几种食用菌菌种保藏方法
菌种安全保藏方法
菌种安全保藏方法菌种安全保藏方法点击：23食用菌由于生产投入少，经济效益高，近年来在农村兴起了食用菌生产热潮。
生产中食用菌菌丝繁殖快，容易老化，菌种保藏更难。
下面介绍七种简单易行的菌种保藏方法供广大农户参考：蒸馏水法适用于平菇、金针菇、香菇的苗种。
1、保藏平菇、金针菇菌种先将八成熟待保藏试管菌种移入接种箱内灭菌后，用注射器从试管栓内注入蒸馏水，将培养基面全部淹没至管口2厘米为止。
管口用矿蜡封闭，常温下置于阴凉处立放可以保藏1～1.5年。
2、保藏香菇、木耳菌种，用150×15毫米的指型管将培养至7成熟的固体或半固体试管种在接种箱内无菌操作下，放人25×200毫米的大试管内，向大试管内注入蒸馏水至管口1厘米处，封口用橡皮栓包好，并用矿蜡加固密封，置于阴凉处。
木耳可保藏7～8个月，香菇可保藏9～12个月。
此法在自然温度下也可以保藏其他菌种。
尿素暂存法在避光、干燥通风良好的地方放置袋装尿素，将试管菌种主体埋在尿素颗粒中，试管口露在外面，可保藏菌种活力30天之多。
此法在恒定低温环境下即可进行。
液体石蜡保藏法选用化学液体石蜡，高压灭菌后放入40℃恒温箱中数小时或干燥器中数日，用无菌吸管或注射器吸取液体石蜡注入菌种试管。
注入量应高出斜面尖端1厘米左右，管口塞上棉塞并用石蜡封好。
直立保藏在清洁、干燥、凉爽的低温处可以保藏5年。
麸皮保藏法取一定麸皮加水或营养液后拌匀即可备用。
将水麸皮装入试管经高压灭菌后拌入菌种，放在适温下培养，待菌丝体发育好后将试管放入室温下进行干燥。
然后在20℃以下干燥处保藏，可保藏3～5年。
生理盐水保藏法将菌种接入马铃薯培养液中，每250毫升三角瓶装60毫升养液，振动培养液或每天摇动5～10次，培养5～7天，然后将形成的菌丝球吸入装有5毫升无菌生理盐水的试管中，每管约移入4～5个菌丝球，塞上棉塞，用蜡封好管口。
低温可保藏1年。
麦粒保藏法取优质小麦淘洗后浸入20℃水中泡5小时，稍晾干后装管。
菌种保藏方法及复壮技术
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菌种保藏方法及复壮技术菌种保藏的原理是通过干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养等方法，使菌种的代谢水平降低，乃至完全停止，达到半休眠或完全休眠的状态，而在一定时间内得到保存。
需要时再通过提供适宜的生长条件使保藏物恢复活力，使菌种在较长期的保藏之后仍然保持着原有的生命力、典型的形态特征、优良生产性能。
目前常用的菌种保藏方法有以下几种。
1菌种保藏方法1.1斜面低温保藏法将需要保藏的菌种，接种在适宜的斜面培养基上，菌丝长满斜面时，用硫酸纸包扎棉塞，旋转在4℃的冰箱保藏。
由于微生物的新陈代谢活动未停止，试管内培养基易失水变干，因此，保藏时间较短，转管次数多，不适于长期保藏。
每隔六个月转管一次。
草菇菌种不耐低温，需保藏在10~12℃，或在草菇菌落上灌注3~4毫升的防冻剂（10%的甘油）。
如菌丝长满斜面后，在无菌条件下，用无菌橡皮塞代替棉塞，并用石蜡密封，即可在室温或冰箱中保藏。
这种方法可防止杂菌污染，隔绝氧气，避免培养基干燥，使用方便。
1.2液体石蜡保藏法石蜡防止培养基水分蒸发，隔绝斜面菌丝与空气接触，降低微生物代谢活性，使其处于休眠状态，因此能延长微生物的生命，保持菌种优良的种性。
一般可保藏3~5年，是一种中长期的菌种保藏方法。
液体石蜡选用化学纯的，在121℃下高温灭菌30分钟，再将液体石蜡在160℃烘箱中保温1~2小时，蒸发掉液体石蜡中的水，或将高压灭菌后的液体石蜡放置在40~60℃温箱中，使灭菌后的液体石蜡层由乳白色变成无色透明。
