常见蛋白酶抑制剂

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蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂
因此研究者认为,应对这些药物开展长期的临床试验及售后监督,以弄清该合并症的发生率以及可能的治疗 方法。
相互作用
相互作用
该品可与利托那韦结合使用以提高药效,用于治疗用其他抗逆转录病毒疗法治疗无效的HⅣ。
毒副作用
毒副作用
美国疾病控制和预防中心Hoimberg等报告,使用蛋白酶抑制剂可增加HⅣ-1感染者的心肌梗死发病危险, 尽管发生率并不高。蛋白酶抑制剂治疗HⅣ-1感染有效,但可增加高脂血症和高血糖危险,并可导致胰岛素抵抗。 因此,有人担心,长期应用蛋白酶抑制剂会增加心肌梗死、心绞痛和脑血管意外发病危险。Hoimberg等在1993年 1月至2002年1月期间对美国8个城市9个HⅣ诊所的5672例HⅣ-1感染患者进行了长期观察(17712.4人年)。病 人平均年龄为42.6岁,其中男性占82%。Lancet 2002?360?1747 结果显示,1996年开始应用蛋白酶抑制剂, 数年后心肌梗死发病率有所增高(趋势检验,P=0.0125)。在3247例应用蛋白酶抑制剂的患者中,发生心肌梗 死19例(1.42/1000人年),而在2425例未用蛋白酶抑制剂的患者中,只发生2例(0.046/1000人年)?比值比 为7.1,95%CI为1.6~44.3;Cox比例危险模型—校正后危险率比为6.5,95%CI为0.9~47.8 。使用蛋白 酶抑制剂种类对心肌梗死发病率无显著影响。共发生15例心绞痛,其中11例用蛋白酶抑制剂(比值比为1.93, 95%CI为1.63~5.95)。发生脑血管意外14例,每组7例。研究者认为,蛋白酶抑制剂可增加心肌梗死发病危险, 但心肌梗死发病率并不高,并且通常发生在有其他心血管病危险因素的患者中,不要因此而给HⅣ-1感染患者停 用蛋白酶抑制剂。及早戒烟、诊断和治疗高脂血症、改善胰岛素抵抗和降压治疗都可减少蛋白酶抑制剂的这一并 发症。

常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度

常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度

常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度在与蛋白相关的检测中,首先最关键的一步便是蛋白质的提取。

蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。

另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的,本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂,EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠,Na3VO4 原矾酸钠,BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠,Na2P2O4 焦磷酸钠等。

对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制,贮存液与工作液浓度,保存都做了详细的说明。

蛋白酶抑制剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶(可逆的地面处理)。

溶解性:溶于异丙醇,乙醇,甲醇和丙二醇果>10mg/ml。

在水溶液中不稳定。

在100%异丙醇,+25℃时稳定至少9个月分子量:174.2使用:贮存浓度:200mM,工作浓度:1mMLeupeptin 亮肽素特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,纤溶酶,和组织蛋白酶B 溶解性:高度溶于水(1mg/ml)。

4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月分子量:C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6使用:贮存浓度:1mg/ml,工作浓度0.5 ug/ml (1mM)Aprotinin抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶,激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶的高活性。

不抑制凝血酶或因子X。

溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如,tris,0.1M,pH8.0)。

pH约7-8的溶液在4℃可保存1周,分装保存在-20℃可至少保存6个月。

避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。

常见蛋白酶抑制剂

常见蛋白酶抑制剂

蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全标签:相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销!Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统广州赛诚生物基因表达调控专题蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。

在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂PMSF1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保存一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。

EDTA1)抑制金属蛋白水解酶;2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;3)溶液在4℃稳定六个月以上;4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。

胃蛋白酶抑制剂(pepst anti n)l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D和凝乳酶;2)1mg/ml溶于甲醇中;3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)5)在水中不溶解。

蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂引言蛋白酶抑制剂是一类用于抑制酶活性的化合物,其中蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶。

