HIV抗体初筛实验流程
HIV抗体确证检测流程
样反应
原有试剂 +另一不同原理 （ 或厂家 ） 试剂或另外两种
不同原理 （ 或厂家 ） 试剂
复检试验
一阴一阳
均阴性反应
确证试验
报告阴性
图 1 HIV 抗体筛查检测流程
筛查试验阳性反应样品 确证试剂
阴性反应
HIV-1阳性反应 不确定反应
报告阴性
报告HIV-1阳性
出现HIV-2指示条带
根据具体情况进一步检测 HIV-2
结合流行病学资料，可以在 4 周后随访检测，如带型没有进展或呈阴性反 应，则报告阴性；如随访期间出现阳性反应，则报告阳性；如随访期间带 型有进展，但不满足阳性标准，应继续随访到 8 周。如带型没有进展或呈 阴性反应则报告阴性；满足 HIV 抗体阳性诊断标准则报告阳性，不满足阳 性判断标准可视情况决定是否继续随访。
图 2 HIV 抗体确证检测流程
HIV抗体检测标准操作程序(SOP)
HIV抗体检测标准操作程序（SOP）——微生物科一、样本的采集和处理二、检测方法和步骤三、质控品的应用方法四、仪器的使用和维护五、结果的记录、解释与报告六、保密程序七、实验室的清理、消毒八、艾滋病检测实验室安全防护九、附表样品的采集和处理1.1血清样品采集：用注射器抽出一定量静脉血，室温下自然放置1-2小时，待血清凝固和血块收缩后在用3000rmp离心15min，吸出血清备用。
1.2抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。
1.3采样注意事项：1.3.1采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。
1.3.2采集标本时应注意安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。
2、样品的保存：2.1用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20摄食度以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8摄食度。
3.样品的运送：3.1实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。
样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类、、采样时间。
3.2将试管放入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒。
在试管的周围垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
3.3特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须将盛有样品的试管包扎好，保证不会破碎和遗漏。
4.1含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。
4.2核对标本与送检单，检查样品管有无破损及遗漏。
如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。
检验方法和步骤1.检验方法：酶联免疫吸附试验（ELISA）2.检验步骤：严格按照试剂说明书操作。
3.注意事项：3.1禁止肉眼判读！3.2保证酶标仪，洗板机正常运转，保证加样器准确，选择高质量的与加样器配套的TIP头3.3使用有效期内的试剂3.4保证样品质量质控品的应用方法1.质控品按临床样本对待，操作应依照实验室安全管理条例执行。
我国HIV常用检测方法和流程
我国HIV常用检测方法和流程初筛抗体+WB法确认目前国内实验室多采用「初筛抗体+WB 法确认」等两步法进行HIV检测及确诊。
初筛实验室初筛阳性，不能出具阳性报告，必须进入复检试验。
对初筛有反应的样品，用原有试剂双份或双孔进行复检试验（或者两种试剂复检），如均无反应，报告「HIV 抗体阴性」；如均有反应或一个有反应一个无反应，需要送检做确证实验，报告HIV 感染待确定。
目前大部分临床实验室为艾滋病初筛实验室，开展常规初筛实验，发现阳性结果初步复检后送省市CDC 或当地其他确认实验室做确认实验。
1、条带条带是HIV确认实验——免疫印迹试验（WB）实验所呈现出的结果，如上图。
原理是WB 采用间接法检测样品中的抗HIV-1/HIV-2 特异性抗体。
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的HIV 蛋白分离开来，经过一系列处理后，硝酸纤维素膜显示与特异抗原的结合的抗体条带，从而确诊抗体的存在。
HIV-1抗体特异带包括env带：gp160/gp120、gp41；gag带：p55、p24、p17（或p18）；pol带：p66（或p65）、p51、p31。
HIV-2抗体特异条带包括env带：gp140/gp105、gp36；gag带：p56、p26、p16；pol带：p68、p53、p34。
（由于使用的毒株不同，HIV-2 env带也可为gp125/gp80、gp36）。
2、根据条带判断是否感染HIVHIV-1抗体阳性同时符合以下2条标准可判为HIV-1抗体阳性：①至少有2条env带（gp41和gp160/gp120）出现，或至少1条env带和p24带同时出现；②符合试剂盒提供的阳性判定标准。
（目前实验室判定阳性一般是gp41和gp160/gp120+p24）HIV-2抗体阳性出现HIV-2型特异性指示带的样品：如果同时呈HIV-1抗体阳性反应，报告HIV-1抗体阳性，不推荐进一步做HIV-2抗体确证试验；如果同时呈HIV-1抗体不确定或阴性反应，需用HIV-2型确证试剂再做HIV-2的抗体确证试验。
HIV抗体检测操作流程
HIV抗体检测操作流程HIV是一种致命的病毒，它会破坏人体的免疫系统，导致艾滋病的发展。
目前，HIV抗体检测是诊断HIV感染最常见和可靠的方法之一、在进行HIV抗体检测之前，我们需要了解一些基本信息，包括HIV抗体检测是如何进行的、检测的准确性、检测的效果及其重要性等。
HIV抗体检测是通过检测人体血液中对HIV的抗体来确定一个人是否感染了HIV病毒。
一般情况下，HIV感染后，人体会产生对HIV的抗体，这些抗体在感染后几周到几个月内就会出现。
因此，进行HIV抗体检测的时间不同，检测的结果也可能会有所不同。
HIV抗体检测通常采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光染色试验（IFA）等方法。
这些方法通过检测血液样本中的HIV抗体，来确定一个人是否感染了HIV病毒。
