2019-2020年生物_选修1(人教版)练习：专题5课题3血红蛋白的提取和分离Word版含解析
2019-2020年人教版高中生物选修1《生物技术实践》专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离复习特
2019-2020年人教版高中生物选修1《生物技术实践》专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离复习特训五十七第1题【单选题】使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( )A、电荷的多少B、分子的大小C、肽链的多少D、分子形状的差异【答案】：【解析】：第2题【单选题】凝胶色谱法中所用的凝胶的化学本质大多是( )A、糖类化合物B、脂质C、蛋白质D、核酸【答案】：【解析】：第3题【单选题】在破碎鸡血细胞时，要先加入20mL的蒸馏水，其作用是( )A、DNA溶解于水中B、血细胞破裂，释放DNAC、稀释血液，防止凝固D、有利于搅拌【答案】：【解析】：第4题【单选题】将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时，试管中从上往下数第2层是( )A、甲苯层B、血红蛋白水溶液C、脂溶性物质的沉淀层D、其他杂质的沉淀物【答案】：【解析】：第5题【单选题】下列有关选修实验叙述，正确的是( )A、果胶酶能瓦解植物细胞壁及胞间层，能将乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸B、提取β胡萝卜素实验中，为提高萃取效率，可采用酒精灯直接加热的方法C、血红蛋白提取和分离的纯化过程中，要用缓冲溶液充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液D、用胡罗卜离体组织在一定条件下培育，获得的试管苗可能是杂合子【答案】：【解析】：第6题【单选题】已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示，下列有关该样品中蛋白质的分离的叙述正确的是( )A、将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内，则分子丙也保留在袋内B、若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快C、若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存在于沉淀中D、若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则甲和戊形成的电泳带相距最远，因为它们电荷量差异最大【答案】：【解析】：第7题【单选题】下列有关提取和分离血红蛋白的程度叙述不正确的是( )A、样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B、通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取C、可通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂质蛋白除去，即样品的纯化D、可通过SDS﹣聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度【答案】：【解析】：第8题【单选题】下列与实验有关的叙述不正确的是( )A、蛋白质鉴定时，向豆浆中先加入氢氧化钠溶液，再滴入硫酸铜溶液，并水浴加热B、用鸡血细胞提取DNA时，先去除血浆再加蒸馏水，有利于细胞快速破裂C、用适宜浓度的硝酸钾溶液处理成熟的植物细胞可观察质壁分离和自动复原现象D、提取绿叶中的色素时，叶片的研磨应迅速充分【答案】：【解析】：第9题【单选题】可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有( )A、分离各种细胞器B、DNA的粗提取C、分离并纯化血红蛋白D、进行细胞培养【答案】：【解析】：第10题【单选题】下图能正确表示相对分子质量不同的蛋白质，在凝胶中的行进过程的是( ) A、B、C、D、【答案】：【解析】：第11题【单选题】下列叙述中错误的是( )A、改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B、在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C、用电泳法可分离带点性质、分子大小和形状不同的蛋白质D、用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质【答案】：【解析】：第12题【实验探究题】红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2 ，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。
人教版高中生物 选修1 专题5课题3 血红蛋白的提取和分离 同步练习
《课题3 血红蛋白的提取和分离》13.(改编题)红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其它脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：（1）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、 、 和 。
（2）样品处理包括红细胞的洗涤、 和 三步。
红细胞洗涤次数不能过少，否则 ；离心速度 和时间 会使白细胞等一同沉淀，达不到分离的效果。
（3）凝胶色谱柱在装填过程中，凝胶充分溶胀后，配成凝胶悬浮液，在色谱柱下端的尼龙管的螺旋夹的情况下，一次性缓慢倒入色谱柱内，可轻轻地敲动色谱柱，使凝胶装填均匀。
（4）右图是样品的加入与洗脱示意图，从图中可以看出，正确的加样操作是用吸管小心将透析后的样品 加样，正确的操作次序是 。
14.凝胶色谱法是60年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果，目前已经在生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学等领域广泛应用，不但应用于科学研究，而且已经大规模地用于工业生产。
据图回答下列问题：（1）a 、b 均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是 ，原因是 。
（2）自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d 位置相当于多孔板的结构可由 替代。
（3）装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡的存在，原因是 。
（4）洗脱时对洗脱液的流速要求是 。
若选用SephadexG-75,则“G ”表示 ；“75”表示 。
15.某生物兴趣小组以α-淀粉酶为实验材料进行系列实验：一是用凝胶色谱法测定α-淀粉酶的相对分子质量，二是用包埋法固定α-淀粉酶来探究固定化酶催化效果。
请回答下列问题：（1）凝胶色谱法的原理是 。
（2）某人欲使用凝胶色谱法比较α-淀粉酶、唾液淀粉酶两种蛋白质的分子质量大小，请你选择需○ ○ ○○ ○··· ○·○ ··· a c b d ① ② ③ ④ 样品样品要的材料，借用右图的实验装置，帮助其设计实验步骤，并预测实验结果，得出相关结论。
