【2018-2019】生存率实验步骤-word范文 (14页)

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【2018-2019】生存率实验步骤-word范文 (14页)

【2018-2019】生存率实验步骤-word范文 (14页)

本文部分内容来自网络整理,本司不为其真实性负责,如有异议或侵权请及时联系,本司将立即删除!== 本文为word格式,下载后可方便编辑和修改! ==生存率实验步骤篇一:实验报告复方山莨菪碱注射液对严重烫伤大鼠死亡率的影响摘要:复方山莨菪碱由新斯的明注射液和山莨菪碱注射液按照1:500比例组成。

用该比例在本单位以往的研究中,对失血性休克、过敏性休克、增加小鼠对致死剂量内毒素的耐受性均有较好的作用。

该复方制剂的药理学基础是,新斯的明为可逆性胆碱酯酶(AChE)抑制剂,暂时性抑制胆碱酯酶活性,增加体内胆碱酯酶(ACh)的量来激动M受体和N受体;山莨菪碱大剂量既有改善微循环的作用,又有阻断M受体的作用,M受体的阻断使N受体更充分地被激动,在被激动的N受体及其亚型中,α7被激动后可以减少炎症因子的释放。

我们认为,多数重大创伤引起的休克都与炎症因子的大量释放有关,减少炎症因子的释放既能发挥一定的抗休克作用,也能延长休克引起的死亡时间,即有扩大“治疗时间窗”的作用。

本实验选用SD大鼠,背部烫伤,程度为III度,面积为30%进行实验。

1 实验目的:与单药比较,观察复方山莨菪碱腹腔注射是否能够减少大面积严重烫伤大鼠死亡率的作用。

2 实验材料2.1 受试药物复方山莨菪碱注射液组成:盐酸消旋山莨菪碱注射液10mg,甲基硫酸新斯的明注射液20ug(比例500:1)加注射用水1ml。

盐酸消旋山莨菪碱注射液:上海第一生化药业有限公司生产;国药准字H31022093;生产批号:201X/03/20;规格:1ml:10mg。

甲基硫酸新斯的明注射液:上海信谊金朱药业有限公司生产;国药准字:H31022770;生产批号:090103;生产日期:090111。

规格:2ml:1mg。

内毒素(LPS):美国SIGMA公司生产。

2.1.1 实验分组与剂量设置实验分为6组:受试药物复方山莨菪碱注射液以其中山莨菪碱的含量计算分高剂量组(20mgl/kg )、中剂量组(10mg/kg)和低剂量组(5mg/kg)。

2018-2019-visualbasic201X范例-实用word文档 (14页)

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本文部分内容来自网络整理,本司不为其真实性负责,如有异议或侵权请及时联系,本司将立即删除!== 本文为word格式,下载后可方便编辑和修改! ==visualbasic201X范例篇一:Visualbasic教学项目案例库Visualbasic实训项目案例一、程序设计基础部分(一)条件选择结构:【1.1.01】计算分段函数,程序运行效果如图所示。

【1.1.02】已知字符型变量strChar中存放了一个字符,判断该字符是字母字符、数字字符还是其他字符,程序运行效果如图所示。

【1.1.03】已知x、y、z三个数,比较它们的大小并排序,使得x>y>z。

程序运行效果如图所示:【1..1.04】已知输入某课程的百分制成绩Score,要求显示对应五级制的评定,评定条件见表。

程序运行效果如图2.24所示。

【1.1.05】输入一个年份,判断该年是否为闰年。

程序运行效果如图所示。

说明:s = InputBox("请输入年份:")n = Val(s)If n Mod 400 = 0 Or (n Mod 4 = 0 And nMod 100 <> 0) ThenMsgBox s + "是闰年!"End If【1.1.06】求一元二次方程的根。

要求:当用户在“a=”、“b=”和“c=”对应的文本框中输入a,b,c的值后,单击【计算】按钮,则从“x1=” 和“x2=”对应的文本框中输出计算结果。

程序运行效果如图所示。

【1.1.07】运输公司对用户计算运费。

路程(s)越远,每公里运费越低。

标准如下:S<250km 没有折扣250≤S<5002%折扣500≤S<1000 5%折扣1000≤S<201X 8%折扣:201X≤S<3000 10%折扣S≥3000 15%折扣设每公里每吨货物的基本运费为P,货物重为W,距离为S,折扣为d,则总运费F的计算公式为:F=P*W*S*(1-d)。

