浅谈高效液相色谱的应用与发展
高效液相色谱研究进展
内容摘要
引言：硅胶基质高效液相色谱填料是一种以硅胶为基质的高效液相色谱填料。 它具有优良的理化性质和分离性能，已被广泛应用于生物医药、环境科学、食品 科学等领域。然而，目前硅胶基质高效液相色谱填料仍存在一些问题，如分离效 果不佳、使用寿命短等。这些问题限制了硅胶基质高效液相色谱填料的广泛应用。 因此，本次演示旨在研究一种新的硅胶基质高效液相色谱填料制备方法，以提高 其分离效果和使用寿命。
结论与展望
结论与展望
高效液相色谱法作为一种常用的分析方法，已经在各领域的研究中得到了广 泛的应用。虽然HPLC已经取得了很大的进展，但仍存在一些问题和局限性，如样 品前处理的复杂性、分析成本的较高以及难以对弱电性化合物进行分析等。因此， 未来的研究方向应包括改进样品前处理方法、降低分析成本、发展新型固定相和 检测器等。
结论与展望
此外，随着科技的不断发展，高效液相色谱与其他技术的联用已成为未来的 发展趋势。如将高效液相色谱与质谱（LC-MS）联用，可以实现复杂样品的高效 分离和准确鉴定。这种联用技术的不断发展将为科研人员提供更全面、更准确的 分析工具，从而更好地解决科学问题。
参考内容
内容摘要
摘要：高效液相色谱法是一种常用的分离和分析方法，具有高效、快速、灵 敏等特点。硅胶基质高效液相色谱填料因其具有优良的理化性质和分离性能，已 成为高效液相色谱领域的研究热点。然而，目前硅胶基质高效液相色谱填料仍存 在一些问题，如分离效果不佳、使用寿命短等。针对这些问题，本次演示提出了 一种新的基于硅胶基质的液相色谱填料制备方法，并通过实验验证了该方法的可 行性和优越性。
内容摘要
结论与展望：本次演示提出了一种新的基于硅胶基质的液相色谱填料制备方 法，并通过实验验证了该方法的可行性和优越性。实验结果表明，所提出的填料 具有更好的分离效果和更长的使用寿命，能够满足高效液相色谱仪的制备需求。 然而，目前该研究仍存在一些问题，如制备过程的优化、性能的进一步提升等， 需要未来进一步研究。
高效液相色谱技术在药物分析中的应用与优化
高效液相色谱技术在药物分析中的应用与优化随着现代医学的发展，药物分析在医药领域中越来越重要。
其中，高效液相色谱技术（HPLC）是一种非常有效的方法，被广泛应用于药物分析。
本文将介绍HPLC技术的原理和应用，并分析其优化方法。
一、HPLC技术原理HPLC技术是一种利用液相在高压下进行分离和分析的技术。
它主要由一个高压泵、一台进样器、一根柱子、一个检测器和一个数据处理系统组成。
在HPLC柱中，液相通过样品经过一系列的化学反应，进而达到分离的目的。
其中，柱子是一个关键的部分。
柱子的材质、直径、长度和填充物都会对分离产生影响。
HPLC柱通常有一些选择性，即某些物质会更容易被保留，而某些物质会更容易被分离。
此外，参数的选择还要考虑到某些物质的解析度和灵敏度。
检测器是HPLC技术中另一个重要的组成部分。
检测器用于检测所分离物质的特定性质，并将数据输出到计算机上，以便对数据进行进一步处理。
检测器一般可以根据不同的原理进行分类，包括紫外线检测器、荧光检测器、电导率检测器、质谱检测器等。
二、HPLC技术应用HPLC技术被广泛应用于药物分析。
它不仅可以检测药物的纯度、含量、结构等，还可以检测药物与其他化合物的相互作用，以及药物在体内的代谢和排泄。
1.药物纯度检测药物纯度是药品安全性和治疗效果的关键。
因此，检测药物纯度是药物研究和开发中至关重要的一步。
利用HPLC技术可以测定药物的纯度，同时还可以测定可能出现的其他杂质。
2.药物含量检测药品的含量是药品的一种质量指标。
药品管理员可以通过对样品进行定量分析，确定其含量和质量，并根据该含量情况对药品的使用进行精确管理。
利用HPLC技术可定量测定样品中药物的含量，以得出所需的药物剂量。
3.药物结构分析对于药物研发的需要，了解药物分子结构是至关重要的一步。
HPLC技术的体积和分离能力可用于探究药物分子的组成和结构。
这种方法还可以研究药品反应过程中分子的不同参数。
4.药物代谢与排泄通常将药物在体内的代谢和排泄视为药物作用的重要部分。
浅谈高效液相色谱仪原理与应用_0
