血小板检验ppt课件-血小板课件
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血小板检查ppt课件
病理变化
1.plt减少： ①生成障碍：急性白血病，再障，巨幼贫等 ②破坏过多：ITP、脾亢、SLE等； ③消耗过多：DIC、血栓性血小板减少性紫癜 ④分布异常：脾肿大、血液被稀释等； ⑤先天性：新生儿plt减少症、巨大plt综合征
2.plt增多： ①原发性：慢粒、原发性plt增多症、真性红
（1）plt单个散在，不聚集：见于血小 板无力症、再障、ITP等。
（2）plt过度聚集：见于原发性plt增多 症，骨髓纤维化等。
中共5个中方格内的plt数。
（五）计算
血小板数/L=5个中方格内血小板数（N） ×5×10×20×106/L =N×109/L
（六）结果报告 PLT:△△△ ×109/L
（七）注意事项
全部用具和稀释液要特别清洁，防尘、 防菌，以免计数时误认。
针刺要深，吸血及稀释动作要快，防聚 集。
同时做多项检查时，优先采plt计数之血。 充池前应充分摇匀，充池后需静置10分
（二）血小板的生理
血小板的平均寿命为7~14天，具有止血功 能仅开始2天。衰老的血小板在单核巨噬细 胞破坏，主要在脾破坏。
脾池化：全身约有1/3的血小板滞留于脾窦 和脾髓的细胞间，血小板在脾内的这种滞 留现象即“脾池化”。
（三）血小板检测常用项目
血小板计数 (PLT):手工单项或血液分 析仪多项检测
2.许汝和稀释液（复方尿素稀释液） 尿素10g，枸橼酸钠0.5g，40%甲醛 0.1mL蒸馏水加至100mL。过滤冰箱保 存。
（三）器材 光学显微镜 血球计数板 Hb吸管 试管 采血针等
（四）操作
1.在小试管中加入plt稀释液0.38mL; 2.取末梢血20μL加入试管中，迅速摇匀。
室温放置>10分钟; 3.充池，静置10~15分钟; 4.高倍镜下计数中央大的要求
血小板及其功能PPT课件
血小板对毛细血管内皮细胞有支持和维持毛细血管正常 通透性，使红细胞不逸出的作用，从而维持毛细血管内 皮的完整性。当血小板减少到50×10ˇ9/L。 以下时， 毛细血管壁通透性和脆性增加，微小的损伤就会引起皮肤和 黏膜下出现瘀点或瘀斑，甚至发生自发性出血。
•5
2 参与生理性止血
生理性止血指小血管破裂出血时，出血常于数分钟后自 行停止的现象，血小板在生理性止血过程中起着重要的作用。 生理性止血的基本过程是：
①血管收缩。首先是由于神经调节作用和血小板释放缩 血管物质，使破损血管收缩，血流暂停或减缓。
②血栓形成。血小板通过黏附聚集，形成松软的血小板 血栓堵塞小创口，达到初步止血。
③血液凝固。由于凝血系统被激活，在局部迅速形成血 凝块，构成坚实牢固的止血栓，加强止血效果。
•6
血小板在生理性止血中的作用示意图
•7
End ！！！
谢谢！！！
•8
血小板的数量
血小板（thromdocyte 或platelet）是从 骨髓成熟的巨核细胞胞质裂解脱落，形成 的小块胞质。我国健康成年人血液中血小 板的正常值为（100-300）×10ˇ9/L。妊娠、 进食、运动及缺氧使血小板增多，
妇女月经期血小板减少。衰老的血 小板主要在肝和脾被巨噬细胞吞噬，也有 少数血小板在循环过程中被破坏，在执行 功能时被消耗。
1.黏着
2.聚集
板胶暴 便原露 粘组其当 着织内血 于时膜管 胶，下损 原血得伤 组小得
成是
团指
的血
现小
象板
。彼
3.释放反应
小板受刺激后，将其颗粒中的ADP、 5—羧色胺、儿茶酚胺、血小板3因子
此 聚 合
（PF③)等活性物质向外排出的过程，
称为释放反应。
•5