用寿命表法计算各年的生存率

用寿命表法计算各年的生存率

用寿命表法计算各年的生存率。

生存概率=1 一死亡概率第N 年的生存率=(N-2)年的生存概率X (N-1)年生存概率某恶性肿瘤术后生存率计算举例术后年 期内失 期内死 < 期内观 期内死 期内生 N 年生存率数 访人数 亡人数 期初观 察人数察人数 亡概率 存概率(N=X+1)X 〜n /A)(1) (2) (3) (4)⑸(6)(7)( ⑻0〜 0 122141〜 1 14 23 2022〜 1117■ 1653〜 2214 13744〜1012101■表中第⑴栏:术后年数X 〜,“0〜”表示从手术日起不满1整年,“1〜”表示术后1年 至未满两整年,后依次类推。

第⑵栏:期内失访人数表示术后x 年至未满x+1年期内失去联系与死于其他原因 的病例数。

第⑶栏:期内死亡数Q 表示术后X 年至未满X+1年内死于该恶性肿瘤的病例数。

第⑷栏:期初观察人数表厶表示术后X 年初在访的病例数。

⑵至⑷栏的数据是由原始随 访记录综合所得,并有如下关系:厶如=L x 一 一 D xf 即下一期初观察人数等于上一 期初观察人数减去上一期内失访数与期内死亡数。

如厶=L. - W. 一 D 。

=214-0-12 = 202> 厶2 =厶一叫—D] =202—14—23 = 165 等等。

第⑸栏:期内观察人年数若无失访,期初的厶人每人观察1年则有/V /z = L r Xl年,若有失访,将期内失访的患者按平均观察半年计,则计算公式为一:N’==〔一W“ /2,如 N 。

二厶)一% / 2 = 214-0/2=214, N 严厶一 / 2=202—14 / 2=195,余类死亡概率=期内死亡人数 期内观察人数X100%推。

第⑹栏:期内死亡概率凶”表示术后活满x年的患者,在下一年内死亡的概率。

公式为: 皿=如“0 = 2 / 叫=12/214=, l q l = D l /=23/195=,余类推。

第⑺栏:期内生存概率|几表示术后活满x年的患者在下一观察年内尚能生存的概率。

2018-2019-zemax实验报告-实用word文档 (12页)

2018-2019-zemax实验报告-实用word文档 (12页)

本文部分内容来自网络整理,本司不为其真实性负责,如有异议或侵权请及时联系,本司将立即删除!== 本文为word格式,下载后可方便编辑和修改! ==zemax实验报告篇一:ZEMAX 实验报告基于基本透镜组的照相物镜设计Zemax设计报告徐昕 10272055设计目的通过对设计一个以基本透镜组为基础的照相物镜,学会Zemax软件的基本应用及操作。

设计要求设计一个照相物镜,系统焦距f’=9mm,相对孔径1:4设计过程1.系统建模1.1选取初始结构从《光学设计手册》(李士贤,郑乐年编,北京理工大学出版社,1990)中选取了一个1.2系统特性参数输入在General系统通用数据对话框中设置孔径和玻璃库,如图1-1,图1-2。

打开视场设定对话框设置5个视场,如图1-3。

打开波长设定对话框点击“Select>>F,d,C(visible)”自动加入三个波长,如图1-4。

表1-1图 1- 1图 1- 2图1- 3图1- 41.3初始结构输入对照表1-1,在Lens Data Editor中输入初始结构,如图1-5。

利用Zemax中的“solve”功能,求解透镜组最后一面的厚度。

选取需要设计的单元格,在“Solve”中选取“Thickness”,弹出“Thickness Solve on surface 7”求解对话框。

在对话框“Solve type”中选择“Marginal ray height”,将“Height”值输入为“0”,表示将像面设置在边缘光线聚焦的像方焦平面上,如图1-6,图1-7。

图 1-5图1-6图 1-71.4调整系统焦距打开“System Data”系统数据报告窗口,查看系统现有焦距,为65.65414mm,如图1-8,与设计要求不符,需要通过缩放功能进行调整。

选择“Tools>>Scale Lens”,缩放因子为9/65.65414=0.137082,在Scale By Factor缩放因子后填入0.137082,如图1-9。

