鸡肉中土霉素测定实验结果
盐酸土霉素可溶性粉在肉鸡组织中的残留消除研究
盐酸土霉素可溶性粉在肉鸡组织中的残留消除研究邱瑾丽;李红娇;张崇威【摘要】在常规养殖环境中,对不同日龄肉鸡分别给予250 mg/L和333 mg/L 50％盐酸土霉素可溶性粉,集中饮水给药,每日1次,连续5 d.停药后4 h,1 d,3 d,5 d,6 d,7 d,8 d,9 d,10 d宰杀肉鸡,采集可食性组织(肌肉、肝脏和鸡胗)样品,肌肉、肝脏和鸡胗组织中的残留量采用UP LC-MS/MS测定.结果表明:土霉素主要残留在肝脏组织中;肌肉、肝脏和鸡胗组织的消除速率相似;停药5 d后,两个剂量组的肌肉、肝脏中土霉素残留量均低于最高残留限量(MRL).休药期计算软件WTl.4结果显示,上述两种方法给药后,建议休药期分别为7、8 d.%Two groups broilers of different ages were administered 250 mg/L and 333 mg/L 50％ oxytetracycline hydrochloride soluble powder respectively by concentrated drinking water one time every day for 5 days. The broilers were slaughtered at 4 hour, 1, 3, 5, 6, 7, 8, 9, 10 days after the last administration. Samples of edible tissues ( muscle, liver and chicken gizzards) were collected. The residues of oxytetracycline were determined by UPLC-MS/MS.Results of this study showed that oxytetracycline mainly remains in liver tissue.The elimination rate of the residue was similar in muscle and liver.After 5 days of withdrawal, the residues of oxytetracycline in muscle and liver of the two dose groups were lower than maximum residue limit ( MRL ) . According to the WTl. 4 calculation result, it is suggested that the period of withdrawal will be extended 1～3 d after the above method is given.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2018(052)006【总页数】6页(P58-63)【关键词】盐酸土霉素;残留消除;肉鸡;休药期【作者】邱瑾丽;李红娇;张崇威【作者单位】郑州福源动物药业有限公司,郑州450001;郑州福源动物药业有限公司,郑州450001;河南省兽药饲料监察所,郑州450008【正文语种】中文【中图分类】S859.796盐酸土霉素为四环素类广谱抗生素，对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑制作用，且具有促进生长的作用，因此，在临床上常用于治疗猪、鸡敏感大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌及支原体引起的感染性疾病[1]。
畜禽肉中土霉素,四环素,金霉素的测定
畜禽肉中土霉素，四环素，金霉素的测定食品安全检验手册101页１.原理 样品中土霉素，四环素，金霉素经提取，用微孔滤膜过滤后进HPLC 色谱仪测定 ２.试剂和材料⑴乙腈 色谱纯⑵高氯酸 分析纯;⑶高氯酸溶液 5%(V/V)⑷土霉素标准品 纯度≥99%;⑸土霉素标准贮备液 准确称取10.0mg 土霉素,用甲醇配制浓度为100μg/mL 的标准贮备液。
⑹土霉素标准中间液: 准确吸取5.0mL 土霉素标准贮备液,于50mL 容量品瓶中,加水稀释至刻度。
摇匀,此液1mL 含10μg 氯霉素。
⑺土霉素标准系列溶液: 准确吸取土霉素标准中间液0.1,0.2,0.5,1.0，2.0mL 分别放于10mL 容量瓶中,然后,各加水至10.0mL. 摇匀,即得每mL 含 0.1, 0.2, 0.5, 1.0 .2.0μg 的土霉素标准系列溶液。
３.仪器和设备(1) 液相色谱仪，配有紫外吸收仪;(2) 匀质器；(3) 离心机：6000r/min 。
４.测定步骤（1）提取 称取试样5g(精确至0.01g)，置于50mL 离心管中，加人25mL 高氯酸溶液：5%(V/V), 超声提取20min, 然后离心10min ( 4000r/min )。
取上清液，经0.45µm 滤膜过滤后，滤液作HPLC 用。
（2）测定高效液相色谱参考条件色谱柱:Grace Smart C 18 250mmX4.6mm, 5µm;测定波长: 350nm流速: 1.0mL/min;色谱柱温度:室温。
（3）色谱测定:① 标准曲线的制备 分别吸取土霉素标准溶液各20µL,在上述色谱条件下,进行HPLC 分析,以标准液浓度与峰面积进行回归分析。
② 样品测定 按上述色谱条件下,进样20µL, 进行HPLC 分析,根据保留时间和峰面积，与标准比较进行定性定量。
外标法定量。
５．结果计算m X ∨×=ρ （1-71）式中:X—试样中土霉素残留量, μg/gρ—测定液中土霉素的含量, μg/mLV--试样溶液的体积, mLm-试样的质量,g 。
畜禽肉中多类兽药残留的快速检测
畜禽肉中多类兽药残留的快速检测黄 立（昆明市食品药品检验所，云南昆明 650032）摘 要：建立了猪肉、牛肉、鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类共15种兽药残留量的快速检测方法。
样品经过Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液-2.5%乙酸乙腈溶液提取，经氯化钠、无水硫酸钠除水盐析后取乙腈相用高含碳量的C18吸附粉吸附净化，再用0.1%甲酸水乙腈（75+25）定容后上机检测。