通常情况下，如果初步的ELISA检测结果呈阳性，那么通常会进行IFA或Western blot等更为精确的检测以确认感染。
在一些情况下，可能还会对阳性结果进行复查，以确保结果的准确性。
HIV抗体检测的准确性是非常高的，一般情况下，假阳性和假阴性的概率都很低，但也不是绝对的。
因此，在进行HIV抗体检测时，应该选择正规的医疗机构或实验室进行检测，以确保结果的准确性。
同时，检测的效果也会受到很多因素的影响，如感染的时间、个人免疫系统的反应等。
因此，在进行HIV抗体检测时，需要按照医生的建议进行检测，并根据检测结果采取相应的治疗措施。
HIV抗体检测的重要性不言而喻，及早发现HIV感染对于控制病情的发展十分重要。
一旦被诊断为HIV感染，及早接受治疗可以有效延缓疾病的发展，提高生存率。
同时，及早发现HIV感染也可以减少传播风险，保护他人的健康。
因此，对于那些有HIV感染风险的人群来说，定期进行HIV抗体检测是非常重要的。
总的来说，HIV抗体检测是诊断HIV感染最常见和可靠的方法之一、通过检测血液中的HIV抗体，可以确定一个人是否感染了HIV病毒，及早发现HIV感染对于控制病情的发展十分重要，因此，建议有HIV感染风险的人群定期进行HIV抗体检测，以确保健康。
hiv抗体检测标准操作程序课件
hiv抗体检测标准操作程序课件一、教学内容二、教学目标1. 理解HIV病毒的生物学特性和感染后的免疫应答机制。
2. 掌握不同类型的HIV抗体检测方法，尤其是酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹试验（Western blot）的操作流程与结果判读。
3. 能够独立进行HIV抗体检测的标准操作，并理解实验室安全及质量控制的要点。
三、教学难点与重点教学难点：HIV抗体检测的操作细节、结果判读以及质量控制措施。
教学重点：ELISA和Western blot试验的原理与实践操作，以及安全规程的遵守。
四、教具与学具准备1. 教具：PPT课件、HIV抗体检测操作视频、实验室安全手册。
2. 学具：ELISA试剂盒、Western blot试剂、移液器、离心机、生物安全柜、个人防护装备。
五、教学过程1. 引言（10分钟）：通过一个实际案例引入HIV抗体检测在临床诊断中的重要性。
2. 理论讲解（30分钟）：介绍HIV病毒学、免疫学基础，解释抗体检测原理。
3. 操作演示（20分钟）：播放HIV抗体检测操作视频，讲解操作流程。
4. 例题讲解（15分钟）：通过具体例题讲解如何进行结果判读。
5. 随堂练习（15分钟）：模拟实验室环境，进行ELISA试验操作的练习。
6. 质量控制与安全讨论（10分钟）：强调实验室质量控制措施及个人安全防护要点。
7. 答疑（10分钟）：解答学生提出的问题。
六、板书设计1. HIV抗体检测流程图。
2. ELISA和Western blot试验原理简图。
3. 结果判读标准一览表。
七、作业设计1. 作业题目：对比分析ELISA和Western blot两种HIV抗体检测方法的优缺点。
答案：ELISA敏感性高，可用于大规模初筛，但有一定的假阳性率；Western blot特异性强，用于确证试验，但操作复杂、成本高。
2. 作业题目：简述实验室进行HIV抗体检测时，如何进行质量控制。
答案：包括使用标准品、质控血清进行室内质控，定期参加室间质评，严格操作规程，确保仪器设备校准等。
艾滋病的实验室检测流程
艾滋病的实验室检测流程中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心继发布《全国艾滋病检测技术规范(xx 年版)》后，近日即将发布 xx 年版《全国艾滋病检测技术规范》，此规范堪称艾滋病检测实验室的「红宝书」，适用于疾病控制中心艾滋病确认实验室和医疗机构的艾滋病初筛实验室的 HIV 检测技术操作。
下面是为大家带来的艾滋病的实验室检测流程的知识，欢迎阅读。
检测项目的样品种类1 HIV 抗体检测：全血、血清、血浆、口腔黏膜渗出液、尿液以及干血斑样品。
2 HIV 抗原检测：全血、血清、血浆、病毒培养上清液。
3 T 淋巴细胞亚群测定：EDTA 或肝素抗凝全血。
4 HIV-1 病毒载量、基因型、耐药检测：血浆、滤纸干血斑(DBS)。
5 HIV 核酸定性与定量、基因型检测和 HIV-1 分离培养：淋巴细胞富集液、外周血单核淋巴细胞(PBMC)及全血。
当然，实验室最常用的仍然是血液标本，其他只作为补充样本。
HIV 抗体检测HIV 抗体检测是艾滋病实验室检测的优先选择项目，在国内绝大多数初筛实验室应用最广泛。
1 初筛方法(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA 法检测 HIV 抗体是 HIV 初筛实验室最常用最普遍的方法，目前检测试剂已经发展到 * ，即同时检测血液中 HIV-1P24 抗原和 HIV-1/2 抗体，秉承「宁可错杀一千，不可漏网一个」的革命精神，其灵敏度远高于特异性，直叫 HIV 抗体无处遁形。
(2)化学发光或免疫荧光试验(CIA/IFA)这个试验方法是近 10 年迅猛发展的一种新型检测方法，其采用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体，用发光或荧光仪测定结果，其灵敏度较 ELISA 有了进一步的提高，同时带来的是检测成本的增加和假阳性率的增高。
(3)快速检测(RT)方法此类方法操作简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测，但灵敏度和特异性远不如 ELISA 和发光法，但是经济实惠，也有一定的市场影响力。
HIV实验室SOP文档
韩城市中医院HIV初筛实验室SOP文件一、样本接收登记、处理程序1.样本的接收1.本院的样品接收2.来自本院门诊和病房的标本由门诊和病房的护士采集，先由检验科标本验收者收取。
规定时间内，由HIV筛查实验室进行登记接收。
3.检查样品的状况，记录有无溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。
对于不合格标本（如溶血、乳糜血等），及时通知护士重新采集。
4.院外的样本接收5.含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。
6.核对标本与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。
如有发现溢漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。
