肠道致病菌的检验和鉴定培训课件
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肠道致病菌的分离与鉴定
肠道致病菌的分离与鉴定一、实验目的(1)掌握肠道致病菌的分离、鉴定的主要步骤(2)掌握平板划线分离法(3)掌握玻片凝集试验的操作方法以及实际意义二、实验材料(1)实验仪器：试管、玻片、酒精灯、接种针、接种环、试管架、(2)实验试剂：生理盐水、细菌培养基、伤寒诊断血清、伊红美蓝培养基(EMB、克氏双糖铁培养基(KIA)、葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、甘露醇发酵管、尿素培养基、蛋白胨水、半固体培养基三、实验流程(1)肠道致病菌的分离①待测标本的制作：把接种环放置于点燃的酒精灯火焰处对其进行灭菌，用已灭菌的接种环在细菌培养基中取少量待测细菌于盛有5ml生理盐水的试管中，混匀。
②细菌的分离接种：用接种环取适量配置好的细菌悬液，在酒精灯附近进行划线分离法接种细菌于EMBt养基。
将培养基置于37C培养18~24小时。
(2)肠道致病菌的纯化①单菌落接种：从已培养待测细菌的EMB培养基上用已灭菌的接种针挑取某单个菌落接种到KIA培养基上，一部分直接深入培养基中底部，一部分直接涂抹于斜面处，置于37 C培养18~24小时。
②待测细菌的初步判断：取出已纯化培养待测细菌的KIA培养基，观察现象，初步断定该细菌是致病菌或是非致病菌。
（3）肠道致病菌的鉴定①生化鉴定：分别取葡萄糖、乳糖、甘露醇发酵管各一只（注意管内的小倒管则应充满液体，不含气泡），用已灭菌的接种针取已培养的KIA 培养基上的培养物接种于各发酵管，将各发酵管于37 C培养18~24小时。
取出并观察记录现象。
（注意每次使用接种针前都应用酒精灯火焰进行灭菌）②动力检查：用已灭菌的接种针取KIA培养基上的培养物分别接种于蛋白胨水、尿素培养基、半固体培养基中，将各个培养基于37 C 培养18~24小时。
取出后将靛基质（吲哚）加入到蛋白胨水培养基中，并观察记录现象。
（注意每次使用接种针前都应用酒精灯火焰进行灭菌）③血清学鉴定：取洁净玻片一张，将其用蜡笔分为两格，两边各取生理盐水一滴，再用已灭菌的接种环分别取KIA培养基上的培养物加入两格中，与生理盐水混匀不摊开。
肠道感染细菌ppt课件1教学文案
由痢疾志贺菌I型和II型菌产生，称 志贺毒素(shiga toxin,ST)。该毒素具有 神经毒性、细胞毒性和肠毒性3种生物活 性。
（二）所致疾病：人类细菌性痢疾
传染源：患者和带菌者，无动物宿主。 传播途径：粪-口途径 志贺菌感染可分为急性和慢性两类。
①急性细菌性痢疾：
其特点是潜伏期短，起病急，临床症 状主要有高热、腹痛、腹泻、里急后重及 脓血粘液便等。
伤寒杆菌
大肠杆菌 痢疾杆菌
2、培养特性相同
➢需氧菌或兼性厌氧菌 ➢营养要求不高 ➢普通的琼脂平板--光滑型菌落 ➢液体培养基--混浊生长
大肠杆菌在SS平板上的菌落特征 痢疾杆菌在SS平板上的菌落特征
3、生化反应活泼
➢分解多种糖类和蛋白质
➢利用乳糖发酵试验可初步鉴别肠道杆菌 有无致病性。
乳糖发 致病性肠道杆菌（－） 酵试验 非致病性肠道杆菌（＋）
3、抗原构造
O抗原——分组，42组 H抗原——分群，将组内沙门菌分
成不同菌型 Vi抗原——微荚膜
4、抵抗力
对理化因素抵抗力不强
二、致病性和免疫性
（一）致病物质
侵袭力--Vi抗原、菌毛 内毒素 肠毒素
（二）所致疾病
1、肠热症：即伤寒、副伤寒。
病原体：为伤寒沙门菌、甲 型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙 门菌、丙型副伤寒沙门菌。
② O＞正常、H＜正常：可能是感染的早期或 与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌的 感染；
③ O＜正常、H＞正常：可能是以往预防接种 的结果或非特异性回忆反应。
（三）带菌者检查
四、防治原则
(一)防:接种菌苗 (二)治:氯霉素，长疗程，但停药后 可复发。
第四节 霍乱弧菌
（V.cholerae）
（二）所致疾病：人类细菌性痢疾
传染源：患者和带菌者，无动物宿主。 传播途径：粪-口途径 志贺菌感染可分为急性和慢性两类。
①急性细菌性痢疾：
其特点是潜伏期短，起病急，临床症 状主要有高热、腹痛、腹泻、里急后重及 脓血粘液便等。
伤寒杆菌
大肠杆菌 痢疾杆菌
2、培养特性相同
