人体解剖学实验考试

坐骨神经——腓肠肌标本和腓肠肌标本制备

二、实验原理

三、1、蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织生活条件易于掌握，在任氏液的浸润下，神经肌肉标本可较长时间保持生理活性。因此，在生理学实验中常用蛙或蟾蜍坐骨神经腓肠肌离体标本来观察神经肌肉的兴奋性、兴奋过程以及骨骼肌收缩特点等。

2、细胞的静息膜电位为外正内负，电刺激可改变可兴奋细胞的膜电位差。膜电位减小时，细胞去极化，细胞兴奋；膜电位增大时，细胞超极化，细胞兴奋性被抑制。蘸有任氏液的锌铜弓接触活组织时，可产生沿锌片—活组织—铜片流向的电流对细胞产生刺激效应。

四、实验步骤

1、洗净实验动物→毁髓→剥制后肢→分离坐骨神经→游离腓肠肌→游离股骨头→标本检验→电刺激极性法则的验证

2、双毁髓

一只手握住牛蛙，使其背部向上。用拇指压住牛蛙背部，食指按压其头部前端，另一只

手持毁髓针，由两眼之间沿中线向下触划，触及凹陷处即为枕骨大孔。将毁髓针垂直刺入枕骨大孔。将针尖向前刺入颅腔内搅动，此时为单毁髓；将毁髓针退回枕骨大孔，针尖转向后方，与脊椎平行刺入椎管内捣毁脊髓，完成双毁髓。

3、坐骨神经-腓肠肌标本制备（1）剥制后肢标本:轻提双毁髓蛙，自背面耻骨联合上方约1公分处横向剪断脊柱。轻轻托起后肢，看清坐骨神经位置，沿脊柱两侧横向切口剪断体壁，去除断口以上肢体和内脏放入污物缸。剥去后肢皮肤后放入任氏液中备用。（2）分离两后肢，一只用于剥制标本，一只放入任氏液中保存。（3）分离坐骨神经：将后肢标本脊柱端腹面向上，趾端向外侧用蛙钉将标本固定在蛙板上。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本的背侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内将坐骨神经与周边的结缔组织分离直到腘窝。（4）游离腓肠肌：同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的结缔组织分离并在其跟腱处穿线、结扎；（5）分离股骨头：捏住股骨，剪去并刮净周围肌肉，保留股骨的后2/3，剪断股骨; （6）检验标本：用手术镊轻提标本的脊椎片，再用经任氏液蘸湿的锌铜弓接触坐骨神经，如腓肠肌发生收缩，则表示标本机能正常。轻提腓肠肌上的结扎线，将标本放入任氏液中保存15-20分钟后进行实验。（7）电刺激的极性法则验证：用棉线在神经干中间部位进行结扎，以阻断神经传导兴奋的能力。用锌铜弓跨越结扎线刺激坐骨神经干。

五、注意事项

1、避免血液污染标本，压挤、损伤和用力牵拉标本，不可用金属器械触碰神经干。

2、在操作过程中，应给神经和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性。

3、标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟,使标本兴奋性稳定再开始实验效果会较好。

六、实验结果

通过任氏液浸泡，刺激后，看到肌肉有收缩的反应，调换电极进行刺激后也同样有收缩

反应。通过铜—锌与锌—铜的两种刺激比较后，铜—锌更强。

八、思考题

1、剥去皮肤的后肢，能用自来水冲洗吗？为什么？

答：不能。因为自来水中还有例如氯离子、钙离子等许多离子，它们会影响细胞膜的点

位分布，最终就会影响到刺激反应现象的观察；另外自来水里有许多微生物如果它们附着与誓言材料上，也会影响实验效果的。

2、金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌，可能引起哪些不良后果？

答：金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌会损伤腓肠肌细胞膜，使肌肉中的神经收到过

度刺激，而过度兴奋最终失活，刺激时候就没有现象。

3、如何保持标本的机能正常？

答：首先在制备腓肠肌的过程时，金属器械不要碰及、损伤神经或腓肠肌，以及实验者不要触碰到肌肉；其次，过程中要保持腓肠肌的湿润，常加任氏液，最好先泡一会；另外，在第一次电刺激后，需要让肌肉休息一段时间，在进行下一次刺激。