2018-2019-昆虫标本实验报告-word范文 (15页)

2018-2019-昆虫标本实验报告-word范文 (15页)
(3)贴翅:将准备好的虫翅,按其自然排列方式,在一张纸上摆放好后,用小镊子将一侧前翅夹起,反转一下,使翅的正面朝下,对着载胶带的胶面平放下。一定要轻轻放准,因为一旦翅被胶面粘往后,便不能再拿起。放翅的原则是:应保持翅的后缘与载胶带的上、下缘保持平行,先放前翅,再放后翅。后翅的放置应保持蝶、蛾在自然展开四翅时所具有的自然姿态,只有在特殊用途时(如突出翅上某特定的分类特征)才可使前翅分离开一定的距离。务使同侧的前、后翅肩角部分,处在同一条垂直线上。最后再将另一侧前、后翅根据同样原则细致地放好,使左右对称。待四翅放好后,可用大镊子比较圆润的一端轻按翅面,使其粘好。对于像夜蛾那样后翅臀区有折叠部分的种类,可用昆虫针轻轻托起,再用小镊子的端部缓缓向外推展后翅臀区的折叠部位,边推边按,便可使其粘好
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昆虫标本实验报告
篇一:采集与制作昆虫标本 实验报告 单:
采集与制作昆虫标本实验 报告 单:
本实验报告单的设计应用了综合利用评价的主体性策略、形成性策略、全面性策略、和评价方式多元化策略,在实验前发给学生,进行实验预习,发挥前置评价的诊断和导向作用,使学生更好的完成实验。在实验后设置反思、实验的收获,并把实验报告单存入学生综合素质评定档案,是发挥评价的反馈的作用。
将衬纸对准载胶带后先使一端粘住然后用手指轻轻地向下按压衬纸并顺势从一端向另一端依次将衬纸推压在载胶带上使其粘牢以防出现气泡或皱如果将衬纸改用一段胶带按上述方法覆在载胶带上可做成一个两面透明的贴翅标本此胶带可称做盖胶带如果将硬衬纸按展好的四翅形状掏空使载胶带上的虫翅部分正好对准掏空部分然后再覆盖上一层盖胶带使镂空衬纸夹在两层透明胶带之间这样的标本较挺实同时又可以从两个方向观察虫翅正反面各具的斑纹色彩起带整形

【2018-2019】spring,mvc实训报告-范文word版 (14页)

【2018-2019】spring,mvc实训报告-范文word版 (14页)

本文部分内容来自网络整理,本司不为其真实性负责,如有异议或侵权请及时联系,本司将立即删除!== 本文为word格式,下载后可方便编辑和修改! ==spring,mvc实训报告篇一:MVC三层架构个人信息管理系统实训报告个人信息管理系统实训报告引言在现代,高科技的飞速发展,计算机的大量普及,使得人们生活节奏越来越快,因此,在生活中的一些事情就很杂乱无章,这就需要多元信息进行有效地管理工作,减轻人们的生活压力,让数据管理更现代化,自动化,智能化,人性化,更好的服务于人们,个人信息管理系统可以就实现了此效果,以提供电子名片,便条,行程管理等功能,本实训项目通过B/S设计,可以发布到网上,用户可以随时存储个人信息,项目开发背景在开设了JSP的大背景下,人们对信息的需求,并随着网络在中国的广泛普及,网络信息的完善,越来越多的人习惯于鼠标点击浏览自己需要的信息。

传统的对外宣传和介绍也遭遇网络企业网站的冲击。

企业网站的商务功能已经越来越多样化,从最开始的信息发布功能,到现在的在线产品功能、在线洽谈业务功能、在线客户服务功能、在线网站管理功能等等。

借助网络的跨地域特点,更是将企业宣传介绍的地域限制加以突破,全国各地的客户都可以通过网络在来了解企业的信息,从而大大增加了客户的数量。

为了使企业网站的投入回报和管理效益最大化,在对企业网站进行系统开发之前,必须对一系列问题进行科学的论证,如企业网站的需求分析、总体规划、系统的功能和实施方案、网站的传播与推广、运行网站的软件和硬件配置、企业网站的管理系统和管理方法等等。