➢需氧菌或兼性厌氧菌 ➢营养要求不高 ➢普通的琼脂平板--光滑型菌落 ➢液体培养基--混浊生长
大肠杆菌在SS平板上的菌落特征 痢疾杆菌在SS平板上的菌落特征
3、生化反应活泼
➢分解多种糖类和蛋白质
➢利用乳糖发酵试验可初步鉴别肠道杆菌 有无致病性。
乳糖发 致病性肠道杆菌（－） 酵试验 非致病性肠道杆菌（＋）
3、抗原构造
O抗原——分组，42组 H抗原——分群，将组内沙门菌分
成不同菌型 Vi抗原——微荚膜
4、抵抗力
对理化因素抵抗力不强
二、致病性和免疫性
（一）致病物质
侵袭力--Vi抗原、菌毛 内毒素 肠毒素
（二）所致疾病
1、肠热症：即伤寒、副伤寒。
病原体：为伤寒沙门菌、甲 型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙 门菌、丙型副伤寒沙门菌。
② O＞正常、H＜正常：可能是感染的早期或 与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌的 感染；
③ O＜正常、H＞正常：可能是以往预防接种 的结果或非特异性回忆反应。
（三）带菌者检查
四、防治原则
(一)防:接种菌苗 (二)治:氯霉素，长疗程，但停药后 可复发。
第四节 霍乱弧菌
（V.cholerae）
肠道致病菌检验简述71页PPT
谢谢！
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ，而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸，生 命是活 动。——卢 梭
53、 伟 大 的 事 业，需 要决心 ，能力 ，组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
肠道致病菌检验简述
1、纪律是管理关系的形式。——阿法 纳西耶 夫 2、改革如果不讲纪律，就难以成功。
3、道德行为训练，不是通过语言影响 ，而是 让儿童 练习良 好道德 行为， 克服懒 惰、轻 率、不 守纪律 、颓废 等不良 行Байду номын сангаас。 4、学校没有纪律便如磨房里没有水。 ——夸 美纽斯
5、教导儿童服从真理、服从集体，养 成儿童 自觉的 纪律性 ，这是 儿童道 德教育 最重要 的部分 。—— 陈鹤琴
肠道菌群检测ppt课件
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《中国居民膳食指南》建议，人一生大约 要吃60吨食物，营养物质中99%是从肠道吸 收进入的
人一生中要排出几千公斤的大便， 其中1/3是肠道细菌，废物、毒素 80%是从肠道排出体外
帮助客户解决哪些问题？ ✓ 定量、系统评估肠道菌群水平
幽门螺旋杆菌、艰难梭菌等
✓ 致病菌筛检
结直肠癌、心脑血管疾病、Ⅱ型糖尿病等 ✓ 可有效评估6个月内的慢性疾病状态和发生风险
主要营养合成、代谢能力 呋喃类、喹诺酮类、大环内酯类等
睡眠质量、压力和抑郁水平
✓ 指导营养素的针对性补充 ✓ 指导合理使用抗生素，避免耐药 ✓ 滥用抗生素是超级病菌产生的第二大原因 ✓ 血清素属于快乐激素，影响性格、情绪、食欲、睡眠，
有害菌占优势（小肠细菌过度生长） 菌群平衡被打破
有害菌产生吲哚、胺类、氨、硫化氢等毒素
肠粘膜通透性增加 毒素通过血液循环进入全身各处
形成消化系统炎症 增加肝脏负担，引发皮肤暗黄、口臭、便秘等
长期积累形成消化系统溃疡、息肉 损害心脏、肾脏等，引发糖尿病、血液病等
肠道致病菌 PPT精品课件
肠道杆菌双糖铁培养特点
弧菌属 (Vibrio)
形态染色结构特点
G-, 弯曲如逗点, 单鞭毛, 运 动活泼
主要致病菌
霍乱弧菌, 副溶血弧菌, 其他 (创伤弧菌等)
第一节 霍乱弧菌
Vibrio cholerae
一、主要生物学性状
形态结构 G-弧菌，单端单鞭毛，运动活泼， 悬滴标本可见“鱼群样穿梭”
肠道致病菌
主要致病菌
肠杆菌科
埃希菌属 Escherichia 沙门菌属 Salmonella 志贺菌属 Shigella
弧菌属
霍乱弧菌/ 副溶血性弧菌
螺杆菌属和弯曲菌属
幽门螺杆菌 / 空肠弯曲菌
肠杆菌科共同特点
G－ 杆菌, 排列无规则 有菌毛,大多有周鞭毛 (痢疾杆菌除外) 抗原构造---O, H, K (Vi) 生化反应:鉴别 多为肠道正常菌群, 少数为致病菌 变异: 耐药性变异，H-O, S-R
肠产毒型大肠埃希菌
