大肠菌群
大肠菌群检测方法
大肠菌群检测方法大肠菌群检测是指对人体肠道内的微生物群落进行检测和分析，以了解肠道微生态环境的健康状况。
大肠菌群在人体健康中起着至关重要的作用，它与营养吸收、免疫调节、代谢调节等多个方面密切相关。
因此，对大肠菌群的检测方法的研究和应用具有重要的临床意义。
目前，常用的大肠菌群检测方法主要包括，16S rRNA 基因测序、荧光原位杂交技术（FISH）、实时荧光定量PCR技术、拟南芥芯片技术等。
其中，16S rRNA 基因测序是目前应用最为广泛的一种方法。
该方法通过对肠道微生物的16S rRNA基因进行测序和分析，可以准确地鉴定出肠道微生物的种类和数量，为进一步研究肠道微生物群落结构和功能提供了重要的数据支持。
荧光原位杂交技术（FISH）是一种通过用荧光标记的核酸探针对特定微生物进行检测和定量的技术。
该方法能够直接在样本中观察到目标微生物的分布和数量，具有较高的特异性和灵敏度，适用于对微生物的定量和形态特征进行研究。
实时荧光定量PCR技术是一种基于PCR扩增和荧光探针检测的方法，可以对微生物的数量进行快速、准确的定量分析。
该方法操作简便、灵敏度高，适用于临床样本的快速检测和定量分析。
拟南芥芯片技术是一种通过芯片上固定的核酸探针对微生物进行高通量检测和分析的方法。
该技术可以同时对多个微生物进行检测，具有高通量、高灵敏度的特点，适用于对微生物群落结构和功能进行整体性的研究。
总的来说，大肠菌群检测方法的选择应根据研究目的、样本特性、实验条件等因素进行综合考虑。
不同的检测方法各有优势和局限性，需要根据具体情况进行选择和应用。
随着技术的不断发展和进步，相信大肠菌群检测方法会越来越完善，为人体肠道微生物群落的研究提供更加可靠的技术支持。
食品中大肠菌群检测及注意事项
食品中大肠菌群检测及注意事项大肠菌群(Coliform bacteria)是指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中是否有污染肠道致病菌的可能。
大肠菌群分布较广，在温血动物粪便和自然界中广泛存在。
检测方法MPN检索表使用GB/T 4789.3-2023检索表中阳性管数是以1mL(g)×3、0.1mL(g)×3和0.01mL(g)×3的梯度进行表示，GB 4789.3-2023阳性管数是以0.10、0.01和0.001的梯度表示,均根据稀释倍数推算结果，结果相同。
推算方法以GB 4789.3-2023为例，改用1g(mL)、0.1g(mL)和0.01g(mL)时，表内数字应相应降低10倍;如改用0.01g(mL)、0.001g(mL)和0.0001g(mL)时,则表内数字应相应增高10倍,其余类推即可。
常用标准常见问题及解答1、如何选择检测方法？答：你要依据产品的执行标准去选择检测方法，不是说你喜爱那种就可以用那种。
2、03版的结果能不能和10版的结果进行换算和比较？答：其实换算是不行的，这个两个不同的标准。
假如只是进行比较两个结果是可以的，但是不建议。
3、同一批产品，检测的两份结果不一样，是不是那里出问题？答：其实不是出问题，这个是正常的，同一批产品不代表他们的微生物检测结果是一模一样的，假如是这样也没必要做五份去验证产品合格了吧？假如说同一份样品（制成一份样）消失结果差好远的话，这里就要去分析那里出问题。
样品采集怎样采样，才能使样品具有代表性？这里将样品分为两类：预包装食品和散装食品或现场制作食品1、对于预包装食品① 应采集相同批次、独立包装、适量件数的食品样品，每件样品的采样量应满意微生物项目检验的要求。
② 独立包装小于、等于1000g 的固态食品或小于、等于1000mL 的液态食品，取相同批次的包装。
大肠菌群cfu限量标准
大肠菌群cfu限量标准
大肠菌群的标准值在不同食品类别中是不同的。
在鲜肉类食品中，标准值是≤100 CFU/g；在熟肉或熟制品中，标准值是≤10 CFU/g；在生鲜水果蔬菜中，标准值是≤100 CFU/g；在加工水果蔬菜中，标准值是≤10 CFU/g；在食品类加工品中，标准值是≤10 CFU/g。
此外，饮用水中的大肠菌群平板计数限量标准也有所不同。
具体标准需要根据不同的饮用水类别来确定。
另外，一些特定食品的国家标准也对大肠菌群有限量规定。