企业门户性网站的建设,使企业能够通过网络和客户更好的交流,拉近企业和客户的距离,掌握大量的客户反馈信息,并及时做出企业内部调整方案,以满足客户不断增长的需求.,随着经济全球化,区域一体化的发展,项目管理已经成为经济发展的重要构成因素,项目管理对工程中项目的成功发展起到至关重要的作用,其灵活性也非常适应企业产品的多变,显然,深入而广泛地开展项目管理实践活动,提高项目管理水平是是到发展和经济发展的客观要求。

2018-2019-pdca范文-word范文模板 (9页)

2018-2019-pdca范文-word范文模板 (9页)
本文研究目的是为了通过对目前建筑行业在工程建设现场对安全管理现状综合分析应用pdca循环中的计划执行检查处理管理模式使体系功能不断加强使组织在实施安全管理时始终保持持续改进意识对体系进行不断修正和完善最终实现预防和控制工伤事故职业病及其损失的目标
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⑧把没有解决或新出现的问题转入下一个PDCA循环中去解决。如下图:
3、PDCA的特性 ⑴、周而复始
PDCA循环的四个过程不是运行一次就完结,而是周而复始地进行。一个循环结束了,解决了一部分问题,可能还有问题没有解决,或者又出现了新的问题,再进行下一个PDCA循环,依此类推。
周而复始循环持续改图
⑵、大环带小环
第十七张:
(单击)
第十八张:
经过近一年的对策落实,我们再次从财务科获取数据,统计并对比前后住院患者药占比的情况,因统计时第四季度尚未完成,故仅作当季度部分数据的比较。红线是13年的指标线,绿线是14年的,23.2%,与我们本次活动拟定的目标线22.5%近似,而我们做到了每个季度均低于标准线。(单击)
使管理水平按螺旋式上升的规律不断提高。
PDCA循环图
2、PDCA的四个阶段及八个步骤 ⑴、四个阶段
①计划阶段(Plan):调查、收集研究有关资料,按照上级对工作的方针指示及要求制定工作计划。
②执行阶段(Do):把制定工作计划组织相关力量落实执行,保证计划的实施。 ③检查阶段(Check):根据计划检查执行情况和实施效果,并总结执行过程中的经验,明确问题。
信,在本科小讲课的基础上,提前构建跨科小讲课,是我们对多学科综合团队之路的勇敢探索,我们向往“以卓越的医疗品质促进人类健康”(这句是拍马屁用的)。 第二十二张:
当然,我们在管理手段上并不擅长,在最后回顾整理的过程中,发现了不少瑕疵,但同时也是为我们新一番PDCA工作指明了我们需要注意的地方。在结构上,要做到信息的数据化,概念的理论化,标准的具体化。而在来年质量的进一步提升工作中,我们还需强调病种管理的规范化,术前准备的流程化,医患沟通的有效化。 第二十三张:

2018-2019-中原工学院-毕业设计(论文)撰写规范-精选word文档 (10页)

2018-2019-中原工学院-毕业设计(论文)撰写规范-精选word文档 (10页)

本文部分内容来自网络整理,本司不为其真实性负责,如有异议或侵权请及时联系,本司将立即删除!== 本文为word格式,下载后可方便编辑和修改! ==中原工学院-毕业设计(论文)撰写规范第二部分毕业设计(论文)撰写规范1 毕业设计(论文)对学生的基本要求(1)学生须高度重视毕业设计(论文)工作,严格要求自己,自觉遵守学习纪律和各项规章制度;对于在校外进行毕业设计(论文)的同学,还须遵守所在单位的有关规章制度;毕业设计(论文)期间,应注意人身安全和财产安全。

(2)毕业设计(论文)过程中,要尊敬老师,团结互助,虚心学习,勤于思考,敢于实践,勇于创新,按指导教师的要求,保质保量地按时完成毕业设计(论文)任务。

(3)毕业设计(论文)期间,严格执行考勤制度。

一般不准请假,确因特殊情况需要请假时,按有关规章制度办理,并获指导教师同意。

学生缺勤(含病假、事假)累积超过毕业设计(论文)时间1/3以上者,取消答辩资格,不予评定成绩,须重新补做。

(4)独立完成毕业设计(论文)工作,充分发挥主观能动性和创造性,实事求是,不弄虚作假,不套用和抄袭他人成果,如有剽窃抄袭或伪造数据行为,经调查核实,该生的毕业设计(论文)记为不及格。

