血小板检查
各类血小板功能检测的临床意义
显微镜计数法
通过人工显微镜观察血液样本，计数血小板数 量。
其他方法
如流式细胞术、电镜技术等，用于特殊情况下或进一步研究。
血小板计数检测的临床意义
诊断出血性疾病
血小板计数是诊断出血性疾病的 重要指标，如特发性血小板减少 性紫癜、血栓性疾病等。
监测抗凝治疗
对于接受抗凝治疗的患者，定期 检测血小板计数有助于评估治疗 效果和调整治疗方案。
通过检测血小板表面的活化标记物， 了解血小板活性状态。
血小板功能检测的临床应用
诊断血栓性疾病
通过对血小板功能的检测，有助于诊 断血栓性疾病，如动脉粥样硬化、心 肌梗死、脑卒中等。
评估心血管疾病风险
通过检测血小板功能，可以评估个体 发生心血管疾病的风险，为预防和治 疗提供依据。监测抗血小板药物治疗效果来自血小板活化检测的临床意义
诊断血栓性疾病
01
血小板活化是血栓形成的关键步骤，通过检测血小板活化程度
有助于诊断血栓性疾病，如心肌梗死、脑梗死等。
评估抗血小板治疗效果
02
对于接受抗血小板治疗的患者，检测血小板活化程度有助于评
估治疗效果，指导治疗方案调整。
预测心血管事件风险
03
血小板活化程度与心血管事件风险密切相关，通过检测血小板
活化程度有助于预测患者发生心血管事件的风险。
血小板活化检测的注意事项
01
02
03
标本采集和处理
采集血液标本时应避免过 度挤压和抗凝剂不足，防 止血小板活化和聚集。
检测方法选择
不同检测方法对血小板活 化的敏感性和特异性存在 差异，应根据具体情况选 择合适的检测方法。
结果解读
结合患者临床表现和其他 检查结果综合分析血小板 活化检测结果，避免误诊 和漏诊。
血液学检验33第七章-第2节-血小板的检验
1.是诊断特发性血小板减少性紫癜的指标之一 2.是ITP观察疗效及估计预后的指标 3.有助于研究其他疾病的免疫机制 【应用评价】 1.方法学
2.自身抗体的类型
第二节 血小板检验
六、血小板生存时间
【实验原理】根据观察单次剂量服用阿司匹林后血 小板TXB2和MDA生成量的恢复曲线可以反映血小板 的生存时间。可用ELISA或RIA测定TXB2或MDA的含 量。 【参考区间】TXB2法 7.6～12d，MDA法 9～12d
第二节 血小板检验
六、血小板生存时间
【临床意义】PST缩短见于血小板破坏增多性疾病 、 血小板消耗过多性疾病、高凝状态和血栓性疾病等。 【应用评价】PST测定主要有放射性核素和非放射性 核素两类方法。放射性核素法测定的准确度较高； TXB2或MDA测定的非放射性核素法可避免使用放射性 核素，操作简便。
第 第一 七章 章 造 血血栓及与造止血血调疾控病 检验技术
第一节 造血器官与造血微环境 第二节 血小板检验
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一、血小板黏附试验 二、血小板聚集试验 三、血小板膜糖蛋白测定 四、血小板活化分析 五、血小板自身抗体 六、血小板生存时间 七、血小板第3因子有效性测定
第二节 血小板检验
第二节 血小板检验
七单、击血小此板处第编3因辑子母有版效标性测题定样（式PF3 ）
【实验原理】将健康人和患者的富含血小板血（PRP） 和乏血小板血浆（PPP）交叉混合，以白陶土激活 FⅫ，加钙离子后测定混合血浆的凝固时间，比较各 组血浆凝固时间的差异，从而判断PF3是否有缺陷。 【参考区间】受检者与健康人PRP、PPP交叉混合的 凝固时间延长＜5s 。
第二节 血小板检验
二、血小板聚集试验
血小板检验及临床意义
血小板检验及临床意义血小板检测方法可归纳为出血、血栓和药物监测3大类。
虽则有些方法能应用于多种检测目的，但为特殊目的而创建的方法亦有重要价值。
故在检测时应合理地运用。
血小板的基本功能是黏附、聚集、分泌、促凝血、血块回缩。
通过这些功能维持着正常人体的初期止血作用。
由于这些功能异常而导致的出血疾病包括遗传性和获得性两类，在有些疾病同时会有血小板功能异常和数量减少。
1 血小板数量检查1.1目测计数法将血液用适当的稀释液作一定量稀释，混匀后充入计数池内，在显微镜下计数一定体积内的血小板数量，经过换算得出每升血液中血小板数。
1.2细胞分析仪计数法1.2.1电阻抗法血小板通过小孔引起电阻变化，产生的脉冲经数字化后，根据不同的阈值，计算机分别给出血小板数目。
1.2.2光散射法折射率与细胞内容物有关，血小板有别于红细胞等其它非血小板颗粒，其折射率较低，通过低角度光散射即可与红细胞区别。
2 血小板形态、结构检查瑞氏染色，显微镜观察；MPV检查，应用全自动血细胞计数仪检测。