例如，《食品安全国家标准豆制品》（GB 2712—2014）规定，同一批次样品5个独立包装的大肠菌群检测结果均不得超过1000 CFU/g且至少3个独立包装的检测结果不超过100 CFU/g。
《食品安全国家标准坚果与籽类食品》（GB 19300—2014）规定，一个样品的5次检测结果均不得超过100 CFU/g且至少3次检测结果不超过10 CFU/g。
《食品安全国家标准冲调谷物制品》（GB 19640—2016）规定，同批次5个独立包装产品中大肠菌群的检测结果不允许有超过102CFU/g的，且至少3个包装产品检测结果不超过10CFU/g。
总之，大肠菌群的标准值在不同食品类别和饮用水类别中是不同的，需要根据具体情况来确定。
如果检测结果超过标准值，则可能提示存在污染。
大肠菌群检验方法课件
平板计数
证实实验
分离培养
证实试验
↓ 报告
两步法
MPN计数法
1.推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个 稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃ 培养48±2h，观察是否产气。 2.证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐 （BGLB）肉汤管中，36±1℃培养 48±2h，观察是否产气。以BGLB产 气为阳性。查MPN表，报告每ml(g) 样品中大肠菌群的MPN值。
大肠菌群检验方法
介绍
由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组 与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性 厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰 氏阴性无芽胞杆菌。 因此大肠菌群的检测一般都是按照它的 定义进行。有两步法、三步法
大肠菌群
两部法 三步法
↓
MPN计数法
↓
平板计数法
↓
↓
乳糖发酵试验
↓
↓
推测试验
证实实验
三步法
乳糖发酵试验、分离培养和证实试验
三步法：
1.乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个释 度接种三管乳糖蛋白胨发酵管。36±1℃ 培 养 48±2h，观察是否产气。 2.分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平 板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。
3.证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观 察，同时接种普通乳糖发酵管36±1℃， 24±2h，观察产气情况。
主题一
示例一，引出主题 解释细节 进行练习以巩固所学内容
主题二
示例二，引出主题 解释细节 进行练习以巩固所学内容
总结
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其它信息
参考书籍、电子文档等 咨询服务联系方式 ……
大肠菌群的检测方法
大肠菌群的检测方法
大肠菌群的检测方法包括传统的培养方法和现代的分子生物学方法。
1. 传统的培养方法：将样本（如粪便）在特定的培养基上培养，利用不同菌株在不同培养基上的生长特征进行鉴定和计数。
这种方法可以获取特定菌株的数量和种类信息，但对于非常少量的菌群或无法在培养基上生长的菌群不敏感。
2. 分子生物学方法：使用PCR、实时定量PCR、高通量测序等技术，通过分析样本DNA中的16S rRNA基因序列或其他特定的代谢基因序列，对大肠菌群进行快速、准确的鉴定和计数。
这种方法可以检测到复杂菌群的成员组成及其数量，也可以观察菌群的动态变化。
不同的检测方法具有各自的特点和应用范围，选择适当的方法取决于研究目的、样本来源及需求的分辨率和灵敏度。
大肠菌群怎么报告
大肠菌群怎么报告大肠菌群报告是一种常见的医学检测，用于评估大肠道内细菌的种类和数量。
