虎眼万年青药理活性及安全性研究进展

虎眼万年青药理活性及安全性研究进展近年来，虎眼万年青的化学成分，药理活性方面的研究均取得重要进展，其广泛的药理活性包括抗肿瘤，免疫调节，镇痛抗炎，防治肝损伤等多方面。

本文对虎眼万年青的药理活性及安全性研究进行文献整理与分析，为该药材的临床及开发利用提供参考。

标签：虎眼万年青；药理活性；安全性虎眼万年青（Ornithogalum caudatum ait），别名珍珠草、海葱、鸟乳花等，为百合科、虎眼万年青属多年生草本植物。

由于其不僅具有较高的观赏性，也具有很高的药用价值，民间将其作为中药材使用。

虎眼万年青鲜汁液外敷可以消炎、消肿、止痛，水煎内服可以解毒化瘀，治疗肝炎、肝硬化等顽疾[1]。

1 虎眼万年青药理活性研究1.1抗肿瘤活性虎眼万年青的抗肿瘤作用，文献报道较多，而且从多个角度阐明了其抗肿瘤的机制。

OSW-1对多种肿瘤细胞都具有非常强的靶向细胞毒性，而对正常细胞的毒性损伤却很小，它的抗癌活性为紫杉醇、阿霉素以及喜树碱的10～100倍[2，3]。

目前研究普遍认为OSW-1类化合物的作用机制在于，其能够破坏细胞的线粒体膜，从而诱导细胞凋亡。

有研究[4]发现OSW-1能够破坏白血病细胞以及胰腺癌细胞线粒体膜，使得跨膜电位降低，胞浆内Ca2+浓度增加，激活Ca2+依赖性的细胞凋亡途径，诱导细胞凋亡。

也有研究[5]发现OSW-1能够与Caspase-8结合，并激活其诱导Bcl-2裂解，使线粒体膜无法保持完整性，细胞色素C释放至胞浆，从而细胞凋亡。

但由于OSW-1的提取分离、合成工艺复杂且耗资较高。

亦有不少学者研究虎眼万年青的总皂苷（ORS）的抗癌作用效果。

在MTT法检测ORS对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的细胞增殖抑制实验中[6]，浓度≥25μg/mL的ORS显示出明显的细胞生长抑制作用，且呈现出剂量时间依赖性；其亦可诱发细胞发生凋亡，且凋亡率呈浓度依赖性，使得细胞周期明显阻滞于G0/G1期。

在虎眼万年青总皂苷干预对二乙基亚硝胺诱发的大鼠肝癌变实验中[7]，研究人员运用免疫组化方法观察并分析第12、14、18w肝组织标本中Ki67、Flt-1的表达。

在肝的癌变过程中，12w模型组Ki67 LI表达最高，14w模型组Flt-1 LI 表达最高，而ORS作用的12w预防组Ki67 LI表达较低，14w预防组，治疗组Flt-1 LI表达较低，且都与模型组有统计学意义。

此实验研究表明在二乙基亚硝胺诱发的肝癌变过程中，虎眼万年青总皂苷可以干预肝损伤，硬化阶段的肝细胞增生，而在肝癌发生阶段，干预Flt-1的表达。

虎眼万年青中提取的水溶性多糖成分亦具有抗肿瘤效果[8]，采用EDAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱色谱和Sephadex G-75凝胶过滤柱色谱分离纯化，分离得到的四个多糖部位（OCAP-2-1，OCAP-2-2，OCAP-3-1和OCAP-3-3），其主要由葡萄糖（30%～42.5%），半乳糖（23%～29%），阿拉伯糖（6%～14%），甘露糖（2%～9%），木糖（4%～6%），葡萄糖醛酸（1.0%～7.5%），半乳糖醛酸（1%～6%）组成。

其蛋白质含量分别为2.13%，2.82%，3.45%，3.97%，分子量分别为102.1，62.3，46.4和22.8 KDa，该四种多糖组分在体内抗肿瘤实验中，对小鼠肉瘤S180抑制作用均显示出较高的活性，而在体外细胞实验中，OCAP-2-2，OCAP-3-1和OCAP-3-3对人类慢性髓性白血病细胞K562显示出很高的抑制活性。