结果显示，本方法测定三类混合药物的回收率在63.9%～104.0%，RSD在1.1%～12.2%，检测快速、灵敏度高、重复性好，定性定量准确可靠，适用于猪肉、牛肉及鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类药物残留的快速检测。
关键词：液相色谱-串联质谱法；磺胺；四环素；喹诺酮Rapid Detection of Multiple Types of Veterinary Drug Residues in Livestock and Poultry MeatHUANG Li(Kunming Institute for Food and Drug Control, Kunming 650032, China) Abstract: A rapid method was established for the determination of 15 veterinary drug residues of sulfonamides, tetracyclines and quinolones in pork, beef and chicken. The samples were extracted by Na2EDTA-Mcllvaine buffer-2.5% acetic acid acetonitrile solution, and the acetonitrile phase was purified by adsorption with high carbon content C18 adsorbent powder after dehydration salting by sodium chloride and anhydrous sodium sulfate, and then fixed with 0.1% formic acid aqueous acetonitrile (75+25) and detected on the machine. The results showed that the method determines the recovery of the three types of mixed were 63.9%～104.0%, RSD were 1.1%～12.2%, rapid detection, high sensitivity, good repeatability, accurate and reliable qualitative and quantitative, suitable for the rapid detection of sulfonamides, tetracyclines, quinolones drug residues in pork, beef and chicken.Keywords: liquid chromatography-tandem mass spectrometry; sulfonamide; tetracycline; quinolone合理使用兽药可以提高畜禽养殖效率，节省成本，缩短出栏周期，进而增加收益，但越来越多的人为追求经济效益滥用药物，导致了一些兽药以残留的形式流入人体，从而对身体健康造成威胁[1]。
鸡肉组织中四环素类药物残留检测与分析
鸡肉组织中四环素类药物残留检测与分析作者：刘保国来源：《现代畜牧科技》 2018年第5期摘要：为了初步了解浙川县鸡肉组织四环素类兽药残留情况，本次研究应用液相色谱质谱法对该地区收集鸡肉组织进行兽药残留检测。
结果显示，被检测的220份肌肉样品中四环素、土霉素、金霉素和强力霉素的检出率分别为o．91%、o、1.82%和1.36%，其中四环素、金霉素和强力霉素最大残留量分别为43. 25 ug/kg、52.o ug/kg和37. 50 ug/kg。
结果说明抽检的浙川县鸡肉中存在四环素类兽药残留，其药残含量低于国家和农业部行业标准，但仍需引起养殖户和相关检疫部门的警惕。
关键词：浙川县；鸡肉；兽药残留；检测中图分类号：S858. 31文献标识码：B文章编号：2095-9737(2018)05-0007-01兽药应用对促进畜禽养殖业发展具有重要作用，由于某些兽药不仅可以应用于畜禽疫病防治，还可以促进畜禽生长和提高饲料转化率，而大量使用兽药会导致畜禽组织兽药残留、病原微生物产生耐药性和动物食品安全问题突出等问题[1-2]。
近年来，随着居民生活水平的提高，其对肉类品质要求也越来越高，特别是对畜禽兽药残留问题产生严重的担忧。
因此，对畜禽肉类兽药残留问题进行定期检测对保障畜禽与人类健康具有重要的意义。
本次研究应用液相色谱质谱法对浙川县鸡肉组织进行兽药残留检测，以初步弄清淅川县鸡肉组织中四环素类兽药残留情况。
1 材料与方法1.1 样品来源本次研究于2016年1月一12月从淅川县不同地区随机购买220只肉鸡，每只肉鸡体重为1. 2～1.5 kg，肉鸡在屠宰前进行健康检查，屠宰后取肌肉组织置于封口袋内，逐一标记，保存4℃待检或立即进行药物残留检测。
1.2 主要仪器与试剂本次研究需要超高效液相色谱质谱联用仪，固相萃取柱、氮吹仪等仪器；甲醇、甲酸、乙酸乙酯、柠檬酸等试剂。
1.3 检测方法与限量标准按照GB/T21317-2007标准采用液相色谱质谱法对鸡肉样品进行检测，被检畜禽肌肉样品中四环素类兽药残留量不能超过100 ug/kgE3]，若超过，则判定为药残超标。
盐酸土霉素可溶性粉在肉鸡组织中的残留消除研究