2020秋高中生物人教版选修1课堂演练：专题5课题3血红蛋白的提取和分离含解析
专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离1．下列试剂可用于血红蛋白释放的是()①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠A．②④B．①④C．④⑤D．①③解析：0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂，不能用于血红蛋白释放；甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂，加速血红蛋白的释放；磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质，不能用于释放血红蛋白；蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破，释放其中的血红蛋白；柠檬酸钠的作用是采血时，防止血液凝固，不能用于血红蛋白的释放。
答案：A2．在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽，与其有关的是()A．凝胶色谱柱的制作B．色谱柱的装填C．洗脱过程D．样品的处理解析：在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽，说明色谱柱制作不成功，可能是凝胶装填不紧密、不均匀，或者存在气泡，打乱了洗脱次序所致。
答案：B3．在蛋白质的提取和分离中，下列关于样品处理及粗分离过程的叙述，正确的是()A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B．洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果C．洗涤过程选用质量分数为0.1%的NaCl溶液D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质解析：洗涤红细胞的目的是去除血浆中的杂蛋白；洗涤时离心速度过高，时间过长，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果；洗涤过程应选用质量分数为0.9%的NaCl溶液。
答案：D4．凝胶色谱柱取长为40 cm，内径为1.6 cm，有关说法中，不正确的是()A．一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果B．凝胶色谱柱过高，超过1 m，不影响分离的效果C．凝胶色谱柱过矮，则影响混合物的分离度D．凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液，样品的稀释度过大解析：一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果，但是直径过大会造成洗脱液体积增大，样品的稀释度过大，因此应选择直径不超过2 cm的色谱柱。
凝胶色谱柱的高度与分离度有关，一般不超过1 m。
人教版生物选修一课下提能：专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离 含解析
专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离课下提能一、选择题1．(2019·平遥期中)下列关于电泳技术分离蛋白质原理的叙述，正确的是()A．蛋白质中含有游离的氨基，是碱性电解质B．蛋白质中含有游离的羧基，是酸性电解质C．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动[解析]选D氨基酸既有氨基也有羧基，是中性电解质，A、B错误；蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动，C错误、D正确。
2．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为()[解析]选B用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量较大的蛋白质容易通过凝胶间隙，先被洗脱出来；相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部，后被洗脱出来。
3．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是() A．防止血红蛋白被氧气氧化B．血红蛋白是一种碱性物质，需磷酸中和C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能不变[解析]选D磷酸缓冲液的作用是稳定pH，从而维持血红蛋白的结构和功能不变。
4．蛋白质的各种特性的差异，可以作为分离不同种类的蛋白质的依据。
下列可作为分离依据的是()A．分子的形状、大小和溶解度B．所带电荷的性质和多少、吸附性质C．对其他分子的亲和力D．以上三项都是[解析]选D利用蛋白质的各种特性，可以采用不同的方法对蛋白质进行分离和提取。
如蛋白质分子的形状和大小、在不同溶剂中的溶解度、所带电荷的性质和多少、吸附性质以及对其他分子的亲和力等，都可作为分离依据。
5．下面是血红蛋白提取和分离实验中对样品的处理措施，不正确的是() A．采集血样后要高速短时间离心获得血细胞B．洗涤三次后如上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，否则血浆蛋白无法除净C．在蒸馏水和甲苯的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白D．释放血红蛋白后再经过离心，就可以使血红蛋白和其他杂质分离开来[解析]选A采集血样后要低速短时间离心获得血细胞，否则会使淋巴细胞、血小板等混杂在红细胞中。
2019-2020学年人教版选修一 专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离 作业
2019-2020学年人教版选修一专题5 课题3 血红蛋白的提取和分离作业[基础全练]1．分离不同种类的蛋白质依据的原理不包括()A．分子的形状和大小B．所带电荷的性质和多少、吸附性质C．对其他分子的亲和力D．蛋白质分子的组成元素解析：根据分离蛋白质的方法可以知道，分离不同种类的蛋白质依据的原理包括分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、吸附性质、对其他分子的亲和力和蛋白质分子的溶解度等。
蛋白质分子的组成元素不是分离不同蛋白质的依据。
答案：D2．如图能正确表示相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程的是()解析：相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢；相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，故B正确。
答案：B3．凝胶色谱法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是() A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度C．将酶或细胞固定在凝胶中D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度解析：凝胶的种类较多，但每种凝胶内部都有孔隙。
