岛津LC20AD液相色谱仪操作规程.doc
岛津LC-20AD XR高效液相色谱仪操作细则
岛津LC-20AD XR高效液相色谱仪操作细则1. 开机1.1准备流动相，将过滤头放入流动相中。
1.2打开脱气机、泵、柱箱、自动进样器、检测器的开关：将脱气机的开关拨到“on”档；分别将泵、柱箱、自动进样器和检测器上的“POWER”键按到“ON”状态，然后等待各部分自检。
1.3打开系统控制器：以上各部分自检完成后，将系统控制器上的“power”键按到“on”状态，检查显示屏中是否包含了所有要使用的一起，如果缺少某一项，按一下系统控制器上的“F2”键。
1.4排空操作和零压力调整1.4.1 排空操作：将泵上的排空法逆时针旋转≥90度，按下泵上的“Purge”键，观察脱气机上两个泵的进出管路中是否有空气，确定没有以后再按下：“Purge”键。
1.4.2 零压力调整:连续按泵上的“func”键18下或连续按泵上的“back”键9下，进入“ZERO ADJ”界面，然后按下“Enter”键，再按“CE”键回到原始界面。
2关机2.1关掉工作站2.2系统发出一声响后关掉系统控制器：系统控制器上的“POWER”键按到“OFF”状态.2.3关掉泵、柱箱、自动进样器、脱气机和检测器：脱气机上的开关拨到“OFF”档，其它仪器上的“POWER”键均按到“OFF”状态。
3软件操作及校准验证3.1双击软件“CLASS-VP”，进入工作站窗口。
3.2双击“Instrument 1”。
3.3新建方法文件3.3.1 单击“File”。
3.3.2单击“Method”。
3.3.3单击“New”。
3.4. 编辑方法3.4.1编辑积分参数3.4.1.1单击“Method”。
3.4.1.2 单击“Integration Events”。
]3.4.1.3 打开第三行下拉菜单，单击“Minimum Area”。
3.4.1.4 在“Stop Time”一栏第三行设置检测时间（根据被检测物的保留时间确定）3.4.1.5 在“Value”一栏第三行根据方法设置一定大小数值。
岛津LC-20AD型液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AD型液相色谱仪操作规程xxx/ZHD14-001一、开机：1. 检查流动相是否足够、在有效期内。
使用前须进行超声脱气15分钟。
脱气后将吸滤头由保护液中换至流动相瓶内。
2. 更换柱温箱内所需的色谱柱，拧紧两端的螺帽，在泵运行过程中检查色谱柱是否有漏液现象。
3. 依次开启输液泵电源、柱温箱、紫外检测器（或荧光检测器）系统、控制器及电脑，最后点击LC-Solution快捷键打开工作站界面。
二、方法：1. 确认系统配置，如紫外/荧光检测器的配置。
2. 登陆LC实时分析后单击数据采集按钮，首先打开A、B泵上的排空阀（open方向旋转180度）。
然后按二泵面板上的“purge”键开始自动清洗泵流路3分钟左右。
3. 点击仪器参数视图中“常规”及“高级”按钮设置：测定时间、检测器波长、柱温箱温度、流速以及流动相比例，出现保存设置即保存方法文件，并单击“下载”将设置传送到仪器。
4.系统的启动：点击“开启系统”键（此时泵开始工作，柱温开启）确保窗口状态显示区域显示为“就绪”。
三、进样:1. 观察基线至平衡后，进样前按软件中[零点校正] 按钮校正基线零点准备进样.2. 选择“单次分析/批量分析”，选择数据文件名称及保存路径（注：批处理分析选择“向导”按钮依次按要求进行批处理表的设置）后进行进样分析。
（在样品分析时可以进行暂停和停止操作）3. 完成分析后，清洗色谱柱，若所用水流动相含盐，首先需将水流动相换超纯水清洗20~30分钟；然后用纯甲醇冲洗10分钟即可。
四、关机：清洗完成后，先关闭泵及柱温箱的加热，关闭各组件电源，关闭计算机。
起草人：xxx 审核人：xxx 批准人：xxx。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程一、开机前准备1、流动相按照标准要求配制流动相，需使用色谱纯试剂，有机相和纯水不用过滤，可直接超声脱气后使用。
无机盐溶液流动相必须使用溶剂过滤器过滤，根据溶液不同选择不同的滤膜（有机相/水相），过滤后超声脱气使用。
脱气时需盖上瓶盖，但不拧紧。
有机相流动相脱气必须在通风橱或高温室操作。
将配制好的流动相接入液相色谱仪的流路。
一般纯有机相接入A泵，纯水接入D泵，无机盐溶液接入B 泵。