对毕业设计(论文)工作,不努力、不认真、敷衍了事、回避指导,且未完成各阶段任务及严重违纪者,指导教师有权取消其参加毕业答辩资格。

(5)严格遵守操作规程及实验室有关规章制度。

节约材料,爱护仪器设备。

确保安全,离开工作现场时关闭电源、水源。

杜绝工作中的安全隐患。

(6)对于设计类题目,须按照指导教师的要求,完成计算机绘图和手工绘图的数量。

(7)毕业设计(论文)须符合格式要求和撰写要求。

(8)整理毕业设计(论文)的全部资料,并在资料袋上列出清单,及时交指导教师收存。

2 毕业设计说明书和毕业论文的撰写规范2.1 毕业设计(论文)内容组成毕业设计(论文)内容一般包括:题目(标题、题名)、中文摘要(含关键词)、英文摘要(含关键词)、目录、正文、参考文献、致谢、附录、注释等。

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本文部分内容来自网络整理,本司不为其真实性负责,如有异议或侵权请及时联系,本司将立即删除!== 本文为word格式,下载后可方便编辑和修改! ==生存率实验步骤篇一:实验报告复方山莨菪碱注射液对严重烫伤大鼠死亡率的影响摘要:复方山莨菪碱由新斯的明注射液和山莨菪碱注射液按照1:500比例组成。

用该比例在本单位以往的研究中,对失血性休克、过敏性休克、增加小鼠对致死剂量内毒素的耐受性均有较好的作用。

该复方制剂的药理学基础是,新斯的明为可逆性胆碱酯酶(AChE)抑制剂,暂时性抑制胆碱酯酶活性,增加体内胆碱酯酶(ACh)的量来激动M受体和N受体;山莨菪碱大剂量既有改善微循环的作用,又有阻断M受体的作用,M受体的阻断使N受体更充分地被激动,在被激动的N受体及其亚型中,α7被激动后可以减少炎症因子的释放。

我们认为,多数重大创伤引起的休克都与炎症因子的大量释放有关,减少炎症因子的释放既能发挥一定的抗休克作用,也能延长休克引起的死亡时间,即有扩大“治疗时间窗”的作用。

本实验选用SD大鼠,背部烫伤,程度为III度,面积为30%进行实验。

1 实验目的:与单药比较,观察复方山莨菪碱腹腔注射是否能够减少大面积严重烫伤大鼠死亡率的作用。

2 实验材料2.1 受试药物复方山莨菪碱注射液组成:盐酸消旋山莨菪碱注射液10mg,甲基硫酸新斯的明注射液20ug(比例500:1)加注射用水1ml。

盐酸消旋山莨菪碱注射液:上海第一生化药业有限公司生产;国药准字H31022093;生产批号:201X/03/20;规格:1ml:10mg。

甲基硫酸新斯的明注射液:上海信谊金朱药业有限公司生产;国药准字:H31022770;生产批号:090103;生产日期:090111。

规格:2ml:1mg。

内毒素(LPS):美国SIGMA公司生产。

2.1.1 实验分组与剂量设置实验分为6组:受试药物复方山莨菪碱注射液以其中山莨菪碱的含量计算分高剂量组(20mgl/kg )、中剂量组(10mg/kg)和低剂量组(5mg/kg)。

两个阳性对照组:盐酸消旋山莨菪碱注射液对照组,剂量为20mg/kg;甲基硫酸新斯的明注射液:剂量为40μg/kg。

注射容积为2.5ml/kg;阴性对照组静脉注射等容积的注射用水。

2.1.2 给药途径及给药次数给药途径:腹腔注射,单次给药,给药时间在烫伤后6小时。

2.2 实验模具烫伤模具,用木板自制。

大鼠按照平均体重230g计算,求出体表面积,然后在木板上开出占大鼠体表面积约30%的椭圆形孔。

如图12.3 实验动物品系: Sprague Dawley 大鼠来源:第二军医大学实验动物中心。

级别:清洁级。

体重:200-220g性别:雄性。

动物生产许可证号:SCXK(沪)201X-0016实验动物质量合格证:201X001609077动物购回后在本单位普通动物房分笼并适应性饲养7天,用普通标准大鼠饲料喂养,自由饮水,温度控制18-20℃,光线明暗12小时自动转换。

实验前一天禁食12小时,不禁水。

3. 实验方法大鼠称重,编号,然后用氯胺酮100mg/kg+地西泮10mg/kg腹腔注射麻醉,大鼠麻醉后背部向下放入自制的模具中(图2)在开水中烫10sec(图3)。