浅谈高效液相色谱仪原理与应用在实验中，高效液相色谱仪常被用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物，那么今天我们就来看看高效液相色谱仪结构原理与其应用。
高效液相色谱仪高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理，主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。
它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
HPLC广泛应用于生命科学、食品科学、药物研究以及环境研究中。
高效液相色谱仪结构与工作原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
高效液相色谱仪的应用高效液相色谱仪应用非常广泛，几乎遍及定量定性分析的各个领域。
例如环境气体分析、药物分析、茶叶的成分分析、食品分析、生物制药、化工化工、脂肪酸分析、氨基酸分析等方面。
而高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
与试样预处理技术相配合，HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。
浅谈高效液相色谱(HPLC)在目前手性药物分析领域中的应用
体进行分离。铜和锌等都是常用的配位金属。氨基酸及衍生物、 多巴胺、氧氟沙星等均可用此类方法分离[4]。由于目前为止还未 发现任何一种试剂可以作为通用型试剂，所以在选择手性试剂时 可能会经过多次尝试，选择分离效果最好的手性添加剂。
2.3 手性衍生化试剂法（CDR） 当满足以下条件时可以使用手性衍生化试剂法：①手性化 合物对映体中有氨基、羟基或羧基等基团，其容易发生衍生作 用；②反应产物具有稳定的化学性质，手性试剂具有稳定的手 性性质，以及较高的光学纯度，不易发生变化，不会在色谱条 件下发生消旋化反应[5]。根据手性化合物对映体中有氨基、羟 基或羧基等基团以及分离效率之间的差别，将反应产物进行分 离。胺类试剂、酰化试剂氯甲酸酯类等均是目前常用的衍生化 试剂。因为该类方法是使用普通色谱柱，因此成本较低，分离 的灵敏度较高。
过去常使用酶消化法、分布结晶法等非色谱方法对手性药 物进行拆分，拆分过程耗时、烦琐，具有较大的不可控性，近 年来随着色谱技术的不断发展，在对手性药物进行拆分方面有 了较为广泛的应用[2]。 目前在手性药物进行拆分时较为常用的 方法有气象色谱、毛细管电泳和毛细管色谱以及高效液相色谱 法等，其中高效液相色谱法（HPLC）以其反应速度快、效率 高、准确性强等特点被广泛应用。
究进展[J].药物分析杂志,2015,35(7):1127-1133. [2] 刘丽敏.高效液相色谱在中草药和抗生素类药物分析中的应用
[D].成都:西南大学,2008. [3] 潘永玉.手性药物的对映体分离方法与药物动力学研究[D].沈阳:
沈阳药科大学,2007. [4] 康自华,阳小成,陈婷.高效液相色谱法在药物分析中的应用[J].广
高效液相色谱（HPLC）是一种在近年来被广泛应用的色 谱分析方法，其与传统色谱法相比，具有效率高、灵敏性高和 分析分离速度快等优点。高效液相色谱法原理上可对所有的 热稳定性差、沸点高和相对分子质量大的有机物进行分离和分 析，其不仅可用于对手性药物的定量分析，而且可用于制备分 离，在手性药物分析领域具有较为广泛的应用。
高效液相色谱的应用与发展前景
高效液相色谱的应用呵发展前景液相色谱分析是指流动相为液体的色谱技术,是色谱法中最古老的一种,但通过改进的粒度及柱压,在经典的液相柱色谱的基础上引入了气相色谱的塔板理论,在技术上采用了高压输液泵,高效固定相和高灵敏度的检测器,实现了分析速度快.分离效率高和操作自动化,这种色谱技术被称为高效液相色谱法 HighperformanceliquidchromatographyHPLCHPLC的出现不过三十多年的时间,但这种分离分析技术的发展十分迅猛,目前应用也十分广泛。
其仪器结构和流程也多种多样。
典型的高效液相色谱仪结构。
高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置用双泵、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。