当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质分子可以进入凝胶内部，通过的路程较长，洗脱时从凝胶柱中出来得较晚；相对分子质量较大的蛋白质分子则可以较早地洗脱出来，从而达到分离蛋白质的目的。
答案：A4．下列有关凝胶色谱操作的叙述，不正确的是()A．干的凝胶要用蒸馏水充分溶胀后，才能装填B．在装填凝胶色谱柱时，不得有气泡产生C．在装填凝胶色谱柱时，下端的尼龙管先打开后关闭D．在样品洗脱过程中，不能让洗脱液流干解析：在装填凝胶色谱柱时，下端的尼龙管应始终打开，C错误。
答案：C5．下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验，叙述正确的是() A．前者选择鸡血细胞作为实验材料较好，后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好B．样品预处理时，前者静置1天处理除去上清液；后者需要加入清水，反复低速短时间离心洗涤，至上清液无黄色C．在DNA粗提取实验中，往2 mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应该缓慢加入，直到出现黏稠物即止D．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等解析：鸡血细胞有细胞核，适于提取DNA；哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，适用于提取血红蛋白。
2019-2020学年度人教版生物选修1《生物技术实践》课题3 血红蛋白的提取和分离复习特训第六篇
2019-2020学年度人教版生物选修1《生物技术实践》课题3 血红蛋白的提取和分离复习特训第六篇第1题【单选题】使用凝胶色谱法分离蛋白质时，洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中，分别使用下列哪些试剂( )①蒸馏水②生理盐水③20 mmol/L的磷酸缓冲液④清水⑤柠檬酸钠A、①③⑤B、①②③C、②①③D、④①③【答案】：【解析】：第2题【单选题】下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述，不正确的是( )A、提取动物细胞中的DNA和蛋白质都可以采用蒸馏水涨破细胞的方法B、采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质C、蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质D、血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化，DNA则可采用电泳、盐析等方法纯化【答案】：【解析】：第3题【单选题】用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质( )A、路程较长，移动速度较慢B、路程较长，移动速度较快C、路程较短，移动速度较慢D、路程较短，移动速度较快【答案】：【解析】：第4题【单选题】凝胶色谱法洗脱时加入磷酸缓冲液，下列说法不正确的是( )A、在一定范围内，能对抗外来大量强酸、强碱对pH的影响，维持pH基本不变B、选用磷酸缓冲液（pH=7.0）可用Na2HPO4和NaH2PO4按相应配比配置C、缓冲溶液通常是由一或两种化合物（缓冲剂）溶解于水中制得，调节缓冲剂的配比就可制得不同pH范围的缓冲液D、缓冲溶液广泛应用于生化实验、微生物培养、组织切片和细菌的染色等的研究【答案】：【解析】：第5题【单选题】血红蛋白的提取和分离中，将搅拌好的混合液转移到离心管中，离心后，可以明显看到试管中的溶液分为4层，其中第3层是( )A、无色透明的甲苯层B、脂溶性物质的沉淀层C、血红蛋白的水溶液D、其他杂质的暗红色沉淀物【答案】：【解析】：第6题【单选题】有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是A、它们都是分离蛋白质的重要方法B、它们的原理相同C、使用凝胶色谱法需要使用缓冲溶液而电泳不需要D、以上说法都正确【答案】：【解析】：第7题【单选题】凝胶色谱法是根据( )分离蛋白质的有效方法A、分子的大小B、相对分子质量的大小C、带电荷的多少D、溶解度【答案】：【解析】：第8题【单选题】以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是A、洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂B、猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少C、血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D、在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢【答案】：【解析】：第9题【单选题】可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有( )A、分离各种细胞器B、DNA的粗提取C、分离并纯化血红蛋白D、进行细胞培养【答案】：【解析】：第10题【单选题】将处理破裂后的红细胞混合液以2000 r/min的速度离心10 min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是( )A、血红蛋白、甲苯层、脂质物质层、细胞破碎物沉淀层B、甲苯层、细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层C、脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、细胞破碎物沉淀层D、甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物沉淀层【答案】：【解析】：第11题【单选题】在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是( )A、磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程B、血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和C、防止血红蛋白被O2氧化D、让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能【答案】：【解析】：第12题【单选题】下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是( )A、是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B、在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部而最先流出，而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢，最后流出C、凝胶内部有许多贯穿的通道，其直径大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