7.检查样品的状况，记录有无严重溶血，微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况，如果污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃，并要将样品情况通知送样人。
8.打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。
样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。
同时应戴口罩，防护镜，以防皮肤或黏膜污染。
9.因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不能用于荧光方法测试。
10.接收样品是应填写HIV筛查试验室标本接收登记。
2.样本的登记记录HIV筛查试验室样本登记表，实验室收到标本后应及时进行有关参数登记，包括受检者的姓名、性别、人群类别、试管编号、检验结果（初筛）、送检日期、报告日期和3.样本的处理标本在室温下自然放置1-2小时，待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min，吸出血清备用。
3.样本的保存用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20℃以下，短期（1周内）进行检测的样品可存放于2-8℃。
5.样品的运送实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。
1.应采用WHO提出的三级包装系统1.1第一层容器：装样品，要求防渗漏。
样品应置于带盖的试管内，试管试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者的姓名、种类和采集时间。
艾滋病初筛实验室标准操作规程
HIV抗体初筛实验室SOP文件适用部门：检验科目录第一部分工作制度.................................................................................................................... - 1 -实验室工作制度.................................................................................................................. - 1 - HIV标本采集与接收登记制度.......................................................................................... - 1 - 艾滋病实验室保密制度...................................................................................................... - 2 - 艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度...................................................................... - 2 - 差错事故处理制度.............................................................................................................. - 3 - 报告单签发审核制度.......................................................................................................... - 3 - 设备管理制度...................................................................................................................... - 4 - 试剂管理制度...................................................................................................................... - 4 - 艾滋病筛查实验室安全防护制度...................................................................................... - 5 - 艾滋病病毒职业暴露预防处理方案.................................................................................. - 5 -第二部分标准操作规程............................................................................................................ - 8 -第二章样品采集与处理.................................................................................................... - 8 - 第二章标准操作程序........................................................................................................ - 8 -一、北京金豪.............................................................................................................. - 8 -二、上海科华生物...................................................................................................... - 9 -三、英科新创............................................................................................................ - 