高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。
对于高效液相色谱的发展前景应该是非常乐观的,现在的社会的发展节奏很快,各个领域对于分析检验的需求很多,而分析检验中,HPLC所占的比重是不言而喻的,已成化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
所以她的发展情景很乐观。
理由有几点1，随着科技的发展,技术的日臻完善,较之以前色谱分析的方法有了很大程度的提高,很多科学家在对于一些分析上的难点有了新的突破,这样一个不断完善的技术在以后的社会发展中一定会扮演着一个重要的角色。
2，最近,一些先进的检测仪器成功的用在了高效液相色谱分析法上,使得高效液相色谱的应用更广泛,并充分利用高效快速.选择性好.灵敏度高等优点,建立更加系统的成分分析方法.通过与质谱联用.梯度洗脱.柱切换技术.配合先进的检测技术,以及与分子生物学.现代分子药理学相结合,必将在中药分析中发挥很大作用.3，在现在的生活中,人们对于物质的安全要求很高,对于物质中出现的对人体有害的东西,一直是一个敏感的话题,而对于这些东西何从分辨呢最后还是要归于分析检验。
高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新
高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新概述高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种重要的分离与检测技术，已经在广泛的科学领域中得到了广泛的应用。
本文将对高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新进行综述，并探讨其在不同领域中的应用。
一、高效液相色谱的基本原理高效液相色谱是以液相作为固定相的分离技术。
其基本原理是将样品溶解在流动相中，通过与固定相之间的相互作用来实现样品的分离。
高效液相色谱的固定相种类繁多，不同种类的固定相可以实现对不同性质样品的选择性分离。
二、高效液相色谱的发展与创新1. 色谱柱技术的发展：随着材料科学与合成化学的不断进步，新型的色谱柱材料如亲水性、疏水性、离子交换、手性等材料相继出现。
这些材料可以提供更高的分离效率和选择性。
2. 检测器技术的创新：传统的高效液相色谱检测器主要有紫外检测器、荧光检测器和电化学检测器等。
随着科学技术的发展，新型的检测器如质量分析检测器（Mass Spectrometry, MS）和电喷雾检测器（Electrospray Ionization, ESI）等被引入到高效液相色谱中，提高了检测灵敏度和选择性。
3. 色谱分离模式的创新：除了传统的反相色谱分离模式，还出现了离子交换色谱、手性色谱、亲水色谱等新的分离模式。
这些分离模式可以对特定问题提供更好的解决方案。
三、高效液相色谱在不同领域中的应用1. 制药工业：高效液相色谱在制药工业中起着至关重要的作用。
它可以用于药物分析、药物代谢物分析和质量控制，以确保药物的质量和安全性。
2. 环境监测：高效液相色谱在环境监测领域中广泛应用，例如水质监测、土壤污染分析和空气污染物检测等。
它可以快速、准确地测定各种环境污染物。
3. 农业食品安全：高效液相色谱在农业食品安全领域中也发挥着重要作用。
它可以用于农药残留分析、食品添加剂检测和农产品质量控制等方面。
高效液相色谱分析技术的应用
高效液相色谱分析技术的应用在当今社会中，高效液相色谱分析技术已经成为了化学研究中不可或缺的重要工具。
它可以用来分离、检测和定量各种化合物，是一个通用的分析方法。
在医药、环保、食品和农业等领域，高效液相色谱分析技术都有着广泛的应用，如下所述。
1. 医药研究高效液相色谱分析技术在生物医药领域中有着非常广泛的应用。
例如，它可以用来检测蛋白质、核酸和药物等生物大分子，分析药品的质量和含量，探测药物中残留的有害物质等。
这些都是基础医学、临床医学和制药工业中必不可少的步骤。
2. 环保工程高效液相色谱分析技术也可以应用在环保领域中。
