毒性病理诊断学启步指南之2
中毒的诊断
中毒的诊断
1读物接触史简明扼要的向家属同事，目击者了解下现场情况寻找接触毒物的证据，职业性中毒要询问工种，环境条件；防护措施，有无违反操作规定，机务处毒物的种类，计量，时间以及主要症状，同工种其他人员有无类似症状。
费职业性中毒了解患者的生活情况，精神状态，发病前病人的活动场地所，和杰出的人或事，仔细搜寻吃呢高腰的容器腰带，出事地点有无剩余的毒物。
2灵床表现如有肯定的毒物接触史，则要分析症状特点和出现的时间是否复合某种毒物中毒的特点，并根据主要症状的特点进行必要的体格检查，结合呼吸脉搏血压等情况，给予紧急处理。
3实验室检查急性中毒应常规六区剩余毒物，或寒毒标本，进行毒物分析
中毒的治疗原则
1立即接触毒物
2迅速清除进入体内易吸收或者尚未吸收的毒物
3初试易吸收毒物排泄
4及时使用特殊解毒剂
5积极对阵治疗重点在于保护中电器官的功能
急性有机农药中毒
有机磷杀虫药大度成游行或精装，色泽由蛋黄到棕色，难溶于水，可溶于有机溶剂中，在饥饿性条件虾以分解失败，严重者可饮呼吸衰竭或者昏迷而死亡。
局部毒性试验基本要求及检查要点-周建平2
北京市药品检验所 药物安全评价中心 周建平
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一 概述
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局部毒性是指某些药物在机体接触部位直接 造成的损害作用。其最初表现为直接接触部 位的细胞死亡。 全身毒性是指毒物被机体吸收并分布至靶器 官或全身后所产生的损害作用。其表现是一 定的组织和器官的损伤。最初表现为局部毒 性的药物也可能通过神经反射或被机体吸收 后引起全身性反应。
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五(2)血管刺激性试验
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操作技术要点: 操作技术要点:
4明显血管刺激性药物不宜左右侧自身对比 明显血管刺激性药物不宜左右侧自身对比 4固定动物，轻柔并熟练操作，避免人为损 固定动物，轻柔并熟练操作，避免人为损 伤。 4动物试验与临床同途径和方法（注射或滴 动物试验与临床同途径和方法（注射或滴 注），并考虑可能接触到受试物的周围组 织的影响（增加进行肌肉刺激的试验）。
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五(4)粘膜刺激性试验-眼刺激试验
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试验方法: 试验方法: 检查双眼
4家兔，≥3只, 左右侧自身对比，试验前 家兔，≥
4每只眼睛滴入0.05-0.1ml或涂敷0.1g受试 每只眼睛滴入0.05-0.1ml或涂敷0.1g受试 物，轻合眼睑约10秒。给药期限依用于临 物，轻合眼睑约10秒。给药期限依用于临 床的情况，多次给药时每天的次数同临床 频率，连续给受试物2-4周。 频率，连续给受试物2
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五(2)血管刺激性试验
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试验方法: 试验方法:
4首选家兔，≥3只, 可同体左右侧自身对 首选家兔，≥ 比法，耳缘静脉注射。 4按临床用药方案给予受试物，给药容积和 按 速率依动物的情况。给药期限依临床应用 的情况，多次给药一般不超过7d。 的情况，多次给药一般不超过7d。
急性毒性毒理
实验一、LD50的测定[目的] 通过实验学习测定药物LD50的方法、步骤和计算过程，了解急性毒性试验的常规。
[材料] 小鼠50只(体重17－25g，雌雄各半) 注射器及针头鼠笼普鲁卡因溶液（本实验以普鲁卡因为试验药物）苦味酸溶液[方法] 根据试验设计要求不同，下列步骤要求略有不同。