这种报告可以提供有关肠道健康状况的重要信息，帮助医生诊断和治疗相关疾病。
本文将介绍大肠菌群报告的步骤和分析方法。
1.样本收集大肠菌群报告需要采集肠道样本，通常是通过大肠镜或者粪便样本。
对于大肠镜检查，医生会在患者的直肠内插入一根长而柔软的管子，然后将管子逐渐推进到结肠。
通过这种方式，可以直接观察到结肠的内部情况，并采集组织或者液体样本。
而对于粪便样本，患者只需在指定的容器中收集新鲜的粪便样本即可。
2.样本处理收集到的样本需要进行处理，以便提取出样本中的细菌。
对于组织样本，常见的处理方法是将组织样本进行细菌培养，以分离和鉴定各种细菌。
对于粪便样本，通常使用分子生物学技术进行处理，如PCR技术，以便检测和鉴定细菌DNA。
3.细菌种类和数量分析在得到细菌样本后，需要对其进行种类和数量的分析。
对于细菌种类的分析，常见的方法是将细菌样本进行培养，并观察不同菌落的形态和特征，以确定细菌的种类。
对于细菌数量的分析，可以使用细菌培养方法进行定量，也可以通过DNA测序技术进行定量。
DNA测序技术可以准确地测定细菌样本中各种细菌的相对数量。
4.报告解读最后，根据细菌种类和数量的分析结果，医生会解读大肠菌群报告并给出相应的诊断和治疗建议。
一般来说，正常的大肠菌群应该包含多种细菌，而某些疾病可能导致菌群失衡或异常增殖。
医生会根据细菌种类和数量的异常情况来判断是否存在疾病，并制定相应的治疗方案。
总结起来，大肠菌群报告是一种重要的医学检测，可以提供有关肠道健康状况的信息。
通过样本收集、处理、细菌种类和数量分析以及报告解读，医生可以了解患者的肠道情况，并做出相应的诊断和治疗建议。
这种报告对于预防和治疗相关疾病具有重要意义。
大肠菌群的单位-概述说明以及解释
大肠菌群的单位-概述说明以及解释1.引言1.1 概述大肠菌群是指存在于人体大肠内的一种微生物群落，包括了多种不同类型的菌群。
这个微生物群落主要由各种细菌组成，其中最常见的是乳酸菌、肠球菌和革兰氏阴性菌等。
大肠菌群扮演着非常重要的角色，对人体健康具有巨大的影响。
大肠菌群的单位指的是研究和评估大肠菌群的测量标准和指标。
对于人体而言，了解和监测大肠菌群的单位十分重要，因为它们可以提供关于肠道健康和整体身体状况的重要信息。
随着科学技术的进步，研究人员可以利用多种方法来衡量和描述大肠菌群的单位。
常用的方法包括通过测量菌群的种类和丰度来描述它们的组成，使用16S rRNA基因测序来揭示菌群的多样性，以及通过测量菌群的代谢产物来评估其功能。
大肠菌群的单位不仅在研究和了解人体健康方面有着重要意义，还在多个领域中得到广泛应用。
例如，在食品安全领域，测量大肠菌群的单位可以帮助评估食品中的微生物污染程度。
在环境科学领域，它们也被用来监测污水处理系统中的微生物群落的稳定性和效果。
本文将对大肠菌群的单位进行详细探讨，包括其定义、重要性以及功能。
进一步介绍大肠菌群单位的研究进展，以及未来在这一领域的展望。
通过对大肠菌群单位的研究和认识，我们可以更好地了解和保护人体健康，为相关领域的科学研究和应用提供有益的指导。
1.2文章结构文章结构：本文主要包括引言、正文和结论三个部分。
在引言中，将对大肠菌群的概述进行介绍，明确文章的目的，并概述文章的结构。
正文部分将分为三个小节进行讨论。
首先是对大肠菌群的定义进行详细说明，包括其组成成分和特点。
接下来将重点探讨大肠菌群的重要性，分析其在人体健康和疾病中的作用和影响。
最后，谈论大肠菌群的功能，包括其在营养消化、免疫调节等方面的功能和机理。
在结论部分，将强调大肠菌群的单位的重要性，并回顾当前对大肠菌群的单位的研究进展，展望未来的发展方向。
整篇文章将通过以上结构，全面、系统地介绍大肠菌群的单位，为读者提供相关知识和科学的研究成果。
大肠菌群
LST初发酵
大肠菌群检验(MPN法)
• 6.3 复发酵试验 用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养 物1环，移种于煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB） 管中，36 ℃±1℃培养48h±2 h，观察产 气情况。产气者，计为大肠菌群阳性管。
大肠菌群检验(MPN法)
• • • •