例如，它可以用来检测水、空气和土壤中的重金属、有机化合物和细菌等污染物，帮助人们找到环境污染的原因和来源，进而采取相应的治理措施。
这些工作可以保障人们健康和环境的可持续发展。
3. 食品行业高效液相色谱分析技术在食品行业也有着广泛的应用。
例如，它可以用来分析食品中的营养成分、添加剂、防腐剂、色素等物质，检测食品中的微量有害物质和重金属等。
这些分析结果可以保证食品质量和安全。
4. 农业科技高效液相色谱分析技术不仅可以应用在生物医药、环保和食品等领域，也可以用于农业科技。
例如，它可以用来检测农产品中的农药残留、重金属含量和污染物等，分析土壤中的养分和微生物等。
这些都可以为农业科技发展提供数据和支持。
总之，高效液相色谱分析技术在各个领域中都有着广泛的应用前景。
但是，同时也需要注意分析技术的精度和可靠性，以及对环境和健康的影响。
在未来的发展中，应该注重提高技术水平、完善检测标准和加强科学技术的应用。
高效液相色谱法的发展和应用探究
动相 通过 高压 输液泵 进 入了 柱压很 大 的色 谱柱 中，在 固定 相 中 ，溶 质 的传质 和扩 散速 度都 很快 ，所 以在 很多 的 时间 内 ，柱子 的效 率和 分 离
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高效液相色谱法的发展和应用探 究
王 艳
２ ２ ２０ ６ ２） （ 江 苏正大 天晴 药业集 团有 限公司 ，江苏 连云港
摘
要 ：在对 高效液相 色谱 法进行 了解以后 ，概述 了高效液相 色谱 的组成结构、操作原理和 方法，分析 了高效液相 色谱的分 类方法和 它的优 势
１ ． 高效液 相色谱 法的应 用范 围 对 于那 些高 沸 点不 易挥 发 、热稳 定性 差 的 、高分 子 的 、具有 不 同 极性 饿有机 化合 物 ，生 物活 性物 质和 各 种天 然的 物质 ，高 效液 相色 谱 法都能 对其 进行 分离和 分析 。这 些物 质在 食 品 、合 成 药物 、石 油化 工 产品 、生物 化工 产 品等 方面 都有 应用 ，其 中在 这 些方 面应 用 的无机 物 中占 ２ ０ ％，在这 些方 面应 用 的有 机物 中占 ８ ０ ％，特 别是 那些 永久 性气
的传质 和扩 散 的速度 都很 慢 ，因为柱 的入 口压 力很 小 ，导致 柱子 的效 果很 差 ，在 很 大程度 上增 加 了分析 时 间 。而高 效液 相色 谱 法使 用的 固 定相 是全 多孔 微粒 ，将 固定相 装在 口径 小 、短 的不 锈钢 的 柱子 内 ，流
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浅谈高效液相色谱的应用与发展Peishan Zou摘要：高效液相色谱分析是一种高效、快速、准确的分离分析方法。
本文旨在从仪器原理、仪器结构、应用范围、检测效率、检测准确度等方面简要介绍液相色谱分析法，及在不同领域的应用情况和本领域分析方法中的重要性等角度进行阐述。
着重对高效液相色谱的发展现状进行总结，并根据发展趋势而延伸，预测未来液相色谱仪的技术发展路线。
关键词：高效液相色谱；应用；发展现状；发展趋势1. 高效液相色谱的发展历史简况色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。
高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。
高效液相色谱法是目前各种色谱模式中应用最广的一个领域，在化合物的分析方面，世界上约有80% 的化合物，如括高分子化合物、离子型化合物、热不稳定化合物以及有生物活性的化合物都可以用不同模式的HPLC(如正相 HPLC、反相 HPLC、离子交换色谱和离子色谱、体积排除色谱、亲合色谱等等)进行分离分析[1]。
站在当今世界科技前沿的液相色谱用户现在又有了新的需求。
首先是改进生产力的需求，因为大量的样品需要在很短的时间内完成；其次是在生化样品及天然产物样品的分析中，样品的复杂性对分离能力提出了更高的要求；第三是在与质谱等检测技术联用时，也提出了更高的要求。
由此，UPLC（超高效液相色谱）概念得以提出，将HPLC的极限作为自己的起点。