注意观察洗液瓶是否还有洗针水，洗针水为1：1甲醇水。
2、色谱柱按标准要求选择色谱柱，一般为C18柱，苯并芘有专用柱，糖类分析用氨基柱。
色谱柱安装：色谱柱上有箭头，按流路方向安装，根据所要使用的检测器在色谱柱的出口端接上不同接头。
二、开机1、打开Labsolution。
点击自动进样器上Purge键，使自动进样器进入自动清洗状态，25分钟自动停止。
双击选择适用的检测器，SPDA为二极管阵列检测器，RF为荧光检测器，ELSD为蒸发光散射检测器。
标准要求使用紫外检测器或者二极管阵列检测器的均选择二极管阵列检测器，此检测器为最常用检测器，一般项目均使用此检测器。
要求使用示差折光检测器或者蒸发光散射检测器的均选用蒸发光散射检测器，本实验室应用主要为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、乳糖、三氯蔗糖，使用该检测器需打开气体，气体为氮气或空气，需使用99.999%纯度以上。
荧光检测器本实验室主要用于黄曲霉毒素B族和G族、苯并芘的检测。
2、新建方法文件文件→新建方法文件将等度洗脱修改为低压梯度，最高柱压由10MPa改为20MPa，设置柱流速为1ml/min，根据标准要求选择光源，检测波长小于350nm打开D2灯，350nm以上打开W灯。
设置完成后点击“下载”。
流路排气根据选择的流路进行排气，所需要使用的每个流路均需排气。
以选择A、B流路为例，逆时针旋转打开排气阀，将B、C、D泵流量设为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，显示屏上显示“Purge line”，进入A泵排气阶段。
岛津LC-20AD型高效液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AD型高效液相色谱仪操作规程1、检查流动相是否足够、在有效期内。
使用前须进行超声脱气5～10分钟。
脱气后将吸滤头由保护液中换至流动相瓶内。
更换柱温箱内所需的色谱柱，拧紧两端的螺帽，在泵运行过程中检查色谱柱是否有漏液现象。
2、依次开启电脑、柱温箱（40℃）、输液泵电源，紫外检测器在平衡系统大约30min后开启，这样做是为了延长检测器的氘灯寿命。
3、在首先进行的系统平衡时，起始运行时的流速应从低到高进行调节，主要是为保护色谱柱考虑。
（一般起始流速设定为0.5ml/min即可，待基线平稳后调整到检测所要求的流速，目前我们所测样品的要求流速均为1.0ml/min）。
4、在输液泵操作面板上按“func”键，输入流速值“0.5”，按“enter”键。
设定好流速后按“Pump”键，启动输液泵。
如系统中有气泡存在应进行排气（泵压过低或不稳定）。
按“Pump”键停泵，将排气阀旋转90°至水平位置，按面板上的“purge”键，一般2～3分钟即可排除气泡。
按“purge”键停止，将排气阀旋回“close”，按“Pump”键，重新启动输液泵。
5、打开电脑桌面上“N2000在线工作站”，选择“通道2”。
点击“方法”，选择“校正曲线”，单击右上方所需的峰名，界面上出现校正曲线图形，说明此方法被采用。
6、泵运行大约30min左右，启动紫外检测器的电源。
等检测器自检通过后就可进行系统参数的设定并平衡系统。
（当检测器显示屏显示波长值时，如“λ318nm”时，表示自检通过，检测器正常）。
7、点击在线工作站的“数据”、“开始基线”，查看基线的平衡情况。
8、基线平衡过程中，可查看电压值，按检测器操作面板上的“zero”键或点击工作站界面上的“零点校正”，修正检测电压值接近于零。
（进样以后禁止此操作）。
基线稳定后，将流速设定为检测值，更改参数过程中无需停泵。
（检测流速为1.0ml/min）。
9、在系统平衡过程中，可进行进样针的清洗、样品的称量、稀释溶解和过滤等准备工作。
岛津LC-20A操作规程
岛津LC-20A液相色谱仪操作规程1．开关机顺序●开机顺序：先打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器电源开关，再打开系统控制器电源开关，点击电脑中LC-Solution工作站联机，联上后能听到一声蜂鸣。
●关机顺序：与开机顺序相反，即先关闭LC-Solution工作站－系统控制器－泵、自动进样器、柱温箱、检测器。
2．流动相及样品的准备●流动相配制所用的试剂必须是色谱级。
流动相须经0.45um的微孔滤膜过滤后方能进入LC系统。