ETEC (Enterotoxigenic E. coli )
旅游者腹泻/婴幼儿腹泻 轻度→霍乱样腹泻 致病物质：肠毒素、定植因子
肠产毒型大肠埃希菌
ETEC (Enterotoxigenic E. coli )
不耐热肠毒素 LT
A→cAMP↑ →分泌↑
B:与GM1神经节 苷脂结合
肠出血型大肠埃希菌
EHEC (Enterohemorrhagic E. coli)
O157:H7
致病因子
Vero毒素/志贺样毒素
Transmission electron micrograph
菌毛
所致疾病
出血性结肠炎（血性腹泻）
溶血性尿毒综合征（HUS）
死亡率10%
肠道致病菌检验简述PPT71页
肠道致病菌检验简述
Hale Waihona Puke 46、法律有权打破平静。——马·格林 47、在一千磅法律里，没有一盎司仁 爱。— —英国
48、法律一多，公正就少。——托·富 勒 49、犯罪总是以惩罚相补偿；只有处 罚才能 使犯罪 得到偿 还。— —达雷 尔
50、弱者比强者更能得到法律的保护 。—— 威·厄尔
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克
第七章 肠道致病菌的检验与鉴定 PPT课件
3、败血病：高烧、寒战、厌食、局部发炎、由猪霍乱沙 门氏菌等引起
四、微生物检验
（一）、基本步骤（程序） 检样→增菌（前增菌）→分离培养→生化
试验初步鉴定→血清学反应最后鉴定→报告
1、前增菌：用无选择性的培养基使处于濒死状态的M 恢复活力;
2、选择性增菌：使沙门氏菌优势繁殖，基它细菌变到 抑制;
3、选择性平板分离培养：分离出所需的细菌;
2、平板分离
选择性培养基：BS、DHL、HE、WS、SS BS中最好，DHL、HE、WS很好，SS最差 一般要用：BS和WS/SS两个平板，BS主要用
于伤寒沙门氏菌的分离
DHL上的菌落
BS上的菌落
SS上的菌落
3、五项生化试验
H2S、靛基质 、 PH7.2尿素酶、KCN 、 赖氨酸脱羧酶
（1）三糖铁培养的培养
3、H抗原（鞭毛抗原）
耐热性差：60℃15′或酒精处理可破坏
沙门氏H抗原有两种： 第 1 相 ： 特 异 相 ， 用 英 文 小 写 字 母 表 示 a 、 b 、 c……z
z1~z55 第2相：非特异相，用阿拉伯数字表示1、2、3……其
中也有用小写字母a、n、x等表示。
4、表面抗原：
沙门氏菌有三种：Vi、M、5抗原、K抗原
1 、 需 氧 或 兼 性 厌 氧 ， 最 适 温 度 37℃ ， PH7.2~7.4。
(沙门氏菌（红色）侵入人体细胞
2、对营养要求不高，在普通培养基生长良好， 37 ℃，24h，能形成菌落中等大小，直径2～ 3mm，圆形或卵形，表面光滑湿润，无色半 透明，边缘整齐的菌落
3、在液体培养基中，呈均匀混浊性生长，无 菌膜。
四、 致病性
（一）、致病物质 1、内毒素：能引起机体发热，白细胞减少，低血糖，
四、微生物检验
（一）、基本步骤（程序） 检样→增菌（前增菌）→分离培养→生化
试验初步鉴定→血清学反应最后鉴定→报告
1、前增菌：用无选择性的培养基使处于濒死状态的M 恢复活力;
2、选择性增菌：使沙门氏菌优势繁殖，基它细菌变到 抑制;
3、选择性平板分离培养：分离出所需的细菌;
2、平板分离
选择性培养基：BS、DHL、HE、WS、SS BS中最好，DHL、HE、WS很好，SS最差 一般要用：BS和WS/SS两个平板，BS主要用
于伤寒沙门氏菌的分离
DHL上的菌落
BS上的菌落
SS上的菌落
3、五项生化试验
H2S、靛基质 、 PH7.2尿素酶、KCN 、 赖氨酸脱羧酶
（1）三糖铁培养的培养
3、H抗原（鞭毛抗原）
耐热性差：60℃15′或酒精处理可破坏
沙门氏H抗原有两种： 第 1 相 ： 特 异 相 ， 用 英 文 小 写 字 母 表 示 a 、 b 、 c……z
z1~z55 第2相：非特异相，用阿拉伯数字表示1、2、3……其
中也有用小写字母a、n、x等表示。
4、表面抗原：
沙门氏菌有三种：Vi、M、5抗原、K抗原
1 、 需 氧 或 兼 性 厌 氧 ， 最 适 温 度 37℃ ， PH7.2~7.4。
(沙门氏菌（红色）侵入人体细胞
2、对营养要求不高，在普通培养基生长良好， 37 ℃，24h，能形成菌落中等大小，直径2～ 3mm，圆形或卵形，表面光滑湿润，无色半 透明，边缘整齐的菌落
3、在液体培养基中，呈均匀混浊性生长，无 菌膜。
四、 致病性
（一）、致病物质 1、内毒素：能引起机体发热，白细胞减少，低血糖，