3 血小板功能检查3.1血块收缩试验(CRT)血块收缩时有相应的血清析出，计算占原有血量的百分数。
3.2血小板粘附试验一定量血液与一定表面积的异物接触后，即有相当数目的血板粘附于异物表面上，测定接触面后血小板数之差，可求出占血小板总数的百分率。
3.3血小板聚集试验血小板聚集是血小板的主要功能之一，主要有比浊法、剪切诱导血小板聚集测定法、散射性粒子检测法、全血电阻抗法、血小板计数法、微量反应板法等。
3.3.1比浊法在特定的搅拦条件下，在富含血小板血浆中加入诱导剂后，由于血小板发生聚集，悬液的浊度随之下降，根据描记曲线可以计算血小板聚集程度及速度[1]。
3.3.2剪切诱导测定法不加诱聚剂，血小板在高剪切力环境下血小板聚集，根据比浊法的原理采用旋转式铁板流体测定仪，仪器绘制成聚集曲线，以观察体外血小板聚集变化。
4 注意事项4.1全部用具和稀释液要特别清洁，无污染。
血小板
页
形态改变
病理性幼稚型血小板
☆体积较大，呈圆形，胞膜无丝状“树突”伸出， 胞质蓝色，颗粒缺乏，为未成熟巨核细胞所脱落；
☆正常人见不到。
☆↑：见于特发性和反应性血小板病。
☆当骨髓巨核细胞增生时，尤其在特发性血小板减 少性紫癜出现PLT减少危象和粒细胞性白血病时， 可以见到大量蓝色和巨大的血小扳。
形态改变
方法学评价
优点：重复性好，准确性高，能同时提供血小板 缺点：仪器不能区分PLT与其他类似大小的物
质，如：RBC碎片、WBC碎片、灰尘等
杂物。因此，有时仍需目视法做校正，
因而国外仍然将目视法（特别是相差显
微镜法）作为参考方法。
目视计数法
目 视 显 微 镜 计 数 法 普 通 显 微 镜 法 直接法
ACD保养液
【质量保证】
原则：避免血小板被激活、破坏，杂物污染。
1.检测前 （1）采血是否顺利：采血时血流不畅可导致血小 板破坏，使血小板计数假性降低； （2）选用的抗凝剂是否合适：肝素抗凝不能用于 血小板计数；EDTA-2K抗凝血标本取血后1h内 结果不稳定，少数患者可引起血小板聚集； （3）储存时间是否适当：标本保存于室温，低温 可激活血小板，储存时间过久可导致PLT计数 偏低。
Plt计数
血小板计数（目视计数法）
•原 理：
P P P P P
• 与白细胞计数基 本相同。 • 不同点：计数中 央大方格内5个 中方格的Plt数。
Plt计数
血小板计数（目视计数法）
• 国内最常用的血小板直接计数法: • 1、草酸铵溶血法（首选） • 2、复方尿素溶血法 （次选） • 无论是自动血液细胞分析仪法或显微镜计 数法，多以草酸铵溶血法作为参考方法， 国内将其作为首选方法。
血小板的检测原理及误差分析(1)
镜检
解决方案： 显微镜镜检发现有红细胞大小不 均，有大量红细胞碎片存在。血 小板散在分布，数量正常。此种 情况下，PLT-I必然假性增高， 使用PLT-F可以完全排除干扰
3、巨大血小板
• 刘某，女70岁，因身体不适，在县城二级医院就诊，血常规检查， WBC:6.1*10E9/L，RBC:5.4*10E12/L，HGB:132g/L,PLT:10*10E9/L， 转诊至某三甲医院血液科就诊，PLT-I：8*10E9/L，使用PLT-F通道 后，PLT-F：24*10E9/L, IPF:75.8%，推片镜检，可见血小板明显减 少，血小板体积明显增大。
非常感谢！
血小板的检测原理及误差分析
学术应用部 张文忠
血小板基础
• 什么是血小板？ • 血小板（platelet,PLT）是由骨髓造血组织中的巨核细
胞产生，具有维持血管内皮完整性以及黏附、聚集、释 放、促凝和血块收缩等功能。 • 正常血小板形态呈两面微凸的圆盘状，直径约1.5-3um， 新生血小板体积大，成熟血小板体积小。
PLT-I方法学优缺点
• 优点：目前常规筛检PLT的主要方法 • 1.检测速度快 • 2.重复性好 • 3.准确性高 • 4.同时提供多项指标
• 缺点：容易受干扰因素影响，导致结果出现偏差 • 1.假性增高：小红细胞、红细胞碎片、微小细胞碎片 • 2.假性减低：微小血小板、大血小板、血小板聚集
光学法（PLT-O）
无PLT体积分布异常报警信息
有PLT体积分布异常报警信息
单位
低值范围的血小板样本中，PLT-F测定的精度最高
在没有干扰的情况下
Correlation with immnological method ( anti-CD-61 Ab; Abbott ). Subjects: Samples with PLT-I measurement abnormality (n=120), fragments, g-PLT and so on.