煌绿乳糖胆盐肉汤BGLB 胆盐可抑制革兰氏阳性菌。 煌绿是抑菌抗腐剂，可增强对革兰氏阳性菌的抑 制作用。 乳糖是大肠菌群可利用发酵的糖类。有利于大肠 菌群的生长繁殖并有助于鉴别大肠菌群和肠道致 病菌。 复发酵试验判定原则：产气为阳性。由于配方里 有胆盐，胆盐遇到大肠菌群分解乳糖所产生的酸 形成胆酸沉淀，培养基可由原来的绿色变为黄色， 同时可看到管底通常有沉淀。
大肠菌群在VRBA上的菌落特征
大肠菌群 第二法的检验程序
• 8.3 平板菌落数的选择 选取菌落数在15 CFU～150 CFU 之间的平 板，分别计数平板上出现的典型和可疑大 肠菌群菌落。典型菌落为紫红色，菌落周 围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5 mm 或更大。
大肠菌群 第二法的检验程序
BGLB肉汤证实试验 36℃±1℃ 18~24h 报告结果 注：VRBA(结晶紫中性红胆盐琼脂)又称为：VRB或VRBL
大肠菌群 第二法的检验程序
操作要点 • 8.1 样品的稀释按6.1进行（第一法）。 • 8.2 平板计数 • 8.2.1 选取2个～3个适宜的连续稀释度，每个 稀释度接种2个无菌平皿，每皿1 mL。同时取 1mL生理盐水加入无菌平皿作空白对照。 • 8.2.2 及时将15 mL～20 mL冷至46 ℃的结晶 紫中性红胆盐琼脂（VRBA）约倾注于每个平 皿中。小心旋转平皿，将培养基与样液充分混 匀，待琼脂凝固后，再加3 mL～4 mLVRBA 覆盖平板表层。翻转平板，置于36 ℃±1 ℃ 培养18 h～24 h。
大肠菌群的表示方法
大肠菌群的表示方法
大肠菌群是指在人体肠道中生活的一类细菌群，它们对于维持肠道健康和免疫系统功能发挥着重要作用。
由于大肠菌群的种类繁多，因此需要对其进行表示和分类。
一般情况下，大肠菌群的表示方法采用16S rRNA基因序列分析。
这是一种常用的分子生物学技术，通过对细菌的16S rRNA基因序列进行测序、比对和分类，可以清晰地展现大肠菌群的多样性和种类组成情况。
除了16S rRNA基因序列分析，还可以采用群体代表序列（OTUs）的方法表示大肠菌群。
该方法将相似的细菌序列聚合为一个OTU，从而得到样品中大肠菌群的数量和组成信息。
此外，近年来还出现了一些新的高通量测序技术，如16S rRNA gene amplicon测序和metagenomics测序等，这些技术可以更精细地鉴定和描述大肠菌群的复杂组成和功能。
- 1 -。
大肠菌群 国家标准
大肠菌群国家标准大肠菌群是人体肠道中的一类微生物群，对于人体健康具有重要的影响。
国家标准对于大肠菌群的监测和评价提出了一系列的要求，旨在保障人体健康，预防疾病的发生。
本文将就大肠菌群国家标准进行详细介绍和解读。
首先，国家标准对大肠菌群的监测方法进行了规范。
在监测大肠菌群的时候，应当采用标准化的方法和技术，确保监测结果的准确性和可比性。
常用的监测方法包括菌落计数法、PCR法等，这些方法均需要严格按照国家标准进行操作，以确保监测结果的科学性和可靠性。
其次，国家标准对大肠菌群的评价指标进行了明确。
大肠菌群的种类和数量是评价肠道微生物平衡的重要指标，国家标准对于大肠菌群的种类和数量都进行了明确的规定。
同时，国家标准还对于大肠菌群的功能进行了评价，例如对于益生菌和致病菌的比例进行了规定，以此来评价肠道微生物的健康状况。
此外，国家标准还对大肠菌群的相关产品进行了管理要求。
在食品、药品等领域中，大肠菌群相关产品的质量和安全问题备受关注。
国家标准对于这些产品的生产、储存、运输等环节进行了详细的管理要求，以保障产品的质量和安全性，防止因大肠菌群相关产品而引发的健康问题。
总的来说，国家标准对于大肠菌群的监测、评价和相关产品管理进行了全面的规范，这对于保障人体健康具有重要的意义。
只有严格按照国家标准进行操作，才能够确保监测结果的准确性和可比性，保障大肠菌群的健康状况。
同时，相关部门和企业也应当加强对于国家标准的宣传和执行，以此来提升人们对于大肠菌群健康的重视程度，推动大肠菌群国家标准的有效实施。
综上所述，大肠菌群国家标准的出台和实施，对于保障人体健康、预防疾病的发生具有重要的意义。
只有严格按照国家标准进行操作，才能够确保大肠菌群的健康状况，为人们的健康提供有力保障。
