高效液相色谱法应用论文
生物碱的高效液相色谱分离分析和制备方法-有机化学论文-化学论文
生物碱的高效液相色谱分离分析和制备方法-有机化学论文-化学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——摘要：生物碱是天然产物中药用活性较好的一类化合物, 在分离科学与技术领域, 生物碱的分离一直是一个研究热点和难点问题。
近年来, 随着高效液相色谱填料和分离方法的发展, 生物碱的分离分析和纯化制备有了长足的进步。
该文主要针对碱性化合物的峰形拖尾问题, 综述了高效液相色谱理论的发展和色谱分离技术的进步, 以及近年来新型色谱填料和分离方法在生物碱分离分析和纯化制备中的应用, 并对其前景进行了展望。
关键词：生物碱; 拖尾; 制备色谱; 正交分离;Abstract：Alkaloids are a class of natural compounds with good pharmacological properties.In the field of separation science and technology, alkaloid separation has always been a hot and difficultproblem.In recent years, with the development of high performance liquid chromatography (HPLC) materials and separation methods, great progresses in alkaloid analysis and preparation have been achieved.In this article, the theoretical development and technological advances with respect to peak tailing problems of basic compounds are summarized, and the applications of HPLC in natural alkaloid analysis and preparation are discussed.The further development of HPLC separation on alkaloids is also looked forward.Keyword：alkaloids; peak tailing; preparative HPLC; orthogonal separation;生物碱是天然产物中药用活性和成药性较好的一类化合物, 据统计, 美国FDA批准的1 000多种小分子药物中, 碱性药物的比例超过60%[1]。
高效液相色谱法测定护肝宁片含量论文
高效液相色谱法测定护肝宁片含量的研究【中图分类号】r256．33 【文献标识码】a 【文章编号】1672－3783(2011)04－0226－02【摘要】目的：建立护肝宁片中大黄素含量的hplc测定方法。
方法：采用 supelcosiltmc8分析柱，流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液（80:20），在254nm波长处检测。
结果：大黄素的线性范围为10.3-103.6μg，平均加样回收率为99.47％，rsd为1.27%（n=5)。
结论：方法简便，快速，准确，可用于护肝宁片生产的质量控制。
本品清热利湿，益肝化瘀，疏肝止痛；退黄，降低谷丙转氨酶。
用于急性肝炎及慢性肝炎。
1 仪器与试药1.1 仪器 hp1100高效液相色谱系统：在线脱气机，四元泵，hp1100色谱工作站。
1.2 试药甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯；大黄素对照品中国药品生物制品检定所，批号：0756-200110样品：自制2 实验方法与结果2.1 色谱条件 supelcosiltmc8分析柱（150mm×4.6mm,5mm），流动相：甲醇-0.1％磷酸溶液（80:20），流速：1.0ml./min，检测波长：254nm；柱温：室温；进样量：20μl；理论塔板数：按大黄素峰计算应不低于2000。
2.2 实验溶液的制备2.2.1 供试品溶液制备精密称定，研细，取0.2g，精密称定，置具塞锥瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理60分钟，放冷，再称定得量，用甲醇补足减失的重量，取上清液滤过，取续滤液，即得。
2.2.2 对照品溶液制备精密称取以大黄素对照品适量，加甲醇制成每1ml中含40μg的溶液，即得。
2.2.3 阴性对照液制备按处方量称取不含虎杖药材的阴性样品，然后按样品溶液制备方法制备溶液，2.3 干扰性试验：精密吸取阴性样品溶液10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，考察其他组分对大黄素测定的干扰性。