在无菌条件下，将灭菌除水的液体石蜡用无菌吸管罐到长满菌丝的斜面试管中，液体石蜡要高出斜面尖端1厘米左右，然后用无毒泡沫试管塞塞好，直立地放在试管架上或罐头瓶中，置于冰箱或室温中保藏。
液体石蜡灌注过多，移种时不方便；过少，时间长容易干涸。
如将棉塞齐试管中剪平，用石蜡溶封，或用无菌橡皮塞代替棉塞，可延长保藏时间。
食用菌菌种保藏的方法
食用菌菌种保藏的方法保藏食用菌菌种的方法很多，常采用控制温度、水活度、氧气和营养等因素的方法，最大限度降低或抑制食用菌菌丝体的生长从而达到菌种保藏的目的。
首先要挑选优良的纯菌种，包括菌丝体和孢子；其次，根据其生理、生化特点，人为的创造低温、干燥或缺氧等条件，抑制菌丝体的代谢作用，使其生命活动降低或处于休眠状态，从而延长菌种生命以及使菌种保持原有的性状，防止变异。
1 利用菌丝体保存的方法① 琼脂斜面低温保藏将要保藏的菌种接种在PDA斜面培养基上培养，在28～32℃下培养，待菌丝体长满斜面时，把试管的棉塞换成无菌橡皮塞，并用石蜡封口，置于4℃的冰箱低温保藏，每隔2～4个月转管1次。
该种方法保藏的菌种不易老化，生命力强，接种后萌发快，能保持优良性状，但转接周期短，污染风险大，且菌株易变异，易造成菌株衰退。
② 液体石蜡常温保藏法此法亦称矿物油保藏法。
先将化学纯石蜡油（无色、透明的黏稠液体）装于三角瓶中，塞上棉塞并用牛皮纸包裹，放入高压锅中灭菌30min，然后置于40℃的恒温箱中，让水分蒸发至完全透明后备用，使用前先将石蜡油做无菌检查。
在无菌条件下，用无菌吸管将无菌石蜡油注入已长好的斜面试管中，用量以高出斜面顶端1cm为宜，目的是使菌种与空气隔绝，阻止水分蒸发，降低细胞的生长代谢活动，然后用蜡封口后，直立放入室内干燥处。
15～25℃，可以保藏菌种5年。
该方法的优点是成本较低，保藏时间较长，长达数年甚至几十年；缺点是转接培养较慢，往往需要转接培养2～3次，才能除去菌丝体上的液体石蜡，使菌种恢复正常生长。
③ 蒸馏水保藏法蒸馏水保藏方法适用于绝大多数食用菌菌种保藏。
该法是用无菌蒸馏水保存食用菌菌丝体，过程为：用移液器吸取4mL 无菌蒸馏水注入无菌安瓶中，将发育成熟的菌落用无菌接种针挑取数块放入安瓶中，加盖密封，室温保存。
据报道，真菌用蒸馏水保藏可保存1～20年，而且菌株污染少。
④ 盐水保藏法食盐溶液具有高渗透性，对杂菌孢子的萌发具有较强的抑制和杀灭作用，从而减少或避免保藏期间菌种的污染；同时，食盐中含有食用菌生长所必需的钠、镁、钙等金属离子，对菌丝的生长有促进作用，转管后，由于水势差，接种菌株吸水能力强，易恢复，成活率较高。
食用菌菌种四大保存方法
食用菌菌种四大保存方法无论是母种、原种或栽培种，如果未及时使用，其菌丝就会很快衰老，降低生产力，影响产量和质量。
因此，菌种必须进行适当的保存。
其目的是保持菌种的生活力，降低死亡速度，保持菌种原有的优良性状，防止退化，确保菌种纯一，防止杂菌感染。
菌种保存的基本原理：主要是通过采用低温、干燥与缺氧的条件，以中止菌种的繁殖，降低其新陈代谢，使之处于休眠状态。
菌种保存的方法很多，常用的为斜面低温保存法，液体石蜡保存法等。
有条件的还可采用冷冻真空干燥保存法。
1.斜面低温保存法这是最简便最普通的保存方法。
将菌丝生长良好的斜面菌种，置于冰箱内，在4℃左右低温下保存，以后每隔2~3个月转管移接一次。
这种保存方法适于大多数食用菌菌种。
但草菇菌种在5℃以下很快死亡，所以草菇菌种不宜放在冰箱中，置于室温保存即可，每隔2~3个月，也须重新移接一次，防止菌种老化。
为防止菌种在保存过程中积累过多的酸，在配制保存母种培养基时添加0.2%磷酸二氢钾或0.02%碳酸钙等盐类，对培养基PH值的变化能起缓冲作用。