血小板检查
南华大学 University of South China
南华大学 University of South China
南华大学 University of South China
31，血小板直方图异常（血小板聚集引起的除外），应该涂片镜检。 32，有不成熟粒细胞（仪器图像判断），且为首次检查时，应该涂片镜检。 33，有不成熟粒细胞（仪器图像判断）， 34，有核左移的图像（仪器图像判断或者提示），应该执行实验室SOP。 35，有异型（变异）淋巴细胞图像（仪器提示有异淋），且为首淋），以前证实过结果，但是 WBC阳性差值失败，应该涂片镜检（希望专家能解释一下本条规则---译者）。 37，有原始细胞图像（仪器提示有原始细胞），且为首次检查时，应该涂片镜检 。 38，有原始细胞图像（仪器提示有原始细胞），以前证实过结果，差值通过或者 对WBC有阴性差值，且在3-7天内检查，应该执行实验室SOP。
南华大学 University of South China
经验教训：
1、初次到本院检查，血小板<50X109/L的，不管机器是否报“聚集”， 必须进行目测血小板检查。用的就是临检操作规程上的目测方法。看看 有没有聚集，没有聚集就可以发送了。 2、主要仪器报“聚集”，需要重点关注。 2.1此时需进行目测血小板，计数盘中血小板聚集成团，不能计数。 2.2马上通知病人用枸橼酸抗凝管采血，进行全血细胞分析，一般情况 下血小板计数恢复正常。 2.3告知病人以后做血常规不能用“紫管”，要用“蓝管”。
坏红细胞。 高铁氰化钾：不能完全破坏红细胞。 复方碘：不破坏红细胞，易长菌，已淘汰。
诊断血小板减少的检查方法
诊断血小板减少的检查方法
血小板减少检查方法
1、全血细胞计数：
检查结果有白细胞计数异常或贫血(轻度除外)，提示有严重的血液学疾病可能，如急性白血病或骨髓增生障碍。
2、血涂片检查：
检查目的是寻找破碎红细胞、原始细胞、其他幼稚细胞或异常细胞。
检查结果有破碎细胞，则提示有血栓性血小板减少性紫癜或其他微血管溶血性贫血的可
能。
我以前血小板只有7，后来喝了半年左右的康髓诺汤药，血小板基本恢复正
常了，而且一直很稳定。
3、生化检查：
检查肝酶谱以排除患者有病毒性肝炎。
肝酶谱(血清酶)主要是用来判断有无肝实质细胞损伤、肝内外胆汁淤积等肝胆疾病，并可以引起大多数酶指标不同程
度升高，其高低与肝细胞损害程度和疾病的严重性相一致。
4、自身免疫性疾病的血清学检查：
如果在初步检查和进一步检查中，发现血小板减少患者自身免疫性疾病的病史或体征，则需要检查抗核抗体。
5、HIV检测：
任何有危险性的患者都要行HIV的血清学检查。
(有关人士建议任何初发的血小板减少患者都要做HIV的血清学检查)
6、骨髓检查：
如果血小板减少患者还存在其他的血液学异常，骨髓检查是必须的；如没有其他异常，则无需做骨髓检查。
诊断血小板减少的检查方法
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血小板功能检测注意事项
血小板功能检测注意事项血小板功能检测在血栓预警、早期诊断及血栓用药指导都具有十分重要和无法替代的价值，此外血小板功能检测在血液疾病诊断、炎症反应过程、药物研究、肿瘤转移、血液成份质量控制中都具有广泛的应用价值。
近年来由于血栓性疾病的严重危害及抗血小板药物个体化治疗的迫切需要，血小板功能检测技术方法研究及其在心脑血管疾病临床实践和相关科研中的应用都十分活跃。
血小板功能检测如此重要，而由于血小板的特点等原因血小板功能检测具有较大难度。
因此，血小板功能检测质量控制和严格按照规范执行就显得十分重要。
否则可能由于检测结果的偏差导致诊断和治疗失误。
血小板功能检测要注意哪些细节才能获得准确的结果呢？下面我们根据近年来我们实际经验将总结血小板功能检测中应注意的事项介绍如下。
首先需要选择一台准确、方便、具有质控并通过临床验证的血小板功能检测仪器，是重要的第一步。
1.采血时间：空腹或餐后二小时以上；2.采血后必须在二小时内完成检测；3.采血及检测应在室温20-26°C条件下进行，并要避免震荡（剪切力）对样本质量的影响4.血小板功能检测应当作为即时/床旁检测（POCT）检测项目，建议门诊及体检由被检查者自行到检验科采血检测；而临床病房应设置床旁检测仪器，在临床科室由科室人员在床旁随时采血随时检测；5.采血顺序：应当是血常规、血小板功能。
始终注意血小板功能血样应在第二管采血；6.采血管选用：必须使用3.8%枸橼酸钠血小板功能检测专用抗凝管（双层）；7.应关注被检测者用药及其它原因（药物、生理、病理）可导致的血小板功能改变等。
由于血小板功能检测结果对临床诊断、治疗具有极高的价值，因此，各单位开展血小板功能检测应严格按照规范要求，尽量杜绝和减少任何可能导致检测结果错误的因素，为临床血栓防治提供准确的有价值的检测报告。