ｄｏｉ：１０．１１７５１／ＩＳＳＮ．１００２－１２８０．２０１８．０６．１０盐酸土霉素可溶性粉在肉鸡组织中的残留消除研究邱瑾丽１，李红娇１，张崇威２（１．郑州福源动物药业有限公司，郑州４５０００１；２．河南省兽药饲料监察所，郑州４５０００８）［收稿日期］２０１７－１１－０６㊀［文献标识码］Ａ㊀［文章编号］１００２－１２８０（２０１８）０６－００５８－０６㊀［中图分类号］Ｓ８５９．７９６［摘㊀要］㊀在常规养殖环境中，对不同日龄肉鸡分别给予２５０ｍｇ／Ｌ和３３３ｍｇ／Ｌ５０％盐酸土霉素可溶性粉，集中饮水给药，每日１次，连续５ｄ㊂停药后４ｈ，１ｄ，３ｄ，５ｄ，６ｄ，７ｄ，８ｄ，９ｄ，１０ｄ宰杀肉鸡，采集可食性组织（肌肉㊁肝脏和鸡胗）样品，肌肉㊁肝脏和鸡胗组织中的残留量采用ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ测定㊂结果表明：土霉素主要残留在肝脏组织中；肌肉㊁肝脏和鸡胗组织的消除速率相似；停药５ｄ后，两个剂量组的肌肉㊁肝脏中土霉素残留量均低于最高残留限量（ＭＲＬ）㊂休药期计算软件ＷＴｌ．４结果显示，上述两种方法给药后，建议休药期分别为７㊁８ｄ㊂［关键词］㊀盐酸土霉素；残留消除；肉鸡；休药期作者简介：邱瑾丽，硕士，从事兽药临床应用研究㊂Ｅ－ｍａｉｌ：ｑｊｌｑｌｈｗｑｑ＠１６３．ｃｏｍＳｔｕｄｙｏｎＲｅｓｉｄｕｅＥｌｉｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＯｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅＳｏｌｕｂｌｅＰｏｗｄｅｒｉｎＢｒｏｉｌｅｒＴｉｓｓｕｅｓＱＩＵＪｉｎ－ｌｉ１，ＬＩＨｏｎｇ－ｊｉａｏ１，ＺＨＡＮＧＣｈｏｎｇ－ｗｅｉ２（１．ＺｈｅｎｇｚｈｏｕＦｕｙｕａｎＡｎｉｍａｌＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏＬｔｄ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００１，Ｃｈｉｎａ；２．ＨｅｎａｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＤｒｕｇａｎｄＦｅｅｄＣｏｎｔｒｏｌ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００８，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｗｏｇｒｏｕｐｓｂｒｏｉｌｅｒｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｇｅｓｗｅｒｅａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ２５０ｍｇ／Ｌａｎｄ３３３ｍｇ／Ｌ５０％ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｓｏｌｕｂｌｅｐｏｗｄｅｒｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｂｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄｄｒｉｎｋｉｎｇｗａｔｅｒｏｎｅｔｉｍｅｅｖｅｒｙｄａｙｆｏｒ５ｄａｙｓ．Ｔｈｅｂｒｏｉｌｅｒｓｗｅｒｅｓｌａｕｇｈｔｅｒｅｄａｔ４ｈｏｕｒ，１，３，５，６，７，８，９，１０ｄａｙｓａｆｔｅｒｔｈｅｌａｓｔａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．Ｓａｍｐｌｅｓｏｆｅｄｉｂｌｅｔｉｓｓｕｅｓ（ｍｕｓｃｌｅ，ｌｉｖｅｒａｎｄｃｈｉｃｋｅｎｇｉｚｚａｒｄｓ）ｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．ＴｈｅｒｅｓｉｄｕｅｓｏｆｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ．Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｍａｉｎｌｙｒｅｍａｉｎｓｉｎｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅ．Ｔｈｅｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｔｈｅｒｅｓｉｄｕｅｗａｓｓｉｍｉｌａｒｉｎｍｕｓｃｌｅａｎｄｌｉｖｅｒ．Ａｆｔｅｒ５ｄａｙｓｏｆｗｉｔｈｄｒａｗａｌ，ｔｈｅｒｅｓｉｄｕｅｓｏｆｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｉｎｍｕｓｃｌｅａｎｄｌｉｖｅｒｏｆｔｈｅｔｗｏｄｏｓｅｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｌｏｗｅｒｔｈａｎｍａｘｉｍｕｍｒｅｓｉｄｕｅｌｉｍｉｔ（ＭＲＬ）．ＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅＷＴｌ．４ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔ，ｉｔｉｓｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｅｒｉｏｄｏｆｗｉｔｈｄｒａｗａｌｗｉｌｌｂｅｅｘｔｅｎｄｅｄ１ ３ｄａｆｔｅｒｔｈｅａｂｏｖｅｍｅｔｈｏｄｉｓｇｉｖｅｎ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ；ｒｅｓｉｄｕｅｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ；ｂｒｏｉｌｅｒｓ；ｗｉｔｈｄｒａｗａｌｐｅｒｉｏｄ㊀㊀盐酸土霉素为四环素类广谱抗生素，对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑制作用，且具有促进生长的作用，因此，在临床上常用于治疗猪㊁鸡敏感大肠杆菌㊁沙门氏菌㊁巴氏杆菌及支原体引起的感染性疾病［１］㊂我国农业部对四环素类抗生素在可食性动物组织中的最高残留限量规定为：肌肉１００μｇ／ｋｇ，肝脏３００μｇ／ｋｇ［２］，美国食品药品监督管理局规定动物肌肉中四环素类药物总量为２００μｇ／ｋｇ［３］㊂国内外对土霉素的残留分析方法的研究较多，目前主要使用的有微生物检测法，固相萃取－高效液相色谱法，液相色谱－串联质谱法和放射免疫法［４－７］等㊂本试验采用的是国家标准规定动物源性食品中四环素类兽药残留量的检测方法［８］㊂虽然国内外很多研究报道了土霉素在肉鸡肌肉和肝脏中的残留消除规律，确定了土霉素的休药期，但主要研究针对土霉素预混剂和拌料的给药途径㊂在实际养殖过程中，可溶性粉剂由于饮水给药的便利和药物更易均匀分布，使用范围更广泛㊂关于盐酸土霉素可溶性粉对肉鸡饮水给药后，在肌肉㊁肝脏和鸡胗的残留消除规律研究尚未见报道㊂本试验通过对盐酸土霉素可溶性粉在肉鸡体内残留消除的研究，计算土霉素在不同组织中的休药时间，以期为安全用药和正确执行休药期提供科学依据㊂１㊀材料与方法１．