D、一般情况，凝胶对要分离物质没有吸附作用，因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来【答案】：【解析】：第13题【单选题】下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是( )A、加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B、让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面C、打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱D、待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，每5mL收集一管，连续收集流出液【答案】：【解析】：第14题【单选题】在蛋白质的提取和分离中，下列对样品处理过程的分析正确的是( )A、洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B、洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的结果C、洗涤过程选用质量分数0.9%的NaCl溶液(生理盐水)D、透析袋是一种半透膜，小分子能自由进出，大分子无法通过【答案】：【解析】：第15题【综合题】红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。
2019-2020学年生物人教版选修1同步检测：专题5.课题3 血红蛋白的提取和分离 Word版含
姓名，年级：时间：课题3 血红蛋白的提取和分离理一理判一判1。
凝胶色谱法和电泳法分别利用了蛋白质的相对分子质量的大小和所带电荷性质的不同,实现了对蛋白质的分离。
(√）2．相对分子质量大的蛋白质会被排阻在凝胶颗粒之外而不能通过凝胶。
（×）3．缓冲溶液可以抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响。
（√)4．电泳过程中蛋白质的运动速率只与带电性质有关。
(×)5．测定蛋白质相对分子质量时常用琼脂糖凝胶电泳。
（×）6．蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率仅与其电荷多少有关.(×）7．添加了SDS后的蛋白质电泳结果只跟蛋白质的分子量有关。
(√）8．血红蛋白存在于血浆中，是内环境的组成部分。
（×）9．洗涤红细胞和血红蛋白的释放所用的液体分别是生理盐水和蒸馏水.（√)10．装填色谱柱时要先把凝胶物质填充进去，而后立即用高压缓冲液洗涤以使凝胶紧密。
(√)悟一悟1.在装填凝胶柱时，不得有气泡存在,因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，影响分离效果.2．在凝胶色谱操作过程中,不能发生洗脱液流干，露出凝胶颗粒的现象。
一旦发生上述两种情况，凝胶色谱柱需要重新装填.3．小心加入磷酸缓冲液到适当高度后，再连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，进行洗脱，不能边加缓冲液边洗脱，这样会扰乱洗脱顺序。
4．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，再用试管收集流出液．此时收集到的才是纯度较高的血红蛋白溶液。
收集时间不要过早或过晚，若收集时间过早，血红蛋白还未洗脱出，若收集时间过晚，则血红蛋白早已经洗脱出，得不到血红蛋白.感悟体会：练一练1。
已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质，其分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示.下列叙述正确的是（）A．将样品以2 000 r/min的速度离心10 min,若分子戊存在于沉淀中，则分子甲也一定存在于沉淀中B．若五种物质为蛋白质，则用凝胶色谱柱分离时，甲的移动速度最快C．将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内，则分子甲也保留在袋内D．若五种物质为蛋白质，用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远解析:分子戊分子量大于甲，以2 000 r/min的速度离心10 min，若分子戊存在于沉淀中，则分子甲不存在于沉淀中，A项错误。
2019-2020年高中生物人教版选修1教学案：专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离(含答案)
2019-2020年高中生物人教版选修1教学案：专题五课题3 血红蛋白的提取和分离(含答案)1．凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法，相对分子质量大的先洗脱出来，相对分子质量小的后洗脱出来。
2．在电泳中，待分离样品中分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状都会影响分子的迁移速度。
3．SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移率完全取决于分子的大小。
4．蛋白质提取和分离的一般步骤是：样品处理及粗分离、纯化和纯度鉴定。
5．透析法可除去相对分子质量较小的杂质。
6．在对蛋白质进行纯度鉴定时，使用最多的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。
一、蛋白质分离的原理和方法1.分离原理依据蛋白质各种特性的差异分离蛋白质，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等。
2.凝胶色谱法(1)概念：也称为分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
(2)凝胶：微小的多孔球体，大多数由多糖类化合物构成，内部有许多贯穿的通道。
(3)原理：[填表]蛋白质类型能否进入凝胶内部移动路程移动速度相对分子质量较小能较长较慢相对分子质量较大不能较短较快3．缓冲溶液(1)作用：在一定范围内，抑制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变。
(2)配制：由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成，通过调节缓冲剂的使用比例就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。
4．电泳(1)概念：指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
(2)原理：①许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。
②在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
③电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
④方法：常用的电泳方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