2.高效液相色谱仪的原理与构造2.1 高效液相色谱仪的构造高效液相色谱仪（HPLC）一般由高压输液系统、进样系统、分离系统、记检测系统、数据处理系统等几部分组成。
制备型仪器还需配有馏份收集系统。
为了取得较好的分析结果，HPLC 仪器对于准确度、精确度、灵敏度及结果重现性有较高的要求[2]。
（1）高压输液系统高压输液系统包括：溶剂储液瓶、溶剂脱气装置、高压输送泵以及梯度洗脱装置。
其中，高压输液泵是高效液相色谱仪的主要部件之一，输送压力达150—350×105Pa。
输液系统要为HPLC仪器提供流量恒定、准确、无脉冲的流动相，流量的精度和长期的重复性要好，同时还要提供精度好、准确度高、重现性好的多元溶剂梯度[1]。
因此，输液泵的好坏直接影响着整个系统的质量和分析结果的可靠性。
（2）进样系统进样能在试样引入色谱柱，有六个接口：1,4之间接定量环；2接高压泵；3接色谱柱；5,6接废液管。
图1 六阀手动进样器示意图（3）色谱分离系统色谱柱通常为不锈钢柱，内装各种填充剂。
常用的填料为硅胶，可用于正相色谱;化学键合固定相，根据键合的基团不同，可用于反相或正相色谱。
其中、最常用的是十八烷基键合硅胶，即ODS柱，可用于反相色谱或离子对色谱。
（4）检测系统检测系统用于连续检测色谱柱流出的物质，进行定性定量分析。
要求其灵敏度高、噪音小、基线稳定、响应值的线性范围宽等。
近年来各国都在研究开发新的检测技术，进一步扩大了HPLC的应用。
根据检测需要的不同检测器可分为紫外检测器(UVD)、示差折光检测器(RID)、电化学检测器(ECD)、红外检测器(IRD)、核磁共振检测器(NMRD)、质谱检测器(MSD)、蒸发光散射检测器(ELSD)、小角度激光散射检测器(LALLSPD)。
（5）数据处理系统高效液相色谱的分析结果除可用记录仪绘制谱图外，还可使用微处理机和色谱数据工作站来记录和处理色谱分析的数据。
图2 高效液相色谱仪的构造示意图2.2 高效液相色谱仪的工作原理储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来[4]。
3.高效液相色谱仪的应用3.1 高效液相色谱仪在食品安全领域的应用3.1.2 食品添加剂的检测食品添加剂主要常用的有三类：分别是防腐剂、甜味剂和色素。
添加剂的检测方法多种多样，例如气象法，比色法等，但是液相色谱法的优势非常明显，故现代检测技术中，多偏向于使用液相色谱法来检测。
在防腐剂检测方面，骆和东等[5]用Hypersil ODS色谱柱，流动相为0.02mol/L pH5.0乙酸铵甲醇溶液，柱温35℃，在不同波长下同时测定苯甲酸和山梨酸。
在合成色素的检测方面，吴敏[6]等采用Zorbax 80A Extend—C8色谱柱，高效液相色谱仪配备紫外检测器，同时测定食品中对位红和苏丹红等8种脂溶性燃料。
近几年随着色谱柱填充制备技术的高速发展，已经可以一次性分离糖精钠、安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、柠檬黄、苋菜红、亮蓝这十种食品常用添加剂。
其效率之高非其他仪器分析方法可比。
3.1.2 食品中危害物质的检测食品中有害物质主要可分为：农药、兽药残留；霉菌毒素；重金属；加工过程中高温或其它特殊条件下形成的致癌物质等。
黄曲霉毒素普遍存在于多种谷物类食品当中，具有极强的致畸致癌作用，王君[7]等用HyPersil ODS—C18色谱柱，测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量，该方法方便快捷，定性准确，较传统的点板法，酶联免疫吸附法更为科学准确。
高效液相色谱法在应对2008年奶粉掺入三聚氰胺风波的检测中发挥了重要作用，面对全国众多乳制品企业的样品进行检测，尽快出具检测结果给老百姓一个公正准确的结果，检测方法必须既要快，又要准，检出量还非常微小，能做到完美完成这一任务的，仅有高效液相色谱法能够做到。
目前检测三聚氰胺的方法主要有高效液相色谱法、酶联免疫法、气相色谱质谱联用法、液相色谱质谱联用法。
其中液相色谱质谱联用法由于能够快速地对三聚氰胺定性与定量，已成为大家首选的检测方法。