肠道细菌实验ppt课件
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效价的判定
1
2
3
4
5
6 效价判定
阴性对
照
H抗原 +++ +++ ++ ++ + － +
O抗原 +++ +++ ++ + + － +
PA抗原 － － － － －
金 黄 色 葡 萄 球 菌
铜 绿 假 单 胞 菌
细菌菌落的溶血现象观察
乙型溶血性链球菌:透明的无色溶血环。
一、糖发酵试验
1.了解糖发酵的原理和在肠道细 菌鉴定中的重要作用。
2.掌握通过糖发酵鉴别不同微生 物的方法。
糖发酵试验：
乳糖酶 乳糖
乳酸
葡萄糖发酵试验：
细菌
葡萄糖
丙酮酸
各种酸类
脱氢酶
[参考值] 伤寒杆菌凝集价H<1：160，O<1：80； 副伤寒凝集价A<1：80，B<1：80，
C<1：80
[临床意义]机体感染伤寒、副伤寒杆菌后会产生相
应抗体，正常人因隐性感染或预防接种，血清中可 含有一定量的抗体。一般当H≥1：160，O≥1：80， 副伤寒凝集价≥1：80时，才有诊断意义。病程中应 每周复查一次，如病人H与O的凝集价均高于参考值 或较原凝集价升高4倍以上，则患伤寒的可能性很 大。若H凝集价高而O低于正常值，则可能是以往预 防接种疫苗的结果或非特异性回忆反应所致。
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也称表面抗原（荚膜抗原），多糖，具有阻抑 O抗原发生凝集的现象，加热60℃30′可消除 抑阻作用
肠道致病菌的检验和鉴定
4
四、 致病性
（一）、致病物质 1、内毒素：能引起机体发热，白细胞减少，低血糖，
血压降低，严重者休克。 2、外毒素：对小肠粘膜细胞具有物殊毒害作用，引起
腹泻。
肠道致病菌的检验和鉴定
三、沙门氏菌食物中毒
（一）、引起食物中毒最常见的沙门氏菌：
鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌
（二）、易引起沙门氏菌中毒的食品 肉、蛋、乳类食品
行业关注：美国两种花生酱含沙门氏菌
肠道致病菌的检验和鉴定
21
(三)、中毒原因
1、食用病畜禽的肉制品食品 2、病畜禽、带菌人和动物使食品受污染 3、用不洁净水外理食品
养基混浊生长。 （2）、肠道致病菌一般不分解乳糖，而非致病菌多能分解乳
糖、葡萄糖产酸或产酸产气。 （3）、可还原硝酸盐为亚硝酸盐。
肠道致病菌的检验和鉴定
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三、抗原类型
O抗原 H抗原 K抗原
菌毛抗原
也称菌体抗原，细胞壁脂肪糖，耐热100℃不 被破坏
也称鞭毛抗原，鞭毛蛋白，不耐热，60℃ 30′可破坏
肠道致病菌的检验和鉴定
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（四）、抗原结构 主要两种：
A、O抗原 B、H抗原 C、表面抗原（K抗原） D、菌毛抗原
肠道致病菌的检验和鉴定
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2 、O抗原 （1） O抗原的表示方法 共有58种，用字母O和阿拉伯数字标记：O1 、
O2 、O3、 O4 如：
伤寒杆菌： O9 、O12
肠道致病菌的检验和鉴定
肠道致病菌的检验和鉴定
22
（四）、临床病状（所致病菌）
1、肠热病：伤寒与副伤寒病，为慢性发热的菌血病。 由伤寒与副伤寒菌引起，潜伏期7~20天
2、急性肠胃类：主要症状：头痛、发热、恶心、呕吐、 腹泻、出冷汗、及全身不适，病程2~3天
3、败血病：高烧、寒战、厌食、局部发炎、由猪霍乱沙 门氏菌等引起
肠道致病菌的检验和鉴定
肠道致病菌的检验和鉴定
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3、H抗原（鞭毛抗原）
耐热性差：60℃15′或酒精处理可破坏
沙门氏H抗原有两种： 第 1 相 ： 特 异 相 ， 用 英 文 小 写 字 母 表 示 a 、 b 、 c……z
z1~z55 第2相：非特异相，用阿拉伯数字表示1、2、3……其
中也有用小写字母a、n、x等表示。
2、定义 是肠杆菌科中形态和培养特征，生化反应及 抗原结构相似，被O1噬菌体裂解的一群革兰 氏阴性杆菌。
肠道致病菌的检验和鉴定