二、血红蛋白提取和分离的实验操作[填图]1．凝胶色谱法中移动速度快的是()A．相对分子质量大的B．相对分子质量小的C．溶解度高的D．溶解度低的解析：选A凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。
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专题5 DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取和分离---------------- 课堂演练当堂达标1下列试剂可用于血红蛋白释放的是（）①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠A .②④B.①④C .④⑤D .①③解析：0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂，不能用于血红蛋白释放；甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂，加速血红蛋白的释放；磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质，不能用于释放血红蛋白；蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破，释放其中的血红蛋白；柠檬酸钠的作用是采血时，防止血液凝固，不能用于血红蛋白的释放。
答案：A2.在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽，与其有关的是（）A .凝胶色谱柱的制作B.色谱柱的装填C .洗脱过程D .样品的处理解析：在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽，说明色谱柱制作不成功，可能是凝胶装填不紧密、不均匀，或者存在气泡，打乱了洗脱次序所致。
答案：B3.下列有关“血红蛋白提取和分离”实验的正确叙述是（）A .用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是去除细胞表面的杂蛋B.将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较大的杂质C .血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D .整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构解析：对红细胞洗涤时应该用生理盐水，不能用蒸馏水，A错误; 将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质，B错误；血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是溶解磷脂，加速血红蛋白的释放，C 错误；整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持pH相对稳定，防止和血红蛋白的结构发生改变，D正确。
答案：D4.凝胶色谱柱取长为40 cm,内径为1.6 cm,有关说法中，不正确的是（）A .一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果B.凝胶色谱柱过高，超过1 m,不影响分离的效果C .凝胶色谱柱过矮，则影响混合物的分离度D .凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液，样品的稀释度过大解析：一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果，但是直径过大会造成洗脱液体积增大，样品的稀释度过大，因此应选择直径不超过2 cm 的色谱柱。
凝胶色谱柱的高度与分离度有关，一般不超过1 m。
答案：B5.凝胶色谱法可测定蛋白质的相对分子质量，现有A、B两种蛋白质，请运用凝胶色谱法完成下列实验，确定A、B两种蛋白质相对分子质量的大小。
(1)凝胶色谱法的原理是____________________________________ 。
(2)材料用具：玻璃管，橡皮塞，打孔器，移液管，尼龙网，螺旋夹，凝胶，缓冲液。
(3)实验步骤：①凝胶色谱柱的制作：注意底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的_________ ，否则难以铺实________ ，还会导致液体残留，蛋白质分离不彻底。
②凝胶色谱柱的装填：装填时轻轻敲动色谱柱的原因是：③ ______________________________________________________ 样品的加入和洗脱：__________________________________________________________________(4)预期结果及结论：__________________________________________________________________解析：(1)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
(3)制作凝胶色谱柱时，选择橡皮塞打孔，然后将橡皮塞切出锅底状凹穴，然后插入玻璃管，注意不能超出橡皮塞凹穴底面，否则难以铺实尼龙网。
装填时轻轻敲动色谱柱，使凝胶装填均匀。
用吸管取混合液沿壁环绕加样后，即可用缓冲液洗脱。
(4)相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。
答案：(1)根据相对分子质量的大小分离蛋白质(3)①凹穴底面尼龙网②使凝胶装填均匀③将A、B两种蛋白质的混合液加到凝胶色谱柱的上端，用缓冲液进行洗脱，检测它们洗脱的先后顺序(4)若A先于B洗脱出来，则A的相对分子质量大于B;若B先洗脱出来，则B的相对分子质量大于A--------------- 课后作业知能强化--------A级基础巩固1使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中，相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程，可表示为下图中( )ABC D解析：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。
相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量大的蛋白质，路程较短，移动速度较快，首先洗脱出来。
答案：B2.使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( )A .电荷的多少B.分子的大小C .肽链的多少D .分子形状的差异解析：SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物，SDS所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。
答案：B3.在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是（）A .防止血红蛋白被氧气氧化B.血红蛋白是一种碱性物质，需磷酸中和C .磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D .让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和性质解析：磷酸缓冲液的作用是稳定pH，从而维持血红蛋白的结构和性质。