10 -第三章结果报告与注意事项.......................................................................................... - 12 - 第三部分设备SOP文件 ........................................................................................................ - 13 -一、多功能自动酶标仪RT—2100C ............................................................................... - 13 -二、KHB ST－36W洗板机............................................................................................. - 16 -三、电热恒温水箱............................................................................................................ - 18 - 第四部分流程图...................................................................................................................... - 20 -一、HIV抗体筛查流程图................................................................................................ - 20 -二、暴露级别的评估........................................................................................................ - 21 - 附件：血清加样表.................................................................................................................... - 22 -第一部分工作制度实验室工作制度1.室内应经常保持整洁，各种仪器设备要安装适当，器皿试剂摆放整齐，标志清晰，有良好的通风设备.2.实验室工作人员工作时一律穿制服，保持衣帽整洁，试验过程中应专心致志、认真负责,坚守工作岗位，不得随意串岗、闲谈,保持实验室安静，下班离开实验室前要检查并关好水、电、门、窗等，注意实验室安全。
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HIV初筛与确诊实验操作步骤与注意事项
1检验科采集HIV抗体标本后，按下列流程图1进行初筛与复检试验。
图1 HIV抗体筛查检测流程
2筛查试验呈阳性或一阴一阳反应，该样品务必转送至市疾控中心作确证试验。
初筛“阳性或一阴一阳”标本→临床医生核对取得其姓名和身份证及电话号码→必要时采第二份血样→标本三层包装冷冻→持HIV抗体复检报告单→医院办公室派车→专人集中每周一送往无锡市疾控中心三楼季主任→无锡市疾控中心每周二作确诊试验→结果由疾控中心电话报告被检查者
送无锡市疾控中心作确诊试验，需要核对身份，补充个人信息（如姓名和身份证号码及电话号码），必要时采集第二份血样，持HIV抗体筛查报告，持HIV 抗体复检试验用附表2送检。
HIV抗体复检报告需由1名检验人员和1名审核人员签字。
3 样品的运送：每周一是送检日。
3.1 应符合生物安全要求；要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送。
3.2 应采用三层容器对样品进行包装，随样品应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。
送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息，并应放置在第二层和第三层容器之间。
3.2.1 第一层容器：直接装样品，应防渗漏。
样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的唯一性编码或受检者姓名、种类和采集时间。
在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。
3.2.2 第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。
要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。
3.2.3 第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。
外面要贴上醒目的标签，注明数量、收样和发件人及联系方式，同时要注明“小心轻放、防止日晒、小心水浸、防止重压”等字样，还应易于消毒。
3.2.4 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。
每一件包装的体积以不超过50mL为宜。
3.2.5 运送样品必须有记录。
4 HIV抗体初筛实验中的假阳性分析：
4.1血液恶性病变
4.2自身免疫性疾病
4.3多发性胆汁型肝硬化
4.4酒精性肝炎
4.5疫苗接种（流感、乙肝）
4.6多发性骨髓瘤
4.7肾移植或慢性肾衰竭
4.8疟疾或丝虫病
4.9其它
5 HIV抗体初筛实验中的假阴性分析：
5.1窗口期
5.2免疫移植
5.3换血输血
5.4恶性肿瘤
5.5免疫功能丧失（B细胞功能缺陷）及其它
6无锡市疾控中心报告日期：每周二作确诊试验。
7如遇被检查者拒绝留本人身份信息，其初筛可能阳性结果的标本2周后消毒处理后按医疗垃圾丢弃。
2012.2.11
附表1
HIV抗体筛查报告
REPORT OF HIV ANTIBODY SCREENING TESTING 秘密编号：
PRINTED BY CHINESE CENTER FOR
DISEASE CONTROL AND PREVENTION 中国疾病预防控制中心制订
附表2
HIV抗体复检检测单
秘密编号
中国疾病预防控制中心制订。