蛋白酶在生物体中起着重要的调控作用,参与多种生物反应的调节和控制。

然而,在某些情况下,蛋白酶的过度活化可能导致疾病的发生和发展。

因此,研发蛋白酶抑制剂成为一种重要的医药研究方向。

本文将介绍蛋白酶抑制剂的基本分类、作用机制以及在药物研发中的应用。

分类根据蛋白酶抑制剂对酶活性的抑制方式,蛋白酶抑制剂可分为两大类:1.反式抑制剂:反式抑制剂与酶结合后形成稳定的酶-抑制剂复合物,从而阻止酶催化反应的进行。

典型的例子是蛋白酶抑制剂Aprotinin,它通过与蛋白酶结合形成稳定的复合物,从而抑制蛋白酶的活性。

2.逆式抑制剂:逆式抑制剂通过与酶催化中心结合,改变酶的构象和活性。

这类抑制剂通常是模拟酶底物的分子结构,与酶催化中心发生特异性的相互作用。

逆式抑制剂的典型例子是酶的底物类似物,如硫氰酸酰胺(p-Tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone,TPCK)可以选择性地抑制胰蛋白酶的活性。

作用机制蛋白酶抑制剂能够通过不同的机制来抑制蛋白酶的活性。

以下是几种常见的作用机制:1.受体拮抗作用:某些蛋白酶抑制剂能够与蛋白酶结合并阻断其与受体的相互作用,从而抑制了受体的活化。

这种机制在很多药物设计中都有重要的应用。

2.亲和力增强:一些蛋白酶抑制剂可以增强与酶的结合亲和力,从而阻止酶底物结合,进而抑制了酶的活性。

3.酶底物竞争:逆式抑制剂通过与酶催化中心竞争底物结合位点,从而阻断底物与酶的结合,进而抑制了酶活性的发生。

4.构象改变:某些蛋白酶抑制剂能够与酶发生特异性相互作用,改变酶的构象从而影响酶的活性。

应用蛋白酶抑制剂在医药领域有着广泛的应用。

以下是一些典型的应用示例:1.抗癌药物:蛋白酶在肿瘤细胞中起着重要的作用,因此蛋白酶抑制剂被广泛用于抗癌药物的研发。

例如,蛋白酶抑制剂Paclitaxel可以通过抑制肿瘤细胞内的蛋白酶活性来抑制细胞的增殖。

蛋白酶体抑制剂作用机制_概述说明以及解释

蛋白酶体抑制剂作用机制_概述说明以及解释

蛋白酶体抑制剂作用机制概述说明以及解释引言部分内容:1.1 概述蛋白酶体抑制剂是一类能够干扰细胞内蛋白酶体功能的化合物或分子。

蛋白酶体是细胞中主要负责蛋白质降解的细胞器,通过这一过程可以清除老化、变性或异常的蛋白质,并参与调控许多生物学过程。

因此,研究和理解蛋白酶体抑制剂的作用机制具有重要的理论和实践意义。

1.2 文章结构本文主要从以下几个方面对蛋白酶体抑制剂作用机制进行探讨:首先介绍了什么是蛋白酶体抑制剂以及其在细胞中的功能和调控;接着概述了常见的蛋白酶体抑制剂及其分类,并阐述了它们在药物研发中的应用和前景展望;然后解释了蛋白酶体抑制剂对蛋白降解途径和产生效果的机理,并探讨了其对生物学意义和影响因素;最后总结了文章的主要内容,并展望了蛋白酶体抑制剂在未来研究和应用方面的发展。

1.3 目的本文旨在对蛋白酶体抑制剂的作用机制进行综述,希望通过深入探讨蛋白酶体抑制剂对细胞内蛋白酶体的影响,加深我们对这类化合物或分子的理解,并为进一步研究和开发具有潜力的药物提供参考。