水和有机相所用的微孔滤膜不同，有机相（如甲醇）的过滤用F膜，水用水膜。
●样品溶液亦必须用0.45um 的微孔滤膜过滤后才能进样。
3．工作站的进入及系统的开启●双击桌面上的“labsolution”图标，选择“operation”项并单击，在弹出窗口后按OK进入工作站。
●首先打开仪器上的排空阀（open方向旋转180度）。
然后点击仪器面板上“purge”钮开始清洗5个流路3分钟，自动进样器25分钟，然后在分析参数设置页中设置流速，检测波长，柱温，停止时间等。
在完成后点击“Download”将分析参数传输至主机。
●分析方法的保存：选择file－save method file as－选择保存路径－取名保存文件●系统的启动：点击“instrument on/off”键开启系统（此时泵开始工作、柱温箱开始升温。
4．进样准备●将样品瓶放入自动进样器中●观察基线及柱压，待基线平直（－5～30mv），压力稳定（0.5Mpa）时方可进样。
5. 进样●点击助手栏中的“single start”键，弹出对话框，在对话框中输入“sample name”“method”“data file”等。
然后填入进样瓶号（vial），架号（tray），进样体积（injection volumn）。
●填完后点击“start”，仪器开始自动进样分析。
6. 数据文件的调用及查看●点击助手栏中的“Postrun analysis”键，打开数据处理窗口。
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程一．系统配置系统组成：本系统由DGU-20A3 脱气机、2 个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，B泵）、7725i手动进样器、色谱柱（2个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A 紫外-可见检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等组成。
二．准备工作1．流动相准备：使用前按待检测样品的检验方法准备所需的流动相（水使用蒸馏水，其他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于20mmol/L）用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，水相使用前必须过滤，有机相用肉眼观察有颗粒时必须过滤）。
2．色谱柱准备：根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应与流动相流向一致（检查柱上“FLOW”流向）。
3．样品溶液配置：配置样品和标准溶液，用合适0.45μm的样品过滤器过滤后待用。
如检测中发现检测峰拖尾严重，可稀释后使用。
严禁使用未经处理的浑浊溶液进样。
4．检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
三．开机、参数设定及平衡系统1．开机：接通电源，依次开启B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。
2．排气泡或更换流动相的操作方法1）将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2）逆时针转动A/B泵的排液阀180o；3）按A/B泵的【purge】键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4）将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
5）如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
6）如按以上方法不能排尽气泡，从色谱柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中设流速为5 ml/min冲洗3分钟，停泵后重新接上色谱柱并将流速重新设定为规定值。
3．参数设定1）波长设定：一般设为254nm。
2）流动相设定：流速开始不宜太高应为正常分析流速的50％～80％冲洗一段时间，等待柱压平稳后可调节到正常流速（调节流速时应该每次增减0.1ml/min，不宜调节过快，柱在线时流速一般不超过1ml/min）。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪标准操作规程