1.2肝损伤及肝硬化防治在防治大鼠急性肝损伤实验中[9，10]，研究人员对比吉林长白山中药研究所的虎眼万年青精制粉与甘草酸二胺防治组的防治作用，结果显示，与CCl4急性肝损伤模型组相比，虎眼万年青具有与甘草酸二胺相当的降低急性肝损伤组大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、并提高血清前白蛋白（PA）活性的作用，而在HE染色观察肝组织病理变化，免疫组织化学法观察肝组织溶菌酶蛋白（MOD）的表达、了解急性肝损伤大鼠肝脏枯否氏细胞（KC）的变化的实验中，虎眼万年青防治组显示出其能够显著改善肝组织炎性反应，大鼠肝组织MOD表达较模型组显著降低，且优于甘草酸二胺防治对照组，说明虎眼万年青抑制KC表达，可能是其防治急性肝损伤的作用机理之一。

在对乙酰氨基酚建立的急性肝损伤模型中[11]，体内实验结果表明，虎眼万年青总皂苷在对乙酰氨基酚诱导肝损伤12h后具有较强的肝保护作用，抑制了血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶的活性，减少了脂质过氧化物的生成，提高了过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性，抑制了细胞凋亡蛋白酶caspase-3和缺氧诱导因子-1α的表达。

体外实验结果显示虎眼万年青总皂苷显著减少了对乙酰氨基酚代谢过程中关键酶细胞色素P4502E1的活性及环氧化酶2的表达。

肝硬化是临床常见的慢性进行性肝病，由一种或多种病因长期或反复作用形成的弥漫性肝损害。

肝纤维化是肝硬化的前期，是慢性肝病发展为肝硬变的必经阶段[12]。

在探索虎眼万年青总皂苷诱导活化肝星状细胞（HSC）凋亡机制实验中[13]，作者采用蛋白免疫印迹测定虎眼万年青总皂苷对激活的t-HSC细胞总蛋白MMP-13、TIMP-1以及核蛋白中NF-kB p65表达的影响，实验结果显示，对于体外培养的t-HSC细胞，虎眼万年青皂苷通过激活NF-kB p65诱导MMP-13蛋白表达，并抑制TIMP-1蛋白表达，从而诱导活化肝星状细胞凋亡。

1.3免疫调节作用在小鼠免疫调节实验研究中[14-16]，研究人员通过机体非特异性免疫和体液免疫功能的实验，证明了虎眼万年青多糖能够有效增强小鼠非特异性免疫及体液免疫功能，筛选出其有效组分为虎眼万年青中性多糖活性组分S3，细胞和分子水平实验表明，S3能够增强小鼠T、B淋巴细胞的转化、提高NK细胞的细胞毒活性、促进小鼠脾细胞中细胞因子IL-2的分泌，有利于增强细胞毒T细胞和NK细胞的杀瘤效应。

研究人员随后利用流式细胞术检测S3对T 淋巴细胞亚群的影响，并采用RT-PCR方法检测IL-2mRNA的表达水平，进一步证实了S3对辅助性T细胞（Th）的增强作用及对抑制性T细胞（Ts）的抑制作用，并能够促进IL-2的mRNA表达量，该实验进一步从基因水平证实了S3有提高小鼠免疫功能的作用。

1.4镇痛抗炎作用在虎眼万年青乙醇提取物镇痛、抗炎的实验研究中[17，18]，对于热刺激（热板法）所致小鼠疼痛以及醋酸所致小鼠疼痛（扭体法），虎眼万年青能显著提高小鼠痛阈值，对热板刺激所致小鼠疼痛和醋酸刺激所致的疼痛反应均有一定的抑制作用。

采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法和醋酸致小鼠毛细血管通透性增高法观察其抗炎作用，结果显示虎眼万年青能显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，抑制醋酸诱导的小鼠腹腔毛细血管通透性增加，说明虎眼万年青能够抑制毛细血管扩张、通透性增加、渗出性水肿为主的炎症早期反应。