１㊀供试试剂㊀土霉素对照品，批号：１３０３０５，中国食品药品检定研究院；盐酸土霉素可溶性粉，规格：５０％，生产批号：２０１６０５００３，郑州福源动物药业有限公司苏可乐；甲醇，乙腈为色谱纯；乙二胺四乙酸二钠为分析纯，超纯水，所需溶液配制见ＧＢ／Ｔ２１３１７［８］㊂１．２㊀主要仪器㊀ＡｃｑｕｉｔＵＰＬＣ－ＸｅｖｏＴＱ－Ｓ质谱联用仪，美国Ｗａｔｅｒｓ公司；３Ｋ－３０台式高速冷冻离心机，Ｓｉｇｍａ公司；Ｒ２１５Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ旋转蒸发仪，瑞士Ｂｕｃｈｉ公司；ＩＫＡＭＳ３．Ｂａｓｉｃ圆周振荡器，广州仪科实验室技术有限公司；ＡＬＣ－２１００．２，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；ＶＸ－Ⅲ多管涡旋振荡器，北京踏锦科技有限公司；ＴＴＬ－ＤＣⅡ氮气吹干仪，北京同泰联科技发展有限公司；ＴＤ系列固相萃取柱，ＴＤ－ＴＰＳ－００６０３，天津市天兴达科技有限公司㊂１．３㊀方法１．３．１㊀试验动物㊀三组肉鸡，购自山西省阳城县浩博养殖有限公司，随机分为对照组２６日龄，１００００只；常规剂量组２５日龄，１６３００只；加大剂量组３２日龄，１２０００只㊂饲喂不添加任何抗菌药物的全价饲料，自由采食饮水㊂试验前后各组饲养条件相同㊂１．３．２㊀给药与样品采集㊀常规剂量组以２５０ｍｇ／Ｌ，加大剂量组３３３ｍｇ／Ｌ集中饮水给药５ｄ，空白对照组不给药㊂停药后４ｈ㊁３ｄ㊁５ｄ㊁６ｄ㊁７ｄ㊁８ｄ㊁９ｄ㊁１０ｄ分别随机宰杀２４只，采集肌肉㊁肝脏和鸡胗，于－２０ħ保存㊂１．３．３㊀色谱条件㊀色谱柱：ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＴＭＢＥＨＣ１８（１．７μｍ，２．１ˑ５０ｍｍ）；柱温３０ħ；流动相Ａ：乙腈，Ｂ：０．１％甲酸溶液；进样量５μＬ；梯度洗脱程序见表１㊂表１㊀色谱梯度洗脱程序Ｔａｂ１㊀Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｏｆｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ时间ｔｉｍｅ／ｍｉｎ流速／（ｍＬ㊃ｍｉｎ－１）ＦｌｏｗｒａｔｅＡ／％Ｂ／％曲线类型Ｃｕｒｖｅ㊀㊀１Ｉｎｉｔｉａｌ㊀０．３００１０．０９０．０／㊀㊀２４．００㊀０．３００４０．０６０．０６㊀㊀３５．００㊀０．３００１０．０９０．０１㊀１为即时变化，６为线性变化１．３．４㊀质谱条件㊀电喷雾离子源；正离子扫描；多反应监测ＭＲＭ；离子源温度１５０ħ；脱溶剂气容量８００Ｌ／ｈ；锥孔电压２５Ｖ；锥孔气流速１５０Ｌ／ｈ；毛细管电压３．３ｋＶ；定性㊁定量离子对及对应的锥孔电压和碰撞能量见表２㊂表２㊀定性㊁定量离子及对应的锥孔电压和碰撞能量Ｔａｂ２㊀Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｉｏｎｐａｉｒ，ｔｈｅｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｃｏｎｅｖｏｌｔａｎｄｃｏｌｌｉｓｉｏｎｅｎｅｒｅｙ药物Ｃｏｍｐｏｕｎｄ定性离子对（ｍ／ｚ）Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ定量离子对（ｍ／ｚ）Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｉｏｎｐａｉｒ锥孔电压／ＶＣｏｎｅｖｏｌｔ碰撞能量／ｅＶＣｏｌｌｉｓｉｏｎｅｎｅｒｅｙ土霉素４６１．２＞４２６．１４６１．２＞３３７．０４６１．２＞４２６．１３８１８３８２６１．３．５㊀标准曲线㊀精密吸取１００μｇ／Ｌ的土霉素标准中间液０．０２㊁０．０５㊁０．０８㊁０．１０㊁０．２０ｍＬ，分别加空白基质０．９８㊁０．９５㊁０．９２㊁０．９０㊁０．８０ｍＬ，混匀，制成２㊁５㊁８㊁１０㊁２０μｇ／Ｌ的系列基质标准溶液，依次上机，以土霉素的质量浓度为横坐标，定量离子的色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线㊂１．３．６㊀样品前处理㊀称取（２ʃ０．０２）ｇ肌肉㊁肝脏㊁鸡胗已匀浆样品，置５０ｍＬ离心管中，加入１５ｍＬ缓冲液，漩涡振荡２０ｍｉｎ，１４０００ｒ／ｍｉｎ低温离心５ｍｉｎ，取上清液进行样品净化㊂ＨＬＢ固相萃取小柱用３ｍＬ甲醇㊁３ｍＬ水活化㊂然后分别取上述肌肉㊁肝脏㊁鸡胗待净化的上清液注入该萃取小柱中，分别依次用超纯水３ｍＬ㊁５％甲醇水溶液３ｍＬ淋洗，弃去淋洗液，再用３ｍＬ甲醇洗脱，洗脱液６０ħ水浴中氮气仪吹干，残渣用１ｍＬ３０％甲醇溶液复溶，充分混匀，残渣溶液过０．２２μｍ针头式过滤器后，滤液供液相色谱－串联质谱法检测㊂１．３．７㊀检测限和定量限㊀取空白鸡肉㊁鸡肝和鸡胗试样组织，添加适量的土霉素标准溶液，经处理上机㊂１．３．８㊀灵敏度和准确度㊀分别取空白鸡肉㊁鸡肝㊁鸡胗组织，添加５㊁１０㊁２０μｇ／ｋｇ的土霉素标准物进行回收率实验，每个浓度做５个平行样品㊂２㊀结果与分析２．１㊀线性关系㊀土霉素在２ ２０μｇ／Ｌ浓度范围内呈现良好的线性关系，其曲线方程为：ｙ＝３２５６ｘ＋３７９．６，相关系数Ｒ为０．９９９５㊂标准溶液图谱如图１㊂图１㊀１０μｇ／ｍＬ基质工作液的特征色谱图Ｆｉｇ１㊀Ｃｈｒｏｍａｔｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆ１０μｇ／ｍＬｓｔａｎｄａｒｄｓｏｌｕｔｉｏｎ２．２㊀检测限和定量限㊀根据特征质量色谱峰的信噪比Ｓ／Ｎ＞３为检测限，Ｓ／Ｎ＞１０为定量下限，得肌肉㊁肝脏和鸡胗组织中土霉素的检测限为５μｇ／ｋｇ，定量下限为１０μｇ／ｋｇ㊂２．３㊀灵敏度和准确度㊀土霉素在５㊁１０㊁２０μｇ／ｋｇ３个添加水平上，其平均回收率㊁相对标准偏差见表３㊂土霉素的回收率在７９．１％ ９３．６％之间，相对标准偏差均小于１０％㊂图２为空白鸡肉的土霉素特征离子质量色谱图，图３为空白鸡肉中添加２５μｇ／ｋｇ的土霉素特征离子质量色谱图㊂表３㊀土霉素回收率及相对标准偏差试验Ｔａｂ３㊀ＴｅｓｔｏｆｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅａｎｄｒｅｌａｔｉｖｅｓｔａｎｄａｒｄｄｅｖｉａｔｉｏｎｏｆＯｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ药物名称Ｎａｍｅ添加量／（μｇ㊃ｋｇ－１）Ａｍｏｕｎｔｏｆａｄｄｉｔｉｏｎ平均回收率／％ＲｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅＲＳＤ／％土霉素Ｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ５７９．