相信通过本文的阐述,读者能够更好地认识和理解蛋白酶体抑制剂在生物学领域中所扮演的关键角色。

2. 蛋白酶体抑制剂的作用机制:2.1 什么是蛋白酶体抑制剂:蛋白酶体抑制剂是一类能够干扰蛋白酶体功能的化合物或药物。

蛋白酶体是细胞内起着关键作用的小囊泡结构,负责进行细胞内的蛋白质降解和回收。

2.2 蛋白酶体在细胞中的功能和调控:蛋白酶体参与了多种生物学过程,包括细胞周期调控、免疫应答、应激响应以及疾病发展等。

蛋白酶体内含有多种不同类型的蛋白水解酶(即蛋白酶),它们协同作用来降解细胞内已经老化或异常的蛋白质,并将其分解成氨基酸片段供细胞再利用。

2.3 蛋白酶体抑制剂对蛋白酶体的影响与作用机制:蛋白酶体抑制剂可以干扰或阻止蛋白酶体的正常功能。

它们通过不同的机制影响蛋白酶体,例如抑制蛋白酶体中的水解酶活性、阻止蛋白质进入蛋白酶体或干扰蛋白质在蛋白酶体内的降解过程。

蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。

在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂PMSF PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名为苯甲基磺酰氟。

分子式为C7H7FO2S,分子量为174.19,纯度>99%。

常用生化试剂,用于抑制蛋白酶.【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成 1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。

如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。

【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。

一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。

凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

PMSF在水溶液中不稳定。

应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。

PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。

pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。

蛋白水解酶抑制剂啊实验室常用的啊主要用于组织匀浆时用!!1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保存一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。

蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明

蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明

蛋白质提取‎过程中常用‎的蛋白酶和‎磷酸酶抑制‎剂详细使用‎说明转自:http://www.bioas‎/html/980.html在与蛋白相‎关的检测中‎,最关键的一‎步便是蛋白‎质的提取。

在提取的过‎程中,我们要经常‎加入以防止‎。

另外在磷酸化‎蛋白的研究‎过程中,也是必不可‎少的。

本文详细总‎结了常用的‎P MSF、 Leupe‎p tin亮‎肽素、Aprot‎i nin抑‎肽酶、Pepst‎a tin胃‎、EDTA-Na2等以及NaF‎氟化钠、Na3VO‎4原矾酸钠、Beta-glyce‎r opho‎s phat‎e甘油磷酸‎钠、Na2P2‎O4焦磷酸钠等的‎溶液配制、贮存液与工‎作液浓度及‎保存条件。

一、蛋白酶抑制‎剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白‎酶抑制剂,如胰凝乳蛋‎白酶、胰蛋白酶和‎凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋‎白酶如木瓜‎蛋白酶。

溶解性:溶于异丙醇‎、乙醇、甲醇和丙二‎醇里>10mg/ml。

在水溶液中不‎稳定。

在100%异丙醇,25℃时稳定至少‎9个月。

分子量:174.2使用:贮存浓度2‎00mM,工作浓度1‎m MLeupe‎p tin 亮肽素特性‎:抑制丝氨酸‎和半胱氨酸‎蛋白酶如胰‎蛋白酶、木瓜蛋白酶‎、纤溶酶和组‎织蛋白酶B‎。

溶解性:高度溶于水‎(1mg/ml)。

4℃一周稳定,分成小份,冷冻在 -20℃至少6个月‎。

分子量:C20H3‎8N6O4‎×1/2 H2SO4‎:475.6 C20H3‎8N6O4‎x 1/2 H2SO4‎× H2O:493.6使用:贮存浓度1‎m g/ml,工作浓度0‎.5 ug/ml (1mM)。

Aprot‎i nin抑‎肽酶特性:丝氨酸蛋白‎酶抑制剂,抑制纤维蛋‎白溶酶、激肽释放酶‎、胰蛋白酶、糜蛋白酶的‎高活性。

不抑制凝血‎酶或因子X‎。

溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如0.1M tris,pH8.0)。

蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明

蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明

蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明一、蛋白酶抑制剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。