2 参与生理性止血
生理性止血指小血管破裂出血时，出血常于数分钟后自 行停止的现象，血小板在生理性止血过程中起着重要的作用。 生理性止血的基本过程是：
①血管收缩。首先是由于神经调节作用和血小板释放缩 血管物质，使破损血管收缩，血流暂停或减缓。
②血栓形成。血小板通过黏附聚集，形成松软的血小板 血栓堵塞小创口，达到初步止血。
③血液凝固。由于凝血系统被激活，在局部迅速形成血 凝块，构成坚实牢固的止血栓，加强止血效果。
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血小板在生理性止血中的作用示意图
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End ！！！
谢谢！！！
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血小板的数量
血小板（thromdocyte 或platelet）是从 骨髓成熟的巨核细胞胞质裂解脱落，形成 的小块胞质。我国健康成年人血液中血小 板的正常值为（100-300）×10ˇ9/L。妊娠、 进食、运动及缺氧使血小板增多，
妇女月经期血小板减少。衰老的血 小板主要在肝和脾被巨噬细胞吞噬，也有 少数血小板在循环过程中被破坏，在执行 功能时被消耗。
1.黏着
2.聚集
板胶暴 便原露 粘组其当 着织内血 于时膜管 胶，下损 原血得伤 组小得
成是
团指
的血
现小
象板
。彼
3.释放反应
小板受刺激后，将其颗粒中的ADP、 5—羧色胺、儿茶酚胺、血小板3因子
此 聚 合
（PF③)等活性物质向外排出的过程，
称为释放反应。
血小板检验PPT课件
参考值
（100~300） ×109/L
质量控制
❖ 1. 器材 仪器标准化 ❖ 2. 计数时间 充池10~15min后再计数，并在采
血后1h内计数完毕
❖ 3. 镜下观察 区分鉴别 ❖ 4. 血涂片观察
《全国临床检验操作规程》规定，PLT低于60×109/L时， 应观察血小板在血涂片中的分布情况，如果PLT有3～5 个成群分布，则PLT一般不会减少。
❖ B.复方尿素 ❖ 优点：PLT胀大易辨认 ❖ 缺点：不能完全溶解RBC，计数困难。且尿
素不易保存，易分解
（3）血细胞分析仪法
❖ 优点：测定PLT、MPV及PDW，快速，适用 临床应用。
❖ 缺点：不能完全区分PLT与其它类似大小物 质，出现假性血小板减少
❖ *当既往无PLT数量异常的病例，出现意外的 低值时，必须以显微镜计数法重新计数。
于脾切除术后、巨大血小板综合征等。
异常血小板形态
❖ 2. 形态异常
❖ ①幼稚型②老年型③病理幼 稚型④病理刺激型⑤退化型
❖ 正常人为成熟型，可见少量 异常形态的血小板，但少于 2%。异常血小板超过10% 时才具有临床意义。
❖ 3. 分布异常
❖ ①血小板不聚集。②血小 板过度聚集
一、血小板计数
❖ 血小板计数(PLT)： ❖ 血小板的生成 ❖ 原巨核细胞 颗粒巨细胞
产板巨细胞
1/3滞留于脾窦和脾髓的细胞间 2/3位于循环池
血小板
↓
7-14天
血小板生理
✓ 血小板来自骨髓内巨核细胞 ✓ 血小板的寿命为7－14天 ✓ 全身约1/3的血小板贮存在脾脏
血小板计数
❖ 血小板生成图
教 学目标
❖ 1、掌握血小板显微镜计数 ❖ 2、掌握血小板计数参考值、临床
《血小板计数法》课件
血小板计数法的缺点
操作繁琐
血小板计数法需要进行样本采集 、稀释、染色和计数等多个步骤
，操作较为繁琐。
对样本要求高
血小板计数法需要采集一定量的 血液样本，且对样本的质量和保
存条件有一定的要求。