实验三骨骼肌收缩特性和收缩形式的观测

二、实验原理：

1、腓肠肌有许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激程度会引起肌肉不同的反应、当刺激强度过小时肌肉不会发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激，而能够引起肌肉发生收缩反应的最小刺激强度为阈刺激，当全部肌纤维同时收缩时则出现最大收缩反应这时即使在增大刺激强度肌肉收缩的力量也不会随之加大，可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为最适刺激强度。

肌肉组织对于一个与上强度的刺激，发生一次迅速的收缩反应，即单收缩，单收缩反应过程包括三个时期潜伏期收缩其舒张期

五、思考题

1、同一标本的阈刺激强度与最适刺激强度是否会发生变化，为什么？

答：会的。由于实验过程中的电刺激会使得肌肉标本发生变化，神经的兴奋性也会相应的收到一定影响；任氏液的浸泡也会对兴奋性造成影响的。

2、刺激骨骼肌与刺激神经的单收缩曲线有何不同？

答：神经收缩和肌肉兴奋都是一种电活动，都是以细胞膜上的动作电位的产生与传导为标志的坐骨神经干兴奋是诱发骨骼肌细胞膜产生兴奋的刺激因素坐骨神经干动作电位发生在腓肠肌动作电位发生之前两种电活动的幅度持续时间以及不应期等各方面的不同肌细胞膜动作电位是骨骼肌兴奋的根本标志。他通过兴奋——收缩偶联才引发骨骼肌的机械收缩活动，肌电发生在先，机械活动发生在后，从曲线的幅度上说，肌肉收缩的曲线与肌电兴奋的曲线完全不是一个概念，没有可比性。从曲线的持续时间来说，骨骼肌收缩的机械收缩曲线远比其动作电位时程长。骨骼肌的兴奋活动具有不应期，骨骼肌收缩的机械不存在不应期，因此骨骼肌收缩曲线可以发生部分融合，甚至完全融合，但是骨骼肌兴奋动作电位是无法融合的。

ABO血型鉴定与交叉配血

ABO血型鉴定与交叉配血血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。

交叉配血是将受血者的红细胞与血清分别同供血者的血清与红细胞混合，观察有无凝集现象（见图4-3-1-1）。输血时，一般主要考虑供血者的红细胞不要被受血者的血清所凝集；其次才考虑受血者的红细胞不被供血者的血清所凝集。前者叫交叉配血试验的主侧（也叫直接配血），后者叫交叉配血的次侧（也叫间接配血）。只有主侧和次侧均无凝集，称为“配血相合”，才能进行输血；如果主侧凝集，称为“配血不合”或“配血禁忌”，绝对不能输血；如果主侧不凝集，而次侧凝集，可以认为“基本相合”，但输血要特别谨慎，不宜过快过多，密切注视有无输血反应。本实验的目的是学习ABO血型鉴定的原理、方法以及交叉配血方法。

蛙心起搏点、收缩与电兴奋地关系及期外收缩与代偿

间歇的观测

二、实验原理

两栖类动物的心脏为两心房、一心室，心脏的起搏点是静脉窦。静脉窦的节律最高，心房次之，心室最低。正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。这种有节律的活动可以能过张力传感器在生理信号采集系统中记录下来，称为心搏曲线。心脏收缩的机械活动，与心脏兴奋的产生、传导和恢复过程中的生物电变化，是两个不同的生理过程。心脏收缩的机械活动可以通过心搏曲线记录下来，而心脏的生物电变化可以能过心电图表现了来。同时记录心脏的机械活动与电变化，可以清梦地观察到两个生理过程之间对应关系。心肌的机能特性之一是具有较长的不应期，整个收缩期都处于有效不应期内。在心室收缩期给以刺激，心室都不发生反应，在心室舒张中后期给以单个阈上刺激，则产生一次正常节律以外的收缩反应，即期前收缩。当静脉窦传来的节律性兴奋恰好落在期外收缩的收缩期时，心室不再发生反应，须静脉窦传来下一个兴奋才会收缩。因此在期外收缩之后，就会出现一个较长时间的舒张间歇期，即代偿间歇。

四、实验方法及步骤