反相高效液相色谱法测定牛黄上清胶囊中胆红素含量论文
反相高效液相色谱法测定牛黄上清胶囊中胆红素的含量【摘要】目的为牛黄上清胶囊中胆红素含量的测定建立起反相高效液相色谱的测定方法。
方法固定相：hypersil bds c18柱（4.6mm ×250mm，5μm）；流动相：二甲基亚砜-乙腈（13.5：6.5）；检测波长：450nm；流速：1.0 ml·min-1。
结果胆红素在1.6μg/ml-40μg/ml 之间呈现良好的线性关系（r=0.9999）；胆红素的平均回收率（n=6）98.94%（rsd=0.573%）。
结论该测定方法专属性强，准确、有效，可作为市售牛黄上清胶囊质量控制的方法之一。
【关键词】rp-hplc；牛黄上清胶囊；胆红素含量牛黄上清丸是中医治疗湿热证的经典方剂之一，首载于明代李梃的《医学入门》，具有清热泻火、散风止痛之功效。
可用于热毒内盛、风火上攻所致的头痛眩晕、咽喉肿痛、目赤耳鸣、口舌生疮等症[1]。
根据90版的《中国药典》所载牛黄上清丸剂，经改造所成的一个中药新药制剂——牛黄上清胶囊。
其处方由牛黄、菊花等19味常用的中药材所组成，处方中的君药为人工牛黄，其主要有效成分主要为胆红素[2-3]。
现在，对胆红素的含量测定方法主要有：紫外分光光度法、rp-hplc和hplc等。
本研究对牛黄上清胶囊中所含的胆红素进行了含量测定，运用的方法为反相高效液相色谱法，以期为牛黄上清胶囊提供反相高效液相色谱法的质量控制标准。
1仪器与试药1.1仪器高效液相色谱仪：agilent1200泵。
色谱柱：hypersil bdsc18。
1.2试药牛黄上清胶囊（市售）；胆红素（批号：10077-200503，中国药品生物制品检定所提供）；研究中所用的水为超纯水，乙腈为色谱纯，各试剂均为分析纯。
2方法与结果2.1色谱条件色谱柱使用hypersil bds c18柱（4.6mm ×250mm，5μm）；流动相为：二甲基亚砜-乙腈（13.5：6.5）溶液；流速为：1.0 ml·min-1；检测波长为：450nm。
高效液相色谱法测定卡介菌多糖核酸中苯酚残留量论文
高效液相色谱法测定卡介菌多糖核酸中苯酚残留量【摘要】目的采用高效液相色谱法测定卡介菌多糖核酸注射液中苯酚的残留量。
方法色谱柱c18ods柱（250×4.6mm，5μm）。
流动相：水-甲醇（50：50v/v），流速为1ml·min-1270nm，柱温为25℃；进样量：10μl。
结果在5μg/ml-25μg/ml间，苯酚峰面积与浓度的线性方程为y=9.2766x-0.3115（r=0.9994），线性关系良好，检测限为0.04μg/ml，且卡介菌多糖核酸中苯酚能得到良好分离，重现性好。
结论本方法快速简单，结果准确，灵敏度高，且无污染。
【关键词】高效液相色谱；苯酚；卡介菌多糖核酸卡介菌多糖核酸（bcg-psn）是采用热酚法去除蛋白质，研制成的新一代卡介菌提取物，临床上广泛用于预防和治疗感冒、哮喘、慢性气管炎、病毒感染性疾病、自身免疫性疾病[1]该疫苗在制备过程中，使用有机溶剂苯酚。
苯酚是最简单的酚，为无色固体，有特殊气味，呈酸性，早期用气相色谱法或溴化容量法可分别测定各种酚类，由于操作过程繁琐，应用受到一定限制。
本文根据《中国药典》三部（2010版）对生物制品的质量控制要求[2][3]1 材料与方法1.1 药品与试剂卡介菌多糖核酸注射液、苯酚、无水乙醇、甲醇。
1.2 主要仪器高效液相色谱仪、电子天平、超声仪。
1.3 溶液制备1.3.1 对照品溶液取苯酚适量，精密称定。
置200ml量瓶中，加乙醇溶解并稀释定容，摇匀，作为对照品储备液。
分别精密量取储备液适量，加乙醇稀释为0-20μg/ml浓度的线性对照溶液。
1.3.2 供试品溶液精密取卡介菌多糖核酸注射液0.5ml，置2ml 离心管中，加乙醇1ml，超声5分钟，16000rpm离心5分钟，精密量取上清液作为供试品溶液。
1.4 色谱条件色谱柱c18ods柱（250×4.6mm，5μm）。
流动相：水-甲醇（50：50v/v），流速为1ml·min-1波长为270nm，柱温为25℃；进样量：10μl。
高效液相色谱法测定水性酚醛树脂中残留的甲醛和苯酚
乙酰丙酮衍生法、 !， % ) 二硝基苯肼分 光 光度 法、 液相 色谱法及气相色谱法等
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通讯联系人： 刘秀玲， 硕士， *+# ： （ "$)! ） **#"(#&) )*(%( ， ,)-./# ： #/"0#)12$ + (!& ’ 3&-’
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二硝基苯肼对甲醛进行衍生化反应生成的甲醛衍生物有很强的紫外吸收提高了检测灵敏度并且选择了最佳的液相色谱条件将树脂成分同苯酚和甲醛很好地分离使同时测定树脂中甲醛和苯酚的含量成为可能并为该类物质的质量控制提供了可靠的分析手段和技术保证
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高效液相色谱法应用论文