１９．９１０８９．８６．７２０９３．６４．３图２㊀空白鸡肉的土霉素特征离子质量色谱图Ｆｉｇ２㊀Ｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｉｏｎｑｕａｌｉｔｙｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｉｎｂｌａｎｋｃｈｉｃｋｅｎ图３㊀空白鸡肉中添加２５μｇ／ｋｇ土霉素的特征色谱图Ｆｉｇ３㊀Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ（２５μｇ／ｋｇ）ｉｎｂｌａｎｋｃｈｉｃｋｅｎ２．４㊀肉鸡组织中土霉素残留消除㊀空白对照组饲养情况和采样时间点与试验组一致，在组织中均未检出土霉素残留，表明试验动物在试验期间未受到其他来源药物的影响㊂表４㊁表５结果显示，肉鸡分别按２５０ｍｇ／Ｌ和３３３ｍｇ／Ｌ剂量集中饮水给药５０％盐酸土霉素可溶性粉，连续５ｄ㊂土霉素在停药０ｄ的鸡胗部位浓度最高，其次为肝脏，肌肉组织中药物浓度最低㊂在停药后第５天，两组别的肌肉和肝脏中的药物残留量已低于ＭＲＬ，分别为４４．８１μｇ／ｋｇ和１５７．５６μｇ／ｋｇ㊂对于鸡胗，我国尚未规定其最高残留限量㊂试验结果表明，停药４ｈ时，鸡胗中药物残留浓度最高，但其消除速度很快；停药５ｄ时，已接近肌肉中的药物残留量，其消除规律与肌肉和肝脏相似㊂经统计分析，两种给药剂量组在肌肉㊁肝脏和鸡胗中土霉素残留量的差异不显著（Ｐ＞０．０５）㊂２．５㊀休药期㊀采用ＷＴｌ．４软件计算休药期，确保有９５％的可信限使９９％的残留低于ＭＲＬ，两试验组在肉鸡不同组织中的休药期见表６㊂表４㊀２５０ｍｇ／Ｌ剂量组肉鸡组织中土霉素残留量平均值Ｔａｂ４㊀Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｓｉｄｕｅｓｏｆ２５０ｍｇ／Ｌｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｉｎｂｒｏｉｌｅｒｔｉｓｓｕｅｓ停药后时间ｔｉｍｅ组织中土霉素残留量／（μｇ㊃ｋｇ－１）ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｓｉｄｕｅｓｏｆｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ肌肉ｍｕｓｃｌｅ肝脏ｌｉｖｅｒ鸡胗ｇｉｚｚａｒｄ４ｈ５９４．０５ʃ４０．４９１８１２．３３ʃ９３．８３４４７１．６８ʃ１６１６．８１１ｄ３０４．４２ʃ３７．５２８７６．２１ʃ７８．３５６１０．７４ʃ１４２１．６８３ｄ１４６．１７ʃ４９．６２３４７．２５ʃ８１．４１２４１．１０ʃ９７．１４５ｄ４４．８１ʃ９．２９１５７．５６ʃ５９．０７９６．７１ʃ４４．７９６ｄ３５．３４ʃ３．９１１１３．４２ʃ２６．０８７６．５５ʃ２４．２９７ｄ２０．１４ʃ４．２７１３１．２４ʃ４３．２０６７．６０ʃ３９．３１８ｄ１０．２１ʃ７．３５６１．８１ʃ８．１２５４．８７ʃ２４．６７９ｄ８．５４ʃ４．５４６４．５２ʃ１．４１４４．２９ʃ２２．４１１０ｄ７．２４ʃ１．５９４８．４５ʃ２．２５３０．５８ʃ１１．５４表５㊀３３３ｍｇ／Ｌ剂量组肉鸡组织中土霉素残留量平均值Ｔａｂ５㊀Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｓｉｄｕｅｓｏｆ３３３ｍｇ／Ｌｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｉｎｂｒｏｉｌｅｒｔｉｓｓｕｅｓ停药后时间ｔｉｍｅ组织中土霉素残留量／（μｇ㊃ｋｇ－１）ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｓｉｄｕｅｓｏｆｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ肌肉ｍｕｓｃｌｅ肝脏ｌｉｖｅｒ鸡胗ｇｉｚｚａｒｄ４ｈ５７７．２０ʃ８９．０８１２３７．７５ʃ８７．４０３７９７．０２ʃ７７４．９３１ｄ３４５．１１ʃ７６．５７６４７．４５ʃ９７．７４３０１．７４ʃ１２４．５７３ｄ１８７．４５ʃ８１．７５３１８．７４ʃ４８．２７１７８．２１ʃ５７．４４５ｄ５３．９５ʃ１５．１３１２０．７４ʃ２７．２８７１．８６ʃ２６．０５６ｄ３３．２１ʃ５．８３１１４．５２ʃ３５．１２６０．１７ʃ１７．７８７ｄ２８．７４ʃ９．２１６２．８０ʃ９．７１５４．３１ʃ５．７２８ｄ１７．４１ʃ４．８７５２．０８ʃ７．１１４２．８７ʃ１１．２５９ｄ１４．２１ʃ５．６８４７．３１ʃ１．０９３５．７７ʃ８．５７１０ｄ１０．７４ʃ１．５８３９．４５ʃ２．９８２２．３１ʃ５．１９表６㊀土霉素在肉鸡组织中的休药期Ｔａｂ６㊀Ｔｈｅｗｉｔｈｄｒａｗａｌｏｆｏｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｉｎｂｒｏｉｌｅｒｔｉｓｓｕｅｓ动物组织Ｔｉｍｅ休药期／ｄＷｉｔｈｄｒａｗａｌｐｅｒｉｏｄ（ｄ）２５０ｍｇ／Ｌ剂量组３３３ｍｇ／Ｌ剂量组肌肉Ｍｕｓｃｌｅ４．６５５．７１肝脏Ｌｉｖｅｒ６．１７７．８５㊀㊀结果显示，２５０ｍｇ／Ｌ给药浓度在肉鸡组织中的休药期分别为肌肉４．６５ｄ，肝脏６．１７ｄ，３３３ｍｇ／Ｌ给药浓度的休药期分别为５．７１ｄ，７．８５ｄ，其中肝脏休药时间最长㊂为了确保消费者健康安全，在实际养殖环境中，５０％盐酸土霉素可溶性粉按２５０ｍｇ／Ｌ和３３３ｍｇ／Ｌ给药浓度，建议在肉鸡的休药期分别为７㊁８ｄ㊂３㊀讨论与小结在兽药组织残留消除规律研究中，药物的剂型㊁生产工艺㊁动物本身的差异对组织中药物残留浓度都有影响㊂表４㊁表５结果表明，两个剂量组肌肉㊁肝脏中土霉素残留量在停药后５ｄ均低于国家规定的ＭＲＬ，本试验结果与刘世磊等报道［９］相似㊂鸡胗作为消化器官，在停药４ｈ，药物残留量最大，且药物在该部位消除迅速，停药５ｄ药物残留量低于肝脏，这是因为肝脏是土霉素的主要代谢器官㊂表６结果表明，经ＷＴｌ．