为了延长保存时间，试管口处要用塑料薄膜包扎，以防培养基干涸。
在没有冰箱设备的地方，可把母种试管，用石蜡封口，再用塑料薄膜包封，沉放于清凉的井底保存。
2.液体石蜡保存法食用菌的菌丝体都可用此法保存，方法简单，只在斜面菌种试管内注入一层已灭过菌的液体石蜡，注入量以高出斜面1厘米为宜，使菌种与空气隔绝，降低其新陈代谢的活动，然后在棉塞外包以塑料薄膜，直立存放于室内干燥处或低温下保存，一般可保存一年以上。
液体石蜡在使用前要彻底灭菌，灭菌后的液体石蜡由于有水蒸气渗入，会影响菌种保存质量，因此需要放在44℃烘箱中烘烤数小时，使水蒸气蒸发。
在室温下也可以，不过所需的时间要长些。
使用液体石蜡菌种时，只要用接种计从斜面上挑取少许菌体，放在新鲜的培养基上；经过培养，即可应用。
原种则重新蜡封，继续保存。
3.木屑试管菌种保存法用杂木屑按原种的培养基配制装入大号试管，容量为管高的三分之二，擦净管口塞紧棉塞，用牛皮纸包扎管口后高压灭菌，然后移入母种，在25~28℃下培养，待长满菌丝后，立即移到低温干燥环境保存、或埋于尿素、硝酸铵或地洞中保存，效果更好，并能延长保存时间。
食用菌菌种保藏的方法
食用菌菌种保藏的方法
食用菌是一种广泛使用的食品，如何保存食用菌的菌种是非常重要的。
下面介绍几种常用的菌种保藏方法。
一、冷冻法
冷冻法是将菌种置于低温下，使其处于冷冻状态以达到保藏的目的。
将菌丝均匀地涂于平板上，置于-80℃的低温冷冻柜中冷冻，或将菌丝混入15%甘油溶液中，用液氮冷冻保存。
这种方法保存的菌种质量较好，保藏时间较长。
二、干燥法
将菌丝培养在无菌环境下，培养到菌丝生长至顶部时，用无菌石英砂或无菌滤纸吸干培养皿内的水分，再将石英砂或滤纸中的菌种置于无菌条件下进行干燥，然后密封保存。
这种方法使用简单，保存时间较长，但保存的菌种易受到氧气、温度和湿度等因素的影响。
三、冷藏法
冷藏法是将培养好的菌种置于低温环境下进行保存。
将培养好的菌种涂于平板上，进行初步培养，再将平板用无菌纸包好，置于4℃的冰箱中保存。
这种方法保存的菌种质量较好，但保存时间较短。
四、液氮保存法
将培养好的菌种混入15%甘油溶液中，用液氮冷冻保存。
这种方法保存的菌种质量较好，保存时间长达数年，但需要液氮存储设备。
五、糖分保藏法
将培养好的菌种混入10%蔗糖水溶液中，用常温保存。
这种方法保存的菌种质量较好，保存时间长达数年，但需要注意保藏容器的密封性。
不同的菌种保藏方法适用于不同的情况，我们需要根据实际情况选择合适的方法。
同时，在进行菌种保藏时，需要注意保藏容器的密封性、温度、湿度等因素，以确保保存的菌种质量。
长期保藏食用菌菌种的方法有哪些？
长期保藏食用菌菌种的方法有哪些？（1）矿物油保藏法。
食用菌的菌丝体都可用此法保藏。
矿物油即指质量好的医用液体石蜡。
在试管斜面上灌注液状石蜡可以防止培养基水分的散失；使菌丝体与空气隔绝，以降低新陈代谢，从而达到保藏的目的。
此法保藏菌种一般可贮藏 2～3年，但最好每1～2年移植1次；加了石蜡的菌种，置于室温下保藏比放在冰箱内更好。
将100毫升液状石蜡倒入250毫升三角瓶中，在121℃下灭菌2小时，再在40℃煤箱中烘烤几小时，蒸发水分备用。
然后在无菌操作条件下，在培养好了的斜面菌种上注入一层液状石蜡，注入量以高出斜面尖端1厘米为度。
使用矿物油保藏时，菌种必须置在小铁丝篓或试管架上垂直存放。
由于棉塞易受污染，最好将棉塞齐管口剪平，用矿蜡密封后再以塑料薄膜包扎贮于清洁、避光的木柜中。
（2）沙土保藏法。
此法比较简单方便，将食用菌的孢子保藏在干燥的无菌沙土中。
沙土装入小试管中，要经过严格灭菌后再将无菌孢子拌入沙中，用石蜡封口，放在盛有干燥器的大试管中密封保存。