误差较大
由于血小板计数法是人工操作， 存在一定的误差和不确定性，有 时需要重复检测以获得准确结果
。
血小板计数法的改进方向
健康体检
用于评估个体健康状况， 预测潜在的疾病风险。
血小板计数法的原理
流式细胞术
利用特定的抗体标记血小 板，通过流式细胞仪进行 计数和分析。
光学比浊法
通过测量血液样本在特定 波长下的吸光度值，计算 血小板数量。
电化学发光法
利用电化学发光技术检测 血小板，具有高灵敏度和 特异性。
PART 02
血小板计数法实验操作
01
02
03
04
防止污染
在整个实验过程中，要特别注 意防止样本和试剂的污染，以
免影响实验结果。
精确计数
在观察和计数血小板时，要保 证计数结果的准确性和可靠性
，避免误差过大。
遵守操作规程
严格遵守实验操作规程，按照 规定的步骤进行实验，避免操 作不当导致误差或安全问题。
安全防护
实验操作人员应佩戴必要的防 护用品，如手套、口罩等，确
PART 04
血小板计数法的优缺点
血小板计数法的优点
准确性高
适用范围广
血小板计数法是一种基于血液样本的 实验室检测方法，其准确性较高，能 够较为准确地反映出血小板数量。
血小板计数法适用于多种类型的血液 样本，包括全血、血浆和血清等，适 用范围较广。
标准化程度高
血小板的检测原理及误差分析PPT课件
13
PLT-F与PLT-O的差异
FSC
PLT-O (XE)
FSC
PLT-F (XN)
IPF IPF
PLT-O
PLT-F
Lower size PLT
Lower size PLT
SFL
SFL
PLT-F通道的染液对PLT的染色效果更敏感，微小血小板能够检出
检测颗粒数是PLT-O或PLT-I的5倍
14
各PLT测定模式的重复性比较
5
电阻抗法（PLT-I）
电阻抗法（PLT-I）：悬浮在电解质溶液中的血细胞相对 于电解质溶液为非导电颗粒，其电阻比电解质溶液大，利 用两者导电性的差异，当体积大小不同的血细胞（或类似 颗粒）通过计数小孔时，可引起小孔内、外电流或电压的 变化，形成与血细胞数量相当、体积大小相当的脉冲电压， 从而间接区分细胞，电流或电压变化的频次即为细胞（或 颗粒）的数量，故此法可受小红细胞、红细胞碎片、小微 粒、大血小板、血小板聚集等的影响
Normal Platelets
FSC
PLT Clumps FSC
Laser
Laser
FSC FSC_W
FSC FSC_W
19
PLT-F优点
• 优点： • 高特异性，与CD41/CD61流式细胞仪检测相当 • 排除网织红细胞影响，排除红细胞碎片及小红细胞影响 • 排除微小血小板假性减少 • 5倍颗粒检测，即使低值血小板依然有较高的精度 • PLT-F可检测IPF，为诊断PLT减少的原因提供分析数据 • 敏感监测血小板聚集
血小板的检测原理及误差分析
学术应用部 张文忠
1
血小板基础
• 什么是血小板？ • 血小板（platelet,PLT）是由骨髓造血组织中的巨核细
PLT-F与PLT-O的差异
FSC
PLT-O (XE)
FSC
PLT-F (XN)
IPF IPF
PLT-O
PLT-F
Lower size PLT
Lower size PLT
SFL
SFL
PLT-F通道的染液对PLT的染色效果更敏感，微小血小板能够检出
检测颗粒数是PLT-O或PLT-I的5倍
14
各PLT测定模式的重复性比较
5
电阻抗法（PLT-I）