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二、生物学特性
（一）、形态与染色： 革兰氏染色阴性，无荚膜，无芽胞，多数
有鞭毛，有动力，短小杆菌。 （二）、培养特性
1 、 需 氧 或 兼 性 厌 氧 ， 最 适 温 度 37℃ ， PH7.2~7.4。
4、生化试验：鉴定分离出来的细菌是否符合所检项目 的细菌;
5、血清学鉴定：进一步鉴定。
5
（二）、所致病疾 1、伤寒和副伤寒 2、食物中毒 3、细菌性痢疾
肠道致病菌的检验和鉴定
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五、微生物检验的基本程序
检样→处理→增菌培养→分离培养→ 生化试验→血清学鉴定→报告
肠道致病菌的检验和鉴定
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思考题
1、肠道致病菌具有哪些生物学特性? 2、肠道致病菌具有哪些抗原？又称为什么？有
什么特点？ 3、写出肠道致病菌检验的基本程序
肠道致病菌的检验和鉴定
第一节 概述
一、食品中常见的肠道致病菌
• 沙门氏菌 • 志贺氏菌 • 大肠艾希氏菌 • 变形杆菌 • 耶尔森菌
肠道致病菌的检验和鉴定
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二、生物学特性
1、形态与染色 均为革兰氏阴性杆菌，中等大小，无芽胞，多数具有周身鞭毛
能运动，志贺氏菌属无鞭毛无动力。 2、培养和生化反应 （1）、需氧或兼性厌氧，菌落中等大小，表面光滑，液体培
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（2）沙门氏菌的分群及表示方法
用大写字母及相关符号表示： A、B、C、D、E、F ……Z、 O51
~O63、 O65~ O67
肠道致病菌的检验和鉴定
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（3）沙门氏菌中的主要菌群及其群特异性抗原
A群----O2 B群----O4 C群----O6
C1群----O7、 C2群---- O6 O8 、 C3群----O8 、 C4群----O6 O7 O14 D群----O9 F群----O11 E群----O3 E2群----O3、 O10族 E3群----O3、 O15 E4群----O1 、O3 、O19
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四、微生物检验
（一）、基本步骤（程序） 检样→增菌（前增菌）→分离培养→生化
试验初步鉴定→血清学反应最后鉴定→报告
肠道致病菌的检验和鉴定
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1、前增菌：用无选择性的培养基使处于濒死状态的M 恢复活力;
2、选择性增菌：使沙门氏菌优势繁殖，基它细菌变到 抑制;
3、选择性平板定
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第二节、沙门氏菌检验
一、概况
（一）沙门氏菌的发现与食物中毒
（二）沙门氏菌的命名
根据所致疾病命名
根据菌的发现地区命名
以发现者的名字命名
（三）沙门氏菌的抵抗力
60 ℃ 30′可杀死
肠道致病菌的检验和鉴定
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（四）沙门氏菌的分类地位及定义
1、地位：是肠杆菌科、埃希氏菌族、沙门氏 菌属中的细菌
肠道致病菌的检验和鉴定
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肠道致病菌(沙的检门验和氏鉴定菌（红色）侵入人体1细2 胞
2、对营养要求不高，在普通培养基生长良好， 37 ℃，24h，能形成菌落中等大小，直径2～ 3mm，圆形或卵形，表面光滑湿润，无色半 透明，边缘整齐的菌落
3、在液体培养基中，呈均匀混浊性生长，无 菌膜。
肠道致病菌的检验和鉴定
肠道致病菌的检验和鉴定
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4、表面抗原：
沙门氏菌有三种：Vi、M、5抗原、K抗原
Vi抗原位于菌体的最表层，包围了O抗原，可阻碍O抗原的血清 学凝集试验。破坏Vi抗原：60℃ 30′，100 ℃ 5′