我公司在血小板功能检测技术达到国际领先水平，同时我公司市场推广部可为各临床单位提供技术咨询、仪器使用培训及相关临床试验设计技术支持服务。
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（二）器材
光学显微镜；血球计数板、Hb吸管、试管、采血针 等。
（三）试剂：下列试剂任选一种
1.草酸铵稀释液：草酸铵1.0g,EDTA-Na2 0.012g，蒸 馏水加至100mL.首选试剂。
2.许汝和稀释液（复方尿素稀释液）：尿素10g，枸 橼酸钠0.5g，40%甲醛0.1mL蒸馏水加至100mL。 过滤冰箱保存。
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病理变化
▪ 1.plt减少： ①生成障碍：急性白血病，再障，巨幼贫等 ②破坏过多：ITP、脾亢、SLE等； ③消耗过多：DIC、血栓性血小板减少性紫癜 ④分布异常：脾肿大、血液被稀释等； ⑤先天性：新生儿plt减少症、巨大plt综合征
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▪ 2.plt增多： ①原发性：慢粒、原发性plt增多症、真性红
细胞增多症等； ②反应性：急性化脓性感染、大出血、急性
溶血、肿瘤等； ③其他：外科手术后、脾切除等。
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三、plt平均体积（MPV） 的临床意义
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▪ MPV参考值：6.8~13.6fL ▪ 分析MPV临床意义需结合plt数量变化。 ▪ 1.鉴别plt减少症的原因 ▪ ①plt ，而MPV ，骨髓自身正常，外周血
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▪ 4.流式细胞仪法：用血小板单克隆抗体染色 标记血小板，根据荧光强度和散射光强度， 用独立的流式细胞仪检测可得到准确性极 高的血小板数。流式细胞仪法式目前血小 板计数参考方法。
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▪ 5.相差显微镜法：相差显微镜下，血小板立 体感增强，有助于识别血小板，还可照相 后核对计数结果，作为手工法血小板计数 的参考方法。
Plt 2/3在循环血，其余贮存于脾。
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（二）血小板的破坏
▪ 血小板的平均寿命为7~14天，具有止血功 能仅开始2天。衰老的血小板在单核巨噬细 胞破坏，主要在脾破坏。
▪ 脾池化：全身约有1/3的血小板滞留于脾窦 和脾髓的细胞间，血小板在脾内的这种滞 留现象即“脾池化”，脾池中的血小板和 循环池中的血小板可以互换。
▪ 2 PCT：是血小板计数值和MPV经过计算 得到的，其值的大小与PLT和MPV值有关。 PCT = PLT×MPV
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▪ 3、参考值： PDW：15.5%～18.1% ▪ PCT: 成人：0.108%～0.282% 1～15岁儿
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（八）方法学平价
▪ 1.草酸铵法对RBC破坏力强，使视野清晰， plt形态清楚，是全国临床检验操作规程推 荐方法。由于Plt体积小，易粘附、聚集及 破坏等，结果不甚理想。
▪ 2.复方尿素法优点是plt胀大易辨认，但不 能完全溶解RBC，且尿素易分解，试剂保 存时间短。
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▪ 3.血液分析仪法可同时测MPV、PDW等多 个指标，快速，临床适用。但不能鉴别红 细胞碎片、灰尘等与plt大小相似之物，故 计数误差大。当直方图出现变化时，应用 显微镜计数法校准之。
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（四）操作
▪ 1.在小试管中加入plt稀释液0.38mL。 ▪ 2.取末梢血20μL加入试管中，迅速摇匀。
室温放置>10分钟。 ▪ 3.充池，静置10~15分钟。 ▪ 4.高倍镜下计数中央大方格中四角及正中共
5个中方格内的plt数。
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（五）计算