3.2 高效液相色谱仪在工业上的应用以往，在石油化工、农药、环保等方面，经常采用薄层色谱法(TLC)和气相色谱法(OC)进行含量测定，而液相色谱法(LC)只是用于对组分标样的测定和分离的可能性的研究。
自七十年代以来，我国就有数家科研部门以及工厂前后研制并生产了液相色谱仪。
LC 开始在我国许多科学领域进入了实用阶段，尤其是对那些热稳定性差或蒸气压低的样品组分的分析，更显示了LC的优越性[8]。
近几年来，HPLC在油品分析，尤其是在石油中多环芳烃、重质烃的测定方面取得了突破性的进展。
苟爱仙等[9]以正己烷、二氯甲烷为流动相，用多维高效液相色谱技术及适宜的梯度淋洗条件，实现了渣油各烃族良好的分离和检测。
吕振波等[10]同样用HPLC对润滑油基础油的化学族组成进行了分离分析，以键合氰基柱和硅胶柱双柱切换的方式，正己烷为流动相，示差折光检测器检测，得到了不同产地和馏程的基础油烃类的族组成。
3.3 高效液相色谱仪在生命科学领域的应用生命科学研究工作中，最大的难题就是基因的解密工作，从基因组DNA序列尚不能回答某基因的表达时间、表达量、蛋白质翻译后加工和修饰的情况、以及它们的亚细胞分布等等。
这些在基因组中不能解决的问题可望在蛋白质组学（Proteome）研究中找到答案。
在所研究的细胞中会有3~5万种功能各异的蛋白质，目前蛋白质组研究所使用的双向电泳法一般只能分辨到2000~3000个蛋白质点。
现代蛋白质组的分析可尝试使用第一向是体积排阻色谱的双向HPLC高效液相色谱作预分离。
高效液相色谱和双向电泳将会成为蛋白质组学的重要分离工具。
因此，高效液相色谱仪将为深入地揭示生命奥秘作出更大的贡献。
4.高效液相色谱在当今时代的发展4.1 超高液相色谱 (UPLC)4.1.1 超高液相色谱(UPLC)的概述基于1.7μm小颗粒技术的超高液相色谱(UPLC)，与人们熟知的高效液相色谱(HPLC)技术，具有相同的分离原理。
不同的是，与HPLC相比，UPLC具有以下特征：(1) 更高的分离度UPLC TM用1.7μm颗粒提高了分离能力，可以分离出更多的色谱峰，从而对样品提供的信息达到了一个新的水平。
图3a UPLC TM与HPLC分离度的比较[11]ACQUITY UPLC TM系统：1.7μm颗粒提供的柱效比4.8μm颗粒提高了2.5倍。
1.7μm颗粒的分离度比5 μm颗粒提高了70％。
(2)更高的分离速度高通量实验室始终要求在单位时间内提供更多的信息和处理更多的样品并保证提供高质量的数据，UPLC色谱柱中较小的颗粒能超乎寻常地提高分析速度而不降低分离度。
结束了人们多年不得不在速度和分离度之间取舍的历史（图3b）。
图3b UPLC TM与HPLC分离速度的比较由于ACQUITY UPLC TM系统用1.7μm颗粒，柱长可以比用5 μm颗粒时缩短3倍而保持柱效不变，而且使分离在高3倍的流速下进行，结果使分离过程快了9倍而分离度保持不变。
(3)更高的灵敏度过去提高灵敏度的工作集中在检测器上，包括光学、质谱检测器。
然而采用超高效色谱系统更能获得灵敏度的显著提高。
图3c UPLC TM与HPLC分离灵敏度的比较UPLC TM的峰高显著显著比HPLC的要高，且波峰尖锐陡峭、波宽更狭窄。
另外，使用UPLC可以在很宽的线速度、流速和反压下进行高效的分离工作，并获得优异的结果。
4.1.2 超高液相色谱(UPLC)的改进方向虽然分离原理相同，但ULPC并非普通HPLC系统改进而成。
它不但需要耐压、稳定的小颗粒填料（图4a），而且需要耐压的色谱系统(>15,000psi)、最低交叉污染的快速进样器（图4b）、快速检测器及优化的系统体积、并解决超高压下的耐压及渗漏问题等诸多方面的保障，以充分发挥小颗粒技术优势。
另外，由于分离速度的加快，还要求有高速检测器、系统控制及数据管理（图4c），解决高速数据的采集、仪器的控制问题。
这就需要对系统所有硬件和软件的进行全面创新。
图4a UPLC的小颗粒填充料[12]UPLC色谱柱中的硅胶基质乙基桥能耐高压，具有宽pH范围(pH1-12)和极高的柱效(1.7μm)，且有比硅胶低的硅醇基活性（较稳定）。
图4b 针内针装置（上样探头和吸样）[12]外针刺破密封，内针插入样品容器底部吸取样品可达到微量取样（µL取样），事实上消除了在穿透样品瓶盖时瓶盖碎屑及硬物使进样针弯曲，减少死体积，降低谱带扩展，低扩散、低交叉污染，实现快速进样。