探索剂量范围取小鼠8-10只，以2只为一组分成4-5组，选择组距较大的一系列剂量，分别按组腹腔注射和灌胃普鲁卡因溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0％及100％死亡率(至少应找出引起20％—80％死亡率)剂量的所在范围。
2. 进行正式试验在预初试验所获得的0％和100％致死量范围内，选用几个剂量(一般用5个剂量按等比级数增减)；尽可能使半数组的死亡率都在50％以上，另半数组的死亡率都在50%以下。
各组动物的只数应相等或相差无几，每组10只左右，动物的体重和性别要均匀分配。
完成动物分组和剂量计算后按组腹腔注射给药。
最好先从中剂量组开始，以使能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适，否则可随时进行调整。
LD50测定中应观察记录的项目：实验各要素：实验题目，实验日期，室温，检品的批号、规格、来源、理化性状、配制方法及所用浓度等；动物品系、来源、性别、体重、给药方式及剂量(药物的绝对量与溶液的容量)和给药时间等。
给药后各种反应；潜伏期(从给药到开始出现毒性反应的时间)；中毒现象及出现的先后顺序，开始出现死亡的时间；死亡集中时间；末只死亡时间；死前现象。
逐日记录各组死亡只数。
尸解及病理切片：从给药时开始记时，凡两小时以后死亡的动物，均及时尸解以观察内脏的病变，记录病交情况．若有肉限可见变化的则需进行病理检查．整个实验一般要观察7-14天，观察结束时，对全部存活动物称重，尸解，同样观察内脏病变并与中毒死亡鼠尸解情况相比较。
当发现有病变时，也同样作病理检查，以比较中毒后病理改变及恢复情况。
【报告要点】结果处理受试剂量(mg/kg）对数剂量(X)动物数（只）死亡动物数（只）死亡率（%）概率单位（Y）LD50及置信限(95%）2、结果计算（1）根据试验设计，采用相应的方法计算LD50，一般采用简化概率法或寇氏改进法，如有计算器程序或计算机软件可使用Blisss计算法。
法医毒物分析绪论2
毒物分析样品的收集和保存 重视运送程序中的每一环节，因为任 何疏忽都可作为法庭上的证据，特别 是有反方律师对这些环节提出异议的 时候。
LinchuanLiao Foreቤተ መጻሕፍቲ ባይዱsic Med.Sichuan Univ.
Analytical Toxicology
毒物分析中样品的要求
不允许在其中添加任何防腐剂，因为这样 会妨碍很多药毒物的检测，甚至无法检测。 尸体解剖时应在用甲醛固定之前采取检材。 检验材料是证明是否含有毒物的原始证据。 真实可靠，严防混淆错乱。绝不容许更换 替代。足够的数量。
LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.
Analytical Toxicology
各种检材的采集
1、体外检材 2、血液 3、呕吐及胃内容物 4、尿液及粪便 5、肝和其他器官 6、毛发和指甲 7、尸体腐泥
LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.
一氧化碳中毒血液呈樱红色 氰化物中毒血液呈鲜红色 亚硝酸钠、氯酸钾中毒血液呈暗褐色
刺激性气体如二氧化硫、汞蒸气 百草枯
蛛网膜下腔及脑内小血管 充血、脑水肿、中毒性脑 病
铅、汞、酒精、巴比妥类药物
LinchuanLiao Forensic Med.Sichuan Univ.
Analytical Toxicology
心肌细胞浊肿及脂肪变性、 心肌炎
砷化物、四氯化碳等引起肝小叶中央区肝细 胞变性坏死 磷化锌引起肝小叶外围带出血坏死
汞中毒引起近端肾小管的损伤 四氯化碳中毒引起肾小管上皮明显脂肪变性 铅中毒引起近曲肾小管上皮细胞出现核内嗜 酸性包涵体 砷化氢中毒引起血红蛋白尿性肾病 砷化物、磷化锌、有机汞、酒精
毒理学指标及实验操作汇总
药物毒性试验指标1.急性毒性试验一、半数致死量（LD50）的测定(一)目的:观察受试物一次给予动物后，所产生的毒性反应和死亡情况。
(二)动物分组和剂量1.动物:一般用小白鼠8周龄，体重18---22g(同次试验体重相差不超过2g)大白鼠6~8周龄，体重120--150g，同次试验体重相差不超过10g。
2.受试物:溶于水的做成溶液，不溶于水的做成混悬液.(三)试验方法1.剂量:一般选用3一5个剂量，各剂量间剂距根据受试物情况和预试结果而定。