血小板数/L=5个中方格内血小板数（N） ×5×10×20×106/L =5个中方格内血小板总数×109/L
观察血小板数量、大小、分布情况，并注 意有无异常增多的红、白细胞碎片。 ▪ （2）用参考方法核对。 ▪ （3）同一份标本2次计数误差要<10%。
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（十一）临床意义
生理变化： ▪ ①新生儿<婴儿，出生后3个月达成人水平。 ▪ ②晨间<午后，春季<冬季，毛细血管<静脉 ▪ ③运动、饱餐后上升，休息后恢复。 ▪ ④月经期低，经期后上升。 ▪ ⑤妊娠中晚期 ，分娩后1~2天
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（三）血小板检测常用项目
▪ 1、血小板计数 （PLT）:手工单项或血液 分析仪多项检测
▪ 2、血小板平均体积（MPV）
▪ 3、血小板分布宽度(PDW) ▪ 4、血小板比积(PCT)
血液分析仪测
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二、血小板计数（手工法）
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（一）原理
▪ 将血液稀释一定倍数，充入计数池内计数， 计算出每一升血中血小板数。稀释液破坏 RBC, 固定Pt并防止聚集。
plt破坏 。 ▪ ② plt ，而MPV ,骨髓抑制损伤而造成plt
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▪ 2.血小板增高性疾病 ▪ ①plt ，而MPV :脾切除，慢粒等； ▪ ② plt ，而MPV ：严重感染。 ▪ 3.血栓前状态或血栓性疾病时MPV常增高
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▪ 4. MPV↑可作为判断骨髓功能恢复的较早指 标：
▪ ①骨髓功能衰退时，MPV、PLT同时 ，抑 制越重，MPV越 。
▪ （九）参考值：（100~300）×109/L
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（十）质量保证
▪ 原则是：避免血小板被激活、破坏，避免 杂物污染。
▪ 1.检测前：采血要顺畅，抗凝剂选用合适， 储存时间适当；
▪ 2.检测中：手工法计数要定期检查稀释液质 量，仪器法要质控合格；
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▪ 3.检测后： ▪ （1）用同一份标本制备学血涂片染色精简
▪ ②当骨髓功能恢复时，MPV 先于PLT，是 功能恢复的第一指标。
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▪ 5.作为出血程度的监护指标 :
▪ 有出血倾向者MPV显著低于无出血倾向者， 即使严重的PLT 者，如MPV>6.4fL，出血 发生率也低。
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四、血小板分布宽度(PDW) 和血小板比积(PCT）
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▪ 1 PDW：是血液分析仪对血小板分布情况 进行数据处理得到的血小板体积的变异系 数。
血小板检查
检验系临检教研室 陈丽华
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目的要求
掌握：血小板计数的原理、、方法、质量 控制、参考值、方法学平价及临床意义。
重点 : 血小板计数 难点: 血小板形态
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一、概述
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（一）血小板的生成
造血多能干细胞
TPO调控 分化
原巨核细胞
促进巨核细胞祖细胞增 殖、分化、成熟与释放 plt 进入血液
（六）结果报告 PLT:△△△ ×109/L
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（七）注意事项
▪ 1.全部用具和稀释液要特别清洁，防尘、防 菌，以免计数时误认。
▪ 2.针刺要深，吸血及稀释动作要快，防聚集。 ▪ 3.同时做多项检查时，优先采plt计数之血。 ▪ 4.充池前应充分摇匀，充池后需静置10分钟
以上待plt全部下沉后再计数。1h内完成。