含有Vi 抗原的沙门氏菌： 伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌
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（三）、生化特性
1、发酵GLU，甘露醇，山梨醇产酸产气（伤寒鸡伤 寒沙门氏菌少数不产气）
2、不发酵乳糖，蔗糖，侧金黄花醇 3、多数产生H2S（+），不产靛基质（-），不分解尿
素（-），不产生乙酰甲基甲醇（V—P）（-）， 4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐（+） 5、在KCN培养基中生长（-），苯丙氨酸脱氨酸（-）
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四、 致病性
（一）、致病物质 1、内毒素：能引起机体发热，白细胞减少，低血糖，
血压降低，严重者休克。 2、外毒素：对小肠粘膜细胞具有物殊毒害作用，引起
腹泻。
肠道致病菌的检验和鉴定
三、沙门氏菌食物中毒
（一）、引起食物中毒最常见的沙门氏菌：
鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌
（二）、易引起沙门氏菌中毒的食品 肉、蛋、乳类食品
行业关注：美国两种花生酱含沙门氏菌
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(三)、中毒原因
1、食用病畜禽的肉制品食品 2、病畜禽、带菌人和动物使食品受污染 3、用不洁净水外理食品
养基混浊生长。 （2）、肠道致病菌一般不分解乳糖，而非致病菌多能分解乳
糖、葡萄糖产酸或产酸产气。 （3）、可还原硝酸盐为亚硝酸盐。
肠道致病菌的检验和鉴定
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三、抗原类型
O抗原 H抗原 K抗原
菌毛抗原
也称菌体抗原，细胞壁脂肪糖，耐热100℃不 被破坏
也称鞭毛抗原，鞭毛蛋白，不耐热，60℃ 30′可破坏
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（四）、抗原结构 主要两种：
A、O抗原 B、H抗原 C、表面抗原（K抗原） D、菌毛抗原
肠道致病菌的检验和鉴定
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2 、O抗原 （1） O抗原的表示方法 共有58种，用字母O和阿拉伯数字标记：O1 、
O2 、O3、 O4 如：
伤寒杆菌： O9 、O12
肠道致病菌的检验和鉴定
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（四）、临床病状（所致病菌）
1、肠热病：伤寒与副伤寒病，为慢性发热的菌血病。 由伤寒与副伤寒菌引起，潜伏期7~20天
2、急性肠胃类：主要症状：头痛、发热、恶心、呕吐、 腹泻、出冷汗、及全身不适，病程2~3天
3、败血病：高烧、寒战、厌食、局部发炎、由猪霍乱沙 门氏菌等引起
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3、H抗原（鞭毛抗原）
耐热性差：60℃15′或酒精处理可破坏
沙门氏H抗原有两种： 第 1 相 ： 特 异 相 ， 用 英 文 小 写 字 母 表 示 a 、 b 、 c……z
z1~z55 第2相：非特异相，用阿拉伯数字表示1、2、3……其
中也有用小写字母a、n、x等表示。
2、定义 是肠杆菌科中形态和培养特征，生化反应及 抗原结构相似，被O1噬菌体裂解的一群革兰 氏阴性杆菌。
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二、生物学特性
（一）、形态与染色： 革兰氏染色阴性，无荚膜，无芽胞，多数
有鞭毛，有动力，短小杆菌。 （二）、培养特性
1 、 需 氧 或 兼 性 厌 氧 ， 最 适 温 度 37℃ ， PH7.2~7.4。
4、生化试验：鉴定分离出来的细菌是否符合所检项目 的细菌;
5、血清学鉴定：进一步鉴定。
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（二）、所致病疾 1、伤寒和副伤寒 2、食物中毒 3、细菌性痢疾