希望相关部门和企业能够加强对于国家标准的宣传和执行，推动大肠菌群国家标准的有效实施，为人们的健康保驾护航。
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题目：生菜中大肠菌群MPN的测定
摘要：本实验采用GB/T4789.3-2010的检测方法测定生菜中的大肠菌群MPN。
将不同倍数的检样稀释液接种到LST肉汤发酵管中，经一定温度、时间发酵，若均不产气者则可报告为阴性；如有产气者，则需要接种至BGLB肉汤中做实证实验，依据产气情况，查取MPN检索表，报告出每ml（g）大肠菌群的最近似数。
本次实验测得每克生菜中大肠菌群为>1100MPN。
因此，生菜在没有洗净前的大肠菌群是很多的，人们吃用前一定要洗净或煮熟。
关键词：大肠菌群MPN检验法生菜
前言
食品的被污染程度可以用大肠菌群数来表示。
大肠菌群系指一群在36度条件下培养48h能发酵乳糖，产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌[1]。
它与肠道致病菌的来源相同，并且在相同的来源中普遍存在和数量甚多，是适合做食品是否已被肠道致病菌污染及其污染的程度的指标菌的。
由于大肠菌群数量很多，适宜用一个近似值来代替菌群的确切数量。
大肠菌群MPN是基于泊松分布的一种间接计数方法，指在每克食品检样中所含的大肠菌群的最近似或最可能数。
1 材料与方法
1.1实验材料与仪器： 10g 生菜，无菌水，灭菌三角瓶若干，灭菌试管若干，玻珠若干，移液枪，灭菌吸管，酒精灯，试管架，恒温培养箱，天平，PH试纸，灭菌锅
1.2培养基和试剂：
1.2.1无菌生理盐水：称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中。
每组配制200mL，分装90mL于1瓶带有玻璃珠的250mL三角瓶和9mL于18支试管内，加硅胶塞，包扎，做好本组标记，121度高压灭菌15分钟。
1.2.2 LST肉汤：称取35.6g，加蒸馏水1L，加热煮沸至完全溶解，分装带小导管的试管，每支9mL，每组20支，包装，标记，121度灭菌15分钟。
1.2.3 BGLB肉汤：称取40g，加蒸馏水1L，加热煮沸至完全溶解，分装带小导管的试管，每支9mL，每组14支，包装，标记，121度灭菌15分钟。
1.3检测程序
1.4 实验步骤
1.4.1初发酵试验
选择三个适宜的连续稀释度的样品均液，每个稀释度接种3管LST肉汤，每管接种1mL，36±1℃培养24±2h，观察倒管内是否有气泡产生。
未产气者为大肠菌群阴性，产气者则进行复发酵试验。
1.4.2复发酵试验
用接种环从所有初发酵后发酵产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于BGLB肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察产气情况。
未产气者为大肠菌群阴性，产气者则计为大肠菌群阳性管。
2 实验结果与分析
根据大肠菌群阳性管数，检索MPN表，报告每克样品中大肠菌群的MPN值。
2.2大肠菌群检测结果
2.2.1 初发酵各浓度梯度阳性管数统计
表一初发酵各浓度梯度阳性管数统计
2.2.2 复发酵各浓度梯度阳性管数统计
表二复发酵各浓度梯度阳性管数统计
2.1.3 大肠菌群MPN的计算与报告
根据各阳性管数及MPN检索表(附录一)，可得大肠菌群最可能数MPN 为>1100，即至少1.1*104cfu/mL。
3 实验结论与讨论
作为食品的指示菌，大肠菌群的数量越多，表示该食品受粪便污染的程度越大，表示食品被肠道致病菌污染的可能性也就越大。
生菜在没有经过洗净的情况下大肠菌群最可能数MPN为>1100。
根据无公害蔬菜质量标准（DB33 291.3）中规定，无公害蔬菜（净菜）中的大肠菌群（MPN/100g）应≤150[2]。
所以此生菜中的大肠杆菌数严重超标。
这个数值相当大，能导致食用者肠道不适[3]，可能导致中毒。
而清水能大大地减少大肠菌群的数量，因此在食用生菜或其它的果蔬之前应该充分洗净再食用。
4检验报告
主检：校核：检验日期：2012 年3月10日。