电阻抗法（PLT-I）：悬浮在电解质溶液中的血细胞相对 于电解质溶液为非导电颗粒，其电阻比电解质溶液大，利 用两者导电性的差异，当体积大小不同的血细胞（或类似 颗粒）通过计数小孔时，可引起小孔内、外电流或电压的 变化，形成与血细胞数量相当、体积大小相当的脉冲电压， 从而间接区分细胞，电流或电压变化的频次即为细胞（或 颗粒）的数量，故此法可受小红细胞、红细胞碎片、小微 粒、大血小板、血小板聚集等的影响
Normal Platelets
FSC
PLT Clumps FSC
Laser
Laser
FSC FSC_W
FSC FSC_W
19
PLT-F优点
• 优点： • 高特异性，与CD41/CD61流式细胞仪检测相当 • 排除网织红细胞影响，排除红细胞碎片及小红细胞影响 • 排除微小血小板假性减少 • 5倍颗粒检测，即使低值血小板依然有较高的精度 • PLT-F可检测IPF，为诊断PLT减少的原因提供分析数据 • 敏感监测血小板聚集
血小板的检测原理及误差分析
学术应用部 张文忠
1
血小板基础
• 什么是血小板？ • 血小板（platelet,PLT）是由骨髓造血组织中的巨核细
血小板PPT课件
[内源性途径]
[外源性途径
胶原等带负电荷表面 PKa
]组织损伤释放
XII—PK————XIIa
（凝血旁路）
组织因子（III）
HMWK XI
XIa IX IXa VIII III
IIa VIIIa
X
VIIa IIa VII
Plt
Ca2+
Ca2+ V IIa
Xa PF3 Xa Va
Ca2+
PF3;磷脂
止血与凝血障碍检查
中国医科大学附属第一医院 实验诊断学教研室 郑军
本课学习重点：
瀑布学说cascade hypothesis---熟悉 APTT,PT临床意义----熟练掌握 FDP,DD,Fg----掌握 血栓止血筛选试验----熟练掌握
生理状态下
血管中流动的血液为什么不凝固 破损的血管为什么能止血 如何正确选择实验室检查项目 如何正确判断检验结果
3.1.2血小板检测（platelet count）
3.2实验室检查原理与应用
二期止血 secondary hemostasis 1.活化部分凝血活酶时间检测 activated partialthromboplastin time 2.凝血酶原时间检测 Prothrombin time 3.纤维蛋白原测定 Determination of fibrinogen 4.抗凝血酶III检测 Antithrombin III detection
3.2.1活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）
[原 理]
XII 因子活化剂
Ca2+ 、磷脂（替代PF3） 血浆
[参考值] 32-43秒（或与正常对照相差5秒以内）
血小板的检测原理及误差分析PPT课件
悬浮在电解质溶液中的血细胞相对于电解质溶液为非导电颗粒其电阻比电解质溶液大利用两者导电性的差异当体积大小不同的血细胞或类似颗粒通过计数小孔时可引起小孔内外电流或电压的变化形成与血细胞数量相当体积大小相当的脉冲电压从而间接区分细胞电流或电压变化的频次即为细胞或颗粒的数量故此法可受小红细胞红细胞碎片小微粒大血小板血小板聚集等的影响plti浮动界标鞘流阻抗法浮动界标?分布范围
5
电阻抗法（PLT-I）
电阻抗法（PLT-I）：悬浮在电解质溶液中的血细胞相对 于电解质溶液为非导电颗粒，其电阻比电解质溶液大，利 用两者导电性的差异，当体积大小不同的血细胞（或类似 颗粒）通过计数小孔时，可引起小孔内、外电流或电压的 变化，形成与血细胞数量相当、体积大小相当的脉冲电压， 从而间接区分细胞，电流或电压变化的频次即为细胞（或 颗粒）的数量，故此法可受小红细胞、红细胞碎片、小微 粒、大血小板、血小板聚集等的影响
Normal Platelets