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五、微生物检验的基本程序
检样→处理→增菌培养→分离培养→ 生化试验→血清学鉴定→报告
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思考题
1、肠道致病菌具有哪些生物学特性? 2、肠道致病菌具有哪些抗原？又称为什么？有
什么特点？ 3、写出肠道致病菌检验的基本程序
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第一节 概述
一、食品中常见的肠道致病菌
• 沙门氏菌 • 志贺氏菌 • 大肠艾希氏菌 • 变形杆菌 • 耶尔森菌
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二、生物学特性
1、形态与染色 均为革兰氏阴性杆菌，中等大小，无芽胞，多数具有周身鞭毛
能运动，志贺氏菌属无鞭毛无动力。 2、培养和生化反应 （1）、需氧或兼性厌氧，菌落中等大小，表面光滑，液体培
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（2）沙门氏菌的分群及表示方法
用大写字母及相关符号表示： A、B、C、D、E、F ……Z、 O51
~O63、 O65~ O67
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（3）沙门氏菌中的主要菌群及其群特异性抗原
A群----O2 B群----O4 C群----O6
C1群----O7、 C2群---- O6 O8 、 C3群----O8 、 C4群----O6 O7 O14 D群----O9 F群----O11 E群----O3 E2群----O3、 O10族 E3群----O3、 O15 E4群----O1 、O3 、O19
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四、微生物检验
（一）、基本步骤（程序） 检样→增菌（前增菌）→分离培养→生化
试验初步鉴定→血清学反应最后鉴定→报告
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1、前增菌：用无选择性的培养基使处于濒死状态的M 恢复活力;
2、选择性增菌：使沙门氏菌优势繁殖，基它细菌变到 抑制;
3、选择性平板定
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第二节、沙门氏菌检验
一、概况
（一）沙门氏菌的发现与食物中毒
（二）沙门氏菌的命名
根据所致疾病命名
根据菌的发现地区命名
以发现者的名字命名
（三）沙门氏菌的抵抗力
60 ℃ 30′可杀死
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（四）沙门氏菌的分类地位及定义
1、地位：是肠杆菌科、埃希氏菌族、沙门氏 菌属中的细菌
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肠道致病菌(沙的检门验和氏鉴定菌（红色）侵入人体1细2 胞
2、对营养要求不高，在普通培养基生长良好， 37 ℃，24h，能形成菌落中等大小，直径2～ 3mm，圆形或卵形，表面光滑湿润，无色半 透明，边缘整齐的菌落
3、在液体培养基中，呈均匀混浊性生长，无 菌膜。
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4、表面抗原：
沙门氏菌有三种：Vi、M、5抗原、K抗原
Vi抗原位于菌体的最表层，包围了O抗原，可阻碍O抗原的血清 学凝集试验。破坏Vi抗原：60℃ 30′，100 ℃ 5′
含有Vi 抗原的沙门氏菌： 伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌
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（三）、生化特性
1、发酵GLU，甘露醇，山梨醇产酸产气（伤寒鸡伤 寒沙门氏菌少数不产气）
2、不发酵乳糖，蔗糖，侧金黄花醇 3、多数产生H2S（+），不产靛基质（-），不分解尿
素（-），不产生乙酰甲基甲醇（V—P）（-）， 4、能还原硝酸盐为亚硝酸盐（+） 5、在KCN培养基中生长（-），苯丙氨酸脱氨酸（-）