溶解性:溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。

在水溶液中不稳定。

在100%异丙醇,25℃时稳定至少9个月。

分子量:174.2使用:贮存浓度200mM,工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。

溶解性:高度溶于水(1mg/ml)。

4℃一周稳定,分成小份,冷冻在-20℃至少6个月。

分子量:C20H38N6O4 ×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 × H2O:493.6使用:贮存浓度1mg/ml,工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。

Aprotinin抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。

不抑制凝血酶或因子X。

溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如0.1M tris,pH8.0)。

pH约7~8的溶液在4℃可保存1周,分装保存在-20℃可至少保存6个月。

避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。

分子量:6,512使用:贮存浓度1mg/ml,工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。

Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性:抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性:溶于甲醇约1mg/ml;可溶于乙醇,过夜溶解可达到1 mg/ml;在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。

4℃稳定一周,分装储存于-20℃时可保存1个月。

分子量:685.9使用:贮存浓度1mg/ml,使用浓度0.7 μg/ml(1 μM)。

EDTA-Na2特性:金属蛋白酶抑制剂溶解性:溶于水至0.5M,在pH8-9的条件下,4℃稳定至少6个月分子量:372.24使用:工作浓度0.2~0.5 mg/ml(0.5~1.3 mM),不需现用现配,在溶液pH值调至8~9时再加入。

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蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全
日期:2012—06-13 来源:互联网
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相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展
摘要: 破碎细胞提取蛋白质得同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速得被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解、以下列举了5种常用得蛋白酶抑制剂与她们各自得作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质得敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶得浓度
恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销!ﻫIbidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下得细胞培养系统
广州赛诚生物基因表达调控专题
蛋白酶抑制剂
破碎细胞提取蛋白质得同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速得被抑制以保持蛋白质不被降解、在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解、以下列举了5种常用得蛋白酶抑制剂与她们各自得作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质得敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶得浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中得溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂得沉淀。

在宝灵曼公司得目录上可查到更完整得蛋白酶与蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂
PMSF
1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)与巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
2)10mg/ml溶于异丙醇中;
3)在室温下可保存一年;
4)工作浓度:17~174ug/ml(0。

1~1.0mmol/L);
5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离与纯化步骤中加入新鲜得PMSF。

EDTA
1)抑制金属蛋白水解酶;
2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;
3)溶液在4℃稳定六个月以上;
4)工作浓度:0、5~1.5mmol/L、(0.2~0、5mg/ml);
5)加入NaOH调节溶液得pH值,否则EDTA不溶解。

胃蛋白酶抑制剂(pepstanti n)
l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D与凝乳酶;
2)1mg/ml溶于甲醇中;
3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;
4)1作浓度:0、7ug/ml(1umol/L)
5)在水中不溶解。

亮抑蛋白酶肽(leupeptin)
1)抑制丝氨酸与巯基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血浆酶与组织蛋白酶B; 2)lOmg/ml溶于水;
3)储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度0。

5mg/ml。

胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)
1)抑制丝氨酸蛋白酶,如血浆酶,血管舒缓素,胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶; 2)lOmg/ml溶于水,pH7~8
3}储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度:0。

06~2.0ug/ml(0.01~0。

3umol/L);
5)避免反复冻融:
6)在pH>12。

8时失活。

蛋白酶抑制剂混合使用
35ug/ml PMSF…………………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂0.3mg/ml EDTA…………………………………金属蛋白酶抑制剂0。

7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)…………酸性蛋白酶抑制剂0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)……………广谱蛋白酶抑制剂
常用蛋白酶抑制剂表
作者:青岚点击:次来源于-生物秀知道
相关得检测中,首先最关键得一步便就是蛋白质得提取。

蛋白质得提取过程中,我们要经常加与蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)以防止蛋白质得降解。

另外在磷酸化蛋白得研究过程中,磷酸酶抑制剂也就是必不可少得,本文总结了常用得蛋白酶抑制剂(protease inhibit or)PMSF,Leupeptin亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(proteas [蛋白酶抑制剂分子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸]
在与蛋白相关得检测中,首先最关键得一步便就是蛋白质得提取。