标准操作规程第 1 页共 4 页1 仪器组成和开机1.1 仪器组成本系统由LC-20AT泵、SPD-20A紫外检测器、DGU-20A5真空脱气机、CTO-10ASvp柱温箱、SIL-20AC自动进样器、LCsolution色谱工作站（1.21SP1版本）和打印机组成。
1.2 开机将电源插头分别插入插座，打开泵、真空脱气机、紫外检测器、柱温箱和自动进样器的电源开关；打开计算机，鼠标双击桌面上的【LCsolution】图标打开一个窗口。
如需进行在线操作，点击图标，输入用户名和密码，点击【OK】即进入工作站的在线操作页面；如要进行离线分析方法的建立和修改则点击下方的图标；点击【Postrun】图标则进入数据分析和处理界面。
进入在线操作页面后，可看到如下几部分组成：--最上方为命令栏，依次为File、Edit、View、Method等；--命令栏下方为常用命令的快捷操作图标，分别用于样品序列分析、单个样品分析、管路排空、仪器开关等；--左侧为辅助栏，显示几个分析作业流程的操作图标，如系统设置，数据采集，序列表，离线分析等；--中部为数据信号显示栏；--下部为仪器工作参数栏：包括泵、检测器、柱温等；1.3 开机清洗打开泵的排液阀，点击上方快捷命令按钮【Auto Purge】，可对仪器管路进行冲洗。
清洗的管路和清洗时间可在仪器工作参数设置界面中的【Auto Purge】窗口进行选择和设置，可对A、B、C、D四个流动相管路和自动进样器进行清洗。
2 分析方法的建立、保存和调用2.1 分析方法的建立在仪器运行参数设置界面，点击【Normal】出现主要运行参数，点击【Advanced】出现全部运行参数。
2.1.1 采样时间设置在【Data Acquisition】窗口中，左侧【LC Stop Time】框中输入样品运行时间；右侧【Acquisition Time】打勾同时输入检测起始时间和检测结束时间。
2.1.2 输液泵参数设置在【Pump】窗口中，选择【Low pressure gradient】模式，输入总流速和流动相比例。
岛津LC-20AT液相色谱操作步骤
岛津LC-20AT高效液相色谱操作步骤1、流动相的处理◆共有5个流动相储液瓶。
一般RP—HPLC中，A（无机相）、B（有机相)为分析流动相；C（水）、D（甲醇）用于柱子后处理清洗；50％甲醇-水用于清洗自动进样针◆流动相体积V A、B=100+总流速×比例系数×分析时间（mL)；V c≥300mL； V D≈350mL；≈300mLV50％甲醇◆所有流动相须用0.22um孔径滤膜过滤（根据有机相和无机相选用相应滤膜),清洗储液瓶，不能在清洗过程中留下污迹，并超声30min，超声完成后禁止剧烈摇晃2、开机◆开启插座电源电脑开机◆打开仪器电源（LC—20AT最后打开，等待数秒后“control”指示灯亮）◆打开软件（Labsolution 仪器 LC—20A)，若连接正常则软件显示 LC就绪3、自动排气◆将各流动相过滤头缓慢放入流动相中◆在简单设置界面设置总流速为0。
2mL/min；在自动排气界面设置自动排气参数(Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ各流动相≥5min，自动进样器≥25min），不勾选“排气结束后运行控制器”◆“下载" “执行自动排气”◆等待排气结束4、样品处理◆稀释后的样品（浓度约1mg/mL，不宜过高）用注射器经0。
22um过滤器注入样品瓶◆样品应≥2/3样品瓶体积（1。
5mL样品瓶）◆按序号依次将样品瓶放入自动进样器的样品架上◆切记：将样品架推到底！5、系统平衡及设置分析条件◆自动排气完成后，设置柱温、检测波长等参数（建议柱温高于环境10℃),用梯度洗脱初始流动相平衡柱子（流动相比例与梯度洗脱初始比例一致)◆“下载”“激活/取消激活仪器”，此时系统显示：等待柱温稳定◆缓慢增加总流速至样品分析所需流速，V max=1ml/min（每隔1分钟增大0。
2mL/min,注意每次增大都点击“下载”）◆在时间程序界面设置梯度洗脱条件◆若要保存方法文件：文件方法文件另存◆等待基线平稳（留意泵压力是否稳定），待系统显示:LC就绪,右击，进行基线测试斜率（一般＜3000即可)◆开始测样6.“单次分析开始”或“批处理”6。