2.给药途径和容积:给药途径:应与临床试验的途径相一致。
口服药物应灌胃给药，一、二类新药应采用两种途径给药，其中一种应为推荐临床研究的给药途径。
水溶性好的药物还应测定静脉给药的急性毒性。
给药容积:小白鼠禁食(12~16小时)，不禁水，按体重计算:灌胃(ig)不超过0. 4ml/ 10g 体重。
大白鼠禁食(12~16小时)，不禁水、灌胃(ig)，不超过3ml/只。
3.测定LD50:将动物按体重随机分组，每组至少10只(雌雄各半)。
给受试物后立即观察动物反应情况，每天观察一次连续观察七天。
详细逐天记录动物毒性反应情况及死亡分布，并用适当的统计学方法(申报时应说明方法名称)计算出LD50值及95%可信限。
4.观察毒性反应:给受试物后应严密观察反应情况，并记录动物的外观、行为活动、精神状态、食欲(饲料消耗量)、大、小便及其颜色、被毛、肤色、呼吸、鼻、眼、口腔有无异常分泌物，体重变化以及死亡等情况。
死亡动物应及时进行尸检，发现病变器官应做病理组织学检查。
若发现中毒反应或死亡率一与动物的性别有明显相关时，则应选择性别敏感的动物进行复试。
(四)试验报告和结果评价应详细具体，包括试验日期、动物的规格、性别、数量、受试物来源及含量、试验方法。
LD50值及其95%可信限，以及各剂量组的死亡率，或最大耐受量的值及其相当于临床剂量的倍数.详细报告实验过程中动物出现的中毒表现及致死症状，综合评价受试物毒性大小。
法医毒理学2
兴奋期 豪言壮语
（皮层下中枢兴奋）
共济失调期 胡言乱语 舌硬、步态不稳 易摔跌
昏睡期 低头不语 抑制状态 昏睡（迷）
出现冲动性言行
2.扩张毛细血管，尤其是皮肤血管，产生温热感，麻痹体
温调节中枢，使得体温下降。
乙醇主要在肝脏代谢，分阶段进行：
1.乙醇在肝细胞浆中乙醇脱氢酶（ADH）和辅酶I（
NAD）作用下，脱氢氧化成乙醛及还原型辅酶I（ NADH）。 2.乙醛在肝细胞线粒体乙醛脱氢酶（ALDH）和NAD作 用下生成乙酸和NADH，或直接形成乙酰辅酶A。
共济失调期：皮层下中枢及小脑受到抑制，步态不稳，
易摔跌，动作不协调、语无伦次、舌头发硬。 昏睡期：脑干受到抑制，呼吸循环受抑制。最终死于呼 吸衰竭。
（五）尸检所见
1．颜面潮红
2．内脏充血
3．体腔有酒味
4．实质脏器病变：出血、脂肪变性等
5．其它伴随病变（损伤、气道内呕吐物、肺炎）
慢性乙醇中毒可见酒精性肝病，早期肝细胞脂肪变 性、灶性坏死。胞浆内有酒精透明小体（或称 Mallory小体）形成；胞浆内出现鹿角形、花环状或 不规则形状的团块，HE染色呈紫红色。酒精性肝病 可形成脂肪肝，随后肝纤维化，甚至肝硬化。 部分患者可出现酒精性心肌病，其病变与扩张型心 肌病相同。 还可发生酒精中毒性脑病（Wernicke脑病）,可出现 脑损害和精神障碍。
• 农药在农业生产中广泛使用。
• 农药中毒的病例在我国比较多见，因而有关 农药中毒的案例在法医学工作中时有所遇。
一、农药的种类：
（一）按其用途分： • 杀虫剂：各种杀虫、杀鼠剂，种类多、使用广 • 除草剂：
• 植物生长调节剂：包括脱叶剂、辅助剂、增效 剂 （二）按来源分： • 无机农药： • 有机农药： • 生物性农药：
毒理指导原则
皮肤长期毒性试验（讨论稿）一、试验目的观察动物皮肤长期接触受试物后，经皮肤渗透对局部和全身是否产生毒性反应及其严重程度，并提供毒性反应的靶器官及其损害的可逆性，确定无毒性反应剂量。
二、试验材料（一）受试物：膏剂、液体可直接试验，固体粉末需用适量的水或适宜的赋形剂（如羊毛脂、凡士林和橄榄油等）混匀，以保证受试物与皮肤有良好的接触。
（二）动物1. 种属与品系：选用成年健康合格的白色家兔、白化豚鼠或大鼠，雌雄各半。
体重以家兔2.0~3.0kg，豚鼠250~350g，大鼠150~200g为宜。
2. 饲养管理：单笼饲养，所有动物试验前至少观察5天。
对于啮齿类，动物室的温度为22+3O C，对于家兔，应为20+3O C，相对湿度50~70%。
人工照明时，12/12小时明暗交替。
一般情况下，用常规颗粒饲料和饮用水。
3. 给受试物前处理：给受试物前24小时将动物背部脊柱两侧毛去除（以剪毛法或剃毛法为宜），一般间隔1周，需再剪剃1次。