烫伤6小时后腹腔图2 大鼠背部烫伤部位图1 自制烫伤模具注射内毒素(LPS)2mg/kg造模,造模成功后分别给予生理盐水、复方山莨菪碱、山莨菪碱、新斯的明观察48小时存活率和存活时间。

图3 烫伤过程图4 烫伤后4. 观察指标2.4.1 48小时生存率。

2.4.2 生存时间。

2.5. 统计分析_2.5.1 生存率实验结果以均数±标准差(x±s)表示,与生理盐水组进行组间二样本X2检验,以P<0.05为具有统计学显著性差异标准。

2.5.2 生存时间用SPSS软件进行生存时间分析,采用K-M方法进行统计学处理,以P<0.05为具有统计学显著性差异标准。

6. 实验结果生存率:生理盐水对照组烫伤29只,24小时后仅有1只存活,生存率仅有3.33%;复方山莨菪碱注射液高剂量组存活7只,生存率为35%,经x2检验两组相差非常显著;复方中剂量、低剂量和阳性对照山莨菪碱组均存活4只,生存率为15%虽然存活率明显高于生理盐水组,但统计学处理未达到显著意义。

表1生存时间:生理盐水组烫伤后平均生存时间为12.2小时,而复方山莨菪碱注射液低剂量组存活时间为13.9小时,中高剂量组均为16.3小时。

中高剂量组存活时间与生理盐水存活率比较相差显著(P<0.01-0.001)。

表2表1 复方山莨菪碱注射液对严重烫伤存活率的影响组别生理盐水组山莨菪碱组新斯的明组 n 存活数(只)存活率(%) 29 1/29 20 4/20 20 3/20 3.33 20.0 15.015.015.035.0** 0.0543 0.136 0.0543 0.0543 0.00277 P值复方低剂量组 20 4/20 复方中剂量组 20 4/20 复方高剂量组 20 7/20**P<0.01 与生理盐水组比较复方山莨菪碱注射液对严重烫伤存活时间的影响组别生理盐水组山莨菪碱组新斯的明组 n 平均存活时间(h)29 12.2±3.08 20 14.7±5.71 2012.6±5.28复方低剂量组20 13.9±5.75复方中剂量组20 16.3.±4.12***复方高剂量组20 16.3±6.15****P<0.01,***P<0.001与生理盐水组比较图5 严重烫伤各组24小时存活时间曲线7. 实验结论:复方山莨菪碱注射液能显著降低严重烫伤的的死亡率,延长伤后生存时间。

篇二:实验方案实验方案[1]金沈锐,祝彼得,秦旭华,瞿燕.不同制备方法对西黄丸体外抑瘤作用影响的比较研究[J].时珍国医国药,201X,18(7):1735-1737.研究不同制备方法对西黄丸体外抑瘤作用的影响。

方法采用3种制备方法, 即西黄丸浸提液、煎液、含药血清, MTT法分别测定其对两种人恶性肿瘤细胞株(人原发性肝癌细胞株SMMC7721、人早幼粒细胞白血病细胞株H L-60)增殖的影响,发现不同的制备方法对西黄丸体外抑瘤作用有明显的影响, 西黄丸浸提液和煎液均具有明显的抑瘤作用, 且浸提液的抑瘤作用优于煎液, 古人将西黄丸定位于丸剂, 确有其合理性和科学性。

[2]戴一.西黄丸的药理作用及临床应用概况[J]. 药物评价研究,201X,35(6):473-476.西黄丸原名犀黄丸,出自《外科证治全生集?卷四》,是清代名医王洪绪的祖传秘方。

犀黄丸由牛黄、麝香、乳香、没药4 味中药粉碎研配以水泛丸而成,清热解毒、和营消肿,用于痈疽疔毒、瘰疬、流注、癌肿等。

[3]金沈锐,秦旭华,肖桦,陈洁,秦健. 西黄丸对荷瘤小鼠生存质量的影响[J]. 中药药理与临床,201X,27(1):7-8.采用体内研究方法,考查其对荷瘤小鼠生存质量的影响, 包括观察荷瘤动物一般情况, 计算荷瘤小鼠生存率和生命延长率。