４软件计算，２５０ｍｇ／Ｌ剂量组肌肉的休药期符合说明书中休药期５ｄ的规定，但是，２５０ｍｇ／Ｌ剂量组肝脏和３３３ｍｇ／Ｌ剂量组肌肉和肝脏的休药期结果与说明书规定不一致，虽然停药后５ｄ，两组动物的肌肉和肝脏中的药物残留都已低于ＭＲＬ，但本试验数据采用ＷＴ１．４软件处理，在统计学上考虑了各种药物由于剂型或处方的不同以及动物本身的差异，使计算得到的休药期数据与国家规定的不一致㊂而其他文献报道是根据残留浓度低于ＭＲＬ的停药时间点来确定休药期［１］㊂因此，为确保动物性食品更高的安全性，在上述两种方法饮水给药５０％盐酸土霉素可溶性粉后，根据使用剂量建议休药期分别为７㊁８ｄ㊂对于本研究中与说明书规定休药期不一致的情况，可能是休药期计算方式或动物之间差异造成㊂现今消费者对于鸡胗的食用量加大，但是我国对鸡胗这个可食性组织的残留限量未做出规定，因此本试验的研究为制定鸡胗组织合理休药期提供了一定的科学依据㊂参考文献：［１］㊀杨柳．土霉素预混剂在鸡的休药期验证及鸭标签外用休药期研究［Ｄ］．武汉：华中农业大学国家兽药残留基准实验室（ＨＺＡＵ）／农业部食品安全评价重点开放实验室，２００８．㊀ＹａｎｇＬ，ＶａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆＯｘｙｔｅｔｒａｃｙｅｌｉｎｅＰｒｅｍｉｘＷｉｔｈｄｒａｗａｌＰｅｒｉｏｄｉｎｂｒｏｉｌｅｒｃｈｉｅｋｅｎａｎｄＥｓｔｉｍａｔｅｏｆＷｉｔｈｄｒａｗａｌＰｅｒｉｏｄＡｆｔｅｒＥｘｔｒａｌ⁃ａｂｅｌＵｓｅｏｆＯｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅＰｒｅｍｉｘｔｏＤｕｅｋ［Ｄ］．Ｗｕｈａｎ：ＮａｔｉｏｎａｌＲｅｆｅｒｃｎｅｅＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＤｒｕｇＲｅｓｉｄｕｅｓ（ＨＺＡＵ）／ＭＯＡＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＦｏｏｄＳａｆｅｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎ，ＨｕａｚｈｏｎｇＡｇｒｉｅｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００８．［２］㊀中华人民共和国农业部公告第２３５号．动物性食品中兽药最高残留限量［Ｓ］．㊀ＡｎｎｏｕｎｃｅｍｅｎｔＮｏ．２３５ｏｆｔｈｅＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＭａｘｉｍｕｍＲｅｓｉｄｕｅＬｉｍｉｔｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＤｒｕｇｓｉｎＡｎｉｍａｌＦｏｏｄ［Ｓ］．［３］㊀Ｕ．Ｓ．ＣｏｄｅｏｆＦｅｄｅｒａｌＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｕ．Ｓ．ＧｏｖｅｒｎｍｅｎｔＰｒｉｎｔｉｎｇＯｆｆｉｃｅ，ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＤＣ［Ｓ］．［４］㊀邢进，冯育芳，岳秉飞，等．微生物法检测实验动物血清中的抗生素残留［Ｊ］．中国比较医学杂志，２０１３，２３（４）：５７－６０．㊀ＸｉｎｇＪ，ＦｅｎｇＹＦ，ＹｕｅＢＦ，ｅｔａｌ．ＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃＲｅｓｉｄｕｅＭｏｎｉｔｏｒｉｎｇｉｎＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌＳｅｒｕｍｂｙＭｉｃｒｏｂｉａｌＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎＴｅｓｔ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｏｍｐａｒｅｔｉｖｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，２０１３，２３（４）：５７－６０．［５］㊀陈小燕，牛玉玲，朱敏，等．固相萃取－高效液相色谱法测定牛奶中四环素类抗生素［Ｊ］．中国抗生素杂志，２０１７，４２（２）：１２９－２３３．㊀ＣｈｅｎＸＹ，ＮｉｕＹＬ，ＺｈｕＭ，ｅｔａｌ．ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＴｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓｉｎＭｉｌｋｂｙＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＣｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｔｉ⁃ｂｉｏｔｉｃｓ，２０１４，４２（２）：１２９－２３３．［６］㊀张勋，吴连鹏，李玲，等．液相色谱－串联质谱法测定进出口多种食用活动物体液及肉中四环素类药物残留量［Ｊ］．化学试剂，２０１６，３８（１２）：１１７８－１１８２．㊀ＺｈａｎｇＸ，ＷｕＬＰ，ＬｉＬ，ｅｔａｌ．ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＦｏｕｒＴｅｔｒａｃｙ⁃ｃｌｉｎｅｓｆｒｏｍＢｏｄｙＦｌｕｉｄａｎｄＭｅａｔｏｆＶａｒｉｏｕｓＩｍｐｏｒｔａｎｄＥｘｐｏｒｔＥｄｉｂｌｅＬｉｖｉｎｇＡｎｉｍａｌｓｂｙＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ＴａｎｄｅｍＭａｓｓＳｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．ＣｈｅｍｉｃａｌＲｅａｇｅｎｔｓ，２０１６，３８（１２）：１１７８－１１８２．［７］㊀苏明明，王翛，王晓薇，等．放射免疫法快速检测牛血清中四环素类药物［Ｊ］．食品安全质量检测学报，２０１６，（２）：６２９－６３３．㊀ＳｕＭＭ，ＷａｎｇＸ，ＷａｎｇＸＷｅｔａｌ．ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＴｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｉｎＢｏｖｉｎｅＳｅｒｕｍＷｉｔｈＲａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙＭｅｔｈｏｄ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＳａｆｅｔｙａｎｄＱｕａｌｉｔｙ，２０１６，（２）：６２９－６３３．［８］㊀ＧＢ／Ｔ２１３１７－２００７．动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法液相色谱－质谱／质谱法与高效液相色谱仪［Ｓ］．㊀ＧＢ／Ｔ２１３１７－２００７ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＴｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｓＲｅｓｉｄｕｅｓｉｎＦｏｏｄｏｆＡｎｉｍａｌＯｒｉｇｉｎ－ＬＣ－ＭＳ／ＭＳＭｅｔｈｏｄａｎｄＨＰＬＣＭｅｔｈｏｄ［Ｓ］．［９］㊀刘世磊，李松彪，李兆周，等．土霉素在肉鸡体内的消除代谢及对肌肉品质的影响［Ｊ］．畜牧与饲料科学，２０１２，３３（５／６）：８－１０．㊀ＬｉｕＳＬ，ＬｉＳＢ，ＬｉＺＺｅｔａｌ．ＥｌｉｍｉｎａｔｉｏｎＭｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆＯｘｙｔｅｔｒａ⁃ｃｙｃｌｉｎｅｉｎＢｒｏｉｌｅｒｓａｎｄＩｔｓＩｎｆｌｕｅｎｃｅｏｎＭｕｓｃｌｅＱｕａｌｉｔｙ［Ｊ］．ＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙａｎｄＦｅｅｄＳｃｉｅｎｃｅ，２０１２，３３（５／６）：８－１０．（编辑：侯向辉）。
开放 实验一 紫外分光光度法测定饲料中土霉素的含量
由光谱图可知，土霉素分别在217.0nm、268.0nm、353.0nm波长处有三个吸收峰，，而最大吸收波长出现在268.0nm。因而确定最大吸收波长为268.0nm。选择1cm比色皿，间隔1.0nm作为测量条件。
2.2标准工作曲线的制备
准确移取上述50ug·mL-1的土霉素溶液5.00mL、10.00mL、15.00mL、20.00mL、25.00mL、30.00mL、35.00mL的土霉素盐酸溶液于50mL容量瓶中，配成浓度分别为5ug·mL-1、10 ug·mL-1、15 ug·mL-1、20 ug·mL-1、25 ug·mL-1、30 ug·mL-1、35 ug·mL-1的土霉素溶液。以稀盐酸为空白，在268.00nm波长处分别测定上述溶液及溶液1、探究实验，第二种提取方法需要耗费两到三天的时间，第一种方法仅需要用一天的时间即可完成，而两种方法的产率相似，故本实验采用第一种方法进行提取。
4饲料中土霉素的测定
将提取出来的土霉素溶液放置35min后转移至100mL容量瓶中，准确定容至刻度，用干滤纸过滤，弃去开始的10mL滤液，收集续滤液测定其吸光度，计算其浓度。
潍坊学院化学化工系讲稿专用纸
实验一紫外分光光度法测定饲料中土霉素的含量
一、实验目的
1、掌握用紫外分光光度法测定土霉素的原理和方法。
2、掌握紫外分光光度计的使用方法。
3、学会刻度吸管和容量瓶的使用方法。
二、实验原理
土霉素在畜牧业中应用广泛，土霉素可以治愈多种传染病，但同时会有很多副作用，饲料中添加的土霉素会通过食物链进入人体，从而会威胁到人的身体健康，因此加强对饲料中土霉素的添加量的严格把关对人类的身体健康具有非常重要的意义，传统的方法步骤繁琐，费时费力，实验要求较高，仪器成本比较高，不能对饲料进行快速检测。本实验采用紫外分光光度法进行测定，方法简便易行，结果准确。通过实验发现土霉素在稀盐酸中溶解度大于在无水乙醇中的溶解度，故以稀盐酸为溶剂，以丙酮作为有机溶剂用浸取法提取饲料中的土霉素，蒸发去溶剂后用盐酸溶解，然后用石油醚萃取掉里面的油脂。本方法不仅节省了大部分时间，绿色环保，而且可以得到比较满意的结果。
高效液相色谱法对畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素的残留检测研究
恒温振荡 20 min，再超声 5 min，最后在 25 ℃、7 000 r/min
离心 5 min。重复 1 次后，合并上清液于鸡心瓶中，用旋转
蒸发器蒸发至近干，然后准确加入 2.00 mL 乙腈溶解后转移
到 2 mL 离心管中高速离心，上清液经过 0.45 μm 滤膜，滤
液供液相色谱测定，本方法色谱图见图 1。
（2）提取液。将磷酸盐缓冲液与乙腈按照 2 ∶ 1 的比例 混合（pH=2.5）。
所有玻璃器皿包括样品瓶均用 10% 的硝酸浸泡（长时间 较好），之后放置在马弗炉中于 250 ℃条件下烧 2 h。
表 1 目标抗生素结构式及主要性质
结构式
中英文 简称
主要性质
OH O
OHOHO
O NH2
OH HO CH3 H N(CH3)2
1.4 质量控制
定性依据：相对于标样，保留时间差别在 2% 以内；定
量方法：外标法定量；方法检出限（MDLs）：将实际环境
样品不断稀释进样（S/N ≥ 3）。
作者简介：吕振娥（1987—），女，河南南阳人，硕士，农艺师。研究方向：农产品质量安全。
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四环素 TC
1. 四环素 pKa 约为 3.32，在有 氧、光照、强酸碱条件下会降 解产生多种代谢产物，一定条 件下代谢产物会转化为母体。
2. 溶于甲醇且易溶于水
OH O
OHOHO
O NH2
OH HO CH3OHH N(CH3)2
土霉素 OTC
1. 土霉素母体易溶于甲醇， pKa 值为 3.22；
2. 土霉素很容易降解为差向土 霉素，且差向土霉素对动物的
鸡肉组织中四环素类药物残留检测与分析
鸡肉组织中四环素类药物残留检测与分析为了对于肌肉组织四环素兽类材料情况，有更深层次的认识本研究，主要使用液相色谱质谱法去对这一地区肌肉组织进行收集，并且对兽药残留进行相关的检测，检测的结果显示出当前被进行检测的220份鸡肉样品里送完素和土霉素以及青霉素以及强力霉素的检出率分别达到了0.91%和0.182%以及1.36%和0，其中四环素和金霉素以及强力霉素其残留量分别达到了43. 25 ug/kg、52.0 ug/kg和37. 50 ug/kg。