（3）菌丝球生理盐水保藏法。
将待保藏菌种，在无菌操作下接入无菌的、不含琼脂的液体 PDA 培养基中，每250毫升三角瓶装60毫升，用摇床（以旋转式摇床为好）振荡培养5～7天（180转/分钟，25℃），然后将形成的菌丝球用无菌吸管吸入装有5 毫升无菌生理盐水的试管中，每管转入4～5个菌丝球。
试管用石蜡封口，放在4℃冰箱或常温下保藏。
（4）真空冷冻干燥法。
真空冷冻干燥法主要是采用真空、干燥和低温等三种手段对菌种进行保藏。
这种保藏方法对菌种的保藏期长，10～20年后仍不降低菌种原有的性能。
其保存的基本方法是将需要保藏的菌种悬浮液装在特制的安培管中，然后骤然冰冻，并立即抽真空，使培养物以固体形态升华脱水，熔封后在低温下保藏。
（5）液氮超低温保藏法。
液态氮温度在—195℃，由于液态氮的超低温能使食用菌的代谢水平降到最低限度，因此，采用液态氮超低温冰箱保藏法，能够保藏所有的微生物菌种，包括一些不能用冷冻干燥法保藏的菌种，甚至不耐低温的草菇菌种如用10%的甘油和5%～10%的二甲基矾做保护剂，也能在超低温冰箱中保藏。
食用菌菌种保藏的基本方法
食用菌菌种保藏的基本方法食用菌菌种保藏是指在适当的条件下，延长菌种的保存寿命，保持菌种的菌丝形态、菌核活力以及遗传信息的方法。
常见的食用菌菌种保藏方法有冷冻保存、液氮保存、干燥保存、石膏包埋保存等。
1. 冷冻保存：冷冻保存是将菌种培养物以-80摄氏度的低温条件下保存。
冷冻保存具有保存周期长、操作简便的特点。
具体步骤为：将菌种培养物接种在琼脂平板或液体培养基上培养到菌落充分生长，然后用聚合物添加剂（如甘油、大豆油、卵磷脂等）加入培养物中，制成菌株的冻存物，将冻存物在-80摄氏度的冰箱中保存。
菌种在冷冻保存中还需定期进行代代传承，以维持菌株的稳定性。
2. 液氮保存：液氮保存是将菌种培养物以极低的温度(-196摄氏度)保存。
液氮保存能更好地保护菌种的细胞结构、蛋白质、碳水化合物等组分，减小冰冻对菌种的损伤。
具体步骤为：将菌种培养物接种在琼脂平板或液体培养基上培养到菌落充分生长，然后将细菌培养物加入含有细胞保护剂（如甘油、肉汤等）的1.8ml冻存管中，迅速冷冻至-80摄氏度以上，然后转移到液氮罐中保存。
菌种保存在液氮中，可以保存几十年甚至更长时间。
3. 干燥保存：干燥保存是将菌种培养物在低温低湿的环境下，使其逐渐失去水分而保存。
干燥保存的优点是操作简单，保存周期长，且菌种易于恢复。
具体步骤为：将菌种培养物接种在琼脂平板上培养到菌落充分生长，然后用无菌棉签或无菌吸管将菌落转移到无菌滤纸上，放置在通风干燥处，待菌落完全干燥后，将滤纸装入无菌试管或无菌塑料袋中，密封保存。
4. 石膏包埋保存：石膏包埋保存是将菌种与石膏混合包埋后保存。
石膏包埋保存的优点是操作简便、保存周期长，对于某些对温度敏感的菌种保藏效果较好。
具体步骤为：将菌种培养物接种在琼脂平板上培养到菌落充分生长，然后用芯子将培养物取出，混合适量石膏搅拌均匀，装入无菌塑料袋或无菌瓶中，封好保存。
在进行食用菌菌种保藏的过程中，应注意以下几点：- 菌种的分离与筛选：只有选取健康、快速生长、菌株形态周正且菌核完整的细胞进行保存，才能保证保存的菌株具有较高的活力。
食用菌菌种贮藏
食用菌菌种贮藏1.低温定期移植贮藏法将需要贮藏的菌种接种在适宜的斜面培养基上，适温培养，当菌丝健壮地长满斜面时取出，放在3℃-5℃低温干燥处或4℃冰箱、冰柜中贮藏，每隔4-6个月时间移植转管一次，具体应根据菌种特性决定。
贮藏时要注意环境温度不能太高，以防霉菌通过棉塞进入管内。
因此，若用棉塞，可用干净的硫酸纸或牛皮纸包扎棉塞，即可减少污染的机会，也可防止培养基干燥。