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岛津LC-20AD型液相色谱仪操作规程
1．目的
规范岛津LC-20AD型高效液相色谱仪的使用。
2．范围
适用于岛津LC-20AD型高效液相色谱仪的使用。
3．职责
质检员对本规程的实施负责。
4．规程
4.1 系统组成：本系统由2个LC-20AD溶剂输送泵（分主/A泵和副/B泵）、SIL-20A自动进样阀、SPD-20A紫外-可见检测器、CTO-20A柱箱、LCsolution色谱数据工作站和IBM台式电脑等组成。
4.2 准备
4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
4.3 开机
4.3.1 接通电源，依次开启不间断电源、B泵、自动进样器、检测器、柱温箱、A泵
4.3.2 待泵和检测器自检结束后，打开打开色谱工作站，点击按钮“1”，输入用户名:ADMIN。
4.3.3 当SPD-20A发出蜂鸣声后，说明已建立与计算机之间的连接，LC窗口打开。
4.4 参数设定
4.4.1 设置新的分析参数时，请从通过键盘在LC窗口的“Instrument Parameters View”中输入参数（即A、B泵的流速，波长，柱温；柱在线时流速一般不超过1ml/min）
4.4.2 选择File >Save Method File As ，输入方法名称后保存。
4.4.3 点击“Download”键，将保存好的方法下载
4.5 更换流动相并排气泡
4.5.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；
4.5.2 逆时针转动A/B泵的排液阀360°
4.5.3 按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，1min再次按A/B泵的[purge]键
4.5.4 顺时针转动A/B泵的排液阀,关闭排液阀
4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽
4.6 平衡系统
4.6.1 更换流动相并排气泡后，在工作站中输入实验信息并设定各项方法参数
4.6.2 等度洗脱方式
4.6.2.1 点击“Instrument on/off ”按钮，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。
用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。
4.6.2.2 检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。
4.6.2.3 观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。
如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，应重新排气泡。
4.6.2.4 观察基线变化。
如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声为<0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。
4.6.3 梯度洗脱方式
4.6.3.1 以检验方法规定的梯度初始条件，按4.6.2项下方法平衡系统。
4.6.3.2 在进样前运行1~2次空白梯度。
4.7 进样
4.7.1 进样前按软件中[零点校正] 按钮校正基线零点
4.7.2 点击“Single start ”按钮，设置好保存路径并输入试样位置，系统开始自动进样4.7.3 样品采集完毕后，点击“Stop”按钮，接着就会出现一条消息，询问您是否“Abort the current run”, 单击Yes，当前的数据采集就会终止。
4.8 清洗系统和关机
4.8.1 数据采集完毕后，关闭泵，待压力降为0后，将工作流动相换水相，设定流动相比例，冲洗色谱柱
4.8.2 清洗柱
4.8.2.1 C18柱先用95%的水以1ml/min冲洗40min以上，再用90%的甲醇或乙腈冲洗
20min，最后用40%的水冲洗10min
4.8.2.2 Protein PAK60柱先用超纯水冲洗90min以上，再用甲醇或乙腈冲洗40min
4.8.3 清洗完成后，先关闭泵，待压力降至为“0”时，关闭各组件电源，关闭计算机
4.9 填写使用记录。