【摘要】目的：探究高效液相色谱法在药物分析中的实际应用。
方法：研究高效液相色谱法在药物分析中的特点及其在药物成分中的
测定。结果：高效液相色谱法在药物分析中的应用范围较广泛，取得
了良好的效果。结论：高效液相色谱法拥有灵敏度高、专属性强等优
势特征，在药物分析领域内具有广阔的应用发展前景。
【关键词】高效液相色谱法；药物分析；应用；分离；药物成分
高效液相色谱法是一种发展于上世纪70年代的快速、高效分析分
离技术【1】。该方法通常以液体溶剂充当流动相，并密切结合气相色
谱法和液相色谱法分析分离的基本原理，具有见效快、高灵敏度、速
度快等优势特征。相较于气相色谱法，液相色谱法仅试剂制作成溶液
即可，而忽略了气化过程，所以，并不受到试剂挥发作用的影响和制
约。该方法也用作分析分离沸点高、热稳定性能低、相对分子质量较
大的有机物。本文主要研究高效液相色谱法在药物分析中的特点及其
在药物成分中的测定。
1高效液相色谱法在药物分析中的应用
1.1抗生素分析 抗生素通常是由微生物及其他办法所产生的一
种化学物质，在高度稀释的条件下依然具备抑制及消灭微生物的基本
功能。对抗生素进行分析、分离及定量检测是药物分析中难度较大的
领域，较普遍用到的办法为化学方法、分光光度法及微生物法等，然
而，这三类方法的弊端在于耗费时间较长、专一性欠佳【2】。目前运
用在临床中的一类酯类抗生素——阿奇霉素具备较广泛的抗菌谱，有
助于抑制流感嗜血杆菌、黏膜炎莫拉菌及肺炎链球菌等。在酸性条件
下，阿奇霉素的平稳性仍然较高，具备生物应用程度高、半衰期长及
吸收性优良的特征。据科学检测，PH值对分离阿奇霉素的影响较大，
在PH11左右的环境中拥有较显著的分离效果。高效液相色谱法具有
分析时长较少、流动相耗费少及质谱联用的特征，在阿奇霉素的检测
领域有着可靠的应用优势，通常所选的检测波长为215nm，在<5min
的时间段内即可使阿奇霉素完成基线分离，有效地节省了分析时间。
将该方法用到分析注射液及尿液中的阿奇霉素，效果显著。
1.2天然药物分析 天然药物源自植物、矿物质及动物，又以植物
类为主，因天然药物的化学组分相对多样化，其有效组分从一个到多
个不等，给维持药品自身的质量，建立相应的质量评估标准带来了不
小的困难。高效液相色谱法可经由分离检验天然药物的组分，进而检
测有效组分的具体含量。作为芸香科植物门的一类果实，吴茱萸具有
温脾止泻、温胃止吐的临床疗效，其水提取液内包含固定量的游离氨
基酸。在检测该游离氨基酸时，可运用高效液相色谱法，在室温环境
下将水-甲醇充当流动相，进而敏锐地检测含量【3】。
1.3天然药物及复方成药分析 增免扶正片是由党参、黄芪及当归
等十余类天然药物磨制而成，拥有活血养血、健脾开胃及益气生津的
临床效果，对于防衰老、抵抗疲惫及缺氧有着独特的作用，长时间服
用可增强机体的免疫力，强健体魄，延年益寿。该药对于肾虚、心脑
血管病、脂肪肝、慢性肝炎等有着较理想的预防效果。要检测包含当
归的复方制剂增免扶正片内阿魏酸的具体含量，可将柱温保持25℃、
检测的波长定位313nm，该办法简便易于操作，敏锐度较高【4】，重
复特性较佳，起效快。因化学药品的开发成本较高，毒副作用较大，
因此，近年来，人们更加关注植物药、草药、医药等天然类药物，纵
观全球药品市场，天然类药品的数量已达30%，高效液相色谱法必定
能为国家传统的中医药产品迈进现代化轨道、开辟国际市场提供强大
的技术支撑。
1.4高效液相色谱法在药物鉴别中的应用 在高效液相色谱法中，
药物组成成分的留存时长与其自身的性质及结构密切相连，药物不
同，因性质及结构的差异而在色谱图上的出峰顺序也各异，以此作为
定性的关键参数，并运用在药物鉴别中。通常情形下，在记录含量检
测项目的色谱图中，试品溶液主峰的保留时间需同对照品溶液主峰的
保留时间相同。
2高效液相色谱法在药物成分测定的应用
2.1药物残留测定 高效液相色谱法可对含量相对复杂的成分加
以定量分析，所以，该方法被普遍地运用到药物残留的检测之中【5】。
例如，利用高效液相色谱法检测尿液及血浆内的异烟肼时，以香草醛
充当衍生化试剂，把异烟肼经柱前衍生作为香草醛腙，并对处理之后
样品内的腙完成定量、定性分析，该办法精确、迅速，特别运用在药
物浓度的监测之中，具有较理想的应用价值。
2.2药物成分含量测定 运用高效液相色谱法检测合成药物及其
制剂的具体含量，可消除药物内的各种杂质，排除制剂内的附加剂及
共存药物对检测的影响。中药材及其制剂的组成成分相对复杂，对其
有效成分含量的检测也更多地运用到高效液相色谱法。另外，该方法
在农业药物的检测及药物代谢动力学等诸领域的研究也有着重要的
借鉴作用。
3讨论
综上所述，高效液相色谱法是当代分离检测的关键技术手段，因
其具备灵敏度高、简便快捷、专属性较强、分析速率快、分离效率较
高、检测自动化、运用范围较广泛、样品处理简易化等诸多优势，在
医药领域内必将拥有广阔的前景。在今后，该方法与其他技术的联合
应用必将成为必然，为药物分析走向正规化、精确化提供强有力的技
术支持。
参考文献：
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