FSC
PLT Clumps FSC
Laser
Laser
FSC FSC_W
FSC FSC_W
19
PLT-F优点
• 优点： • 高特异性，与CD41/CD61流式细胞仪检测相当 • 排除网织红细胞影响，排除红细胞碎片及小红细胞影响 • 排除微小血小板假性减少 • 5倍颗粒检测，即使低值血小板依然有较高的精度 • PLT-F可检测IPF，为诊断PLT减少的原因提供分析数据 • 敏感监测血小板聚集
PDW/ P-LCR
• PDW
假设峰值高度为100%，在20%频率 水平上的分布宽度即为PDW。单位用 fL表示，其中1 fL = 10-15L。
• P-LCR
P-LCR为由12 fL界标或更大界标得 到的巨型血小板的比值。计算时，将 固定界标与高界标之间的粒子数，同 低界标与高界标之间的粒子数相比而 得到一个比值。
5
电阻抗法（PLT-I）
电阻抗法（PLT-I）：悬浮在电解质溶液中的血细胞相对 于电解质溶液为非导电颗粒，其电阻比电解质溶液大，利 用两者导电性的差异，当体积大小不同的血细胞（或类似 颗粒）通过计数小孔时，可引起小孔内、外电流或电压的 变化，形成与血细胞数量相当、体积大小相当的脉冲电压， 从而间接区分细胞，电流或电压变化的频次即为细胞（或 颗粒）的数量，故此法可受小红细胞、红细胞碎片、小微 粒、大血小板、血小板聚集等的影响
Normal Platelets
FSC
PLT Clumps FSC
Laser
Laser
FSC FSC_W
FSC FSC_W
19
PLT-F优点
• 优点： • 高特异性，与CD41/CD61流式细胞仪检测相当 • 排除网织红细胞影响，排除红细胞碎片及小红细胞影响 • 排除微小血小板假性减少 • 5倍颗粒检测，即使低值血小板依然有较高的精度 • PLT-F可检测IPF，为诊断PLT减少的原因提供分析数据 • 敏感监测血小板聚集
PDW/ P-LCR
• PDW
假设峰值高度为100%，在20%频率 水平上的分布宽度即为PDW。单位用 fL表示，其中1 fL = 10-15L。
• P-LCR
P-LCR为由12 fL界标或更大界标得 到的巨型血小板的比值。计算时，将 固定界标与高界标之间的粒子数，同 低界标与高界标之间的粒子数相比而 得到一个比值。
血小板 PPT 课件
•
细胞膜：由蛋白质和脂质组成。
血小板计数方法
计算外周血中血小板的数量（XXX X 10 9 检测原理： 1、显微镜计数法： 电阻抗法
激光流式细胞术法 综合电学和激光流式细胞术法
方法学评价
• 难计数原因： • 1、血小板体积小，易受其他杂物的干扰 • 2、血小板在体外易于黏附、聚集、和变性破坏
普通光镜计数法
•
巨型血小板：>7.5微摩尔，血小板无
力症，假血友病。
异常血小板>10%有意义。
形态异常
•
• 血小板颗粒减少：血小板胞质内嗜天青颗粒减少或无 颗粒，胞质灰蓝或淡蓝色
• 血小板卫星现象：血小板黏附、围绕于中性粒细胞 （或偶尔黏附于单核细胞）的现象，有时可见血小板 吞噬现象
• 聚集性和分布异常：血小板聚集、分布状态可间接 反映其功能。聚集功能正常的血小板在非抗凝血外周 血涂片中常可见3-5个聚集成簇或成团。聚集与散在血 小板之比为20:1
•
• 1黏附功能
血小板功能
• 2聚集功能
• 3释放反应
• 4血小板相关抗体检测：包括PAIgG PAIgM PAIgA
• 5血块收缩试验
血小板检验意义
• 参考值（100-300）X10 9/L • (一）生理性 • 晨低午高 • 春低冬高 • 平原低，高原高
• 病理性
血小板检验意义
• PLT减少： <2-5万/微升有出血倾向