除草菇菌种外，其他食用菌菌种都能采用此法贮藏。
2.液体石蜡贮藏法取化学纯液体石蜡(要求不含水分、不霉变)装于三角瓶中加棉塞并包纸，在1公斤/平方厘米压力下灭菌1小时，再放入40℃恒温箱中数天，以蒸发其中水分，至石蜡油完全透明为止。
将处理好的石蜡油移接在空白斜面上，在28℃-30℃温度下培养2-3天，确定无杂菌生长方可使用。
然后用无菌操作的方法把液体石蜡注入待贮藏的斜面试管中。
注入量以高出培养基斜面1-1.5厘米为宜，塞上橡皮塞，用固体石蜡封口，直立于低温干燥处贮藏。
贮藏时间在1年以上，在低温下，保藏时间还可延长。
3.沙土管贮藏法取河沙用水浸泡洗涤数次，过60目筛除去粗粒，再用10%盐酸浸泡2-4小时，除去其中有机物质，再用水冲洗至pH值达到中性，烘干备用。
同时取贫脊土或菜园土用水浸泡，使其呈中性，沉淀后除去上清液，烘干碾细，用100目筛子过筛，将处理好的沙与土以(2-4)：1比例混匀，用磁铁吸出其中的铁质，然后分装小试管或安瓿内，每管装量0.5-2克，塞棉塞，用纸包扎灭菌(1.5公斤/平方厘米，1小时)，再干热灭菌(160℃，2-3小时)1-2次，进行无菌检验，合格后使用。
将已形成孢子的斜面菌种，在无菌条件下注入无菌水3-5毫升，刮菌薹，制成菌悬液，再用无菌吸管吸取菌液滴入沙土管中，以浸透沙土为止。
将接种后的沙土管放入盛有干燥剂的真空干燥器内，接上真空泵抽气数小时，至沙土干燥为止。
真空干燥操作需在孢子接入后48小时内完成，以免孢子发芽。
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几种食用菌菌种保藏方法
食用菌菌种是指用于食用或驯化培养的真菌种类。
在保藏食用菌菌种时，主要有以下几种方法：
1.冷冻保藏：将菌种置于-80℃的低温环境中。
首先，将菌种种植在琼脂平板上的单独菌落。
然后，将单独的菌落切下并置于含有30%甘油的琼脂平板上。
最后将含有菌落的琼脂平板置于-80℃的低温冷冻库中进行保存。
这种方法适合于长时间保存，但对设备和电力有一定需求。
2.雪贮法：将菌种置于冷藏室的冷湿源物质上。
首先，将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后，将菌落保留在琼脂平板上并将其置于冷藏室中。
这种方法适用于一般食用菌的保存，在适宜的湿度和温度下，可以保存数月至一年。
3.干燥保藏：将菌种置于干燥环境中。
首先，将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后将菌落切下并置于无菌的滤纸或多孔塑料袋中。
最后将菌种放置于干燥通风良好的地方，等待其自然干燥。
这种方法适用于一些干货类食用菌种，如香菇、平菇等。
4.培养罐保藏：将菌种保藏于培养罐中。
首先，将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后将菌落切下并置于无菌培养罐中，加入适宜的培养基，并密封培养罐。
最后将培养罐保存在适宜的温度和湿度下。
这种方法适用于菌种的短期保藏。
5.低温干燥保藏：将菌种保藏于低温干燥器中。
首先，将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后将菌落切下并置于低温干燥器中，通过低温干燥将其保存起来。
这种方法适用于一些低温耐受性较强的食用菌。
总结起来，以上是几种食用菌菌种保藏的方法。
选择合适的方法可根据菌种的特性、用途和预期保藏时间来确定。
在进行菌种保藏时，要注意无菌操作，避免菌种的污染或变异，并在适宜的环境条件下保存。
这将有助于保持菌种的营养价值和生物特性，以及保证其在后续使用中的质量。