蛋白质得提取过程中,我们要经常加与蛋白酶抑制剂(proteaseinhibitor)以防止蛋白质得降解。

另外在磷酸化蛋白得研究过程中,磷酸酶抑制剂也就是必不可少得,本文总结了常用得蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(protease inhibitor),EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠,Na3VO4 原矾酸钠 ,BETA—glycerophosphate甘油磷酸钠,Na2P2O4焦磷酸钠等。

对这些蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)得溶解配制,贮存液与工作液浓度,保存都做了详细得说明、
蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)
PMSF:
特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor),如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶与凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶(可逆得地面处理)、
溶解性:溶于异丙醇,乙醇,甲醇与丙二醇果〉10mg/ml。

在水溶液中不稳定。

在100%异丙醇, +25℃时稳定至少9个月
分子量:174、2
使用:贮存浓度:200mM,工作浓度:1mM
Leupeptin 亮肽素
特性:抑制丝氨酸与半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,纤溶酶,与组织蛋白酶B
溶解性:高度溶于水(1mg/ml)、4℃一周稳定,分成小份冷冻在—20℃至少6个月
分子量:C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475、6
C20H38N6O4x 1/2H2SO4 x H2O:493、6
使用:贮存浓度:1mg/ml,工作浓度0.5ug/ml(1mM)
Aprotinin抑肽酶
特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂(proteaseinhibitor),抑制纤维蛋白溶酶, 激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶得高活性、不抑制凝血酶或因子X、
溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如,tris,0、1M,pH8、0)。

pH约7-8得溶液在4℃可保存1周,分装保存在—20℃可至少保存6个月。

避免反复冻融, pH>12。

8得碱性环境可使其灭活。

分子量:6,512
使用:贮存浓度:1mg/ml, 工作浓度:0。

06–2。

0 ug/ml(0、01–0。

3 uM)
Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(proteaseinhibitor)
特性:抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶,肾素,组织蛋白酶D,凝乳酶,许多微生物酸性蛋白酶
溶解性:溶于甲醇约1mg/ml; 可溶于乙醇,过夜溶解可达到1 mg/ml;在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml、4℃稳定一周,分装储存于—20℃时可保存1个月
分子量: 685。

9
使用:贮存浓度:1mg/ml,使用浓度:0.7 μg/ml(1μM)
EDTA—Na2
特性:金属蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)
溶解性:溶于水至0。

5M,在pH8-9得条件下,4℃稳定至少6个月
分子量: 372.24
使用:工作浓度:0.2–0、5 mg/ml(0、5–1。

3mM),不需现用现配,在溶液pH值调至8-9时再加入。

磷酸酶抑制剂
NaF氟化钠
溶解性:溶于水
分子量: 41。

99
使用:贮存液:5M工作浓度:10-20mM
Na3VO4 原矾酸钠
分子量:183.91
溶解性:溶于水,我们购买过来得就是原矾酸钠。

原矾酸钠需要经过处理以后才能成为激活得矾酸钠,激活得矾酸钠才具有抑制去磷酸化得作用、原矾酸钠变成激活得矾酸钠得过程就是:
100mM原矾酸钠激活储存液配制ﻫ(1)。

取0。

183克得原矾酸钠溶解于10ml得双蒸水中,加酸调节PH至10(颜色变黄)ﻫ(2)。

煮至无色ﻫ(3).室温冷却
(4)。

重调PH至10
(5)重复(1)(2)(3)(4)直至溶液保持无色,并且PH稳定于10,分装100ul/管,每10ml裂解液加一管。

(终浓度为1mM),—20度保存。

使用: 贮存液:100mM 工作浓度:1mM
BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠
溶解性:溶于水
分子量:306.11
使用:贮存液:100mM 工作浓度:25mM
Na2P2O4焦磷酸钠
溶解性:溶于水
分子量:265、9
贮存液:100mM, 工作浓度:1-2 mM
关键词:蛋白酶抑制剂分子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸。

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