•
显微镜：相差
•
准确性高，血小板易于识别
血液分析仪法
• 优点：重复性好，适于临床应用。 • 缺点：不能完全将血小板与其他类似大小的物
质完全区别开来，仍需目视显微镜法作校正。 • 物质包括红细胞或白细胞碎片、灰尘等杂物
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R
R R Plt
R
R
W
W
【注意事项】
1.器材标准化 2.刺血要深（3mm），如与红、白细胞计数同时检查，
应先吸血作血小板，如同时做CT，应更换部位。
3.充池后，静置15min后计数。
4.血小板容易聚集、充池前，须充分摇匀。
5.计数时光线要适中，不可太强，注意与细胞碎屑、
微生物、结晶等杂质鉴别。
图17. 血小板血块收缩功能模式图
二、血小板计数
相差显微镜 目视显微镜计数 光学显微镜
02
破坏红细胞—溶血法
不破坏红细胞法 血细胞分析仪：常规筛选血小板 流式细胞仪：血小板计数参考方法
【原理】 血液经一定比例稀释后，滴入计数池，在显微
镜下计数一定体积内的血小板数，经换算求出 每升血液中血小板的数量
图15. 血小板释放模式图
Activated Platelet one
四. 促 凝 作 用
Ⅸa-Ⅷ -Ca2+ PF3
Coagulation
FIBRIN CLOT
Ⅱa
Ⅹ
Ⅹa-Ⅴa –Ca PF3
2+
Ⅱ
Fg
凝血活酶
图16. 血小板促凝作用模式图
五. 血 块 收 缩 功 能
第一课件网
异常血小板形态
谢 谢 大 家
2．病理性
（1） 血小板减少
①血小板生成障碍
②血小板破坏增加
③血小板消耗增多
（2） 血小板增多
①骨髓增生性疾病 ②急性大出血、急性溶血 ③脾切除后 ④感染及炎症性疾病等
二、血小板形态 变化
正常血小板形态:两面微凸的圆盘状,直径 约为1.5-3um,新生血小板体积大,成熟体 积小,血涂片散在或成堆分布,形态为圆形 \椭圆或不规则形,胞质淡蓝或淡红色,中 心部位细小紫红的颗粒.
GPⅤ Ca++
GPⅡb-Ⅲa Fibrinogen
ADP
GPⅡb-Ⅲa
图14. 血小板聚集模式图
Activated Platelet two
release
三. 释 放 反 Ca 应
Resting Platelet
++
Ca2+↑
Ⅱa
ADP
P-selectin α颗粒： β-TG PF4 TSP 致密颗粒：ADP
6.血小板计数，应在采血后1h内计数完毕。
参考值 (100～300)×109/L
临床意义:
1．生理性 A. 正常人晨间较低，午后略高、春季低、 冬季略高、平原居民低，高原居民略高。 B. 新生儿较婴儿低，出生后3个月达成人水平。 C. 妇女月经前血小板降低，月经后上升 妊娠中晚期升高，分娩后1～2天降低。 D. 剧烈活动和饱餐后血小板升高、休息后恢复。
【器材】 显微镜、牛鲍计数板
【试剂】草酸铵溶血直接计数法
1.草酸铵 2.EDTA-Na2
1.0g
14mg
3.蒸馏水：加至100ml
【操作方法】
1. 1ml稀释液+10μl血，混匀。 2. 充液 3. 静置15min后，镜检。 4. 计数1个大方格内的 Plt。 5. 计算： Plt = N × 109 /L
血小板检验
血小板计数 platelet，PLT
一. 血小板的生成
二.血小板的功能
一. 粘 附 功 能
Adhesion
基 底 膜
vWF
Resting Platelet
图13. 血小板粘附模式图
Aggregation
二. 聚 集 功 能
Ⅱa
Activated Platelet one Resting Platelet