答案：D4.下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤，其中正确的是（）A .蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步B.蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、鸡、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白C .对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等D.对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳解析：蛋白质提取和分离的实验步骤一般包括样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等4步，A错误；蛋白质的提取和分离实验一般用哺乳动物的成熟的红细胞作为实验材料分离血红蛋白，一般不要鸡、蛙等动物血液为材料分离血红蛋白，B错误；样品处理的一般步骤分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白、透析等，C错误；对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳，D正确答案：D5.从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大，其原因不是（）A .蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感，更易失活B.蛋白质的空间结构多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有统一的方法C .提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序D .提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步解析：蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感，更易失活，是提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大的原因，A错误；蛋白质的空间结构多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有统一的方法，是提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大的原因，B 错误；提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序是提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大的原因，C错误；提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步，这只是某一种蛋白质的提取步骤，不是难度大的原因，D正确。
答案：D6.蛋白质的提取和分离分为哪几步（）A .样品处理、凝胶色谱操作、SDS —聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C .样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D .样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定解析：蛋白质提取和分离的实验步骤一般包括样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等4步答案：CB级能力训练7.凝胶色谱技术不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。
下图甲为凝胶色谱柱分离蛋白质的示意图，图乙为几种被分离蛋白质相对分子质量大小与洗脱液的洗脱体积的关系，请据图分析回答:O >图甲图乙（1）图甲a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是（2）自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由_________ 代。
（3）若图乙被分离的蛋白质混合液中含有肌红蛋白（相对分子质量为16 900）、血清蛋白（相对分子质量为68 500）、牛乳球蛋白（相对分子质量为35 000）、牛胰岛素（相对分子质量为5 700），则图乙中A、B、C、D代表的物质依次是解析：（1）由于不同蛋白质的相对分子质量不同，相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，路程短, 速度快，易洗脱；相对分子质量较小的蛋白质则进入凝胶内部通道，路程长，速度慢。
⑵凝胶色谱柱的制作：底部橡皮塞的凹穴上覆盖尼龙网和尼龙 纱，相当于多孔板。
(3) 据图可知，四种蛋白质的相对分子质量逐渐增大，因此图乙 中A 、B 、C 、D 代表的物质依次是牛胰岛素、肌红蛋白、牛乳球蛋 白、血清蛋白。
答案：(1)a a 相对分子质量较大，无法进入凝胶内部的通道， 只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快(2)尼龙网和尼龙纱(3) 牛胰岛素、肌红蛋白、牛乳球蛋白、血清蛋白8. (1)同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速率的因素包括蛋白质分子的 _________ 、 _______ 以及分子的形状等。
(2)同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白分离 (如图一),他在操作 中加样的正确顺序是 _________________ ,在执行图一中②所示操作时，色谱柱 下端连接的尼龙管应该 _________ 填“打开”或“关闭”)洗脱时M/mmSephadex Gr-75^胶也.谱分离结杲(3)图二、图三分别是同学甲、 乙利用同一种样品分离得到的结果，则在图三中与图二中蛋白质P 对应的是蛋口质诳度伽M • L 1)图二图三解析：(1)进行琼脂糖凝胶电泳时，影响蛋白质迁移速率的因素有蛋白质分子大小、带电性质及分子的形状等。
(2)正确的加样顺序可依据样品在色谱柱及凝胶层中的渗入量进行分析，可以得出是④①②③；同时进行②所示加样时，应关闭下出口。
(3)SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳装置是垂直的装置，此种电泳方法主要取决于蛋白质相对分子质量的大小，与电荷无关，同时在“-”极加样，通电后，样品蛋白质向“ + ”极移动，相对分子质量小的，移动距离大，因此从图二的电泳结果分析，P比N、M移向“+”极距离大，说明P相对分子质量比较小，因此洗脱出来的时间比较长，符合图三中的丙。
答案：(1)大小带电性质(2 ①②③关闭(3 )丙9.如今人类已跨入了蛋白质时代，对蛋白质的研究和应用，首先需要获得高纯度的蛋白质。