去毛范围相当于体表面积的10~15%（家兔约150cm2，豚鼠、大鼠约40cm2）。
去毛后24小时，检查确认去毛区皮肤无损伤时，方可应用于皮肤长期毒性试验。
三、试验方法1. 剂量选择：一般选用3个剂量组和1个空白对照组。
必要时，应设1 个赋形剂对照组。
各剂量组的要求与大鼠口服长期毒性试验相同。
若用受试物剂量超过1000mg/kg或达有效浓度20倍以上，仍未见动物呈现毒性反应及死亡时，可仅设一个高剂量组，如果敷用受试物后，产生了严重的皮肤刺激，造成皮肤损伤，则应考虑降低药物浓度，重新进行一次新的试验。
2.给受试物方法：给受试物前将动物称重，计算给受试物剂量，按每cm20.05~0.1ml(g)涂敷给药。
试验时，将受试物均匀地涂敷于已处理好的动物去毛区，先用略大于涂布面积的无刺激性纱布紧贴动物试验部位，上盖一层油布或油纸，再用绑带和橡皮膏加以固定。
每天一次，每次接触受试物至少6小时后，用温水或无刺激性溶剂除去残留的受试物或赋形剂。
局部毒性试验精品PPT课件
2021/1/23
Hale Waihona Puke 22一 皮肤急性毒性试验
第一节 皮肤毒性试验
[报 告]
实验结束时，将数据综合成表格形式，说明 实验开始时各组的动物数，不同剂量组中各个体动 物死亡的时间，出现其它毒性症状的动物数，毒性 反应的描述和尸检所见。最后根据观察各组动物死 亡的累积数，用相应的统计学方法计算 LD50。
2021/1/23
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第一节 皮肤毒性试验
三 应用于直肠、阴道制剂的毒性试验
[试验目的] 观察动物直肠或阴道一次接触药物
后，由于吸附所产生的毒性反应和死亡情况。
[试验动物]
健康家兔体重为2.5kg左右，每组 4只； 大鼠体重为250g 左右，每组 10 只； 雌雄各半。
[试验药物] 栓剂、液体或膏剂。
2021/1/23
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四 皮肤长期毒性试验
第一节 皮肤毒性试验
[注 意]
如果受试动物涂抹后产生了严重的皮肤刺激 毒性反应，应该中止试验，重新设计试验方案， 以较低剂量进行一次新的试验。
2021/1/23
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四 皮肤长期毒性试验
第一节 皮肤毒性试验
[观察指标]
在整个试验期间应该认真记录所观察到的毒性反 应，包括其出现时间、程度、持续时间。笼旁观察反 应包括皮肤、毛、眼睛和粘膜的变化、呼吸、循环和 中枢神经系统，四肢活动和行为方式等的变化。但不 局限于此，要每周测量进食量和动物体重。实验结束 时，检查项目均同大鼠长期毒性试验的要求。
2021/1/23
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第一节 皮肤毒性试验
药物经表皮屏障吸收包括两相
第一阶段
1
渗透相
药物透过表皮进入真皮
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大鼠骨髓造血细胞重度抑制
大鼠骨髓造血细胞重度抑制
心肌脂肪浸润
大鼠宫腔积液压迫性萎缩
成年犬睾丸萎缩（右）
犬睾丸曲细精管萎缩。曲细精管变小，生精上皮细 胞层明显减少，仅残留精原细胞及支柱细胞。
犬睾丸萎缩。睾丸曲细精管明显缩小，残留单层生精上皮细胞和较多的 支柱细胞，初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子缺失。。
同侧附睾萎缩。附睾管明显减少变小，腔内无精子，纤维结缔组织增生。
毒性病理学诊断启步指南之2
看图说话，由此起步1
代偿适应性变化 增生、再生、化生、萎缩、肥大
肝细胞萎缩、出血
肝细胞萎缩
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
大鼠心瓣膜根部软骨化生
大鼠心肌肉柱软骨化生
大鼠宫颈腺体鳞状化生。
大鼠肺骨化生
正常肝细胞
肝细胞肥大。
犬慢性肾盂肾炎肾萎缩（左）
犬肾小管萎缩，纤维结缔组织明显增生。