1.5抗氧化作用在虎眼万年青乙醇提取物抗氧化活性实验中[19]，采用邻二氮菲-Fe2+氧化法、邻苯三酚自氧化法和DPPH法分别测定其清除羟基自由基的能力、清除超氧阴离子的能力和DPPH自由基的能力。

结果表明，虎眼万年青70%乙醇粗提取物总皂苷的含量最高，抗氧化活性也最强，且70%虎眼万年青乙醇提取物的正丁醇相清除OH、O2和DPPH三种自由基的综合能力最强。

而在体内抗氧化活性实验中，通过测定小鼠血清和肝组织中的超氧化歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）数值的变化来研究虎眼万年青乙醇提取物的抗氧化活性，结果显示，70%虎眼万年青乙醇提取物正丁醇相可以有效的提高体内SOD数量，降低MDA数量，抗氧化效果显著。

虎眼万年青粗多糖亦体现出一定的抗氧化活性[20]，实验显示其对OH、O2和DPPH都有一定的清除活性，且呈現一定的量效关系。

当粗多糖浓度达到7mg/mL时，对DPPH、O2和OH的清除率分别达到73%、60%和79%。

2 安全性研究2.1细胞毒性作用研究在细胞毒性实验中，研究人员对比了OSW-1和几种临床应用的抗癌药物对正常人体肺细胞的IC50值[2]，结果显示，OSW-1的IC50值为 1.5μg/mL，而丝裂霉素（MMC），阿霉素（ADM），顺铂（CDDP），喜树碱（CPT）和紫杉醇（TAX）分别为2μg/ml，2μg/ml，10μg/ml，2μg/ml，2μg/ml，说明OSW-1对正常细胞毒性较小，且远远小于其对肿瘤细胞的毒性作用（OSW-1对人肺癌细胞（Lu-65）的IC50值为0.00020μg/mL，对人白血病细胞（CCRF-CEM）IC50值为0.00016μg/mL）。

另有研究人员测试OSW-1对人体血液中正常淋巴细胞，卵巢纤维原细胞，大脑正常星形胶细胞的IC50值[4]，结果显示，OSW-1对这三种正常细胞的IC50值分别为1.73nM，0.83nM，7.13nM，远高于其对肿瘤细胞的IC50值。

2.2致突变作用研究有学者依据GB15193-2003《食品安全性毒理学评价程序和检验方法》对虎眼万年青乙醇提取物进行了小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验（Ames试验）对其可能引起的致突变性进行研究[21]。

微核试验结果显示在2.5～10g/kg的给药剂量范围内，各剂量组微核率与阴性对照组比较差异无统计学意义（P>0.05），且各组动物PCE/RBC值差异无统计学意义（P>0.05），说明小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性。

精子畸形试验结果显示在2.5g～10g/kg的给药剂量范围内，各剂量组精子畸形率与阴性对照组比较差异无统计学意义（P>0.05），说明小鼠精子畸形试验结果为阴性。

Ames试验结果显示在虎眼万年青0.313、0.625、1.250、2.500、5.000mg/皿5个剂量组中，在加S9和不加S9活化的情况下，对鼠伤寒沙门氏菌突变型菌株TA97、TA98、TA100、TA102菌株的回变菌落数与阴性对照组比较均无明显变化，说明虎眼万年青在<5.000mg/皿的剂量内不能使鼠伤寒沙门氏组氨酸缺营养陷型发生移码突变或碱基置换突变。

该三项试验未见至突变作用。

2.3致畸作用研究在虎眼万年青乙醇提取物的致畸实验中[22]，研究人员将虎眼万年青乙醇提取物以成人摄入量（0.033g/kg体重）的125、100、75倍设置高中低三个剂量组，依次为4.1、3.3和2.5g/kg体重，实验结果显示，各剂量组的孕鼠增重、窝重、着床数、活胎数、吸收胎数、迟死胎数、死胎数、骨骼检查、胎鼠囟门、矢状缝宽度、胎鼠身长、体重、胎鼠内脏、外观畸形比较等项指标与阴性对照组比较，均为差异无统计学意义，这表明受试物剂量在2.5～4.1g/kg体重范围内未见母体毒性、胚胎毒性和致畸性。