1.1试验药物??黄丸,九寨沟天然药物集团有限公司生产,批号: 080401,实验时用蒸馏水配制为混悬液予动物灌胃;注射用环磷酰胺( 0.2g /瓶), 山西普德药业有限公司,批号201X0807, 临用前用蒸馏水新鲜配制。

1.2动物昆明种小鼠, SPF级,体重18~ 22g小鼠,雌雄兼用,由成都中医药大学实验动物中心提供, 动物合格证号SCXK( 川201X-11)。

1. 3 细胞株小鼠肝癌细胞株H22、小鼠艾氏腹水瘤细胞株EAC,均由成都中医药大学病理教研室提供。

1.4 方法??液氮冻存小鼠肝癌H 22瘤株进行复苏, 经体外培养增殖, 生长稳定后以5×106 细胞量接种于昆明小鼠腹腔内, 待其长出癌性腹水后传代培养至3代, 取小鼠无血性的癌性腹水, 供接种使用。

实验时将第3代的肿瘤小鼠癌性腹水用无菌生理盐水调整细胞数至5×106, 接种于昆明种小鼠腹腔注射接种( 每只注射0.2m l)。

取体重为18~ 22g的小鼠(每次实验使用同一性别的小鼠), 常规消毒后每只小鼠腹腔注射H 22瘤液或EAC 荷瘤小鼠接种, 接种后次日, 将动物称重并分层随机分为4组, 分别为模型对照组、西黄丸高、低剂量组及环磷酰胺组。

西黄丸各组给予西黄丸混悬液灌胃, 低剂量组给药剂量为1.08g/kg(西黄丸每日人用量6g, 以50kg 为正常人体重计算, 给药量相当于人用量9倍) , 高剂量组给药剂量为2.16g /kg (相当于人用量18倍), 环磷酰胺组予0. 02g /kg 环磷酰胺灌胃给药,模型对照组予等体积生理盐水灌胃。

每日灌胃给药1次, 连续 10天后停药。

观察动物的一般情况, 包括毛色、活动度、进食量、体重等, 并记录动物在接种肿瘤后的死亡时间。

以对照组20%动物存活时间不得超过4周为依据, 故设第29天终止实验, 并计算小鼠生命延长率。

抑瘤作用是西黄丸的主要药理作用,实验显示1.08、2.16 g/kg 剂量下西黄丸对H22荷瘤小鼠及EAC荷瘤小鼠的生存状态明显好于环磷酰胺组(0.02g/kg),同时,西黄丸在2.16 g/kg 剂量下,可明显延长荷瘤小鼠的生存时间,生命延长率可达30%以上。

[4]徐浩,崔立然,刘吉成. 西黄丸对H_(22)荷瘤小鼠Bcl-2基因mRNA表达的影响[J]. 现代预防医学,201X,11:2120-2121.本实验采用RT-PCR 法测定H22荷瘤小鼠瘤组织中bcl-2基因mRNA在给药前后的表达差异,为传统中成药西黄丸临床上治疗肿瘤提供更科学的理论依据。

进一步研究发现西黄丸可下调H22 荷瘤小鼠瘤组织中凋亡相关基因bcl-2 基因mRNA 的表达。

1.2 动物选用清洁级昆明种(KM)小鼠,体重(20 ± 2) g, 6~8周龄,雌雄各半,黑龙江中医药大学药物安全评价中心(GLP)提供合格证号: 01-10-2。

1.3 瘤株H22瘤株由齐齐哈尔医学院药物研究所提供。

1.4 主要仪器及试剂离心机(Microfuge 18 Centrifuge, BECKMAN COULTER,德国);超净工作台(苏州净化设备厂);可见/紫外分光光度计(765PC 型上海光谱仪器有限公司);电泳凝胶图象分析系统( Backman 公司);梯度PCR 仪( EPPERFOR201X 型德国); RT-PCR 试剂盒(美国Promega 公司);PCR Marker 美国Promega 公司);bcl-2、β-actin 的引物(英骏生物技术有限公司合成)。

1.5 实验方法1.5.1 分组及给药超级洁净工作台上无菌取接种于d 8 转移癌H22腹水(活细胞计数大于95%),用0.9%氯化钠注射液稀释成2×106 / ml,取清洁级KM 小鼠雌雄各半,共40 只,每只鼠右侧腋部皮下接种0.2 ml瘤细胞悬液。

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