)正确持镊
(2)错误持镊
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缝针
➢ 缝针是用于各种组织缝合 的器械，它由三个基本部 分组成，即针尖，针体和 针眼。
➢ 圆针：弧度大者多用于深 部组织及软组织。
➢ 三角针：前半部为三棱形， 较锋利，用于缝合皮肤、 软骨、韧带等坚韧组织， 损伤性较大。
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CCl4注射后肝脏变化
正常小白鼠肝脏
注射CCl4一个月后
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正常组
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CCL4 组
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CCL4 组
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结扎胆总管肝硬化模型
固定
备皮
消毒
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切开 皮肤
切开 腹膜
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正常人体胆总管解剖
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动物术前准备
实验前动物需： 禁食 12-24小时 禁水 4-6小时
以免手术时出现呕吐及窒息死亡等现象
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动物实验常用麻醉剂
（１）吸入性麻醉剂：乙醚、氯仿等
特点：a.麻醉量与致死量相差大；b.麻醉深度 易于掌握；c.麻醉后恢复快
（２）非吸入性麻醉剂：巴比妥类、氨基甲酸乙酯 、水合氯醛、氯胺酮等
实验课要求
1.进入实验室须穿白大衣，实验室要保持安静，有秩序 ，手机要保持关闭或无声状态，以免影响他人。
2.必须严肃、认真地进行实验操作，观察实验结果。 3.动物室需保持清洁，定期确认饲料和水瓶，注意观察
动物。 4.取及动物时，注意个人安全。
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5.鼠笼及垫料需要每周更换１－２次，用过的鼠笼必
脊髓内给药 直肠内给药
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麻醉效果的观察
➢呼吸：深慢而平稳 ➢反射活动：明显迟钝 ➢肌张力：全身肌肉松弛 ➢皮肤夹捏反应：皮肤夹捏反射消失
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正确持剪刀法
为拇指和第四指分别插入剪刀柄的两环，中指放在第 四指环的剪刀柄上，食指压在轴节处起稳定和向导作 用，有利操作。
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小白鼠胆总管位置
剑突
肝脏
胆总管
十二指肠 上动脉
十二指肠
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结扎胆总管
进腹后提出十二指肠，近十二指肠处游离胆总管，两端丝线结扎
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切断胆总管、缝合
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结扎胆总管手术过程
Curr Protoc Toxicol. 2012 May;Chapter 23:Unit 23.1
须及时清洗干净。
6.如有死亡动物，应及时报告并按规定处理。 7.爱护公共财物，节约各种试剂,每次实验结束后都要
轮流值日，将实验室打扫干净，关好门窗和水电后 方可离开实验室。
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形态学实验（一）
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实验主要内容
➢小白鼠的捉拿与固定、注射方法 ➢动物麻醉及正确使用手术器械方法 ➢肝硬化模型制备方法 ➢解剖小白鼠并观察腹腔脏器及解剖位置 （重点观察胆总管）
上，在小白鼠向前爬行时用力
向后拉尾，此时用左手的拇指
和食指捏住小白鼠两耳和头颈
部皮肤，然后将鼠置于左手心
中，拉直后肢并用左手无名指
和小指压紧尾巴和后肢，右手
即可作注射、灌胃等实验操作
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常用给药途径与方法
１）注射给药法：肌内注射 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 静脉注射
２）口服给药法：饲料给药 胃管给药
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术后１周后胆管明显扩张
肝脏
胆囊
胆囊
胃 胆囊管
肝总管
术后１周后可见胆囊、胆
囊管及肝总管明显扩张；
皮肤、肝脏明显变黄
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正常组
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BD医学形态学——实验课
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医学形态学——实验课
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每个组 4只
正常组 1只 加药组 3只