这样的一种情况显示出当前进行抽检的地区鸡肉中存在四环素类残留药，其残留含量与国家和农业部提出的标准相对要低一些，可是尽管这样仍然需要相关养殖户和质检部门的关注和警惕。
标签：鸡肉;兽药残留;检测兽药使用对推进畜牧养殖业的发展有着不可忽视的作用，因为某些兽药不但能够被使用在畜牧疫病的防治中，还能够推进畜牧生长和提高饲料的转化率，而过度的去对兽药进行使用会导致目前组织兽药出现残留或者会出现病原微生物，同时还会产生耐药性以及动物食品安全等问题。
最近几年伴随着居民生活水平的不断提升，其对肉类品质和质量提出的要求也越来越高，尤其是对于去禽类药物残留问题的担忧。
因此对于蓄禽肉兽药残留问题进行相关的检测，对于保障旭琴和人类健康有着非常重要的意义，本文进行的研究主要针对的是液相质谱法对某地区肌肉组织中的兽药残留进行检测，希望能够通过检测的方式去对这一地区肌肉组织中四环素等等兽药的残留情况有一定的了解。
1 材料与方法1.1 樣品来源本文的研究主要是从2016年的1月到2016年的12月，针对不同地区随机的购买了220只机并且每只肉鸡的体重达到了1.2～1.5千克，肉鸡再进行屠宰之前需要进行相关的健康检查，再进行屠宰之后需要对其有组织完成封存，并且对其进行单独的标记使其能够保存在4摄氏度的环境下准备进行接下来的检测。
1.2 主要仪器与试剂本次研究需要使用超高效的液相色谱质谱联用仪和固相萃取柱以及安徽移动相关的一切，其中甲醇和甲酸以及乙酸乙酯和柠檬酸的相关设计也需要使用其中。
动物性食品中土霉素、金霉素和四环素检测方法研究进展
动物性食品中土霉素、金霉素和四环素检测方法研究进展杨琳【摘要】Tetracycline is a kind of broad-spectrum antibiotic. It has a good bactericidal effect which often used as a feed additive in animal husbandry and aquaculture. The common tetracyclines areOxytetracycline,Chlortetracycline,and Tetracycline. In recent years, some lawless persons abuse these kinds of drugs for economic benefit resulting in large residual of oxytetracycline,chlortetracycline, tetracycline in animal foods,which impact on public health seriously. The detection methods of oxytetracycline,Chlortetracycline,and Tetracycline in animal foods are mainly high performance liquid chromatography,capillary electrophoresis method,immunology and microbiology methods,and the high performance liquid chromatography is the most widely used.% 四环素类药物是一类广谱抗菌素，有良好的杀菌抑菌作用，经常作为饲料添加剂用于畜牧及水产养殖中，常见的四环素类药物包括土霉素、金霉素、四环素。
高效液相色谱法测定鸡肉中土霉素、四环素、金霉素和强力霉素残留
高效液相色谱法测定鸡肉中土霉素、四环素、金霉素和强力霉素残留量的方法优化探讨作者：夏洁贞，区敏霞来源：《现代食品》 2018年第12期摘要：参照国标GB/T20764-2006 利用高效液相色谱法，采用Agilent XDB-C18 色谱柱，以乙腈- 磷酸二氢钠缓冲液为流动相洗脱后，经过DAD 检测器分析，同时测定鸡肉中土霉素、四环素、金霉素和强力霉素的残留量，实验方法所采用的HLB 和WCX 固相萃取柱得到较好的净化效果，采用的XDB-C18 柱得到的线性、检出限和回收率均符合标准要求，可以满足日常检测需要。
关键词：高效液相色谱；DAD 检测器；土霉素；四环素；金霉素；强力霉素；线性；回收率Abstract：Reference to national standard GB/T20764-2006 using high performance liquidchromatography (HPLC) method, and the Agilent XDB - C18 chromatographic column, acetonitrile - sodiumdihydrogen phosphate buffer as mobile phase after elution, after DAD detector is analyzed, and thedetermination of terramycin, tetracycline, chlortetracycline, and doxycycline in chicken residues, experimentalmethods adopted by HLB and solid phase extraction column WCX get better purification effect, adoptXDB - C18 column to get the linearity, detection limitand recovery are conform to the requirements of thestandards, can meet the needs of the daily inspection.Key words：HPLC; DAD detector; Oxytetracycline; Tetracycline; Chlortetracycline; Doxycycline; Linear;Recovery中图分类号：TS251.7四环素类抗生素（Tetracyclines）是由放线菌产生的一类广谱抗生素，包括金霉素（Chlortetracycline)、土霉素（Oxytetracycline）、四环素（Tetracycline）及半合成衍生物甲烯土霉素、强力霉素和二甲胺基四环素等，其结构均含并四苯基本骨架。